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MANUAL DE PROCEDIMIENTOS ANALTICOS

LABORATORIO DE SUELOS
UNIVERSIDAD DEL MAGDALENA

Universidad del Magdalena, Santa Marta. Carrera 32 No. 22-08 San Pedro Alejandrino.
Telfono: 4303621 Pagina web: www.unimag.edu.co. ing.agronmica@yahoo.com
LABORATORIO
DE SUELOS

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Misin

El Laboratorio de Suelos de la Universidad del Magdalena realiza anlisis fsicos, qumicos y


microbiolgicos en muestras de suelos y de tejidos vegetales y de aguas para riego, Apoya
analticamente a la comunidad universitaria en el desarrollo especializado de prcticas acadmicas,
trabajos de investigacin y cientficos, adems de brindar a nuestros clientes externos asesora
profesional, para el diagnstico y mantenimiento de la fertilidad de los suelos de la regin y del pas.
Su calidad y eficiencia estn basadas en el mejoramiento continuo del recurso humano que lo
conforman, con procesos, estructuras y equipos de ltima tecnologa, permitindole el
posicionamiento como lder en la regin.

Visin

El Laboratorio de Suelos de la Universidad del Magdalena ser reconocido en 2019 a nivel nacional
como el pilar fundamental de la investigacin, produccin y desarrollo tecnolgico de la Regin
Caribe, con fuertes vnculos con la comunidad agrcola del departamento, amplia cobertura de sus
servicios analticos y metodologas acreditadas con estndares de calidad.

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PERSONAL ADSCRITO AL LABORATORIO DE SUELOS

NOMBRE FUNCIN FORMACIN


Nelson Piraneque Gambasica Docente tiempo completo del Ingeniero Agrnomo, Ph.D.
programa Ciencias del Suelo
Jos Rafael Vsquez Polo Docente tiempo completo del Ingeniero Agrnomo Ph.D.
programa Ciencias ambientles
Kira Victoria Nez Imitola Coordinadora de laboratorio Ingeniero Agrnomo
Candidato MsC en Ciencias
Ambientales

PROTOCOLOS PARA ANLISIS


ANLISIS FSICOS
PROCEDIMIENTO SMBOLO UNIDAD MTODOLOGA Y/O TCNICA
Textura del suelo Textura Bouyoucos, hidrmetro
Densidad Aparente gr/cc Terrn Parafinado
Densidad Real gr/cc Picnmetro
pH (Extracto de saturacin) pH Potenciometra
Conductividad elctrica C.E. a 25C mS cm -1
Extracto de saturacin
Lmite de Consistencia o de
Atterberg Cazuela de Casagrande
Resistencia a la penetracin Kg. cm-2 Penetrmetro de campo
Determinacin del contenido de
Estufa de precisin forzada
humedad gravimtrica %

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PROTOCOLOS PARA ANLISIS
ANLISIS QUMICO
PROCEDIMIENTO SMBOLO UNIDAD MTODOLOGA Y/O TCNICA
pH (Suelo) pH Agua (1:1); Potenciometra
Materia Orgnica M.O. % Walkley and Black; Volumetra
Nitrgeno total (Suelo) N % Kjheldhal
ppm Sulfato de aluminio 0.025 F;
Nitrgeno ntrico (Suelo) N-NO3 (mg/kg) Potenciometra
ppm Cloruro de Potasio 1M,
Nitrgeno amoniacal (Suelo) N-NH4 (mg/kg) Colorimetra
Carbono orgnico (Suelo) C % Walkley and Black; Volumetra
Bray II; Olsen Modificado;
Fsforo (Suelo) P Ppm Colorimetra
CIC efectiva (Suelo) CICE cmol (+)/kg Suma de cationes
Acetato de Amonio 1M; Volumetra y
CIC a pH 7 (Suelo) CIC a pH 7 cmol (+)/kg cloruro de amonio 1M
Aluminio (Suelo) Al cmol (+)/kg Cloruro de Potasio 1M; Volumetra
Calcio, Magnesio, Potasio y Sodio Ca, Mg, K y Acetato de Amonio 1M;
(Suelo) Na cmol (+)/kg Absorcin atmica
ppm Turbidimetra; Fosfato monoclcico
Azufre (Suelo) S (mg/kg) 0.008 F
Fe, Mn, ppm
Elementos menores(suelo) Cu, Zn (mg/kg) Olsen-EDTA, Absorcin atmica
ppm
Boro (Suelo) B (mg/kg) Agua caliente; Colorimetra
Extracto de saturacin;
Conductividad elctrica (Suelo) C.E dS/m conductivmetro

INTRODUCCIN

La caracterizacin fsica y qumica del suelo tiene como objetivo es de establecer la respuesta de este
recurso a las prcticas asociadas en los diferentes sistemas de produccin, as como su susceptibilidad
a la degradacin por acciones naturales o antrpicas.
El nfasis en el anlisis de un suelo radica en la importancia de conocer su capacidad como medio
para el desarrollo de las plantas. Sin embargo, existen otros factores que pueden influir en el

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crecimiento del cultivo, por ejemplo el clima, la disponibilidad de agua, las propiedades fsicas y
microbiolgicas.

El anlisis fsico de suelos permite determinar la capacidad de ste para transmitir adecuadamente el
agua y el aire y con ello, permitir la expansin de races y el suministro adecuado de agua y nutrientes.

El anlisis del contenido total de algunos elementos en el suelo es til para la clasificacin del mismo,
pero el contenido total no indica la disponibilidad del elemento para la planta. Ms importante en
este sentido, es la estimacin del contenido de los elementos en el suelo que la planta puede
aprovechar. Muchas veces se analiza una fraccin del elemento en el suelo, por ejemplo, la fraccin
soluble, la fraccin cambiable o la fraccin fijada. Los elementos extrados en un anlisis qumico son
llamados nutrientes disponibles y son importantes para indicar la fertilidad del suelo. Estos
nutrientes disponibles son aquellos que la planta utiliza para el crecimiento.

Hay varios mtodos para evaluar la fertilidad del suelo (Peck y Soltanpour, 1990).

Ensayos de campo
Ensayos en el invernadero
Sntomas del cultivo
Anlisis de tejidos de la planta
Anlisis de la savia de la planta
Ensayos biolgicos
Anlisis del suelo

Los ensayos en el campo o en el invernadero son costosos y toman mucho tiempo. El anlisis de la
planta es una autopsia y cuando se presentan los sntomas en el cultivo, generalmente ya es muy
tarde para solucionar la deficiencia del nutriente. El anlisis del suelo se lleva a cabo previamente al
cultivo y puede indicar fcilmente el estado de fertilidad del mismo.

El anlisis del suelo tiene varias etapas:


Muestreo
Preparacin de la muestra
Anlisis qumico / fsico
Interpretacin de resultados y Correlacin y calibracin
Entre los objetivos del anlisis del suelo estn:
Diagnosticar deficiencias o toxicidades de un elemento en el suelo
Recomendar niveles y tipo de fertilizacin
Determinar condiciones qumicas o fsicas
Clasificar el suelo

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Muestreo

La muestra es una pequea cantidad de suelo que representa el volumen que l ocupa en el campo
en un rea y profundidad determinada.
La muestra de suelo es el enlace entre la Unidad de Muestreo y las interpretaciones, diagnostico y
recomendaciones para dicha unidad.
Los resultados de un anlisis pueden variar pero deben reflejar la verdadera variacin en el campo y
no el error en el laboratorio. El valor del anlisis depende mucho de un muestreo eficaz.

La variabilidad que se encuentra en el campo no es solo vertical sino tambin horizontal y puede ser
natural o inducida. No se puede analizar todo el campo, entonces se han desarrollado procedimientos
para recoger muestras representativas de la variabilidad (James y Wells, 1990).

El mtodo ms comn de muestreo es el de la muestra compuesta. Consiste en una muestra que


resulta de la mezcla de varias submuestras tomadas al azar en diferentes sitios ya sea de toda una
Unidad Natural, o en parte de ella.

Requisitos de una Muestra Compuesta


Submuestra: Volumen y seccin transversal similares en el rea del muestreo.
Submuestras tomadas al azar transversalmente en la direccin de las operaciones del cultivo o de los
accidentes del terreno (pendiente).
Representabilidad: Nmero suficiente de submuestras (15-20/ha.) para disminuir variabilidad de las
propiedades a analizar.
Interacciones qumicas: Empaque; parches salinos; cercas; caminos; sitios de descanso del ganado;
basureros; etc.

rea de muestreo homognea.


Tiempo del muestreo: 3 a 4 aos; un ao para comerciales de alto rendimiento.
Procedimiento: Cuadrcula; zig-zag; contorno.

Se toman las muestras a la profundidad de la zona radical o de la capa arable, usando un barreno o
una pala, despus de retirar la hojarasca de la superficie. Se mezclan todas las submuestras y se enva
la muestra compuesta al laboratorio. Todo el equipo de muestreo debe estar limpio y libre de
contaminacin. Es mejor evitar guardar las muestras hmedas por mucho tiempo. Se pueden guardar
a 4 grados Celsius antes de llevarlas al laboratorio.

Muestra Simple: Muestra individual de un volumen de suelo (alterada o no). Se toma cuando se
describe y se realiza el muestreo del perfil de suelo (Pedn).

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Preparacin de la Muestra

El tratamiento de las muestras debe estandarizarse para permitir la comparacin entre laboratorios.
Generalmente, se secan al aire y se pasan por un tamiz de 1 mm (malla # 18). A veces se colocan en
un horno para secarlas ms rpido. La temperatura no debe ser muy elevada porque puede afectar
algunas propiedades del suelo. Una temperatura entre 35 y 60 grados Celsius es la adecuada. (James y
Wells, 1990).
Despus de secada y tamizada, la muestra se almacena en un recipiente limpio hasta el anlisis.

Anlisis

El objetivo de un mtodo de anlisis de suelo es simular la absorcin de un nutriente por las races de
la planta, mediante una extraccin qumica. La simulacin no es perfecta, debido a que cada planta
difiere en su habilidad de extraer nutrientes del suelo.

Un procedimiento qumico extrae los nutrientes rpidamente y muchas veces en forma destructiva
mientras que el cultivo, por medio de las races, extrae los nutrientes del suelo durante todo su
crecimiento.

Idealmente el mtodo debe extraer nutrientes del suelo en forma semejante a la planta y mostrar una
diferencia entre un nivel txico del elemento y un nivel deficiente en el suelo.
El mtodo solo puede dar una aproximacin de los nutrientes disponibles en el suelo. Los resultados
dependen mucho del tipo de suelo y del cultivo.

El presente manual pretende ser una gua para estudiantes y acadmicos que requieran hacer
evaluaciones de algunas propiedades de los suelos. Por lo tanto, se presentan los procedimientos
analticos para estimar y determinar, las principales propiedades fsicas y qumicas del suelo. No existe
una estandarizacin de todos los mtodos de caracterizacin. Sin embargo, toda la metodologa que
se presenta en este manual, est documentada por el Laboratorio de Servicios Analticos del Centro
Internacional de Agricultura Tropical CIAT.

El procedimiento para desarrollar un mtodo es el siguiente:


Seleccionar el extractante (agua, resina, cido, etc.), teniendo en cuenta el tipo del suelo y
propsito del experimento.
Correlacionar la cantidad del nutriente extrado del suelo en el anlisis con la cantidad extrada
por la planta y calibrar los resultados con el crecimiento del cultivo.
Interpretacin de los Resultados

La interpretacin de los resultados de un anlisis de suelo depende de correlaciones y calibraciones


anteriores.
Una interpretacin no puede ser ms exacta que la correlacin.
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La diferencia en metodologa y en la expresin de los resultados crea confusin en la interpretacin.
Existen varios proyectos llamados programas de intercambio que tratan de estandarizar los
mtodos y establecer muestras de referencia. Esto ayuda a la interpretacin de los resultados y a la
comparacin entre laboratorios.

Correlacin y Calibracin
La correlacin de un anlisis es la determinacin de la relacin que existe entre la cantidad de
nutrientes aprovechada por la planta y la cantidad extrada por el mtodo.
A veces el mtodo no mide la forma disponible del nutriente en el suelo y resulta una correlacin
baja. Para obtener datos para calibrar un mtodo, el extractante debe extraer una cantidad de
nutriente proporcional a la cantidad que extrae la planta. Los resultados solo tienen sentido en cuanto
estn relacionados con la respuesta del cultivo.
El tipo de suelo y de cultivo son importantes en los estudios de correlacin y calibracin. Un mtodo
puede ser adecuado para un suelo y un cultivo pero no adecuado en situacin diferente.

La confianza de un mtodo depende de:


El muestreo y la preparacin de la muestra.
La especificidad del anlisis.
La exactitud del anlisis.
La precisin del anlisis.
La sensitividad del instrumento.

El muestreo puede introducir los ms grandes errores si no se hace bien. Es muy importante la
preparacin cuidadosa de la muestra.

La especificidad es afectada por la presencia de interferencias en el anlisis. Estas interferencias


pueden causar un aparente incremento en la cantidad del elemento de inters.

La exactitud Es la comparacin con un estndar absoluto. En muchos casos en el anlisis de suelo no


hay estndares absolutos. Diferentes mtodos pueden dar resultados distintos en la misma muestra.
Todos pueden ser precisos pero no podemos decir cules son exactos. Un mtodo puede dar
resultados con ms exactitud bajo algunas circunstancias pero no bajo otras. Por esta razn, el
mtodo utilizado debe ser especificado y sus resultados solo pueden ser comparados con otros
resultados del mismo mtodo.

La precisin. La desviacin estndar mide la precisin. Las repeticiones pueden aumentar la precisin
pero no la exactitud. Si se repite un anlisis y da el mismo resultado, hay alta precisin.
La sensitividad depende del instrumento y la concentracin del elemento presente en la muestra.

El informe de resultados debe incluir la desviacin estndar o el error estndar.

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Instrucciones para el trabajo en el laboratorio de suelos
Dentro de los cuidados que se deben de tener en un laboratorio de suelos se mencionan,
principalmente, los siguientes:

No tirar suelo en los lavaderos. El suelo debe vaciarse en recipientes de desecho para
posteriormente ser llevado al exterior.

Asegurarse de que los instrumentos estn calibrados y estandarizados en su punto de


referencia.
Asegurarse de que las balanzas estn niveladas.
En el caso de la olla y membrana de presin, asegurarse de que no existan escapes de aire en
las tapas o en alguna conexin.
En el caso de compresores, verificar su perfecto mantenimiento y funcionamiento.
Verificar que los extractores de gases funcionen adecuadamente
Utilizar los implementos de proteccin necesarios segn la rutina.

Referencias
Corey, R.B. 1987. Soil Test Procedures: Correlation. Cap.2 en Soil Testing:
Sampling, Correlation, Calibration and Interpretation. J.R. Brown (ed.) SSSA
Special Publication No. 21.
Howeler, R.H. 1983. Anlisis del Tejido Vegetal en el Diagnstico de Problemas nutricionales en
algunos Cultivos Tropicales. CIAT. Cali, Colombia.
Jackson, M. L. 1958. Soil Chemical Analysis. Prentice-Hall, Inc. N. J.
James, D.W. y Wells, K.L. 1990. Soil Sample Collection and Handling. Cap. 1 en Soil Testing and Plant
Analysis. R.L.Westerman (ed.) SSSA. 3erd Edition.
Landon, J.R. (ed.). 1991. Booker Tropical Soil Manual. A handbook for soil survey and agricultural land
evaluation in the Tropics and Subtropics. Longman.
Peck, J.R. y Soltanpour, P.N. 1990. The Principles of Soil Testing Cap. 1 en Soil Testing and Plant
Analysis. R.L. Westerman (ed.) SSSA. 3 erd Edition.
Determinacin de pH en Suelos. Potenciometra [EDULST01-1]

Mtodo para la determinacin de pH en suelos o en sustratos.

Principio
La medicin potenciomtrica del pH se basa en la diferencia entre el potencial elctrico de una
solucin y el de un electrodo. Esta medicin es relativa y depende del tipo de electrodo y la
temperatura. El pHmetro debe ser calibrado con soluciones estndar de pH conocido.
El pH es la unidad potenciomtrica de medicin, que indica el grado de acidez o alcalinidad en
soluciones acuosas y se define como: pH = - log[H+] Para iniciar la medicin de pH es muy importante
realizar los pasos de ajuste del equipo, con el fin de verificar las desviaciones de los valores reales de
las soluciones Buffer.
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Reactivos
Solucin Buffer pH 10.
Solucin Buffer pH 7.
Solucin Buffer pH 4.
Solucin HI 70300
Agua bidestilada.

Procedimiento de preparacin de la muestra


Pesar aproximadamente 10 g de las muestras a analizar y de los suelos control y agregar 10 mL de
agua bidestilada 10 mL de KCl 1M
Agitar durante un minuto en el agitador
Dejar en reposo durante una hora

Procedimiento de Medida
Leer las muestras directamente en el equipo pH Hanna Instruments HI 2550. Consultar Procedimiento
de Operacin del pH metro Hanna Instruments HI 2550 (PROLSE08).
Antes de iniciar la lectura, agitar manualmente cada muestra, para homogenizar la pasta. Luego,
introducir el electrodo y esperar hasta que la lectura sea estable; cuando esto ocurra registrar el dato.

Referencias.
Mackean, S. 1993. Manual de Anlisis de Suelos y Plantas. Centro Internacional de Agricultura Tropical
(CIAT). Cali, Colombia.
Manual de Operacin Hanna Instruments pH Metro HI 2550

Determinacin de la Humedad del Suelo. Gravimetra [EDULST01-2]

Alcance

Este mtodo se utiliza para la determinacin del contenido de humedad en suelos y sustratos.

Principio
Normalmente los suelos se analizan secos al aire; muchas veces se reportan los resultados basados en
el suelo seco a 105 0C. Esto facilita la comparacin de los resultados de anlisis de suelos secados al
aire a diferentes temperaturas. Cuando se conoce la humedad del suelo, se puede calcular el peso del
suelo seco a 105 0C y usar un factor de correccin para obtener todos los resultados basados en suelo
seco a 105 0C.

Procedimiento
Pesar un crisol vaco
Pesar en el crisol 10 g de suelo secado al aire.
Colocar el crisol en el horno a una temperatura de 105 0C por 24 horas.
Dejar enfriar en un desecador y pesar de nuevo.
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Clculos
Por convencin se calcula la humedad del suelo en base a 105 0C
% H = (Suelo seco al aire (g) Suelo seco a 105 0C ) * 100 / suelo seco a 105 0C
Para convertir los resultados a suelo seco al 105 0C, se usa el factor de conversin (FC)
FC = (Suelo seco al aire) / (Suelo seco a 105 oC)

Referencias
Mackean, S. 1993. Manual de Anlisis de Suelos y Plantas. Centro Internacional de Agricultura Tropical
(CIAT). Cali, Colombia.

Determinacin de la Salinidad del Suelo. Potenciometra [EDULST01-3]

Alcance
Este mtodo se usa para la determinacin de la salinidad en extractos de suelos o de sustratos

Principio
Se puede estimar la salinidad del suelo midiendo la Conductividad Elctrica (CE) del extracto de
saturacin del suelo. La salinidad se determina por convencin, en extractos acuosos de una pasta
saturada de suelo.

Reactivos
Cloruro de Potasio KCl 0.02 M (Para control del electrodo)
Disolver 1.491 g de KCl en agua bidestilada y llevar a un volumen de 1 L. La conductividad de esta
solucin a 250 C es 2.768 mmhos cm-1 (2.768 dS m-1)

Procedimiento de Extraccin
Pesar entre 100 y 200 g de muestra y del suelo control CIAT en tazas de 600 mL.
Agregar agua bidestilada poco a poco mezclando con una esptula hasta obtener la pasta saturada
(ver comentarios).
Dejar en reposo por 4 horas.
Transferir las muestras a embudos Buchner con papel filtro y aplicar vaco. La extraccin al vaco
termina cuando el aire comienza a pasar a travs del filtro.
Leer la conductividad del extracto en el conductmetro usando KCl 0.02 M para calibrar el equipo.
Expresar los resultados en mmhos cm-1 o dS m-1.
Procedimiento Analtico
Consultar Procedimiento de Operacin del Conductmetro pH Mettler (PROLSE11)

Comentarios
Los suelos orgnicos deben dejarse en reposo durante la noche.
El contenido de agua debe estar al punto de saturacin. Los criterios para saturacin son los
siguientes: La muestra brilla al reflejar la luz, la pasta fluye con facilidad cuando se inclina el vaso y no
debe haber exceso de agua en la superficie.
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La conductividad aumenta con la temperatura.
Una conductividad de ms de 4 mmhos cm-1 (4 dS m-1) indica un suelo salino. La siguiente tabla
muestra unos valores indicativos para suelos salinos y alcalinos.

Clasificacin de suelos afectados por sales (Landon, 1984 USDA)


Suelo Conductividad Elctrica (dS m-1) *PSI pH
Salino >4 < 15 < 8.5
Salino Alcalino >4 > 15 < 8.5
Alcalino <4 > 15 > 8.5
*PSI = Porcentaje de Sodio Intercambiable. Es una medida del porcentaje de la Capacidad de
Intercambio Catinico, ocupado por iones Sodio.
Referencias
Mackean, S. 1993. Manual de Anlisis de Suelos y Plantas. Centro Internacional de Agricultura Tropical
(CIAT). Cali, Colombia.
Manual de Operacin Conductmetro pH condutyvity Mettler Toledo MPC 227
Nortcliff, S. 1988. Soil formation and characteristics of soil profiles. Captulo 5 en Russells soil
conditions and plant growth. 11th ed. A. Wild (ed).

Determinacin del Carbono Orgnico Oxidable (Sin Digestin) Espectrofotometra Molecular


[EDULST01-4]

Alcance
Este mtodo se utiliza para la determinacin de Carbono Orgnico Oxidable en suelos y sustratos

Principio
Para determinar el contenido de Carbono Orgnico se usan varios procedimientos basados la mayora,
en una oxidacin hmeda.
Se oxida la muestra con Dicromato de Potasio, aprovechando el calor producido por la reaccin con
cido Sulfrico concentrado.
2 Cr2O7 2- + 3C + 16H+ ------- 4 Cr3+ + 3CO2 + 8 H2O
El cido Crmico producido se puede medir colorimtricamente a 620nm.
El procedimiento automatizado para la determinacin de Carbono se basa en el mtodo de Walkley y
Black. La oxidacin no es completa; se estima que en promedio se oxida el 76 % del carbono total.

Equipos
Balanza
Equipo de Espectrofotometra Automatizada o Manual.
Equipo usual en el Laboratorio

Reactivos:
Dicromato de Potasio 8%
Pesar 80 g de K2Cr2O7 en un baln de 1L
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Adicionar cerca de 800 mL de agua bidestilada y disuelva
Completar a 1L con agua bidestilada y mezcle
Guardar la solucin en una botella oscura
Acido Sulfrico puro
H2SO4 con una concentracin no menor a 97 %
Estndares
Solucin stock 10000 mg/L
Glucosa D+ Grado reactivo (C6H12O6)
En un baln volumtrico de 100 mL, pesar 2.5022g de Glucosa grado reactivo y disolver en 50 mL de
agua bidestilada, completar a volumen y mezclar. Esta solucin contiene 10000 mg/L de Carbono y es
estable por una semana.
Estndares de trabajo
Tomar de la solucin de 10000 mg/L, las alcuotas indicadas, en balones de 100 mL. Agregar a cada
baln, 5 mL de Dicromato de Potasio y 10 mL de Acido Sulfrico, dejar enfriar por media hora,
completar a volumen con agua bidestilada.

Alcuota mg/L C g/kg C Oxidable


mL Solucin Suelo
0 0 0
0.5 50 10.0
1.0 100 20.0
1.5 150 30.0
2.0 200 40.0

Procedimiento de Extraccin

En Erlenmeyer de 250 mL pesar 0.500 g de suelo seco y 0.500 g de matrices de referencia, si el suelo
es muy oscuro, pesar 0.250 0.125 g.
A las muestras de suelo agregar 5 mL de Dicromato de Potasio al 8% con una repipeta; agitar bien.
Agregar 10 mL de Acido Sulfrico puro, con una repipeta y agitar por un minuto.
Dejar en reposo al menos 2 horas para enfriar.
Agregar 85 mL de agua con una repipeta, agitar bien las muestras y dejar en reposo durante la noche.
Trasvasar la solucin sobrenadante a las copitas del muestreador teniendo cuidado de no mezclarla.

Procedimiento Analtico

Para la parte analtica, consultar Manual de Mtodos: Soil and Plant Anlisis SKALAR
Para manejo de equipo, consultar Procedimiento de Operacin del Espectrofotmetro Autoanalizador
Skalar-1 (PROLSE05) o Procedimiento de Operacin del Espectrofotmetro Manual Gilford
(PROLSE07)

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Elemento Longitud de onda nm Rango (mg/L) Estndar de Chequeo (mg/L)
C 620 y 720 > 3.51 100 150

Clculos
g/kg C Suelo = mg/1000mL C Solucin * 100mL/0.5g * 1000g/1 kg * 1g/1000mg
g/kg C Oxidable en Suelo = mg/L C en solucin * 0.2
Peso muestra = w = 0.5 g.
Nota: Para pasar de g/kg C a porcentaje se divide por 10
Para calcular la Materia Orgnica a partir del C oxidable, se multiplica ste por (100/75) y por 1.72.

Referencias
Mackean, S. 1993. Manual de Anlisis de Suelos y Plantas. Centro Internacional de Agricultura Tropical
(CIAT). Cali, Colombia.
Nelson, D.W. y Sommers, L.E 1982. Total Carbon, Organic Carbon and Organic Matter. Methods of Soil
Analysis. A.L. Page, Ed. American Society of Agronomy. Madison, Wisconsin, USA.
Skalar Analytical Bv. 1995. Soil and Plant Analysis. Breda, The Netherlands. 160 p.

Determinacin del Carbono Orgnico Total (Con Digestin) Espectrofotometra Molecular


[EDULST01-5]

Alcance
Este mtodo se utiliza para la determinacin de Carbono Orgnico Total (y Materia Orgnica) en
suelos y sustratos
Principio
No existe un mtodo de rutina para determinar la Materia Orgnica (MO) del suelo de manera
directa. Por esta razn normalmente se estima determinando el contenido de Carbono Orgnico Total
(COT) en el suelo.
Para determinar el contenido de COT se usan varios procedimientos basados, la mayora, en una
oxidacin hmeda. Se oxida la muestra con Dicromato de Potasio, aprovechando el calor producido
por la reaccin con Acido Sulfrico concentrado.

2 Cr2O7 2- + 3C + 16H+ ------- 4 Cr3+ + 3CO2 + 8 H2O

El cido crmico producido se puede medir colorimtricamente a 620 nm.


El procedimiento automatizado para la determinacin de Carbono se basa en el mtodo de Walkley y
Black. La oxidacin no es completa; se estima que en promedio se oxida el 76 % del Carbono por lo
tanto se debe incluir una digestin a 120 oC durante 2 horas. Finalmente, para convertir el Carbono
Orgnico Total a Materia Orgnica se emplea el factor de 1.72

Equipo
Balanza
Bloque digestor de tubos
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Equipo Espectrofotmetro Automatizado o Manual.
Equipo usual en el Laboratorio

Reactivos
Dicromato de Potasio 8%
Pesar 80 g de K2Cr2O7 en un baln de 1L.
Adicionar cerca de 800 mL de agua bidestilada y disolver
Completar a 1L con agua bidestilada y mezclar
Guardar la solucin en una botella oscura
Acido Sulfrico puro
H2SO4 con una concentracin no menor a 97 %
Estndares
Solucin stock 10000 mg/L
Glucosa D+ Grado reactivo (C6H12O6. H2 O)
En un baln volumtrico de 100 mL, pesar 2.7523 g de Glucosa grado reactivo y disolver en 50 mL de
agua bidestilada, completar a volumen y mezclar. Esta solucin contiene 10000 mg/L de Carbono y es
estable por una semana.
Estndares de trabajo
Tomar de la solucin de 10000 mg/L, las alcuotas indicadas, en balones de 100 mL. Agregar a cada
baln, 5 mL de Dicromato de Potasio y 10 mL de Acido Sulfrico, dejar enfriar por media hora,
completar a volumen con agua bidestilada.
Alcuota mg/L C g/kg C-Total
(mL) Solucin Suelo
0 0 0
0.5 50 10.0
1.0 100 20.0
1.5 150 30.0
2.0 200 40.0

Procedimiento de Extraccin
En tubos de digestin graduados, pesar 0.250 g de muestra y de cada uno de los suelos control. Si el
suelo es oscuro y contiene races, pesar 0.125 g
A las muestras y a los controles agregar 2.5 mL de Dicromato de Potasio al 8% con una repipeta; agitar
bien.
Agregar 5 mL de Acido Sulfrico puro, con una repipeta y agitar por un minuto.
Colocar los tubos en un bloque de digestin a 120 oC durante 2 horas.
Dejar enfriar al menos por 2 horas.
Completar a 50 mL con agua; agitar manualmente bien hasta que la solucin est completamente
homognea y dejar en reposo toda la noche.
Trasvasar la solucin sobrenadante a las copitas del autoanalizador Skalar.
En el espectrmetro Gilford se leen las muestras directamente de los tubos.

Universidad del Magdalena, Santa Marta. Carrera 32 No. 22-08 San Pedro Alejandrino.
Telfono: 4303621 Pagina web: www.unimag.edu.co. ing.agronmica@yahoo.com
Procedimiento Analtico
Para la parte analtica, consultar Manual de Mtodos: Soil and Plant Anlisis SKALAR
Para manejo de equipo, consultar Procedimiento de Operacin del Espectrofotmetro Autoanalizador
Skalar-1 (PROLSE05)

Elemento Longitud de onda nm Rango (mg/L) Estndar de Chequeo (mg/L)


C 620 y 720 > 3.57 100 150

Clculos
g/kg C Suelo = mg/1000mL C Solucin * 50mL/0.25g * 1000g/1kg * 1g/1000mg
g/kg C Total en Suelo = mg/L C en solucion * 0.2
Peso muestra = w = 0.5 g.
Nota: Para pasar de g/kg de C a Porcentaje se divide por 10
g/kg MO Suelo = mg/L C en Solucin * 0.2 * 1.72
Nota: Para pasar de g/kg de MO a Porcentaje se divide por 10
1.72= Factor de conversin de Carbono a Materia Orgnica
Referencias
Mackean, S. 1993. Manual de Anlisis de Suelos y Plantas. Centro Internacional de Agricultura Tropical
(CIAT). Cali, Colombia.
Nelson, D.W. y Sommers, L.E 1982. Total Carbon, Organic Carbon and Organic Matter. Methods of Soil
Analysis. A.L. Page, Ed. American Society of Agronomy. Madison, Wisconsin, USA.
Skalar Analytical Bv. 1995. Soil and Plant Analysis. Breda, The Netherlands. 160 p.

Determinacin de Calcio y Magnesio Intercambiables en suelos con pH <5. Espectrofotometra de


Absorcin Atmica [EDULST01-6]

Alcance
Este mtodo se utiliza para la determinacin de Calcio y Magnesio cambiables en suelos y sustratros
con pH menor de 5.5.

Principio
El Calcio y el Magnesio se encuentran en la solucin del suelo, fijados en el complejo de cambio y en
algunos minerales. La forma intercambiable es la ms importante para la planta. Normalmente el
Calcio es el in ms abundante en el suelo aunque en los suelos cidos se lixivia y el Aluminio lo
remplaza. La disponibilidad de estos cationes tambin es afectada por la textura del suelo.
En suelos cidos con carga variable, los cationes intercambiables Calcio y Magnesio se desplazan con
una solucin de Cloruro de Potasio 1M. Se mide la concentracin de cada catin en el extracto, por
Absorcin Atmica.

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Telfono: 4303621 Pagina web: www.unimag.edu.co. ing.agronmica@yahoo.com
Equipo
Balanza
Agitador Mltiple
Equipo de Absorcin Atmica.
Equipo usual en el Laboratorio

Reactivos
Solucin extractora de Cloruro de Potasio (KCl) 1M
Pesar74.56 g de KCl agregar un poco de agua bidestilada disolver y completar a 1 litro con agua
bidestilada.
Solucin de Oxido de Lantano al 5 % (La2O2)
Pesar 58.65 g de La2O3, agregar 100 mL de agua bidestilada, adicionar lentamente y con agitacin,
250 mL de HCl 6 M, dejar enfriar y completar a un litro con agua bidestilada.
Solucin de trabajo de Lantano
Medir con probeta 25 mL de la solucin anterior y diluir con agua bidestilada a un litro.
Estndares
Soluciones patrones combinadas para Calcio y Magnesio
Solucin estndar de Ca (1000 mg/L)
Solucin estndar de Mg (1000 mg/L)
A. Solucin de Magnesio (500 mg/L Mg )
En un baln volumtrico de 100 mL, tomar 50 mL de solucin de 1000 mg/L.
Completar a volumen con agua bisdestilada y mezclar. Esta solucin contiene 500 mg/L de Mg.
B. Solucin estndar de Calcio (1000 m/L de Ca)
Estndares de trabajo
Tomar de la solucin de 500 mg/L de Mg y de la de 1000 mg/L de Ca, las siguientes alcuotas en mL y
completar a volumen en balones de 250 mL, con la solucin de KCl 1M.

Alcuota Alcuota mg/L Mg mg/L Ca Cmol+ Mg/kg Cmol+ Ca/kg


(Mg) (Ca) Solucin Solucin Suelo Suelo
0.0 0.0 0.0 0.0 0.0 0.0
0.5 0.5 1.0 2.0 0.083 0.1
1.0 1.0 2.0 4.0 0.17 0.2
1.5 1.5 3.0 6.0 0.249 0.3
2.5 2.5 5.0 10.0 0.42 0.5
5.0 5.0 10.0 20.0 0.84 1.0
6.25 25.0 1.25

Procedimiento de Extraccin
Pesar 5.0 g de muestra y 5.0 g de cada uno de los suelos control, en vasos plsticos
Agregar 25 mL de la solucin extractora de Cloruro de Potasio 1M
Agitar durante 5 minutos
Filtrar por gravedad en tubos graduados de 50 mL lavando el suelo con 2 porciones de 10 mL de KCl
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Completar a volumen con KCl y agitar para obtener una mezcla homognea

Procedimiento Analtico
Dispensar con el dilutor en tubos de ensayo, 2mL de cada solucin (estndares y muestras) y 18 mL de
la solucin de Lantano.
Nota: Los estndares de la curva y las muestras quedan diluidos 10 veces con la solucin de Lantano.
Las muestras se leen en los equipos de Absorcin Atmica despus de cuadrarlos con los estndares
diluidos.
Consultar Procedimiento de Operacin del Espectrofotmetro Unicam -1 (PROLSE01) o Procedimiento
de Operacin del Espectrofotmetro Unicam 2 (PROLSE02)

Elemento Longitud de onda nm Rango (mg/L) Estndar de Chequeo (mg/L)


Ca 422.7 > 0.45 4.0
Mg 285.2 > 0.94 2.0

Clculos
Ca suelo (cmol (+) /kg) =
mg/L *1L/1000 mL * 50mL/5g * 9 cmol (+) Ca/400 mg Ca * 1000 g/1 kg = 0.5
Mg suelo (cmol (+) /kg) =
mg/L * 1L/1000 mL * 50 mL/5g * 10 mL/2mL * 2 cmol (+) Mg/240 mg Mg * 1000 g/1 kg = 0.833
Nota: El factor 2 que afecta a centimol se usa para incluir las 2 valencias de los cationes divalentes
S hay necesidad de diluir, debe incluirse el correspondiente factor en los clculos.
La unidad centimol de carga positiva por kilogramo, cmol(+)/kg, equivale en valor absoluto a la
antigua unidad meq/100 g

Referencias
Mackean, S. 1993. Manual de Anlisis de Suelos y Plantas. Centro Internacional de Agricultura Tropical
(CIAT). Cali, Colombia.
Manual de Operacin Unicam Solaar 969 Page, A.L. Ed. 1982 Methods of Soil Analysis Part 2. Second
Ed. ASA
Temminghoff, E.J.M. 2000. Methodology of chemical Soil and Plant Analysis. Wageningen. University.

Determinacin de Potasio Intercambiable en Suelos con pH < 5.5 Espectrofotometra de Absorcin


Atmica [EDULST01-7]

Alcance
Este mtodo se usa para determinar Potasio cambiable en suelos o sustratos cuyo pH sea menor de
5.5.

Principio
El contenido de Potasio del suelo depende del material parental y de la cantidad y tipo de arcillas.

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Para desplazar el Potasio intercambiable, puede emplearse la solucin de Acetato de Amonio 1M o la
solucin de Bray II (HCl 0.1M y NH4F 0.03 M). Ambas extraen cantidades similares de Potasio
intercambiable, pero en el extracto de Bray II tambin se determina el Fsforo disponible. La
determinacin de Potasio puede hacerse por Absorcin Atmica o por Emisin.

Equipo
Balanza
Agitador Mltiple
Equipo de Absorcin Atmica.
Equipo usual en el Laboratorio
Reactivos
Solucin extractora de Bray II (HCl 0.1 M y NH4F 0.03 M)
Pesar 1.11 g de NH4F en un baln de 1 litro, disolver con un poco de agua bidestilada, agregar 8.3 mL
de HCl concentrado y completar con agua bidestilada.
Estndares
Solucin Estndar de 1000 mg/L K
Solucin de trabajo de 100 mg/L K
Tomar 50 mL de la solucin estndar de 1000 mg/L K y disolver a 100 mL con agua bidestilada. Esta
solucin contiene 500 mg/L K
Estndares de trabajo
Tomar de la solucin de 500 mg/L de K, las siguientes alcuotas en mL y completar a volumen en
balones de 250 mL, con la solucin extractora Bray II.

Alcuota mg/L K cmol/kg K


(mL) Solucin Suelo
0.0 0.0 0.000
1.0 2.0 0.036
2.0 4.0 0.072
5.0 10.0 0.180
10.0 20.0 0.360
20.0 40.0 0.720

Procedimiento de Extraccin
Pesar 2.85 g de muestra y de cada uno de los suelos control, en vasos plsticos
Agregar 20 mL de la solucin extractora de Bray II
Agitar durante 40 s
Filtrar la suspensin inmediatamente a travs de papel filtro en vasos plsticos

Procedimiento Analtico
Las muestras se leen directamente en el equipo de Absorcin Atmica (Espectrmetro Unicam 969)
Procedimiento de Operacin del Espectrofotmetro Unicam -1 (PROLSE01) (Espectrmetro Thermo ).
Consultar Procedimiento de Operacin del Espectrofotmetro Thermo (PROLSE03).

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Elemento Longitud de onda (nm) Rango (mg/L) Estndar de Chequeo (mg/L)
K 766.5 > 0.53 4

Clculos
K suelo ( cmol (+) /kg) =
mg/L * 1L/1000 mL * 20 mL/2.85g * 1 cmol K/390 mg K * 1000 g/1 kg = 0.018
Nota: Si hay necesidad de diluir, debe incluirse el correspondiente factor en los clculos.
La unidad centimol de carga positiva por kilogramo, cmol (+)/kg, equivale en valor absoluto, a la
antigua unidad meq/100 g

Referencias
Mackean, S. 1993. Manual de Anlisis de Suelos y Plantas. Centro Internacional de Agricultura Tropical
(CIAT). Cali, Colombia.
Manual de Operacin Unicam Solaar 969
Manual de Operacin Thermo
Page,A.L Ed. 1982 Methods of Soil Analysis. Part 2. Second Ed. ASA. USA.
Temminghoff, E.J.M. 2000. Methodology of chemical Soil and Plant Analysis. Wageningen. University

Determinacin de Acidez Intercambiable. Volumetra [EDULST01-8]

Alcance
Este mtodo se usa para la determinacin de la Acidez intercambiable, el Aluminio y/o el Hidrgeno
intercambiables en suelos y sustratos con pH menor de 5.5.

Principio
La Acidez Intercambiable comprende el Hidrgeno y el Aluminio intercambiables en el suelo. Se
determina mediante la titulacin con NaOH 0.05M, despus de la extraccin con una solucin de KCL
1M. Existen cuatro fuentes de Acidez:
1. Iones H+ que vienen de la hidrlisis del Al intercambiable
2. La hidrlisis del Al no intercambiable
3. Los cidos en la Materia Orgnica
4. Los iones de Hidrgeno intercambiables
La acidez en suelos con pH mayor de 5.5 proviene de los puntos 2 y 3.
Los suelos con pH entre 4 y 5.5 deben su acidez especialmente al punto 1.
Los suelos con pH menor de 4.0 deben su acidez a los puntos 1 y 4.

Equipo
Balanza
Agitador Mltiple
Equipo usual en el Laboratorio

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Reactivos
Cloruro de Potasio 1M
Pesar 74.56 de Cloruro de Potasio reactivo y llevar a 1 L con agua bidestilada
Hidrxido de Sodio (NaOH) 0.05 M
A partir de una solucin certificada NaOH 1M, preparar una solucin 0.05M, tomando 50 mL y
completando a 1000 mL con agua bidestilada.
Fenolftalena 1% en etanol
Pesar 1g de fenolftalena, disolver en 90 mL de etanol y completar a volumen de 100 mL con etanol.
cido Clorhdrico (HCl) 0.05 M
Tomar 4.14 mL de HCl (37%) y completar a volumen de 1L con agua bidestilada.
Fluoruro de Sodio ( NaF ) 1M
Pesar 41.988 g y disolver en 1L de agua bidestilada. Preparar la solucin diariamente.
Procedimiento de Extraccin del (Al + H)
Pesar 5g. de muestra y de cada uno de los suelos control y agregar 25 mL de KCl 1M
Agitar durante 5 minutos y filtrar.
Llevar el filtrado a volumen de 50mL con KCl 1M
En este filtrado se puede leer Ca y Mg por Absorcin Atmica y NO3 y NH4 por el auto analizador de
flujo segmentado.

Procedimiento Analtico
Determinacin de Acidez Intercambiable (Al + H)
Tomar una alcuota del extracto, agregar 3 gotas de fenolftalena y titular con NaOH 0.05M hasta que
aparezca un color rosado plido (as se determina la acidez intercambiable Al + H)

Determinacin del Aluminio Intercambiable


Agregar unas gotas de HCl 0.1N para eliminar el color rosado.
Agregar 10mL de NaF 1N (la solucin se torna de color rosado intenso) y titular con HCl 0.05M hasta
que el color desaparezca por ms de un minuto; registrar la lectura (as se determina el Aluminio
Intercambiable).
Por diferencia entre Acidez intercambiable y Aluminio intercambiable calcular el Hidrgeno
intercambiable.

Determinacin directa del Hidrgeno intercambiable


Tomar una alcuota del extracto de KCl y transferirla a un erlenmeyer.
Agregar 3 gotas de indicador metil naranja 0.1% y titular con NaOH 0.05M hasta la aparicin de un
color amarillo permanente; registrar la lectura.

Porcentaje de Saturacin de Aluminio


Una medida relativa de la acidez del suelo, es el Porcentaje de Saturacin de Aluminio de la CICE
(Capacidad de Intercambio Catinico Efectiva)

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Clculos
Acidez Intercambiable (cmol(+)/kg) =
Vol. NaOH mL x N NaOH meq/mL x (Vol final extrac.mL / Vol. Alcuota mL) x (1000g / peso muestra) x
3/10/3
Se divide por 3 para pasar meq. a mmol, y por 10 para pasar mmol a cmol. Se multiplica por 3 para
pasar Al (+++) a Al (+)
Al Intercambiable (cmol(+)/kg) =
Vol. HCl mL x N HCl meq/mL x (Vol final extrac.mL / Vol. Alcuota mL) x (1000g / peso muestra) x
3/10/3
Se divide por 3 para pasar meq. a mmol, y por 10 para pasar mmol a cmol. Se multiplica por 3 para
pasar Al (+++) a Al (+).
H Intercambiable. = Acidez. Inter. - Al Inter.
Hidrgeno Intercambiable (Directa) (cmol(+)/kg) =
Vol. NaOH mL x N NaOH meq/mL x (Vol final extrac.mL / Vol. Alcuota mL) x (1000g / peso
muestra)/10
Se divide por 1 para pasar meq. a mmol, y por 10 para pasar mmol a cmol.
La unidad centimol de carga positiva por kilogramo, cmol (+)/kg, equivale en valor absoluto a la
antigua unidad meq/100 g de suelo
Porcentaje de Saturacin de Aluminio
% Sat. Al = (Al / Al+Ca+Mg+K) x 100
Referencias
Mackean, S. 1993. Manual de Anlisis de Suelos y Plantas. Centro Internacional de Agricultura Tropical
(CIAT). Cali, Colombia

Determinacin de Capacidad de Intercambio Catinico (CIC). Volumetra [EDULST01-9]

Alcance
Este mtodo se utiliza para la determinacin de la Capacidad de Cambio Catinico de los suelos y
sustratos con pH mayor de 5.5. Tambin se usa para cuantificar los cationes Ca, Mg, K y Na
cambiables.

Principio
Capacidad de Intercambio Catinico (CIC) Es un estimativo del nmero de cargas negativas del coloide
del suelo neutralizadas por los cationes cambiables. Para determinar la CIC se satura el complejo de
cambio con un exceso de Amonio, luego se lava el Amonio sobrante y por ltimo se desplaza el
Amonio de los sitios de cambio con el Sodio de una solucin de NaCl.
Capacidad de Intercambio Catinico Efectiva (CICE). En suelos con carga variable, los cationes
intercambiables, incluyendo el Aluminio, se desplazan con una sal no amortiguada de KCL 1M y la
CICE se toma como la suma de los cationes

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Equipo
Balanza
Agitador Horizontal
Equipo de Filtrado
Equipo usual en el Laboratorio

Reactivos
Acetato de Amonio 1M
Pesar 77,08g del reactivo y completar a volumen de 1L con agua bidestilada.
Alcohol Etlico 96%
Cloruro de Sodio 10%
Pesar 10g del reactivo y completar a volumen de 100mL con agua bidestilada.
Formaldehido 37%.
Fenolftaleina al 1% en alcohol.
Pesar 1g y disolver en 90mL de alcohol; completar a volumen de 100mL con alcohol.
Hidrxido de Sodio 0.1M
Tomar 100mL de una solucin 1M estndar y transferirlos a un baln aforado; completar a volumen
de 1L.

Procedimiento de Extraccin
Pesar 5 g de muestra y de cada uno de los suelos control.
Agregar 25 mL de Acetato de Amonio y agitar por 30minutos
Filtrar al vaco recibiendo en balones de 100 mL.
Lavar 3 veces con porciones de 5 mL de Acetato de Amonio.
Completar a 100 mL con agua bidestilada
Este es el extracto para determinar cationes cambiables.

Procedimiento Analtico
Lavar el suelo que queda en el embudo, con 5 porciones de 10 mL cada una, de alcohol etlico del 96%
neutralizado, desechando los lavados.
Desplazar el Amonio intercambiable mediante 5 lavados de 10 mL cada uno, de Cloruro de Sodio al
10% y recoger el filtrado.
Tomar una alcuota, agregar 10 mL. de Formaldehdo al 37% y 3 gotas de Fenolftalena, titular con
Hidrxido de Sodio 0.1M hasta un color rosado plido. Registrar la lectura.
Clculos
Capacidad de Intercambio Catinico (cmol(+)/kg)
C I C = Vol NaOH mL x N NaOH meq/mL x (Vol. Extrac mL / Vol.Alcuota mL) x (1000g. de Suelo / peso
muestra g) *1 /10
Se divide por 1 para pasar meq a mmol, y por 10 para pasar mmol a cmol
La unidad centimol de carga positiva por kilogramo, cmol (+)/kg, equivale en valor absoluto a la
antigua unidad meq/100 g de suelo
Capacidad de Intercambio Catinico Efectiva (CICE)
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CICE = Ca + Mg + K + Al

Referencias
Mackean, S. 1993. Manual de Anlisis de Suelos y Plantas. Centro Internacional de Agricultura Tropical
(CIAT). Cali, Colombia

Determinacin de Calcio, Magnesio, Potasio y Sodio Intercambiables en Suelos con pH > 5.5
Espectrofotometra de Absorcin Atmica [EDULST01-10]

Alcance
Este mtodo se usa para determinar los cationes cambiables Ca, Mg, K y Na, extrados en la
determinacin de la Capacidad de Cambio, en suelos y sustratos.

Principio
El Calcio y el Magnesio se encuentran en la solucin del suelo, fijados en el complejo de cambio y en
algunos minerales. Las formas intercambiable y en solucin son las ms importantes para la planta.
El contenido del Potasio en el suelo depende del material parental y de la cantidad y tipo de arcillas.
Las formas disponibles para la planta son el Potasio soluble y el intercambiable el cual est asociado
principalmente con las arcillas.
El contenido de Sodio en el suelo puede variar desde cantidades pequeas hasta una porcin
considerable de la capacidad de cambio dependiendo de las condiciones del suelo. En suelos
sdicos/salinos se encuentra una alta concentracin de Sodio en solucin y en el complejo de cambio.
Los cationes intercambiables se desplazan con una solucin amortiguada de Acetato de Amonio y la
concentracin de cada catin se mide por absorcin atmica.

Equipo
Balanza
Agitador Horizontal
Equipo de Absorcin Atmica.
Equipo usual en el Laboratorio

Reactivos
Solucin extractora de Acetato de Amonio (CH3C00NH4) 1M
Pesar 77.08 g de CH3C00NH4 disolver en un poco de agua bidestilada y completar a 1 L con agua
bidestilada.
Solucin de Oxido de Lantano al 5 % (La2O2)
Pesar 58.65 g de La2O3, agregar 100 mL de agua bidestilada, adicionar lentamente y con agitacin,
250 mL de HCl 6 M, dejar enfriar y completar a un litro con agua bidestilada.
Solucin de trabajo
Medir con probeta 25 mL de la solucin anterior y diluir con agua bidestilada a 1 L.
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Estndares
Soluciones patrones combinadas para Calcio y Magnesio
Solucin estndar de Ca (1000 mg/L)
Solucin estndar de Mg (1000 mg/L).

A. Solucin de Magnesio (500 mg/L Mg )


En un baln volumtrico de 100 mL, tomar 50 mL de solucin de 1000 mg/L
Completar a volumen con agua bidestilada y agitar . Esta solucin contiene 500 mg/L de Mg.
B. Solucin estndar de Calcio (1000 mg/L)
Estndares de trabajo
Tomar de la solucin de 500 mg/L de Mg y de la de 1000 mg/L de Ca, las siguientes alcuotas en mL,
agregar 100 mL de Acetato de Amonio 1M y completar a volumen en balones de 250 mL, con agua
bidestilada.
Alcuota Alcuota mg/L Mg mg/L Ca Cmol+ Mg/kg Cmol+ Ca/kg
(Mg) (Ca) Solucin Solucin Suelo Suelo
0.0 0.0 0.0 0.0 0.0 0.0
0.5 0.5 1. 2.0 0.166 0.2
1.0 1.0 2.0 4.0 0.33 0.4
1.5 1.5 3.0 6.0 0.50 0.6
2.5 2.5 5.0 10.0 0.83 1.0
5.0 5.0 10.0 20.0 1.66 2.0
6.25 25.0 2.5

Soluciones patrones combinadas para Potasio y Sodio


Solucin estndar de K (1000 mg/L); Solucin estndar de Na (1000 mg/L)
A. Solucin de Potasio (500 mg/L K )
En un baln volumtrico de 100 mL, tomar 50 mL de solucin de 1000 mg/L K completar a volumen
con agua bidestilada y mezclar. Esta solucin contiene 500 mg/L de K.
B. Solucin de Sodio (250 m/L de Na )
En un baln volumtrico de 100 mL, tomar 25 mL de solucin de 1000 mg/L Na completar a volumen
con agua bidestilada y mezclar. Esta solucin contiene 250 mg/L de Na.
Estndares de trabajo
Tomar de la solucin de 500 mg/L de K y de la de 250 mg/L de Na, las siguientes alcuotas en mL,
agregar 100 mL de Acetato de Amonio 1M y completar a volumen en balones de 250 mL, con agua
bidestilada.
Alcuota K Alcuota Na mg/L K mg/L Na Cmol/ kg K Cmol/ kg Na
(mL) (mL) Solucin Solucin Suelo Suelo
0.0 0.0 0.0 0.0 0.00 0.00
1.0 1.0 2.0 1.0 0.10 0.09
2.0 2.0 4.0 2.0 0.20 0.17
5.0 5.0 10.0 5.0 0.51 0.43
10.0 10.0 20.0 10.0 1.02 0.87
Universidad del Magdalena, Santa Marta. Carrera 32 No. 22-08 San Pedro Alejandrino.
Telfono: 4303621 Pagina web: www.unimag.edu.co. ing.agronmica@yahoo.com
20.0 20.0 40.0 20.0 2.05 1.74

Procedimiento de Extraccin
Pesar 5.0 g de muestra y de cada uno de los suelos control, en erlenmeyers de 125 mL
Agregar 25 mL de la solucin extractora de Acetato de Amonio 1M
Agitar durante 30 minutos en un agitador de posicin horizontal
Filtrar al vaco. El filtrado se recoge en balones volumtricos de 100 mL; este filtrado constituye el
extracto de suelo a partir del cual se determinan los cationes cambiables Ca y Mg por Absorcin
Atmica y K y Na por Emisin
Lavar el suelo con 3 porciones de 5 mL de acetato de amonio y completar a volumen con agua
bidestilada.

Procedimiento Analtico

Elemento Longitud de onda nm Rango (mg/L) Estndar de Chequeo (mg/L)


Ca 422.7 > 1.52 4.0
Mg 285.2 > 0.33 2.0
K 766.5 > 3.65 4.0
Na 589.0 > 1.15 2.0

Para Potasio y Sodio


Las muestras se leen directamente en el equipo de Absorcin Atmica ( Espectrmetro Unicam 969
Espectrmetro Thermo ) despus de cuadrar el equipo. Consultar Procedimiento de Operacin del
Espectrofotmetro Unicam -1 (PROLSE01) o Consultar Procedimiento de Operacin del
Espectrofotmetro Thermo (PROLSE03)
Para Magnesio Mg y Calcio Ca
Despus de haber ledo Potasio y Sodio, dispensar con el dilutor, en tubos de ensayo, 1mL de cada
solucin (estndares y muestras) y 9 mL de la solucin de Lantano.
Nota: Los estndares de la curva y las muestras quedan diluidos 10 veces con la solucin de Lantano.
Las muestras se leen en los equipos de Absorcin Atmica despus de cuadrarlos con los estndares
diluidos. Consultar Procedimiento de Operacin del Espectrofotmetro Unicam -1 (PROLSE01)

Clculos
Ca suelo (cmol (+) /kg) =
mg/L *1L/1000 mL * 100 mL/5g * 20 mL/2mL * 2 cmol (+) Ca/400 mg Ca * 1000 g/1 kg = 1
Mg suelo (cmol (+) /kg) =
mg/L * 1L/1000 mL * 100 mL/5g * 20 mL/2mL * 2 cmol (+) Mg/240 mg Mg * 1000 g/1 kg = 1.67
Nota: El factor 2 que afecta a centimol se usa para incluir las 2 valencias de los cationes divalentes
K suelo (cmol (+) /kg) =
mg/L * 1L/1000 mL * 100 mL/5g * 1 cmol K/390 mg K * 1000 g/1 kg= 0.051
Na suelo (cmol (+) /kg) =
mg/L * 1L/1000 mL * 100 mL/5g * 1 cmol Na/230 mg Na * 1000 g = 0.087
Universidad del Magdalena, Santa Marta. Carrera 32 No. 22-08 San Pedro Alejandrino.
Telfono: 4303621 Pagina web: www.unimag.edu.co. ing.agronmica@yahoo.com
Nota: Si hay necesidad de diluir, debe incluirse el correspondiente factor en los clculos.
La unidad centimol de carga positiva por kilogramo, cmol (+)/kg, equivale en valor absoluto a la
antigua unidad meq/100 g de suelo

Referencias
Mackean, S. 1993. Manual de Anlisis de Suelos y Plantas. Centro Internacional de Agricultura Tropical
(CIAT). Cali, Colombia.
Manual de Operacin Unicam Solaar 969
Manual de Operacin Termo
Page, A.L. Ed. 1982 Methods of Soil Analysis Part 2. Second Ed.ASA.
Temminghoff, E.J.M. 2000. Methodology of chemical Soil and Plant Analysis. Wageningen. University
Skalar Analytical Bv. 1995. Soil and Plant Analysis. Breda, The Netherlands. 160 p.

Determinacin de Fsforo Disponible (Mtodo de Bray II) Espectrofotometra Molecular


Automatizada [EDULST01-11]

Alcance
Este mtodo se emplea para la determinacin del Fsforo extractable en la solucin de Bray II en
suelos y sustratos.

Principio
La solucin Bray II (HCl 0.1M y NH4F 0.03 M ) disuelve algunos fosfatos fcilmente solubles en cido
como los fosfatos de Calcio y una parte de los fosfatos de Hierro y Aluminio.
El proceso automatizado para la determinacin de Fsforo se basa en la siguiente reaccin: El
Molibdato de Amonio catalizado con Tartrato de Antimonio y Potasio reacciona en medio cido, con
el fosfato para formar un complejo fosfomolbdico el cual es reducido mediante cido Ascrbico para
producir un complejo de color azul. El complejo se mide a 880 nm.

Equipo
Balanza

Equipo de Espectrofotometra Automatizada.


Equipo usual en el Laboratorio

Reactivos
Solucin extractora Bray II
Acido Clorhdrico (HCl 0.1 M ) y Fluoruro de Amonio ( NH4F 0.03 M )
Disolver 7.77 g de NH4F en un poco de agua bidestilada, agregar 58 mL de HCl concentrado y
completar a 7 litros con agua bidestilada.
Estndares
Solucin estndar 100 mg/L P
Fosfato Hidrogenado de Potasio KH2PO4
Universidad del Magdalena, Santa Marta. Carrera 32 No. 22-08 San Pedro Alejandrino.
Telfono: 4303621 Pagina web: www.unimag.edu.co. ing.agronmica@yahoo.com
Pesar 0.4394 g de KH2PO4 y llevarlos a 1 L en un baln, con agua bidestilada. Mezclar bien.
Estndares de trabajo
Tomar de la solucin de 100 mg/L de P, las siguientes alcuotas y completar a volumen en balones de
100 mL, con la solucin Bray II
Alcuota mg/L P mg/kg P
(mL) Solucin Suelo
0.0 0.0 0.0
1.25 1.25 8.75
2.50 2.50 17.50
3.75 3.75 26.25
5.00 5.00 35.00

Procedimiento de Extraccin
Pesar 2.85 g de muestra y de cada uno de los suelos control, en vasos plsticos
Agregar 20 mL de la solucin Bray II
Agitar durante 40 segundos
Filtrar la suspensin inmediatamente a travs de papel filtro whatman #2

Procedimiento Analtico

Elemento Longitud de onda nm Rango (mg/L) Estndar de Chequeo (mg/L)


P 880 > 0.09 2.5 3.75

Para la parte analtica, consultar Manual de Mtodos: Soil and Plant Anlisis SKALAR
Para manejo de equipo, consultar Procedimiento de Operacin del Espectrofotmetro Autoanalizador
Skalar-1 (PROLSE05)

Clculos
mg/kg P (suelo) = mg/L P (solucin)* L/1000mL * 20mL/2.85g *1000g/1Kg = 7.02
mg/kg P (suelo) = mg/L P (solucin) * 7.02

Referencias
Mackean, S. 1993. Manual de Anlisis de Suelos y Plantas. Centro Internacional de Agricultura Tropical
(CIAT). Cali, Colombia.
Murphy, J. y J.P. Riley. 1962. A modified single solution for determination of phosphate in natural
waters. Anal. Chem. Acta. 27:31-36
Skalar Analytical Bv. 1995. Soil and Plant Analysis. Breda, The Netherlands. 160.

Referencias
Mackean, S. 1993. Manual de Anlisis de Suelos y Plantas. Centro Internacional de Agricultura Tropical
(CIAT). Cali, Colombia.
Universidad del Magdalena, Santa Marta. Carrera 32 No. 22-08 San Pedro Alejandrino.
Telfono: 4303621 Pagina web: www.unimag.edu.co. ing.agronmica@yahoo.com
Murphy, J. and J. P. Riley. 1962. A modified single solution for determination of phosphate in natural
waters. Anal. Chem. Acta. 27:31-36

Determinacin de Fsforo Disponible (Mtodo de Olsen) Espectrofotometra Molecular [EDULST01-


13]

Alcance
Este mtodo se emplea para la determinacin del Fsforo extractable en la solucin de Bicarbonato
de Sodio, en suelos y sustratos

Principio
El Fsforo se extrae con una solucin de Bicarbonato de Sodio (NaHCO3 0.5 M) a un pH 8.50. En los
suelos calcreos o alcalinos los iones bicarbonato causan la precipitacin del Calcio como CaCO3 por
lo tanto la actividad del Calcio en la solucin disminuye; esto facilita la extraccin de los fosfatos de
Calcio. En los suelos cidos el in bicarbonato reemplaza al Aluminio y al Hierro en los fosfatos.
El proceso automatizado para la determinacin de Fsforo se basa en la siguiente reaccin: El
molibdato de Amonio catalizado con tartrato de Antimonio y Potasio reacciona en medio cido, con el
fosfato para formar un complejo cido fosfomolbdico, el cual es reducido mediante Acido Ascrbico
para producir un complejo de color azul, este complejo se mide a 880 nm.

Equipo
Balanza
Agitador Horizontal.
Equipo de Espectrofotometra Automatizada.
Equipo usual en el Laboratorio

Reactivos
Solucin Extractora Olsen
Bicarbonato de Sodio NaHCO3
Pesar 42 g de Bicarbonato de Sodio NaHCO3 en un vaso de 1 litro
Adicionar ms o menos 900 mL de agua bidestilada y disolvera.
Ajustar el pH de la solucin a 8.5 adicionando NaOH 1M (40 g de NaOH/L)
Completar a un litro con agua bidestilada
Chequear y reajustar el pH despus de guardar la solucin.
Estndares
Solucin Estndar 100 mg/L P
Fosfato Hidrogenado de Potasio KH2PO4
Disolver 0.4394 g de KH2PO4 en 800 mL de agua bidestilada; completar a 1litro con agua bidestilada
y mezclar bien.
Estndares de trabajo
Tomar de la solucin de 100 mg/L de P, las siguientes alcuotas y completar a volumen en balones de
100 mL, con la solucin Olsen.
Universidad del Magdalena, Santa Marta. Carrera 32 No. 22-08 San Pedro Alejandrino.
Telfono: 4303621 Pagina web: www.unimag.edu.co. ing.agronmica@yahoo.com
Alicuota mg/L P mg/kg P
(mL) Solucin Suelo
0.0 0.0 0.0
1.25 1.25 25.0
2.50 2.50 50.0
3.75 3.75 75.0
5.00 5.00 100.0

Procedimiento de Extraccin
En Erlenmeyer de 250 mL pesar 2.5 g de muestra. Incluir los suelos control y tres blancos.
Adicionar 50 mL de solucin extractora Olsen, usando una repipeta.
Agitar durante 30 minutos en un agitador de posicin horizontal
Filtrar en tubos de ensayo con papel filtro whatman No 2 o su equivalente.

Procedimiento Analtico
Elemento Longitud de onda nm Rango (mg/L) Estndar de Chequeo (mg/L)
P 880 0.103 a 5 2.5 3.75

Para la parte analtica, consultar Manual de Mtodos: Soil and Plant Anlisis SKALAR
Para manejo de equipo, consultar Procedimiento de Operacin del Espectrofotmetro Autoanalizador
Skalar-1 (PROLSE05)
Clculos
mg/kg P (suelo) = mg/L P (solucin)* L/1000mL * 50mL/2.50g *1000g/1Kg = 20
mg/kg P (suelo) = mg/L P (solucin) * 20
Referencias
Mackean, S. 1993. Manual de Anlisis de Suelos y Plantas. Centro Internacional de Agricultura Tropical
(CIAT). Cali, Colombia.
Olsen, S.R. and Sommers, L.E. 1982. Phosphorus. Methods of Soil Analysis. A.L. Page, Ed. American
Society of Agronomy. Madison, Wisconsin, USA.
Skalar Analytical Bv. 1995. Soil and Plant Analysis. Breda, The Netherlands. 160.

Determinacin de Fsforo y Nitrgeno Espectrofotometra Molecular [EDULST01-14]

Alcance
Este mtodo se utiliza para la determinacin del Nitrgeno y del Fsforo totales en suelos y sustratos.

Principio
El suelo se digesta con Acido Sulfrico concentrado ms Acido Saliclico en presencia de un
catalizador; de esta manera el Nitrgeno total se convierte en Amonio. El Amonio en el digestado se
determina colorimetricamente mediante la formacin de un complejo de color verde con salicilato y
nitroprusiato en presencia de cloro activo, el cual se mide a 660 nm.
Universidad del Magdalena, Santa Marta. Carrera 32 No. 22-08 San Pedro Alejandrino.
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(1) Hidrlisis del di-isocianurato
(2) Formacin de la monocloroamina
(3) Formacin de 5-aminosalicilato
(4) Oxidacin
(5) Formacin del complejo
El proceso automatizado para la determinacin de Fsforo se basa en la reaccin del molibdato de
Amonio catalizado con tartrato de Antimonio y Potasio, en medio cido, con el fosfato para formar un
complejo fosfomolbdico el cual es reducido mediante Acido Ascrbico para producir un complejo de
color azul que se mide a 880 nm.

PO43- + 12 MoO42- PMo12 O403- + 12 O2- Sb PSb2 Mo10 O483-

Equipo
Balanza
Bloque digestor de tubos
Equipo Espectrofotmetro Automatizado.
Equipo usual en el Laboratorio

Reactivos
Acido Sulfrico concentrado H2SO4 (p= 1.84 g/mL) y cido Saliclico C7H6O3
En 1 litro de Acido Sulfrico concentrado disuelva completamente 34 g de Acido Saliclico
Catalizador:
Sulfato de Sodio Na2SO4 y Sulfato de Cobre CuSO4
Mezcle bien, 1 Kg de Sulfato de Sodio y 12.5 g de Sulfato de Cobre.
Solucin de Trabajo:
En un baln de 1L, agregar 800 mL de agua bidestilada y 40 mL de H2SO4 concentrado, dejar enfriar y
completar a volumen con agua bidestilada.
Estndares
Solucin 100 mg/L P
Fosfato Hidrogenado de Potasio KH2PO4
Pesar 0.4394 g de KH2PO4 y disolverlos en 800 mL de agua bidestilada; completar a 1litro con agua
bidestilada y mezclar bien.
Estndares de trabajo
Tomar de la solucin de 100 mg/L de P, las siguientes alcuotas y completar a volumen en balones de
100 mL, con solucin de trabajo.

Alcuota mg/L P mg/kg P


(mL) Solucin Suelo
0.0 0.0 0.0
1.25 1.25 625
2.50 2.50 1250
3.75 3.75 1875
5.00 5.00 2500
Universidad del Magdalena, Santa Marta. Carrera 32 No. 22-08 San Pedro Alejandrino.
Telfono: 4303621 Pagina web: www.unimag.edu.co. ing.agronmica@yahoo.com
Solucin 1000 mg/L N
Cloruro de Amonio NH4Cl
Disolver 3.819 g de NH4Cl en 800 mL de agua bidestilada; completar a 1litro con agua bidestilada y
mezclar bien.
Solucin 100 mg/L N
Tomar 10 mL de la solucin de 1000 mg/L, completar a 1litro con la solucin de trabajo. La solucin
contiene 100 mg/L de N
Estndares de trabajo
Tomar de la solucin de 100 mg/L de N, las siguientes alcuotas y completar a volumen en balones de
100 mL, con solucin de trabajo

Alcuota mg/L N mg/kg N


(mL) Solucin Suelo
0.0 0.0 0.0
2.0 2.0 1.000
4.0 4.0 2.000
6.0 6.0 3.000
8.0 8.0 4.000

Procedimiento de Digestin
Esta digestin es adecuada para la determinacin de N total y P total
En tubos de digestin graduados, pesar 0.100 g de muestra y de cada uno de los suelos control.
Agregar 3 mL de la mezcla cida (Sulfrico ms Saliclico), y aproximadamente 1 g de catalizador
Agitar y dejar en reposo toda la noche
Colocar los tubos en los bloques de digestin y digestar a 400 Oc. La digestin se completa, cuando el
digestado toma un color amarillo claro; usualmente a los 60 - 70 minutos.
Bajar las muestras y dejar enfriar a temperatura ambiente
Completar a volumen de 50 mL con agua bidestilada
Agitar bien.

Procedimiento Analtico

Elemento Longitud de onda nm Rango (mg/L) Estndar de Chequeo (mg/L)


P 880 > 0.11 2.5 3.75
N 660 > 0.28 4.0 6.0

Para la parte analtica, consultar Manual de Mtodos: Soil and Plant Anlisis SKALAR
Para manejo de equipo, Procedimiento de Operacin del Espectrofotmetro Autoanalizador Skalar-1
(PROLSE05) para Fsforo Total y el Procedimiento de Operacin Espectrofotmetro Autoanalizador
Skalar-2 (PROLSE06) para Nitrgeno Total
Universidad del Magdalena, Santa Marta. Carrera 32 No. 22-08 San Pedro Alejandrino.
Telfono: 4303621 Pagina web: www.unimag.edu.co. ing.agronmica@yahoo.com
Clculos Fsforo
mg/kg P (suelo) = mg/L P (solucin)* L/1000mL * 50mL/0.1g *1000g/1Kg = 500
mg/kg P (suelo) = mg/L P (solucin) * 500
Clculos Nitrgeno
mg/kg N (suelo) = mg/L N (solucin)* L/1000mL * 50mL/0.1g *1000g/1Kg = 500
mg/kg N (suelo) = mg/L N (solucin) * 500

Referencias
Errwing J.M. Temminghoff. Methodology of Chemical Soil and Plant Analysis 2000 Environmental
Sciences. Wageningen University.
Skalar Analytical Bv. 1995. Soil and Plant Analysis. Breda, The Netherlands. 160.

Determinacin de Cobre, Manganeso, Hierro y Zinc Disponibles. Espectrofotometra de Absorcin


Atmica [EDULST01-15]

Principio
El Cobre, Manganeso, Hierro y el Zinc son esenciales para la planta pero son requeridos en cantidades
pequeas y por esta razn se les denomina micronutrientes. Las formas disponibles para la planta se
encuentran libremente o en complejos en la solucin del suelo. Estos nutrientes tambin pueden
estar fijados por la materia orgnica, los sesquixidos o carbonatos.
En suelos cidos los micronutrientes son ms disponibles y en algunas circunstancias pueden llegar a
ser txicos. En suelos alcalinos su disponibilidad es menor.
Para extraer los micronutrientes del suelo, se emplean diferentes soluciones pero lo ms importante
es que la cantidad del nutriente extractada con la solucin seleccionada, est calibrada con la
respuesta de la planta al nutriente.

Equipo
Balanza
Agitador Mltiple
Equipo de Absorcin Atmica..
Equipo usual en el Laboratorio

Reactivos
Solucin extractora de Doble Acido
Acido Clorhdrico (HCl) 1M
En un baln tipo A de 1000 +/- 0.08 mL, tomar 82.7 mL de HCl 37 %, y completar a 1000 mL con agua
bidestilada
Acido Sulfrico (H2SO4) 5M
En un baln tipo A de 1000 +/- 0.08 mL, tomar 277.8 mL de H2SO4 al 96 % y completar a 1000 mL con
agua bidestilada
Solucin extractora (HCl 0.05 M + H2SO4 0.0125 M)

Universidad del Magdalena, Santa Marta. Carrera 32 No. 22-08 San Pedro Alejandrino.
Telfono: 4303621 Pagina web: www.unimag.edu.co. ing.agronmica@yahoo.com
Tomar 50 mL de HCl 1M y 2.5 mL de H2SO4 5 M y completar a un volumen de 1 litro con agua
bidestilada.
Estndares
Solucin Estndar de 1000 mg/L Cu
Solucin Estndar de 1000 mg/L Mn
Solucin Estndar de 1000 mg/L Fe
Solucin Estndar de 1000 mg/L Zn
Soluciones patrones combinadas para Cobre y Zinc (50 mg/L de Cu y Zn)
Tomar 5 mL de la solucin estndar de Cobre y 5 mL de la solucin estndar de Zinc y disolver en 100
mL con agua bidestilada.
Soluciones patrones combinadas para Manganeso y Hierro (100 mg/L de Mn y Fe)
Tomar 10 mL de la solucin estndar de Manganeso y 10 mL de la solucin estndar de Hierro y
disolver en 100 mL con agua bidestilada.
Estndares de trabajo
Tomar de las soluciones combinadas de 50 mg/L de Cu y Zn, y de 100 mg/L de Mn y Fe, las siguientes
alcuotas y completar a volumen en balones de 250 mL, con la solucin extractora.

Alcuota mL Alcuota mL mg/L mg/L mg/kg mg/kg


Cu y Zn Mn y Fe Cu y Zn Mn y Fe Cu y Zn Mn y Fe
Solucin Solucin Suelo Suelo
0 0 0 0 0 0
1.25 1.25 0.25 0.50 1.0 2.0
2.50 2.50 0.50 1.00 2.0 4.0
5.00 5.00 1.00 2.00 4.0 8.0
10.00 10.00 2.00 4.00 8.0 16.0
20.00 15.00 4.00 6.00 16.0 24.0

Procedimiento de Extraccin
Pesar 5 g de muestra y de cada uno de los suelos control, en vasos plsticos
Agregar 20 mL de la solucin extractora de doble cido.
Agitar durante 15 min.
Filtrar en vasos plsticos la suspensin a travs de papel filtro Whatman

Procedimiento Analtico
Elemento Longitud de onda nm Rango (mg/L) Estndar de Chequeo (mg/L)
Cu 324.8 > 0.05 0.50
Zn 213.9 > 0.32 0.50
Mn 279.5 > 0.47 1.0
Fe 248.3 > 0.05 1.0

Las muestras se leen directamente en el equipo de Absorcin Atmica despus de cuadrar el equipo.
Consultar Procedimiento de Operacin del Espectrofotmetro Unicam -1 (PROLSE01) o Procedimiento
de Operacin del Espectrofotmetro Unicam 2 (PROLSE02)
Universidad del Magdalena, Santa Marta. Carrera 32 No. 22-08 San Pedro Alejandrino.
Telfono: 4303621 Pagina web: www.unimag.edu.co. ing.agronmica@yahoo.com
Clculos
mg/L(solucin)* 1L/1000mL * 1g/1000mg * 20mL/5g * 1000g/kg * 1000mg/g = 4 g/kg
Nota: Si hay necesidad de diluir, debe incluirse el correspondiente factor en los clculos.
Referencias
Mackean, S. 1993. Manual de Anlisis de Suelos y Plantas. Centro Internacional de Agricultura Tropical
(CIAT). Cali, Colombia.
Page,A.L Ed. 1982 Methods of Soil Analysis. Part 2. Second Ed. ASA. USA
Manual de Operacin Unicam Solaar 969

Determinacin de Boro en extractos de Suelos Espectrofotometra Molecular [EDULST01-16]

Principio
El mtodo de extraccin con agua caliente para la determinacin de Boro en suelos, es uno de los ms
usados. Mediante el agua caliente se disuelve una fraccin del Boro que se encuentra adherido a los
componentes del suelo. El mtodo descrito est basado en la adaptacin de Mahler (1984), del
mtodo de Berger y Troug (1939). Consiste en pesar las muestras de suelo en tubos de plstico,
agregar una determinada cantidad de agua, colocar a temperatura de ebullicin en un bao Mara,
por espacio de quince minutos y filtrar. Luego se toma una alcuota de cada extracto y se efecta la
determinacin mediante el mtodo de AzometinaH. (Shanina et. al., 1967).
Es necesario usar EDTA para eliminar interferencias y un buffer de Acetato de Amonio para mantener
el pH de la solucin entre 4.9 y 5.1 debido a que en este rango, la azometina y el Boro en la solucin,
forman un complejo estable de color amarillo el cual se lee a 430 nm.

Equipo
Balanza
Bao mara
Equipo de filtrado por succin.
Equipo Espectrofotmetro Manual.
Equipo usual en el Laboratorio.

Universidad del Magdalena, Santa Marta. Carrera 32 No. 22-08 San Pedro Alejandrino.
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Reactivos
Solucin Buffer
Acetato de Amonio (CH3COONH4)
Acido Actico (CH3COOH)
Acido Etilenediamino tetra actico (sal disdica (EDTA)
Acido Tiogliclico 98% (HSCH2COOH).
Pesar 400 g de Acetato de Amonio, agregar 260 mL de Acido Actico, 640 mL de agua bidestilada,
10.72 g de EDTA y 9.6 mL de Acido Tiogliclico; agitar bien la solucin.

Reactivo de color (preparar diariamente para cada determinacin)


Azometina-H
Acido Ascrbico (C6H8O6)
Pesar 0.9 g de Azometina-H, 2.0 g de cido Ascrbico y disolver en 100 mL de agua bidestilada;
mezclar bien la solucin.
Estndares
Acido Brico (H3BO3)
Solucin Estndar 1000 mg/L B
Preparar a partir de la solucin de 1000 mg/L, una solucin de 100 mg/L B
Estndares de trabajo
Tomar de la solucin de 100 mg/L de Boro, las siguientes alcuotas en mL y completar a volumen en
balones de 100 mL, agua bidestilada:

Alcuota mg/L B mg/kg B


(mL) Solucin Suelo
0.0 0.0 0.0
0.2 0.2 0.4
0.4 0.4 0.8
0.8 0.8 1.6
1.2 1.2 2.4
1.6 1.6 3.2
2.0 2.0 4.0

Procedimiento de Extraccin
Pesar 10 g de muestra y de cada uno de los suelos control, en tubos plsticos
Agregar 20 mL de agua bidestilda; colocar tapa a cada muestra.
Agitar manualmente la muestra
Colocar las muestras a temperatura de ebullicin en un bao mara por 15 minutos, filtrar por
succin en tubos plsticos.

Procedimiento Analtico
Elemento Longitud de onda nm Rango (mg/L) Estndar de Chequeo (mg/L)
B 430 > 0.026 0.8
Universidad del Magdalena, Santa Marta. Carrera 32 No. 22-08 San Pedro Alejandrino.
Telfono: 4303621 Pagina web: www.unimag.edu.co. ing.agronmica@yahoo.com
Para los estndares de trabajo, tomar con pipeta volumtrica 4.0 mL de cada estndar agregar 8.0 mL
de solucin buffer y 4.0 mL de reactivo de color. Agitar bien. Dejar en reposo durante 45 min.
Para el estndar cero, tomar 10.0 mL de agua bidestilada, agregar 20.0 mL de solucin buffer y 10.0
mL de solucin reactivo de color, agitar bien; dejar en reposo por 45 minutos.
Con una pipeta automtica, en tubos plsticos, tomar 2.0 mL de cada muestra, agregar 4.0 mL de
solucin buffer y 2.0 mL de reactivo de color, agitar bien con un agitador mecnico; dejar en reposo
por espacio de 45 minutos; efectuar la lectura en un colormetro Gilford a una longitud de onda de
430 nm
Consultar Procedimiento de Operacin del Espectrofotmetro Manual Gilford (PROLSE07)

Clculos
mg/kg B (suelo) = mg/L B (solucin)* L/1000mL * 20mL/10g *1000g/1Kg = 2.0
mg/kg B (suelo) = mg/L B (solucin) * 2

Referencias
Mackean, S. 1993. Manual de Anlisis de Suelos y Plantas. Centro Internacional de Agricultura Tropical
(CIAT). Cali, Colombia.
Mahler, R. L., Naylor, D.V. y Fredrickson, M.K. 1984. Hot water extraction of boron from soils using
sealed plastic pounches. Comn. in Soil Sci. and Plant Anal. 15 479-492
Manual de Operacin Espectrmetro Gilford

Determinacin de Azufre Disponible. Espectrofotometra Molecular [EDULST01-17]

Principio
La interpretacin de la cantidad de azufre disponible en el suelo para la planta es complicada debido a
que existen otras fuentes, adems del suelo, que pueden proporcionar azufre a la planta. Estas
fuentes son el SO2 en la atmsfera, S en fertilizantes, pesticidas y en el agua de riego.
La turbidimetra es el mtodo ms usado para medir el sulfato extrado. La turbidimetra es la medida
de la prdida de la luz transmitida a travs de una solucin con partculas suspendidas de un
precipitado de Sulfato de Bario. Se adiciona Cloruro de Bario a la solucin filtrada, para iniciar la
formacin del precipitado. Tambin se usa gelatina para mantener suspendido el precipitado en la
solucin mientras se lleva a cabo la lectura.

SO4 -2 + Ba +2 BaSO4

Equipo
Balanza
Agitador Mltiple
Equipo Espectrofotmetro Manual.
Equipo usual en el Laboratorio

Universidad del Magdalena, Santa Marta. Carrera 32 No. 22-08 San Pedro Alejandrino.
Telfono: 4303621 Pagina web: www.unimag.edu.co. ing.agronmica@yahoo.com
Reactivos
Solucin Extractora.
Fosfato monobsico de Calcio 0.008 M Ca(H2PO4)2 H2O
Pesar 4.04 g y disolver en 2 L de agua bidestilada. Se necesita 25 mL por cada muestra.
Solucin semilla
Sulfato de Potasio, grado reactivo (K2SO4).
cido Clorhdrico concentrado (HCl) 37% (12.08 M).
Pesar 0.2270 g de K2SO4, en 200 mL de agua bidestilada, agregar 99.34 mL de HCl (37 %) y completar
a volumen de 500 mL con agua bidestilada.
Cloruro de Bario (BaCl2. H2O).
Gelatina Gelatin Difco Certified
Calentar 800 mL de agua a una temperatura entre 60-70OC y aadir 0.6 g de gelatina. Dejar enfriar
con agitacin suave y constante. Cuando est a temperatura ambiente (ms o menos a las dos horas),
colocar la solucin en la nevera durante 4 horas. Despus de este tiempo, sacar la solucin de la
nevera y continuar agitando por 2 horas ms. Agregar 100 g de BaCl2 y agitar hasta que est disuelto.
Colocar nuevamente en la nevera durante 16 horas. Al otro da sacar de la nevera y agitar por 1 hora.
Estndares
Solucin stock 1000 mg/L S
Sulfato de Potasio K2SO4.
Pesar 5.4354 g de K2SO4 en 800 mL de agua bidestilada, completar a 1 litro con agua bidestilada y
mezclar bien.
Solucin de 80 mg/L S
Tomar de 20 mL de la solucin de 1000 mg/L de S y completar a 250 mL con agua bidestilada.
Estndares de trabajo
Tomar de la solucin de 100 mg/L de S, las siguientes alcuotas en mL y completar a volumen en
balones de 50 mL con solucin extractora.

Alicuota mg/L S mg/kg S


(mL) Solucin Suelo
0.0 0.0 0.0
2.0 3.2 16.0
4.0 6.4 32.0
6.0 9.6 48.0
8.0 12.8 64.0
12.0 19.2 96.0

Procedimiento de Extraccin
Pesar 5 g de muestra y de cada uno de los suelos control, en erlenmeyer de 125
Agregar 25 mL de la solucin Extractora
Agitar durante 30 minutos
Usando papel filtro doble, filtrar la solucin por gravedad en tubos de ensayo.

Universidad del Magdalena, Santa Marta. Carrera 32 No. 22-08 San Pedro Alejandrino.
Telfono: 4303621 Pagina web: www.unimag.edu.co. ing.agronmica@yahoo.com
Procedimiento Analtico
Elemento Longitud de onda nm Rango (mg/L) Estndar de Chequeo (mg/L)
S 420 > 3.35 9.6

Tomar una alcuota de 10 mL de los estndares y 5 mL de las muestras


Adicionar 2 mL de la solucin semilla a los estndares y 1 mL a las muestras
Agregar 4 mL de gelatina a los estndares y 2 mL a las muestras
Agitar suavemente.
Dejar en reposo por 45 minutos.
Calibrar el espectrofotmetro Gilford con los estndares a una longitud de onda de 420 nm usando
concentracin o absorbancia.
Leer las muestras agitando de nuevo antes de leer.
Calcular la concentracin de Azufre en el suelos en mg/kg.
Consultar Procedimiento de Operacin del Espectrofotmetro Manual Gilford (PROLSE07)

Clculos
mg/kg S (suelo) = mg/L S (solucin)* L/1000mL * 25mL/5g *1000g/1Kg = 5.0
mg/kg S (suelo) = mg/L S (solucin) * 5
Referencias
Mackean, S. 1993. Manual de Anlisis de Suelos y Plantas. Centro Internacional de Agricultura Tropical
(CIAT). Cali, Colombia.
Mengel, K y Kirkby, E.A. 1982 Sulphur. Capitulo 8. En Principles of Plant Nutritrion. P 369-386.
Determinacin de N-Amoniacal (N-NH4) y de N-Ntrico (N-NO3). Espectrofotometra Molecular
Automatizada [EDULST01-18]

Principio

El Amonio (NH4+) y el Nitrato (NO3-) del suelo, se extraen con una solucin de Cloruro de Potasio
(1M) (Bremner 1965).
La determinacin automtica del Amonio se basa en la reaccin modificada de Berthelot; el Amonio
se pasa a monocloramina que reacciona con el salicilato para formar 5-amino salicilato. Despus de
una oxidacin se forma un complejo de color verde el cual se mide a 660 nm.
La determinacin automtica de Nitrato se basa en el mtodo de reduccin con cadmio; la muestra se
pasa a travs de una columna que contiene Cadmio granulado y Cobre para reducir el Nitrato a
Nitrito. Este reacciona con sulfanilamida y naftil-etilenediamina para formar un complejo coloreado.
El color de este complejo se mide a 540 nm.

Equipo
Balanza
Agitador Horizontal
Equipo Espectrofotmetro Automatizado.
Universidad del Magdalena, Santa Marta. Carrera 32 No. 22-08 San Pedro Alejandrino.
Telfono: 4303621 Pagina web: www.unimag.edu.co. ing.agronmica@yahoo.com
Equipo usual en el Laboratorio

Reactivos
Cloruro de Potasio (KCl) 1M
Pesar 74.56 g de KCl y disolver en 500 mL de agua bidestilada. Completar a un volumen de 1 litro con
agua bidestilada
Estndares ( Autoanalizador Skalar-1)
Soluciones patrones combinadas para Amonio y Nitrato
Cloruro de Amonio NH4Cl
Nitrato de Sodio NaNO3
Solucin Estndar 100 mg/L N-NH4 y 100 mg/L N-NO3
En un baln volumtrico de 1L, pesar 0.3819 g NH4Cl, grado reactivo y 0.60681 g de NaNO3 grado
reactivo. Disolver en 500 mL de agua bidestilada.
Completar a volumen y mezclar. Esta solucin contiene 100 mg/L de N-NH4 y 100 mg/L de N-NO3.

Tambin se pueden preparar soluciones de 100 mg/l de N-NH4 y 100 mg/l de N- NO3 a partir de las
soluciones estndar certificadas de 777.8 mg/l de N-NH4 y 225.8 mg/l de N- NO3
Estndares de trabajo
Tomar de la solucin de 100 mg/L de N-NH4 y 100 mg/L de N-NO3, las siguientes alcuotas y
completar a volumen en balones de 100 mL, con la solucin KCl 1M:

Alcuota mg/L NNH4 mg/L NNO3 mg/kg NNH4 mg/kg NNO3


(mL) Solucin Solucin Suelo Suelo
0.0 0.0 0.00 0.00 0.00
0.25 0.25 0.25 2.50 2.50
0.50 0.50 0.50 5.00 5.00
0.75 0.75 0.75 7.50 7.50
1.00 1.00 1.00 10.0 10.0

Estndares (Autoanalizador Skalar-2)


Soluciones patrones combinadas para Amonio y Nitrato
Cloruro de Amonio NH4Cl
Nitrato de Sodio NaNO3
Solucin Estndar 2000 mg/L N-NH4 y 1000 mg/L N-NO3
En un baln volumtrico de 250 mL, pesar 1.91036 g NH4Cl, grado reactivo y 1.51768 g de NaNO3
grado reactivo. Disolver en 100 mL de agua bidestilada.
Completar a volumen y mezclar. Esta solucin contiene 2000 mg/L de N-NH4 y 1000 mg/L de N-NO3.
Tomar 5 mL de esta solucin y disolver en 25 mL de solucin extractora ( KCl 1M). Completar a 50 mL
y mezclar. Esta solucin contiene 200 mg/L de N-NH4 y 100 mg/L de N-NO3
Estndares de trabajo

Universidad del Magdalena, Santa Marta. Carrera 32 No. 22-08 San Pedro Alejandrino.
Telfono: 4303621 Pagina web: www.unimag.edu.co. ing.agronmica@yahoo.com
Tomar de la solucin de 200 mg/ L de N-NH4 y 100 mg/L de N-NO3 las siguientes alcuotas y
completar a volumen en balones de 100 mL, con la solucin KCl 1M :

Alcuota mg/L NNH4 mg/L NNO3 mg/kg NNH4 mg/kg NNO3


(mL) Solucin Solucin Suelo Suelo
0.0 0.0 0.0 0.00 0.00
1.0 2.0 1.0 20.0 10.0
2.0 4.0 2.0 40.0 20.0
3.0 6.0 3.0 60.0 30.0
4.0 8.0 4.0 80.0 40.0

Procedimiento de Extraccin
Pesar 5.0 g de muestra y de cada uno de los suelos control.
Agregar 15 mL de KCl 1M
Agitar durante 5 minutos en un agitador mecnico
Filtrar en tubos graduados a 50 mL, lavando el suelo 3 veces con porciones de 10 mL de KCl
Completar a volumen de 50 mL con solucin de KCl 1M y agitr bien
Nota: Cuando el pH del suelo es menor a 5.5, se puede leer Calcio, Magnesio y Aluminio en este
mismo extracto.

Procedimiento Analtico
Para la parte analtica, consultar Manual de Mtodos: Soil and Plant Anlisis SKALAR
Para manejo de equipo (Concentraciones de 0 a 1 mg/L)
Consultar Procedimiento de Operacin del Espectrofotmetro Autoanalizador Skalar-1 (PROLSE05).
Para manejo de equipo (concentraciones mayores de 1 mg/L)
Consultar Procedimiento de Operacin del Espectrofotmetro Autoanalizador Skalar-2 (PROLSE06)

Elemento Longitud de onda nm Rango (mg/L) Estndar de Chequeo (mg/L)


N-NH4 520 y 660 0.24 a 1 0.50 0.75
N-NO3 550 0.068 a 1 0.50 0.75

Clculos
mg/kg N-NH4 (suelo) = mg/L N-NH4 (solucin)* L/1000mL * 50mL/5g *1000g/1Kg = 10
mg/kg N-NH4 (suelo) = mg/L N-NH4 (solucin) * 10
mg/kg N-NO3 (suelo) = mg/L N-NO3 (solucin)* L/1000mL * 50mL/5g *1000g/1Kg = 10
mg/kg N-NO3 (suelo) = mg/L N-NO3 (solucin) * 10

Referencias
Mackean, S. 1993. Manual de Anlisis de Suelos y Plantas. Centro Internacional de Agricultura Tropical
(CIAT). Cali, Colombia.
Skalar Analytical Bv. 1995. Soil and Plant Analysis. Breda, The Netherlands. 160 p.
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Determinacin de la Textura del Suelo por Bouyucos. Gravimetra [EDULST01-19]

Principio
Se usa el anlisis mecnico (la clasificacin por tamao de las partculas del suelo) para evaluar la
textura. Los dos mtodos ms comunes (el de la pipeta y el del hidrmetro) se basan en la ley de
Stokes que relaciona la velocidad de asentamiento de las partculas en una suspensin y el dimetro
de las mismas. El mtodo del hidrmetro es menos exacto que el de la pipeta, pero es ms rpido y es
bastante preciso para propsitos agrcolas. El mtodo descrito aqu se basa en el mtodo de Bouyucos
(1962) usando un hidrmetro.
El hidrmetro mide la disminucin de la densidad de la suspensin debido al asentamiento de las
partculas del suelo. Es necesario un pretratamiento para separar o dispersar los agregados del suelo
en las partculas principales de arena, limo y arcilla. El pretratamiento puede ser qumico o fsico. En
este procedimiento se usa una solucin qumica.

Equipo
Balanza
Equipo usual en el Laboratorio

Reactivos
Alcohol Isoamlico C5H12O
Hexametafosfato de Sodio (NaPO3)6.
Carbonato de Sodio Na2CO3
Solucin dispersante.
Pesar 37.5 g de Hexametafosfato de Sodio y 7.94 g de Carbonato de Sodio. Disolver en 600 mL agua
bidestilada y llevar a un volumen de 1 L.
Procedimiento
Pesar 40 g de muestra y de cada uno de los suelos control, en el vaso del multimixer.
Agregar 50 mL de la solucin dispersante.
Dejar en reposo por 10 minutos.
Agregar 100 mL de agua y agitar 10 minutos.
Pasar todo el contenido a un cilindro de vidrio aforado y completar con agua hasta 1000 mL.
Agitar fuertemente por espacio de 20 segundos con una varilla en forma de pistn e introducir el
hidrmetro. Adicionar una gotas de alcohol isoamlico en caso de que se produzca espuma.
Leer el hidrmetro a los 40 segundos corrigiendo la lectura en base a la temperatura de la suspensin
(Tabla 1). Por ejemplo si la temperatura es 220 C, sume 0.86.
Volver a leer a las 2 horas, corrigiendo la lectura con base en la temperatura.
Simultneamente, pesar 5 g del suelo en una caja metlica y colocarla en un horno a 105 0C por 24
horas, para determinar la humedad

Tabla 1. Factores de correccin con base en la temperatura de la suspensin

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Temperatura (0c) Factor De Correccin
14 -1.46
16 0.98
18 0.44
19.44 (67 0F) 0.00
20 +0.18
21 +0.52
22 +0.86
23 +1.23
24 +1.61
25 +2.00
26 +2.41
27 +2.85
28 +3.28
29 +3.74
30 +4.20
Clculos
PSS Peso de suelo seco.
PSH Peso de suelo hmedo (40 g).
MS 40s Materia en suspensin a los 40 segundos (100 g-1 suelo seco).
MS 2H Materia en suspensin a las 2 horas (100 g-1 suelo seco).
PSS 5g humedad x 8.
MS Lectura corregida 40s / PSS x 100.
MS 2H Lectura corregida 2H / PSS x 100.
Con base en las anteriores lecturas, se efectan los siguientes clculos:
% Arena = 100 MS 40s.
% Arcilla = MS 2H.
% Limo = MS 40s MS 2H.
Usando el tringulo y los datos obtenidos se puede averiguar cul es la textura del suelo.

Referencias
Mackean, S. 1993. Manual de Suelos y Plantas. Centro Internacional de Agricultura Tropical (CIAT).
Cali Colombia.
Bouyoucos, G.J. 1962. Hydrometer method for particle size analysis of soils. Agron. J. 54 464-465.

Determinacin de Carbono y Nitrgeno total por el mtodo de combustin seca [EDULST01-20]

Principio

Se utiliza un equipo Perkin Elmer 2400 Serie II (PROLSE04), cuya temperatura de combustin es de
925 grados centgrados y su ciclo de anlisis es de 6 minutos. El anlisis es destructivo, ya que las
muestras de suelo son pasadas a estado gaseoso para poder ionizar la muestra y en estado gaseoso es

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llevada al detector del equipo por medio de helio como gas de arrastre o fase mvil. De sta manera
es analizado simultneamente los porcentajes de carbono, hidrgeno e hidrgeno en la muestra.

Equipo

Microbalanza Perkin Elmer AD 6


Pinzas de acero inoxidable
Cpsulas de estao

Reactivos

Cilindro de aire zero


Cilindro de oxgeno industrial
Cilindro de Helio
Acetanilida Perkin Elmer EDTA SIGMA ALDRICH
cido Sulfmico

Procedimiento

Pesar aproximadamente 2 mg de cido sulfmico como acondicionador del equipo


Pesar aproximadamente 3 mg de acetanilida EDTA como patrn de calibracin para el equipo
Pesar 15 mg de muestra de suelo control interno del laboratorio (CARIMAGUA, SANTANDER DE
QUILICHAO y CIAT)
Pesar 15 mg de la muestra de suelo para ser analizada

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ALGUNOS EQUIPOS DE MEDICIN SECCIN QUMICA

Espectrofotmetro de Adsorcin Atmica Solaar S-4


THERMO ELECTRON

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Hornos de secado de muestras Marca Memmertt , Mesa de arena marca Eijkelkamp y Agitador
mgnetico marca Menmertt

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Espectrofotmetro UV Genesys 10
190-1100 nm THERMO

Conductrmetro de celdas 3200 YSI

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Balanza Analtica Pionner PA 214
0.0001 g - 210 g

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ALGUNOS EQUIPOS DE MEDICIN SECCIN FSICA

Penetrmetro Eijkelkamp

Juego de Tamices Eijkelkamp

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Conductrmetro 315 i

pH WTW 315 i

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