Universidad San Francisco de Quito

Laboratorio de Biologa

Informe No.3
Protocolo casero para extraccin de ADN de cebolla
Nombres: Alex Gaona Macas Profesor: Nelson Miranda Moyano
Cdigo: 00133112 Seccin: Grupo 1, Miercoles 14h00-16h00
Fecha: 30/03/2016 Nota:

1. Introduccin

El ADN (cido Desoxirribonucleico) es un cido nucleico, o un material gentico de

todos los organismos celulares y algunos virus. Es el tipo de molcula ms compleja que se
conoce. Su secuencia de nucletidos contiene la informacin necesaria para poder controlar el
metabolismo un ser vivo. (Audersik, 2008).

El ADN lleva la informacin necesaria para dirigir la sntesis de protenas y la

replicacin. En casi todos los organismos celulares el ADN est organizado en forma de
cromosomas, situados en el ncleo de la clula. Se trata de una molcula larga, de doble hlice,
con dos hebras que se encuentran unidas por puentes de hidrgeno. Est conformada por
nucletidos, que a su vez se componen de un grupo fosfato, una azcar (desoxirribosa), y una
base nitrogenada, que puede ser: adenina (A), guanina (G), timina (T) y citosina (C). El ADN es
una molcula formada por dos hebras que se encuentran unidas por enlaces dbiles (puentes de
hidrgeno) entre las bases nitrogenadas (Burriel, s/f).

Un gen es una regin que codifica o crea protenas. Dentro de una cadena de ADN, la
secuencia de bases nitrogenadas puede variar de un individuo a otro, y es por esto que el cdigo
de ADN es nico para cada individuo, cada gen tiene secuencias adecuadas de bases
nitrogenadas que determinan diferentes tipos de caractersticas como el color de los ojos, tipo
sanguneo, el color de las flores, forma de alas, entre muchas otras caractersticas de todos los
seres vivos. (Guadalupe y Riera, 2014)

En la industria farmacutica permite el diagnstico de enfermedades. En aspectos

ecolgicos permite desarrollar y aplicar mtodos como la biodegradacin y biorremediacin para
limpiar contaminaciones, y esto se potencia con la manipulacin gentica pues se generan
microbios especializados. Otro aspecto til del ADN es la identificacin de personas especficas,
por ello se aplica a la actividad forense y pruebas de paternidad. (Campbell y Reece, 2010)
 Si se realiza un proceso de homogenizacin sutil y lento, se lograr que el ADN no
resulte daado y se pueda visualizar fcilmente.
El ADN juega un papel muy importante en varios campos del desarrollo humano, gracias
a la informacin que este lleva en su interior. Apoyando a campos como la Ingenira Gentica, la
biologa, la bioqumica, la bioinformtica, medicina forense entre otras. (Ruz, M. 2011).

Objetivos
Entender a la extraccin del material gentico y su aislamiento como la base para realizar
estudios genticos moleculares
Aprender un mtodo bsico para la extraccin y visualizacin de ADN de manera casera

2. Materiales
1 cebolla fresca
1 papaya
1 mortero
1 papel filtro de caf
1 vaso de precipitacin
1 pinza
1 probeta
Detergente/solucin de sal:
20 ml detergente (para lavar ropa)
20 g NaCl
180 ml agua destilada
20 mL de jugo de papaya cernido con el papel filtro
Solucin salina al 5% (NaCl)

3. Mtodos o Procedimiento

Para dar inicio de la prctica, se revis que los materiales esten en buen estado para que no
infieran en los resultados. Entonces se inici con la prctica. En primer lugar con la ayuda del
mortero y el pistilo se procedi a machacar la cebolla. Una vez machacada la cebolla, se aadio
la solucin del detergente. Despus, en el vaso de presipitacin se fitr la solucin con la ayuda
de un papel filtro para caf. Se coloco la solucin filtrada en un tuvo de ensayo y se procedi a
agitar para que sea una mezcla homognea.

Posteriormente se coloc en el tuvo de ensayo, jugo papaya y se mezcl suavemente. Ms

tarde se coloc el etanol al 70% a 10-12C y se dejo reposar la mezcla alrededor de 5 minutos,
con el fin de que el ADN se separe del resto de compuestos. El ADN flot entre la capa de etanol
y la mezcla anterior.
 Seguidamente, se recuper el ADN con ayuda de una pinza, y se lo coloc en el
portaobjetos. Finalmente se lo cubri con el cubreobjetos y se observo el ADN con un aumento
de 40x

4. Resultados

Imagen 1. ADN extrado de cebolla

AD
N

Fuente: Laboratorio de Biologa Universidad San Francisco de Quito

Anlisis de resultados: Al mezclar ligeramente la solucion de etanol con la mezcla de jugo de

papaya en el cual se encuentra la muestra de cebolla , se puede notar que el ADN de la misma
empieza a aislarse del resto de compuestos dando lugar a una sustancia consistecia viscosa y
color amarillo-anaranjado que tiene lugar en el fondo del tuvo de ensayo en el que se encuentra
contenido.

Imagen 2. Muestra de ADN observada mediante el microscopio

Fuente :Laboratorio de Biologa Universidad San Francisco de Quito

Anlisis de resultados: Debido a que no se contaba con la camara especializada para poder
realizar una buena fotografia no se puede explicar de manera grafica lo que se observo en el
microscopio, pero ha la vista de los observadores fue muy clara la observacion en la cual se
visualizo una pequea muestra de ADN extraido con un aumento de 40x, por ende se tiene como
resultado la visualizacion del mismo amplificada 400 veces. En la imagen se puede apreciar la
forma retorcidad que es caracteristico de esta molecula, asimismo, se observa las hebras que
confirman el mismo. De igual manera, se puede apreciar una aglomeracion en la parte superior
derecha de la imagen debido a que el ADN que se observa se encuentra desnaturalizado o roto,
debido a la manipulacion forzosa que tuvo al momento de ser extraido para ser visualizado.

5. Discusin
En base a los resultados que se pudieron observar en la presente prctiva, se obervo que
uno de los principales incconvinientes que este esta presento fue sacar un poco de la muestra, del
fondo del tuvo de ensayo, puesto que al hacerlo con las pinzas este se rompia con mucha
facilidad, es por ello que se pude decir que hubo una visualizacion parcial de ADN puesto que
este no se encontraba en su forma nartural, sin embargo, segn un informe acerca de la
extraccion de ADN, se dice que incluso la muestra que se ha obtenido no era pura debido a la
presencia de pequeos fragmentos de ARN que se ha entremezclado, no obstante, es posible la
extraccion pura de ADN mediante metodos cientificos de mayor complejidad.(Salas, s/f)

Uno de los primeros pasos de la prctica , fue poner poner el detergente en soluin de sal
sobre la cebolla, esto debido que este elemento ayudar a que las paredes celulares y las
membranas, plasmticas y nucleares de la cebolla comiencen a romperse. (Pimentel, J. 2014).
Entonces al momento en que se rompieron las paredes celulares de la cebolla, se espero
unos minutos para colocar el jugo de papaya que le ayudara a esta mezcla a eliminar cierto tipos
de protenas que pueden contaminar la formacin del ADN. Esto debido a que la papaya contiene
una enzima denominada papayina, que realiza esta funcin especfica. (Pimentel, J. 2014).
Por ltimo, con las paredes celulares rotas y limpias de impurezas, se coloc en la mezcla
la solucn del cloruro de sodio, el cual contribuy a separar el ADN, esto como consecuencia de
que el ADN va a tener ms afinidad con esta solucin comparada con el agua, por ende va a
precipitarse en una interfase formada por el alcohol y el agua. (Pimentel, J. 2014).

6. Conclusiones
En conclusion, para lograr una extraccion eficar de la molecula de ADN, es necesario
romper la membrana celular y nuclear de la celula, ademas en el caso de las celulas vegetales,
debido a que estas poseen pared celular , esta se debe romper tambien para poder liberar al ADN,
dicho proceso se llevo a cabo con la solucion de detergente y sal.

Por otro lado , se concluto que el judo de papaya utilizado en la practica tuvo la finalidad
de eliminar las proteinas que puedan contaminar o daar la muestra de ADN y por ultimo ue la
molecula en presencia del alcohol se desenrrolla y precipita, por ello se utilizo etanol para separa
la muestra.
 Al terminar con la prtica se cponcluye que se ha cumplido con cada uno de los objetivos
previamente planteados. Se conocieron los principios bsicos que son muy necesaios a la hora de
extraer el ADN de una manera caser. Tambien se conoce la importancia que existe cuando se
aisla el material gnetico y las ventajas que esto puede tener en los diferentes campos del
desarrollo humano.

7. Literatura Citada
Audersik, T. (2008). Biologa: La vida en la Tierra. Mxico D.F. Pearson Educacin.

Burriel, V. (s/f). Estructura y propiedades de los cidos nucleicos. Extrado el 14 de marzo de

2015 de http://www.uv.es/tunon/pdf_doc/AcidosNucleicos_veronica.pdf.

Campbell, N. y Reece, J. (2010). Biologa. Madrid. Editorial Mdica Panamericana.

Guadalupe, J. Riera P. (2014), Manual del Laboratorio de Biologa para Ingenieras. Quito:
Universidad San Francisco de Quito.
Ruiz, M. (2011). Aplicaciones del ADN en diferentes campos. Recuperado el 3 de marzo del
2015 de: http://procesosdeladn.blogspot.com/2011/04/aplicaciones-del-adn-en
diferentes.html