RESUMEN

Este trabajo surgi por la necesidad de conocer la efectividad del desinfectante ALCOHOL EN
GEL, utilizado para la desinfeccin de manos en las personas.

Para este procedimiento se utiliz la tcnica de siembre en estra sobre agar selectivo para los
diferentes microorganismos que se encuentran con mayor incidencia en las manos de las
personas.

En la evaluacin de los desinfectantes se tuvieron en cuenta tres diferentes concentraciones de

los mismos, la recomendada por la casa comercial 0.2% v/v, el doble de la recomendada 0.4%
v/v y la mitad de la recomendada 0.1% v/v. Se realizaron pruebas en tres tiempos distintos a los
5, 10 y 15 minutos, para as determinar el mejor tiempo de accin de los desinfectantes.

Los resultados que arrojaron estas pruebas mostraron que este tipo de desinfectante result muy
efectivo con los microorganismos que se evaluaron, ya que revelaron un 100% de inhibicin en el
crecimiento de estos, tanto en la concentracin recomendada 0.2% v/v, como en la
correspondiente al doble de esta es decir 0.4% v/v. En cuanto a la concentracin correspondiente
a la mitad de la recomendada, en este caso 0.1% v/v, se observ que presenta fallas en su
efectividad, debido a que a los 5 minutos de exposicin, el porcentaje de inhibicin fue de 0%, y
a los 10 minutos fue de 75%, lo cual indica que a esta concentracin, los desinfectantes
necesitan un mayor tiempo de exposicin, el cual esta entre 10 y 15 minutos, para lograr un
100% de inhibicin del crecimiento microbiano.

Para la prueba in vitro que se llev a cabo, el desinfectante mostr una efectividad del 100% en
la concentracin recomendada 0.2% v/v, para los diferentes tiempos en que se evaluaron 5, 10,
y 15 minutos, inhibiendo as los microorganismos presentes en las reas de trabajo y mquinas
utilizadas.

2. METODOS PARA EVALUAR LOS DESINFECTANTES

Un desinfectante es eficaz cuando se aplica en la concentracin recomendada y reduce
rpidamente el nmero de microorganismos patgenos a niveles que sean seguros para la salud
pblica. Generalmente se pueden tener en cuenta tres aspectos para la evaluacin de un
producto: la eficiencia inmediata de la formulacin (hace referencia a la remocin mecnica y la
inactivacin inmediata de microorganismos), persistencia antimicrobiana de la efectividad (es la
medida de la habilidad del producto para prevenir la recolonizacin microbiana en la superficie
despus de la aplicacin del producto) y las propiedades residuales antimicrobianas de la
formulacin. Para poder llegar a evaluar estas caractersticas se emplea el mtodo
. .

2.1 Recuento en placa

Las diluciones del microorganismo se vierten en medio de cultivo slido junto con una
concentracin del desinfectante y se incuban. Luego del periodo de incubacin se observa la
ausencia o disminucin del crecimiento del microorganismo. Con el resultado obtenido del
recuento en placa se puede determinar hasta que concentracin acta el desinfectante sobre
una determinada cantidad de microorganismos. (Cotrino, 1994).

2.2 Tcnica de dilucin en tubo

Se realizan diferentes diluciones del agente qumico. El mismo volumen de cada dilucin se
dispersa en tubos estriles, a cada tubo se le aade la misma cantidad de una suspensin del
microorganismo utilizado como prueba. A determinados intervalos de tiempo se transfiere una
alcuota de cada tubo a otro tubo que contenga medio de cultivo. Estos tubos inoculados se
incuban a una temperatura ptima de crecimiento del microorganismo utilizado durante 24 o 48
horas. Al cabo de este tiempo se examina el crecimiento del microorganismo mediante la
aparicin de turbidez en el tubo (crecimiento +) o ausencia de turbidez (crecimiento -).
Aquellos que presenten crecimiento negativo indican la dilucin a la cual ese agente qumico
mata al microorganismo utilizado como prueba cuando este es expuesto al desinfectante
durante determinado periodo de tiempo (Rojas, 2001).

2.3 Susceptibilidad microbiana

Se puede realizar mediante el mtodo de difusin en agar, conocido como el mtodo de Baver &
Kurby, se basa en la difusin que presenta un agente antimicrobiano, impregnado en un disco de
papel de filtro, sobre la superficie de agar. Se utiliza una suspensin de microorganismo
semejante al tubo 0.5 de McFarland. Se mezclan 0.001 mL de la suspensin del microorganismo
con 9 mL de agar licuado y se vierte en una caja de Petri que contenga agar nutritivo o BHI,
luego de 5 minutos se colocan sobre la superficie del agar los discos impregnados con las
concentraciones del desinfectante a ensayar, comenzando por la menos concentrada. Para la
lectura se miden las zonas de inhibicin alrededor del disco (Cotrino, 1994).

2.4 Medicin de la actividad microbiana (MIC)

La actividad microbiana se mide determinando la mnima cantidad del agente que se necesita
para inhibir el crecimiento de un microorganismo, valor que se conoce como concentracin
mnima inhibitoria (MIC). Para determinar la MIC se prepara una serie de tubos, cada uno de los
cuales contiene medio con una concentracin diferente del desinfectante y se inoculan todos los
tubos de la serie. Luego de la incubacin se observa en cuales de los tubos no hay crecimiento
(evidenciado por la ausencia de turbidez) y se determina as la MIC. Este eficaz procedimiento se
denomina con frecuencia tcnica de la dilucin en tubo. (BLOOK, 1994).

2.5 Ensayos de dilucin neutralizacin (pueden ser cualitativos y cuantitativos)

Referencia TESIS 5 GINO-pdf

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http://www.microinmuno.qb.fcen.uba.ar/SeminarioRecuento.htm

tesis 2 gino
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3. OBJETIVO GENERAL
Determinar in vitro la efectividad biocida del Alcohol en Gel al 70% frente a cepas de
staphylococcus aureus, pseudomonas aeruginosa, escherichia coli y salmonella typhi.

3.1 OBJETIVOS ESPECFICOS

Evaluar la efectividad in vitro del alcohol en gel al 70% usado para las manos frente a la
salmonella typhi, con 2, 5 y 10 minutos de contacto antisptico-microorganismo segn la
Norma UNE-EN 1276.2010.
Evaluar la efectividad in vitro del alcohol en gel al 70% usado para las manos frente al
staphylococcus aureus con 2, 5 y 10 minutos de contacto antisptico-microorganismo
segn la Norma UNE-EN 1276.2010.
Evaluar la efectividad in vitro del alcohol en gel al 70% usado para las manos frente a la
pseudomonas aeruginosa con 2, 5 y 10 minutos de contacto antisptico-microorganismo
segn la Norma UNE-EN 1276.2010.
Evaluar la efectividad in vitro del alcohol en gel al 70% usado para las manos frente a la
escherichia coli con 2, 5 y 10 minutos de contacto antisptico-microorganismo segn la
Norma UNE-EN 1276.2010.
Determinar el tipo de microorganismo que presenta menor susceptibilidad frente al
alcohol en gel
Comparar la efectividad del desinfectante Alcohol en gel de diferentes marcas
comercializadas ambulatoriamente.
4. HIPOTESIS GENERAL

La efectividad in vitro del alcohol en gel al 70% frente a las cepas patgenas bacterianas
no cumplira con los parmetros establecidos en la normativa UNE-EN 1276.2010.

4.1 HIPOTESIS ESPECFICAS

la reduccin logartmica de salmonella typhi sera inferior a 5 despus del contacto con el
alcohol en gel al 70% siguiendo la normativa UNE-EN 1276.2010.
la reduccin logartmica de staphylococcus aureus sera inferior a 5 despus del contacto
con el alcohol en gel al 70%.
la reduccin logartmica de pseudomonas aeruginosa sera inferior a 5 despus del
contacto con el alcohol en gel al 70%.
la reduccin logartmica de escherichia coli sera inferior a 5 despus del contacto con el
alcohol en gel al 70%.