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ESCUELA SUPERIOR POLTCNICA DE Logo

CHIMBORAZO escuela

1. TEMA DE LA PRCTICA
ANALISIS DE CARBOHIDRATOS
2. OBJETIVOS
3.1. Objetivo general
Identificar los distintos tipos de carbohidratos en muestras biolgicas
mediante el uso de reactivos para as diferenciar los azucares reductores
y los no reductores.
3.2. Objetivo(s) especfico
- Utilizar los reactivos de Benedic para determinar la glucosa en orina.
- Distinguir azucares reductores de los no reductores mediante su
coloracin.
3. MATERIALES Y REACTIVOS
- Tubos de ensayo
- Pipetas de 10, 5 y 1ml
- Gradillas para tubos de ensayo
- Mechero bunsen.
- Pinzas metlicas o de madera para tubos de ensayo
- Alcohol
- Muestra de orina
- Reactivo Fehling A
- Agua destilada
- Galleta salada
- Solucin glucosa 3%
- Solucin fructosa 5%
- Solucin sacarosa 3%
- Solucin lactosa 3%
- Solucin maltosa 3%
- Reactivo de Benedict
- Reactivo Fehling B
4. FUNDAMENTO TERICO

Los glcidos, carbohidratos, hidratos de carbono o sacridos son


biomolculas compuestas por carbono, hidrgeno y oxgeno, cuyas
principales funciones en los seres vivos son el brindar energa
inmediata y estructural. La glucosa y el glucgeno son las formas
biolgicas primarias de almacenamiento y consumo de energa, la
celulosa cumple con una funcin estructural al formar parte de la
pared de las clulas vegetales, mientras que la quitina es el principal
constituyente del exoesqueleto de los artrpodos.

Segn la complejidad de la molcula, los hidratos de carbono se


clasifican en monosacridos, disacridos, oligosacridos y
polisacridos. A este grupo se agregan otras biomolculas que
presentan en su estructura, adems de la porcin glucdica, otra
porcin qumicamente diferente: derivados de monosacridos,
heteropolisacridos, peptidoglicanos, glicoprotenas y glicolpidos.
Las principales rutas metablicas de los glcidos son:

- Gliclisis. Oxidacin de la glucosa a piruvato.


- Fermentacin. La glucosa se oxida a lactato (fermentacin
lctica), o etanol y CO2 (fermentacin alcohlica).
- Gluconeognesis. Sntesis de glucosa a partir de precursores
no glucdicos.
- Glucogenognesis. Sntesis de glucgeno.
- Ciclo de las pentosas. Sntesis de pentosas para los
nucletidos.

La reaccin o prueba de Benedict nos ayuda a identificar azucares


reductores (Los azucares reductores son aquellos que tienen el grupo
OH anomerico libre), como la lactosa, la glucosa, la maltosa, y
celobiosa.
El reactivo de Benedict consta de:
- Sulfato cprico
- Citrato de sodio
- Carbonato anhdrido de sodio
Ademas se emplea NaOH para alcalinizar el medio. El medio alcalino
facilita que el azcar este de forma lineal, puesto que el azcar en
solucin forma un anillo de piranosico o furanosico. Una vez que el
azcar esta lineal, su grupo aldehdo puede reaccionar con el ion
cprico en solucin.
Es posible observarque la fructosa es capaz de dar positivo. Esto ocurre
por las condiciones en que se realiza la prueba: en un medio alcalino
caliente esta cetohexosa se tautomeriza a glucosa.
Los disacridos como la sacarosa y la trehalosa, no dan positivo puesto
qe sus OH anomericos estn siendo utilizados en el enlace glucosdico.
En resumen, se habla de azucares reductores cuando tienen su OH
anomerico libre, y estos son los que dan positivo en la prueba de
Benedict.

5. PROCEDIMIENTO
1. Preparar soluciones de Glucosa 3%, Fructosa 5%, Sacarosa 5%,
Lactosa 3%, Maltosa 3%.
2. Colocar 2mL de las soluciones en los tubos de ensayo y
etiquetarlos correctamente.
3. Colocar 2mL de Reactivo de Benedict o 1mL de Reactivo de Fehling
A y 1ml de Reactivo de Fehling B, en cada muestra.
4. Poner los tubos en bao maria con mucho cuidado. Observar.
5. Masticar la galleta por un buen rato y vierta el contenido de la
boca en un tubo de ensayo. Aada agua tibia hasta que alcance el
mismo nivel de altura del otro tubo. Agite, y finalmente adicione
2mL de Reactivo de Benedict en el tubo y proceder a calentar a
bao maria. Observe.
6. RESULTADOS OBTENIDOS
Pudimos observar con el pasar del tiempo y al calor de bao mara los
tubos de ensayo comenzaron a cambiar de color, esto se dio debido al
componente qumico que se le puso en el tubo de ensayo.
Pudimos observar que cada tubo tena un color diferente esto es
gracias al reactivo de Fehling, que hace que podamos observar de
mejor manera si es un azcar reductor o no reductor.
En el primer tubo pusimos una solucin de lactosa, con el reactivo de
Fehling. Este tubo al ingresar al bao mara este al cabo de cinco
minutos cambio de color, se torno rojizo esto se debe a que el azcar
del tubo uno es reductor.
En el segundo tubo pusimos una solucin de sacarosa, con el reactivo
de Fehling. Este tubo ingreso al bao maria sin presentar cambios en
su coloracin, esto se debe a que el azcar del tubo no era reductor.
En el tercer tubo pusimos una solucin de maltosa, con el reactivo de
Fehling. Este tubo al ingresar al bao maria al cabo de cinco minutos
cambio de color, se torno un color rojizo y esto se debe a que es un
azcar reductor.
En el cuarto tubo pusimos orina, con el reactivo de Benedict. Este tubo
de ensayo al ingresar al bao maria se torn de un color verdoso, esto
se debe a la presencia de glucosa en la orina.
En el quinto tubo pusimos la galleta masticada con enzimas salivales,
aadimos el reactivo de Fehling y lo colocamos en el bao maria, al
cabo de 5 minutos empez a cambiar de color, debido a la presencia
de azucares reductores en la galleta
7. CONCLUSIONES
Como conclusin tenemos que todos los glcidos estn formados por
distintos tipos de azucares, los cuales son reductores o no reductores a
travs de esta prctica pudimos aprender a identificar estos azucares
en diferentes muestras biolgicas.
Gracias al uso de reactivos que nos facilitaron su color caracterstico,
gracias a esto pudimos identificar azucares reductores de los no
reductores.
8. ANEXOS (GRFICOS, FOTOGRAFAS)

9. Bibliografa
MURRAY, R. (2004). Bioqumica Ilustrada de Harper. Mxico. El manual
moderno.
LAGUNA, J. (2009). Bioquimica de laguna. El manual moderno.
SONG, J. (2011). Histologia y Biologia Celular. Manual Moderno

NOTA: Puede hacerlo en hojas de papel a cuadros o en el tipo que


ud. Elija, a mano.