Ao de la Diversificacin Productiva y del Fortalecimiento

de la Educacin

UNIVERSIDAD NACIONAL DE INGENIERA

FACULTAD DE INGENIERA AMBIENTAL

2015-I
LABORATORIO N 1:
Calibracin del micrmetro
del ocular Medicin de
microorganismos

Curso: MICROBIOLOGA SANITARIA

Docente: Jorge Tello Cebreros
Alumno: QUISPE PARDAV, GUSTA
Cdigo: 20130060H
18/09/2014

1
 1. OBJETIVOS:

1.1. OBJETIVO PRINCIPAL:

Realizar correctamente la
medicin de las dimensiones
de los microorganismos con
su respectivo error de
medicin.

1.2. OBJETIVOS SECUNDARIOS:

Realizar la calibracin correcta

del micrmetro ocular respecto
al de la platina.
Saber calcular el error de
medicin al medir las
dimensiones de los
microorganismos.

2. FUNDAMENTO TERICO:

2.1. MICROSCOPIO:
Un microscopio es un aditamento mecnico creado en 1590 por Zacharias Janssen y
consiste en el acomodo de dos lentes cncavos que permiten ver las cosas pequeas
que existen y as es utilizado en trminos mdicos en 1665 cuando William Harvey lo
usa para ver los capilares sanguneos. En forma inmediata, fue utilizado por los
cientficos para poder ver los seres microscpicos, influenciando directamente sobre la
salud y sobre la industria, llegando hasta nuestros das. La estructura y
funcionamiento del microscopio es por refraccin fsica de la luz. Los ms modernos
utilizan componentes electrnicos y piezas ms sofisticadas para obtener una
resolucin ms clara.

Hoy en da existen variantes de los microscopios,

como:

Microscopio compuesto.

Microscopio ptico.

Microscopios digitales.

Microscopios fluorescentes.

Microscopios electrnicos.

2
2.1.1. MICROSCOPIO PTICO:

Es un microscopio basado en lentes pticos. Tambin se le conoce como

microscopio de luz, (que utiliza luz o "fotones") o microscopio de campo claro. El
desarrollo de este aparato suele asociarse con los trabajos de Anton van
Leeuwenhoek. Aumenta el tamao de los objetos que son realmente muy
pequeos y que no se pueden ver a simple vista, a su vez puede ser monocular,
binocular entre otros

2.1.2. PARA QU SIRVE EL MICROSCOPIO?:

Por su estructura y funciones, el microscopio es usado en infinidad de campos,

desde la medicina, hasta la
ciberntica. El microscopio juega un
papel muy importante en la
microbiologa en el reconocimiento
de microorganismos dentro de
diferentes cuerpos u objetos.
Fue una herramienta indispensable
en la elaboracin de las vacunas, con
este dispositivo, se observaron los
diminutos seres que componan el
virus, lo que lo llev a desarrollar las
tcnicas de la vacuna, y de igual
manera lo uso para pasteurizar el
vino y la cerveza.
Posteriormente se estudiaron la
tuberculosis, y los hongos, aprendiendo los beneficios y daos que producen.

2.1.3. PARTES DEL MICROSCOPIO PTICO:

3
 a.) SISTEMA PTICO:
OCULAR: Lente situada cerca de ojo del observador, ampla la imagen
del objetivo.
OBJETIVO: Lente situada cerca de la preparacin. Ampla la imagen de
esta.
CONDESNADOR: Lente que concentra los rayos luminosos sobre la
preparacin.
DIAFRAGMA: Regula la cantidad de luz que entra en el condensador.
FOCO: Dirige los rayos luminosos hacia el condensador.

b.) SISTEMA MECNICO:

SOPORTE: Mantiene la parte ptica. Tiene dos partes: el pie o base y

el brazo.
PLATINA: Lugar donde se deposita la preparacin.
CABEZAL: Contiene los sistemas de lentes oculares. Puede ser
monocular, binocular.
REVLVER: Contiene los sistemas de lentes objetivos. Permite, al
girar, cambiar los objetivos.
TORNILLOS DE ENFOQUE: Macro mtrico que aproxima el enfoque y
micro mtrico que consigue el enfoque correcto.

2.2. MICRMETRO OCULAR:

El micrmetro ocular consiste en una placa circular de vidrio que se

coloca entre las dos lentes del ocular de Huygens, en el diafragma, que es
donde se forma la imagen producida por el objetivo y donde est el foco del
ocular. Posee una escala numerada, en este caso del 0 al 10 con 10
divisiones entra cada nmero. Si colocamos simultneamente ambos
micrmetros podremos asignar a las divisiones del micrmetro objetivo, un
nmero de divisiones del micrmetro ocular, por ejemplo, a 10 divisiones
del objetivo (10 x 0,01 mm = 0,1 mm) le corresponden 13 del micrmetro
ocular. Conocida esta equivalencia, sustituimos el micrmetro objetivo por
cualquier preparacin que queramos medir, sin alterar las condiciones,
bastar contar las divisiones que ocupa del micrmetro ocular y efectuar un

4
 simple clculo ya que
sabemos que 13
corresponden a 0,1
mm.

2.3. MICRMETRO DE LA PLATINA:

Un micrmetro es simplemente un
portaobjetos de microscopio con una
finamente dividido escala marcada
en la superficie. En este laboratorio, nuestra
platina tena 10 divisiones donde cada una
meda 0.1mm.

3. EQUIPO DE TRABAJO:

MICROSCOPIO N 13

LMPAR

5
 MICRMETRO DE LA
MUESTRA DE PLATINA

MICRMETRO
DEL OCULAR

4. PROCEDIMIENTO:

Muestras: Muestra de algas (estanque de arquitectura).

MICRMETRO DE PLATINA: En el microscopio se ven las rayas de color blanco,

de 0 a 10 es una divisin compuesta por 10 subdivisiones, cada uno de 0.1mm,
entonces el micrmetro de la platina mide 1mm.

MICRMETRO
DEL OCULAR: En el microscopio se ven las rayas negras, tiene 50 divisiones

6
 Teniendo esas consideraciones pasamos a los pasos del procedimiento:
1. Colocar el micrmetro de la platina en la platina.
2. Colocar el micrmetro del ocular en el ocular.
3. Superponer el micrmetro del ocular sobre el micrmetro de platina para
determinar el N de divisiones equivalentes de ambos micrmetros. (Los
clculos se mostraran ms adelante).
Calibracin del micrmetro ocular:
a) Determinar cuntas divisiones del micrmetro ocular coinciden con las
divisiones del micrmetro de platina. Con objetivo de 10x y 43x.

x ser divisin de platina e y ser divisin del ocular.

Medicin de los microorganismos:

a) Con el micrmetro del ocular, se realiza la medida de microorganismos,
calculando el ancho y el largo tanto con el objetivo de 10x y 43x.

4. Graficar los datos en papel milimetrado.

5. Mostrar la tabla de resultados.

5. CLCULO, TABLA Y GRFICA DE RESULTADOS:

Calibracin del micrmetro ocular:

1. OBJETIVO 10x:

1 divisinde platina< 6.5 divisiones delocular

Dato:
Divisin de platina :0.1 mm=x

Divisin del ocular : y

01
x=6.5 y y= =0.01538 mm 15.38 ( factor de conversin ) .
6.5

2. OBJETIVO 43x:

1 divisinde platina< 27.5 divisiones delocular

Dato:
Divisin de platina :0.1 mm=x

7
Cuerpo del microorganismo
Divisin del ocular : y . x=27.5 y

0.1
y= =0.00363 mm 3.63 ( factor de conversin ) .
27.5
ANCHO

Medicin del microorganismo:

LARGO

1. OBJETIVO 10x:

Largo=4 divisiones del ocular=4 15.38 =61.52

Ancho=1 divisiones del ocular=4 15.38 =15.3 8

2. OBJETIVO 43x:

Largo=17 divisiones del ocular=17 3.63 =61.71

Ancho=4 divisiones del ocular=4 3.63 =14.52

TABLA DE RESULTADOS:

Medicin
MICROSCO Calibracin Error
PIO Obj. 10x Obj. 43x
Obj. 10x Obj. 43x Ancho Largo Ancho Largo
Medicin %
1x < > 1x < > Ancho =
6.5y 27.5Y y 4y 4y 17y 5.886%
13
Y= y= 61.52u 14.525u 61.71u Largo =
15.38um 3.63um 15.38um m m m 0.308%
Ancho =
0.6%
6 16.7 um 3.6um 15.03um 50.4um 15.12um 50.4um
Largo =
0.6%

8
 Ancho =
7.74%
14 14.3um 3.1um 14.3um 42.9um 15.5um 46.5um
Largo =
7.70%
Ancho =
6,52%
2 15.28um 3.57um 18.45um 84.5um 19.6um 85.6um
Largo =
1,3%
33.334u 66.668 67.83u Ancho =
12 16.667um 3.57um 14.28um
m um m 57.16%
Largo =
1.743%
Ancho =
1.43%
15 14.29um 3.45um 14um 42um 13.8um 41.4um
Largo =
1.43%

9
6. CONCLUSIONES :

El error del microscopio nmero 13 (el que yo uso) en el largo es de

0.308%, se puede ver que es menos del 2%, por lo tanto est dentro de los
valores admisibles.
En el caso del ancho el error es de 5.886%, lo que se concluye que esta
fuera del rango admisible y se debe volver a hacer el laboratorio.
En el grfica del papel milimetrado podemos notar que la pendiente de la
recta de 10x es menos con respecto a la de 43x, concluyendo que a mayor
sea el objetivo, menor ser la medida de una divisin del micrmetro
ocular.
Se concluye que sabiendo el tamao de los microorganismos podemos
saber qu tipo de filtro usar para el tratamiento de aguas.
Se concluye que los microscopios 6 y 15 se encuentran dentro del rango
admisible tanto en la medida del ancho y del largo.
El microscopio nmero 12 tiene que volver a hacer el laboratorio ya que le
sali un error de 57.16%.

10
 7. RECOMENDACIONES:

Tener sumo cuidado con micrmetro del ocular y de la platina, ya que si

sufren una cada se pueden quebrar o hasta romper.
Verificar la calidad de cada microscopio y de sus objetivos, para no tener
problemas de visin en el futuro.
Si ya encontr el alga con el objetivo de 10x, para pasar al objetivo de 43x
simplemente ya no mueva el portaobjetos y cambie de objetivo ligeramente
levante y baje el lente hasta encontrar el alga.
Diferenciar claramente el micrmetro del ocular y de la platina para su
correcta calibracin.
Tener las precauciones al trabajar con lmparas ya que se calientan muy
rpido y algunas estn defectuosas.
Si deseamos calcular el error de calibracin necesitamos un microscopio
patrn para poder realizar esta medicin.

8. CUESTIONARIO:

1. Sealar el tamao relativo de los microorganismos: Bacterias,

hongos, protozoarios, algas y virus.
1
Bacterias: Las bacterias que se estudian ms a menudo en el laboratorio
miden aproximadamente 0.5 a 1.0 x 2.0 a 5.0 um (micrmetros).
2
Hongos: Los cuerpos usualmente alargados o filamentosos miden de 5 a 10
um de grosor y por lo general ramificados.
3
Protozoarios: De dimetro tienen aproximadamente de 1 a 4 um (dimetro
mayor).

1 Pg. 70 Pelczar, J, Reid R, Chan Ch. Microbiologa. 4 ed.Mxico: Mc Graw Hill; 1982

2 Pg. 248 Pelczar, J, Reid R, Chan Ch. Microbiologa. 4 ed.Mxico: Mc Graw Hill; 1982

3 Pg. 313 Pelczar, J, Reid R, Chan Ch. Microbiologa. 4 ed.Mxico: Mc Graw Hill; 1982

11
 Virus: De tamao relativo de 20-300 nm.

2. Describa las principales caractersticas de bacterias, hongos,

protozoarios, algas, virus, rotferos y microcrustceos.

BACTERIAS:

El primer nombre de una bacteria corresponde al gnero y el segundo la

especie.
Las bacterias en un principio se clasificaron por su forma, la tincin Gram y
por sus necesidades de oxgeno, lo que se complementaba con los
caracteres bioqumicos y serolgicos. En la actualidad se utiliza la gentica
para establecer relaciones fundamentales.

Las bacterias son procariotas, con ADN circular libre, ribosomas, sin
mitocondrias y una pared celular de peptidoglucano.
PROTOZOARIOS:

Los Protozoos incluyen parsitos intestinales y genitales, por ejemplo,

Entamoeba histoytica y Tricomonas vaginalis y parsitos de la sangre y los
tejidos por ejemplo Toxoplasma gandii y parsitos del paludismo.

Los protozoos son unicelulares y tienen estructuras celulares eucariotas.

Todos tienen una etapa de trfozoito frgil y la mayora tienen una forma
qustica resistente.

Todos tienen signos vitales fuera del husped humano y la mayora puede
multiplicarse en el ser humano. La infeccin es por ingestin, por
inhalacin, por picaduras de insectos o por el contacto sexual.

Sus ciclos de vida varan desde la transmisin directa del trofozoito

durante el coito (Trichomonas) o la eliminacin de quistes en las heces y la
ingestin Los protozoos incluyen parsitos intestinales y genitales, por
ejemplo, Entamoeba histoytica y Tricomonas vaginalis y parsitos de la
sangre y los tejidos por ejemplo Toxoplasma gandii y parsitos del
paludismo.

ROTFEROS:

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 Filo de invertebrados acuticos, pluricelulares, de tamao pequeo,
generalmente microscpicos, provistos en la cabeza de una corona de cilios
que parece una rueda girando al moverse los cilios.

El nombre rotferos, que significa portadores de ruedas, proviene

precisamente de ese aparato rotador.

Son de las primeras formas de vida microscpicas que se estudiaron, y se les

conoca como animlculos rueda. Oscilan entre 40 m y 3mm y comprenden
unas 1.500 especies.

Los rotferos son muy numerosos en todo el mundo y se encuentran

principalmente en ecosistemas dulceacucolas, como charcas o lagos de agua
dulce, aunque tambin hay algunas especies marinas o terrestres.

Se alimentan de otros microorganismos y unas pocas especies son parsitas.

Los rotferos presentan sexos separados, aunque los machos son escasos y
salvo en condiciones adversas se desarrollan por partenognesis.

Clasificacin cientfica: los rotferos constituyen el filo Rotferos (Rotifera),

formado por 3 clases: Seisonceos, Bdeloideos y Monogonontos.
VIRUS:
Los virus son entidades no celulares de muy pequeo tamao
(normalmente inferior al del ms pequeo procariota), por lo que debe de
recurrirse al microscopio electrnico para su visualizacin.

Son agentes infectivos de naturaleza obligadamente parasitaria intracelular,

que necesitan su incorporacin al protoplasma vivo para que su material
gentico sea replicado por medio de su asociacin ms o menos completa
con las actividades celulares normales, y que pueden transmitirse de una
clula a otra.

Cada tipo de virus consta de una sola clase de cido nucleico (ADN o
ARN, nunca ambos), con capacidad para codificar varias protenas,
algunas de las cuales pueden tener funciones enzimticas.

Otras son estructurales, disponindose stas en cada partcula virsica

(virin) alrededor del material gentico formando una estructura regular
(cpsida); en algunos virus existe, adems, una envuelta externa de tipo
membranoso, derivada en parte de la clula en la que se desarroll el virin
y en parte de origen virsico (protenas).

HONGOS:

La estructura es eucariota y, por ende, a diferencia de las bacterias

procariotas, los hongos tienen un ncleo con una membrana nuclear, y el

13
 citoplasma contiene mitocondrias, aparato de Golgi, lisosomas y retculo
endoplasmtico.

La morfologa consiste en pequeas levaduras redondas o mohos

filamentosos con un micelo de hifas. Algunos hongos son dimorfos con una
forma de levadura en los tejidos y una forma miceliar en el medio ambiente.

Todos los hongos se reproducen en forma asexuada con clulas haploides

que se dividen mediante mitosis para formar esporas.

Los hongos imperfectos, en los que slo se conoce la replicacin asexual,

incluyen algunos microorganismos patgenos humanos.

La reproduccin sexual mediante meiosis constituye la base de la

clasificacin y la denominacin definitiva.

Los microorganismos patgeno primarios son hongos que pueden infectar

a huspedes anormales.

Los microorganismos patgenos oportunistas slo pueden infectar a

huspedes anormales con las defensas alteradas.

Los hongos producen enfermedad mediante micotoxinas, hipersensibilidad

o infeccin invasiva con lesin hstica.

3. Por qu es importante conocer el tamao de los microorganismos?

Explique.

Conociendo el tamao de los microorganismos podemos elaborar

papeles o membranas de filtro que retengan bacterias, algas, por
ejemplo para el tratamiento de determinada aguas.
4
Se sabe que la filtracin es la etapa de la purificacin que tiene
por objeto eliminar del agua las materias en suspensin,
microorganismos, etc. Es ah en donde el tamao de los
microorganismos es indispensable para saber qu tipo de filtracin
hacer, el material del filtro entre otros.

4 Ingeniera de acueductos y tratamiento de aguas. Pg 345 (Filtracin).-

Hernando Snchez Montenegro

14
 El tamao microscpico de los microorganismos est determinado
genticamente, y de las condiciones ambientales. Por lo general, a
ms tamao hay una mayor complejidad en su estructura, y por lo
tanto mayor funcin. Adems determina algunas propiedades
biolgicas, de su ecologa y su evolucin. Entre ellos tenemos a las
bacterias, virus y protozoarios.

En la lucha contra la contaminacin tambin se ha encontrado

aplicacin a distintos tipos de microorganismos capaces de
metabolizar y degradar determinadas sustancias contaminantes,
gracias al tamao podemos clasificarlos.

El tamao de los microorganismos est muy relacionado con la

relacin superficie-volumen. O sea, cuanto menos sea el radio
mayor ser esta relacin. Esto significa que el pequeo tamao de
las bacterias condiciona un mayor contacto directo con el medio
ambiente inmediato que los rodea, lo que se traduce en que reciben
las influencias ambientales de forma directa.

Podemos hacer una clasificacin de los microorganismos segn su

tamao, viendo de que formas pueden contribuirnos con sus
propiedades.

4. Describa las aplicaciones prcticas referentes a la informacin sobre

la medicin de microorganismos.
a) Proceso de filtracin de tratamiento de agua.
b) Proceso de filtracin mediante membrana.
c) Proceso biolgico de tratamiento de aguas residuales: Filtro
percolador, Wetland.
d) Mtodo de filtro de membrana (determinacin de coliformes).

5
a) La filtracin se usa para preparar el agua residual para procesos de
tratamientos posteriores o para su utilizacin directa como agua con un grado
de clarificacin muy elevado. Puede aplicarse directamente al efluente de
planta de un tratamiento biolgico, o a continuacin del proceso coagulacin
sedimentacin, segn el grado de clarificacin requerido.

Procesos de filtracin en las plantas de tratamiento de agua En el proceso de

filtracin el agua residual es roseada sobre la piedra y se deja que se filtre a
travs del lecho, este filtro consiste en un lecho formado por un medio
sumamente permeable al que los microorganismos se adhieren y a travs del
cual se filtra el agua residual. El tamao de las piedras de que consta el medio

5 Tratamiento y depuracin de las aguas residuales METCLAF & EDDY pg. 678
(FILTRACIN)

15
 filtrante est entre 2.5 10cm de dimetro, la profundidad de estas vara de
acuerdo al diseo particular, generalmente de 0.9 2.4m con un promedio de
profundidad de 1.8m.
6
b) El concepto del filtro percolador naci del uso de los filtros de contacto, que
eran estanques impermeables rellenos con piedra machacada. En su
funcionamiento, el lecho de contacto se llenaba con el agua residual desde la
parte superior y se dejaba que se pusiese en contacto con el medio durante un
corto perodo de tiempo. El lecho se vaciaba a continuacin y se le permita
que reposase antes de que se repitiese el ciclo. Un ciclo tpico exiga 12 horas
de las cuales haba 6 horas de reposo. Las limitaciones del filtro de contacto
incluyen una posibilidad relativamente alta de obturaciones, el prolongado
perodo de tiempo de reposos necesario, y la carga relativamente baja que
poda utilizarse" En el filtro percolador el agua residual es roseada sobre la
piedra y se deja que se filtre a travs del lecho, este filtro consiste en un lecho
formado por un medio sumamente permeable al que los microorganismos se
adhieren y a travs del cual se filtra el agua residual. El tamao de las piedras
de que consta el medio filtrante est entre 2.5 10cm de dimetro, la
profundidad de estas vara de acuerdo al diseo particular, generalmente de
0.9 2.4m con un promedio de profundidad de 1.8m. Ciertos filtros
percoladores usan medios filtrantes plsticos con profundidades de 9 12m. -
Wetland La importancia de los wetland ha variado con el tiempo. Los wetland
son zonas de transicin entre el medio ambiente terrestre y acutico y sirven
como enlace dinmico entre los dos. El agua que se mueve arriba y abajo del
gradiente de humedad, asimila una variedad de constituyentes qumicos y
fsicos en solucin, ya sea como detritus o sedimentos, estos a su vez se
transforman y transportan a los alrededores del paisaje. Los wetland proveen
sumideros efectivos de nutrientes y sitios amortiguadores para contaminantes
orgnicos e inorgnicos. Esta capacidad es el mecanismo detrs de los
wetland artificiales, tambin denominados wetland, para simular un humedal
natural con el propsito de tratar las aguas residuales de empresas y
municipios. La solucin biotecnolgica consiste en la instalacin de wetland
artificiales que actan como filtros naturales. Ubicados entre la planta y los
recursos acuticos (ros, lagos, lagunas), estos sistemas, adems de no
necesitar mantenimiento ni consumir energa elctrica, cuestan menos que la
cuarta parte de un sistema de tratamiento tradicional.

c) Mtodo de filtro de membrana (determinacin de coliformes) Los filtros de

membrana con profundidad ordinaria contienen poros tortuosos que capturan
microorganismos atrapndolas de forma aleatoria. El resultado es que se
capturan fracciones de microorganismos en el interior (intersticios) de la
membrana y por tanto, no se puede utilizar para su observacin en superficie
por microscopa de luz o microscopa electrnica de barrido. En contraste, los
filtros de policarbonato contienen poros cilndricos uniformes,

6 Ingeniera de acueductos y tratamiento de aguas. Pg 345 (Filtracin por

percolador).- Hernando Snchez Montenegro

16
 preferencialmente embebidos en la membrano, permitiendo as una
distribucin uniforme de la muestra en un plano a travs de la superficie
completa de la membrana. Por tanto, todas las muestras son capturadas en
una superficie plana, uniforme y sin defectos. La precisin en el tamao de los
poros en una estrecha distribucin asegura una separacin adecuada, o
fraccin de las muestras por su tamao. Al estar libres de contaminantes, estas
pantallas micro porosas son biolgicamente inertes, ofreciendo excelente
resistencia qumica y estabilidad trmica. Proveen una resistencia superior y
adsorcin del sustrato prcticamente nula. Estos factores combinados con las
capacidades nicas de las membranas de policarbonato, las hacen ideales
para una serie de aplicaciones en LM y SEM, tales como: Anlisis de partculas
en el aire (incluyendo asbestos), quimiotaxis, citologa, histologa,
paleontologa, parenterales y anlisis de aguas para asbestos y otros agentes
inorgnicos en
suspensin.

9. BIBLIOGRAFA:

Pelczar, J, Reid R, Chan Ch. Microbiologa. 4 ed.Mxico: Mc Graw Hill; 1982

Temas utilizados (Cuestionario Bacterias, Hongos, Protozoarios).

Ingeniera de acueductos y tratamiento de aguas - Hernando Snchez

Montenegro Temas utilizados (Cuestionario Filtracin y filtracin por
percolador).

Tratamiento y depuracin de las aguas residuales METCLAF & EDDY Temas

utilizados (FILTRACIN)

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