REVISION Y ACTUALIZACION DEL PROGRAMA DE LIMPIEZA Y DESINFECCION DE

ANGLOPHARMA S.A.

DIANA C. PEREZ H.

ADRIANA M. VERA T.

TRABAJO DE GRADO

Presentado como requisito parcial

Para optar al ttulo de

MICROBIOLOGA INDUSTRIAL

PONTIFICIA UNIVERSIDAD JAVERIANA

FACULTAD DE CIENCIAS

MICROBIOLOGIA INDUSTRIAL

BOGOT D.C.

DICIEMBRE DE 2008

16
 NOTA DE ADVERTENCIA

Articulo 23 de la resolucin N 13 de Julio de 1946

La universidad no se hace responsable por los conceptos emitidos por sus alumnos
en sus trabajos de tesis. Solo velar porque no se publique nada contrario al dogma y
a la moral catlica y por que las tesis no contengan ataques personales contra
persona alguna, antes bien se vea en ellas el anhelo de buscar la verdad y la justicia.

17
REVISION Y ACTUALIZACION DEL PROGRAMA DE LIMPIEZA Y DESINFECCION DE
ANGLOPHARMA S.A.

DIANA C. PEREZ H.

ADRIANA M. VERA T.

Trabajo de grado

Presentado como requisito parcial

Para optar el ttulo de

MICROBIOLOGA INDUSTRIAL

PONTIFICIA UNIVERSIDAD JAVERIANA

FACULTAD DE CIENCIAS

MICROBIOLOGIA INDUSTRIAL

BOGOT D.C.

DICIEMBRE DE 2008

18
REVISION Y ACTUALIZACION DEL PROGRAMA DE LIMPIEZA Y DESINFECCION DE
ANGLOPHARMA S.A.

DIANA C. PEREZ H.

ADRIANA M. VERA T.

--------------------------------------------------

JAIME HERNAN SILVA MONTAA

Director

---------------------------------------------------

LORENA VALENCIA ZULETA

Asesora

PONTIFICIA UNIVERSIDAD JAVERIANA

FACULTAD DE CIENCIAS

MICROBIOLOGIA INDUSTRIAL

BOGOT D.C.

19
 DICIEMBRE DE 2008

REVISION Y ACTUALIZACION DEL PROGRAMA DE LIMPIEZA Y DESINFECCION DE

ANGLOPHARMA S.A.

DIANA C. PEREZ H.

ADRIANA M. VERA T.

--------------------------------------------- --------------------------------------------

Dr. Guillermo Romero Molina Dr. Zulma Valbuena Jimnez

JURADO JURADO

PONTIFICIA UNIVERSIDAD JAVERIANA

FACULTAD DE CIENCIAS

MICROBIOLOGIA INDUSTRIAL

BOGOT D.C.

DICIEMBRE DE 2008

20
REVISION Y ACTUALIZACION DEL PROGRAMA DE LIMPIEZA Y DESINFECCION DE
ANGLOPHARMA S.A.

DIANA C. PEREZ H.

ADRIANA M. VERA T.

APROBADO

--------------------------------------------- --------------------------------------------

Dra. Janeth Arias Palacios Dra. Ingrid Schuler

Directora de Carrera Decano Acadmico

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 Dedicatoria

A mis padres por su esfuerzo y confianza que me impulsaron y motivaron a seguir adelante,
avanzar y alcanzar una ms de mis metas.

A mis hermanos por su compaa, por escucharme y sobretodo por creer y confiar en m.

A Lorena y Jaime quienes dedicaron tiempo, nos aguantaron tantas molestias y motivaron a
continuar con este proyecto que hoy es un hecho.

Adriana Vera Tovar.

A ti mama que eres mi motor y mi aliciente para ser cada da mucho mejor y nunca dejarme
vencer siempre con la firme conviccin de ser la mejor y ser tu orgullo.

A ti que eres como mi padre que siempre ests ah para darme apoyo y nunca dejarme caer, porque
siempre me ayudas a seguir adelante y nunca jams vencerme, siempre has sido mi ejemplo a
seguir.

A ti mi piloto que eres el soporte de mis alas para siempre volar ms lejos y jams dejarme caer,
porque nunca me dejaste sola y siempre estuviste conmigo en todo momento dndome apoyo y
ayudndome para no rendirme y ser cada da mejor Te amo amorcito.

A todos mi amigos a Sonia y a Jaimito porque me ayudaron a que fuera posible esta tesis dndome
consejos y siempre confiaron en m

A la profe Lorena porque siempre nos ayudo y nos aguanto molestndola tanto, por sus consejos y
su total apoyo.

Gracias a todos por siempre estar ah esto es con mucho esfuerzo para los que siempre estn
conmigo porque sola jams podra

Diana Carolina Prez Herrera.

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26
27
 RESUMEN

En el campo farmacutico, la desinfeccin ha hecho parte fundamental de las actividades

para controlar el nivel de microorganismos contaminantes que puedan llegar a comprometer
la calidad de un producto en proceso o terminado. El objetivo del estudio fue evaluar y
actualizar el programa de limpieza y desinfeccin de ANGLOPHARMA S. A. optimizando el
control de los microorganismos contaminantes de las reas de manufactura de productos no
estriles, para esto, se llev a cabo una revisin preliminar de las reas y equipos apoyados
en una lista de chequeo. P o s teriormente, se realiz un anlisis retrospectivo de los
monitoreos microbiolgicos realizados durante el ao 2008, luego, se efectu la evaluacin
de los 4 desinfectantes de rotacin en el rea de manufactura, evalundolos frente a tres
diferentes microorganismos aislados en el rea (Neurospora sp, Rhodotorula sp y
Staphylococcus epidermidis).

Se evalu la actividad desinfectante y efectividad en procesos de sanitizacin de Tego 51
(0.1, 0.5 y 1%), Cloruro de Benzalconio, Hipoclorito de sodio (0.5,1 y 1.5%) y Alcohol al 70%,
frente a las 3 cepas aisladas. Se determin que los productos valorados presentan actividad
contra las cepas evaluadas; el desinfectante con mejores resultados fue el Cloruro de
Benzalconio con una Concentracin Mnima Inhibitoria (CMI) de 31.25 mg/L para la levadura
y 62.50 mg/L para el hongo y la bacteria, demostrando que requiere de muy bajas
concentraciones para ser activo. En los otros productos evaluados la CMI obtenida fue

superior: Tego 51 , la CMI de 125 mg/L para la levadura y el hongo y 250 mg/L para la
bacteria; El Hipoclorito de sodio obtuvo una CMI de 750 mg/L para las 3 cepas en estudio y
en los resultados conseguidos con el alcohol al 70% la CMI alcanzada fue de 7000 mg/L,
una concentracin muy superior a la que se obtuvo con los otros desinfectantes evaluados,
probando que se requiere utilizar prcticamente puro para ser efectivo.

Se concluy que el desinfectante ms efectivo frente a las 3 cepas evaluadas es el Cloruro

de Benzalconio , siendo el ms destacado de los desinfectantes a emplear y a contribuir en
las exigencias en la instalacin farmacutica.

28
 ABSTRACT

In the pharmaceutical field, disinfection is part of the activities to control the level of micro-
pollutants that jeopardize a process or finished product. The aim of this study is to assess
and update the program of cleaning and disinfecting of ANGLOPHARMA optimizing the
control of the areas of micro-polluting manufacturing. Was carried out a preliminary review of
the areas and equipment based on a checklist.

We performed a retrospective analysis of microbiological monitoring conducted during 2008,

then the evaluation of the 4 disinfectants rotation in the area of manufacturing, compared to
assessing three different isolates of the area (Neurospora sp, Staphylococcus sp and
Rhodotorula epidermidis).

We evaluated the activity and effectiveness in disinfectant processes sanitization of Tego 51

(0.1, 0.5 and 1%), benzalkonium chloride, sodium hypochlorite (0.5,1 and 1.5%) and Alcohol
70%, compared with 3 strains isolated. It was observed that the products tested have activity
against strains tested, the best disinfectant was benzalkonium chloride with a minimum
inhibitory concentration (MIC) 31.25 mg / L for yeast and 62.50 mg / L for the fungus and
bacteria, showing that requires very low concentrations to be active in other tested products
from the CMI is higher: In Tego 51 CMI 125 mg / L for yeast and fungus and 250 mg / L for
the bacteria. Sodium hypochlorite was a CMI 750 mg / L for the 3 strains under study. In the
results obtained with alcohol 70% from the WCC was 7000 mg / L, a concentration far higher
than that obtained with the other disinfectants evaluated showing is required to use almost
pure.

We concluded that the most effective disinfectant against the 3 strains tested is the
benzalkonium chloride being the best use of disinfectants which helps to get products of
excellent quality to generate credibility with the consumer.

29
 1. INTRODUCCIN

Es de gran importancia la fabricacin de medicamentos que generen una respuesta eficaz

frente a la dolencia del paciente y a la vez garanticen un alto grado de confiabilidad, que es
medida por la calidad ofrecida. Para evitar fallas en la calidad es necesario tener en cuenta
el control de la presencia de los microorganismos que pueden generar contaminacin y
deterioro o alteracin de los productos.

La industria farmacutica es un sector vital en el ciclo de la asistencia a la salud en donde

uno de los factores ms relevantes a controlar es la presencia de agentes contaminantes
durante cada una de las etapas de manufactura de los medicamentos. Una de las principales
vas por las que estos se pueden alterar es por el contacto con las superficies,
manipuladores y equipos de procesamiento contaminados, por lo tanto es necesario que se
realice una limpieza y desinfeccin suficiente y regular con base en tcnicas estandarizadas
y validadas.

Para controlar la proliferacin de los microorganismos es necesario que las empresas

cuenten con un programa de l i m p i e z a y desinfeccin actualizado que garantice la
eliminacin de cualquier forma microbiolgica viviente que pueda interferir con el producto,
manteniendo as las condiciones higinico-sanitarias en las reas de manufactura.

Los procesos d e sanitizacin en general, se ven afectados por aspectos como: Tipo de
microorganismos presentes, ambiente, temperatura, pH del producto sanitizante, edad de la
clula, tiempo de exposicin; con base en la interaccin de estos factores se toma la
decisin de la clase de agente a utilizar. Una gran variedad de agentes desinfectantes se
usan para eliminar los microorganismos por lo que se hace importante realizar una
evaluacin terico-prctica de los agentes desinfectantes con el fin de obtener el criterio para
determinar el tipo de desinfectante que se va a emplear.

Usualmente, un programa de limpieza y desinfeccin efectivo es parte del proceso de

sanitizacin e n las industrias farmacuticas, para prevenir la acumulacin de carga
microbiana y biopelculas, as como de partculas viables en las superficies de los equipos de
procesamiento.

16
La importancia del presente trabajo radica en revisar, actualizar y establecer un adecuado
programa de limpieza y desinfeccin que corrija y prevenga alteraciones a futuro causadas
por microorganismos contaminantes, garantizando el cumplimiento de las normas nacionales
e internacionales dirigidas a este tipo de industrias, la inocuidad de sus productos, y la mejor
relacin costo-beneficio al interior de la empresa.

17
 2. MARCO TERICO

2.1. ANTECEDENTES HISTRICOS

La utilizacin de los desinfectantes y antispticos proviene de la antigedad; los sacerdotes

Egipcios lo utilizaban para embalsamar con el fin de evitar la putrefaccin. El papel del Cloro
fue reconocido por el mdico obstetra Semmelweis quien observ que la mortalidad debida a
la fiebre puerperal era causada por la transferencia de material infectante de un paciente a
otro por parte de mdicos y estudiantes; implantaron entonces el mtodo de lavarse las
manos primero con jabn y luego con una solucin clorada antes y despus de examinar al
paciente (Semmelweis, 1847).

Lister, quien se interes por evitar las infecciones de las heridas operatorias comenz su
trabajo mientras estaba en Glasgow, durante los aos 1865 a 1869; sus primeros escritos al
respecto se publicaron en 1867. Fueron varios sus aportes, como cirujano su anhelo fue
prevenir infecciones graves y a menudo fatales, que frecuentemente se producan despus
de las operaciones y heridas. Observ la similitud entre las heridas infectadas y los
procesos de putrefaccin y fermentacin que Pasteur haba atribuido a los
microorganismos, y concluy que los microorganismos deban ser los causantes de las
infecciones de las heridas, estaba convencido que las heridas se podran liberar de las
bacterias si se las protegan con la aplicacin de unas sustancias que mataran los
microorganismos, as sent las bases de su mtodo antisptico.

Posteriormente, Lister emple sustancias qumicas bactericidas como el fenol y bicloruro de

mercurio para el lavado de las heridas, manos y material quirrgico e incluso para la
pulverizacin del aire; con dicha sustancia logro un gran descenso de las cifras de
mortalidad y sent las bases de desinfeccin y asepsia. Comenz utilizando el cido fnico,
que era una sustancia germicida conocida como profilctico el que aplicaba en las heridas
de fracturas abiertas en donde tuvo un gran xito ya que las heridas sanaron rpidamente
sin formar el pus que era normal en ellas. Ms adelante Lister aplic este mtodo al
tratamiento de abscesos y otros tipos de heridas. Finalmente propuso un mtodo
sistemtico para el uso de cido fnico en las operaciones, conocido como mtodo
antisptico de Lister (Sikes, 1965).

Por otra parte, Pasteur obtuvo como resultado directo la validez del uso del cido carblico
para poner sobre heridas, para desinfectar instrumentos y para esparcir sobre la atmsfera

18
antes de una ciruga. Estas sustancias Lister la utiliz en soluciones de 1:20 para
instrumentos y 1:40 para desinfeccin de piel. (Sikes, 1965).

2.2 CONCEPTOS IMPORTANTES EN UN PROGRAMA DE LIMPIEZA Y DESINFECCIN

Para un buen proceso de desinfeccin es necesario tener claridad acerca de diferentes

conceptos que son utilizados en la implementacin de un proceso de sanitizacin.

2.2.1 SANITIZACIN

Se refiere al proceso empleado para reducir el contenido de microorganismos viables

remanentes en una superficie limpia. En la industria se emplea este trmino cuando se trata
con agentes qumicos o fsicos las reas de produccin y los equipos empleados en la
elaboracin de productos con el propsito de reducir el contenido microbiano hasta niveles
insignificantes (Rossi, 1998)

Las aplicaciones de las sustancias desinfectantes generalmente tienen como base amonio
cuaternario, soluciones yodadas o cloradas con un bajo nivel de toxicidad. Estos productos
controlan los niveles de todo tipo de bacterias, hongos, levaduras, protozoos y algas al ser
aplicados de forma adecuada en superficies de pisos, muros, baos, entre otros (Barsotii,
2001).

2.2.2 LIMPIEZA

Se entiende por limpieza la cualidad que se le atribuye a una superficie a la cual se le han
retirado todas las partes orgnicas e inorgnicas, incluyendo microorganismos, biofilms, etc.
Las suciedades son separadas de su sustrato y puestas en soluciones o dispersin. El
propsito de la limpieza es eliminar todo tipo de residuos presentes en las diferentes reas
de procesos de produccin, con el fin de restablecer el normal funcionamiento de stas,
prolongar la vida til de instalaciones y por ende asegurar la calidad ptima del producto a
obtener (Leveau, 2002).

19
2.2.3 HIGIENE

Conjunto de hbitos que garantizan una adecuada conducta sanitaria y que van acorde con
la limpieza y la desinfeccin. La higiene trata de la conservacin y del mejoramiento de la
salud del individuo y de la sociedad; su tarea fundamental es el estudio de la influencia en la
salud (Wildbredt, 2000).

2.2.4. DESINFECCIN

Es la destruccin, inactivacin o remocin de aquellos microorganismos que pueden causar

infeccin u ocasionar otros efectos indeseables en superficies u objetos inanimados; la
desinfeccin no implica necesariamente esterilizacin.

Dentro de los objetivos de la desinfeccin estn el proteger la salud del consumidor y

asegurar la calidad del producto frente a la influencia microbiana (Wildbrelt, 2000).

Adicionalmente, el proceso de desinfeccin de superficies consiste en la aplicacin manual

de un desinfectante que moja e impregna las superficies tratadas, dependiendo del producto
que se utilice (Gonzles, 2004).

2.2.5 DESINFECTANTE

Agente usualmente qumico, que mata las formas en crecimiento de los microorganismos,
pero no necesariamente las esporas. El trmino se refiere a sustancias utilizadas sobre
objetos inanimados que son capaces de matar microorganismos patgenos (infecciosos) de
un material y pueden en muchos casos presentar efectos txicos sobre tejidos vivos.
Pueden ejercer dos tipos de efectos diferentes sobre las bacterias:

Bacteriostticos: Compuestos que evitan la reproduccin y crecimiento de las bacterias,

pero no las matan.

Bactericida: Compuestos que matan a las bacterias, aunque generalmente no matan a las
esporas (Anzola, 2003).

20
2.2.6 ANTISPTICO

Sustancia que impide el crecimiento o la accin de los microorganismos, ya sea

destruyndolos o inhibiendo su crecimiento y actividad en tejidos vivos (Ketchum, 1988).

2.2.7 SANITIZANTE

Agente que reduce la poblacin microbiana a niveles seguros segn los requerimientos de
salud pblica; se aplica en objetos inanimados de uso diario por ejemplo utensilios y equipos
para manipular alimentos, vasos, platos y otros objetos de uso similar (Leveau, 2002).

2.2.8 GERMICIDA

Agente que mata los microorganismos pero no necesariamente las esporas (Leveau, 2002).

2.2.9 ESTERILIZACIN MICROBIANA

Es la destruccin o eliminacin de todas las formas de vida de los microorganismos. Se

puede llevar a cabo por procesos qumicos o fsicos. Dado que las endosporas que hacen
parte de las estructuras de l os microorganismos ms resistentes a los agentes fsicos y
quimmicos de esterilizacin, se usan como indicadores biolgicos del proceso. La
esterilizacin por calor ha sido utilizada desde pocas antiguas; tanto el calor seco como el
hmedo esterilizan, pero el seco lo hace a menor velocidad y requiere temperaturas mayores
y un tiempo ms prolongado de exposicin. La resistencia al calor, varia entre diferentes
microorganismos y depende del tipo de calor (Malagon, 1999).

2.2.10 ANTISPSIA

Implica la eliminacin de microorganismos o su inhibicin en los tejidos o fluidos corporales.

No necesariamente destruye todos los microorganismos, pero los reduce a niveles de no
infeccin (Malagon, 1999).

21
2.3 PROCESOS DE LIMPIEZA Y DESINFECCIN

Aunque tradicionalmente han sido consideradas como conceptos sinnimos, la realidad es

bien distinta, ya que se trata de operaciones complementarias pero apreciablemente
diferentes. La limpieza es el proceso mediante el cual se logra la eliminacin de la suciedad
en las superficies aplicadas, que significa a la vez la destruccin de la fraccin principal de
grmenes presentes en estas superficies.

Por otro lado, la desinfeccin es la eliminacin de microorganismos infecciosos remanentes

en objetos inanimados o la reduccin de los mismos a niveles que no constituyan un peligro
para la salud pblica (Fleitas, 1994). En el proceso de desinfeccin se produce una reaccin
entre el agente infeccioso y el producto desinfectante mediante la cual se destruye o reduce
el agente infeccioso y numerosos saprfitos, pudiendo ser empleados para alcanzar tal fin
medios fsicos como el calor (ebullicin y pasteurizacin), radiaciones UV, ultrasonidos,
filtraciones o por m e d i o de sustancias qumicas denominadas desinfectantes (Rossoni,
2002).

Existen varias formas de eliminar o reducir los residuos de suciedad o contaminantes por
debajo de los limites establecidos de forma que no afecte la calidad y seguridad de cualquier
producto fabricado en un equipo, esta limpieza se realiza de forma fsicoqumica
acompaada de una accin mecnica. Esta tiene que ver con la presin a chorro de agua
para la remocin de suciedad. La accin mecnica tiene ventajas como la baja inversin,
centraliza operaciones, disminuye salpicaduras, reduce un poco el lavado a mano y es de
fcil uso, sin embargo una desventaja de este proceso es que en superficies muy sucias se
requiere de la utilizacin de demasiada cantidad de agua.

Otro sistema utilizado es la limpieza manual, la eficacia de este sistema de lavado depende
de lo cuidadoso que sea el operario, en este caso se recomienda cambiar las soluciones
limpiadoras de acuerdo con un cronograma de rotacin de desinfectantes. En vez de utilizar
agua caliente se puede utilizar una solucin desinfectante durante 10 a 15 minutos,
dependiendo de la sustancia utilizada; en lo posible no enjuagar el desinfectante, solo en el
caso que se precise ser enjuagado; se debe dejar escurrir el material sin secarlo para evitar
que se contamine de nuevo (Barsotti, 2001).

22
2.3.1. OBJETIVOS DE LOS PROCESOS DE LIMPIEZA DESINFECCIN

La limpieza adems de que busca cumplir las exigencias estticas en las instalaciones
farmacuticas tiene como compromiso de calidad eliminar los residuos microscpicos
presentes (Barsotii, 2001), restablecer el normal funcionamiento de los equipos y las
instalaciones tras su actividad en el proceso de produccin y asegurar la calidad ptima de
los productos farmacuticos frente a los contaminantes qumicos.

Por otra parte, la desinfeccin a su vez permite tener una calidad ptima de los productos,
desde el punto de vista microbiolgico, reduciendo hasta el mnimo posible la carga
microbiana y en las reas de produccin tanto en equipos, superficies y dems reas que la
componen (Bruins, 1995).

Lo anterior hace parte de un sistema de calidad en donde tienen gran influencia las buenas
practicas de manufactura (BPM), siendo estas responsables de involucrar todo lo
relacionado con el proceso productivo, desde la calidad ptima de las materias primas hasta
el producto final elaborado en donde se debe tener muy en cuenta aspectos como el diseo
de la distribucin de la planta, el cual debe contar con un flujo de proceso lgico, funcional y
definido.

Buenas practicas de manufactura (BPM) en industria farmaceutica (BPM).

Todo sistema integral de garanta sobre la calidad de los productos farmacuticos debe
basarse no solo en un sistema confiable de procedimientos para autorizar el registro y la
comercializacin y en un anlisis independiente del producto acabado, sino tambin en la
seguridad lograda mediante una inspeccin independiente, de que todas las operaciones de
fabricacin que se realizan sean de conformidad con normas aceptadas, comnmente
conocidas como Buenas Prcticas de Manufactura.

En 1969, la 22a. asamblea mundial de la Salud aprob las normas recomendadas para la
fabricacin y la inspeccin de calidad de los medicamentos. Estas prcticas comprenden
normas reconocidas y respetadas internacionalmente cuya opcin y aplicacin se
recomienda a todos los pases miembros, las cuales sirven de base para el sistema OMS de
certificacin de calidad de los productos farmacuticos objeto del comercio internacional.

23
Las Normas de BPM son un instrumento administrativo en virtud del cual el estado se
compromete, a peticin de una parte interesada a certificar que:

Est autorizada la venta o distribucin del producto.

Las instalaciones industriales donde se fabrica el producto estn sometidas a

inspecciones regulares para comprobar si el fabricante se ajusta a las Buenas
Prcticas de Manufactura e inspeccin de la calidad.

Es as que se hace necesario que la Industria Farmacutica Nacional elabore

medicamentos, sujetndose a normas de BPM, las que facilitarn el control y garanta de la
calidad de las mismas; dando seguridad y confiabilidad para su uso, administracin,
expendio y dispensacin al paciente y a los profesionales de salud.

El proyecto de requisitos revisados para las BPM se compone de tres partes. La Primera
Parte, "Administracin de la calidad en la industria farmacutica: filosofa y elementos
esenciales", esboza los conceptos generales de la garanta de la calidad, como tambin los
principales componentes o subsistemas de las BPM, que son responsabilidades conjuntas
de la administracin principal y de la administracin de la produccin y del control de calidad.
Entre stos se incluyen higiene, comprobacin, autoinspeccin, personal, instalaciones,
equipos, materiales y documentacin. La segunda parte, buenas prcticas en la produccin
y el control de calidad", provee asesoramiento con respecto a las acciones que debe
efectuar separadamente el personal de produccin y el de control de calidad, para la puesta
en prctica de los principios generales de garanta de la calidad.

La tercera Parte contiene dos pautas complementarias, pero no es una seccin taxativa,
pues se prev la inclusin de otras pautas en el futuro, como por ejemplo las referentes a
productos biolgicos, materiales para ensayos clnicos, y comprobacin.

Las estipulaciones incluidas en esta gua concuerdan totalmente con las normas antes
mencionadas de la Comunidad Econmica Europea (CEE) y la Cmara de la Industria
Farmacutica (CIF).

Los productos farmacuticos autorizados deben ser producidos solamente por fabricantes
registrados (que posean autorizacin de fabricacin), cuyas actividades sean inspeccionadas
regularmente por las autoridades nacionales. Esta gua de las BPM deber usarse como

24
patrn indispensable en el cumplimiento de las condiciones exigidas por las BPM, lo cual
constituye uno de los elementos esenciales del Sistema de Certificacin de la Calidad de los
Productos Farmacuticos, objeto de Comercio Internacional, y como base para la evaluacin
de las solicitudes de autorizacin de fabricacin y para la inspeccin de las instalaciones de
produccin. Dicha gua puede usarse tambin para la capacitacin de funcionarios
encargados de la inspeccin de medicamentos, y la del personal de produccin y control de
calidad en la industria farmacutica.

La gua puede aplicarse a la produccin en gran escala de medicamentos en su forma

farmacutica terminada, incluyendo los procesos en gran escala empleados en los
hospitales, y la preparacin de materiales para ensayos clnicos.

Las Buenas Prcticas detalladas ms adelante deben ser tenidas en cuenta como guas
generales, y pueden ser adaptadas a las necesidades individuales. No se pretende que la
Primera y Segunda Partes de esta gua cubran todos los aspectos referentes a la produccin
de principios farmacuticos activos, para los cuales en la Seccin 18 se describen los
requisitos especficos. La gua tampoco cubre aspectos de seguridad para el personal
involucrado en la fabricacin, ya que ello se rige por la legislacin de cada pas. No obstante,
el fabricante es responsable de garantizar la seguridad de los trabajadores. Siempre que sea
posible, deben emplearse las denominaciones comunes para las sustancias farmacuticas
designadas por la OMS, juntamente con los dems nombres designados.

2.3.2 ETAPAS DE UN PROGRAMA DE LIMPIEZA Y DESINFECCIN

Una vez superadas las evaluaciones de la capacidad del producto desinfectante elegido, se
debe adecuar un proceso de limpieza y desinfeccin para realizar las pruebas in vivo, el
cual en forma general debe contemplar las siguientes etapas (Barsotii, 2001).

a. Pre-enjuague: Se trata de realizar una limpieza previa con agua, para eliminar la
suciedad ms gruesa y la materia orgnica visible. Puede usarse agua fra o caliente siendo
esta ltima de especial inters para suciedades grasientas y para eliminar parte de la carga
microbiana en la superficie.

b. Aplicacin del detergente: Se realiza mediante el sistema adecuado a cada caso e n

particular, con el detergente se genera la remocin de la suciedad de un material slido por

25
medio de un bao lquido, que es a la vez capaz de mantener en suspensin a la suciedad
removida previniendo la redeposicin de la misma sobre la superficie.
La accin de detergencia involucra factores como el descenso de la tensin superficial,
solubilizacin, emulsificacin y dispersin. Esta fase es la responsable de disolver y
solubilizar la suciedad para facilitar su desprendimiento de las superficies tratadas.

c. Enjuague: Se realiza mediante agua potable abundante, a media y baja presin para
evitar nebulizaciones.

d. Aplicacin del desinfectante: Una vez realizado el proceso de limpieza como tal, se
procede a aplicar un desinfectante, de manera que se genere una eliminacin de los
microorganismos presentes en el rea.

e. Enjuague: Se realiza con el objetivo de eliminar los residuos de desinfectante y evitar

que stos contaminen los productos. En esta etapa es importante tener en cuenta el tiempo
de exposicin del desinfectante para que se ejerza una accin adecuada.

f. Secado: En la medida de las posibilidades se realizar una etapa de secado, esto con el
fin de eliminar excesos de agua que puedan favorecer el crecimiento bacteriano y en
consecuencia pueda servir de vehculo diseminador en el caso que quede a l g n
microorganismo presente.

2.3.3 ETAPAS DE LA CONFECCION DEL PROGRAMA DE LIMPIEZA Y DESINFECCION

Los programas de limpieza y desinfeccin debern asegurar que todas las partes de las
instalaciones estn debidamente limpias, e incluir la limpieza del equipo de limpieza. Este
programa debe considerar que las labores de limpieza sean realizadas por los mismos
empleados del proceso, por lo que debern ser entrenados y tener acceso a este documento
(Delgado, 2006).

a. OBTENER TODAS LAS INFORMACIONES QUE FORMAN PARTE DE LAS BASES

DEL PROGRAMA.

En esta etapa es pertinente recoger informacin acerca de las caractersticas y condiciones

en las que trabaja el laboratorio en donde se incluyen las sustancias y tiles empleados

26
diariamente en cada una de las actividades a realizar, los cuales debern estar rotulados y
contenidos en recipientes destinados para tal fin, siendo estos de uso especfico.

Los aspectos relacionados con el laboratorio se obtendrn mediante observaciones directas

de todas y cada una de las actividades que en el mismo se realizan y puedan relacionarse
directa o indirectamente con la limpieza y la desinfeccin, por lo cual se tendrn en cuenta
las condiciones existentes en diferentes momentos de la jornada de trabajo y del da.

b. REDACTAR LA PRIMERA VERSIN DEL PROGRAMA SOBRE LA BASE DE LAS

INFORMACIONES RECOLECTADAS.

Durante la redaccin del documento se garantizar que en este se encuentren todas las
instrucciones de limpieza y desinfeccin del establecimiento en forma integrada, organizada
y clara, con un lenguaje fcil de entender por toda persona que quiera consultarlo. Este
documento debe constituir una gua para la aplicacin y verificacin del programa, adems
de expresar la preocupacin y ocupacin en el establecimiento por garantizar sus
condiciones higinico-sanitarias.

c. COMPROBAR LA PRIMERA VERSIN EN EL ESTABLECIMIENTO EN RELACIN

CON SU CORRESPONDENCIA CON ESTE Y OBTENER LA INTERPRETACIN Y
ACEPTACIN DE ESTE DOCUMENTO POR EL PERSONAL QUE PARTICIPARA EN EL
PROGRAMA.

Para esta etapa se debe facilitar la lectura y estudio del documento al personal que lo
aplicar, de esta manera se solicitar al mismo que lo valore de forma comparativa con las
actuales actividades y que sealen sus opiniones sobre todos los aspectos que puedan
estar expresados incorrectamente o que no se puedan aplicar del mismo para generar a
tiempo la aprobacin de cambios por el encargado del programa.

De igual manera es importante la asignacin de responsabilidades correspondientes con las

tareas especficas a realizar, as como el mtodo y la frecuencia de limpieza a implementar
en cada caso, teniendo en cuenta el tipo de producto, instalacin, equipo y su disponibilidad.

27
d. CAPACITAR AL PERSONAL QUE PARTICIPARA EN EL PROGRAMA.

En esta capacitacin es importante cumplir con las etapas de concepcin, formulacin,

aplicacin y retroalimentacin.

De acuerdo con las caractersticas del personal que recibir la capacitacin, las condiciones
y caractersticas del establecimiento, se plantearan objetivos que permitan adquirir
conocimientos y habilidades para limpiar y desinfectar correctamente. Para impartir los
mensajes y realizar la retroalimentacin se debe hacer nfasis en actividades prcticas.

e. REDACTAR LA VERSIN DEFINITIVA DEL PROGRAMA Y PRESENTARLO AL

PERSONAL QUE LO APLICARA.

De acuerdo con todos los sealamientos recibidos por el personal que tendr relacin con el
programa y de las observaciones realizadas, se realizaran los arreglos al documento final
que ser presentado en el establecimiento como su programa de limpieza y desinfeccin

f. REALIZAR UN SEGUIMIENTO DE LA APLICACIN DEL PROGRAMA.

Mediante el cual se brindara el asesoramiento para su mejor utilizacin, adems de conocer

los inconvenientes de la utilizacin del programa y brindarles solucin.

Se debe realizar una vigilancia o supervisin desde los inicios de la aplicacin y a los 3
meses posteriores con nfasis en la deteccin de los efectos negativos, adems de valorar
los aspectos positivos del programa y eficacia de los mtodos de limpieza.

Adicionalmente, este proceso de vigilancia contribuye a la identificacin de las necesidades

de capacitacin y ayuda a la prevencin de contaminacin que pueda generar costos
adicionales.

28
Es importante considerar que los programas de limpieza y desinfeccin deben ser
actualizados, especialmente despus de cambios y modificaciones de las condiciones
existentes en los establecimientos cuando se confecciono el programa (Delgado, 2006).

2.4. FACTORES A CONSIDERAR EN LA IMPLEMENTACIN DE UN PROGRAMA DE

LIMPIEZA Y DESINFECCIN

La implementacin de programas adecuados de limpieza y desinfeccin en la industria

farmacutica persigue controlar los microorganismos alteradores, que no permiten obtener
productos de calidad desde el punto de vista microbiolgico (Luppens, 2002). Los
consumidores, por su parte, esperan disponer de medicamentos de calidad exentos de
grmenes patgenos o toxinas de modo que no representen ningn riesgo para su salud.
Esto se requiere, para la satisfaccin de ambas partes, la implementacin de un programa
adecuado de limpieza y desinfeccin en los equipos, utensilios e instalaciones implicadas en
la produccin de frmacos (Ronner, 1993).

Un programa tpico de limpieza en su implementacin debe tener en cuenta factores tales

como el tipo de suciedad a tratar, incluir una descripcin de los equipos y de los
desinfectantes a utilizar. Los programas de limpieza y desinfeccin pueden diferir
significativamente de acuerdo a la naturaleza del equipo, caractersticas de los depsitos de
suciedad en las instalaciones y el uso al cual sea destinado posteriormente el producto
originado del proceso de fabricacin. Un buen programa se debe adecuar a las
caractersticas de los microorganismos encontrados durante el proceso de produccin de tal
forma que se pueda garantizar la remocin total de stos, para que el desinfectante aplicado
logre reducir al mnimo, sin ninguna interferencia los microorganismos presentes en las
superficies.

En la seleccin del desinfectante se debe tener en cuenta factores como el tipo y cantidad de
microorganismos que se desea eliminar, el nivel de desinfeccin que se desea alcanzar, la
materia orgnica y el nivel de limpieza previo a la aplicacin del producto. En funcin de
estos factores se determina el producto o productos necesarios adems de sus posibles
condiciones de aplicacin (Concentracin, tiempo y temperaturas utilizadas) (Gallardo,
2002). Adems, actualmente es importante considerar que el producto no sea
potencialmente contaminante al medio ambiente, que sea poco txico para operadores y

29
poco corrosivo para equipos. Una vez elegido el desinfectante es recomendable realizar las
evaluaciones in Vitro del producto, para poder establecer la capacidad del desinfectante
elegido en diferentes concentraciones, tiempo y temperaturas de aplicacin contra posibles
microorganismos presentes en la industria a tratar (Urego, 1994).

2.5 MECANISMOS DE RESISTENCIA MICROBIANA

Los microorganismos pueden desarrollar diferentes tipos de resistencia frente a los diversos
desinfectantes utilizados, esto radica en diferencias en su pared celular, morfologa y
composicin.

Las especies de microorganismos difieren en su susceptibilidad a los agentes fsicos y

qumicos. La eficacia de un agente en particular depende de las propiedades del organismo
contra el cual est siendo probado. Las ms importantes de estas propiedades son: Las
especies de organismos, la fase de crecimiento del cultivo, la presencia de estructuras
especiales como esporas o cpsulas, los antecedentes del cultivo y el nmero de
organismos en el sistema de prueba (Joklink, 1986).

a. RESISTENCIA DE BACTERIAS GRAM POSITIVAS

La pared de estas bacterias est compuesta de peptidoglicano y cidos teicoicos, pero

ninguno de estos parece ser una gran barrera para la accin y entrada de los desinfectantes
y antispticos.

Existen unos microorganismos que pueden crecer con un aspecto mucoso y otros no, pero
estas ltimas mueren mucho ms rpido, por lo que se podra decir que esta lama juega un
papel importante al actuar como una barrera fsica a la penetracin de los desinfectantes o
como una capa suelta que interacta o absorbe el biocida (McDonnell, 1999).

b. RESISTENCIA BACTERIAS GRAM NEGATIVAS

Las bacterias Gram negativas son ms resistentes que las Gram positivas a los
desinfectantes y antispticos. La membrana externa de estas bacterias acta como una

30
barrera que limita la entrada de algunos desinfectantes. Muchos autores, consideran que el
peptidoglicano puede ser una gran barrera, porque el contenido de este es mucho ms bajo
que el que se encuentra en las bacterias Gram positivas, entonces las hace menos sensibles
a muchos agentes qumicos (McDonnell, 1999).

c. RESISTENCIA DE LAS ESPORAS

Las esporas son mucho ms complejas debido a que poseen mltiples capas. La capa
externa se conoce como exosporium, una fina y delicada cubierta de carcter protico y se
presenta en algunas especies. Dentro de stas se presentan las cubiertas de la espora
compuestas por capas de protenas. El crtex es una capa de peptidoglicano de uniones
laxas y el protoplasto contiene pared, membrana, citoplasma, nucleoide, ADN, ARN, cido
dipicolnico, calcio, magnesio, fsforo. El crtex es una parte importante en la resistencia
frente a los desinfectantes y antispticos. Esta resistencia puede ocurrir dentro de la etapa
de esporulacin y puede ser un evento que puede ocurrir en etapas temprana, intermediaria
o tarda (McDonnell, 1999).

d. RESISTENCIA DE HONGOS

Estos organismos poseen dos mecanismos de resistencia, el primero es una resistencia

intrnseca que consiste en una barrera para reducir la entrada del agente microbiano.
Tambin la edad de los cultivos influencia la resistencia y la sensibilidad hacia los
desinfectantes, ya que la pared es mucho menos sensible en fase estacionaria que en fase
logartmica.

Los hongos son ms resistentes que las levaduras y considerablemente ms resistentes que
las bacterias no esporuladas. Las esporas de los hongos son menos resistentes que las
esporas bacterianas a los agentes biocida (McDonnell, 1999).

31
2.6 TIPOS DE DESINFECTANTES Y ANTISEPTICOS

2.6.1 QUMICOS

a. Aldehdos

Los aldehdos mas comnmente usados como desinfectantes son el formaldehdo y el

glutaraldehdo. El formaldehdo es muy similar al glutaraldehdo en su toxicidad y
tratamiento, aunque probablemente sea ms txico. El glutaraldehdo se prepara
comnmente como una solucin acuosa concentrada al 2% y es levemente alcalino de esta
manera. Se ha informado que causa irritacin respiratoria dando lugar a rinitis y asma
ocupacional. Raramente causa taticardia en seres humanos. Debido a los efectos irritantes
del glutaraldehdo se requiere el uso de un equipo protector para la piel y los ojos de acuerdo
a las normas de las OSHA; los empleados que se encuentren expuestos al glutaraldehido
durante el proceso de limpieza y desinfeccin requieren el uso de respiradores apropiados.
El glutaraldehdo es efectivo frente a virus, clulas vegetativas y esporas de bacterias y
hongos. Se usa en medicina para esterilizar instrumentos urolgicos y pticos (Arias, 2006).

2.6.2. ORGNICOS

a. Alcoholes

Los alcoholes poseen un amplio historial de uso como desinfectantes. La mayora de veces,
las mezclas desinfectantes estn constituidas generalmente de etanol y alcohol Isoproplico
(Isopropanol). El alcohol de mayor uso domstico como desinfectante es el alcohol etlico,
manufacturado comercialmente al 96%. Este es un lquido claro e incoloro con un olor similar
al etanol (Manring, 1997).

Los alcoholes son compuestos orgnicos, cuya formula general R-OH. El grupo hidroxilo
determina la posible clase de reaccin fsica o fisiolgica, la velocidad y extensin de sta.

Solamente los alcoholes alifticos (metlico, etlico, proplico, butlico y amlico), de cadena
corta, son usados como antispticos y desinfectantes en donde la accin bactericida s e
incrementa con el peso molecular. Adicionalmente, tienen como caractersticas importantes
que son usados como antispticos y desinfectantes por su miscibilidad con el agua.

32
Las condiciones antimicrobianas de los alcoholes dependen de la actividad de su
concentracin, la condicin del microorganismo y la coagulacin de las protenas que se ve
influida tambin por su solubilidad en lpidos, esta ocurre con ciertas concentraciones lmite
que comprenden las concentraciones ptimas, lo cual trae como consecuencia la prdida de
las funciones celulares especficas en donde las enzimas bacterianas localizadas en la pared
celular son ms fciles de inactivar que las que se encuentran dentro de la clula; esta
coagulacin de protenas puede presentarse tambin sobre la membrana plasmtica en
donde se genera una destruccin de aminocidos y cidos nucleicos constituyentes del
citoplasma a relativamente baja concentracin.

Adicionalmente, en ausencia de agua existe un incremento del peso molecular que hace que
las protenas no sean desnaturalizadas como en presencia de agua, sta es la explicacin
por la cual el alcohol etlico absoluto es menos bactericida que las mezclas de alcohol agua.
Su accin desinfectante mejora conforme aumenta la longitud de la cadena aliftica de los
alcoholes, hasta aquellos con 8 a 10 tomos de carbono ya que los alcoholes de cadena
ms larga tienen una solubilidad baja en el agua (Manring, 1997).

b. Fenol y compuestos fenlicos

Varios fenoles se utilizan como desinfectantes. El fenol o cido carblico, histricamente uno
de los primeros desinfectantes en usarse, solo se emplea en la actualidad como patrn para
ensayar el poder desinfectante de otros compuestos. Una solucin acuosa al 5% de fenol
elimina rpidamente clulas vegetativas, pero las esporas son ms resistentes. El fenol y
compuestos derivados alteran la permeabilidad de la membrana citoplasmtica as como
tambin desnaturalizan las protenas. (Arias, 2006).

A partir del fenol se pueden lograr desinfectantes con mayor actividad antibacteriana con
menor toxicidad y mejor olor sustituyendo hidrgenos del anillo bencnico por radicales
alqulicos o halogenados; el cresol es un alquil fenol con radical alqulico que puede estar en
posicin orto, meta o para, dando respectivamente el orto cresol, meta cresol y el para
cresol. Normalmente se emplea la mezcla de los tres, denominndose Tricresol (Anderson,
1999).

33
c. cidos y lcalis

Son activamente bactericidas, actan alterando la permeabilidad y coagulando las protenas,

+ -
debido a sus grupos H y OH disociados, respectivamente. En principio, su actividad es
proporcional al grado de disociacin, pero algunos hidrxidos son ms potentes de lo
sugerido por su grado de disociacin, debido a la accin txica directa que puede ejercer el
catin metlico (Franklin, 1989).

En general los cidos son ms eficaces que los lcalis. Dentro de estos compuestos se
encuentran el sulfrico (H2SO4), ntrico (HNO3 ), hidrxido sdico (NaOH) e hidrxido
potsico (KOH). Tienen aplicacin limitada debido a su naturaleza custica y corrosiva. An
as el NaOH se utiliza en la industria del vino para limpiar las cubas de madera. (Arias, 2006)

d. Perxido de hidrgeno

Hace parte de este grupo y es muy utilizado en la industria farmacutica y cosmtica, debido
al bajo costo y a la eficiencia frente a bacterias aerobias. Su accin antimicrobiana radica en
la oxidacin directa de estructuras bacterianas o por la liberacin de oxgeno:

( 2H2O2 Catalasa O2 + 2H2O).

Los dos componentes principales del perxido de hidrgeno son el oxgeno, el cual es un
gas incoloro, inodoro e inspido, poco soluble en agua; caracterstica que aumenta la
prolongacin del efecto desinfectante; y el hidrgeno que es uno de los elementos ms
importantes pues se encuentra en todos los organismos vivos, tanto en las plantas como en
los animales. El hidrgeno se emplea en el laboratorio como agente reductor; teniendo en
cuenta que tiene la capacidad de reducir ciertas sustancias a un estado menor de oxidacin,
en pocas palabras cuando un tomo de alguna especie qumica disminuye su carga elctrica
(Henao, 1995).

En cuanto a la toxicidad del oxgeno para los microorganismos, es sabido que durante la
respiracin se forman cantidades pequeas de radicales libres superxido (O2 ). Estos

34
radicales libres son txicos para los componentes celulares, de tal suerte que los
microorganismos que crecen en presencia de oxgeno, como aceptor final de electrones,
deben sintetizar una enzima la superxido dismutasa, para neutralizarlos. Gracias a sta
2
enzima, los radicales superxido se transforman en oxgeno molecular (O ) y perxido de
hidrgeno (H 2O2 ). El perxido de hidrgeno es tambin txico, pero se convierte
inmediatamente en oxgeno molecular y agua mediante la enzima catalasa.

Tambin la peroxidasa destruye al perxido de hidrgeno. El In perxido (O-) es otra forma

txica del oxgeno, que se genera en pequeas cantidades en la respiracin normal. El
ltimo producto de la reduccin normal, el radical hidroxilo libre (2 + ) es muy reactivo. Se
produce principalmente por las radiaciones ionizantes, tambin en la reaccin entre radicales
libres superxido y perxido (Cuesta, 2004).

e. Agentes oxidantes halogenados

Son bactericidas muy tiles y muy potentes. El iodo no tiene parangn como desinfectante
de la piel, aparte de su efecto oxidante, se combina irreversiblemente con residuos de
tirosina de las protenas. Sus principales presentaciones son la tintura de iodo y los
iodforos, y el cloro fue uno de los primeros antispticos en usarse (antes de conocerse su
mecanismo, e incluso antes de que se supiera el autntico papel de los microorganismos en
las enfermedades infecciosas). El cloro se presenta bajo las formas de Cl2 (gaseoso),
hipocloritos y cloraminas. La muerte de los microorganismos por accin de ste se debe en
parte a la combinacin directa del cloro con las protenas de las membranas celulares y las
enzimas. (Arias, 2006).

La actividad biocida de estos compuestos se debe fundamentalmente a la capacidad de

formar acido hipocloroso no disociado y a la liberacin de cloro libre. La concentracin de
acido hipocloroso no disociado depende directamente de pH de la solucin. El siguiente
sistema de ecuaciones qumicas muestra la relacin existente entre los desinfectantes
liberadores de cloro y su relacin con la concentracin de acido hipocloroso, cloro libre y el
pH del medio.

Desinfectante liberador de cloro H2O HClO Cl2 + H2O

- +
Activo ClO + H

35
 Inactivo determinado por el pH

-
El hipoclorito de sodio (NaClO), se disocia en el agua para producir ion hipoclorito (ClO ) y el
ion sodio (Na+), segn la siguiente reaccin:
- +
NaClO ClO + Na
Hipoclorito de sodio Ion hipoclorito Ion sodio

Simultneamente el ion hipoclorito en presencia de agua genera los siguientes equilibrios

qumicos:

OCl- + H+ HClO + HCl

Ion hipoclorito hidrogenion acido hipocloroso

HClO + HCl Cl2 + H2O

Fuente: Malagn, 1999.

f. Amonios cuaternarios

Son sales, con accin anftera, que no poseen color, ni olor, ni sabor. Son agentes
desinfectantes que por su accin detergente, rompen la membrana citoplasmtica debido a
que disuelven las capas lipdicas, adems desnaturalizan las protenas. Estos son
ampliamente utilizados en desinfeccin de instrumentos y sanitizacin de ambientes. La
limitacin de estos productos es que no son esporicidas y su efecto puede ser neutralizado
por otros compuestos, como jabones, detergentes aninicos y en menor cantidad por
materia orgnica ( Tortora, 2001).

Algunos ejemplos son:

Cloruro de Benzalconio: Es un amonio cuaternario, de color blanco amarillento, de olor

aromtico y altamente soluble en agua y alcohol. Su forma anhdrido es soluble en ter.
Estos surfactantes se disocian en solucin acuosa en tiempos relativamente largos. Son
muy buenos germicidas frente a bacterias Gram positivas y algunas Gram negativas.
Algunas Pseudomonas sp. son resistentes y tambin Mycobacterium tuberculosis.

36
El espectro de accin no interfiere frente a la destruccin de esporas. La actividad es buena
frente a Candida albicans y frente a hongos, pero no es eficiente frente a virus. El efecto
antibacterial es variable, pero se puede mejorar con 0.175% de alcohol benzlico o fenil
propanol (Jawetz, 2001).

Los efectos de los amonios cuaternarios se han agrupado en:

Sobre protenas: Por el efecto tensoactivo, desnaturaliza protenas por disociacin a nivel del
grupo prosttico.

Sobre el metabolismo: Interactuando con las enzimas a nivel citoplasmtico, estimulando la

gliclisis y alterando la dinmica enzimtica de la clula.

Sobre la permeabilidad celular: Produciendo prdida de iones de potasio y disminuyendo la

actividad de coenzimas (Aldana, 1999).

SANIT 10

Sanitizante a base de amonio cuaternario (Superquat), formulado para ser usado en

preparaciones de procesamiento de alimentos, escuelas, clnicas, hospitales, restaurantes e
instituciones en general. Sanitizante para superficies en contacto con alimentos,
desinfectante de frutas y verduras. (Arias, 2006).

g. TEGO 51

Es un desinfectante compuesto por aminocidos de alto peso molecular, tensoactivo que

ocupa una posicin particular. Es un anftericida debido a que contiene grupos catinicos y
aninicos dentro de la misma molcula que tiene como frmula qumica dodecil-di
(aminoetil)-glicina. Es un producto soluble en agua, se utiliza una solucin desinfectante
caliente a 50C. La capacidad bactericida se enfoca en la adsorcin de las paredes
celulares, tambin atraviesa la pared celular cargada negativamente reduciendo prdida de
potasio y generando una desnaturalizacin de protenas (Arias, 2006).

37
Se recomienda su empleo para desinfeccin de mesas de trabajo, utensilios, en una solucin
al 1% (1:100) con tiempo de actuacin de 15 minutos. Las concentraciones varan en funcin
de las necesidades microbiolgicas para desinfeccin normal (Aldana, 1999),
adicionalmente, diferentes estudios han reportado la eficacia de TEGO 51 en evaluaciones
acerca de la eficacia contra Campylobacter jejuni, Listeria monocytogenes, Staphylococcus
aureus, algunos virus como Herpes virus, Adenovirus y Rhabdovirus (Mossel, 1985).

El TEGO 51 posee las siguientes caractersticas:

No contiene ni cloro liberable, ni cidos, ni lcalis.
No es corrosivo.
Forma una capa fina insoluble en las superficies previniendo la infeccin de nuevos
microorganismos (Mossel, 1985).

PARMETRO VALOR

Densidad 1000+-0.005g/cc a 20 C

Viscosidad 7.5+5.0mPa. a 20 C

Sin diluir 2+/- 03Solucin acuosa 1%

ndice de pH
8.3+/- 0.5

Solucin acuosa al 1% -27.8+-0.5mN/m

Tensoactividad
20 C

Solucin acuosa al 1% 640+100

Conductividad
micras/cm 20 C

Solubilidad Miscible con agua en cualquier proporcin.

TABLA 1. Caractersticas Fisicoqumicas TEGO 51.

Fuente: Aldana, 1999.

2.7 NIVELES DE DESINFECCION.

De acuerdo al tipo de agente que es capaz de destruir, se han definido tres niveles de
desinfeccin: alta, intermedio y bajo.

Alta: Elimina todos los microorganismos incluyendo los virus resistentes.

38
 Intermedia: Elimina formas vegetativas de bacteria, hongos y virus, pero no
necesariamente todos los virus de tamao pequeo no lipdico.

Baja: Elimina bacterias patgenas en su forma vegetativa y algunos hongos.

2.8 FACTORES QUE AFECTAN LA EFICACIA DE LOS PRODUCTOS

DESINFECTANTES.

La eficacia de los productos desinfectantes puede ser influenciada por mltiples factores
dentro de los cuales la concentracin, temperatura de aplicacin y tiempo de contacto son de
primera importancia. Por otro lado, adems de estas caractersticas la forma de aplicacin,
la materia orgnica, los tipos de superficies y los microorganismos contaminantes sern
determinantes en la eficacia del producto. Segn Holah, los factores con mayor influencia en
la capacidad desinfectante son tipo de agua, condiciones de crecimiento y tipo de
microorganismo, sustancias interferentes, pH, temperatura, tiempo y concentracin de
desinfectante (Holah, 1995).

2.8.1. AGUA

Es el solvente por excelencia de los productos de limpieza y desinfectantes y el elemento

que arrastra la suciedad. El nivel de humedad disponible se mide con base en la actividad de
agua y sirve para determinar si se producir alteracin de los productos por multiplicacin de
microorganismos. Por otro lado, la presencia de agua aumenta el efecto letal del calor sobre
los microorganismos a lo largo del proceso de limpieza. El agua contiene diversas impurezas
ambientales (gases disueltos, sales inorgnicas, sustancias orgnicas solubles). Excepto en
el caso de que se haya destilado en condiciones controladas (I.C.M.S.F.1980).

Las aguas duras contienen Calcio y Magnesio, en menor proporcin otros iones (Hierro,
Manganeso, Aluminio, Estroncio o Zinc), hasta una tasa total de 60 ppm o superior. Esta
agua al reaccionar con jabones, detergentes aninicos, sustancias bicarbonatadas o
desinfectantes dan lugar a una reduccin de la capacidad antisptica de estos productos.
Las aguas se pueden ablandar adicionando sustancias secuestrantes, como tripolifosfato
clcico a una mezcla de cal y soda custica, que elimina la dureza por precipitacin o mejor
an, tratando las aguas por un procedimiento conocido como Zeolite, que utiliza resinas

39
intercambiadoras de iones, con el fin de reemplazar los iones metlicos alcalinos por sodio.
(I.C.M.S.F.1980).

Las aguas blandas son las que tienen muy pocos minerales. Producen mucha espuma
cuando se les mezcla con el jabn. Las aguas de pozos o aquellas que proceden de aguas
superficiales suelen ser aguas blandas. El agua mas blanda es el agua destilada que no
posee ningn mineral. Asimismo, es importante conocer las caractersticas qumicas del
agua, puesto que la gran variedad de sustancias que se pueden encontrar disueltas y
suspendidas en ella pueden ser causantes de interferencias en los procesos de limpieza no
permitiendo la obtencin de una superficie asptica que es lo que se busca con este tipo de
procesos . Algunos parmetros sirven para medir las propiedades comunes a muchas
sustancias a la vez, uno de estos parmetros es la acidez que es la capacidad que tiene el
agua de neutralizar una base fuerte, en las aguas superficiales se produce por la formacin
de cidos fuertes, por la disolucin del gas carbnico o la actividad microbiana en el agua
por algunos minerales que contienen el suelo como el yeso o cuando la fuente recibe cargas
industriales acidas. Se dice que las acidez es dbil cuando es causada por la disolucin del
gas carbnico presente en la atmsfera o cuando sta es producida por la actividad
microbiana del agua. Para prevenir daos de corrosin el agua no debe tener un pH mayor a
6.5. (Holah, 1995).

2.8.2 CONDICIONES DE CRECIMIENTO Y TIPO DE MICROORGANISMO

Idealmente un desinfectante debe tener un amplio espectro contra bacterias, hongos, virus y
esporas. Las formas microbianas ms resistentes son las esporas, seguidas por los hongos,
los bacilos Gram negativos, los cocos y por ltimo los bacilos Gram positivos. (Herruzo,
2000).

Es conocido que el microorganismo es ms resistente si se encuentra formando biofilms,

que cuando est en suspensin. Esta estructura compleja donde se encuentran los
microorganismos ejerce un efecto protector e interferente y dificulta la accin de los
desinfectantes. (Holah, 1995).

Por ot ro lado, cuando la carga microbiana es muy alta se requiere una mayor concentracin
de desinfectante y un mayor tiempo de exposicin; de ah la necesidad y recomendacin de

40
limpiar siempre la superficie previa a la aplicacin, pues reducir en parte la carga
microbiana y facilitar la accin del desinfectante. (Herruzo, 2000).

2.8.3 SUSTANCIAS INTERFERENTES

La eficacia de los productos sanitizantes est ligada a la presencia o ausencia de materia

orgnica e inorgnica, principalmente debido a reacciones qumicas no especficas. La
materia orgnica puede reaccionar no especficamente con el desinfectante consumiendo
parte del producto aplicado, lo que hace disminuir su concentracin efectiva evidencindose
una prdida clara de la potencia del producto. Algunos materiales tambin pueden ser
afectados por materiales inorgnicos tales como sales presentes en el agua de dilucin
(Holah, 1995).

Adems de la materia orgnica existen otros elementos como jabones, gomas, corcho, que
pueden reaccionar con el desinfectante y neutralizarlo (Herruzo, 2000).

2.8.4 EL pH

Los desinfectantes pueden ser afectados por le pH del agua en el que se diluyen, por lo que
solo deben ser utilizados en el rango de pH recomendado por el fabricante. El pH afecta el
grado de ionizacin del producto. Las formas ionizadas de los productos son capaces de
atravesar ms fcilmente la membrana de los microorganismos. (Holah, 1995).

2.8.5 TEMPERATURA

Los desinfectantes debern ser efectivos en el ms amplio rango posible de temperaturas y

ser aplicados entre los lmites de temperaturas indicados por los fabricantes; estas oscilan
entre 5C y mximas de 55C. En la mayora de productos al aumentar la temperatura
aumenta su eficacia hasta alcanzar un punto mximo de eficacia, lo que se considera la
temperatura ptima de aplicacin, punto a partir del cual el incremento de la temperatura
produce una perdida del potencial biocida como ocurre con el perxido de hidrgeno el cual
a temperaturas mayores de 45C se vuelve inestable.

41
La temperatura del agua juega un papel importante en el proceso de limpieza y desinfeccin,
al ser calentada tiene importantes aplicaciones; cuando el agua alcanza altas temperaturas,
por si sola es capaz de emulsificar las grasas de las superficies, desprender partculas
orgnicas y producir una breve accin bactericida antes que la superficie se enfri (Gallardo,
2002).

La estabilidad de algunos desinfectantes, por ejemplo los halgenos, desciende rpidamente

a altas temperaturas. El Cloro y el Yodo se descomponen rpidamente a altas temperaturas
alrededor de los 60C y 48C, respectivamente. Tambin, algunos desinfectantes, por
ejemplo el cloro, se tornan ms corrosivos en superficies o peligrosos de manejar a altas
temperaturas (Fleitas, 1994).

2.8.6 TIEMPO DE CONTACTO

Para que los desinfectantes sean efectivos en primer lugar deben atravesar la envoltura
celular hasta sus sitio diana. Un tiempo de contacto suficiente del desinfectante con la clula
es por lo tanto requerido y es un punto crtico para asegurar desinfeccin y alcanzar el
propsito general de la mayora de desinfectantes, que es reducir la poblacin en un orden
de 5 unidades logartmicas en 5 minutos de contacto en una prueba de suspensin. (Holah,
1995).

En los productos que forman espuma o son geles los tiempos de aplicacin suelen ser
superiores a 5 minutos, alcanzando tiempos de 10 a 15 minutos para espumas y superiores
de 15 para geles. Por otro lado, el tiempo de aplicacin va ligado a la concentracin de
desinfectante aplicada. Cuando se utilizan concentraciones bajas, por lo general, los tiempos
de aplicacin suelen ser mayores y viceversa estando para la mayora de los casos entre 10
y 15 minutos (Herruzo, 2000).

2.8.7 CONCENTRACIN

Cuando se aplica una preparacin de desinfectante sobre una superficie o en una prueba de
suspensin, la relacin entre muerte microbiana y concentracin de desinfectante no es
lineal, pero se sigue una tpica curva de muerte microbiana. En esta curva las poblaciones se
resisten a la muerte a bajas concentraciones de desinfectante, pero cuando la concentracin

42
se aumenta este punto se alarga hasta que la mayora de la poblacin sucum b e a l
desinfectante (Holah, 1995).

2.8.8 FORMULACIN

La mayora de los desinfectantes son usados en soluciones acuosas, las soluciones

alcohlicas de formaldehdo y glutaraldehdo no son siempre ms activas que aquellas
soluciones acuosas de similar espectro. Los desinfectantes fenlicos contienen agentes
activos de superficie para promover la solubilidad de compuestos activos.

Los compuestos de amonio cuaternario son tambin formulados con detergentes, pero slo
tipos no inicos son compatibles y la actividad de la frmula final debe ser confirmada
mediante pruebas microbiolgicas.

La compatibilidad de los detergentes para la combinacin con desinfectantes clorados y

yodados debe ser tambin verificada. El espectro antibacterial de formulaciones fenlicas
est influenciado por los tipos de fenoles usados. Algunos son ms activos contra bacterias
Gram positivas y otros contra bacterias Gram negativas (Garnedner, 1991).

2.9 CARACTERSTICAS DE UN BUEN DESINFECTANTE.

Ningn agente antimicrobiano solo es mejor o ideal para el propsito requerido. Si existiera
un desinfectante ideal tendra que cumplir con los siguientes requisitos:

2.9.1 ACTIVIDAD ANTIMICROBIANA

La sustancia a utilizar debe ser capaz de matar microorganismos, teniendo en cuenta que a
baja concentracin deber tener un amplio espectro de accin (Pelczar, 1994).

43
2.9.2 CONCENTRACION DEL AGENTE

Muchos desinfectantes solo son efectivos frente a bacterias cuando se utiliza altas
concentraciones del mismo. Otros pueden estimular, retardar o incluso destruir el
microorganismo a concentraciones muy bajas. Sin embargo, la concentracin requerida para
producir un efecto dado, as como el espectro de concentracin con el cual es demostrable
el efecto, vara con el desinfectante, el organismo y el mtodo de prueba.

Existe una relacin entre el desinfectante utilizado y el tiempo requerido para destruir una
fraccin de la poblacin. Esta se representa con la siguiente ecuacin:

n
C t= K

Donde C es la concentracin del agente, t es el tiempo requerido para destruir una fraccin
dada de la clula y n y K son constantes (Joklink, 1986).

Con los compuestos fenlicos, un cambio en la concentracin del desinfectante tiene un

notable efecto sobre la velocidad de desinfeccin, o sea, la reduccin de la concentracin a
la mitad incrementa en aproximadamente 64 veces al tiempo requerido para la esterilizacin.
Sin embargo, con muchos desinfectantes, el efecto es menos dramtico (Joklink, 1986).

2.9.3 ESTABILIDAD

Los cambios en la estabilidad de la sustancias debern ser mnimos y no afectar

considerablemente la accin germicida (Pelczar, 1994).

2.9.4 SOLUBILIDAD

La sustancia deber ser soluble en agua y otros disolventes en la medida necesaria para uso
eficaz (Pelczar, 1994).

44
2.9.5 TOXICIDAD

La sustancia utilizada no deber ser txica para los hombres y animales, pero si deber ser
letal para los microorganismos.

2.9.6 HOMOGENEIDAD

La preparacin deber ser uniforme en su composicin de manera que los ingredientes

activos se encuentren en cada aplicacin. Las sustancias qumicas puras son uniformes,
pero la mezcla de sustancias puede traer como consecuencia perdida de homogeneidad.

2.9.7 NO DEBER REACCIONAR CON MATERIAL ORGNICO EXTRAO.

Muchos desinfectantes tienen afinidad por las protenas y otros materiales orgnicos.
Cuando se usan estos desinfectantes en situaciones en las que adems de bacterias hay
cantidades considerables de material orgnico, muy poco, si no es que nada del
desinfectante, estar disponible para actuar contra los microorganismos (Pelczar, 1994).

2.9.8 NO DEBER CORROER NI TEIR

No deber producir manchas u otras alteraciones en los metales, o teir y daar las telas.

2.9.9 PROPIEDADES DESODORANTES

Aunque no es ideal, es deseable que tenga atributos desodorantes as como desinfectantes.

Lo ideal es que el desinfectante por si mismo tenga olor agradable o sea inodoro.

45
2.9.10 CAPACIDAD DETERGENTES

Un desinfectante que a la vez sea detergente (agente limpiador) lograr dos objetivos pues
la accin limpiadora aumentar la eficacia del desinfectante (Pelczar, 1994).

2.9.11 DISPONIBILIDAD

El compuesto deber estar disponible en grandes cantidades y a un valor razonable.

(Pelczar, 1994).

2.9.12 TIEMPO DE EXPOSICIN

Al exponer las bacterias a una concentracin determinada del agente bactericida, incluso en
exceso, no todos los organismos mueren al mismo tiempo, sino que hay una disminucin
gradual en el nmero de clulas vivientes.

La desinfeccin se considera un proceso en el cual las bacterias son destruidas durante u n

tiempo razonable, pero hay diversas opiniones acerca de cual debera ser este tiempo
(Joklink, 1986).

2.10. LEGISLACIN NACIONAL E INTERNACIONAL QUE NORMALIZA LA INDUSTRIA

FARMACUTICA

a. BPM Informe 32 OMS

Cada uno de los aspectos de fabricacin de productos farmacuticos y cosmticos debe ir

acompaado de un elevado nivel de saneamiento e higiene, el cual debe abarcar el
personal, instalaciones, equipos y aparatos, materiales y recipientes para la produccin,
productos de limpieza y desinfeccin, y todo aquello que pueda ser fuente de contaminacin

46
del producto. Todas estas posibles fuentes deben ser eliminadas mediante un programa
amplio de saneamiento e higiene.

Es sumamente importante el saneamiento de reas limpias. Deben limpiarse en forma

completa y con frecuencia y de conformidad con un plan escrito aprobado por el
departamento de control de calidad. En caso de que se empleen desinfectantes, debe
usarse ms de un tipo cambindolos peridicamente. Durante los controles peridicos la luz
ultravioleta no debe ser usada en sustitucin de la desinfeccin qumica.

Los desinfectantes y detergentes deben controlarse para detectar su posible contaminacin

microbiana; las diluciones deben mantenerse en recipientes limpios y no deben ser
guardados por mucho tiempo a no ser que hayan sido esterilizados. Si un recipiente est
parcialmente vaci no debe rellenarse (Informe 32 OMS, 2003).

La fumigacin de las reas limpias puede ser til para reducir la contaminacin
microbiolgica en lugares inaccesibles.

Durante las operaciones, las reas limpias deben controlarse a intervalos preestablecidos,
mediante el conteo microbiano del aire y de las superficies; cuando se llevan a cabo
operaciones aspticas, dicho control debe ser suficientemente frecuente como para asegurar
que el ambiente est dentro de las especificaciones (Informe 32 OMS, 2003).

2.11 PROCEDIMIENTOS OPERATIVOS ESTANDAR DE SANEAMIENTO (POES).

Estos procedimientos describen las tareas de saneamiento. Se aplican antes, durante y

despus de las operaciones de elaboracin. Estos son un requerimiento fundamental para la
implementacin de sistemas que aseguren la calidad de los medicamentos.

Para la implementacin de los POES, al igual que en los sistemas de calidad, la capacitacin
y seleccin del personal responsable cobra suma importancia.

47
Los POES deben identificar procedimientos de saneamiento preoperacional y deben
diferenciarse de las actividades de saneamiento que se realicen durante las operaciones en
lneas generales, una empresa elaboradora debe disponer, como mnimo de los siguientes
POES:

Lavado y antisepsia de manos.

Saneamiento de lneas de produccin.

Saneamiento de reas de recepcin.

Depsito de materias primas.

Intermediarios y productos terminados.

Saneamiento de lneas de saneamientos internas y externas de la planta.

Saneamiento de paredes, techos, zcalos, pisos y ventanas.

Una de las caractersticas invalorables de la aplicacin de los POES es la posibilidad de

responder inmediatamente frente a fallas en la calidad de los productos, debidas a un
problema de higiene. Sin olvidar que un buen programa de saneamiento, tiende a minimizar
la aparicin de tales fallas. Entonces, ms all de la obligatoriedad de los POES, es
indispensable entender que la higiene determina un conjunto de operaciones que hace parte
integrante de los procesos de Buenas prcticas de manufactura (BPM). As la eficacia de un
POES depende solo de los mtodos y los agentes de saneamiento utilizado (Surez, 2006).

Cada establecimiento debe tener un plan escrito que describa los procedimientos diarios
que se llevarn a cabo durante y entre las operaciones, as como las medidas correctivas
previstas y la frecuencia con la que se realizarn para prevenir la contaminacin directa o
adulteracin de los productos ( INSEC, 2007).

2.11.1 REDACCION DE LOS POES

Cada sector que genere un POE deber consultar a Garanta de Calidad para una correcta
asignacin del mismo.

Los POES deben ser generados por cada sector en conjunto con Garanta de Calidad el cual

48
indicar los lineamientos generales del mismo como ser: formato, letra (tipo y tamao), tipo
39
de hoja, etc. . En general, los procedimientos operativos debern ser elaborados con base
en la estructura documental interna de cada industria donde se implemente el programa de
limpieza y desinfeccin.

2.12 RESEA HISTRICA DE ANGLOPHARMA S.A.

2.12.1 HISTORIA

ANGLOPHARMA S.A. fue constituida el 1 de marzo de 1984, con 25 personas, quienes

hacan parte de su planta, la cual hoy en da se ha incrementado a una cifra superior a los
180 colaboradores a nivel nacional.

Es una compaa farmacutica dedicada a la elaboracin y comercializacin de

medicamentos para consumo humano que comenz con 15 sustancias aproximadamente
como parte de su portafolio el cual ahora se apoya en ms de 130 sustancias y mltiples
presentaciones.

2.12.2 POLTICA DE CALIDAD

El Sistema de Gestin de la Calidad se orienta hacia la satisfaccin de las necesidades de

los clientes, apoyados en el cumplimiento de la normatividad vigente, con nfasis en las
buenas prcticas de manufactura.

ANGLOPHARMA S.A. est comprometido con el mejoramiento continuo de sus procesos,

asimismo de facilitar un ambiente integral que permita el desarrollo y bienestar del talento
humano, la participacin de sus proveedores en la cadena de calidad, obtener mayores
niveles de productividad, asegurar solidez y ofrecer mejores utilidades a sus accionistas.

49
2.12.3 VISIN

Estar en el 2009 dentro de los 12 primeros laboratorios de genricos en Colombia; por

ventas en unidades y en pesos en el mercado nacional y por ventas en os mercados de 5
pases de Centroamrica y el Pacto Andino.

2.12.4 MISIN

ANGLOPHARMA S.A. es una empresa dedicada a elaborar y comercializar productos

farmacuticos de excelente calidad para consumo humano, conforme a la tica y el
cumplimiento de la normatividad vigente, con el fin de satisfacer las necesidades de nuestros
clientes y del consumidor final, cubriendo los mercados genrico de consumo y de marca.

50
3. PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

La evaluacin y actualizacin de un programa de limpieza y desinfeccin encaminado al

mejoramiento continuo de los procesos requiere de un compromiso de todo el personal del
laboratorio farmacutico, ya que gracias al apropiado manejo que se le de a dicho programa,
va a depender en gran medida la calidad de los productos ofrecidos a los consumidores.

Por otro lado, un mal manejo de este puede generar alteraciones en la salud de los
consumidores y retardar la evolucin competitiva y la imagen corporativa de la empresa.

El laboratorio ANGLOPHARMA S.A. actualmente cuenta con un programa de limpieza y

desinfeccin el cual requiere mejoras y actualizaciones en la evaluacin y uso de los
desinfectantes, teniendo en cuenta que en diferentes pruebas microbiolgicas de ambientes
en reas controladas se han encontrado desviaciones en los resultados frente a los
estndares establecidos internamente para el rea de manufactura, las cuales estn siendo
frecuentes y se ven reflejados en los resultados obtenidos en las muestras de ambientes
que se realiza semanalmente en el rea blanca. Por lo tanto, no existe garanta en el
cumplimiento de la sanitizacin; al no tomar las medidas de saneamiento necesarias, se
podra ver afectada la calidad de los medicamentos a comercializar. Con este trabajo se
busca actualizar, apoyar y reforzar los procedimientos de limpieza y desinfeccin existentes
actualmente en ANGLOPHARMA S.A.

51
4. JUSTIFICACIN

Para los laboratorios farmacuticos es de vital importancia prever y controlar la aparicin de

microorganismos que puedan alterar la composicin de los principios activos, l o s
excipientes, sus productos, su accin y por ende la calidad de los mismos.

Al ingerir productos que no representen buena calidad puede llegar a generarse ciertas
patologas vindose reflejadas no en su mejora, sino en un deterioro de la salud. Es por este
motivo que existen sistemas de reglamentacin nacional e internacional como los son las
BPM, que dan lineamientos generales para implementar procedimientos que garanticen la
calidad de los productos de las industrias farmacuticas c o m o ANGLOPHARMA S . A . ,
basndose en controles microbiolgicos, desde la recepcin de la materia primas y
materiales de envase primario hasta el final del proceso.

Las diferentes actividades llevadas acabo en ANGLOPHARMA S.A. requieren de un

adecuado proceso de limpieza y desinfeccin para evitar el desarrollo de microorganismos
que pueden presentarse en este; para ello es esencial identificar los puntos crticos de
contaminacin que se pueden originar durante todo el proceso, el o los tipos de
microorganismos que puede interferir, y as establecer el mtodo de limpieza a implementar
como el o los tipos de desinfectantes a utilizar, tendiendo en cuenta que no afecten l a
propiedades organolpticas, qumicas o fisicoqumicas de los productos y la seguridad del
personal que manipula los mismos.

ANGLOPHARMA S.A. tiene como meta ampliar su mercado y comercializar sus productos
dentro y fuera del pas, por lo que ha visto la necesidad de actualizar e implementar un
adecuado programa de limpieza y desinfeccin teniendo en cuenta que este juega un papel
esencial para alcanzar dicho objetivo. Adems de esto, es indispensable dar a conocer de
manera fcil el programa a las personas que realizan el trabajo de la limpieza y desinfeccin
para que sea llevado acabo de forma adecuada; por lo que se hace necesaria la elaboracin
de cartillas que ayudarn en el proceso de capacitacin y entendimiento.

52
5. OBJETIVOS

5.1 Objetivo general:

Revisar, evaluar y actualizar el programa de limpieza y desinfeccin de ANGLOPHARMA

S.A, para que se garantice y se controle un bajo nivel carga microbiana en las reas blancas
de manufactura, siguiendo los parmetros nacionales e internacionales.

5.2 Objetivos Especficos

Realizar la evaluacin de los desinfectantes utilizados en el rea de manufactura con

cepas propias de esta, con el fin de determinar o ratificar las concentraciones
ptimas de los desinfectantes a utilizar.

Elaborar cartillas instructivas de fcil manejo para los operarios que llevan a cabo el
proceso de limpieza y desinfeccin en las diferentes reas de manufactura.

Capacitar y entrenar el personal del laboratorio para que ejecute de forma adecuada
el programa establecido.

53
6. MATERIALES Y MTODOS

6.1 El diseo de la investigacin (Experimental o Investigativos): El estudio que se

realiz fue de tipo investigativo y experimental, se realiz una lista de chequeo con el fin de
evidenciar el estado actual del rea de manufactura basada en lineamientos dados por el
informe 32 de la OMS, posterior a esto, se realiz un anlisis retrospectivo por medio de
datos estadsticos, en donde se tomaron los resultados de la toma de ambientes semanales
del rea de manufactura de enero a octubre de 2008. La parte experimental se llev a cabo
por medio de una revisin-evaluacin del M-VRC-001-016 ( Manual de tcnicas de anlisis
microbiolgicos) de Anglopharma S.A. con el fin de recomendar los parmetros para mejorar
el protocolo de evaluacin de desinfectantes establecido actualmente en Anglopharma S.A.
Para esto se evaluaron cuatro (4) desinfectantes en distintas concentraciones para
determinar la concentracin adecuada a utilizar o ratificar la que actualmente es utilizada en
las reas de manufactura.

6.1.1 Poblacin de estudio y muestra: Los objetos de estudio fueron cuatro desinfectantes
(Hipoclorito de sodio, cloruro de benzalconio al 0.5%, 1% y 1.5%, Tego 51 al 0.1%, 0.5% y
1% y Alcohol etlico a l 70%), empleados en ANGLOPHARMA S.A. en el rea de
manufactura, los productos fueron evaluados a la concentracin de uso, una por encima y
una por debajo en todos los casos.

6.1.2 Variables del estudio: La variable dependiente del estudio correspondi a las
diferentes concentraciones a evaluar de los desinfectantes utilizados actualmente en el rea
de manufactura, y la variable independiente correspondi a las cepas de referencia tomadas
del rea de manufactura Levadura Rhodotorula sp, Hongo Neurospora sp y Bacteria Gram
positiva Staphylococcus sp.

6.2 Materiales

Tubos tapa rosca de 16 x 150 mm.

Pipeta de 5ml.
Pipetas de 2ml.
Micropipeta de 100 a 1000 l.

54
 Cajas de petri plasticas.
Asas desechables.
Gradilla metlica

6.2.1 Medios de Cultivo

Caldo casoy.
Agar Plate Count.
Agar YGC.
Agar VRB.

6.2.2 Cepas

Cepas puras de microorganismos a. evaluar obtenidas del rea de manufactura (Gram

positivas, hongos y levaduras).

6.2.3 Reactivos

NaCl al 0.9%estril.
Solucin de Cloruro de Bario al 1 %.
Solucin de Acido Sulfrico al 1 %.
Tego 51 (0.1%, 0.5% y 1.5%).
Hipoclorito de sodio (0.5%, 1% y 1.5%).
Cloruro de Benzalconio (0.5%, 1% y 1.5%).
Alcohol al 70%.

6.2.4 Equipos

Incubadora 36C 3C.

o o
Incubadora 24 C 3 C.
Autoclave.

55
6.3 Metodologa

6.3.1 Observaciones tenidas en cuenta segn manual de tcnicas microbiolgicas

evaluacin de desinfectantes (M-VRC-001-016) de Anglopharma S.A

Se deben preparar por lo menos tres (3) concentraciones diferentes de cada

desinfectante.
Se debe trabajar con cultivos que no tengan ms de 48h para bacterias y 5 a 7 das
para hongos y levaduras.
o
Los tubos del patrn de Macfarland preparados se conservan entre 8 y 30 C
protegidos de la luz.
No se deben abrir los tubos de MacFarland despus de preparados y deben ser
sellados con papel parafinado.
Si se observan partculas grandes en la suspensin se deben descartar los tubos y
preparar nuevamente la suspensin.
Antes de usar los tubos de MacFarland deben ser agitados mecnicamente.
Si el producto a evaluar es turbio realizar viabilidad en caja para confirmar
resultados.

6.3.2 Modificaciones a la tcnica de la norma NTC 2455 del ICONTEC segn

requerimientos de ANGLOPHARMA S.A:

a. No se realizo con cepas ATCC debido a que en la empresa ya se haba realizado un

estudio inicial con estas.
b. Se aislaron cepas propias del rea blanca de ANGLOPHARMA S.A ya que se buscaba
observar el comportamiento del desinfectante frente a cepas propias del rea
c. No se realizo comparacin con el fenol debido a que no haban las condiciones necesarias
para manejar ese tipo de reactivos puesto que son txicos y no se contaba con las medidas
de seguridad necesarias para su manipulacin..

6.3.3 Obtencin de las cepas a evaluar:

a. Para la obtencin de los microorganismos en el rea blanca de Anglopharma s.a se

tomaron muestras de ambientes con el equipo MAS 100ECO instrumento que aspira el aire
atravs de una placa preformada dirigiendo las partculas de aire hacia la superficie del
medio de cultivo especifico para la recuperacin de cada microorganismo. Para obtener

56
estos se utilizo medio Plate Count para la recuperacin de bacterias totales, para
recuperacin de bacterias Gram negativas agar VRB (Violet Red Bile) y en medio YGC
(Yeast Glucose Chloranfenicol) para la recuperacin de hongos y levaduras, posteriormente
o o
estas fueron incubadas a 37 C y 25 C respectivamente.

b. A partir de las colonias obtenidas se realiz la caracterizacin morfolgica por medio de

la coloracin de Gram, posterior a esto se realiz un aislamiento de las colonias presentes
en medios nutritivos.

c. La identificacin de microorganismos por caractersticas de las colonias en medios

slidos no garantizan la pureza del microorganismo ni la especie a la que pertenece debido
a esto no puede ser fiable para una identificacin, e s por esta razn que se realiz el
aislamiento de las cepas y una posterior caracterizacin mediante un sistema apropiado para
este fin.
d. Una vez obtenido el crecimiento en el medios slidos esta cepa fue enviada a
laboratorios Farmacoop en donde se realiz una identificacin bioqumica por medio de un
montaje de un sistema API 20A para identificacin de bacterias Gram Positivas debido a que
el laboratorio Anglopharma S.A no contaba con esta prueba.

6.3.4. Preparacin escala de MacFarland

La finalidad, es establecer una relacin entre una precipitacin qumica y una suspensin
bacteriana. Crearon 10 estndares de forma que se pudo detectar la concentracin de
nuestras diluciones bacterianas de manera aproximada, ya que depende de factores como el
tamao de la bacteria y la formacin de agregados. La escala se basa en la capacidad de
precipitacin del cloruro de bario en presencia de cido sulfrico. Con el objetivo de
estandarizar la cantidad de bacterias que se emplean en las pruebas de susceptibilidad
antimicrobiana se preparo una escala de MacFarland que es una serie de patrones de
turbidez diferente, esto permiti realizar una estimacin de la densidad de las suspensiones
microbianas. Estos patrones estn designados por el nmero de tubos de la escala descrita
inicialmente por McFarland, la preparacin se realizo con un estndar de BaSO4. El principio
se baso en la comparacin de la densidad de las suspensiones microbianas a evaluar contra
una ampolla de turbidez conocida.

57
Medir y servir en cada tubo los volmenes que aparecen en la siguiente tabla.

TUBO Solucin al Solucin al 1% Densidad

NO 1% de BaCl2 de H2SO4 mL aproximada
mL correspondiente
a bacterias/mL
0.5 0.05 9.95 150000.000
1 0.1 9.9 300000.000
2 0.2 9.8 600000.000
3 0.3 9.7 900000.000
4 0.4 9.6 1.200000.000
5 0.5 9.5 1.500000.000
6 0.6 9.4 1.800000.000
7 0.7 9.3 2.100000.000
8 0.8 9.2 2.400000.000
9 0.9 9.1 2.700000.000
10 1.0 9.0 3.000000.000

Tabla 2. Volmenes correspondientes a la preparacin de la escala de McFarland.

58
6.3.4 Determinacin de la concentracin Mnima inhibitoria (CMI)

Figura 1. PREPARACIN DEL INOCULO

Inicio

Preparacin del
inoculo

Transferir a tubos tapa

rosca 9mL de NaCl al
0.9%

Esterilizar a 121oC
durante 15 min.

59
Figura 2: PREPARACION DE LA TECNICA CONCENTRACIN MINIMA INHIBITORIA
(CMI)

Tomar placas con

suspensin de m.o

Transferir a tubo tapa

rosca NaCl 0.9%

Homogenizar

Comparar tubo 1 de
McFarland

60
 Determinar si la
concentracin No
bacteriana Ajustar suspensin
corresponde tubo 1 de bacteriana
McFarland

Si

3x108m.o/mL.

10-2 10-3
10-1 1ml 1ml

Por cada concentracin de desinfectante y cepa a estudiar

3.6 mL de 2 mL de caldo Casoy

caldo Casoy

Esterilizar a 121oC X 15 min

Tomar el tubo con 3.6 mL y marcar como 1 y los 11

restantes de 2 al 12

61
 B

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12

Transferir 2mL del tubo 1 al 2 y del 2 al 3 Descartar

Adicionar 0.4 mL de desinfectante
y agitar suavemente.
y as sucesivamente hasta el #12 2mL .

Adicionar 0.1mL del m.o a

evaluar de la dilucin 10_3
preparada anteriormente a cada
tubo
Repetir la prueba con cada m.o
a evaluar y con las diferentes
Incubar a 36oC +/- X 24- 48h para concentraciones de
bacterias y Hongos a 24oC X 6 das. desinfectantes

Observar crecimiento y turbidez e identificar el

primer tubo que presente crecimiento ( ).

Comparar con la tabla # 2, este indica

la CMI de desinfectante que inhibe el
crecimiento de los m.o evaluados.

Resultado de la evaluacin de
desinfectantes expresado en mg/L

Fin

62
7. RESULTADOS Y DISCUSION

7.1 LISTA DE CHEQUEO

A continuacin se presentan los resultados que se obtuvieron con la lista de chequeo

realizada en el rea de manufactura en donde se evidenci el estado actual del proceso y
todas las actividades que en esta se realizan. Se pudo observar que cumplen con la mayora
de las normas y lineamientos estipulados en el informe 32 de la OMS. Se observ que falta
capacitacin al personal sobre los procesos de limpieza y desinfeccin y claridad en
conceptos bsicos de este. Asimismo se encontr fallas en la eliminacin de la materia
orgnica debido a que no cuentan con elementos de fcil desinfeccin ya que utilizan
escobas y recogedores que no deben ser usados en el rea blanca por norma BPM.

Pregunta Si No Observaciones
Las reas de produccin son de X
acceso restringido solo para personal N.A
autorizado?
Las etapas de fabricacin desde la X
pasada hasta el envasamiento
primario para cada grupo de principio N.A
activo se realiza en reas o
instalaciones independientes y
autnomas?
Todas las reas poseen esclusas X
independientes para ingreso de N.A
operarios y de materiales?
Poseen diferenciales de presin? X N.A
Existe un sistema de extraccin de X
aire que evite descargar contaminante N.A
al medio ambiente?
Se lleva a cabo recirculacin del aire X
que egresa del rea? N.A
Se encuentran disponibles en cada X
rea o sector productivo todos los N.A

63
procedimientos operativos
normalizados (POE) que se apliquen
en cada uno de ellos?

Para cada procedimiento estn X

claramente definidos el propsito,
alcance, referencias y N.A
responsabilidades?

Se realizan continuamente X Falta ms capacitacin acerca de

capacitaciones y seguimiento a los procesos de limpieza y desinfeccin,
procedimientos establecidos? no hay claridad en muchos conceptos.
Los procedimientos exhibidos estn X
vigentes? N.A
Figura las firmas/ inicial del personal X
que emite, revisa y aprueba el N.A
documento?
Existen los registros de las acciones X
indicadas por los procedimientos? N.A
Los rtulos / etiqueta adheridos a los X
recipientes, equipos y otros elementos N.A
auxiliares de produccin y reas son
claros e inequvocos?
Se exhibe la documentacin X
relacionada con el proceso que se N.A
esta llevando a cabo en cada rea?
La documentacin se completa en el X
momento en que se desarrollan las N.A
acciones?

Estn disponibles los procedimientos X

de operacin y uso de cada equipo? N.A
Se cuenta con procedimientos X Si pero no son utilizados, ya que no
detallados y claros sobre el proceso hay claridad en muchos conceptos y
de limpieza y desinfeccin en reas de estos no se siguen totalmente. Hay

64
manufactura? pasos que no son realizados como lo
estipula en procedimiento.
Se realiza procesos de limpieza y X
Sanitizacion al finalizar cada proceso N.A
productivo?
Se cuenta con un cronograma d e X Acepcin de que el desinfectante no
rotacin de desinfectantes y este se este disponible.
cumple?
8. AREAS
Esta el rea fsicamente separada de X
las dems dependencias por paredes N.A
u otro tipo de separaciones?
Las superficies de paredes pisos y X
cielo rasos son lisas y de fcil limpieza N.A
y las unidades pared-pared piso pared
y cielo raso son de tipo sanitario?
Se cuentan con procedimientos claros X
de limpieza y Sanitizacin de pisos, N.A
paredes y vidrios en el rea de
manufactura?
Estn en buenas condiciones de X
conservacin e higiene? N.A
Se cuenta con procedimientos claros X
para la preparacin y uso de los N.A
sanitizantes?
Se verifica que el sanitizante usado X
este de acuerdo con lo establecido en N.A
el cronograma de sanitizantes?
A excepcin de las puertas todas las X
aberturas estn selladas? N.A
Las tuberas, artefactos de X
iluminacin, puntos de ventilacin y N.A
otros servicios estn diseados de tal
forma que permite su fcil limpieza?
La ventilacin es efectiva y con X N.A

65
adecuacin de (aire, temperatura,
humedad y filtracin) si lo requieren
las materias primas y los productos
manipulados?
Se mide y registra la temperatura y X
humedad relativa, si los productos los N.A
requieren?
Se verifica la integridad de los filtros? X N.A
Existen registros? X N.A
Existe un POE de revisin y cambio X N.A
de los mismos?
Se toman las precauciones necesarias X N.A
cuando se trabaja con materias primas
fotosensibles?

Cuentan con un sistema para X

extracciones localizadas de polvo? N.A
Son efectivos en relacin a las X
cantidades de polvo generado en los N.A
procesos?
Se evita el riesgo de contaminacin X
del medio ambiente a travs del N.A
sistema de extraccin de polvos?
Existen sistemas de segurid a d e n X
aquellas reas donde se emplean N.A
inflamables?
Las reas estn limpias? X N.A
Se utilizan escobas y recogedores X Las BPM no permite la utilizacin de
para la limpieza de las reas de este tipo de elementos en reas
manufactura? blancas porque no son de fcil
desinfeccin.
Pasillos y vestieres son sanitizados X Solo son limpiados ms no
diariamente? sanitizados.
Se cuenta con procedimientos donde X No hay claridad con los das de
se estipula la frecuencia de la limpieza Sanitizacion, ni con la frecuencia de

66
y Sanitizacion? estos.
Se establece un periodo de vigencia X
de la limpieza? N.A
Estas especificaciones estn X Solo se establece que la limpieza se
establecidas en el POE de limpieza de debe realizar cada vez que se termine
cada rea? un proceso mas no cada cuanto se
debe limpiar y sanitizar las reas.
Existen recipientes para la recoleccin X
de residuos identificados como tales? N.A
Estn bien tapados? X N.A
9. EQUIPAMIENTO
La ubicacin de los equipos facilita su X
limpieza as como la del rea en la N.A
que se encuentran?
Se cuenta con procedimientos claros X
de limpieza y Sanitizacion de equipos? N.A
Se cuenta con procedimientos claros X
para la preparacin y uso de los N.A
sanitizantes?
Se cuenta con un cronogram a d e X
rotacin de sanitizante de equipos? N.A
Se verifica sanitizante usado este de X
acuerdo con lo establecido en el N.A
respectivo cronograma?
Los equipos en reparacin se X
identifican como tales? N.A
Todos los recipientes, equipos y X
elementos auxiliares, son limpiadas N.A
despus de su uso?
Se establece un periodo de vigencia X No esta establecidos en los periodos
de la limpieza de equipos? de vigencia de la limpieza de los
equipos solo se estipula limpieza
despus de un proceso mas no l a
vigencia de esto.
Estas indicaciones estn establecidas X Falta claridad en los periodos de

67
en el POE de limpieza de cada vigencia de la limpieza y Sanitizacion.
equipo?
Para secadores de lecho fluido existe X
un juego de mangas para cada
producto, o aplican proceso de N.A
validacin de limpieza que garantice la
no contaminacin cruzada?
Esta libre de impurezas el aire X
inyectado en los equipos de N.A
recubrimiento?
Se utilizan elementos de proteccin X
para las operaciones que lo N.A
requieren?
Cuales? Caretas, guantes, uniforme, gafas
todo dependiendo de la operacin a
realizar.
Se utiliza vestimenta acorde a las X
tareas que se realizan? N.A
10. OPERACIONES
Se utilizan elementos de proteccin X
para las operaciones que lo N.A
requieren?
Se utiliza vestimenta acorde a las X
reas y tareas que se realizan? N.A
Los operarios estn con los uniformes X
limpios y en buenas condiciones? N.A
Antes de iniciar el proceso de X
elaboracin se verifica que el rea de
trabajo y los equipos estn limpios y N.A
libres de materiales de una operacin
anterior y/o material extraola proceso
de fabricacin?
El personal de produccin realiza la X
verificacin de peso de las materias N.A
primas empleadas en la elaboracin

68
de cada lote?
Se realizan controles microbiolgicos X
en los ambientes controlados? N.A
Frecuencia de controles X Una vez por semana
microbiolgicas en las diferentes
reas?
Se exhiben registros? N.A
El personal que ingresa al vestuario se X
encuentra ya con ropa protectora de N.A
planta?
Los materiales, equipos y X No siempre se sanitizan los
contenedores estn sanitizados? contenedores con materia prima antes
de ingresar al cubculo de
manufactura.
Ingresan al rea asptica por esclusa? X N.A

Tabla 1. Lista de chequeo de reas, equipamiento y operaciones del rea de

7.2 ANALISIS RETROSPECTIVO

A continuacin se presentan los resultados obtenidos en la estadstica de toma de muestras

de ambientes semanales de las diferentes reas de manufactura en ANGLOPHARMA S. A.
de Enero a Octubre del 2008, en donde se evidenci los procesos de limpieza y desinfeccin
que se llevaron a cabo en todo el rea de procesamiento.

Mesfilos
3
Nivel de alerta: 60-80 UFC/m
3
Nivel de Accin: 80-100 UFC/m
3
Nivel Mximo: 100UFC/m

Hongos
3
Nivel de alerta: 10 UFC/m
3
Nivel de Accin: 20 UFC/m
3
Nivel Mximo: 30 UFC/m

69
 Promedio UFC/m3 de Enero a Octubre del 2008
Tabletera # 1

100
90
80
70
3 60
UFC/m 50
40
30
20
10
0
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
Meses

Mesfilos (UFC/m3)

3
FIGURA 1. Promedio de las UFC/m de mesfilos en el rea de tabletera # 1.

Promedio ufc/m3 de Enero a Octubre de 2008

TABLETERIA # 1

30
25
20
UFC/m3

15
10
5
0
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
MESES

Hongos (ufc/m3)
3
FIGURA 2. Promedio de las UFC/m de hongos en el rea de tabletera # 1.

70
 Promedio UFC/m3 de Enero a Octubre del 2008
en Tabletera # 2

100
90
80
70
3
60
UFC/m 50
40
30
20
10
0
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
Meses

Mesfilos (UFC/m3)

3
FIGURA 3. Promedio de las UFC/m de mesfilos en el rea de tabletera # 2.

3
Promedio UFC/m de Enero a Octubre de 2008
TABLETERIA # 2

30
25
3
UFC/m 20
15
10
5
0
1 2 3
4 5 6 7 8 9 10
MESES

Hongos UFC/m3

3
FIGURA 4. Promedio de las UFC/m de hongos en el rea de tabletera # 2.

71
 3
Promedio UFC/m de Enero a Octubre del 2008 en
Tabletera # 3
100
90
80
70
60
3
UFC/m 50
40
30
20
10
0
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10

Meses
3
Mesfilos ( UFC/m )

3
FIGURA 5. Promedio de las UFC/m de mesfilos en el rea de tabletera # 3.

3
Promedio UFC/m de Enero a Octubre de 2008
TABLETERIA # 3
30
25
UFC/m
3 20
15
10
5
0
1 2 3
4 5 6 7 8 9 10
MESES

Hongos UFC/m3

3
FIGURA 6. Promedio de las UFC/m de hongos en el rea de tabletera # 3.

72
 Promedio UFC/m3 de Enero a Octubre del 2008 en
Tabletera # 4
100
90
80
70
60
3
UFC/m 50
40
30
20
10
0
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
Meses

Mesfilos ( UFC/m3)

3
FIGURA 7. Promedio de las UFC/m de mesfilos en el rea de tabletera # 4.

3
Promedio UFC/m de Enero a Octubre de 2008
TABLETERIA # 4
30
25
20
3
UFC/m 15
10
5
0
1 2 3
4 5 6 7 8 9 10
MESES

Hongos UFC/m3

3
FIGURA 8. Promedio de las UFC/m de hongos en el rea de tabletera # 4.

73
Al observar los resultados numricos obtenidos durante 10 meses en las cuatro reas de
3
tabletera se encontr que en ninguno de los casos se supero el nivel mximo de UFC/m d e
microorganismos segn el caso, teniendo en cuenta que el rango permitido de mesfilos es
3 3
mucho mas amplio (100 UFC/m ) con relacin a los Hongos (30 UFC/m ).

Adicionalmente se observ que los recuentos estuvieron por debajo de el lmite de alerta y
de accin en todas las reas exceptuando el rea de tabletera #1 durante el noveno y
dcimo mes en donde se super el lmite de alerta que tiene en este caso un punto mximo
3
de 10 UFC/m , Esta recopilacin de datos sugieren que si bien es cierto a grandes rasgos
los resultados son satisfactorios, existen puntos crticos de control en donde se hace
necesario verificar los procesos de limpieza y desinfeccin que se estn utilizando.

Promedio de UFC/m3 de Enero a Octubre de 2008 en

Recubrimiento # 2
100
90
80
70
60
3
UFC/m 50
40
30
20
10
0
1 2 3 4 5 6 7 8 9 1
0
Meses
3
Mesfilos (UFC/m )

3
FIGURA 9. Promedio de las UFC/m de mesfilos en el rea de recubrimiento # 2.

74
 3
Promedio UFC/m de Enero a Octubre de 2008
RECUBRIMIENTO # 2

30
UFC/m 3 25
20
15
10
5
0
1 2 3
4 5 6 7 8 9 10
MESES

Hongos (UFC/m3)

FIGURA 10. Promedio de las UFC/m3 de hongos en el rea de recubrimiento # 2.

Los datos arrojados durante el monitoreo microbiolgico en el rea de recubrimiento,

muestran un comportamiento dentro del rango permisible an cuando se evidencian
variaciones durante los diez meses de recuentos transcurridos en cuanto a mesfilos y
hongos respectivamente cumpliendo con los rangos mximos, los cuales fueron demarcados
en la fig. 8 y fig. 9, sin embargo se puede decir que los datos obtenidos en el recuento de
hongos se acercaron sobretodo en el sexto mes al nivel de alerta que de no ser controlado
podra arrojar recuentos indeseados en los meses siguientes.

3
Promedio UFC/m de Enero a Octubre del 2008
en pulverizador
100
90
80
70
60
UFC/m3 50
40
30
20
10
0
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
Meses
Mesfilos (UFCm3)

3
FIGURA 11. Promedio de las UFC/m de mesfilos en el rea de Pulverizador.

75
 3
Promedio UFC/m de Enero a Octubre de 2008
PULVERIZADOR

30
3
25
UFC/m 20
15
10
5
0
1 2 3
4 5 6 7 8 9 10
MESES

Hongos (UFC/m3)

3
FIGURA 12. Promedio de las UFC/m de hongos en el rea de Pulverizador.

En el rea de pulverizador se pudo evidenciar recuentos crecientes a partir del sexto mes de
monitoreo en donde se alcanz el limite de alerta de UFC/m3 para hongos, si bien es cierto
como lo muestra la figura 12, al sptimo mes se tuvo una disminucin considerable de
microorganismos, a partir de este, los recuentos estuvieron en aumento lo que indica errores
y problemas de contaminacin que deben ser controlados.

Promedio UFC/m3 de Enero a Octubre de 2008

Granulacin
100
90
80
70
60 MesfiIos
UFC/m3 50 UFC/m3
40
30
20
10
0
1 2 3 4 5 6 7 8 9 1
0
Meses

3
FIGURA 13. Promedio de las UFC/m de mesfilos en el rea de Granulacin.

76
 3
Promedio UFC/m de Enero a Octubre de 2008
GRANULACIN

30
25
3 20
UFC/m
15
10
5
0
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
MESES

Hongos (UFC/m3)

3
FIGURA 14. Promedio de las UFC/m de hongos en el rea de Granulacin.

El rea de granulacin mostr una tendencia controlada y dentro de los lmites en cuanto al
crecimiento microbiano, sin embargo esto no indica que este libre de peligro de
contaminacin por lo que es de vital importancia continuar con el monitoreo y correcto
proceso de limpieza y desinfeccin de manera continua con el fin de disminuir la carga
microbiana en el caso de mesflos y hongos durante los siguientes meses en esta rea.

3
Promedio UFC/m de Enero a Octubre del 2008 en
Mezclador Stokes
100
90
80
70
60
UFC/m3 50
40
30
20
10
0
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
Meses

Mesfilos (UFC/m3)

3
FIGURA 15. Promedio de las UFC/m de mesfilos en el rea de Mezclador Stokes.

77
 3
Promedio UFC/m de Enero a Octubre de 2008
MEZCLADOR STOKES

30
25
3
UFC/m 20
15
10
5
0
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
MESES

Hongos UFC/m3

3
FIGURA 16. Promedio de las UFC/m de hongos en el rea de Mezclador Stokes.

Promedio UFC/m3 de Enero a Octubre del

2008 En Mexclador
10 Inoxmor Inoxmor
09
0
8
0
7
0
6
UFC/ 0
5
Mm3 0
4
0
3
0
2
0
1
0
0
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
Mese
s
Mesfilos UFC
7///7(/(UFC/m3)
3
FIGURA 17. Promedio de las UFC/m de mesfilos en el rea de Mezclador Inoxmor.

78
 3
Promedio UFC/m de Enero a Octubre de 2008
MEZCLADOR INOXMOR

30
25
3 20
UFC/m
15
10
5
0
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
MESES
Hongos (UFC/m3)

3
FIGURA 18. Promedio de las UFC/m de hongos en el rea de Mezclador Inoxmor.

Las reas de mezclador Stokes e Inoxmor en cuanto a mesfilos arrojaron datos

satisfactorios y controlados segn se muestra en la fig. 15 y 17 respectivamente,
presentando recuentos alejados de los valores mximos permitidos en cada caso; sin
embargo, en cuanto a los recuentos de hongos si se tiene recuentos desfavorables en los
dos casos, el mezclador Stokes mostr una tendencia creciente presentando los recuentos
ms altos en el sexto, octavo y dcimo mes, este ltimo sobrepasa el nivel de accin
acercndose al nivel mximo, lo que indica que puede derivar en un riesgo crtico de
contaminacin; de igual manera los valores obtenidos en el mezclador Inoxmor que si bien
son menores a los anteriormente mencionados, an sobrepasan el nivel de alerta lo que
sugiere tomar medidas preventivas que lleven a disminuir los ndices de contaminacin en
esta rea.

79
 Promedio UFC/m3 de Enero a Octubre de 2008 en
Horno Rae
100
90
80
70
60
3 50
UFC/m
40
30
20
10
0
1 2 3 4 5 6 7 8 9 1
0
Meses

Mesfilos (UFC/m3)

3
FIGURA 19. Promedio de las UFC/m de mesfilos en el rea de Horno Rae.

3
Promedio UFC/m de Enero a Octubre de 2008
HORNO RAE

30
3
25
UFC/m 20
15
10
5
0
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
MESES

Hongos (UFC/m3)

3
FIGURA 20. Promedio de las UFC/m de hongos en el rea de Horno Rae.

80
 Promedio UFC/m3 de Enero a Octubre del 2008
en Horno Glatt
100
90
80
70
3 60
UFC/m
50
40
30
20
10
0
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
Meses

Mesfilos (UFC/m3)

3
FIGURA 21. Promedio de las UFC/m de hongos en el rea de Horno Glatt.

3
Promedio UFC/m de Enero a Octubre de 2008
HORNO GLATT

40
35
30
3
UFC/m 25
20
15
10
5
0
1 2 3 4 5 6 7 8 9
MESES 10

Hongos (UFC/m3)

3
FIGURA 22. Promedio de las UFC/m de hongos en el rea de Horno Glatt.

El comportamiento microbiolgico de las reas de los Hornos Rae y Glatt evidenci reas
controladas y fuera de los niveles de accin, alerta y mximo en el crecimiento de
microorganismos mesfilos, mientras que el crecimiento de hongos en estas mismas reas

81
permite determinar que se sobrepas el limite de alerta en ambos casos durante varios
meses, como se puede ver en la fig. 22, este comportamiento estuvo presente durante tres
meses consecutivos (4,5,6 mes), los limites de accin tambin fueron alcanzados en ambas
reas lo que sugiere no solo una accin preventiva sino correctiva en los procesos de
limpieza y desinfeccin de las mismas, teniendo en cuenta que en el rea del horno Glatt no
solo se super los limites de alerta y de accin sino que en el dcimo mes se present u n
crecimiento significativo de microorganismos que arrojo recuentos mayores al nivel mximo
permitido para esta rea.

3
Promedio UFC/m de Enero a Octubre del 2008 en Implementos
limpios

100
90
80
70
60
Ufc/m3 50
40
30
20
10
0
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
Meses

Mesfilos (UFC/m3)

3
FIGURA 23. Promedio de las UFC/m de mesfilos en el rea de Implementos Limpios.

82
 Promedio UFC/m3 de Enero a Octubre de 2008
IMPLEMENTOS LIMPIOS

40
35
30
UFC/m3
25
20
15
10
5
0
1 2 3 4
5 6 7 8
9 10
MESES
3
Hongos (UFC/m )
3
FIGURA 24. Promedio de las UFC/m de hongos en el rea de implementos Limpios.

El rea de implementos limpios es una de las reas de mayor contaminacin evidencindose

los recuentos ms altos de microorganismos, en donde el crecimiento de mesfilos con
relacin a otras reas es mucho ms alto an sin sobrepasar los limites permitidos en el
proceso de produccin, en cuanto a los recuentos de hongos si se puede mencionar que a
excepcin del primer mes todos sobrepasan limites de alerta y de accin e inclusive del
tercero al sexto mes se sobrepas el nivel mximo permitido volviendo a manifestarse en el
dcimo mes de recuento con un valor limite pero an as mximo, lo anteriormente
mencionado sugiere que esta es una de las reas de mayor cuidado en el procesos de
produccin y control en los procesos de limpieza y desinfeccin.

83
 Promedio UFC/m3 de Enero a Octubre del 2008 en
Encapsulado #1
100
90
80
70
60
UFC/m3 50
40
30
20
10
0
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
Meses
Mesfilos (UFC/m3)

3
FIGURA 25. Promedio de las UFC/m de mesfilos en el rea de Encapsulado # 1.

3
Promedio UFC/ m de Enero a Octubre de 2008
ENCAPSULADO # 1

30
25
3 20
UFC/m
15
10
5
0
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
MESES
Hongos (UFC/m3)

3
FIGURA 26. Promedio de las UFC/m de hongos en el rea de Encapsulado #1.

84
 Promedio UFC/m3 de Enero a Octubre del 2008 en
Encapsulado # 2
100
90
80
70
UFC/m3 60
50
40
30
20
10
0
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
Meses

Mesfilos (UFC/m3)

3
FIGURA 27. Promedio de las UFC/m de mesfilos en el rea de Encapsulado # 2.

3
Promedio UFC/m de Enero a Octubre de 2008
ENCAPSULADO # 2

30
25
3 20
UFC/m
15
10
5
0
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
MESES
3
Hongos (UFC/m )

3
FIGURA 28. Promedio de las UFC/m de hongos en el rea de Encapsulado # 2.

En las reas de encapsulado se encontr un comportamiento aceptable con respecto a el

crecimiento de microorganismos mesfilos sin desestimar algunos picos presentes en
algunos meses que no alcanzan los limites de alerta hay que cuidar; por otro lado, el

85
comportamiento de los hongos es mucho ms desalentador teniendo que en el rea de
encapsulado # 1 adems de alcanzar el nivel de alerta en varios meses consecutivos, al
octavo mes el recuento alcanz el limite de accin lo que sugiere errores en el proceso de
limpieza y desinfeccin al estar incrementndose sustancialmente la carga microbiana, en el
rea de encapsulado # 2 los recuentos de hongos se presentaron en menor proporcin an
cuando al sexto mes de monitoreo microbiolgico se encontr un incremento de la poblacin
microbiana superando el limite de alerta que segn los meses siguientes fue controlado
observando su disminucin.

Promedio UFC/m3 de Enero a Octubre del 2008

En Granel
100
90
80
70
60
UFC/m3 50
40
30
20
10
0
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
Meses

Mesfilos (UFC/m3)

3
FIGURA 29. Promedio de las UFC/m de mesfilos en el rea de Granel.

86
 3
Promedio UFC/m de Enero a Octubre de 2008
GRANEL

30
25
20
UFC/m3 15
10
5
0
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
MESES

Hongos (UFC/m3)

3
FIGURA 30. Promedio de las UFC/m de hongos en el rea de Granel.

En el rea de Granel a partir del quinto mes se increment el crecimiento de hongos

cruzando el lmite de alerta lo que genera la necesidad de tomar medidas preventivas que
segn lo mostrado en la fig. 30 fue controlado en los meses siguientes en donde se
evidencia una disminucin de la carga microbiana en esta rea.

Promedio UFC/m3 de Enero a Octubre del 2008 en

Blister Farcon
100
90
80
70
60
UFC/m3 50
40
30
20
10
0
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
Meses
Mesfilos (UFC/m3)

3
FIGURA 31. Promedio de las UFC/m de mesfilos en el rea de Blister Farcon.

87
 3
Promedio UFC/m de Enero a Octubre de 2008
BLISTER FARCON

30
25
20
3
UFC/m 15
10
5
0
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
MESES

Hongos (UFC/m3)

3
FIGURA 32. Promedio de las UFC/m de hongos en el rea de Blister Farcon.

En el rea de Blister Farcon se observa que los recuentos de mesfilos son aceptables con
respecto a los tres niveles evaluados, mientras que en los datos obtenidos para hongos se
nota un comportamiento variable que mostr errores en los procesos de limpieza y
desinfeccin los cuales al quinto, octavo y dcimo mes sobrepasaron los niveles de alerta
sugiriendo mejoras en el proceso.

Promedio UFC/m3 de Enero a Octubre del 2008 en

Blister Pharmapack

100
90
80
70
60
UFC/m3 50
40
30
20
10
0
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
Meses
Mesfilos (UFC/m3)

3
FIGURA 33. Promedio de las UFC/m de hongos en el rea de Blister Pharmapack.

88
 3
Promedio UFC/m de Enero a Octubre de 2008
BLISTER PHARMAPACK

30
25
20
UFC/m3
15
10
5
0
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
MESES

Hongos (UFC/m3)
3
FIGURA 34. Promedio de las UFC/m de hongos en el rea de Blister Pharmapack.

El rea del Blister Pharmaphack para mesfilos y hongos como se puede ver en las figuras
33 y 34 respectivamente se mostr dentro de los limites de especificacin permitidos para
cada caso, sin embargo tambin se pudo notar que durante los tres ltimos meses en el
caso de los hongos el crecimiento tuvo un aumento con respecto al sptimo mes en donde
3
no sobrepas las 5 UFC/m , lo que sugiere que aun cuando no llegan a salirse de los
rangos, son indicadores de errores en los procesos.

Promedio UFC/m3 de Enero a Octubre del 2008 en

Blister Tecnomaco

100
90
80
70
60
UFC /m3 50
40
30
20
10
0
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10

Mesfilos (UFC/m3) Meses

3
FIGURA 35. Promedio de las UFC/m de mesfilos en el rea de Blister Tecnomaco.

89
 3
Promedio UFC/m de Enero a Octubre de 2008
BLISTER TECNOMACO

120
110
100
90
80
UFC/m
3 70
60
50
40
30
20
10
0
1 2 3 4 5 6
MESES 7 8 9 10
3
Hongos (UFC/m )
3
FIGURA 36. Promedio de las UFC/m de hongos en el rea de Blister Tecnomaco.

El rea de equipo Blister Tecnomaco mostr un aumento en el cuarto y quinto mes en

cuanto a los microorganismos mesfilos, lo que no se present en reas anteriores, en
donde el quinto mes sobrepasa el lmite de accin, asimismo en la fig. 35 podemos ver que
en los meses siguientes decreci significativamente manteniendo un comportamiento
aceptable hasta el dcimo mes. Por otra parte, el recuento de hongos en esta misma rea es
bastante alto teniendo en cuenta que ms de la mitad de los meses alcanz los lmites de
alerta, el cuarto mes fue el de mayor crecimiento microbiano lo cual se evidencia en la fig. 36
en donde se sobrepasa el nivel mximo permitido de colonias en el rea, e s t e
comportamiento se ve disminuido y controlado durante los ltimos cuatro meses de
monitoreo.

90
 Promedio UFC/m3 de Enero a Octubre del 2008 en
Preparacin de Lquidos

100
90
80
70
60
3
UFC/m 50
40 Mesfilos UFC/m3
30
20
10
0
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
Meses

3
FIGURA 37. Promedio de las UFC/m de mesfilos en el rea de Preparacin Lquidos.

Promedio UFC/m3 de Enero a Octubre de 2008

PREPARACION LIQUIDOS
30
25
20
3
UFC/m 15
10
5
0
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
MESES
Hongos (UFC/m3)

3
FIGURA 38. Promedio de las UFC/m de hongos en el rea de Preparacin Lquidos.

91
 3
Promedio UFC/m de Enero a Octubre del 2008 en Envase de
Lquidos

100
90
80
70
60
UFC/m3 50
40 Mesfilos UFCm3
30
20
10
0
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
Meses

3
FIGURA 39.Promedio de las UFC/m de Mesfilos en el rea de Envase de Lquidos

3
Promedio UFC/m de Enero a Octubre de 2008
ENVASE LIQUIDOS
90
80
70
UFC/m
3 60
50
40
30
20
10
0
1 2 3 4 5 6 7
MESES 8 9 10
3
Hongos (UFC/m )

3
FIGURA 40. Promedio de las UFC/m de hongos en el rea de Envase Lquidos.

En el rea de preparacin de lquidos a partir del quinto mes y a excepcin del noveno se
obtuvo recuentos por encima del limite de alerta lo que sugiere que en esta rea se deben
tomar medidas preventivas en cuanto a la limpieza y desinfeccin que se ha venido

92
desarrollando con el fin de evitar alcanzar niveles mayores de contaminacin que puedan ser
significativos interfiriendo los procesos de produccin.
Por otra parte, en esta rea de envase lquidos se presenta un comportamiento mas
preocupante ya que casi todos sobrepasan los limites de alerta y no solo estos sino que en
el quinto y sexto mes de estudio se presenta un incremento en la contaminacin lo que lleva
a atravesar los niveles de accin, los meses posteriores estos ndices disminuyeron
considerablemente pero al dcimo mes se presento un recuento bastante grande en donde
3 3
se supera el nivel mximo de UFC/m permitido (30 UFC/m ), al analizar la fig 39 se puede
observar un incremento de mesfilos a partir del 6 mes lo que sugiere un cuidado especial
en los procesos de limpieza y desinfeccin debido a que no cumplen con su objetivo
generando un riesgo critico en el proceso de esta rea.

Promedio de UFC/m3 de Enero a Octubre del 2008 en

Alimentacin de Frascos

100
90
80
70
3 60
UFC/m 50
40 Mesofilos UFC/m3
30
20
10
0
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
Meses

3
FIGURA 41. Promedio de las UFC/m de mesfilos en el rea de Alimentacin Frascos.

93
 3
Promedio UFC/m de Enero a Octubre de 2008
ALIMENTACION FRASCOS

30
25
3 20
UFC/m
15
10
5
0
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
MESES
3
Hongos (UFC/m )
3
FIGURA 42. Promedio de las UFC/m de hongos en el rea de Alimentacin Frascos.

Esta rea denota recuentos lejanos a los niveles mximos permitidos en los recuentos de
microorganismos mesfilos y hongos, sin embargo se puede ver en la fig. 41 que a partir del
cuarto mes se present un incremento de microorganismos que a partir del sexto mes
parece haber sido controlado generando una favorable disminucin de la carga microbiana
en cuanto a presencia de hongos.

Promedio de UFC/m3 de Enero a Octubre del 2008 en

Envase de Cremas

100
90
80
70
60
UFC/m3 50
40 Mesfilos UFC/m3
30
20
10
0
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
Meses

3
FIGURA 43. Promedio de las UFC/m de mesfilos en el rea de Envase Cremas.

94
 3
Promedio UFC/m de Enero a Octubre de 2008
ENVASE CREMAS

30
25
20
3
UFC/m 15
10
5
0
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
MESES

Hongos (UFC/m3)
3
FIGURA 44. Promedio de las UFC/m de hongos en el rea de Envase Cremas.

Promedio de UFC/m3 de Enero a Octubre del 2008 de

Preparacin de Cremas

100
90
80
70
UFC/m3 60
50
40 Mesfilos UFC/m3
30
20
10
0
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
Meses

3
FIGURA 45. Promedio de las UFC/m de mesfilos en el rea de Preparacin Cremas.

95
 Promedio UFC/m3 de Enero a Octubre de 2008
PREPARACION CREMAS

40
35
30
UFC/m3 25
20
15
10
5
0
1 2 3
4 5 6 7 8 9 10
MESES
3
Hongos (UFC/m )
3
FIGURA 46. Promedio de las UFC/m de hongos en el rea de Preparacin Cremas.

En las reas de Envase de cremas y Preparacin de cremas se evidenci u n

comportamiento comn en el mes sexto, donde existe un aumento en los recuentos que
3
logra sobrepasar el nivel mximo de UFC/m de hongos en el rea de preparacin de
cremas lo cual se ve subsanado posteriormente con una radical disminucin del crecimiento
microbiano el cual se muestra en la fig. 46 por debajo de los niveles de alerta. Por otra parte
el comportamiento de los microorganismos mesfilos se mantiene controlado y dentro de los
parmetros estipulados.

96
 3
Promedio UFC/m de Enero a Octubre del 2008 en Pesaje de
Bodega

100
90
80
70
60
UFC/m3 50
40 Mesfilos UFC/m3
30
20
10
0
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
Meses

3
FIGURA 47. Promedio de las UFC/m de mesfilos en el rea de Pesaje Bodega.

3
Promedio UFC/m de Enero a Octubre de 2008
PESAJE BODEGA

30
25
UFC/m
3 20
15
10
5
0
1 2 3 4 5 6 7 8 9
MESES 10

Hongos (UFC/m3)
3
FIGURA 48. Promedio de las UFC/m de hongos en el rea de Pesaje Bodega.

97
 Promedio UFC/m3 de Enero a Octubre del 2008 en Cuarentena

100
90
80
70
60
UFC/m3 50
Mesfilos UFC/m3
40
30
20
10
0
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
Meses

3
FIGURA 49. Promedio de las UFC/m de mesfilos en el rea de Cuarentena.

Promedio UFC/m3 de Enero a Octubre de 2008

CUARENTENA

30
25
3 20
UFC/m
15
10
5
0
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
MESES

Hongos (UFC/m3)

3
FIGURA 50. Promedio de las UFC/m de hongos en el rea de Cuarentena.

Las reas de pesaje bodega y cuarentena permanecen dentro de los niveles aceptables de
carga microbiana evidencindose recuentos en el caso de microorganismos mesfilos y
hongos lejanos a los niveles mximos respectivamente.

98
 3
Promedio UFC/m de Enero a Octubre del 2008 en Recubrimiento
Area # 2

100
90
80
70
60
UFC/m3 50
40 Mesfilos UFC/m3
30
20
10
0
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
Meses

3
FIGURA 51. Promedio de las UFC/m de mesfilos en el rea de Recubrimiento.

3
Promedio UFC/m de Enero a Octubre de 2008
RECUBRIMIENTO
30
25
20
3
UFC/m 15
10
5
0
1 2 3
4 5 6
7 8 9 10
MESES
Hongos (UFC/m3)

3
FIGURA 52. Promedio de las UFC/m de hongos en el rea de Recubrimiento.

El rea de recubrimiento se mantuvo dentro de los lmites de especificacin durante los 10

meses de estudio manteniendo valores bajos en los recuentos de mesfilos y hongos
durante los ltimos meses.

99
 Promedio UFC/m3 de Enero a Octubre de 2008 en
Tabletera 5 en Area #2

100
90
80
70
UFC/m3 60
m3 50
40 Mesfilos UFC/m3
30
20
10
0
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
Meses

3
FIGURA 53. Promedio de las UFC/m de mesfilos en el rea de Tabletera.

Promedio UFC/m3 de Enero a Octubre del 2008 en

Tableteria 6 Area # 2
100
90
80
70
60
UFC/m3 50
40 Mesofilos UFC/m3
30
20
10
0
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
Meses

3
FIGURA 54. Promedio de las UFC/m de mesfilos en el rea de Tabletera.

100
 3
Promedio UFC/m de Enero a Octubre de 2008
TABLETERIA

30
25
3 20
UFC/m
15
10
5
0
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
MESES

Hongos (UFC/m3)

3
FIGURA 55. Promedio de las UFC/m de hongos en el rea de Tabletera.

El rea de tabletera permanece controlada con valores alejados a los niveles mximos de
crecimiento microbiano permitido lo que indic que los procesos de limpieza y desinfeccin
llevados a cabo en esta mantienen el control de la misma en cuanto a contaminacin se
refiere.

Promedio UFC/m3 de Enero a Octubre del 2008 en Mezcla y

Granulacin Area # 2
100
90
80
70
60
UFC/m3 50
40 Mesfilos UFC/m3
30
20
10
0
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
Meses
3
FIGURA 56. Promedio de las UFC/m de mesfilos en el rea de Mezcla y Granulacin.

101
 3
Promedio UFC/m de Enero a Octubre de 2008
MEZCLA Y GRANULACION

30
3 25
UFC/m
20
15
10
5
0
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
MESES

Hongos (UFC/m3)
3
FIGURA 57. Promedio de las UFC/m de hongos en el rea de Mezcla y Granulacin.

El rea de mezcla y granulacin como se indica en la fig. 57 muestra ndices bastantes

variables de contaminacin en cuanto a hongos durante los siete primeros meses de estudio
que sugieren una toma de medidas no solo preventivas sino correctivas en algunos casos,
posteriormente se evidenci q u e a partir del sptimo mes se ven reducido el crecimiento
microbiano.

3
Promedia UFC/m de Enero de Octubre en Horno Area # 2

100
90
80
70
60
UFC/m3 50
40 Mesfilos UFC/m3
30
20
10
0
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
Meses

3
FIGURA 58. Promedio de las UFC/m de mesfilos en el rea de Horno.

102
 3
Promedio UFC/m de Enero a Octubre de 2008
HORNO

30
25
3
UFC/m 20
15
10
5
0
1 2 3
4 5 6 7 8 9 10
MESES

Hongos (UFC/m3)

3
FIGURA 59. Promedio de las UFC/m de hongos en el rea de Horno.

En el rea de horno aunque los tres primeros meses del estudio el crecimiento microbiano
fue en aumento y alcanzando el nivel mximo permisible en el caso de los hongos, a partir
del cuarto mes se evidencia una disminucin del mismo que para finales del estudio, al
dcimo mes, como se puede ver en la fig. 59 ya se encuentra controlado, en donde se puede
afirmar que los procesos de limpieza y desinfeccin son adecuados.

3
Promedio UFC/m de Enero a Octubre en Encelofanado
Area #2

100
90
80
70
60
UFC/m3 50
40 Mesfilos UFC/m3
30
20
10
0
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
Meses

3
FIGURA 60. Promedio de las UFC/m de mesfilos en el rea de Encelofanado.

103
 3
Promedio UFC/m de Enero a Octubre de 2008
ENCELOFANADO
30
25
3
UFC/m 20
15
10
5
0
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
MESES
Hongos (UFC/m3)

3
FIGURA 61. Promedio de las UFC/m de hongos en el rea de Encelofanado.

El rea de encelofanado permite evidenciar un comportamiento controlado en cuanto al

recuento de mesfilos y hongos, con respecto a los segundos en el sptimo mes logra
atravesar el lmite de alerta lo que sugiere medidas preventivas que como se muestra en la
fig. 61 fueron tomadas en los posteriores meses en donde los recuentos disminuyeron
considerablemente.

3
Promedio UFC/m de Enero a Octubre de 2008
ENVASE DE POLVOS

30
25
3
UFC/m 20
15
10
5
0
1 2 3
4 5 6 7 8 9 10
MESES

Hongos (UFC/m3)

3
FIGURA 62. Promedio de las UFC/m de hongos en el rea de Envase de Polvos.

104
En el rea de envase de polvos los recuentos realizados durante el segundo, sexto y
sptimo mes atraviesan el nivel de alerta en donde se deben tomar medidas preventivas que
limiten el crecimiento de hongos y eviten un aumento de la poblacin, en la fig. 62 se
muestra que hubo un cambio y mejora en el proceso de limpieza y desinfeccin dado que los
tres ltimos meses arrojan valores menores.

PROMEDIO ANUAL

Promedio Anual ufc/m3 en el Area # 2 de Manufactura

100
90
80
70
ufc/m3 60
50
40
30
20
10
0 Mesofilos ufc/m3
Horno
Recubrimiento

Encelofanado
Granulacion
Tableteria #5

Tableteria #6
Mezcla y

Areas de Manufactura

3
FIGURA 63. Promedio Anual de UFC/m de mesfilos en reas de Manufactura.

105
 Promedio Anual de ufc/m3 en las reas de Manufactura

30
25
20
UFC/m3 15
10 10 14
5 7 6 Hongos (ufc/m3)
3 4

RECUBRIMIENTO
0

ENCELOFANADO

GRANULACION

HORNO
TABLETEADO

ENVASE DE
POLVOS
MEZCLA Y
Areas de Manufactura

3
FIGURA 64. Promedio Anual de UFC/m de hongos en reas de Manufactura.

Promedio Anual de ufc/m3 en las Areas de Manufactura

100
90
80
70
60
50
ufc/m3
40
30
20
10 Mesofilos ufc/m3
0
Recubrimiento
Tableteria # 1

Tableteria # 2

Tableteria # 3

Tableteria # 4

Areas de Manufactura

3
FIGURA 65. Promedio Anual de UFC/m de mesfilos en reas de Manufactura.

106
 Promedio Anual de ufc/m3 en las reas de Manufactura

30
25
20
UFC/m3 15
10 Hongos (ufc/m3)
5 7 3 3 4 6

RECUBRIMIENTO
0

TABLETERIA # 1

TABLETERIA # 2

TABLETERIA # 3

TABLETERIA # 4

#2
Areas de Manufactura

3
FIGURA 66. Promedio Anual de UFC/m de hongos en reas de Manufactura.

Promedio Anual ufc/m3 en areas de manufactura

100
90
80
70
60
50
ufc/m3 40
30 Mesofilos ufc/m3
20
10
0
Horno Glatt
Horno Rae
Granulacion
Pulverizador

Mezclador

Mezclador
Inoxmor
stokes

Areas de Manufactura

3
FIGURA 67. Promedio Anual de UFC/m de mesfilos en reas de Manufactura.

107
 Promedio Anual de ufc/m3 en las reas de Manufactura

30
25
20
UFC/m3 15
10 19
12 10
5 4 3 5
0

PULVERIZADOR

HORNO RAE

HORNO GLATT
GRANULACION

MEZCLADOR

MEZCLADOR
INOXMOR
STOKES
Hongos (ufc/m3)

Areas de Manufactura

3
FIGURA 68. Promedio Anual de UFC/m de hongos en reas de Manufactura.

Promedio Anual ufc/m3 del Area de Manufactura

100
90
80
70
60
ufc/m3 50
40
30
ufc/m3
20
10
0
Implementos

Encapsulado

Encapsulado

Granel
limpios

#1

#2

Areas de Manufactura

3
FIGURA 69. Promedio Anual de UFC/m de mesfilos en reas de manufactura.

108
 Promedio anual ufc/m3 de las areas de Manufactura

100
90
80
70
60
ufc/m3 50
40
Mesofilos ufc/m3
30
20
10
0
Blister Farcon Blister Blister
Pharmapack Tecnomaco

Areas de Manufactura

3
FIGURA 70. Promedio Anual de UFC/m de mesfilos en reas de Manufactura.

Promedio Anual de ufc/m3 en las reas de Manufactura

30
25
20
UFC/m3 15 25
10
5 6 8 5
0 Hongos (ufc/m3)
TECNOMACO
FARCON

PHARMAPACK
GRANEL

BLISTER

BLISTER
BLISTER

Areas de Manufactura

3
FIGURA 71. Promedio Anual de UFC/m de hongos en reas de Manufactura.

109
 Promedio Anual de ufc/m3 en las areas de Manufactura

100
90
80
70
60
50
ufc/m3
40
30
20 Mesofilos ufc/m3
10
0
Preparacion

Preparacion
Envase de

Envase de
Alimentacion
de Liquidos

de Cremas
de Frascos

Liquidos
Cremas
Areas de Manufactura

3
FIGURA 72. Promedio Anual de UFC/m de hongos en el rea de Cuarentena.

Promedio Anual de ufc/m3 en las reas de Manufactura

30
25
20
UFC/m3 15 23
10 11
5 6 9 9
0 Hongos (ufc/m3)
ALIMENTACION
PREPARACION

PREPARACION

LIQUIDOS
CREMAS
ENVASE

ENVASE
LIQUIDOS

FRASCOS

CREMAS

Areas de Manufactura

3
FIGURA 73. Promedio Anual de UFC/m de hongos en el rea de Cuarentena.

110
 Promedio Anual de ufc/m3 en el area de Pesaje de Bodega y
Cuarentena

100
90
80
70
60
ufc/m3 50
40 Mesofilos ufc/m3
30
20
10
0
Pesaje de Bodega Cuarentena

Areas

3
FIGURA 74. Promedio Anual de UFC/m de hongos en el rea de Cuarentena.

3
FIGURA 75. Promedio Anual de UFC/m de hongos en el rea de Cuarentena.

El promedio anual de cada una de las reas de manufactura muestra claramente que el
crecimiento microbiano durante los diez meses del estudio con relacin a los
microorganismos mesfilos no sobrepas los limites de alerta estipulados inicialmente lo que
nos sugiri recuentos no significativos, sin embargo, al referirnos a los hongos, si se tiene
reas como Blster Tecnomaco, Envase Lquidos e Implementos Limpios, que logran
sobrepasar el nivel de accin, siendo el ltimo en mencin el de ms altos ndices de

111
 3
contaminacin, el cual llega a tener un promedio de 34 UFC/m que en el caso de los
hongos esta sobre el nivel mximo establecido, cabe mencionar que se realizo una accin
correctiva que fue generada por el rea de microbiologa y diligenciada en el formato (F-
VRQ-024) Relacin de accin correctiva o preventiva documento interno de la empresa.

Al analizar estos resultados se puede inferir que se debe considerar cambios y mejoras en el
proceso de limpieza y desinfeccin de cada una de las reas dando especial cuidado a las
zonas criticas con el fin de eliminar y controlar la carga microbiana que si bien no es absoluta
si debe ser mnima, manteniendo un monitoreo continuo en todos las reas de manufactura
que evite enfrentarnos a la no satisfaccin de un lmite.

Adicionalmente, cabe mencionar que este estudio se enfoco a brindar calidad microbiolgica
en las reas blancas de manufactura del laboratorio ANGLOPHARMA S.A. ya que este e s
un indicador de los buenos procesos de limpieza y desinfeccin que se desarrollan en el
rea blanca que es donde se debe tener un ambiente que cumpla con las especificaciones y
limites permisibles de microorganismos segn lo establecido en la USP vigente.

7.3 Obtencin de las cepas a evaluar en la tcnica de concentracin minima inhibitoria

para 4 diferentes desinfectantes.

La determinacin de las cepas que se obtuvieron a partir de la toma de ambientes del rea
de manufactura correspondieron a tres diferentes microorganismos debido a que no se
encontraron cepas correspondientes al genero Gram negativo. Estas cepas fueron
seleccionadas debido a que se presentan con mayor frecuencia en la toma de ambientes en
el rea blanca de Anglopharma S.A, posteriormente, fueron purificadas en medios
especficos y se realizaron pruebas de identificacin con el fin de caracterizar cada una de
estas obteniendo los siguientes resultados:

El hongo evaluado present una morfologa en donde se observ hifas hialinas septadas con
presencia de esporas (Figura 76), macroscpicamente se observ una regin vegetativa que
crece dentro del sustrato, de color blanco e hifas areas cubiertas de esporas que
presentaron una coloracin naranja (Figura 77) cumpliendo con caractersticas propias del
genero Neurospora sp.

112
 Figura 76. Microscopa Hongo Figura 77.Macroscopa Hongo
La levadura evaluada mostr microscpicamente clulas esfricas, alargadas con bordes
redondeados (Figura 78); macroscpicamente se observa de color rosado, contextura
cremosa y forma irregular (Figura 79) siendo estas caractersticas propias del gnero
Rhodotorula sp.

Figura 78. Macroscopa Levadura Figura 79.Microscopa Levadura

La bacteria evaluada macroscpicamente se observa de color crema y textura cremosa con

colonias pequeas y de rpido crecimiento (Figura 80), microscpicamente se observan
cocos Gram positivos pequeos (Figura 81), bioqumicamente esta bacteria fue catalasa
positiva y oxidasa negativa (figura 82). Por otra parte, debido a que se encontraron
diferentes tipos de bacterias en el ambiente fue necesario la identificacin y aislamiento de
un solo tipo de estas,la cual fue identificada como bacteria # 1, luego de su purificacin en el
medio Plate Count (PC) se realiz una identificacin con el API 20A dando como resultado
un 97.3% de taxn significativo perteneciente a una bacteria que corresponde al gnero
Staphylococcus epidermidis. C a b e r e s a l t a r que todas las caractersticas evaluadas
concuerdan con lo reportado en bibliografa para este tipo de bacterias.

113
 Figura 80. Macroscopa Figura 81. Microscopa
Staphylococcus epidermidis Staphylococcus epidermidis

Figura 82. Catalasa y Oxidasa

7.4 Preparacin del Inculo

Para implementar el procedimiento de la preparacin del inoculo se trabajo con las 3 cepas,
Neurospora sp es un hongo propio del ambiente, Rhodotorula sp es una levadura que crece
o o
fcilmente en temperaturas en 24 C a 48 C y se encuentra en piel y esputo de los seres
humanos y Staphylococcus epidermidis es una bacteria que se encuentra frecuentemente
en la piel y mucosas de los humanos.

o
Para esto se tom como referencia el tubo N 1 del patrn de la escala de McFarland, de
cada una de las cepas a evaluar hasta que se obtuvo una concentracin equivalente a
8
3X10 UFC/ml, para cumplir con las exigencias de la norma 2455 del ICONTEC,
-3
posteriormente se realiz una dilucin 10 la cual fue inoculada en las diferentes
concentraciones evaluadas de los 4 desinfectantes, las cuales no presentaron
modificaciones a lo establecido inicialmente en el procedimiento.

114
7.5. Determinacin de la concentracin mnima inhibitoria (CMI).

Para la determinacin de la CMI se realiz la observacin de los tubos correspondientes a

los desinfectantes en estudio: Hipoclorito de Sodio (0.5%, 1% y 1.5%), Cloruro de
Benzalconio (0.5%, 1% y 1.5%), Tego 51 (0.1%, 0.5% y 1%) y Alcohol al 70%. Obteniendo
los resultados expresados a continuacin.

7.5.1 Determinacin de la concentracin mnima inhibitoria del Hipoclorito de Sodio.

Para el NaCl se obtuvieron resultados similares utilizando los 3 diferentes microorganismos,

al observar la Tabla 3 se pudo determinar que a la concentracin de 0.05% solo hubo
inhibicin de la levadura en el tubo numero 1 lo que quiere decir que para este
microorganismo lo mnimo que se requiere de desinfectante es esta concentracin, mientras
que con el hongo y la bacteria evaluadas no se observ ninguna inhibicin a esta
concentracin, lo que indica que se requiere de una concentracin superior a 0.05% para
q u e s e a activo frente a estos dos microorganismos. Por otra parte, al comparar los
resultados obtenidos tomando como parmetro de evaluacin una concentracin de 0.1% y
0.15% respectivamente, que es la concentracin inicial evaluada en el tubo nmero 1, se
muestra una inhibicin para los 3 diferentes microorganismos evaluados, lo que indica que
este desinfectante tiene un buen comportamiento frente a las cepas en estudio.
De acuerdo a lo mencionado anteriormente se sugiere trabajar con una concentracin de
Hipoclorito de Sodio al 0.5%, pues es una concentracin media en donde se est
asegurando la concentracin mnima requerida de desinfectante para que haya actividad
contra diferentes gneros de microorganismos que puedan estar presentes en el rea de
manufactura. Cabe anotar que an cuando la concentracin del desinfectante empleada
actualmente de 10000mg/L (1%) genera una buena inhibicin, el hipoclorito de sodio ya es
activo a 1000, 2000 y 5000 ppm segn (Malagon, 1999), en donde se afirma que en
concentraciones de 1000 ppm de cloro la actividad es buena a los 10 minutos. Es importante
tener en cuenta la toxicidad, y actividad corrosiva del cloro por lo tanto se sugiere emplear la
mnima concentracin inhibitoria para que no produzca efectos indeseables en la salud del
personal que manipula este agente desinfectante ni genere daos graves a los equipos.
Adicionalmente, es importante tener en cuenta que factores como el pH y la materia
orgnica son fundamentales para que los compuestos clorados acten eficazmente.
Respecto a la presencia de la materia orgnica en superficies, elementos a desinfectar
como los constituyentes bacterianos o residuos de productos, estos utilizan el cloro libre
disponible en el sistema, reduciendo de este modo el efecto bactericida y por tanto la

115
eficiencia del proceso. Por lo anterior, y con base en los resultados obtenidos se puede
recomendar que l a concentracin sugerida, 5000mg/L correspondiente al 0.5% cumple con
las especificaciones y requerimientos en el rea de manufactura, sin llegar a ser una
concentracin que genere toxicidad ni corrosin y por ende no va a producir daos graves a
la salud ni dao en los equipos y por el contrario si ser activo frente a los posibles
contaminantes que se puedan encontrar en esta.

MICROOGANIMOS EVALUADO LEVADURA (Rhodotorula sp)

Concentracin (mg/L)
Concentracin
de Hipoclorito 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
de sodio
0.5% 500 + + + + + + + + + + +
1% 1000 + + + + + + + + + + +
1.5% 1500 750 + + + + + + + + + +
Tabla 3. Concentracin mnima inhibitoria del Hipoclorito de sodio frente a la levadura.

MICROOGANIMOS EVALUADO HONGO (Neurospora sp)

Concentracin (mg/L)
Concentracin
de Hipoclorito 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
de sodio
0.5% + + + + + + + + + + + +
1% 1000 + + + + + + + + + + +
1.5% 1500 750 + + + + + + + + + +
Tabla 4. Concentracin mnima inhibitoria del Hipoclorito de sodio frente Neurospora sp.

MICROOGANIMOS EVALUADO BACTERIA (Staphylococcus epidermidis)

Concentracin (mg/L)
Concentracin
de Hipoclorito 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
de sodio
0.5% + + + + + + + + + + + +
1% 1000 + + + + + + + + + + +
1.5% 1500 750 + + + + + + + + + +
Tabla 5. Concentracin mnima inhibitoria del Hipoclorito de sodio frente Staphylococcus epidermidis.

*Nota: todas las concentraciones del desinfectante y los 3 microorganismos utilizados fueron

116
evaluados por duplicado obtenindose en todos los casos resultados iguales.

Positivo (+) Corresponde a turbidez en el tubo al no haber inhibicin del microorganismo

por parte del desinfectante evaluado.

7.5.2 Determinacin de la concentracin mnima inhibitoria para Tego 51 .

De acuerdo con los resultados observados en la tabla 8, se determin que el Tego 51 n o
presenta actividad frente a bacterias Gram positivas en concentraciones iguales y menores
a 0.01% ya que no se observ ninguna inhibicin en los 12 tubos evaluados. Adicionalmente,
en las concentraciones de 0.05% y 0.1% se obtuvo resultados iguales para los dos casos en
donde se evidenci una inhibicin en los dos primeros tubos lo que corresponde a una CMI
de 250mg/L y 500mg/L respectivamente mostrando de esta forma que diluciones mas altas
son activos frente a bacterias Gram positivas. Con los resultados obtenidos se evidenci
que el porcentaje mnimo requerido para que la bacteria sea contrarrestada es de 0.025%.
Por otra parte, los datos recopilados en las tablas 6 y 7 muestran resultados similares frente
a levaduras y hongos al tener una inhibicin mxima en 3 tubos obteniendo una CMI de
125mg/L, 0.0125% lo que muestra que este desinfectante requiere de menores
concentraciones para empezar a ser activo frente a este tipo de microorganismos. Es
importante resaltar que estos porcentajes son demasiado bajos ya que segn
especificaciones de la ficha tcnica del fabricante se recomienda un porcentaje entre 1% y
2% que generen un efecto desinfectante satisfactorio y muy bueno, segn (Aldana, 1999) el

Tego 51 es considerado un buen desinfectante a una concentracin de 0.5%, por lo
anteriormente mencionado los porcentajes obtenidos son demasiado bajos y no cumple con
estas especificaciones, por lo cual se deben utilizar concentraciones superiores a la CMI
obtenida que si garantice una mayor inhibicin de bacterias en el rea de manufactura y que
cubra los diferentes gneros de microorganismos que se puedan encontrar presentes en le
rea y de este modo se garantice la actividad del desinfectante. Al analizar los resultados
anteriormente mencionados se recomienda la utilizacin de una concentracin superior a la
CMI que asegure un buen proceso de sanitizacin, es por esta razn que se sugiere una
concentracin de 5000mg/L 0.5% que ya es activa frente a 3 gneros diferentes de
microorganismos y es una concentracin que no es tan alta y esta cumpliendo con los
estndares propuestos en la bibliografa evaluada, esta concentracin tambin fue
determinada pensando en la relacin costo beneficio de la empresa que es un factor
fundamental teniendo en cuenta que no justifica un gasto superior de desinfectante si a esta

117
concentracin se estn garantizando los procesos de sanitizacin en el rea que es de
inters para la empresa, c a be resaltar que se debe tener en cuenta que cualquier
concentracin adoptada cumpla con las especificaciones del laboratorio y principalmente que
garantice la actividad frente a flora acompaante del rea blanca que es donde se aplica
este desinfectante.

MICROOGANIMOS EVALUADO LEVADURA (Rhodotorula sp)

Concentracin (mg/L)
Concentracin
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
de Tego 51
0.1% 100 + + + + + + + + + + +
0.5% 500 250 125 + + + + + + + + +
1.0% 1000 500 250 + + + + + + + + +
R
Tabla 6. Concentracin mnima inhibitoria del Tego 51 frente a la levadura.

MICROOGANIMOS EVALUADO HONGO (Neurospora sp)

Concentracin (mg/L)
Concentracin
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
de Tego 51
0.1% 100 + + + + + + + + + + +
0.5% 500 250 125 + + + + + + + + +
1.0% 1000 500 250 + + + + + + + + +
Tabla 7. Concentracin mnima inhibitoria del Tego 51R frente al hongo.

MICROOGANIMOS EVALUADO BACTERIA (Staphylococcus epidermidis)

Concentracin (mg/L)
Concentracin
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
de Tego 51
0.1% + + + + + + + + + + + +
0.5% 500 250 + + + + + + + + + +
1.0% 1000 500 + + + + + + + + + +
R
Tabla 8. Concentracin mnima inhibitoria del Tego 51 frente a la bacteria.

*Nota: todas las concentraciones del desinfectante y los 3 microorganismos utilizados

fueron evaluados por duplicado obtenindose en todos los casos valores iguales.
Positivo (+) Corresponde a turbidez en el tubo al no haber inhibicin del microorganismo
por parte del desinfectante evaluado.

118
7.5.3 Determinacin de la concentracin mnima inhibitoria para Cloruro de
Benzalconio.
En el ensayo correspondiente al Cloruro de Benzalconio utilizando una bacteria Gram
positiva se observ una inhibicin de 3 tubos en una concentracin 0.05% correspondiente a
una CMI de 125mg/L siendo este un porcentaje de 0.0125, lo que muestra que a partir de
esta concentracin este desinfectante es activo frente a la bacteria, mientras que en las
concentraciones 0,1% y 0,15% la CMI encontrada corresponde a valor es de 62.5mg/L y
93.75mg/L respectivamente, estos resultados muestran que este desinfectante es activo a
muy bajas concentraciones, esto se ve reflejado en una inhibicin de una serie de 5 tubos
en las 2 concentraciones anteriormente mencionadas, los resultados obtenidos concuerdan
con lo mencionado en (Malagn, 1999) en donde se afirma que este desinfectante es un
buen agente bactericida contra bacterias pertenecientes al gnero de Gram positivas, debido
a que los amonios cuaternarios actan sobre la pared celular bacteriana al estar cargada
negativamente, permitiendo que la carga positiva del amonio cuaternario se adsorba a la
pared en muy altas concentraciones. Este lazo con la pared celular aumenta si hay leve
alcalinidad, pero la alta alcalinidad puede suprimir esta funcin.

Una vez que la pared celular esta rota por el amonio cuaternario, se filtran los constituyentes
intracelulares, con eventual coagulacin de la membrana y de las protenas intracelulares lo
que inactiva la clula, la accin bactericida de los cuaternarios se ha atribuido a la
inactivacin de enzimas productoras de energa, a la desnaturalizacin de protenas
esenciales celulares y disagregacin de la membrana celular, lo que provoca la salida de
enzimas, coenzimas e intermedios metablicos.

En cuanto al ensayo con el hongo evaluado y en relacin con los resultados obtenidos con la
bacteria Gram positiva se observ una nica variacin en la concentracin de 0.05%, e n
donde hay una inhibicin en 4 tubos de la lnea que corresponde a una CMI de 62,50mg/L y
a un porcentaje de 0,00625, estos resultados muestran que tanto para bacterias como para
hongos la CMI requerida de desinfectante corresponde a la anteriormente determinada.
Cabe resaltar que segn literatura consultada (Rueda, 2003), los amonios cuaternarios y
principalmente el Cloruro de Benzalconio presentan gran efectividad especialmente frente a
bacterias Gram positivas, lo que nos confirma que los resultados obtenidos frente a este
gnero concuerdan con lo reportado en este estudio ya que este desinfectante requiere
bajas concentraciones para empezar a ser activo, asimismo (Malagon,1999), reporta que el
Cloruro de Benzalconio y en general los amonios cuaternarios son ms resistentes frente a
hongos y virus. Este reporte no concuerda con los resultados obtenidos en este estudio ya

119
que en este caso el Cloruro de Benzalconio tuvo mayor actividad frente a hongos y
levaduras lo que se ve reflejado en las tablas de resultados en donde se obtuvieron mas
tubos con inhibicin, por ende se requiere de muy bajas concentraciones para empezar a
ser activo, cabe mencionar, que estos resultados son dependientes de las cepas propias
aisladas del rea blanca de Anglopharma S.A. y que se utilizan parmetros diferentes a los
reportados en otras bibliografas; es importante resaltar que este desinfectante es utilizado
en el rea de manufactura y que las cepas en estudio son propias de esta rea por lo cual
este ya es activo frente a estas y genera una buena actividad que se ve reflejada en los
resultados obtenidos en este.

En cuanto al comportamiento obtenido al evaluar la levadura se observ que este

microorganismo requiere de una concentracin menor a la utilizada con hongos y bacterias,
esto se ve reflejado en la tabla 9, en donde hubo una inhibicin de 4 tubos para una
concentracin de 0.05%, y de 6 tubos en concentraciones 0,1% y 0,15% dando como
resultado una CMI de 62,50mg/L, 31,25mg/L y 46,87mg/L respectivamente lo que permite
afirmar que lo mnimo requerido para obtener una inhibicin efectiva en el rea de
manufactura es de 31,25mg/L correspondiente a un porcentaje de desinfectante de
0,003125%, sin embargo cabe resaltar que este valor es muy bajo de acuerdo con lo
reportado y sugerido en la ficha tcnica del desinfectante ya que este sugiere un porcentaje
de 1% , debido a esto se sugiere una concentracin superior a la CMI obtenida que garantice
la efectividad de la sanitizacin y que tenga un mayor campo de accin frente a diferentes
gneros que se puedan encontrar en el rea de manufactura, por este motivo se sugiere
utilizar una concentracin de 0.5% que garantiza la efectividad de la sanitizacin, no es una
concentracin alta que pueda ser toxica y por ende los costos disminuyen ya que
actualmente la concentracin utilizada es superior a esta, se debe mencionar que la
concentracin que actualmente se utiliza esta siendo efectiva, pero si al bajar la
concentracin se sigue garantizando el proceso de sanitizacin y por lo mismo se
disminuyen costos esto significa gran beneficio para la empresa en donde tambin los costos
son factores importantes.

120
 MICROOGANIMOS EVALUADO LEVADURA (Rhodotorula sp)
Concentracin (mg/L)
Concentracin
de Cloruro de 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
Benzalconio
0.5% 500 250 125 62.50 + + + + + + + +
1% 1000 500 250 125 62.5 31.25 + + + + + +
1.5% 1500 750 325 187.5 93.75 46.87 + + + + + +
Tabla 9. Concentracin mnima inhibitoria del Cloruro de Benzalconio frente a la levadura.

MICROOGANIMOS EVALUADO HONGO (Neurospora sp)

Concentracin (mg/L)
Concentracin
de Cloruro de 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
Benzalconio
0.5% 500 250 125 62.50 + + + + + + + +
1% 1000 500 250 125 62.50 + + + + + + +
1.5% 1500 750 325 187.5 93.75 + + + + + + +
Tabla 10. Concentracin mnima inhibitoria del Cloruro de Benzalconio frente al hongo.

MICROOGANIMOS EVALUADO BACTERIA (Staphylococcus epidermidis)

Concentracin (mg/L)
Concentracin
de Cloruro de 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
Benzalconio
0.5% 500 250 125 + + + + + + + + +
1% 1000 500 250 125 62.50 + + + + + + +
1.5% 1500 750 325 187.5 93.75 + + + + + + +
Tabla 11. Concentracin mnima inhibitoria del Cloruro de Benzalconio frente a la bacteria.

*Nota: todas las concentraciones del desinfectante y los 3 microorganismos utilizados fueron
evaluados por duplicado obtenindose en todos los casos valores iguales.
Positivo (+) Corresponde a turbidez en el tubo al no haber inhibicin del microorganismo
por parte del desinfectante evaluado.

7.5.4 Determinacin de la concentracin mnima inhibitoria para Alcohol al 70%.

Los resultados obtenidos al evaluar el desinfectante alcohol al 70% frente a la Bacteria Gram

121
positiva mostraron que la CMI q u e se present en el tubo 1 correspondiente a una
concentracin de 7000mg/L con un porcentaje de 0.7% generan actividad, a diferencia del
hongo y la levadura que comienzan su actividad a una CMI de 3500mg/l que corresponde a
0.35% de desinfectante requerido, se pudo observar que hay una baja inhibicin por parte
del desinfectante para los 3 microorganismos evaluados, debido a que se observan muchos
tubos con crecimiento lo que muestra que el desinfectante no es activo a muy bajas
concentraciones, lo que nos permite inferir , que se requiere una concentracin casi pura de
desinfectante para que este sea eficiente frente a estos microorganismos, a diferencia de los
otros desinfectantes evaluados que requieren una concentracin mucho mas baja para
generar una buena inhibicin, pero cabe resaltar que las propiedades del alcohol son
bastantes diferentes a la de los otros desinfectantes evaluados ya que el alcohol es de
rpida evaporacin y por esta razn tan solo puede ser utilizado como desinfectante de
superficies y equipos ms no como desinfectante ambiental, esta caracterstica se ve
reflejada en los datos obtenidos ya que su actividad es muy limitada y requiere de mayores
concentraciones para ser activo, con los resultado obtenidos en este estudio se confirma que
el alcohol al 70% es una concentracin adecuada para fines de desinfeccin de equipos y
superficies en el rea de manufactura. Es importante tener en cuenta que porcentajes
mayores de desinfectante no son muy recomendados ya que segn lo reportado por (Rossi,
1998) en concentraciones superiores hay limitacin de agua y para que la membrana celular
del microorganismo se pueda romper se necesita de este elemento, adems hay una
evaporacin rpida del alcohol y el tiempo de contacto no es suficiente para que este pueda
actuar.

MICROOGANIMOS EVALUADO LEVADURA (Rhodotorula sp)

Concentracin (mg/L)
Concentracin
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
de Alcohol
70% 7000 3500 + + + + + + + + + +
Tabla 12. Concentracin mnima inhibitoria del alcohol al 70% frente a Rhodotorula sp.

MICROOGANIMOS EVALUADO HONGO (Neurospora sp)

Concentracin (mg/L)
Concentracin
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
de Alcohol
70% 7000 3500 + + + + + + + + + +
Tabla 13. Concentracin mnima inhibitoria del alcohol al 70% frente Neurospora sp.

122
 MICROOGANIMOS EVALUADO BACTERIA (Staphylococcus epidermidis)
Concentracin (mg/L)
Concentracin 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
de Alcohol
70% 7000 + + + + + + + + + + +
Tabla 14. Concentracin mnima inhibitoria del alcohol al 70% frente a Staphylococcus epidermidis.

Positivo (+) Corresponde a turbidez en el tubo al no haber inhibicin del microorganismo

por parte del desinfectante evaluado.
Todos los anlisis fueron realizados por duplicado y en todos los casos se obtuvo los
mismo resultados tanto en el anlisis 1 como en el 2.

7.6. Cartilla instructiva.

Se elabor una cartilla instructiva de fcil manejo con conceptos bsicos de limpieza y
desinfeccin adaptada a las reas blancas de Anglopharma S.A. para capacitar los operarios
de una manera breve y didctica (Anexo D).

7.7. Capacitacin al personal del rea de manufactura de Anglopharma S.A.

Se realizaron capacitaciones, a todo el personal involucrado con el desarrollo del programa

de limpieza y desinfeccin principalmente en el rea blanca. Esta Capacitacin tuvo como
fin dar a conocer el manual de capacitacin (Anexo D) que se realiz en este trabajo de
grado y darles a conocer conceptos bsicos de limpieza y desinfeccin as como parmetros
importantes para los procesos de sanitizacin. Tuvo una duracin aproximada de 40 minutos
se realizo de forma didctica con el fin de que fuera entendida fcilmente y se aplicara
adecuadamente en el rea blanca esto se llevo a cabo en las instalaciones de Anglopharma
S.A. y se registro en el formato de asistencia a capacitacin F-VRH-002.

8. CONCLUSIONES.

Se pudo determinar que el Cloruro de Benzalconio es un desinfectante efectivo al requerir

de bajas concentraciones para ser activo frente a 3 diferentes tipos de microorganismos
evaluados.

123
 Una concentracin de 0.5% es una concentracin favorable para 3 de los desinfectantes

evaluados (Cloruro de Benzalconio, Hipoclorito de Sodio y Tego 51 ) ya que no es una
concentracin txica y garantiza el proceso de desinfeccin en el rea de manufactura de
Anglopharma S.A.

Se debe considerar el aumento de la concentracin de Tego 51 al 0.09% utilizada
actualmente en ANGLOPHARMA S.A, debido a que esta concentracin es demasiado baja y
no esta garantizando la efectividad del proceso de Sanitizacin.

Una concentracin de 0.5% de Cloruro de Benzalconio es adecuada para la eliminacin

de los microorganismos presentes en el rea de manufactura, reduce costos y cumple la
misma funcin que una concentracin superior.

Los resultados obtenidos en este estudio demostraron que la tcnica de CMI propuesta en
la norma 2455 del ICONTEC, resulta confiable para evaluar la actividad bactericida de un
desinfectante.

Se debe hacer seguimiento a la accin correctiva generada en rea de implementos

limpios con el fin de evitar que se siga generando contaminacin en esta.

9. RECOMENDACIONES.

Para un buen proceso de desinfeccin es importante eliminar previamente todo tipo de

materia orgnica y suciedad presente en el rea de manufactura esto con el fin de no
disminuir la actividad de la solucin desinfectante.

Se debe evaluar otros mtodos de eliminacin de suciedad en el rea de manufactura que

no sea escoba y recogedor ya que no son de fcil desinfeccin y levanta muchas partculas
al aire que pueden ser causantes de contaminacin cruzada.

Se recomienda bajar la concentracin del Hipoclorito de Sodio al 0.5%, ya que a esta

concentracin tiene actividad semejante a la solucin al 1%, garantizando la eliminacin de
los microorganismos presentes en el rea de manufactura y es menos toxico y corrosivo, de
este modo se preserva la salud de los operarios y la integridad de los equipos.

Se debe desinfectar todo tipo de contenedor de materia prima antes de entrar al rea de
manufactura, esto con el fin de evitar contaminacin cruzada y aumento de carga microbiana

124
 La preparacin y la concentracin de desinfectante debe ser dispuesta cuidadosamente, ya
que de esto depende el xito del proceso de limpieza y desinfeccin y la inhibicin de la
carga microbiana presente en el rea de manufactura.

Se debe preparar la solucin desinfectante con agua purificada con el fin de evitar
impurezas y posibles contaminaciones que alteren la calidad del producto a utilizar en los
procesos de limpieza y desinfeccin.

Se recomienda por bibliografa un tiempo de exposicin de los desinfectantes entre 10 y 15

minutos para garantizar la actividad de los mismos y el xito del proceso de sanitizacin.

125
10. LITERATURA CITADA

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29. MOSSEI, B. 1985. Microbiologa de Alimentos. Editorial Acribia. Zaragoza Espaa, 236
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30. NTC 2455 del Icontec. 2000. Desinfectantes limpiadores lquidos, desinfectantes para
uso domestico.

31. OMS. Serie de Informes Tcnicos, Comit de Expertos de la OMS en Especificacin para
las Preparaciones Farmacuticas. Organizacin Mundial de la Salud. Ginebra. 1992.

32. PELCZAR, M.; CHAN, E. 1994. Microbiologa. Segunda edicin. Editorial MacGraw Hill.
Mxico. 250 pgs.

33. RONNER, A.; WONG, A. 1993. Biofilms development and sanitizer inactivation of E.coli
on stainless and buna-n rubber. Journal of Food Proteccion 56(6): 750-758.

34. ROSSI, L. 1998. reas limpias de trabajo en el laboratorio de qumica. Pregrado.

Universidad Central de Venezuela. Facultad de Ciencias. Departamento de farmacia.
Caracas, Venezuela.

35. ROSSONI, M. M.; GAYLARDE, C. C. 2002. Comparision of Sodium hypochlorie and

peracetic acid as sanitising agents for stainless steel food processing surfaces using
epifluorescence microscopy. International Journal of Food Microbiology 61 (1): 81-85.

36. SIKES, G. 1965. Desinfection and Sterilization. Second Edition. Chapman and hall.
London. 122 pgs.

37. TEGO? 51. 1996. Desinfectante anftero para una higiene ptima. Goldschrridtatrasse.
Alemania.

38. TORTORA G.J.; FUNKE, B.R. 2001. Microbiology An Introduction. Seventh Edition. The
Benjamin/Cummings Publishing Company, Inc. 564 pgs.

39. UREGO, G.; BENITEZ, G. 1994. Consideraciones generales a las normas sobre el uso
de desinfectantes en la industria de alimentos y medicamentos, desinfectantes, aspectos
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40. VELZQUEZ, D. 2000. Estudio de hidrlisis alcalina de - Lactmicos. Rev. Cubana de

Farmacia 15 (2):35-42.

128
41. WILDBRELT, G. 2000. Limpieza y desinfeccin en la industria alimentara. Editorial
Acribia S.A. Zaragoza, Espaa 349 pgs.

RECURSOS ELECTRNICOS

42. INSEC. Control de plagas. 2007. [ E n l n e a ] < h t t p : //

www.Insec.Es/fram_desinfeccion.html> [Consulta: 3 Abril 2007].

43. Concepto POES. 2007. [ E n l n e a ]

<http;//www.alimentosargentinos.gov.ar/programa_calidad/marco_regulatorio/ CONAL/
reunin_ Septiembre 05/ recomendaciones/boletPOES_ recomendaciones. Pdf> [Consulta:
3 abril 2007].

129
ANEXO A.

AGENTES QUIMICOS ANTIMICROBIANOS.

130
 Esporas
Grupo Desinfectante Ejemplos Bacteria Hongos Virus Usos Modo de accin
bacterianas

Fenol

Cresol

cidos de Virucida
Bacteriosttico Poca o Antispticos Desnaturalizacin de
alquitran Fungicida Virus
Fenoles y y bactericida ninguna protenas
Desinfectante
compuestos Clorocresol lipolticos
fenlicos Hexaclorofano

Triclosan

Alcohol Desorganizacin de la
estructura lipdica
Alcohol
Poa o Antisptico
isoproplico Bactericida Fungicida Virucida Desnaturalizacin de
ninguna Desinfectante
Alcoholes Alcohol protenas

metilado Deshidratante

Yodo Halogenacin de las

unidades de tirosina
Cloraminas
Bactericida Baja Fungicida Virucida Agua de las enzimas y otras
Hipoclorito de
protenas celulares
sodio
que necesitan tirosina
131
 Cal clorada para su actividad.

Oxycloroseno Lisis celular debido al

desprendimiento de O2
Halgenos (Cloros y
al reaccionar el cloro
compuestos
con el agua.
clorados)

Esporas
Grupo Desinfectante Ejemplos Bacteria Hongos Virus Usos Modo de accin
bacterianas

Mercuricromo
Bacteriosttico
Thiomersal
Ms efectivo
Metales pesados y Fungisttic Desnaturalizacin de
Nitromersol frente a Inactivo Inactivo Antisptico
sus compuestos o protenas
Plata bacterias
(Mercuriales)
Gram positivas
Cobre

Derivados de Bacteriosttico.
la acridina. Poca Interfieren con la
Ms efectivo
Verde contra Inactivo Fungicida virulencia Antisptico sntesis de cidos

Colorantes brillante. bacterias Gram variable nucleicos y protenas

Cristal violeta. positivas.

132
 Magenta.

Verde
malaquita.

Cetrimide

Cloro de
benzalconio

Compuestos
pirimidicos. Bactericida.
Virucida
Cloro Ms efectivo
Fungisttic Desnaturalizacin de
Compuestos de cetilpirimidico. contra Inactivo Virus Antisptico
o variable protenas.
Amonio bacterias Gram lipolticos
Compuestos
Cuaternarios positivas.
quinolinicos:
(Surfactantes
Bisdequalinum
catinicos)
diacetate

Deaqualinium
chloride

Perxido de Lisis celular por la

hidrgeno + -
Antisptico accin de H y OH
cidos y lcalis Bactericida Esporicida Fungicida Virucida
Permanganato Desinfectante libres alternando el pH
(agentes oxidantes)
de potasio del medio.

133
 Acido
peractico

Esporas
Grupo Desinfectante Ejemplos Bacteria Hongos Virus Usos Modo de accin
bacterianas

Lisis celular por

cambios de pH en el
ambiente.

El formaldehdo se

Forladehdo combina con los

Bactericida Baja Fungicida Virucida Desinfectante grupos amino libres de
Glutaraldehdo
las protenas
protoplasmticas,
Aldehdos
daa el ncleo y
coagulan las
protenas.

Oxido de Bloqueo de grupos

etileno activos sobre

Desinfectante
Quimiestabilizadores protenas por
Formaldehdo Bactericida Esporicida Fungicida Virucida Industria textiles
Gaseosos (Gases y reacciones de
Beta- y alimentos
vapores) alquilacin y
propialactona esterificacin.

134
ANEXO B.

135
 DETERMINACIN DE CONCENTRACIN MNIMA INHIBITORIA CMI

NUMERO DE TUBO

Concentracin (%) 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
de desinfectante
utilizado
0.1% 100 50 25 12,5 6,25 3,12 1,56 0,78 0,39 0,19 0,09 0,05
0.5% 500 250 125 62,50 31,25 15,62 7,81 3,90 1,95 0,98 0,49 0,245
1% 1000 500 250 125 62,50 31,25 15,62 7.80 3,91 1,95 0,98 0,49
1.5% 1500 750 375 187,5 93,75 46,87 23,43 11,72 5,86 2,93 1,46 0,73
2% 2000 1000 500 250 125 62,50 31,25 15,62 7,80 3,91 1,95 0,98
5% 5000 2500 1250 625 312,5 156,25 78,12 39,06 19,53 9,76 4,88 2,44
10% 10.000 5000 2500 1250 625 312,5 156,25 78,12 39,06 19,53 9,76 4,88
20% 20.000 10.000 5000 2500 1250 625 312,5 156,25 78,12 39,06 19,53 9,76
50% 50.000 25.000 12500 6250 3125 1562,5 781,25 390,62 195,31 97,66 48,83 24,41
70% 70.000 35.000 17500 8750 4375 2187,5 1093,75 546,87 273,44 136,72 68,36 34,18
100% 100.000 50.000 25000 12500 6250 3125 1562,5 781,25 390,62 195,31 97,66 48,83

ANEXO C
EVIDENCIA FOTOGRAFICA DE LA DETERMINACION DE CMI NORMA 2455 ICONTEC

HIPOCLORITO DE SODIO

136
 R
TEGO 51

137
CLORURO DE BENZALCONIO

138
ALCOHOL AL 70%

139
ANEXO D.

CARTILLA INSTRUCTIVA: CAPACITACION DE OPERARIOS.

ANEXO E. CERTIFICADO PRUEBA DE API 2OA

140