NO
Biotecnologas reproductivas TA
TE
CN
aplicadas a la mejora gentica animal ICA
Marcela Rodrguez*, Adriana Vallejo*, Paula Batista*, Ana C. Espasandin**
La biotecnologa tradicional se refera al em-
pleo de organismos vivos para la obtencin de un
bien o servicio til para el hombre.
La biotecnologa moderna, en cambio, surge
en la dcada de los 80, y utiliza tcnicas, deno-
minadas en su conjunto ingeniera gentica,
para modificar y transferir genes de un organis-
mo a otro.
QU SIGNIFICA BIOTECNOLOGA?
Se trata de tcnicas aplicadas a la reproduc-
cin animal que intentan acelerar en forma im-
portante el posible progreso gentico resultante
de mezclar diferentes genotipos dentro de una
misma o distintas especies (o biotipos). Dicho
fenmeno sucede en forma natural durante la
mitosis (luego de la primera divisin celular) y
supone asegurar la autenticidad de todos los se-
res que se reproducen sexualmente. El uso de
biotecnologas en la reproduccin permite, me-
diante manipulacin gentica, obtener nuevos y
mejores individuos en un tiempo menor respecto
a la mejora que se podra lograr con las tcnicas
actualmente utilizadas.
Esta tecnologa nueva y an no del todo co-
nocida, implica asumir grandes riesgos, que de-
ben, en primera instancia, ser conocidos, lo cual
no siempre es posible.
Como un instrumento de desarrollo
El mejoramiento en la calidad de un produc-
to (carne, lana, leche, etc.) mediante la genti-
ca puede hacerse por seleccin interna en una
raza de sus individuos superiores (largo plazo),
o por la incorporacin de genes nuevos y cruza-
mientos con otras razas (mediano y corto plazo).
As, la incorporacin de nuevas razas y biotipos
ovinos y bovinos en Uruguay, ha demandado la
aplicacin de tcnicas, como por ejemplo, el im-
* Estudiantes del Curso de 5to. Ao. Mejoramiento Gentico
Aplicado a Bovinos de Carne 2010-Facultad de Agronoma.
** Ing. Agr. Dpto. Produccin Animal y Pasturas. EEMAC
plante de embriones importados. Aos atrs, la
nica posibilidad de introducir una raza nueva
era mediante la importacin de animales en pie,
para iniciar aqu su multiplicacin (Durn, 2007).
La inseminacin artificial (IA), preservacin
de semen, inseminacin intrauterina (IAIU), tras-
plante embrionario, son trminos extensamente
usados durante dcadas, referidos a su aplicacin
en Produccin Animal y tambin pueden haber
sido en el pasado considerados como biotecnolo-
gas reproductivas.
Comparado con la importacin de reproduc-
tores en pie la posibilidad de obtener embriones
de hembras puras, congelarlos e importarlos, per-
mite desarrollar de una forma ms econmica,
rpida y sanitariamente segura, la multiplicacin
de una raza biotipo en un pas lejano a su pas de
origen.
QU BIOTECNOLOGAS
REPRODUCTIVAS SE CONOCEN?
I. MOET (multiovulacin y transferencia de
embriones)
II. Tcnicas in vitro (fertilizacin y cultivo
de embriones in vitro, capacitacin espermtica,
recoleccin y maduracin de ovocitos)
III. Manipulaciones Genticas (clonacin,
transgnicos, quimera)
IV. Semen sexado
Cada una de estas tcnicas presenta ventajas
y riesgos, y se adecuan o no a diferentes situa-
ciones.
I. MOET: Multiovulacin y Transferencia
de Embriones)
La tcnica de MOET consiste en la estimula-
cin del ovario de la hembra para que produzca
un mayor nmero de vulos, para luego de ser
fertilizada, ya sea natural o artificialmente, re-
cuperar los embriones y transferirlos a hembras
receptoras.
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 La MOET se ha utilizado mucho en ganado
bovino, para aumentar el nmero de animales pu-
ros de pedigr, acelerando el progreso gentico
con animales superiores por el doble aporte (ma-
terno y paterno). A diferencia de la Inseminacin
Artificial en la que slo el macho es tenido en
cuenta como herramienta de mejoramiento, en la
MOET la hembra juega tambin un importante
papel.
La sincronizacin de los celos de las hembras
receptoras y dadoras es fundamental para lograr
la continuacin del desarrollo del embrin luego
de descongelado. La manipulacin de los em-
briones y su descongelado son procesos crticos
muy importantes en la secuencia de la tcnica, la
eleccin de la receptora no debe ser tampoco des-
cuidada y es fundamental su inspeccin laparos-
cpica para determinar la presencia de un cuerpo
lteo saludable que definir la implantacin o no
del embrin, as como el estado sanitario y nutri-
cional de la misma.
La produccin de embriones permite incorpo-
rar hembras como fuente gentica a multiplicar
en los programas de mejoramiento. La tcnica
permite repetir la operacin varias veces dentro
de una misma estacin, incrementando el nme-
ro de corderos o terneros de una misma donante.
El trmino transferencia de embriones englo-
ba mucho ms que la transferencia en s, inclu-
ye la multi o superovulacin, la recoleccin de
Figura 1. Recoleccin del lquido de lavado. (Extraido de curso
Tcnicas Reproductivas, 2009)
embriones (Figura 1), corto perodo de cultivo in
vitro, manipulacin, congelacin y transferencia
(Figura 2). Del conocimiento y dominio de cada
una de esas tecnologas asociadas depender el
resultado, adems de tener en cuenta otros as-
pectos como raza donantes de embriones, tipo
de servicio, factores ambientales, nutricionales y
sanitarios.
Recin en 2001 en nuestro pas se realizan
comercialmente y por rutina los primeros pro-
gramas de multiovulacin y transferencia de
embriones (MOET) en nmero importante de
dadoras o donantes de embriones ovinos SAMM
y Dorper por un equipo uruguayo (Boggio et al.,
datos no publicados). La transferencia de em-
briones y sus tcnicas asociadas no se han aplica-
do tanto en ovinos como en bovinos. Una de las
causas es el costo relativo de los embriones, im-
posibilidad prctica de canular el cuello uterino y
la heterogeneidad en la respuesta superovulato-
ria. Tomando en cuenta los costos del proceso, un
producto de transferencia de embriones debera
valer dos o tres veces ms que uno por servicio
natural, esto limita la aplicacin a gran escala en
nuestro pas (Bonino y Sienra, 1986, citado por
Fernndez Abella, 2006). Es una tcnica que an
necesita mucha investigacin, para hacer ms re-
petibles los resultados bajo distintas circunstan-
cias y razas.
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 Figura 2. Transferencia embrionaria en Cabra. (Extraido de curso
Tcnicas Reproductivas 2009)
II.Tcnicas in vitro: Fertilizacin y cultivo
de embriones in vitro, capacitacin espermti-
ca, recoleccin y maduracin de ovocitos
Actualmente se estn produciendo embriones
en diferentes especies con ovocitos fertilizados
con las tcnicas de inyeccin intracitoplasmtica
de espermatozoides (Figura 4).
Esta tcnica surge como una necesidad de
producir embriones con fines ligados a la inves-
tigacin de transgnesis y clonacin. Incluye una
serie de etapas: en la hembra se comienza por la
recoleccin de ovocitos, que luego son madura-
dos y fertilizados para finalmente obtener un cul-
tivo de embriones. Del macho se obtienen esper-
matozoides para ser capacitados e introducidos
mediante una inyeccin intra-citoplasmtica al
oocito ya maduro. La totalidad de las etapas son
realizadas in vitro. Este cultivo de embriones
in vitro abarca unos 7-9 das y posteriormen-
te son transferidos a un animal receptor o son
Figura 3. Fertilizacon in vitro. (Extraido
de curso Tcnicas Reproductivas 2009)
conservados en un medio de criopreservacin en
forma congelada. El porcentaje de recoleccin
de ovocitos es de entre 70% a 85%. La fertili-
zacin in vitro de los ovocitos se realiza en un
medio fluido sinttico oviductal, donde se colo-
ca una cantidad determinada de espermatoziodes
previamente capacitados o bien directamente a
travs de una inyeccin intra-citoplasmtica de
un espermatozoide al ovocito (mtodo ICSI) la
cual se muestra en la Figura 3. Hasta la fecha,
aun no se ha implementado esta biotcnica en
nuestro pas, en animales domsticos destinados
a la produccin comercial, como son los ovinos
y bovinos.
En la prxima dcada esperamos el desarro-
llo de sistemas de cultivo in vitro que produz-
can embriones con las mismas caractersticas y
propiedades que los in vivo y que superen los
inconvenientes actuales.
Figura 4. Inyeccin intra-citoplasmtica.
(Extraido de curso Tcnicas Reproductivas 2009)
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 III. Manipulaciones genticas (clonacin,
quimeras, transgnicos)
La aplicacin de la Transferencia Nuclear
(NT), produciendo clones a partir de clulas de
un feto hembra, como experimento preliminar a
la produccin de clones transgnicos con fines
reproductivos en animales de inters zootcnico,
queda reservado para toros y vacas probados de
alto valor gentico, comprobado en su progenie.
Las limitantes de la tcnica son baja eficiencia
(5%) dada la complejidad de los mecanismos
biolgicos
Los animales ms grandes, como ovejas, ca-
bras, cerdos y vacas pueden modificarse genti-
camente gracias al desarrollo de las tcnicas de
clonacin.
ciendo investigacin y desarrollo en clonacin
en Argentina y Brasil.
Investigadores del laboratorio de Biotecno-
loga de la Facultad de Veterinaria de nuestro
pas aos atrs anunciaron (Diario La Repblica,
9/10/2002) el desarrollo de la tcnica de la clo-
nacin en animales. A la fecha no se encontraron
publicaciones de resultados.
La clebre oveja (Dolly) fue creada por clo-
nacin de clulas somticas que consiste en la
introduccin de una clula somtica (del cuerpo)
en el embrin (Figura 5). Pero existe otra tcnica
ms antigua: la clonacin por clulas de embrio-
nes mediante la cual se divide un embrin y se
obtienen gemelos idnticos. A travs de esta lti-
ma tcnica hace 20 aos, hay animales clonados.

a. Clonacin
La clonacin es una forma de reproduccin
asexual que se produce naturalmente en los or-
ganismos unicelulares y plantas. Este proceso
reproductivo se basa slo en un patrimonio gen-
tico nico. La generacin de un nuevo animal de
otro preexistente slo se produce artificialmente
en el laboratorio. Los individuos derivados de
dicho proceso tienen las mismas caractersticas
cromosmicas del donante.
La clonacin en el laboratorio se puede hacer
de dos maneras: la separacin de las clulas de
un embrin en sus primeras etapas de la multi-
plicacin celular, o mediante la sustitucin del
ncleo de un vulo por el de una segunda clula
de otro individuo.
Una vez que la transferencia nuclear de c-
Figura 5. Dolly y su madre. (Extraido de curso Tc-
lulas somticas entra en escena, el inters por la
nicas Reproductivas, 2009)
clonacin cambia completamente. En la transfe-
rencia nuclear se utilizan dos tipos de clulas. Un
ovocito de un animal donante, por ejemplo una
vaca, al que se le extrae por micromanipulacin
el ncleo, es decir, su carga gentica. Por otro
lado, una clula somtica que es inyectada en el
ovocito. Estas dos clulas se fusionan y se pro-
duce un proceso denominado reprogramacin
por el cual esta nueva clula toma caractersticas
de una clula embrionaria. Luego es inducida a
dividirse y se obtiene as un embrin que puede
ser transferido a un tero receptor. El animal que
nace por este procedimiento posee las caracters-
ticas genticas de la clula somtica.
Figura 6. Quimera de Cabra y oveja. (Extraido de
En la actualidad, una docena de grupos de
curso Tcnicas Reproductivas, 2009)
biologa de la reproduccin se encuentran ha-
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 Con respecto al consumo de alimentos pro-
venientes de animales clonados, la Autoridad
Europea de Seguridad Alimentaria indica que
an no hay suficientes evidencias para asegurar
que la carne y leche de animales clonados sean
alimentos seguros para el consumo humano. Sin
embargo la Administracin Federal de Frmacos
y Alimentos de los Estados Unidos concluy en
enero de 2008 que no existen riesgos nuevos o
incrementados en relacin al consumo de carne y
productos lcteos derivados de los clones de cier-
tas especies de ganado vacuno, porcino o caprino
o de la descendencia de clones con un historial
de uso seguro.
Muchos expertos en el tema opinan que al no
poder distinguir un clon de un animal reprodu-
cido sexualmente, no existen razones para esta-
blecer diferencias. Desde esta perspectiva, opi-
nan que se deberan adoptar resoluciones sobre la
base de la informacin cientfica existente y de lo
actuado en otros pases y hacerla pblica.
b.Quimeras virales y transferencia nuclear.
Las quimeras son embriones resultantes de la
fusin de dos embriones de constitucin cromo-
smica distinta. Experimentalmente se ha logra-
do la fusin de blastocistos de mamferos. Estos
embriones logran desarrollarse normalmente,
aunque si uno de los componentes es XX y el
otro XY se presentan cuadros de intersexuali-
dad.
En la Figura 6 se observa una quimera deri-
vada de la combinacin de un embrin de oveja
y cabra.
Las quimeras se emplean en la investigacin
gentica bsica, para el estudio de mutaciones y
fallas genticas. Bajo esta forma, es posible esta-
blecer cmo se comportan dos lneas diferentes
en un individuo y su efecto sobre el desarrollo
corporal.
b.Transgnesis
Se puede definir como la modificacin del ge-
noma de un animal a travs de la introduccin de
un fragmento de ADN ajeno. El ADN agregado
(transgn) codifica la produccin de una prote-
na de inters (mdico, farmacutico o industrial).
Ejemplos de protenas codificas son: Albmina
srica humana, Factor de coagulacin humano
VIII y IX, Lactoferrina, Anticuerpos monoclo-
nales, 1-antitripsina humano, 1-fetoprotena
humana y antitrombina III. La produccin de
leche con algunas de estas protenas se produce
en forma cotidiana el EEUU, no aqu en nues-
tro pas. Cabe aclarar que el transgn introducido
slo se expresa en la glndula mamaria como ya
fue mencionado, es decir que aparentemente no
interfiere en los dems procesos metablicos del
animal. En la Figura 7 se puede apreciar el toro
transgnico Herman (1990-2004), quien logra,
en su progenie, la produccin de leche conte-
niendo Lactoferrina. Los mtodos de trangnesis
conocidos hasta la fecha son:
Microinyeccin de cigotos: se inyecta en
uno de los dos proncleos de ovocitos recin fer-
tilizados miles de copias del ADN forneo. Me-
diante este mtodo se obtiene una baja tasa de
integracin de ADN (1-10%)
Manipulacin de clulas embrionarias:
Se introduce el fragmento de ADN en clulas
embrionarias totipotentes (clulas ES) o en clu-
las embrionarias madres (clulas EM).
Transferencia de genes mediante vectores
An no hay en el mercado animales ni pro-
ductos derivados de animales transgnicos, aun-
que hay desarrollos importantes, sobre todo en el
rea de la produccin de frmacos. Esta aplica-
cin de la biotecnologa se denomina en ingls
molecular pharming, y consiste en el empleo
de los animales como fbricas de molculas.
Hay varios proyectos en este sentido, que inclu-
yen la produccin de lisozima, lactoferrina, hor-
mona de crecimiento, insulina, alfa-antitripsina,
activador tisular de plasmingeno, etc., en leche
de vacas, cerdos, ovejas y cabras, o en huevos de
gallina. La produccin en la leche de animales
transgnicos es particularmente interesante para
la produccin de protenas que se requieren en
gran cantidad o que son muy complejas. Como
la produccin de la nueva molcula no debe in-
terferir con el crecimiento y metabolismo del
animal, se introduce el gen de inters junto con
un elemento promotor que permite su expresin
nicamente en la glndula mamaria.
Semen sexado
Mediante la tecnologa Beltsville Sperm
Sexing Tecnology (Johnson, 1987) se ha logrado
el sexado de semen, y, aunque los resultados son
variables puede obtenerse ms del 90% de cras
con sexo pre-determinado. Son inmensas las
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ventajas que traera tanto para el sector lechero
como para el ganado de cra. En el ganado bo-
vino lechero, las vacas con mayor mrito gen-
tico se podran destinar a la produccin de cras
hembra y el resto de las hembras a generar cras
macho usando una raza de carne (Taylor et al.,
1988). Los productores de carne podrn insemi-
nar sus mejores vacas para reposicin para que
paran hembras, esto permitir mejorar mucho
la facilidad de partos ya que en general una hem-
bra pesa menos al nacimiento que un ternero
macho. Desde el momento en que se seleccion
esas madres para generar el reemplazo por su ca-
lidad gentica, las hijas seran naturalmente las
madres perfectas de la siguiente generacin de
reemplazos y del resto del rodeo se obtendran
preferentemente cras macho para el mercado.
En los programas genticos aumentara la res-
puesta en la tasa de seleccin, pues los cabaeros
produciran ms toros con un nmero reducido
de vacas elite.
Las ventajas generales del semen sexado, re-
feridas a las de Mejoramiento Gentico seran:
Pueden programarse los reemplazos le-
cheros (o de aptitud crnica) inseminando las
mejores vacas con semen sexado, esto supone
un avance gentico en las terneras que nazcan.
Los toros jvenes podran ser probados
ms eficientemente por la preponderancia del
nmero de hijas en sus progenies.
Una porcin de vacas lecheras, las no
escogidas para la produccin de reemplazos le-
cheros, podran dedicarse a otros objetivos, por
ejemplo a la produccin de carne (cruzndose
con toros de razas para carne), convertirse en re-
ceptoras de embriones, etc.
Las vaquillonas sobrantes, tras el reem-
plazo habitual, podran convertirse en recepto-
ras de embriones de calidad gentica superior.
COMENTARIOS FINALES
Investigadores en todo el mundo han logrado
ao a ao avances significativos en campos li-
gados al estudio del genoma, qumica y biologa
molecular, descubriendo los mecanismos ntimos
de la reproduccin, el desarrollo embrionario y
la manifestacin de los genes que modifican el
fenotipo y la produccin. Poco a poco estos co-
Figura 7. Toro transgnico Herman, produccin de
lactoferrina en la leche de sus hijas. (Extraido de Cur-
so Tcnicas Reproductivas, 2009)
nocimientos van siendo aplicados al desarrollo
de tecnologas de uso comercial.
La mayora de los productores y profesio-
nales practicantes de las biotecnologas y de la
clnica reproductiva estn de acuerdo en que la
clave est en la moderacin, alimentar correc-
tamente a los animales tomando en cuenta sus
requerimientos para manifestar su potencial y al
mismo tiempo preservar la fertilidad y longevi-
dad como reproductores.
La respuesta a esta situacin debera ser un
cambio de criterio a la hora de seleccionar los
animales, utilizando la informacin disponible
como son los DEPs (Diferencia Esperada en la
Progenie) que actualmente se encuentra dispo-
nible, aunque se debe reconocer que an existe
mucho trabajo por hacer. Es necesario ampliar
las bases de datos tanto para el sector ganadero
(ovino y bovino) como para el lechero. Esto slo
ser posible si se mantiene el criterio de tomar
registros individuales de los animales de forma
objetiva y consistente, dejando aquella eleccin
subjetiva y tradicional como lo es la eleccin de
animales gordos.
La implementacin de biotecnologas repro-
ductivas como la MOET aparece como una op-
cin de mejora gentica altamente eficiente pero
an no practicable a nivel de productores comer-
ciales dado principalmente por su elevado costo.
Las dems biotcnicas mencionadas en este in-
forme parecen requerir an de investigacin para
avalar su prctica, al menos, a nivel productivo.
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