De Tesis Doctoral

Universidad de Granada
Caracterizacin y aplicacin de biomasa residual a la eliminacin de metales pesados
Mara ngeles Martn Lara, 2008

Determinacin del contenido de lignina, celulosa y hemicelulosa

La preparacin de las muestras y la determinacin de la lignina y la -celulosa se llev a

cabo siguiendo las normas TAPPI (Technical Association of the Pulp and Paper Industry,
1978).

En concreto, se aplicaron las normas TAPPI T 204 cm-97 y TAPPI T 207 om-93 para la
preparacin de las muestras slidas y las normas TAPPI T 222 om- 83 y TAPPI T 203 os-
74, para la determinacin de la lignina y -celulosa, respectivamente. Por otro lado, la
concentracin de hemicelulosa se calcula como la diferencia entre la holocelulosa y la
celulosa. Para ello, la cantidad de Holocelulosa presente en la muestra original se
determin a travs de un proceso de Deslignificacin con clorito sdico (Browning, 1967).

Slido

Eliminacin de los componentes solubles en agua TAPPI T 207 om-93

Eliminacin de los componentes solubles en etanol-benceno TAPPI T 204 os-97

Slido libre de extractivos

Determinacin de -celulosa
Determinacin
TAPPI T 203
de os-74
lignina Klason TAPPI
Determinacin
T 222 om-83
de Holocelulosa Browning, 1967

Determinacin de hemicelulosa (por diferencia entre Holocelulosa y

Figura 1. Secuencia analtica para la determinacin del contenido de lignina, -celulosa y

hemicelulosa
PROCEDIMIENTO

Preparacin de las muestras. La determinacin del contenido de lignina, -celulosa y

hemicelulosa se realiza en muestras libres de extrables. Para ello se preparan los
residuos segn las Normas TAPPI T 207 om-81 y TAPPI T 264 cm-97.

a) Las muestras molidas se someten, en primer lugar, a un proceso de extraccin de

componentes solubles en agua a 95 C mezclando la muestra con 100 mL de agua
destilada y dejando a reflujo durante 3 horas.

b) Se filtra el residuo y se seca en estufa a 105 C.

c) Las muestras se someten a un proceso de extraccin durante 4 horas con una

mezcla recin preparada de etanol-benceno (1:2 v/v).

d) Se lava con etanol aplicando vaco

e) Se realiza otra extraccin con etanol al 95 % durante 4 horas o hasta que la

solucin resulte incolora

f) Se lava 5 veces con agua destilada por periodos de 1 hora y se deja secar al aire libre

Determinacin del contenido de lignina (norma TAPPI T 222 om-83)

a) A una muestra de 1 g del material anhidro libre de extractos se le agregan 15 mL de

cido sulfrico al 72 %, mantenindose en agitacin en bao mara a 20 C durante 2 h.

Solucin de H2S04 al 72%

Disolver 665 mL de H2S04 concentrado en 300 mL de agua destilada y aforar a 1000 mL en un
matraz aforado de 1000 mL, una vez preparada la solucin, dejar enfriar en el refrigerador y
posteriormente vaciarla en un frasco mbar.

b) Se transfiere a un matraz con agua destilada (500-400 mL) y se diluye con agua hasta
alcanzar una concentracin de cido del 3 % y un volumen de 575 mL.

c) Posteriormente se hierve a reflujo durante 4 horas para asegurar un volumen constante

de agua.

d) La solucin se decanta manteniendo el matraz en una posicin inclinada

e) Se filtra a travs de una placa porosa de porosidad fina, se lava con agua caliente y se
seca a 105 C hasta alcanzar un peso constante.

peso final
%Lignina= x100
peso anhidro de la muestra
El porcentaje de lignina se calcula como:

Determinacin del contenido de -celulosa (norma TAPPI T 203 os-74)

a) 5 g de muestra anhidra libre de extractos se transfieren a un matraz, agregando NaOH
al 17,5 % a 25 C.
b) Pasados 30 minutos se aaden 100 mL de agua destilada a 25 C, agitndose con una
varilla de vidrio y dejndose en bao mara a 25 C durante otros 30 minutos para que el
tiempo total de contacto con el NaOH sea de 60 minutos.

c) Posteriormente se filtra a travs de una placa porosa de porosidad media, desechando

los primeros 10-20 mL.

d) Se toman 25 mL de la solucin y 10 mL de dicromato de potasio 0.5 N y se transfieren

a un matraz de 250 mL.

e) Se agregan 50 mL de cido sulfrico concentrado y se deja calentar durante 15

minutos. A continuacin se agregan 50 mL de agua y se deja enfriar a temperatura
ambiente.

f) Se agregan de 3 a 4 gotas de indicador ferrona y se titula con una solucin de sulfato

de amonio ferroso 0.1 N hasta que adquiera un color prpura. Se lleva a cabo una
titulacin en blanco con 12.5 mL de NaOH 17.5 % y 12.5 mL de agua.

El porcentaje de -celulosa se calcula como:

6.85 x V2 - V1 x N x 20
%-celulosa 100 -
V3 x m

Dnde:
V1 = volumen de la titulacin de la muestra, mL
V2 = volumen de la titulacin en blanco, mL
V3 = volumen de la solucin, mL
m = peso anhidro de la muestra, g
N = normalidad exacta del sulfato de amonio ferroso

Determinacin del contenido de holocelulosa (Browning, 1967)

a) 5 g de muestra se mezclan con 300 mL de agua destilada durante 4 horas.

b) A continuacin, se aaden 10 gramos de NaClO2 (clorito de sodio) y 3 mL de cido

actico glacial y la mezcla se coloca en un bao de agua a 70 C y a reflujo durante 30
minutos.

c) Posteriormente, se filtra a travs de una placa porosa de porosidad media, y se lava la

muestra con agua fra.

d) El residuo slido se trata con 400 mL de NaOH al 1 % durante 35 minutos y

manteniendo la disolucin con agitacin.

e) Se filtra y se lava hasta que el pH del agua de lavado sea igual a su pH inicial.

El porcentaje de holocelulosa se calcula como:

 peso final
%Holocelulosa x100
peso anhidro de la muestra