FACULTAD DE MEDICINA HUMANA

BIOQUIMICA

TEMA:

FACTORES QUE MODIFICAN LA ACTIVIDAD DE LAS ENZIMAS

DOCENTE:

ALUMNO: JUAN LUIS PORTILLA GALARZA

CICLO: 4

2017
 PRACTICA N 2
FACTORES QUE MODIFICAN LA ACTIVIDAD DE LAS ENZIMAS

OBJETIVOS:
Determinar la concentracin e sustrato en la cual la enzima alcanza su velocidad.
Entender el significado de los parmetros cinticos Vmax y Km.
Determinar el efecto de un inhibidor en la actividad del lactato deshidrogenasa.
Analizar el efecto de un inhibidor sobre los parmetros cinticos de la enzima.

MARCO TERICO:
La enzima como unidad fundamental de vida. Cada clula y cada tejido tienen su actividad propia, lo que
comporta continuos cambios en su estado bioqumico en la base de la cual estn las enzimas que tienen el
poder de catalizar, facilitar y agilizar determinados procesos sintticos y analticos. Los propios genes son
reguladores de la produccin de las enzimas; por tanto, genes y enzimas pueden ser considerados como las
unidades fundamentales de la vida

MATERIAL DE LABORATORIO:
Cocina elctrica
2 gradillas
10 pipetas 0.5mL y 10 mL
2 vasos de precipitacin de 100 y 400 mL
2 morteros
10 tubos de ensayo
1 hoja de bistur

REACTIVOS:
HNO3 - 80% (concentracin en 80%)
NaOH - 80% (concentracin en 80%)
H2O2
Etanol
Agua destilada

INSUMOS:
250 g. de hgado
Papas
Apio

PROCEDIMIENTO:
1. Lavar y cocer la mitad de cada muestra: la papa, el apio y e hgado.
2. En 5 tubos distintos se colocar cada insumo requerido.
3. Se colocar luego los reactivos correspondientes para cada tubo sealado por el docente.
4. Observar y tomar nota para los resultados correspondientes.

Tubo 1 Tubo 2 Tubo 3 Tubo 4 Tubo 5

Muestra con Trozo de Hgado Hgado cortado
la enzima hervido y en trozos Hgado triturado Hgado triturado Hgado triturado
Peroxidasa machacado pequeos
Soluciones
4 gotas de 10 gotas de
para modificar 1 mL de Alcohol
HNO3 NaOH
el pH
Homogeneizar Homogeneizar Homogeneizar
Sustrato
5 mL 5 mL 5 mL 5 mL 5 mL
H2O2
Homogeneizar Homogeneizar Homogeneizar Homogeneizar Homogeneizar
Observacin No hay reaccin Reaccin Fuerte Reaccin dbil Reaccin fuerte Reaccin dbil
Explicacin Enzima Enzima libre con Enzima Enzima con Enzima
desnaturalizada actividad disminuye su actividad disminuye su
por la mxima. actividad por un mxima pues el actividad por un
Temperatura pH optimo pH acido pH del alcohol pH alcalino
no interfiere
 Con otras fuentes enzimticas:
En el hgado hay ms peroxisomas que en la papa.
En el hgado hay ms peroxisomas que en el apio y a nivel del apio hay ms en sus hojas que en su tallo.
CONSIDERACIONES:
Los pH aproximados de las soluciones:
o HNO3 4.8
o Alcohol 6 - 8
o NaOH 14
El pH ptimo de la peroxidasa y su rango de pH dentro del cual es activa
o pH optimo 6.7 - 7
o Rango de pH 2.5 9

CONCLUSINES:

Los peroxisomas poseen una gran cantidad de enzimas entre ellas la catalasa, la cual degrada a sustancias toxicas
como el H2O2 (principal componente del agua oxigenada) convirtindolos en H2O y O2.

Efecto de la Temperatura sobre la Actividad Enzimtica

La velocidad de una reaccin catalizada por una enzima se incrementa al aumentar la temperatura a la cual se lleva a
cabo la reaccin.
La temperatura ejerce un doble efecto, sobre la conformacin de la enzima y sobre la propia reaccin.

En la Fig. Se representa la tpica curva actividad-temperatura. La velocidad de la reaccin se incremente al aumentar

la temperatura dentro de un determinado rango, alcanzando un valor mximo a la denominada temperatura ptima. A
valores superiores la actividad disminuye debido a que la enzima, como cualquier otra protena, sufre procesos de
desnaturalizacin y, por lo tanto, de inactivacin.

Efectos del pH sobre la actividad

La actividad de la enzima peroxidasa es dependiente de pH. Exhibe actividad mxima a un pH entre 6.5 y 7.0,
dependiendo de la fuente de la cual se deriva la peroxidasa. La actividad de la enzima se reduce cuando los niveles
de pH estn aumentados o reducidos de este rango de pH ptimo. Actividad de la peroxidasa deja a un pH de 2,5 o
de 8.5 a 9.5. Niveles de pH ms bajos resultan en una ms efectiva inactivacin de la enzima que hacen altos niveles
de pH, lo que significa que los entornos cidos son ms eficaces inhibidores de la actividad de la peroxidasa que
entornos bsicos. El nivel de acidez o alcalinidad necesaria para inactivar la enzima vara por el tipo de la peroxidasa
utilizado.
CUESTIONARIO:

1. En cul de los tubos hubo mayor liberacin de gas?

Tubo 2

2. Por qu en las muestras de hgado no se destruyeron las enzimas?

En las muestras de hgado crudo an se conservan funcionales las enzimas debido a que no se han
desnaturalizado pero al cocinarlo si se desnaturalizan y por lo tanto pierden su actividad.

3. Qu efecto podra tener una fiebre alta prolongada sobre el funcionamiento de las enzimas?
Las enzimas son protenas, y como tales tienen un funcionamiento ptimo a una determinada temperatura.
Cuando tenemos mucha fiebre, nos aumenta la temperatura.

El efecto de la temperatura sobre las protenas es que las desnaturaliza, o sea hace que estas comiencen a
perder su forma y con ello, su funcionalidad.

Como la funcin de las enzimas es catalizar las reacciones qumicas de nuestro organismo, el efecto que
produce la temperatura en las enzimas es que vamos a "gastar" ms energa de nuestro cuerpo para que las
reacciones se lleven a cabo, por lo tanto nos sentiremos cansados, desganados y dbiles.

4. Conoce alguna condicin mdica que se deba al mal funcionamiento de una enzima?

Fenilcetonuria
Galactosemia
Porfiria
Gota
Talasemia
Hemofilia
Homocistinuria
 FACULTAD DE MEDICINA HUMANA

BIOQUIMICA

TEMA:

FACTORES QUE MODIFICAN LA ACTIVIDAD DE LAS ENZIMAS

DOCENTE:

ALUMNO: ELIZABETH ROXANA CANCHARI LAZO

CICLO: 4

2017
 PRACTICA N 2
FACTORES QUE MODIFICAN LA ACTIVIDAD DE LAS ENZIMAS

OBJETIVOS:
Determinar la concentracin e sustrato en la cual la enzima alcanza su velocidad.
Entender el significado de los parmetros cinticos Vmax y Km.
Determinar el efecto de un inhibidor en la actividad del lactato deshidrogenasa.
Analizar el efecto de un inhibidor sobre los parmetros cinticos de la enzima.

MARCO TERICO:
La enzima como unidad fundamental de vida. Cada clula y cada tejido tienen su actividad propia, lo que
comporta continuos cambios en su estado bioqumico en la base de la cual estn las enzimas que tienen el
poder de catalizar, facilitar y agilizar determinados procesos sintticos y analticos. Los propios genes son
reguladores de la produccin de las enzimas; por tanto, genes y enzimas pueden ser considerados como las
unidades fundamentales de la vida

MATERIAL DE LABORATORIO:
Cocina elctrica
2 gradillas
10 pipetas 0.5mL y 10 mL
2 vasos de precipitacin de 100 y 400 mL
2 morteros
10 tubos de ensayo
1 hoja de bistur

REACTIVOS:
HNO3 - 80% (concentracin en 80%)
NaOH - 80% (concentracin en 80%)
H2O2
Etanol
Agua destilada

INSUMOS:
250 g. de hgado
Papas
Apio

PROCEDIMIENTO:
1. Lavar y cocer la mitad de cada muestra: la papa, el apio y e hgado.
2. En 5 tubos distintos se colocar cada insumo requerido.
3. Se colocar luego los reactivos correspondientes para cada tubo sealado por el docente.
4. Observar y tomar nota para los resultados correspondientes.
 Tubo 1 Tubo 2 Tubo 3 Tubo 4 Tubo 5
Muestra con Trozo de Hgado Hgado cortado
la enzima hervido y en trozos Hgado triturado Hgado triturado Hgado triturado
Peroxidasa machacado pequeos
Soluciones
4 gotas de 10 gotas de
para modificar 1 mL de Alcohol
HNO3 NaOH
el pH
Homogeneizar Homogeneizar Homogeneizar
Sustrato
5 mL 5 mL 5 mL 5 mL 5 mL
H2O2
Homogeneizar Homogeneizar Homogeneizar Homogeneizar Homogeneizar
Observacin No hay reaccin Reaccin Fuerte Reaccin dbil Reaccin fuerte Reaccin dbil
Explicacin Enzima Enzima libre con Enzima Enzima con Enzima
desnaturalizada actividad disminuye su actividad disminuye su
por la mxima. actividad por un mxima pues el actividad por un
Temperatura pH optimo pH acido pH del alcohol pH alcalino
no interfiere
 Con la papa la reaccin es ms dbil que con el hgado. Por qu?
En el hgado hay ms peroxisomas que en la papa, estos peroxisomas al someterlos a la presencia del
peroxido de hidrogeno o agua oxigenada, el cual es altamente reactivo y toxico para las clulas del hgado,
por lo que la funcin de los peroxisomas es proteger a las clulas del hgado del agua oxigenada.

Con el apio la reaccin es ms dbil que con el hgado. Por qu?

En el hgado hay ms peroxisomas que en el apio y a nivel del apio hay ms en sus hojas que en su tallo.
CONSIDERACIONES:
Los pH aproximados de las soluciones:
o HNO3 4.8
o Alcohol 6-8
o NaOH 14
El pH ptimo de la peroxidasa y su rango de pH dentro del cual es activa
o pH optimo 6.7 - 7
o Rango de pH 2.5 9

CONCLUSINES:

Los peroxisomas poseen una gran cantidad de enzimas entre ellas la catalasa, la cual degrada a sustancias toxicas
como el H2O2 (principal componente del agua oxigenada) convirtindolos en H 2O y O2.

Efecto de la Temperatura sobre la Actividad Enzimtica

La velocidad de una reaccin catalizada por una enzima se incrementa al aumentar la temperatura a la cual se lleva a
cabo la reaccin.
La temperatura ejerce un doble efecto, sobre la conformacin de la enzima y sobre la propia reaccin.

En la Fig. Se representa la tpica curva actividad-temperatura. La velocidad de la reaccin se incremente al aumentar

la temperatura dentro de un determinado rango, alcanzando un valor mximo a la denominada temperatura ptima. A
valores superiores la actividad disminuye debido a que la enzima, como cualquier otra protena, sufre procesos de
desnaturalizacin y, por lo tanto, de inactivacin.

Efectos del pH sobre la actividad

La actividad de la enzima peroxidasa es dependiente de pH. Exhibe actividad mxima a un pH entre 6.5 y 7.0,
dependiendo de la fuente de la cual se deriva la peroxidasa. La actividad de la enzima se reduce cuando los niveles
de pH estn aumentados o reducidos de este rango de pH ptimo. Actividad de la peroxidasa deja a un pH de 2,5 o
de 8.5 a 9.5. Niveles de pH ms bajos resultan en una ms efectiva inactivacin de la enzima que hacen altos niveles
de pH, lo que significa que los entornos cidos son ms eficaces inhibidores de la actividad de la peroxidasa que
entornos bsicos. El nivel de acidez o alcalinidad necesaria para inactivar la enzima vara por el tipo de la peroxidasa
utilizado.
CUESTIONARIO:

1. En cul de los tubos hubo mayor liberacin de gas?

En el Tubo 2 por el pH optimo

2. Por qu en las muestras de hgado no se destruyeron las enzimas?

En hgado crudo an se conservan las enzimas debido a que no se han desnaturalizado pero al cocinarlo si
se desnaturalizan y por lo tanto pierden su actividad.

3. Qu efecto podra tener una fiebre alta prolongada sobre el funcionamiento de las enzimas?
Las enzimas son protenas, y como tales tienen un funcionamiento ptimo a una determinada temperatura.
Cuando tenemos mucha fiebre, nos aumenta la temperatura.

El efecto de la temperatura sobre las protenas es que las desnaturaliza, o sea hace que estas comiencen a
perder su forma y con ello, su funcionalidad.

Como la funcin de las enzimas es catalizar las reacciones qumicas de nuestro organismo, el efecto que
produce la temperatura en las enzimas es que vamos a "gastar" ms energa de nuestro cuerpo para que las
reacciones se lleven a cabo, por lo tanto nos sentiremos cansados, desganados y dbiles.

5. Conoce alguna condicin mdica que se deba al mal funcionamiento de una enzima?

Gota
Porfiria
Homocistinuria
Hemofilia
Talasemia
Galactosemia
Fenilcetonuria