UNIVERSIDAD NACIONAL MAYOR DE SAN MARCOS

Universidad del Per, DECANA DE AMRICA

E.A.P FARMACIA Y BIOQUMICA

Ao del buen servicio al ciudadano

TOXICOLOGIA QUMICA Y LEGAL

PRCTICA N 1: ENSAYOS
PRELIMINARES
PAPELES SENSIBLES

1. FUNDAMENTO TERICO
 PRCTICA N 1: ENSAYOS PRELIMINARES
La Toxicologa es la ciencia que estudia las sustancias qumicas y los agentes
fsicos en cuanto son capaces de producir alteraciones patolgicas a los seres
vivos, a la par que estudia los mecanismos de produccin de tales alteraciones
y los medios para contrarrestarlas, as como los procedimientos para detectar,
identificar y determinar tales agentes y valorar su grado de toxicidad. 1

Por anlisis toxicolgico se entiende el conjunto de procesos analticos

encaminados a poner de manifest la presencia de una sustancia txica en una
muestra. Mediante ste, los txicos se identifican y se cuantifican teniendo en
cuenta sus propiedades fsico-qumicas. La principal caracterstica diferencial
del anlisis toxicolgico en relacin a otras clases de anlisis qumicos, es que
en la mayora de los casos no se trabaja sobre la muestra problema, sino que
es preciso extraer o separar el producto toxico de la muestra, antes de efectuar
en l las reacciones de identificacin y cuantificacin. La muestra problema
puede ser un fluido biolgico (sangre, orina, saliva), o porciones de tejido
(hgado, rin, cerebro, uas, pelos), en los que se debe buscar la presencia de
un producto exgeno (xenobiotico), con el objeto de informar a los tribunales
de justicia (toxicologa judicial o forense) o para establecer un diagnostico y/o
controlar la efectividad del tratamiento teraputico (toxicologa clnica). En
ciertas ocasiones el anlisis toxicolgico se realiza sobre un comprimido
medicamentoso, restos de vegetales, residuos en una taza, vaso, botellas,
alimentos, bebidas, envases, etc. 2

2. OBJETIVOS

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PRCTICA N 1: ENSAYOS PRELIMINARES
La capacidad para extraer, conservar, transportar y analizar las distintas
muestras biolgicas y no biolgicas para el examen toxicolgico.
Observar e interpretar los resultados obtenidos de una investigacin
toxicolgica.
Utilizar los papeles sensibles para determinar compuestos txicos en
fluidos biolgicos.

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 PRCTICA N 1: ENSAYOS PRELIMINARES
3. REACTIVOS, MATERIALES Y EQUIPOS
Materiales

Frascos de vidrio de boca ancha.

Muestras de orina, sangre, vmito y contenido gstrico.
Papel filtro

Equipo

Bao Mara

Reactivos

cido tartrico
Solucin acuosa de sulfato de cobre al 0.2%
Solucin alcohlica de resina de guayaco al 10%
Solucin acuosa de cido pcrico 1% caliente antes del enfriamiento se agregan
10gr de CO3 Na2
Solucin de Iodo yodurada
Solucin de almidn al 1%
Solucin de nitrato de plata al 10%
Solucin de di cloruro de paladio al 10%
Solucin de trtaro emtico al 10%
Solucin de acetato de plomo al 10%
Solucin de hidrxido de sodio al 10%
Solucin de sulfato ferroso al 10%
Solucin de cido clorhdrico concentrado

Fig.1. Reactivos

Fig.2. Tiras de papel filtro.

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PRCTICA N 1: ENSAYOS PRELIMINARES

4. METODOLOGIA
Se realiz reacciones en papeles sensibles :
Papel sensible de Schombein: se embebe una franja de papel de filtro en una
solucin de SO4Cu 10%, luego se embebe en una Sol. Alcohlica de resina de
guayaco al 10% .Luego el reactivo de papel de guayaco se puso en la boca del
recipiente que contiene el material a analizar.
Papel sensible de iodo almidonado: se embebe una franja de papel de filtro con
1 gotas de sol de almidn + 1gota de Sol de iodo-yodurado.
Reaccin con papel sensible de cloruro de paladio: Se humedece una tira de
papel con 1 gota de cloruro de paladio colocarlo en el frasco que contiene la MP
con 100mg de Ac. Tartrico, se llev a calentar a BM por 5min.
Papel sensible de acetato de plomo: se humedece una tira de papel con 1 gota
de acetato de plomo y colocarlo en el frasco que contiene la MP con 100mg de Ac.
Tartrico, se llev a calentar a BM por 5min .
Papel sensible alcalino: Se humedece una tira de papel filtro con 1 gota de
NaOH y colocarlo en el frasco que contiene la MP con 100mg de Ac. Tartrico, se
llev a calentar a BM por 5min .Luego aadir una gota de sulfato ferroso y 1 gota
de HCl concentrado.
Reaccin con papel sensible de Grignard: se embebi una tira de papel filtro
con Sol. de Ac .pcrico, luego se coloc en la boca del recipiente que contiene la
muestra a analizar.

Se llev a
Bao
mara por
5 minutos.

Fig.3. Muestra
Se retir las
tiras de
Fig.4.Los 7 papeles sensibles papeles
preparados colocados en el sensibles y se
envase que contiene la observaron.
muestra con 100g de cido
tartrico

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PRCTICA N 1: ENSAYOS PRELIMINARES

Anlisis Fsico

Muestra

Aspecto Liquido

Color Amarillento

Olor Sui generis

Volumen 100mL

5. RESULTADOS

La muestra dio positivo con el papel sensible alcalino indicando la presencia de

HCN.

Fig.5.Resultados de las Reacciones en papeles sensibles de la muestra.

6. CONCLUSION

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 PRCTICA N 1: ENSAYOS PRELIMINARES

La utilizacin de papeles sensibles en los ensayos analticos inmediatos permiten

identificar de forma rpida posibles compuestos txicos en fluidos biolgicos.
La reaccin con papel sensible alcalino por ser una prueba especfica para el
reconocimiento de HCN, nos permite concluir que la posible sustancia toxica en la
muestra de orina analizada es HCN y/o derivados

7. RECOMENDACIONES

Antes de realizar los ensayos preliminares, se debe utilizar los elementos

de proteccin personal, como los guantes, guardapolvo, lentes, mascarilla
para evitar cualquier accidente.
Asegurarse que nuestra muestra problema se haya almacenado en buenas
condiciones, ya que depende de sta los resultados fiables del anlisis.
Tener cuidado con los gases txicos que se desprenden en las reacciones
que se dan.

CUESTIONARIO

A. Puede el anlisis indicar otra patologa adems de una intoxicacin?

En la orina se pueden excretar compuestos que al ser hidrolizados nos den como
resultados los gases HCN, HS y CO2 los cuales son reconocidos por estos
papeles sensibles, si estos compuestos no se encuentran usualmente en la orina
podra ser signo de que la persona tiene una patologa pero el anlisis tendra q
ser mas especifico ya que primero se tendra que descartar que no hubo ninguna
intoxicacin.

B. Mecanismo de reaccin de las pruebas de tiras reactivas:

Papel sensible de Schombein3

Fundamento: Las sales de Cu al pasar a sales cuprosas insolubles o poco

disociadas aumentan su potencial de oxidacin. Esto se puede aprovechar si
colocamos una sustancia que al oxidarse cambie de color, como la resina de
Guayaco, que es de color castao y vira al azul.

16HCN + 8 Cu+2 -> 8(CN)2 Cu + 16H+

8(CN)2Cu -> 8CNCu + 4(CN)2 (ciangeno)
4(CN)2 + 4H2O -> 4HCN + 4CNOH (cido cinico)

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 PRCTICA N 1: ENSAYOS PRELIMINARES
4CNOH + C22H26O6 -> C22H24O9 + 4HCN + H2O
8HCN + 8 Cu+2 + C22H26O6 -> 8CNCu + C22H24O9 +16H+

cido alfa-guayacnico azul de guayaco

Primero se forma una sal inestable (CN)2Cu que pasa a CNH y CNOH, este
ltimo responsable de la oxidacin del cido guayacnico que da azul de
guayaco, lo que permite visualizar la reaccin del CNH sobre el Cu +2

Papel sensible de iodo almidonado

Fundamento: El ioduro de potasio forma el anion triioduro (I 3-) al

combinarse con iodo elemental.A diferencia del iodo,los triioduros son
altamente solubles en agua,por lo que el ioduro de potasio aumenta
considerablemente la solubilidad del iodo elemental en agua.
El ion yodo(II) (I2+) puede reducirse a ion yoduro(I-)por la accion, de un
agente reductor que puede ser el acido sulfhidrico o el acido cianhidrico ,y
cuando todo el yodo se consume , el color azul desaparece.Esto se llama
una valoracion yodometrica.

Mecanismo de reaccin

KI +I2 + 2 almidn 2 almidn I +KI

HCN + 2almidon-I 2I-1 + 2almidon +CN-1

+H+1
Reaccin qumica Balanceada:

HCN+I2 ICN +HI

Reaccin con papel sensible de cloruro de paladio

Fundamento: El paladio metlico producido da coloracin griscea oscura.

El cloruro de paladio reacciona con el monxido de carbono presente en la
muestra produciendo el paladio metlico y la precipitacin del dixido de
carbono. Adems de acidificar el medio.

Pd+2+ -O C Pd0+O-C+ Pd0 +O-C-OH

H2O-
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 PRCTICA N 1: ENSAYOS PRELIMINARES

Pd0 + O C-O-OH
Pd0 +O C O+
HCl HCl

Reaccin qumica Balanceada:

Pd Cl 2 + CO Pd0 +CO2+2HCl

Reaccin con papel sensible de trtaro emtico

Fundamento
El trtaro emtico (tartrato de antimonio y potasio) al entrar en contacto conel
cido sulfhdrico precipitar en forma de sulfuro de antimonio

Mecanismo de reaccin

S Sb-S-Sb S + H2O

Reaccin qumica balanceada:

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 PRCTICA N 1: ENSAYOS PRELIMINARES
2K(SbO)C4H4O6 +3H2S Sb2S3 + 2KH(C4H4O6) +2H2O

Reaccin con papel sensible de acetato de plomo o plumbito alcalino

Fundamento
Se basa en la formacin de sulfuro de plomo (color negruzco)

Mecanismo de reaccin

SH2 + Pb(CH3COO)2 SPb + 2CH3COOH

Papel sensible alcalino

Fundamento

Se basa en la formacin del complejo azul de Prusia. Realizado para el

reconocimiento de pequesimas cantidades de HCN.

Este ensayo, si bien a veces no resulta tan sensible como algunos de los que
se han detallado, tiene en cambio la enorme ventaja de su especificidad,
puesto que el azul de Prusia solo se forma en presencia de HCN. La presencia
de otros compuestos no interfiere en absoluto, por lo cual este papel sensible
tiene, en la prctica forense, enorme aplicacin aun en el aspecto cuantitativo.

Mecanismo de reaccin

HCN+ OH- CN- + H2O

6CN- + Fe+2 [Fe (CN)6]-4

Fe+2 + 2 OH- Fe(OH)2 pp verde

2Fe(OH)2 + O2 + H2O 2Fe(OH)3 en medio HCl

Fe(OH)3 +[Fe (CN)6]-4 + 3H- + Na+ Fe (CN)6 FeNa + 3H2O

Azul de Prusia

Reaccin qumica balanceada:

10 -4 - +
Fe(OH) 3 +[Fe (CN)6] + 3H + Na
 PRCTICA N 1: ENSAYOS PRELIMINARES

Na[Fe2(CN)6]+ 3H2O

Papel sensible de Grignard

Fundamento
El ensayo se fundamenta en que el cido pcrico en presencia del HCN,
liberado de la muestra acida, forma isopurpurato alcalino, de color rojo al
rojo naranja en el transcurso de cinco minutos

Mecanismo de reaccin

Reaccin qumica Balanceada:

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 PRCTICA N 1: ENSAYOS PRELIMINARES

Medio
alcalino
2HCN- O2

Isopurpurin
CIDO a
PICRICO

8. REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS

1. Hernndez J. Introduccin a la toxicologa. Universidad Autnoma de Madrid.

2010.

2. Anlisis qumico toxicolgico [En lnea]. Disponible en:

https://www.clubensayos.com/Ciencia/An%C3%A1lisisQu%C3%ADmicoToxicol
%C3%B3gico/797524.html. Acceso 02 de Abril del 2017

3. Monxido de carbono - cido cianhdrico y cianuros alcalinos [En lnea]. Disponible

en: https://es.slideshare.net/arielaranda2/seminario-y-trabajo-prctico-n-1-2014.
Acceso 02 de Abril del 2017.

4. Repetto M. Toxicologa fundamental. Ediciones Daz de Santos, 2009

ANEXOS:

1. Normas legales que rigen el anlisis toxicolgicos

Gua de toma de muestra, conservacin y transporte para anlisis toxicolgicos.

En la gua se plantean distintos aspectos del anlisis toxicolgico, desde los
estrictamente tcnicos como criterios de seleccin, preparacin y conservacin de
las muestras, hasta los aspectos legales asociados a los anlisis como cadena de
custodia y confidencialidad de los resultados.

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 PRCTICA N 1: ENSAYOS PRELIMINARES
2. Procedimiento en caso de la exhumacin de un cadver.

Actividades preliminares:

-Obtencin y estudio de la documentacin Judicial y/o Fiscal.

-Obtencin y estudio de la informacin del Registro Civil

-Obtencin y estudio de la Historia Clnica.

Se ha de informar previamente a los familiares de todas las operaciones que se

van a realizar en la exhumacin y posteriormente de los resultados obtenidos.

a. Acordar la realizacin de la exhumacin cuando se confirme la

disponibilidad de todas las condiciones logsticas necesarias para el caso.
b. Se registrarn fotogrficamente todas las actividades realizadas y si es
necesario se llevarn a cabo tambin registros grficos y videogrficos, de
modo que se acredite con exactitud el lugar concreto de la exhumacin. A
los efectos, una sola persona estar encargada de realizar todas estas
actividades. Todos los registros fotogrficos incluirn testigo mtrico.
c. Antes de llevar a cabo cualquier tipo de manipulacin del interior de la
sepultura se deber fotografiar el estado de la misma (intacto, con
desperfectos, destruido ) . Se requiere la mnima movilizacin posible del
contenedor a efectos de conservar la posicin anatmica de los restos y la
mezcla de los restos con otros materiales. Una vez localizados los restos se
proceder in situ a la realizacin de un examen preliminar de los mismos al
nico objeto de confirmar que se trata de los restos humanos que se
buscan. En ningn caso se proceder al examen en profundidad de los
restos en el lugar. Este examen solo se podr realizar en laboratorio o sala
de autopsias. De encontrarse algn tipo de contenedor sin restos humanos
se acreditar fotogrficamente el hecho, se trasladar el contenedor y se
evitar la manipulacin del interior hasta no llegar al laboratorio o sala de
autopsias.
d. Una vez recogidos los restos y/o su contenedor stos se introducirn en
una caja de cartn en el lugar. La caja de cartn se acondicionar para
evitar que el interior se pueda deteriorar, se siglar y se cumplimentar un
documento de cadena de custodia. El documento de cadena de custodia
deber ser firmado por todo aqul que asuma una parte o el total del
traslado as como la conservacin de los restos hasta su estudio.

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 PRCTICA N 1: ENSAYOS PRELIMINARES
3. Responsabilidad legal del profesional QF en el anlisis toxicolgico

Segn la ley N 28173, de acuerdo a su perfil profesional los qumicos

farmacuticos, ejercen actividades en laboratorios de anlisis toxicolgicos,
forenses, etc; por lo tanto debemos estar capacitados para la interpretacin de los
resultados y el conocimiento de los mecanismos de accin de las diferentes
sustancias txicas, tenemos la responsabilidad de brindar informacin cientfica y
orientacin oportuna contra toda forma de intoxicacin.

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