Universidad Autnoma de Nuevo Len

Facultad de Ciencias Qumicas

Licenciado en Qumica Industrial

Bioqumica microbiana

Producto Integrador de Aprendizaje Terico

Saccharomyces carlsbergensis

Equipo: 1

Nombre Matricula

Leticia Pierette Gonzlez Valds 1612814

Edson Johany Arango Rodrguez 1544237
Melani Aeleen vila Rodrguez 1594237

San Nicols de los Garza, a 15 de febrero del 2017

I. Introduccin
Taxonoma

Reino: Fung
Designa a un grupo de organismos eucariotas entre los que se encuentran

los mohos, las levaduras y los organismos productores de setas.

Filo (Tipo de Organizacin): Ascomycota

Constituyen una divisin dentro del reino Fungi. Son hongos con micelio tabicado

que producen ascosporas endgenas. Entre los ms sencillos destacan las

levaduras responsables de la fermentacin.

Clase: Hemiascomycetes (Saccharomycetes)

Son una clase en el Reino de los hongos, los hemiascomicetos ms conocidos

son las levaduras, especialmente la de la industria de la panificacin o de la

cervecera.

Orden: Saccharomycetales

Las Saccharomycetales es un orden en el Reino de los fungi que comprende

las levaduras.

Familia: Saccharomycetaceae

Las Saccharomycetaceae es una familia de levaduras en el

orden Saccharomycetales que se reproduce por gemacin

Gnero: Saccharomyces

El gnero Saccharomyces incluye muchos tipos diferentes de levaduras y forma

parte del reino de los hongos. La incapacidad para utilizar nitratos y la capacidad

de fermentar varios carbohidratos son las caractersticas tpicas de los

Saccharomyces. Sus colonias pueden crecer y madurar en 3 das y muestran un

 color amarillo oscuro. Muchos miembros de este gnero se consideran muy

importantes en la produccin de alimentos.

Especie: S. carlsbergensis

Importancia

Las cepas de levadura cervecera son del tipo Ascomicetos clasificados dentro del

gnero Saccharomyces. En la elaboracin de cerveza se utilizan principalmente

dos especies de levaduras: Saccharomyces cerevisiae para la produccin de

cerveza tipo Ale o de fermentacin alta y Saccharomyces carlsbergensis conocida

tambin como Saccharomyces uvarum o pastorianus para la produccin de

cerveza tipo Lager o de fermentacin baja.

Saccharomyces carlsbergensis es un producto de la elaboracin de

cerveza descubierto y empleado por la gran

industria danesa de cerveza denominada Carlsberg, hoy en da se emplea

esta levadura en la investigacin de ciertos procesos de la Gluclisis.

Saccharomyces carlsbergensis (S. pastorianus) es un hbrido de Saccharomyces

bayanus y Saccharomyces cerevisiae, esto no es sorprendente ya que existe un

grado de similitud entre el fenotipo y el genotipo de ambas especies. S.

pastorianus nunca se cultiva con temperaturas sobre los 34C, mientras que S.

cerevisiae lo hace a 37 C. S. pastorianus presenta una tasa de crecimiento mayor

que S. cerevisiae entre 6 y 12C.

II. Descripcin de los siguientes puntos sobre el microorganismo en

estudio.
1. Tipo de clula que presenta
Clula eucariota
2. Estructuras que componen la clula
Las clulas eucariotas estn formadas por: nuclolo, ncleo celular, ribosoma,

retculo endoplasmtico rugoso, Aparato de Golgi, citoesqueleto (microtbos),

retculo endoplasmtico liso, mitocondrias, microfilamentos, vacuolas, citoplasma,

lisosomas, membrana citoplasmtica y pared celular.

3. Biomolculas que forman la clula
El ncleo est compuesto de ADN y protenas, el citoplasma de sales, azcares,

aminocidos, cidos grasos y nucletidos, y la pared celular de quitina.

4. Morfologa macro y microscpica
Microscpica

Las colonias de Saccharomyces son hongos unicelulares, redondos o elipsoidales

que se reproducen por gemacin o fisin binaria. Crecen rpidamente y maduran

en tres das. Generalmente, tienen un dimetro de 2-8 m y una longitud de 3-25

m.

(a) (b)
Figura 1. (a) Colonia gigante de levadura cervecera tipo Lager o de fermentacin baja. (b) Observacin

microscpica de Saccharomyces Carlsbergensis.

Macroscpica
Se denomina levadura a cualquiera de los diversos organismos eucariotas,

clasificados como hongos, con forma unicelular predominante en su ciclo de

vida, generalmente caracterizados por dividirse asexualmente

por gemacin o fisin binaria y tienen estados sexuales que no estn adjuntos

a un esporocarpo (cuerpo fructfero).

 Figura 2. Levadura para la fabricacin de cerveza.
5. Tipos de preparaciones para observar al microorganismo y sus partes
Tincin simple: se utiliza para poder referirse a la morfologa.
Tincin con eritrosina: para un recuento de levaduras totales frente levaduras

vivas en las muestras.

6. Necesidades nutricionales

Para crecimiento
Las fuentes de carbono utilizadas por las levaduras varan desde los

carbohidratos hasta los aminocidos. Adems, la capacidad de utilizar ciertos

tipos de azcares ha sido tradicionalmente empleada para la caracterizacin

de las distintas razas que esta especie presenta. Entre los azcares que puede

utilizar estn monosacridos como la glucosa, fructosa, manosa y galactosa,

entre otros. Tambin son capaces de utilizar disacridos como la maltosa y

la sacarosa y trisacridos como la rafinosa. Uno de los azcares que no puede

metabolizar es la lactosa, utilizndose este azcar para distinguir esta especie

de Kluyveromyces lactis. Tambin es capaz de utilizar otras fuentes de carbono

distintas a carbohidratos y aminocidos.

Para generacin del producto
Entre las ms destacadas se encuentra la capacidad de utilizar tanto etanol

como glicerol. Por norma general, las levaduras mantienen dos tipos

de metabolismo muy bien diferenciados. Por una parte, en condiciones en las

que existen altas concentraciones de glucosa, fructosa o maltosa, la tendencia

 es a realizar una fermentacin alcohlica de estos, es decir, se realiza

la gluclisis y posteriormente se forma etanol.

7. Reproduccin

Saccharomyces carlsbergensis se reproduce asexualmente por germinacin

multiceular o por germinacin polar en el cual una porcin del protoplasma

sobresale de la pared de la clula y forma una protuberancia, lo cual aumenta de

tamao y se desprende formando una nueva levadura y ascosporas donde se

puede diferenciar por su color, rugosidad o lisura de su pared, su propsito de

reproduccin es aumentar la diversidad de la levadura.

Se obtienen medios de reproduccin en donde se incluyen la presencia de

inhibidores en el cual la sacarosa es el predominante tambin compuestos

nitrogenados como la betaina, el cido glutmico y algunos cidos orgnicos como

lctico, malice, actico y oxlico. Son haploides.

Figura 3. Ciclo de reproduccin de la levadura.

8. Condiciones de crecimiento y de produccin

El crecimiento es el aumento del nmero de microorganismo a lo largo del tiempo,

originando una poblacin en general se distinguen cultivos lquidos y slidos en

funcin de nutrientes en donde al transferirse a una solucin fresca de inicia un

ciclo de levadura.

El crecimiento del microorganismo est condicionado de diferentes factores:

Sustancias nutritivas
Temperatura
pH
Aireacin
Debe de tener todos los nutrientes necesarios para crecer en el medio
Factor limitativo
Control de flujo del carbono y otros nutrientes
Formacin de metabolites y biomasas

9. Mtodos de eliminacin

La Saccharomyces carlsbergensis se puede eliminar por esterilizacin va calor

hmedo.
10. Mtodos de control de crecimiento

El control del crecimiento se basa en reducir las condiciones ptimas del

crecimiento. La mayora de las levaduras crecen mejor con un alto contenido de

humedad. La Aw mnima de crecimiento oscila entre 0.88 y 0.94. El intervalo de

temperaturas de crecimiento es parecido al de los mohos, con una temperatura

ptima en torno a los 25 a 30C y una temperatura mxima en torno a los 35 a

47C. Crecen mejor en aerobiosis, aunque las especies de tipo fermentativo son

capaces de crecer, aunque lentamente, en anaerobiosis. Los azcares son la

fuente energtica ms apropiada para las levaduras, aunque las oxidativas,

pueden oxidar los cidos orgnicos y el alcohol.

11. Pruebas bioqumicas

Fermentacin de carbohidratos: se basa en la capacidad de un microorganismo de
fermentar (degradar) un hidrato de carbono especfico incorporado a un medio
bsico, produciendo cido gas visible. El medio contiene un indicador que vira al
cambiar el entorno de un ambiente bsico o uno cido. No todos los
monosacridos son degradados por todas las especies bacterianas; sus formas de
fermentacin difieren, ayudando a la identificacin del grupo, gnero o especie.
Wickerman: Medio para fermentacin de azucares. Para el test de
fermentacin de azucares se utiliza la campana de Durham.
La composicin es: 0.45% extraco de levadura, 0.75% bactopectona y azul
de bromotimol hasta que el medio quede de color verde intenso.
12. Rutas metablicas asociadas a su metabolismo

Glucolisis
Es la va metablica encargada de oxidar la glucosa con la finalidad de
obtener energa para la clula. Consiste en 10 reacciones enzimticas
consecutivas que convierten a la glucosa en dos molculas de piruvato, el cual es
capaz de seguir otras vas metablicas y as continuar entregando energa al
organismo.

Figura 4. Reaccin global de la gluclisis

La ruta por la que la levadura lleva a cabo el catabolismo de la glucosa es por

Emden-Meyerhoff, el cual transforma una molcula de glucosa a 2 molculas de
piruvato. El mecanismo por el que lleva a cabo este proceso de muestra a
continuacin:
 Figura 5. Mecanismo de Enden-Meyerhott

La ruta Emden-Meyerhoff es la ruta ms viable para la mayora de los

microorganismos para catabolizar la glucosa, y como ya se mencion
anteriormente consta de 10 reacciones sencillas que se describen a continuacin:
Paso 1: Hexoquinasa

Figura 6. Formacin de la glucosa-6-fosfato a partir de glucosa y ATP

La primera reaccin de la gluclisis es la fosforilacin de la glucosa, para activarla

(aumentar su energa) y as poder utilizarla en otros procesos cuando sea
necesario. Esta activacin ocurre por la transferencia de un grupo fosfato del ATP,
una reaccin catalizada por la enzima hexoquinasa,5 la cual puede fosforilar
(aadir un grupo fosfato) a molculas similares a la glucosa, como la fructosa y
manosa.
Paso 2: Glucosa-6-P isomerasa
En esta reaccin, la glucosa-6-fosfato se isomeriza a fructosa-6-fosfato, mediante
la enzima glucosa-6-fosfato isomerasa.
Paso 3: Fosfofructoquinasa

Fosforilacin de la fructosa 6-fosfato en el carbono 1, con gasto de un ATP, a

travs de la enzima fosfofructoquinasa-1 (PFK1).

Paso 4: Aldolasa

La enzima aldolasa (fructosa-1,6-bisfosfato aldolasa), mediante una condensacin

aldlica reversible, rompe la fructosa-1,6-bisfosfato en dos molculas de tres
carbonos (triosas): dihidroxiacetona fosfato y gliceraldehdo-3-fosfato.

Paso 5: Triosa fosfato isomerasa

Puesto que solo el gliceraldehdo-3-fosfato puede seguir los pasos restantes de la
gluclisis, la otra molcula generada por la reaccin anterior (dihidroxiacetona-
fosfato) es isomerizada (convertida) en gliceraldehdo-3-fosfato.

Paso 6: Gliceraldehdo-3-fosfato deshidrogenasa

Esta reaccin consiste en oxidar el gliceraldehdo-3-fosfato utilizando NAD+ para

aadir un ion fosfato a la molcula, la cual es realizada por la
enzima gliceraldehdo-3-fosfato deshidrogenasa.

Paso 7: Fosfoglicerato quinasa

En este paso, la enzima fosfoglicerato quinasa transfiere el grupo fosfato de 1,3-
bisfosfoglicerato a una molcula de ADP, generando as la primera molcula de
ATP de la va.
Paso 8: Fosfoglicerato mutasa

Se isomeriza el 3-fosfoglicerato procedente de la reaccin anterior dando 2-

fosfoglicerato, la enzima que cataliza esta reaccin es la fosfoglicerato mutasa.
Paso 9: Enolasa

La
enzima enola sa propicia la
formacin de un doble enlace en
el 2- fosfoglicerato,
eliminando una molcula de
agua formada por el
hidrgeno del C2 y el OH del C3.

Paso 10: Piruvato quinasa

Desfosforilacin del fosfoenolpiruvato, obtenindose piruvato y ATP.

13. Rutas metablicas asociadas a la generacin del producto

 Como sabemos la Saccharomyces pastorianus genera un producto muy
importante para la industria, el cual es la fermentacin de un alcohol. Esto se da
cuando la levadora al estar sin presencia de oxgeno al momento de haber
catabolizado la glucosa por la ruta de Embden-Meyerhof para producir piruvato el
cual por medio de algunas reacciones qumicas pasa de piruvato a formar etanol.

El proceso para formar etanol a partir de piruvato se llama fermentacin alcohlica

y este proceso ocurre en la mayora de las levaduras.

Figura 5. Proceso de fermentacin partiendo de piruvato para producir el etanol

En el proceso de la fermentacin alcohlica primeramente la glucosa pasa por el

proceso de la gluclisis por medio de la ruta Embden-Meyerhof para producir 2
piruvato, ya obtenido el 2 piruvato este se descarboxila por medio del piruvato
descarboxilasa formando 2 acetaldehdo, despus se reduce el acetaldehdo para
formar 2 etanol, por medio del alcohol deshidrogenasa.

III. Conclusiones

IV. La Saccharomyces carlsbergensis es una levadura la cual por medio de la

ruta de Emder-Meyerhoff para el catabolismo de la glucosa, utiliza en ausencia

 de oxigeno produce etanol, el cual es un subproducto util en la industria

cervecera.

V. Bibliografa
[1] M.C Guadalupe Inei Shizukawa, Evaluacin del efecto del metabolismo

anaerobio de diversas levaduras, 2009, paginas 55-67, Mxico, D.F

[2] https://mybeerdream.wordpress.com/tag/saccharomyces-carlsbergensis/

consultado 17 de mayo.

[3] Montrocher R et al (1998), Phylogenetic Analysis of the Saccharomyces

cerevisiae Group based on polymorphisms of the ADN spacer Sequences, Vol

48, pp295-303.

[4] https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/25088523 consultado 20 de mayo