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UNIVERSIDAD NACIONAL MAYOR DE SAN MARCOS

FACULTAD DE FARMACIA Y BIOQUMICA


ESCUELA ACADMICO PROFESIONAL DE FARMACIA Y BIOQUMICA
DEPARTAMENTO ACADMICO DE FARMACOLOGA, BROMATOLOGA Y TOXICOLOGA

PRCTICA N 6
CUANTIFICACIN DE ALCOHOL ETLICO: TECNICA DE
MICRODIFUSIN DE FELDSTEIN Y KLENDSHOJ.

PROFESOR ENCARGADO: QF.ALFONSO APESTEGUIA

INTEGRANTES:

AURIS CANDELA LIDIA YSABEL


LIPA HUAYTA GIANMARCO
MOTTA PARDO ANGELO PAUL
VEGA SEGURA KURWOLL HEDEN

HORARIO DE PRCTICAS:
Da: Martes Hora: 10:00 am - 2:00 pm Grupo: Los Alquimistas

LIMA-PERU
PRACTICA 6 | AURIS L., LIPA G., MOTTA P., VEGA H.

I. OBJETIVO
Determinar la concentracin de alcohol etlico en sangre.

II. MARCO TEORICO

Origen y Qumica.- El alcohol etlico tambin conocido como etanol, alcohol vnico y
alcohol de melazas, puede ser obtenido por dos mtodos principales: la fermentacin de
las azcares y un mtodo sinttico a partir del etileno. 1 El alcohol etlico es un lquido claro,
incoloro, volatil, inflamable, de olor caracterstico, muy hidrosoluble, hierve a 78 C. El
alcohol etlico es el constituyente fundamental de las bebidas alcohlicas que se clasifican
en fermentadas con un contenido alcohlico entre el 4 y el 20 por ciento v/v como el vino,
la sidra y la cerveza y destiladas con un contenido alcohlico ms elevado (43% v/v o ms)
como el ron, coac.2

Figura: Estructura tridimensional del alcohol etlico. Fuente:


https://www.google.com.pe/search?q=alcohol+etilico&source=lnms&tbm=isch&sa=X&ved=0
ahUKEwifwcfIjIXUAhXD5YMKHcoZAKMQ_AUICigB&biw=1366&bih=638#tbm=isch&q=alco
hol+etilico+formula&imgrc=qv027AS9rsc3aM:

TOXICOCINTICA: La absorcin tiene lugar sobre todo en el intestino delgado, el


vaciamiento del estmago y el ritmo de absorcin intestinal dependen de varios factores.
Se distribuye por todo el organismo siendo mxima la concentracin en tejidos ricos en
lpidos, sufre un metabolismo heptico y solo el 2% es eliminado sin biotransformarse por
la orina y por los pulmones. La excrecin pulmonar del etanol como mecanismo de
eliminacin tiene escaso inters. Pero desde el punto de vista analtico y judicial es de gran
importancia, pues los mtodos de anlisis incruento se basan en la determinacin del etanol
presente en el aire espirado. Se ha calculado que el etanol presente en 2000 ml de aire
espirado equivale al que hay en 1 ml de sangre arterial. El etanol se metaboliza por
oxidacin no microsmica en el citosol y por va microsmica. La enzima alcohol
deshidrogenasa transforma el etanol en acetaldehdo y es inhibida por el 4-metilpirazol o
fomepizol. 2Solo Una pequea cantidad de etanol se excreta sin cambios en la orina,

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el sudor y la respiracin, la mayor parte (90% a 98%) se metaboliza a acetaldehdo


y luego a acetato, principalmente en el hgado. 3

Farmacologa 4: El etanol tambin se une a GABA , glicina , NMDA receptores y modula


sus efectos. El alcohol acta como un depresor del sistema nervioso central (SNC), diurtico
y desinfectante. El alcohol puede actuar mediante la inhibicin de la apertura
de calcio canales, mediada por la unin del neurotransmisor inhibidor cido gamma-amino
butrico ( GABA ) para GABA receptores -a, o por medio de acciones inhibidoras en N- metil-
D-aspartato ( NMDA ) -type glutamato receptores. Tambin el alcohol inhibe la produccin
de la hormona antidiurtica, produciendo de esta manera una diuresis que puede conducir
a la deshidratacin. Este agente mata a los organismos mediante la desnaturalizacin de
sus protenas.

CUANTIFICACIN DE ALCOHOL ETLICO: TECNICA DE MICRODIFUSIN DE


FELDSTEIN Y KLENDSHOJ.

FUNDAMENTO: El etanol es insoluble en soluciones saturadas de 2 3, separndose de


la M.P (sangre) y haciendo que este flote sobre esta por su menor densidad, el etanol se
difunde y reacciona con la mezcla sulfocrmica (mezcla oxidante).

III. PARTE EXPERIMENTAL

A) REACTIVOS, MATERIALES Y EQUIPOS


Muestra Problema: 1mL de sangre venosa.

Reactivos:

Solucin sulfocrmica (K2Cr2O7/H2SO4- H2SO4 10% v/v)

Solucin saturada de K2CO3 al 10%

Base oleosa hidrosoluble siliconeada.

Anticoagulante (EDTA)

Materiales-Equipos:

Cmara de Conway de vidrio pirex.


Estufa Elctrica.
Espectrofotmetro.
Fiola de 10mL.
Pipetas graduadas de 1mL,5mL.
Propipetas.

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IV. METODOLOGIA.

Colocar 1mL de la muestra problemas (sangre) en el compartimento externo.


Colocar 2 mL de solucin sulfocrmica .Engrasar el borde externo de la base de la
cmara de Conway con la grasa siliconeada. Sobre la sangre adicionar 1 mL de
solucin saturada de K2CO3 , Cerrar el sistema y agitar dando 5 giros horarios
suaves. Colocar en la estufa elctrica a 50C por 20 minutos. Tomar 2mL del
compartimento interno y colocarlo en una fiola de 10mL y llevarlo a volumen con
agua destilada. Leer a 50nm calibrando a cero con la absorbancia con agua
destilada. Leer el blanco de reactivo y los estndares para la curva respectiva

Figura 2: Izquierda: sangre externa e la parte externa de la cmara, solucin sulfocrmica dentro de la
cmar Coway.

V. RESULTADOS:

CURVA CALIBRACION
0.3
y = 0.0506x - 0.0004
0.25
R = 0.9999
0.2
Absorbancia

0.15

0.1

0.05

0
0 1 2 3 4 5 6
Concentracin mg/dL

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DATOS:

Absorbancia muestra: 0.198


Absorbancia del blanco: 0.237

CALCULOS:

mg% EtOH: (Abs. Blanco Abs. Muestra) x F (1)

.
F=
...

1/
F= = 5.347
0.2370.050

Reemplazando en (1):

mg% EtOH = (0.237 0.198) x 5.347


= 0.2085 mg/dL

Formula de Widmark:


C= (2)

C: Concentracin de alcohol en sangre (g/L)


A: Cantidad de alcohol ingerida (V ingerido x peso especfico OH x grado alcohol)
P: masa en kg
Vd.: Volumen de distribucin (0.6 L/kg mujeres, 0.7 L/kg hombres)

Reemplazando en (2):


1.5 0.8 14.5
C=
0.6 53

C EtOH sangre = 0.54 g/L V legal sangre = <0.5 g/L

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VI. CONCLUSIONES:
Se determin la concentracin de etanol en sangre por el mtodo de Microdifusin
de Feldstein Y Klendshoj, obteniendo 0.2085 mg/Dl menor del valor legal de etanol
en sangre segn la legislacin peruana.

VII. DISCUSION DE RESULTADOS:


Dentro de los txicos voltiles, los alcoholes etanol (alcohol etlico) y metanol son
sustancias de importancia toxicolgica, dada su accin farmacolgica depresora del
sistema nervioso central (SNC) y el abuso creciente del consumo de bebidas
alcohlicas. Asimismo la determinacin de este solvente en sangre presenta
importancia mdico legal debido a que los individuos alcoholizados pueden ser
causantes de trastornos y accidentes de los cuales son imputables.

En el Per, la legislacin vigente ser los lmites para los diferentes grados de
alcoholemia de acuerdo a la Ley N 27753 de la siguiente manera: 5

Segn esta tabla, el valor hallado con la frmula de Widmark 0.54g/L estara en el
lmite superior del primer periodo en el cual el paciente no presenta alteraciones y
no tiene relevancia administrativa ni penal.
La concentracin de alcohol que se alcanza en sangre y otros fluidos depende de
varios factores, como la cantidad de alcohol ingerido, el estado de hidratacin del
cuerpo y el tiempo transcurrido hasta la toma de la muestra. 5
A la hora de determinar una intoxicacin aguda en algn individuo se debe tomar en
cuenta la edad, el sexo, el historial de consumo de alcohol y grado de desarrollo de
tolerancia para el consumo de alcohol. 6
El paciente evaluado fue una mujer de 22 aos sin hbitos de alcohol por lo que la
concentracin en sangre estuvo dentro de lo permitido aunque fue mayor que la de

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los otros pacientes varones evaluados durante la practica esto es debido a que en
las mujeres el alcohol se metaboliza ms lentamente el alcohol debido a ciertos
factores: 6
- La cantidad de agua del organismo: El alcohol etlico es totalmente soluble en agua
en cualquier proporcin, por lo que cuanto mayor sea la presencia de agua del
organismo mayor ser la dilucin del alcohol y, por tanto, menor su concentracin
en la sangre. Las mujeres tienen menor proporcin de agua en el organismo
- concentracin de enzimas implicada en la oxidacin del alcohol: a nivel de la
mucosa gstrica la actividad de la enzima (la enzima alcohol-deshidrogenasa) es
menor en las mujeres que en los hombres.
- El hbito de beber y la idiosincrasia individual. El hbito de beber puede acelerar
ligeramente el metabolismo del alcohol.
En cuanto al mtodo de Microdifusin de Feldstein y Klendshoj, hay que considerar
ciertos factores que pueden afectar los resultados como las prdidas de etanol que
pueden operarse por la indebida preservacin de la sangre, las mayores prdidas
se deben a la existencia de importante cmara de aire entre la muestra contenida
en el recipiente y la capacidad de ste. Es decir, matrices hemticas escasas en
recipientes de gran volumen, pierden etanol por evaporacin. Por tanto, debe
tenerse muy en cuenta este hecho a la hora de evaluar guarismos de alcohol
emanados del anlisis qumico. 7

VIII. RECOMENDACIONES:

Est contraindicado desinfectar los sitios de puncin con alcohol pues puede llegar
a desacreditar la prueba.

IX. Referencias Bibliogrficas

1.- Mosquera J, Cote M. ALCOHOL ETLICO: Un txico de alto riesgo para la salud humana
socialmente aceptado: RevFacMedUnivNacColomb [Serial on the internet].2006 [cited
2017 may 22; avaible from : http://www.scielo.org.co/pdf/rfmun/v54n1/v54n1a05.pdf.
2.- Velazco A. FARMACOLOGA Y TOXICOLOGA DEL ALCOHOL ETLICO, O ETANOL.
An Real Acad Med Cir Vall 2015 [Internet]. 2014 [cited 23 May 2017];51:242,243,244.
Available from: http://file:/// Dialnet-FarmacologiaYToxicologiaDelAlcoholEtilicoOEtanol-
5361614.pdf.
3. TOXNET [Internet]. Toxnet.nlm.nih.gov. 2017 [cited 23 May 2017]. Available from:
https://toxnet.nlm.nih.gov/cgi-bin/sis/search2/f?./temp/~ccw2nu:3
4.- ethanol | CH3CH2OH - PubChem [Internet]. Pubchem.ncbi.nlm.nih.gov. 2017 [cited 23
May 2017]. Available from:
https://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/compound/ethanol#section=MeSH-Pharmacological-
Classification
5. Canales C. Variacin de la concentracin de alcohol etlico en cadveres en relacin al
tiempo. [Tesis]. Lima: Universidad Mayor de San Marcos; 2011.
6. Alvarado A., Raudales I., Vega J. Determinacin de alcohol post mortem: aspectos a
considerar para una mejor interpretacin. Medicina Legal de Costa Rica. 2008; 25(2):35-46.
7. Ferrari L. Anlisis toxicolgico de etanol y su interpretacin forense. Ciencia Forense
Latinoamericana. 2008; 2(1-2): 20-35.

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