Introduccin

Los repelentes de insectos han sido definidos como compuestos qumicos que
producen en el insecto movimientos que lo alejan de la fuente emisora. Otros
autores los definen como compuestos qumicos o una mezcla de compuestos que
en su fase vapor desencadenan en el insecto un comportamiento que lo hace
moverse en sentido contrario a la fuente emisora.
Los repelentes naturales tambin conocidos como biopesticidas, son derivados de
sustancias naturales como plantas, animales, bacterias y minerales. Siendo el
aceite esencial de eucalipto y el aceite esencial de Citronela, los biopesticidas
que ms se utilizan como repelentes de mosquitos.
Marco terico
La citronela es una planta perenne que alcanza una altura de 1,50 m, su aceite es
extrado de las hojas, cuyo color es amarillo o marrn, presenta un alto contenido de
citronelol y geraniol pero la concentracin puede variar. El clavo por otra parte es el
capullo de un rbol tropical, su aceite contiene una gran cantidad de eugenol.
Algunas de las propiedades de los aceites de citronela y clavo se presentan a
continuacin.
Propiedades Aceite esencial de Aceite esencial de clavo
citronela
Estado fsico Lquido Lquido
Color Amarillo Amarillo plido
Olor Ctrico Caracterstico
Densidad O.902 g/mL 1.529 g/mL
Solubilidad Etanol, ter, cloroformo Etanol, ter, cloroformo
Propiedades biolgicas Posee propiedades que le Es un carminativo con
permiten actuar como propiedades antispticas
repelente, no diluido es y antibacterianas, puede
irritante causar hipersensibilidad
en la piel, es un irritante
drmico y mucoso.
Rutas de degradacin Fotolisis y oxidacin Fotolisis y oxidacin

Estructura qumica
Citronela
 Citronellal Citronellol

Clavo

Eugenol

Espectro de IR

Citronellal

Citronellol
 Eugenol

Objetivo
Desarrollar el estudio de preformulacin y formulacin para el desarrollo de
parches repelentes con aceites esenciales de clavo y citronela.
Hiptesis
Al desarrollar adecuadamente el estudio de preformulacin se obtendr una
formulacin estable de parches repelentes con aceites esenciales de clavo y
citronela.
Metodologa
Diagrama de flujo
Caracterizacin

Cromatografa en capa fina de los aceites

Preparar las
Seleccionar La fase Cubrir la cmara con
cromatoplacas con la Agregar el eluyente.
movill. papel filtro.
silica gel.

Colocar la muestra
Observar las placas Marcar el frente de del aceite a 1cm por
Eluir la muestra.
con una lampara UV. elucin. arriba de la parte
inferior de la placa.

Medir la distancia de
la muestra a la Calcular el Rf.
mancha y al frente.

Reactivos, materiales y equipo

Agua destilada
Silica gel
Cloroformo
Vaso de precipitados
Portaobjetos
Cmara de elucin
Pipeta graduada de 10 mL
Lmpara UV

Procedimiento
Se seleccion el medio de elucin, el cual fue cloroformo, etanol y etanol:cloroformo;
se agreg 6 mL a una cmara de elucin cubierta con papel filtro. Se esper a que el
papel se humedeciera con la fase mvil y se almacenaron para su uso.
Se prepar la silica gel con agua destilada y se coloc sobre los portaobjetos limpios
y secos, de un grosor adecuado. Se coloc en una estufa a 60C y se activaron por
2 horas. Se sacaron y se dejaron enfriar.
Se coloc la muestra a 1 cm por arriba de la parte inferior con un capilar. Se
colocaron las placas dentro de las cmaras cromatografas, se dej eluir la muestra,
se sac, se revelo con lmpara UV. Se marc el frente del disolvente y de la muestra
y se calcularon Rf.

Densidad

Efectuar la Retirar la tapa y Colocar el tapn y

Ensamblar y pesar
calibracin del llenar el picnometro dejar que el exceso
el picnometro vacio.
picnometro a 20C. con agua. de agua salga.

Colocar el
Colocar la tapa y Ajustar el volumen Verificar que no
picnometro en un
sacar el picnometro. del tubo capilar. haya burbujas.
bao de 20C.

Secar el exterior del Pesar nuevamente

picnometro. el picnometro.

Reactivos, materiales y equipo

Agua destilada
Aceites de clavo y citronela
Bao de agua
Picnmetro
Balanza analtica

Procedimiento

Se lav el picnmetro de acuerdo con las indicaciones establecidas en el apartado

de Limpieza. Se efectu la calibracin a 20C. Ensamblando y pesando el
picnmetro lavado y seco en una balanza analtica, registrando la masa en gramos,
hasta la cuarta cifra decimal. Se retir la tapa del tubo capilar y el tapn esmerilado
con el termmetro. Se llen el picnmetro con agua purificada recientemente hervida
y enfriada a 20C. Se coloc el tapn esmerilado con el termmetro adaptado
cuidadosamente y sin dejar que el exceso de agua saliera por el tubo capilar.
Se verifico que no haya burbujas en el interior del cuerpo del picnmetro y del
capilar. Se coloc el picnmetro lleno y se ensamblado, pero sin tapa, en un bao a
20C. Se verifico que el nivel de agua del bao, quedara arriba de la marca de
graduacin del picnmetro. Se equilibr el sistema a 20C, se ajust el volumen del
tubo capilar, de tal manera que el menisco del lquido quedara tangente al aforo. Se
sec muy bien el exterior y boca del capilar. Se coloc la tapa ajustndola bien. Se
sac el picnmetro y se sec escrupulosamente por todo el exterior con papel
absorbente, hasta que no quedarn gotas ni rastro de humedad, teniendo especial
cuidado con la base del ramal y la comisura de la junta del tapn esmerilado con el
cuello del cuerpo.
Se registr la masa hasta la cuarta cifra decimal, se calcul la masa del agua
contenida en el picnmetro mediante la siguiente frmula:
C=B-A
Donde:
C = Masa del agua en gramos.
B = Masa del picnmetro lleno con agua en gramos.
A = Masa el picnmetro vado en gramos.

Solubilidad

Colocar un
Colocar 4 mL de Colocar 0.3 mL de
excipiente diferente
agua destilada. cada aceite.
en cada tubo.

Realizar las
Agitar
observaciones.

Reactivos, materiales y equipo

Agua destilada
Aceite de clavo y citronela
Excipientes
Tubos de ensayo
Pipetas graduadas de 1 mL

Procedimiento

Se coloc en cada tubo 4 ml de agua destilada y 0.3 mL de cada aceite. Se agreg a

cada tubo 0.3 mL de un excipiente diferente y se observ si eran miscibles. Se
realiz lo mismo pero usando mezcla de excipientes.

Viscosidad

Se lleno el Se eintrodujo el
Elegir el aparato. viscosimetro con viscosimetro en bao
agua. mara

Se repitio el Se determino el
Se promediaron los procedimiento por tiempo de
tiempos resultante. triplicado para cada desplazamiento del
aceite . agua.

Calcular la viscosidad
con las formulas
correspondientes.

Reactivos, materiales y equipo

Aceites de clavo y citronela

Viscosmetro de Ostwald
Bao de agua

Procedimiento

La calibracin se llev a cabo calculando la constante K del aparato, determinando

el tiempo en el que se desplaza un fluido de referencia, como lo indica el manual de
manejo del aparato correspondiente y utilizando la frmula del mtodo 1. Se verti
por el tubo D, el volumen necesario de la muestra para llenar el bulbo. Se introdujo
el viscosmetro en bao y se equilibr a la temperatura de la prueba.
Una vez estabilizada la temperatura, por medio de succin se aplic en el tubo, se
pas la muestra al bulbo A hasta alcanzar unos 5 mm arriba de la marca, se
mantuvo ah con ayuda de obstruccin en el tubo, se destapo el tubo para que la
muestra fluyera a travs del capilar y se cont el tiempo cuando el nivel de la
muestra llegara a la marca. Se detuvo el cronometro cuando la muestra llego a la
marca. Se anot el tiempo de fluido de la muestra; se repiti tres veces la operacin
y se promediaron los tiempos resultantes. Previo al lavado del aparato, se determin
el tiempo en el que fluye el fluido de referencia en las mismas condiciones que la
muestra y se promedi los tiempos resultantes y se determin la viscosidad absoluta
de la muestra por medio de las formulas indicadas en el mtodo 1.

Estabilidad de la muestra (solo)

Colocar 3 viales en
Pesar 500 mg de cada
condiciones de luz
aceite en un vial.
blanca.

Y 3 viales en un
recipiente cerrado 3 viales en una estufa de
hermticamente con una estabilidad a 40C.
solucin de salmuera.

Reactivos, materiales y equipo

Agua destilada
Silica gel
Cloroformo
Viales
Vaso de precipitados
Portaobjetos
Cmara de elucin
Pipeta graduada de 10 mL
Lmpara UV
Balanza analtica

Procedimiento
Se pes 500 mg del aceite de citronela en cada uno de los 9 viales, se realiz lo
mismo con el aceite de clavo. Se etiquetaron los 18 viales y se colocaron 3 en la
estufa de estabilidad a 40C, 3 en la estufa de estabilidad a las mismas condiciones
pero dentro de un recipiente cerrado hermticamente que contenia una solucin
sobresaturada de sal y los ltimos 3 en precensia de luz blanca, todos durante 6
semanas y muestreando un vial de cada uno cada 2 semanas y evaluando la
estabilidad mediante CCF.

Estabilidad en solucin

Colocar 1g de citronela
en 8 tubos y 1g de Preparar 20 mL de una Preparar 20 mL de una
20 mL de H202
clavo en otros 8 tubos solucion de HCl 0.1N solucion de NaOH 0.1N
de ensayo.

Adicionar a cada tubo

Preparar soluciones a Preparar 20 mL de una 20 mL de Zn en HCl 0.1
10 mL de las
pH 3, 6 y 9. solucion de HCl 0.1N N.
soluciones preparadas.

Agitar y poner a bao Muestrear cada 4

maria. horas por CCF.

Reactivos, materiales y equipo

Agua destilada
HCl
NaOH
H2O2
Zn
Soluciones buffer
Cloroformo
Viales
Vaso de precipitados
Portaobjetos
Cmara de elucin
Pipeta graduada de 10 mL
Tubos de ensaye
Lmpara UV
Balanza analtica
Parrilla de calentamiento

Procedimiento

Se coloc 1 g de cada aceite, en total se usaron 8 tubos de ensayo para citronela y 8

para clavo. Se prepar una solucin de HCl 0.1 N, una solucin de NaOH 0.1 N, una
solucin de Zn en HCl 0.1 N y soluciones a pH 3, 6 y 9. A cada tubo se adiciono 10
mL de las soluciones prepararadas y 10 mL de H2O2. Se agito y puso a bao mara.
Se muestreo cada 4 horas y se verific la estabilidad por CCF.

Compatibilidad

Colocar los viales en

Agregar a 3 viales 500
Colocar 500 mg de una estufa de
mg de cada excipiente,
cada aceite en un vial. estabilidad a C
tres por cada funcion.
durante 6 semanas.

Continuar con este
procedimiento en la
semana 4 y 6.
A la segunda semana
tomar un vial de cada
Determinar el Rf.
excipiente y realizar la
CCF.

Reactivos, materiales y equipo

Agua destilada
Silica gel
Cloroformo
Viales
Vaso de precipitados
Portaobjetos
Cmara de elucin
Pipeta graduada de 10 mL
Lmpara UV
Balanza analtica

Procedimiento

Se seleccionaron 3 cosolventes, 3 conservadores y 3 polimeros para la base, para

cada excipiente se emplearon 3 viales. Se coloc 500 mg de cada aceite en un vial,
en total se usaron 27 viales para cada aceite. A 3 viales se agreg 500 mg de cada
excipiente, se etiquetaron y se colocaron en una estufa de estabilidad a C durante 6
semanas. A la segunda semana se tom un vial de cada excipiente y se realiz la
CCF. Se determin el Rf y se continu con este procedimiento en la semana 4 y 6.

Produccin de la base para el parche (escalamiento)

Agregar los demas

Hidratar la grenetina
Pesar las materias excipientes y
con agua caliente y
primas. homogeneizar
homogeneizar.
nuevamente.

Agregar los aceites y

Dejar secar y sacarlos Vertir la mezcla
mezclar
de los moldes. sobre los moldes.
homogeneamente.

Colocarlos en bolsas
de celopolian y
sellarlos.

Reactivos, materiales y equipo

Agua destilada
Excipientes
Aceites de clavo y citronela
Vasos de precipitados
Pipetas graduadas
Varilla de agitacin
Moldes para parches
Parrilla de calentamiento
Balanza analtica
Selladora

Procedimiento
El escalamiento se llev a 1 kg en la proporcin grenetina-glicerina 40:60, teniendo
un lote inicial de 50 g.
Se pes 284 g de grenetina, 576 g de glicerina, 15 g de Tween 20, 5 g de
propilparabeno y 10 g de cada aceite en una balanza analtica y semianalitica. Se
hidrato a la grenetina y se homogeneizo, se agregaron los gemas excipientes y los
aceites, se mezcl hasta que quedara homogneo. Se verti la mezcla sobre los
moldes limpios y secos, se dej enfriar, se sacaron las bases. Se colocaron dentro
de bolsas de celopolian y se sellaron.

Pruebas de control de calidad

Transparencia

Preparar la base Preparar la base

Cortar el parche al
para parche sin los para parche con
tamao de la celda.
aceites. aceite.

Tomar tre muestras

Calcular media,
de cada parche y
desviacion estandar
tomar tres muestras
y CV.
del lote.

Reactivos, materiales y equipo

Espectrofotmetro marca Barnstead/Turner modelo SP. 380 Plus
Celdas de vidrio
Agua desionizada

Procedimiento
Se seleccionaron 3 parches de cada formulacin, se midi y corto el parche de
acuerdo al tamao de la celda, tanto las formulaciones 60:40 y 70:30 sin aceites y
las mismas formulaciones con los aceites. Se determin el porcentaje de
transmitancia y se calcul el CV entre los parches de cada formulacin y para las 3
zonas de cada parche

Cromatografa capa
Colocar 7 bases para
parche en un vaso de Adicionar 40 ml de Calentar ligeramente
precipitados de 150 agua y agitar.
ml.

Colocar la muestra Preparar la camara

Eluir la muestra
de parche en una de elusion con
dentro de la camara.
placa de silica gel. cloroformo

Registrar la distancia
del eluyente y de la Calcular el Rf.
muestra.

Reactivos, materiales y equipo

Agua destilada
Silica gel
Cloroformo
Vaso de precipitados
Portaobjetos
Cmara de elucin
Pipeta graduada de 10 mL
Lmpara UV
Parrilla de calentamiento

Procedimiento

Se coloc 7 bases para parche en un vaso de precipitados de 150 ml, se adiciono 40

ml de agua y se calent ligeramente hasta fundir la base, se agito. Se prepar la
cmara de elusin con cloroformo, se coloc la muestra de parche en una placa de
silica gel con un capilar, se eluy la muestra dentro de la cmara. Se registr la
distancia del eluyente y de la muestra y se calcul el Rf.

pH

Pesar 5 g de Calentar
Agregar 40 ml
base para ligeramente y
de agua.
parche. disolver.

Determinar el
Realizar los Calibrar el
pH por
calculos potenciometro.
triplicado.

Reactivos, materiales y equipo

Agua destilada
Varilla de agitacin
Parrilla de agitacin
Balanza analtica
Potencimetro

Procedimiento

Se pes 5 g de base para parche por triplicado y se agreg 40 ml de agua. Se

calent ligeramente hasta disolver el parche con ayuda de una varilla de vidrio. Se
calibr el potencimetro con las soluciones buffer. Se determin el pH por triplicado
y se realizaron los clculos

Variacin de peso

Seleccionar 20 parches del lote por

nmeros al azar.

Pesar cada base para parche.

Calcular media, desviacin

estndar y coeficiente de variacin.

Reactivos, materiales y equipo

Balanza analtica

Procedimiento
Se seleccion 20 parches del lote por nmeros al azar, se pes cada base para
parche y se calcul la media, desviacin estndar y coeficiente de variacin.

Resultados

Caracterizacin

Especificaciones obtenidas del National Center for Biotechnology Information . PubChem; Open
 Especificaciones obtenidas del National Center for Biotechnology Information . PubChem; Open Chemistry datebase.
Compound Summary for CID 8842. Citronellol oil

Estabilidad (solo) semana 6

Estudio desarrollado durante 6 semanas, monitoreado por cromatografa en capa fina.

Estabilidad 12 horas (solucin)

 Las muestras fueron sometidas a 80C durante 12 horas, monitoreado por cromatografa en capa fina

Compatibilidad semana 6

Las muestras fueron puestas en cada condicin: luz blanca, temperatura de 40C y HR de 70%
 Las muestras fueron puestas en cada condicin: luz blanca, temperatura de 40C y HR de 70%

Formulaciones

Control de calidad
 Ninguna de las pruebas contaba con alguna especificacin .

Anlisis de resultados
Para poder llevar a cabo una adecuada fabricacin de parches de clavo y citronela,
es necesario realizar de manera correcta y adecuada, todo el proceso de
caracterizacin de cada uno de los extractos, ya que esto radica sumamente desde
el proceso de surtido y fabricacin, hasta el producto terminado, pues de ste va a
depender las condiciones del proceso, como las condiciones de almacenamiento.
Para dicha caracterizacin, deben contemplarse desde sus propiedades
organolpticas, hasta la densidad, viscosidad y miscibilidad de cada extracto.
Para el caso del proceso de estabilidad, deben establecerse de manera correcta las
condiciones de estrs, pues esto es un punto crtico para la eleccin de empaque
primario, pues es el que est en contacto directo con el extracto y ste es el que lo
va a proteger de la luz blanca, humedad al 75%/40C o temperatura de 40C, si es
que es afectado por alguna de estas condiciones. De igual forma, para la
determinacin del extracto en solucin, es importante determinar si sufre de
hidrolisis tanto cida como bsica, alguna reaccin de xido-reduccin o bajo qu
pH es que el extracto empieza a perder sus propiedades. Al hacer dicha
determinacin, ser como se podrn elegir algunos de los excipientes con los que va
a estar en la mezcla de los componentes el producto, para as, poder protegerlo de
alguna inestabilidad como las que se acaban de mencionar.
Es importante destacar que para la eleccin de cada uno de los componentes a
utilizar, se deber realizar un estudio de compatibilidad extracto-excipiente bajo
condiciones de estrs, para determinar si al interactuar con todos los posibles
componentes, el extracto pierde sus propiedades y con ello establecer la
combinacin ms adecuada para la produccin del producto.
Al contar con los estudios y monitoreo de la compatibilidad, deben tenerse las
condiciones necesarias para poder proponer algunas formulaciones, pues en base a
las propuestas, es cmo se elegir la ms adecuada. Con la formulacin elegida, se
debe considerar para un lote pequeo, pues es cmo se podr observar como
posible producto final, y para esto, se deben realizar las pruebas de compatibilidad
necesarias, que garanticen las especificaciones de los parches. Si dichas pruebas
satisfacen las exigencias de la gente, entonces es como se puede proceder a
realizar un lote de escalamiento al 10%, de acuerdo a l lote pequeo fabricado
anteriormente. Finalmente, si se logra dicho escalamiento, entonces al realizarle las
mismas pruebas de calidad, es como el producto puede proponerse para una
produccin an ms grande, garantizando la calidad y funcionalidad, en este caso
del parche.

Conclusiones
Se determin la apariencia, estado fsico, color, olor, densidad, viscosidad y
miscibilidad para la caracterizacin del aceite de clavo y citronela
El aceite de citronela es estable en presencia de luz blanca, a una temperatura de
40C y HR al 70%/40C, mientras que el de clavo, nicamente es estable en
presencia de temperatura de 40C.
El aceite de clavo y citronela conservaron sus propiedades en combinacin con
grenetina, glicerina, tween 20 y propilparabeno, pero no bajo condiciones de estrs.
Se obtuvo una formulacin de parches repelentes de aceite de citronela y clavo, con
una concentracin del 1% de cada aceite y una proporcion de grenetina:glicerina
(40:60).

Sugerencias
Se sugiere descartar el aceite de clavo de la formulacin, debido a que no mejora el
efecto repelente ni sensorial. Adems de ser inestable a la mayora de las
condiciones de estrs. Se recomienda adecuar un molde especfico para la cantidad
adecuada de la mezcla de componentes y adecuar un adhesivo que permita que el
parche permanezca en contacto con la ropa y superficies. Tambin es importante
disear y establecer el empaque, que incluya al adhesivo y realizar prueba de
ciclaje.

Referencias bibliogrficas
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mosquito bites. N. Enyl, J. Med. Vol. 347 (1) 13-18
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Farmacopea de los Estados Unidos Mexicanos. 11 ed. Mxico: Secretara
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Dosage Forms and Drug Delivery Systems. Lippincott Williams &
6. Gibson Mark. Pharmaceutical Preformulation and formulation, CRC Press.
2001.