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UNIVERSIDAD NACIONAL DE INGENIERA

FACULTAD DE INGENIERA QUMICA Y TEXTIL


ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERA QUMICA

LABORATORIO DE BIOQUMICA Y MICROBIOLOGA

Profesora : Dra. Jessica NIETO JUAREZ


Fecha : 05 / 05 / 2017
Cdigo curso : PI721-A

Laboratorio N 4 :

IDENTIFICACIN DE LPIDOS
1. OBJETIVO GENERAL:
Familiarizar al estudiante con algunas caractersticas generales de los lpidos
mediante pruebas qumicas cualitativas, el cual en base a estas observaciones se
podr identificar los lpidos presentes en la muestra.

2. INTRODUCCIN:
A parte del agua, carbohidratos, protenas, los seres vivos estn compuestos por
otras molculas que, en menor proporcin, desempean funciones muy
importantes. Tienen composicin qumica compleja y muy diversos uno del otro,
sin embargo, poseen caractersticas fsicas y biolgicas comunes.

Los lpidos son mezclas de esteres de cidos grasos, denominados glicridos. Son
un conjunto de molculas orgnicas, la mayora biomolculas compuestas
principalmente por C e H y en menor proporcin de O, tambin pueden contener P,
S y N, que tienen como caracterstica principal el ser hidrofbicas o insolubles en
agua. Cuando se agitan fuertemente la muestra lipdica en agua, stas se dividen
en pequeas gotas formando una emulsin de aspecto lechoso, que es inestable o
transitorio, ya que desaparece cuando est en reposo por reagrupacin de sus
gotas de la grasa en una capa, que por su menor densidad se sita por encima del
agua. Por el contrario, los lpidos son solubles en solventes orgnicos o no polares
(ter, metanol, benceno, etc.). Su solubilidad en alcoholes depender del tamao
del lpido, su ramificacin y presencia de grupos polares.

Los lpidos son constituyentes esenciales de la clula y cumplen funciones diversas


en los organismos vivientes, siendo estas (i) de reserva energtica (triglicridos), (ii)
estructural (fosfolpidos de las bicapas) y (iii) reguladora (esteroides). Debido a su
gran heterogeneidad qumica, los lpidos se pueden clasificar dependiendo de su
poder de saponificacin de la siguiente manera [1]:

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a) Lpidos saponificables: Son aquellos que al someterlos a una hidrolisis alcalina


(saponificacin) se convierten en jabones. Estos a su vez se subdividen en:

Lpidos Simples Lpidos Complejos


i. Glicridos o acilgliceroles i. Fosfolpidos
Aceites ii. Fosfoionositidos
Grasas iii. Glicolpidos
ii. Ceras iv. Sulfolpidos
v. Lipoprotenas
b) Lpidos insaponificables: Como su nombre lo indica, son aquellos que no tienen
capacidad de formar jabones.

Prostaglandinas y Esteroles y derivados


Leucotrienos i. Colesterol
ii. cidos biliares
Derivados del isopreno iii. Hormonas esteroideas
i. Terpenos Masculinas
ii. Carotenos Femeninas
iii. Vitaminas A, E, K Corticosuprarrenales
iv. Vitamina D

En esta prctica de laboratorio, se van a realizar una serie de pruebas qumicas


cualitativas para identificar los lpidos en diversas muestras de origen vegetal y animal.
Siendo estas pruebas las siguientes:

Prueba de solubilidad: Es una propiedad caracterstica de los lpidos. Siendo insolubles


en agua (formando una emulsin) y solubles en solventes orgnicos no polares.

Prueba de saponificacin: Es para identificar cidos grasos. Consiste en la reaccin


qumica de lpidos (grasas) con el hidrxido de sodio o potasio en caliente, formando
glicerina y cidos grasos. A su vez, estos se combinan con los iones de Na o K del
hidrxido para dar jabones, que sera las sales sdicas o potsicas de los cidos grasos.
Estos compuestos tienen la particularidad de ser anfipticos, es decir tiene una parte
polar y otra apolar (no polar), con la cual puede interactuar con sustancias de
propiedades distintas.

3. PARTE EXPERIMENTAL:
MATERIALES

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06 tubos de ensayo 150 x 15 mm 01 cocina elctrica


02 vasos de precipitado 50, 150 ml 01 gradilla para tubos
01 vaso de precipitado 600 ml 01 bagueta
02 pipeta graduada 10 y 5 ml 01 piceta
01 pro-pipeta 02 Baos Mara
01 pinza para tubo

REACTIVOS DE LOS ALUMNOS


Acetona Aceite vegetal
Alcohol etlico Mantequilla
Cloroformo Manteca vegetal o animal
ter Glicerina
NaOH 20% Yema de huevo

PROCEDIMIENTO
Solubilidad de los lpidos:
Preparar 5 tubos de ensayo en una gradilla.
Colocar en cada uno de ellos 2 ml de agua destilada, alcohol etlico, acetona, ter y
cloroformo.
Adicionar a cada solvente 1 ml de la muestra: (i) mantequilla o (ii) manteca o (iii)
aceite o (iv) glicerina, u otro que desee analizar.
Observar sin agitar por 3 minutos. Luego, agitar fuertemente el tubo (teniendo
cuidado). Anotar la solubilidad clasificando cada sustancia como soluble (S),
parcialmente soluble (PS) o insoluble (I) en la Tabla 1.
Luego, calentar todos los tubos con la muestra a 60 C. Anotar la solubilidad en la
Tabla 1.

Saponificacin de los lpidos:


Preparar 4 tubos de ensayo. Colocar en todos los tubos de ensayo 3 ml de aceite y
3 ml de NaOH al 20%.
Agitar vigorosamente y colocar los tubos en Bao Mara a ebullicin por espacio de
30 o 60 minutos. Si no se observa nada, seguir calentando.
Luego, dejar enfriar y anotar las observaciones en la Tabla 2 (debe observar tres
capas). Explicar que se ha formado en cada capa.
Enseguida, en la solucin saponificada formada en los tubos, agregar solo en tres
tubos, 1 ml CaCl2 10%, NaCl 10% y HCl 1N respectivamente.
Anotar las observaciones en la Tabla 2. Explicar que ha sucedido.

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4. ANALISIS Y OBSERVACIONES

Tabla 1. Solubilidad de los lpidos


Muestra Reactivo Caracterstica
Adicionar en cada tubo: 2 ml de (i) agua
Indicar muestra:
destilada, (ii) acetona, (iii) alcohol, (iv)
- Soluble
1 ml de muestra cloroformo y (v) ter. Observar sin agitar x
- Parcialmente
3. Luego, agitar y anotar sus observaciones.
Soluble
Enseguida, calentar los tubos a 60C y
- Insoluble
anotar sus observaciones.
PRUEBA DE SOLUBILIDAD
SOLVENTES
Compuesto Agua Alcohol
Acetona Cloroformo ter
destilada etlico

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Tabla 2. Saponificacin de los lpidos


Muestra Reactivo Caracterstica
Obser1: Solucin
3 ml NaOH al 20%. Agitar vigorosamente
de jabn formada
con cuidado! Poner en bao mara x 30
(identificar en que
3 ml de muestra a 1h. Dejar enfriar.
capa se forma).
(aceite) Enseguida, en 3 tubos adicionar 1ml
Obser2: Que pasa
CaCl2 10%, NaCl 10% y HCl 1N
con la solucin
respectivamente. Observar que ocurre.
saponificada.
PRUEBA DE SAPONIFICACION
Reactivo Observaciones Resultado
Tubo 1 4:
Aceite + NaOH
en caliente

Solucin saponificada de la prueba anterior

Reactivo
Tubo 2: + CaCl2 10%

Tubo 3: + NaCl 10%

Tubo 4: + HCl 1N

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