UNIVERSIDAD NACIONAL DE SAN CRISTBAL DE HUAMANGA

FACULTAD DE INGENIERA QUMICA Y METALURGA

ESCUELA DE FORMACIN PROFESIONAL DE INGENIERA EN
INDUSTRIAS ALIMENTARAS

TOXICOLOGIA DE LOS ALIMENTOS (TA - 454)

PRACTICA N 09
DETERMINACIN DE LUPANINA EN TARWI
PROFESOR : Ing. SABINA CONTRERAS CARRAZCO.
ALUMNOS :
GUZMN SOTO, Lizbeth E.
LAINES LAINES, Santos.
MASCCO GUZMN, Eduard.
TAYPE MUCHA, Gerson U.
ZUIGA VARGAS, Aracely.

AYACUCHO PERU
2011
 I. OBJETIVOS

Determinar el contenido de lupanina en tarwi

Correlacionar la presencia de lupanina con problema de toxicidad

II. FUNDAMENTO TERICO

2.1. TARWI

El tarwi es una leguminosa de la cual se utiliza en la alimentacin el grano conocido como

chocho en el norte del Per y ecuador. Esta especie es pariente de los lupinos o altramuces
(GROSS, 1982).

Los alcaloides (espartena, lupanina ,lupanidinaetc) se emplean para controlar ectoparsitos y

parsitos intestinales de los animales.

Figura 0,1.Flor de tarwi

Clasificacin cientfica
Reino: Plantae
Divisin: Magnoliophyta
Clase: Magnoliopsida
Orden: Fabales
Familia: Fabaceae (Leguminosas)
Subfamilia: Faboideae
Tribu: Genisteae
Gnero: Lupinus
Subgnero: Platycarpos
Especie: L. mutabilis
Nombre binomial LupinusmutabilisSweet
Ullush, talwish, tauri, talhue,
Nombrecomn chuchsmuti, chocho, chochos,
lupino.
FUENTE: (http://es.wikipedia.org/wiki/Archivo:Tarwi.png).

2.2. CARACTERSTICAS BOTNICAS

Es una planta anual, de altura determinada por el eje principal que vara entre 0,5 a 2 m.
Tallo: Generalmente muy leoso. Segn el tipo de ramificacin puede ser: de eje central
predominante, con ramas desde la mitad de la planta, tipo candelabro, o con ramas terminales;
y, de ramificacin desde la base, con inflorescencia a la misma altura. El nmero de ramas vara
desde unas pocas hasta ms de 50.
Hojas: Digitadas, generalmente compuestas por 8 fololos de forma ovalada a lanceolada.
Flores: De color azul, que puede cambiar a blanco y rosado; con inflorescencia en forma de
espiga. Corola papilionada, grande, de 1 a 2 cm de longitud, compuesta por un estandarte, dos
quillas y dos alas. Cliz con 5 spalos soldados. Estambres 10,. Pistilo con un estilo y un
estigma. Segn el tipo de ramificacin que presente, la planta puede tener hasta tres o ms
floraciones sucesivas.
Frutos: Vainas o legumbres de 5 a 12 cm de longitud, conteniendo un nmero variable de
semillas.
Semillas: de 0.5 a 1.5 cm de dimetro y 0.2 0.3 g de peso, recubiertas por un tegumento
endurecido. Forma variada: redonda, ovalada o ligeramente cuadrada. De colores diversos:
blanco, amarillo,gris, ocre, pardo, castao, marrn y combinados.
Raz: Pivotante, votorosa, de hasta 3 m de profundidad; con ndulos de variados tamaos (1-3
cm dim.), formados por un proceso de simbiosis con bacteriasnitrogenantes (Rhizobiumsp.)
(Castaeda; Manrique; Y OTROS; 2007).

2.3. QUMICA DE LA DROGA VEGETAL

Ensayos de Composicin Qumica:Se realiz el anlisis fitoqumico de las semillas del

LupinusmutabilisSweet (Tarhui). En los extractos de tarhui se detect la presencia de
Isoflavonoides. (Hormonas Vegetales), Quinolizidinicos(lupininaespartina). Para la extraccin
de Isoflavonoides de LupinusmutabilisSweet (Tarhui), se utiliz un mtodo de extraccin de
flavonoides con una solucin de NaCl 3%. Los isoflavonoides de Tarhui pueden ser utilizados
en la industria farmacutica. Ambos grupos de compuestos han sido determinados mediante
mtodos cromatogrficos y espectrofotomtricos (Castaeda; Manrique; Y OTROS; 2007).

2.4. COMPOSICIN QUMICA Y VALOR NUTRICIONAL

Composicin por 100 gramos de porcin comestible8

Tarwi cocido con cscara Tarwi crudo sin cscara Tarwi harina

Energa kcal 151 277 458

Agua g 69.7 46.3 37.0
Protena g 11.6 17.3 49.6
Grasa g 8.6 17.5 27.9
Carbohidrato g 9.6 17.3 12.9
Fibra g 5.3 3.8 7.9
Ceniza g 0.6 1.6 2.6
Calcio mg 30 54 93
Fsforo mg 123 262 440
Hierro mg. 1.4 2.3 1.38
Tiamina mg 0.01 0.6 ------
Riboflavina mg 0.34 0.4 ------
Niacina mg 0.95 2.10 ------

Acido ascrbico 0.00 4.6 ------

Principios activos

La semilla de Tarwi es rica en aminoacidos: lisina, metionina, triptofano, isoflavonoides11,

proteina (44%) grasa (16.5%), con contenido de acido linoleico (omega6)1, carbohidratos
(28%), alcaloides: espartena (lupinidina)6. Lupinina, y otros, cuyo porcentaje varia segn el
ecotipo de 0.3 3.5% Estos alcaloides se usan de acuerdo a la dosificacin y formas de
administracin de otra manera son txicos, dando un sabor extremadamente amargo a la
semilla, por lo que tiene que tratarse antes de consumirlo como alimento y los usuarios conocen
a cabalidad estos procedimientos (Castaeda; Manrique; Y OTROS; 2007).
 2.5. LUPANINA

La lupanina o hidroxilupanina y la lupinina o hidroximetilquinolidizona son los principales del

lupinus muto biliar.

Se han descrito 26 alcaloides diferentes, todas derivados de la quinolizidina y cuya naturaleza

varia sobre de lupino; asi el esqueleto de quinolidizinapuede estar enlazado con otros mas, como
sucede en la espartaina o con un anillo piperidinaco.

Como estos alcaloides (2%) comunican al lupino ciertos suberamargo y son de carcter toxico
deben eliminarse. Esto se logra con coccin de agua de la semilla entera y remojada
previamente durante unos 30 minutos, seguida de inmersin prolongada (3-4 das) en corriente
de agua (SCHMIDT-HEBBEL, 1986).

2.6. CARACTERSTICAS Y PROPIEDADES DE LOS ALCALOIDES DE

LUPINUS:
Lupinina.- C10H10N0. Octahidroquinolizina-1-metanol, fu aislada en los granos del lupino
amarillo en 1835 por Cassola y obtenida por primera vez por Zinert (1865). Segn Leonard
(1953) la frmula molecular correcta fue asignada en 1962 por Willstaster; siguiendo los
trabajos realizados anteriormente se comprob que los grupos funcionales en la molcula
solamente fueron un tomo de hidrogeno terciario y un carbonil, la presencia del grupo
hidroxilo fue firmemente establecida por la formacin de derivados de benzoil y un feniluretano
y por deshidratacion de la Lupanina anhidra C10H17N, por medio del cido slfurico y la
posible biosntesis de la Lupinina del aldehdo aminovalrico(de la lisina) ha sido mencionada
por Schop(Castaeda; Manrique; Y OTROS; 2007).

La Lupinina se caracteriza por tener la forma de prismas ortormbicos, es soluble en agua, ter,
alcohol o cloroformo, es una base fuerte. La forma racmica de la Lupanina fue sintetizada por
Becheleide en 1951.

Laigon, estableci que la Lupanina, al igual que la Esparteina y Trilupanina, tiene accin
estimulante sobre el msculo uterino de conejo.

Alfa Isolupanina C15H24N20, es un ismero ciscis de la Lupanina, Mariot et. al. citados por
Leonard (1953) establecieron 10 cclico de este ismero de la Lupanina y adems por
espectrometra (absorcin infrarroja), determinaron la posicion del enlace con el oxgeno.

La D aIfaisolupanina es entoces un diasteroismero de la Lupanina. En la determinacin de

alcaloides en una muestra de Lupinus con un promedio de 12 determinaciones por
Cromatografia de Gases (5), realizado en el ao 1981 por el Instituto Nacional de Salud informe
N7 de Noviembre de 1981 por el DrRainerGrossGraff y el Dr Luis Tuesta Vargas se tiene
los siguientes datos (Castaeda; Manrique; Y OTROS; 2007):
Fuente (Castaeda; Manrique; Y OTROS; 2007).

Fuente (Castaeda; Manrique; Y OTROS; 2007).

Fuente (Castaeda; Manrique; Y OTROS; 2007).

Fuente (Castaeda; Manrique; Y OTROS; 2007).

 2.7. TOXICOLGICA

Se realiz el ensayo de toxicidad aguda determinndose la DL50 (mg/Kg), de acuerdo al

Modelo de Lichfield JT et al (25)., para 10 cual se formaron grupos de seis ratones cada uno,
distribuidos al azar entre hembras y machos, administrndose el extracto acuoso en cocimiento
por va peroral con la ayuda de sondas metlicas orales en dosis crecientes teniendo en cuenta
un nivel de dosis para un solo grupo de animales en estudio, asimismo se tuvo un grupo control
al que se le administr agua destilada. Los animales fueron observados durante 24 horas para
registrar las condiciones de morbilidad o supervivencia u otros parmetros de actividad motora
como convulsiones y dificultades de movimiento y a los sobrevivientes se les observ durante 7
das, evalundose los resultados mediante los Probits Log (dosis-respuesta) (Castaeda;
Manrique; Y OTROS; 2007).

Fuente (Castaeda; Manrique; Y OTROS; 2007).

Fuente (Castaeda; Manrique; Y OTROS; 2007).

Fig. grafica de la DL50 (dosis respuesta) en ratones albinos del extracto acuoso de las semillas del
lupinusmutabilisSweet (Chocho) Instituto de Medicina Tradicional Andina- FMH USMP

Fuente (Castaeda; Manrique; Y OTROS; 2007).

 Fuente (Castaeda; Manrique; Y OTROS; 2007).

2.8. DL50 DE ALCALOIDES TOTALES: 600 MG/KG

La DL50 para el extracto acuoso en cocimiento fu de 3,500 mg/Kg de peso y para los
alcaloides totales de 600 mg/Kg de peso, asimismo podemos mencionar que la toxicidad del
Lupinus se manifiesta por convulsiones tnico-clnicas intensas que llevaron a la muerte a los
animales de experimentacin y asumimos que posiblemente esta toxicidad pueda estar dada por
los alcaloides presentes en el Lupinus, sin embargo a dosis menores no se evidenci la muerte
de ningn ratnhasta los 7 das. De acuerdo a la Clasificacin de Williams (DL50=3,500
mg/Kg) esta especie se ubica dentro de plantas ligeramente txicas y la causa de muerte podra
deberse a la depresin respiratoria por agotamiento, como sucede con los neuroestimulantes en
general (Castaeda; Manrique; Y OTROS; 2007).

2.9. DOSIS

Tabla 07. dosismnima letal (DML) para los alcaloides de lupino sin tratar 0,0744% de
alcaloide.

Peso corporal (kg) DML (masa de Lupino diario

alcaloide) (kg)
Adulto 60 18,000 760
Nio 24 7,200 300
Nia 12 3,600 150
Fuente (SCHMIDT-HEBBEL, 1986).

2.10. USOS

La harina de tarwi que se usa hasta en 15 % en la panificacin, por la ventaja de mejorar

considerablemente el valor proteico y calrico el producto.

Los alcaloides (espartena, lupinina, lupanidina, etc) se emplean para controlar ectoparsitos y
parsitos intestinales de los animales.

En estado de floracin, la planta se incorpora a la tierra como abono verde, con buenos
resultados mejorando la cantidad de materia orgnica, estructura y retencin de humedad del
suelo.Los residuos de la cosecha (tallos secos) se usan como combustible por su gran cantidad
de celulosa que proporciona un buen poder calorfico
(http://es.wikipedia.org/wiki/Archivo:Tarwi.png).

Parsitos internos (Tomar el cocimiento de las semillas en ayunas con igual cantidad de miel).
Caspa, cada de cabello (Aplicar cataplasmas con las semillas molidas crudas o sancochadas)
Estreimiento (Tomar el cocimiento de las semillas).
Fiebre y gripe (Infusin de 4 semillas y unas ramitas de verbena).
(http://golpedegato.blogspot.com/2006/09/tarwi-otra-maravilla-peruana.html).

Se emplea en dolores reumticos, artritis, gota, hinchazones, neuralgias, dolores de rin e

hgado (Cataplasma con el cocimiento tibio de las semillas o con las semillas molidas).
Reumatismo, artritis, gota (maceracin (1 noche) de 6 semillas molidas, tomar diario en ayunas)
Uso medicinal: los alcaloides (espartena, lupinina, etc) se emplean para controlar ectoparsitos
y parsitos intestinales de los animales. La esparteina tiene efectos cardiovasculares6, es tnico
cardiaco, antiespasmdico y sedante la dosis de uso Farmacolgico es de .0.10 -0,20 g por da
(Castaeda; Manrique; Y OTROS; 2007).

Fuente (Castaeda; Manrique; Y OTROS; 2007).

III. MATERIALES Y MTODOS

3.1 MATERIALES Y REACTIVOS
Balanza - Pipetas de 1, 5, 10 mL
Fiolas de 100 mL y 500 mL - Equipo de filtracin al
vacio
Probetas de 100 mL - Cloroformo
Matraz de erlenmeyer de 250 mL - Subnitrato de bismuto
Buretas - Acido actico glacial
Vasos de precipitado - Yoduro de potasio al
40%
Varillas de vidrio - KOH al 15%
Mortero con piln - NaOH al 0.01N
Bao Mara - Al2O3 y Rojo de
metilo

3.2 METODOLOGA
1.2.1 PREPARACIN DEL REACTIVO DE DRAGENDORF
Solucin A: 0,8 g de subnitrato de bismuto+10mL de acido actico glacial+40mL de
agua destilada.
Solucin B: Yoduro de potasio al 40 %
Mezclar un volumen de A (2,0 mL) con un volumen de B (2,5 mL) + 4 mL de cido
actico glacial y 50 mL de agua destilada.
 1.2.2 EXTRACCIN DE LUPANAMINA
Moler la muestra en un mortero y pesar 1,0 g. Tratar esta muestra en el mortero con 1 mL
de KOH al 15%.
Agregar 3 g de Al2O3 , moler hasta polvo seco y transferir a erlenmeyer de 100 mL
Aadir 20 mL de cloroformo, agitar y separar la fase acuosa por filtracin al vaco.
Repetir la operacin con 25 mL de cloroformo. Comprobar la presencia de lupanina en la
fase slida con el reactivo de Dragendorf. Si persiste la presencia del alcaloide, realizar
una nueva extraccin con 25 mL de cloroformo adicionales.
Concentrar el extracto hasta +/- 5 mL en rotavapor
Aadir 10 mL de H2SO4 0,01N y calentar a 70C en bao mara para eliminar el
cloroformo
Enfriar, aadir 2 gotas de rojo de metilo y titular con NaOH 0,01N.

% Lupanina = (a-b)*0,234*100

Donde a = Volumen cido x N del cido

b = Volumen de la base x N de la base

IV. RESULTADOS Y DISCUSIONES

4.1. RESULTADOS

Volumen de gasto=20,5ml

Normalidad de NaOH=0,01N

volumen de H2SO4 = 10 ml

Normalidad de H2SO4 =0,01N

% Lupanina = (a-b)*0,234*100

% = ( ) 0.234 100

% = ( ) 0.234 100

% = (20,5 0,01 10 0,01) 0,234 100

% =2,457%
4.2. DISCUSIONES

Segn:(SCHMIDT-HEBBEL, 1986). En la tabla 07, muestra que la dosis en (masa de

alcaloide) para una persona de adulto de 60kg es de 18, para nio con peso de 24kg es de 7,2 y
para nia con peso de 12kg es de 3,6; los cuales sopn de 0,074%, lo cual es mucho menor al de
obtenido en la practica que es de 2,457% lo cual producira mayor dao y/o una cantidad
bastante para hacer dao.

Segn: (SCHMIDT-HEBBEL, 1986),lupanina o hidroxilupanina y la lupinina o

hidroximetilquinolidizona son los principales del lupinus muto biliar o de tarwi.

Segn: (SCHMIDT-HEBBEL, 1986), Se han descrito 26 alcaloides diferentes, todas derivados

de la quinolizidina y cuya naturaleza varia sobre de lupino; asi el esqueleto de quinolidizina
puede estar enlazado con otros mas, como sucede en la espartaina o con un anillo piperidinaco.

Segn: (SCHMIDT-HEBBEL, 1986), Como estos alcaloides (2%) comunican al lupino ciertos
suberamargo y son de carcter toxico deben eliminarse. Esto se logra con coccin de agua de la
semilla entera y remojada previamente durante unos 30 minutos, seguida de inmersin
prolongada (3-4 das) en corriente de agua

Segn: (Castaeda; Manrique; Y OTROS; 2007), La Lupinina se caracteriza por tener la

forma de prismas ortormbicos, es soluble en agua, ter, alcohol o cloroformo, es una base
fuerte. La forma racmica de la Lupanina fue sintetizada por Becheleide en 1951.Laigon,
estableci que la Lupanina, al igual que la Esparteina y Trilupanina, tiene accin estimulante
sobre el msculo uterino de conejo.Alfa Isolupanina C15H24N20, es un ismero ciscis de la
Lupanina, Mariot et. al. citados por Leonard (1953) establecieron 10 cclico de este ismero de
la Lupanina y adems por espectrometra (absorcin infrarroja), determinaron la posicion del
enlace con el oxgeno.La D aIfaisolupanina es entoces un diasteroismero de la Lupanina. En la
determinacin de alcaloides en una muestra de Lupinus con un promedio de 12 determinaciones
por Cromatografia de Gases (5), realizado en el ao 1981 por el Instituto Nacional de Salud
informe N7 de Noviembre de 1981 por el DrRainerGrossGraff y el Dr Luis Tuesta Vargas.

Segn:(Castaeda; Manrique; Y OTROS; 2007). Menciona en su investigacin, que La

DL50 para el extracto acuoso en cocimiento fu de 3,500 mg/Kg de peso y para los alcaloides
totales de 600 mg/Kg de peso, asimismo menciona que la toxicidad del Lupinus se manifiesta
por convulsiones tnico-clnicas intensas que llevaron a la muerte a los animales de
experimentacin y asumimos que posiblemente esta toxicidad pueda estar dada por los
alcaloides presentes en el Lupinus, sin embargo a dosis menores no se evidenci la muerte de
ningn ratn hasta los 7 das. De acuerdo a la Clasificacin de Williams (DL50=3,500 mg/Kg)
esta especie se ubica dentro de plantas ligeramente txicas y la causa de muerte podra deberse a
la depresin respiratoria por agotamiento, como sucede con los neuroestimulantes en general.

Segn: (SCHMIDT-HEBBEL, 1986) mostrado en la tabla 07, la dosis letal mnima para
alcaloides de lupino sin tratar 0,0744% la cantidad depende factores como la edad, peso
corporal, mostrando DML (masa de alcaloide) para un adulto de 60 kg de peso corporal es de
18,000 lo cual representa 760 Lupino diario (kg) y para una nia de 12 kg de Peso corporal el
DML es de 3,600, lupino diario (kg) es 150; de lo cual se puede mencionar que en la practica se
obtuvo un alto contenido de lupino en tarwi, la muestra fue obtenida en mercado Nery Garcia.

Segn:(Castaeda; Manrique; Y OTROS; 2007). Se puede analizar cualitativamente la

presencia de alcaloides de lupino con el reactivo de Dragendorff en la cual se muestra
coloracin rojisa en presencia de lupinos lo caul no se ha realizado en la practica por falta de
reactivos.

V. CONCLUSIONES
Se determino lupanina de tarwi obteniendo 2,457% de lupanina en tarwi.
segn tablas obtenidas de las bibliografas se pudo comparar y mencionar de que la
lupanina es gran capacidad de toxicidad para el consumo humano para eliminar se
tiene que remojar en varias; y se puede mencionar segn bibliografas de que la
lupanina de tarwi es soluble en agua.

VI. BIBLIOGRAFA
SCHMIDT-HEBBEL, Hernn, 1986. TOXICO QUIMICOS EN ALIMENTOS
AVANCES EN NSU IDENTIFICACION, PREVISION Y DESINTOXICACION
editado por fundacin chile pag. 27-28.
http://es.wikipedia.org/wiki/Archivo:Tarwi.png
http://golpedegato.blogspot.com/2006/09/tarwi-otra-maravilla-peruana.html
Castaeda ;Manrique; Y OTROS;2007, Evaluacin del Efecto Antiinflamatorio del
ExtractoAcuoso de las Semillas de LupinusmutabilisSweet (Tarwi, Chocho), en
Animales de Experimentacin.