Methoden der Bestimmung von

pflanzenverfgbarem Phosphat im Boden

1. Ermittlung des Gehalts an pflanzenverfgbarem P im Boden nach Extraktion mit
Ca-Acetat/-Lactat
1.1. Einleitung
Kalium und insbesondere Phosphat werden in den meisten Boden stark sorbiert. Das
bedeutet, dass die Konzentrationen in der Bodenlsung niedrig sind, die beiden Nhrstoffe
aber aus der festen Bodenmatrix nachgeliefert werden. Diese Speicherformen sind in
unseren Bden fr P v.a. die an Fe- und Al-oxide und -hydroxide adsorbierten Phosphate,
die Calcium-Phosphate und das organische P, fr Kalium sind es die Tonminerale. Die
Erfassung der absolut fr die Pflanzen verfgbaren Nhrstoffmengen gestaltet sich daher
schwierig. Mit Hilfe der v.a. Deutschland verbreiteten CAL-Methode, bei der die Bden mit
einer Calcium-Acetat/Calcium-Lactat-Lsung bei einem pH 4,2 extrahiert werden, sollen die
Gehalte an pflanzenverfgbarem P und K ermittelt werden. Diese knnen (s. Einfhrung)
aber nicht auf die von der Pflanze tatschlich aufgenommenen Mengen hochgerechnet
werden, sondern dienen der Einteilung der Bden in bestimmte Gehaltsklassen (Tab.1), die
nach dem durch eine Dngung zu erwartenden Mehrertrag definiert sind (Abb.1).

Tabelle 1: Gehaltsstufen fr Phosphat und Kali in Ackerbden

(Nhrstoffgehalt in mg/100 g Boden, CAL)

Gehaltsstufe Phosphat fr Kali

alle Bodenarten leichte Bden mittlere Bden schwere Bden
(S, I'S) (IS-uL) (tL-T)
A sehr niedrig <5 <4 <5 <7
B niedrig 5-9 4-7 5-9 7-14
C anzustreben 10-20 8-15 10-20 15-25
D hoch 21-30 16-25 21-30 26-35
E sehr hoch >30 >25 >30 >35

Angaben in P2O5 bzw. K2O!!!!

Befindet sich ein Boden in Gehaltsklasse C, so kann erwartet werden, dass der Boden so
ausreichend mit P bzw. K versorgt ist, dass die Pflanzen optimale Ertrge erzielen und
durch eine zustzliche Dngung keine Mehrertrge erreichbar sind. Es gengt daher, die
Mengen an P bzw. K zu ergnzen, die dem Erntegut abgefahren werden. Bden, die sich
unterhalb von C in Gehaltsklasse A und B befinden, sollten durch Zuschlge langfristig im
Gehalt erhht werden. Auf Bden in Klasse D und E wird reduziert oder gar nicht gedngt,
um sie langfristig abzureichern (Tab. 2). hnliches gilt fr K: Zuschlge auf leichten Bden +
40 kg/ha, auf mittleren bis schweren Bden + 75 kg/ha.

1
 130 leichte Bden

Ertrag relativ zu ungedngter Kontrolle

mittlere Bden
schwere Bden
120

110

100

90

0
A B C D E
P-Gehaltsklasse, DL-Methode

Abb.1: Beziehung zwischen dem P-Gehalt des Bodens und dem durch P-Dngung erzielten
Mehrertrag
Tabelle 2: Beschreibung bzw. Definition der Gehaltsklassen fr P im Boden und daraus
abgeleitete Dngeempfehlung

Gehalts-
Bezeichnung Dngeempfehlung Voraussichtliche Dngewirkung
klasse (GK)
stark erhhte
auf Ertrag: hoher Mehrertrag
Dngung gegenber
A sehr niedrig auf Boden: Gehalt im Boden steigt
Empfehlung in GK C
deutlich an
(Abfuhr + 60 kg/ha)

erhhte Dngung
gegenber auf Ertrag: hoher Mehrertrag
B niedrig
Empfehlung in GK C auf Boden: Gehalt im Boden steigt an
(Abfuhr + 60 kg/ha)

auf Ertrag: geringer Mehrertrag

Erhaltungsdngung
C anzustreben auf Boden: Gehalt im Boden bleibt
(Abfuhr)
erhalten

D verminderte Dngung auf Ertrag: Mehrertrag meist nur bei

gegenber Blattfrchten
hoch
Empfehlung in GK C
auf Boden:
(1/2 Abfuhr)

E keine Dngung auf Ertrag: keine

sehr hoch
auf Boden:
In Klammern: Empfehlung fr Zu- bzw. Abschlge der LfL-Freising Achtung
Neubewertung 2009! Geteilte Gehaltsklasse und strkere Fruchtspezifitt!

2
1.2 Probenahme und Probenvorbereitung
Allgemeine Grundstze zur Entnahme von Bodenproben
Eine sorgfltige Probenahme ist von grter Bedeutung fr das Untersuchungsergebnis.
Fehler bei der Probenahme lassen sich niemals durch eine noch so genaue Laboranalytik
kompensieren. Untersuchungen zeigen, dass die bei einer wiederholten Beprobung und
Untersuchung auftretenden Abweichungen meist zu mehr als 80 % durch die Probenahme
bedingt sind. Fr die Probenahme gelten unabhngig von der Gre der Bezugsflche
immer die gleichen Grundregeln. In jedem Fall muss durch die Gestaltung der Probenahme
gesichert sein, dass die jeweils zugrundeliegende Flche durch die Probe reprsentiert wird.
Wichtige Voraussetzungen dafr sind eine ausreichende Anzahl an Probenahmepunkten
sowie die richtige Verteilung dieser Punkte.

Je Flche (groe Schlge nach Standort und Bewirtschaftung in kleinere Teilflchen

unterteilen) sollten 15 bis 20 Einstiche entnommen werden. Die einzelnen
Probenahmepunkte sollten so verteilt werden, dass sie mglichst gleichmig die gesamte
Probenahmeflche berdecken. Das kann durch eine entsprechende Anordnung der
einzelnen Punkte auf einem vorgegebenen Probenahmepfad erreicht werden. Die Auswahl
eines geeigneten Probenahmepfades (z.B. einfache oder doppelte Diagonale, S-, N- oder
W-frmige Verteilungen) erfolgt in Abhngigkeit von den Standortgegebenheiten. Der
Probenahmepfad sollte nie parallel zur Bearbeitungsrichtung liegen, um Fehler durch
Auswirkungen vorangegangener Bewirtschaftungsmanahmen (z.B. durch Dngestreifen) zu
vermeiden.

Beprobung und Probenvorbereitung fr P und K

Fr die Untersuchung von P und K wird der Oberboden mit Hilfe eines Bohrstocks beprobt.
Wegen der Anreicherung dieser Nhrstoffe im Ap-Horizont ist Sorgfalt hinsichtlich der Tiefe
von grter Bedeutung. Aus den Einstichen wird eine homogene Mischprobe erstellt. Dies
geschieht am besten durch das Sieben der Proben durch ein 5 mm Sieb. Fr die Analyse
muss der Boden luftgetrocknet (1-2 Tage) und auf 2 mm gesiebt werden.

3
1.3 Methodik zur CAL-Methode (nach SCHLLER, 1969)
a. CAL-Extraktionslsung
Vorratslsung A:

77 g Ca-Lactat in ca. 300 ml dest. Wasser und 39,5 g Ca-Acetat in ca. 300 ml dest. Wasser
lsen (erwrmen). Beide Lsungen vereinigen und mit 89,5 ml Eisessig (konz. Essigsure)
p.a. versetzen. Das Lsungsgemisch mit dest. Wasser im Messkolben auf 1 l auffllen.
Gebrauchslsung B:

1 l der Vorratslsung A wird mit dest. Wasser im Messkolben auf 5 l aufgefllt.

(= 0,1 M Ca-Lactat; 0,1 M Ca-Acetat; 0,3 M Essigsure; pH 4,1)

Die Extraktionslsung wird im Praktikum bereitgestellt.

b. Extraktion und Filtration

5 g lufttrockener, auf 2 mm gesiebter Boden wird in 300 ml Polyflaschen eingewogen.

Zu jeder Flasche werden 100 ml Gebrauchslsung B gegeben. Anschlieend werden die

Flaschen im berkopfschttler 1 Stunde geschttelt.

Anschlieend wird die Suspension durch Faltenfilter (NM 640 M ) in 100 ml Erlenmeyer-
Kolben filtriert.

Die ersten 10-20 ml Filtrat werden verworfen, da sie hufig eine Trbung aufweisen
(mangelnde Quellung des Filterpapiers, Leimstoffe etc.).

Je 5 ml des Filtrats werden mit einer Vollpipette in einen 25 ml Messkolben pipettiert und
anschlieend max. bis zur Hlfte mit dest. H2O aufgefllt.

b. Ansetzen einer P-Eichreihe

Zur Herstellung der Vorratslsung werden 4,393 g Kaliumdihydrogenphosphat p.a. (KH2PO4)
in dest. Wasser gelst und anschlieend auf 1 l aufgefllt.

Die Vorratslsung enthlt 1000 ppm P.

Daraus wird durch Verdnnung eine 5 ppm P Stammlsung hergestellt.

Die Eichreihe soll die Konzentrationen 0; 0,025; 0,05; 0,1; 0,2; 0,4 und 0,6 ppm (mg P/l)
umfassen. Das Endvolumen ist 50 ml (50 ml Kolben). Das zu pipettierende Volumen der
Vorratslsung errechnet sich zu:

4
 angestrebte Konzentration x Endvolumen
ml Stammlsung = -----------------------------------------------------------------
Konzentration der Vorratslsung
Das fr jeden Eichpunkt errechnete Volumen der Vorratslsung wird jeweils in einen 50 ml
Messkolben pipettiert.

Anschlieend werden jeweils 5 ml CAL-Lsung zugegeben (Matrix) und das Messklb-

chen bis zur Hlfte mit H2O dest. aufgefllt.

c. P-Bestimmung im Extrakt (nach MURPHY AND RILEY, 1962)

PRINZIP:
In saurer Lsung (H2SO4-Matrix) bilden Orthophosphate in Gegenwart von Molybdat- und
Antimon-Ionen eine Heteropolysure, die durch Ascorbinsure reduziert wird.

Die Absorption des gebildeten blauen Reaktionskomplexes wird spektralphotometrisch bei

einer Wellenlnge von 882 nm gemessen.

Reagenzien:

Nachweisreagenz A:

12 g Ammoniumheptamolybdat (NH4)6Mo7O24 x 4H2O werden in 250 ml dest. Wasser gelst.

0,2908 g Kaliumantimonoxidtartrat K(SbO)C4H4O6 x 0,5 H2O werden in 100 ml dest. Wasser

gelst.

Beide Lsungen werden in einem 2 l Messkolben zu 1000 ml einer 5 N H2SO4 (148 ml konz.
H2SO4 pro l) gegeben, grndlich geschttelt und auf 2 l aufgefllt.

Die Lsung ist verschlossen im Khlschrank aufzubewahren.

Nachweisreagenz B:

1,056 g Ascorbinsure werden in 200 ml des Reagenzes A gelst und gut durchgemischt.
Dieses Reagenz muss tglich frisch hergestellt werden, da es nicht lnger als 24 h haltbar
ist.

DURCHFHRUNG:

Zuerst werden zu jedem Eichpunkt (incl. der 5 ml CAL-Extraktionslsungsmatrix) 4 ml (8 ml

bei 50 ml Klbchen) Nachweisreagenz B zugegeben.

Anschlieend wird mit dest. Wasser bis zur Eichmarke aufgefllt und unter Festhalten des
Deckels umgeschttelt.

5
Mit den Filtraten der einzelnen Bodenproben wird analog verfahren, d. h. 4 ml (8 ml bei 50
ml Klbchen) Nachweisreagenz B zugegeben, mit dest. Wasser bis zur Eichmarke
aufgefllt und umgeschttelt.

Nach einer Reaktionszeit von mind. 30 min (Bei Raumtemperatur stehen lassen) kann die
Messung der Lichtabsorption des blauen Farbkomplexes bei einer Wellenlnge von 882 nm
am Spektralphotometer mit 1 cm Kvette gemessen werden.

Basierend auf der Messung der Eichpunkte errechnet das Photometer eine
Kalibrationskurve, die im vorliegenden Fall linear verluft. Darauf basierend werden die P-
Konzentrationen errechnet. Auf der Ergebnisliste des Photometers sind die Messwerte als
Konzentration mit der Einheit mg P/l (ppm) angegeben.

1.4 Auswertung und Interpretation

BERECHNUNG
Die Ergebnisse fr P sollen in der Einheit mg P pro 100 g Boden angegeben werden:

25 ml* 100 ml * 100 g

Phosphat-Gehalt [mg P pro 100 g Boden] = C [mg/l] *---------------------------------

5 ml * 1000 * 5 g

Berechnen Sie die P-Gehalte des Bodens in mg/kg.

In welche Gehaltsklasse gehren diese Bden? Hierfr sind die P-Gehalte (mg/100g
Boden) jeweils in P2O5 (f=142/62) umzurechnen.

Welche Konsequenzen hat dies fr Ihre Dngeempfehlung?

6
2. Bestimmung von NaHCO3-lslichem P (Olsen-P)

2.1 Einleitung

Das Extraktionsverfahren nach Olsen beruht auf der pH-Erhhung und dem Austausch von
adsorbiertem P durch Hydrogenkarbonat. Eventuell im Boden vorliegende surelsliche Ca-
Phosphate werden nicht erfasst. In diesem Extrakt ergibt sich hufig ein groer Unterschied
der Bestimmungsverfahren des anorganischen P nach MURPHY und RILEY (1962) und der
Bestimmung des Gesamt-P mit ICP, da auch organische P-Fraktionen oder Poly-Phosphate
extrahiert werden knnen. Im Extrakt wird nur P bestimmt.

2.2 Probenahme s. 1.2

2.3 Durchfhrung

Die Bestimmung des im Boden lslichen P mit einer Natriumhydrogencarbonat-Lsung

nach Olsen extrahiert (BASSLER, 1991).

Extraktionslsung:

Es werden je Liter Extraktionslsung 42,005 g Natriumhydrogencarbonat in Wasser gelst

und die Lsung anschlieend mit 1-molarer Natronlauge auf einen pH-Wert von 8,5
eingestellt.

Extraktion:

Die eingewogenen Proben (5 g lufttrocken) werden mit 100 ml der Extraktionslsung

versetzt und 30 Minuten bei konstanter Raumtemperatur maschinell geschttelt.

Nach dem Schtteln wird die Lsung durch einen Faltenfilter (M&N 640 M ) in einen 100
ml Erlenmeyerkolben filtriert. Um Trbungen zu vermeiden, werden hierbei die ersten 10-20
ml des Filtrats verworfen. Es werden 5 ml des Filtrates in 25 ml Messkolben pipettiert.

Der pH-Wert des Filtrates wird anschlieend auf 5,0 eingestellt, da die Anfrbung nach
MURPHY und RILEY (1962) ein saures Milieu bentigt! Hierzu nach dem Abpipettieren 0,8 ml
2 mol/l H2SO4 zu geben und sehr vorsichtig schwenken, bis sich kein CO2 mehr bildet.
Daraufhin werden die Messkolben mit destilliertem Wasser bis etwa zur Hlfte gefllt und
wieder geschttelt.

Zur Festlegung der Suremenge: eine Probe mit 5 Tropfen 2,4 Dinitrophenol-Indikatorlsung
(= 100mg/100ml, in Ethanol = etwa 95%) versetzen, und mit 2 molarer Schwefelsure bis
zum Farbumschlag von gelb nach farblos titrieren. Die so ermittelte H2SO4 Menge ist allen
brigen Proben zuzugeben. (Wurde bereits von der Assistentin durchgefhrt).

Die Bestimmung des P-Gehaltes erfolgt nach MURPHY und RILEY (1962) (s. oben S. 5)

Berechnen Sie die P-Gehalte des Bodens in mg/kg.

7
3. Bestimmung des wasserlsliches P nach van der Paauw

3.1 Einleitung

Die Extraktion mit Wasser stellt ein sehr mildes Verfahren der P-Extraktion dar. Es wird
davon ausgegangen, dass diese Methode (nur) sogenanntes mobiles P liefert, nmlich das
Bodenlsung und das adsorbierte P (PAAUW, 1971; SISSINGH und PAAUW, 1971). Die
Nachteile der Methode liegen im Laborhandling. Aus dem Extrakt wird nur P bestimmt.

3.2 Probenahme s. 1.2

3.3 Durchfhrung

Anmerkung: Die Originalvorschrift sieht eine volumetrische Basis vor. Aus Grnden der
Wiederholbarkeit schlgt Schachtschabel (1973) eine Einwaage vor (4 g Boden und 200 ml
H2O).

Extraktion:

Die Einwaage von 2 g Boden (luftgetrocknet) erfolgt in ein 300 ml Polyethylenflasche. Die
Bden werden mit je 4 ml H2O dest. Fr 22 h befeuchtet. Danach erfolgt die Extraktion mit
100 ml H2O dest. fr 2 h.

Fr die Filtration mssen, um Trbungen zu vermeiden 2 (im Praktikum 1) Faltenfilter (M&N

640 M ) ineinander gelegt werden. Die ersten 10 ml des Filtrats werden verworfen, da sie
oft trb sind. Sollte das Filtrat danach noch immer trb sein, werden 1,5 g NaCl Salz zu ca.
50 ml Filtrat gegeben (bis ca. 0,5 mol/l NaCl kein Einfluss auf die Anfrbereaktion nach
MURPHY und RILEY (1962).

Dazu 50 ml des Extrakts mit einem Messzylinder abmessen und 1,5 g NaCl Salz zugeben
und zum Lsen langsam schwenken. Dann wiederum filtrieren (M&N 640 M )

Bestimmung: nach MURPHY und RILEY (1962) (s. oben S. 5)

Berechnen Sie die P-Gehalte des Bodens in mg/kg.

8
4. P im CAT Extrakt: CaCl2-DTPA nach Alt "CAT Extrakt"

4.1 Einleitung

Wichtige "wirksame Bestandteile" des Extraktionsmittels sind Kationen (z.B. Ca) und ein
Komplexbildner (wie z.B. Citrat, EDTA hier DTPA), die den Nhrstoff selbst oder dessen
Metallbindungspartner komplexieren sowie Protonen, die die Lslichkeit von Salzen
verndern.
CAT ist das wichtigste Extraktionsmittel im Bereich grtnerischer Erden und Substrate. In
diesem Extrakt werden die Pflanzennhrstoffe NH4+, NO3-, P und K bestimmt. Der Extrakt
eignet sich auch zur Bestimmung von Cu, Mn, Na, Mg, Fe, Zn, Al, Pb und Cd (ALT und
PETERS, 1992.
Er wird auch fr die Spurenanalytik in Bden verwendet.

4.2 Probenahme s. 1.2

4.3 Durchfhrung

Extraktionslsung:
Extraktions-Stammlsung (10-fache Konzentration):
14,7 g CaCl2 x 2 H2O p.a. und 7,88 g DTPA p.a. (Merck Art. 8426) mit 1 Liter H2O auf dem
Magnetrhrer mit Heizplatte (Einstellung 100C) lsen. Bei etwa 60C sind die Reagenzien in
etwa 90-120 Min gelst.
Bei Aufbewahrung im Khlschrank treten leichte Ausfllungen auf. Bei Raumtemperatur ist
die Stammlsung etwa 1-2 Wochen haltbar.
Extraktions-Gebrauchslsung:
Stammlsung 1:10 mit H2O verdnnen.
Konzentration der Gebrauchslsung: 0,01M CaCl2 + 0,002 M DTPA
Die Gebrauchslsung hat einen pH-Wert von 2,6-2,65.
Lsung wird im Praktikum bereitgestellt.
Extraktion:
25 g Substrat (im kulturfeuchten Zustand) hier 25 g Boden in eine 300 ml Polyethylenflasche
einwiegen, mit 200 ml Extraktionslsung 1 Stunde schtteln und durch einen Faltenfilter
(M&N 640 M ) in einen 100 ml-Erlenmeyerkolben filtrieren. Die ersten 10 20 ml Filtrat
werden verworfen (mgliche Verunreinigungen des Filters).

Bestimmung des P nach MURPHY und RILEY (1962) (s oben S.5).

Berechnen Sie die P-Gehalte des Bodens in mg/kg.

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Literaturverzeichnis

ALT, D. and I. PETERS. 1992. Die CaCl2/DTPAMethode zur Untersuchung grtnerischer

Erden auf Mengen- und Spurenelemente. 2. Mitteilung: Kupfer und Mangan. Agribiol.
Res. 45, 215224.
BASSLER R. (Hrsg.) (1991): Die Untersuchung von Bden. Handbuch der Landwirt-
schaftlichen Versuchs- und Untersuchungsmethodik. VDLUFA Methodenbuch Band I,
VDLUFA-Verlag Darmstadt.
MURPHY, J. AND RILEY, J.P. (1962): A modified single solution method for the determination
of phosphate in natural waters. Anal. Chim. Acta 27, 31-36.
PAAUW, F, VAN DER (1971) An effective water extraction method for the determination of plant
available soil phosphorus. Plant and Soil, 34, 467-481.
SCHACHTSCHABEL, P (1973) Beziehung zwischen dem Phosphorgehalt in Bden und jungen
Haferpflanzen. Z. Pflanzenernhr. Bodenk. 35, 31-43.
SCHLLER, H. (1969): Die CAL-Methode, eine neue Methode zur Bestimmung des pflanzen-
verfgbaren Phosphats in Bden. Z. Pflanzenernhr. Bodenk. 123,1, 48-63.
SISSINGH H. A. und PAAUW, F. VAN DER (1971) Analytical technique of the Pw method, used
for the assessment of the phosphate status of arable soils in the Netherlands. Plant and
Soil 34, 483-486.

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