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CALCIUM-oC v/v

Calcio
o-Cresolftaleina v/v. Colorimtrico

Determinacin cuantitativa de calcio


IVD CLCULOS
Conservar a 2-8C Suero o plasma
(A) Muestra (A) Blanco
x 10 (Conc. Patrn) = mg/dL de calcio en la muestra
PRINCIPIO DEL MTODO (A) Patrn (A) Blanco
La medicin del calcio se basa en la formacin de un complejo coloreado entre
el calcio y la o-cresolftaleina, en medio alcalino: Orina 24 h
OH (A) Muestra (A) Blanco
Ca++ + o-Cresolftaleina Complejo coloreado x 10 (Conc. Patrn) x vol. (dL) orina/24 h = mg/24 h de calcio
(A) Patrn (A) Blanco
La intensidad del color formado es directamente proporcional a la concentracin
de calcio presente en la muestra ensayada1,2,3. en la muestra
Factor de conversin: mg/dL x 0,25= mmol/L.
SIGNIFICADO CLNICO
El calcio es el mineral ms abundante e importante del cuerpo humano, el 99 % CONTROL DE CALIDAD
se halla en los huesos. Es conveniente analizar junto con las muestras sueros control valorados:
Una disminucin de los niveles de albmina causa una disminucin del calcio en SPINTROL H Normal y Patolgico (Ref. 1002120 y 1002210).
suero. Niveles bajos de calcio pueden atribuirse a hipoparatiroidismo, Si los valores hallados se encuentran fuera del rango de tolerancia, revisar el
pseudohipoparatiroidismo, dficit de vitamina D, malnutricin o mala absorcin instrumento, los reactivos y el calibrador.
La mayora de las causas de hipercalcemia son debidas a enfermedades Cada laboratorio debe disponer su propio Control de Calidad y establecer correcciones
oncolgicas, intoxicacin por vitamina D, aumento de la retencin renal, en el caso de que los controles no cumplan con las tolerancias.
osteoporosis, sarcoidosis, tirotoxicosis e hiperparatiroidismo 1,6,7.
VALORES DE REFERENCIA1
El diagnostico clnico debe realizarse teniendo en cuenta todos los datos clnicos
Suero o plasma:
y de laboratorio.
Adultos 8,5-10,5 mg /dL 2,1-2,6 mmol/L
Nios 10-12 mg/dL 2,5-3,0 mmol/L
REACTIVOS
Recin nacidos 8-13 mg/dL 2,00-3,25 mmol/L
Etanolamina 500 mmol/L
R1 Orina:
Cloroformo 15 mmol/L
Tampn Adultos 50-300 mg/24 h 1,25-7,50 mmol/24 h
Metanol 5700 mmol/L
Nios 80-160 mg/24 h 2,00-4,00 mmol/24 h
R2 o-Cresolftalena 0,62 mmol/L
Cromgeno 8-Hidroxiquinolena 69 mmol/L Estos valores son orientativos. Es recomendable que cada laboratorio establezca sus
propios valores de referencia.
CALCIUM CAL Patrn primario acuoso de Calcio 10 mg/dL
CARACTERSTICAS DEL MTODO
PRECAUCIONES Rango de medida: Desde el lmite de deteccin de 0,07 mg/dL hasta el lmite de
R1: H302+H312+H332-Nocivo en caso de ingestin, contacto con la piel o linealidad de 35 mg/dL.
inhalacin. H314- Provoca quemaduras graves en la piel y lesiones oculares Si la concentracin de la muestra es superior al lmite de linealidad, diluir 1/2 con ClNa
graves. H370-Provoca daos en los rganos. 9 g/L y multiplicar el resultado final por 2.
R2:H290-Puede ser corrosivo para los metales. H314-Provoca quemaduras Precisin:
graves en la piel y lesiones oculares graves. Intraserie (n= 20) Interserie (n= 20)
CAL: H290-Puede ser corrosivo para los metales. Media (mg/dL) 9,14 16,02 9,34 16,27
Seguir los consejos de prudencia indicados en la FDS y etiqueta del producto. SD 0,07 0,11 0,20 0,37
CV (%) 0,74 0,68 2,16 2,27
PREPARACIN
Los reactivos y el patrn estn listos para su uso. Sensibilidad analtica: 1 mg/dL = 0,044 (A).
Exactitud: Los reactivos SPINREACT (y) no muestran diferencias sistemticas
CONSERVACIN Y ESTABILIDAD significativas cuando se comparan con otros reactivos comerciales (x).
Todos los componentes del kit son estables hasta la fecha de caducidad indicada Los resultados obtenidos con 50 muestras fueron los siguientes:
en la etiqueta, cuando se mantienen los viales bien cerrados a 2-8C, protegidos Coeficiente de correlacin (r)2: 0,981.
de la luz y se evita su contaminacin. Ecuacin de la recta de regresin: y= 0,8234x + 1,5484.
No usar reactivos fuera de la fecha indicada. Las caractersticas del mtodo pueden variar segn el analizador utilizado.
Indicadores de deterioro de los reactivos:
- Presencia de partculas y turbidez. INTERFERENCIAS
- Absorbancia (A) del Blanco a 570 nm 0,22. Triglicridos <1,25 g/L, no interfieren1,2,3. Se han descrito varias drogas y otras
substancias que interfieren en la determinacin del calcio4,5.
MATERIAL ADICIONAL NOTAS
- Espectrofotmetro o analizador con cubeta para lecturas a 570 nm. 1. CALCIUM CAL: Debido a la naturaleza del producto, es aconsejable tratarlo con
- Cubetas de 1,0 cm de paso de luz. sumo cuidado ya que se puede contaminar con facilidad.
- Equipamiento habitual de laboratorio(Nota 2,3)
2. Se recomienda utilizar material de plstico de un solo uso. Si se usa material de
MUESTRAS vidrio se deber lavar con cido ntrico diluido con agua (1/2), enjuagar varias
- Suero o plasma1: Separado lo antes posible de los hematies. No usar oxalato veces con agua destilada y secar antes de su uso.
3. La mayora de detergentes destinados a uso del laboratorio contienen agentes
- o EDTA como anticoagulantes ya que son fuertes quelantes de calcio.
- Orina1: Efectuar la recogida de orina de 24 horas en recipientes libres de calcio. quelantes. Trazas de los mismos, como consecuencia de un mal aclarado del
- Antes de la recogida adicionar al contenedor 10 mL de cido ntrico al 50%
- (v/v). Anotar el volumen. material, invalida la determinacin.
- Diluir la orina 1/2 en agua destilada para su anlisis. Mezclar. Multiplicar el 4. La calibracin con el Patrn acuoso puede dar lugar a errores sistemticos en
resultado obtenido por 2 (factor de dilucin). mtodos automticos. En este caso, se recomienda utilizar calibradores sricos.
Estabilidad de la muestra: El calcio es estable 10 das a 2-8C. 5. Usar puntas de pipeta desechables limpias para su dispensacin.
6. SPINREACT dispone de instrucciones detalladas para la aplicacin de este
PROCEDIMIENTO reactivo en distintos analizadores.
1. Condiciones del ensayo:
Longitud de onda: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 570 nm (550-590) BIBLIOGRAFA
Cubeta: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .1 cm paso de luz 1. Farell E C. Calcium. Kaplan A et al. Clin Chem The C.V. Mosby Co. St Louis.
Temperatura: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .37C / 15-25C Toronto. Princeton 1984; 1051-1255 and 418.
2. Ajustar el espectrofotmetro a cero frente a agua destilada. 2. Kessler G. et al. Clin Chem 1964; 10 (8); 686-706.
3. Pipetear en una cubeta:(Nota 5) 3. Connerty H. V. et al. Am J Clin Path 1996; 45 (3); 200-296.
Blanco Patrn Muestra 4. Young DS. Effects of drugs on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC Press, 1995.
5. Young DS. Effects of disease on Clinical Lab. Tests, 4th ed. AACC 2001.
R 1 (mL) 1,0 1,0 1,0
6. Burtis A. et al. Tietz Textbook of Clinical Chemistry, 3rd ed. AACC 1999.
R 2 (mL) 1,0 1,0 1,0 7. Tietz N W et al. Clinical Guide to Laboratory Tests, 3rd ed. AACC 1995.
Patrn(Nota 1,4) ( L) -- 20 --
PRESENTACIN
Muestra ( L) -- -- 20
4. Mezclar e incubar 5 minutos a temperatura ambiente (15-25C)/37C. Ref:1001061 R1:1 x 150 mL, R2: 1 x 150 mL, CAL: 1 x 5 mL
Cont.
5. Leer la absorbancia (A) del patrn y la muestra, frente al Blanco de Ref:1001062 R1:1 x 50 mL, R2: 1 x 50 mL, CAL: 1 x 5 mL
reactivo. El color es estable como mnimo 40 minutos.

BSIS08-E 26/05/16 SPINREACT,S.A./S.A.U Ctra.Santa Coloma, 7 E-17176 SANT ESTEVE DE BAS (GI) SPAIN
Tel. +34 972 69 08 00 Fax +34 972 69 00 99. e-mail: spinreact@spinreact.com
CALCIUM-oC v/v

Calcium
o-Cresolphtalein v/v. Colorimetric

Quantitative determination of calcium 5. Read the absorbance (A) of the samples and standard, against the Blank.
IVD The color is stable for at least 40 minutes.

Store at 2-8C CALCULATIONS


Serum and plasma
PRINCIPLE OF THE METHOD (A) Sample (A) Blank
The measurement of calcium in the sample is based on formation of color x 10 (Standard conc.) = mg/dL calcium in the sample
(A) Standard (A) Blank
complex between calcium and o-cresolphtalein in alkaline medium:
Urine 24 h
OH
Ca++ + o-Cresolphtalein Colored complex (A) Sample (A) Blank
x 10 (Standard conc.) x vol. (dL) urine/24 h = mg/24 h calcium
The intensity of the colour formed is proportional to the calcium (A) Standard (A) Blank
concentration in the sample1,2,3.
Conversion factor: mg/dL x 0,25= mmol/L.
CLINICAL SIGNIFICANCE
Calcium is the most abundant and one of the most important minerals in the QUALITY CONTROL
human body. Approximately 99% of body calcium is found in bones. A Control sera are recommended to monitor the performance of assay procedures:
decrease in albumin level causes a decrease in serum calcium. SPINTROL H Normal and Pathologic (Ref. 1002120 and 1002210).
Among causes of hypercalcemia are cancers, large intake of vitamin D, If control values are found outside the defined range, check the instrument,
enhanced renal retention, osteoporosis, sarcoidosis, thyrotoxicosis, reagents and calibrator for problems.
hyperparathyroidism. Each laboratory should establish its own Quality Control scheme and corrective
Low levels of calcium are found in hypoparathyroidism, actions if controls do not meet the acceptable tolerances.
pseudohypoparathyroidism, vitamin D deficiency, malnutrition and intestinal
malabsoprtion 1,6,7. REFERENCE VALUES1
Clinical diagnosis should not be made on a single test result; it should Serum or plasma:
integrate clinical and other laboratory data. Adults 8,5-10,5 mg /dL 2,1-2,6 mmol/L
Children 10 -12 mg/dL 2,5 - ,03 mmol/L
REAGENTS Newborns 8 -13 mg/dL 2,00 - 3,25 mmol/L
Ethanolamine 500 mmol/L Urine:
R1
Chloroform 15 mmol/L Adults 50 - 300 mg/24h 1,25 7,50 mmol/24h
Buffer
Methanol 5700 mmol/L Children 80 -160 mg/24h 2,00 - 4,00 mmol/24h
R2 o-Cresolphtalein 0,62 mmol/L These values are for orientation purpose; each laboratory should establish its own
Chromogen 8-Hidroxyquinolein 69 mmol/L reference range.
CALCIUM CAL Calcium aqueous primary standard 10 mg/dL
PERFORMANCE CHARACTERISTICS
PRECAUTIONS Measuring range: From detection limit of 0,07 mg/dL to linearity limit of 35 mg/dL.
R1: H302+H312+H332-Harmful if swalled, in contact with skin or inhaled. If the results obtained were greater than linearity limit, dilute the sample 1/2 with
H314-Causes severe skin burns and eye damage. H370-Causes damage NaCl 9 g/L and multiply the result by 2.
to organs. Precision:
R2: H290-May be corrosive to metals. H314-Causes severe skin burns and Intra-assay (n=20) Inter-assay (n=20)
eye damage. Mean (mg/dL) 9,14 16,02 9,34 16,27
CAL: H290-May be corrosive to metals. SD 0,07 0,11 0,20 0,37
Follow the precautionary statements given in MSDS and label of the
CV (%) 0,74 0,68 2,16 2,27
product.
Sensitivity: 1 mg/dL = 0,044 (A).
PREPARATION Accuracy: Results obtained using SPINREACT reagents (y) did not show
All the reagents are ready to use. systematic differences when compared with other commercial reagents (x).
The results obtained using 50 samples were the following:
STORAGE AND STABILITY
Correlation coefficient (r)2: 0,981.
All the components of the kit are stable until the expiration date on the label
Regression equation: y=0,8234x + 1,5484.
when stored tightly closed at 2-8C, protected from light and contaminations
The results of the performance characteristics depend on the analyzer used.
prevented during their use.
Do not use reagents over the expiration date. INTERFERENCES
Signs of reagent deterioration: No interferences were observed with triglycerides up to 1,25 g/L1,2,3.
- Presence of particles and turbidity. A list of drugs and other interfering substances with calcium determination has
- Blank absorbance (A) at 570 nm 0,22. been reported4,5.
ADDITIONAL EQUIPMENT NOTES
- Spectrophotometer or colorimeter measuring at 570 nm. 1. CALCIUM CAL: Proceed carefully with this product because due its nature it
- Matched cuvettes 1,0 cm light path. can get contaminated easily.
-
General laboratory equipment (Note 2,3). 2. It is recommended to use disposable material. If glassware is used the
material should be scrupulously cleaned with diluted 1/2 HNO3 in water and
SAMPLES then thoroughly rinsed it with distilled water.
- Serum or plasma1: Separated from cells as rapidly as possible. Blood 3. Most of the detergents and water softening products used in the laboratories
anticoagulants with oxalate or EDTA are not acceptable since these contains chelating agents. A defective rinsing will invalidate the procedure.
chemicals are strong calcium chelators. 4. Calibration with the aqueous standard may cause a systematic error in
- Urine1: Collect 24 hour urine specimen in calcium free containers. The automatic procedures. In these cases, it is recommended to use a serum
collecting bottles should contain 10 ml of diluted Nitric acid (50% v/v). Calibrator.
Record the volume. 5. Use clean disposable pipette tips for its dispensation.
Dilute a sample 1/2 in distilled water. Mix. Multiply results by 2 (dilution factor). 6. SPINREACT has instruction sheets for several automatic analyzers.
Stability of the samples: Calcium is stable 10 days at 2-8C.
BIBLIOGRAPHY
PROCEDURE 1. Farell E C. Calcium. Kaplan A et al. Clin Chem The C.V. Mosby Co. St Louis.
1. Assay conditions: Toronto. Princeton 1984; 1051-1255 and 418.
Wavelength: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 570 nm (550-590) 2. Kessler G. et al. Clin Chem Vol 10, No 8 1964; 686-706.
Cuvette: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1 cm. light path 3. Connerty H. V. et al. Am J Clin Path Vol 45, No 3 1996; 200-296.
Temperature: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .37C / 15-25C 4. Young DS. Effects of drugs on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC Press, 1995.
2. Adjust the instrument to zero with distilled water. 5. Young DS. Effects of disease on Clinical Lab. Tests, 4th ed. AACC 2001.
3. Pipette into a cuvette (Note 5): 6. Burtis A. et al. Tietz Textbook of Clinical Chemistry, 3rd ed. AACC 1999.
Blank Standard Sample 7. Tietz N W et al. Clinical Guide to Laboratory Tests, 3rd ed. AACC 1995.
R 1 (mL) 1,0 1,0 1,0
R 2 (mL) 1,0 1,0 1,0 PACKAGING
Standard(Note 1,4) ( L) -- 20 -- Ref:1001061 R1:1 x 150 mL, R2: 1 x 150 mL, CAL: 1 x 5 mL
Cont.
Sample ( L) -- -- 20 Ref:1001062 R1:1 x 50 mL, R2: 1 x 50 mL, CAL: 1 x 5 mL
4. Mix and incubate for 5 min. at room temperature(15-25C)/37C.

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CALCIUM-oC v/v

Calcium
o-Crsolphtaline v/v. Colorimtrique

Dtermination quantitative de calcium


CALCULS
IVD Srum ou plasma
Conserver 2-8C (A) chantillon (A) Blanc
x 10 (Conc. talon) = mg/dL de calcium dans lchantillon
(A) talon (A) Blanc
PRINCIPE DE LA METHODE
La mesure du calcium est fonde sur la formation dun complexe color entre le Urine 24 h
calcium de lchantillon et lo-crsolphtaline, en milieu alcalin : (A) chantillon (A) Blanc
OH x 10 (Conc. talon) x vol. (dL) urine/24 h = mg/24 h de calcium
Ca++ + o-Crsolphtaline Complexe color (A) talon (A) Blanc
Lintensit de la couleur forme est directement proportionnelle la dans lchantillon
concentration de calcium prsente dans lchantillon test1,2,3. Facteur de conversion: mg/dL x 0,25= mmol/L.

SIGNIFICATION CLINIQUE CONTROLE DE QUALITE


Le calcium est le minral le plus abondant et le plus important du corps Il est conseill danalyser conjointement les chantillons de srum dont les valeurs ont
humain ; 99 % se trouve dans les os. t contrles: SPINTROL H Normal et pathologique (Rf. 1002120 et 1002210).
Une diminution des niveaux dalbumine cause une diminution du calcium dans Si les valeurs se trouvent en dehors des valeurs tolres, analyser linstrument, les
le srum. De faibles niveaux de calcium peuvent tre attribus de ractifs et le calibreur.
lhypoparathyrodie, pseudo-hypoparathyrodie, dficit en vitamine D, Chaque laboratoire doit disposer de son propre contrle de qualit et dterminer les
malnutrition ou mauvaise absorption mesures correctives mettre en place dans le cas o les vrifications ne
La majorit des causes dhypercalcmie sont dues des maladies correspondraient pas aux attentes.
oncologiques, intoxication par vitamine D, augmentation de la rtention rnale,
ostoporose, sarcodose, thyroxicose et hyperparathyrodie 1,6,7. VALEURS DE REFERENCE1
Le diagnostic clinique doit tre ralis en tenant compte de toutes les donnes Srum ou plasma :
cliniques et de laboratoire. Adultes 8,5-10,5 mg /dL 2,1-2,6 mmol/L
Enfants 10-12 mg/dL 2,5-3,0 mmol/L
RACTIFS
Nouveau-ns 8-13 mg/dL 2,00-3,25 mmol/L
thanolamine 500 mmol/L
R1 Urine :
Chloroforme 15 mmol/L
Tampon Adultes 50-300 mg/24 h 1,25-7,50 mmol/24 h
Mthanol 5700 mmol/L
Enfants 80-160 mg/24 h 2,00-4,00 mmol/24 h
R2 o-Crsolphtaline 0,62 mmol/L
Chromogne 8-Hydroxyquinoline 69 mmol/L Ces valeurs sont donnes titre dinformation. Il est conseill chaque laboratoire de
dfinir ses propres valeurs de rfrence.
CALCIUM CAL talon primaire aqueux de Calcium 10 mg/dL
CARACTERISTIQUES DE LA METHODE
PRCAUTIONS Plage de mesure: Depuis la limite de dtection de 0,07 mg/dL, jusqu la limite de
R1: H302+H312+H332-Nocif en cas dingestion, de contact cutan ou linarit de 35 mg/dL
dinhalation.H314- Provoque des brlures de la peau et des lsions oculaires Si la concentration de lchantillon est suprieure la limite de linarit, diluer 1/2
graves. H370-Risque avr deffets graves pour les organes. avec du ClNa 9 g/L et multiplier le rsultat final par 2.
R2:H290- Peut tre corrosif pour les mtaux. H314- Provoque des brlures de Prcision:
la peau et des lsions oculaires graves. Intra-srie (n= 20) Inter-srie (n= 20)
CAL : H290- Peut tre corrosif pour les mtaux.
Moyenne (mg/dL) 9,14 16,02 9,34 16,27
Suivez les conseils de prudence donns en SDS et tiquette.
SD 0,07 0,11 0,20 0,37
PRPARATION CV (%) 0,74 0,68 2,16 2,27
Tous les ractifs et le talon sont prts lemploi. Sensibilit analytique: 1 mg/dL = 0,044 (A).
Exactitude: Les ractifs SPINREACT (y) ne montrent pas de diffrences
CONSERVATION ET STABILITE systmatiques significatives lorsquon les compare dautres ractifs commerciaux (x).
Tous les composants du kit sont stables jusqu la date de premption indique Les rsultats obtenus avec 50 chantillons ont t les suivants:
sur ltiquette, et si les flacons sont maintenus hermtiquement ferms 2- Coefficient de corrlation (r)2: 0,981.
8C, labri de la lumire et des sources de contamination. Equation de la Coubre de rgression: y=0,8234x + 1,5484.
Ne pas utiliser les ractifs en dehors de la date indique. Les caractristiques de la mthode peuvent varier suivant lanalyseur employ
Indices de dtrioration des ractifs:
- Prsence de particules et turbidit. INTERFRENCES
- Absorbation (A) du blanc 570 nm 0,22. Les triglycrides < 1,25 g/L, ninterfrent pas1,2,3. Il a t rapport que certaines
drogues et autres substances interfrent avec la dtermination du calcium 4,5.
MATERIEL SUPPLEMENTAIRE
- Spectrophotomtre ou analyseur pour les lectures 570 nm. REMARQUES
- Cuvettes de 1,0 cm dclairage. 1. CALCIUM CAL : En raison de la nature du produit, il est conseill de le traiter
- Equipement classique de laboratoire (Remarque 2,3) avec beaucoup de soin vu quil peut facilement contaminated.
CHANTILLONS 2. Il est recommand dutiliser du matriel en plastique usage unique. Si lon
Srum ou plasma1 : Spar le plus tt possible des hmaties. Ne pas utiliser de utilise du matriel en verre, il faudra le laver avec de lacide nitrique dilu dans
loxalate ou EDTA comme anticoagulants parce qu'ils sont forts calcium de leau (1/2), rincer plusieurs fois leau distille et scher avant emploi.
chlateur. 3. La majorit des dtergents destins un usage en laboratoire contiennent des
- Urine1 : Effectuer le prlvement durine de 24 heures dans des rcipients agents chlateurs. Des traces de ces derniers, conscutifs un mauvais rinage
sans calcium. Avant le prlvement, mettre 10 mL dacide nitrique 50 % du matriel, invalident la dtermination.
(v/v) dans le conteneur. Consigner le volume. 4. La calibration avec ltalon aqueux peut donner lieu des erreurs systmatiques
Diluer lurine 1/2 dans de leau distille pour lanalyser. Mlanger. Multiplier le dans les mthodes automatiques. Dans ce cas, il est recommand dutiliser des
rsultat obtenu par 2 (facteur de dilution). calibrateurs sriques.
Stabilit de lchantillon : Le calcium est stable 10 jours 2-8C.
5. Utiliser des embouts de pipette jetables propres pour la dispensation.
PROCEDURE 6. SPINREACT dispose de consignes dtailles pour lapplication de ce
1. Conditions de test: ractif dans diffrents analyseurs.
Longueur dondes: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 570 nm (550-590)
BIBLIOGRAPHIE
Cuvette: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .1 cm dclairage
1. Farell E C. Calcium. Kaplan A et al. Clin Chem The C.V. Mosby Co. St Louis.
Temprature: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .37C / 15-25C
Toronto. Princeton 1984; 1051-1255 and 418.
2. Rgler le spectrophotomtre sur zro en fonction de leau distille.
2. Kessler G. et al. Clin Chem 1964; 10 (8); 686-706.
3. Pipeter dans une cuvette(Remarque 5):
3. Connerty H. V. et al. Am J Clin Path 1996; 45 (3); 200-296.
Blanc talon chantillon
4. Young DS. Effects of drugs on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC Press, 1995.
R 1 (mL) 1,0 1,0 1,0 5. Young DS. Effects of disease on Clinical Lab. Tests, 4th ed. AACC 2001.
R 2 (mL) 1,0 1,0 1,0 6. Burtis A. et al. Tietz Textbook of Clinical Chemistry, 3rd ed. AACC 1999.
talon(Note 1,4) ( L) -- 20 -- 7. Tietz N W et al. Clinical Guide to Laboratory Tests, 3rd ed. AACC 1995.
chantillon ( L) -- -- 20 PRSENTATION
4. Mlanger et incuber pendant 5 minutes temprature ambiante (15-
25C)/37C. Rf:1001061 R1:1 x 150 mL, R2: 1 x 150 mL, CAL: 1 x 5 mL
Cont.
5. Lire labsorbation (A) du talon contre le Blanc du ractif. La couleur est Rf:1001062 R1:1 x 50 mL, R2: 1 x 50 mL, CAL: 1 x 5 mL
stable au moins 40 minutes.

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CALCIUM-oC v/v

Clcio
o-Cresolftalena v/v. Colorimtrico

Determinao quantitativa de clcio


CLCULOS
IVD Soro ou plasma
Armazenar a 2-8C. (A) Amostra (A) Branco x 10 (Conc. Padro ) = mg/dL de clcio na amostra
(A) Padro (A) Branco
PRINCPIO DO MTODO
A medio do clcio baseia-se na formao de um complexo colorido entre o Urina 24 h
clcio e a o-cresolftalena, em meio alcalino. (A) Amostra (A) Branco x 10 (Conc. Padro ) x vol. (dL) urina/24 h = mg/24 h de
OH (A) Padro (A) Branco
Ca++ + o-Cresolftalena Complexo colorido clcio na amostra
A intensidade da cor formada diretamente proporcional concentrao de
clcio presente na amostra analisada1,2,3. Fator de converso: mg/dL x 0,25= mmol/L.

SIGNIFICADO CLNICO CONTROLO DE QUALIDADE


O clcio o mineral mais abundante e importante do corpo humano, 99% So recomendados soros de controlo para monitorizar o desempenho dos
encontrando-se nos ossos. procedimentos dos ensaios:SPINTROL H Normal e Patolgico (Ref. 1002120 e
Uma diminuio dos nveis de albumina causa uma diminuio do clcio em soro. 1002210).
Nveis baixos de clcio podem atribuir-se a hipoparatireoidismo, Se os valores de controlo estiverem foram do intervalo definido, verifique o instrumento,
pseudohipoparatireoidismo, dfice de vitamina D, subnutrio ou m absoro reagentes e tcnicas para detetar problemas.
A maioria das causas de hipercalcemia so devidas a doenas oncolgicas, Cada laboratrio deve estabelecer o seu prprio esquema de Controlo de Qualidade e
intoxicao por vitamina D, aumento da reteno renal, osteoporose, sarcoidose, as aes corretivas no caso de os controlos no estarem de acordo com as tolerncias
tirotoxicose e hiperparatireoidismo1,6,7. aceitveis.
O diagnstico clnico deve realizar-se tendo em conta todos os dados clnicos e
VALORES DE REFERNCIA1
de laboratrio.
Soro ou plasma:
Adultos 8,5-10,5 mg /dL 2,1-2,6 mmol/L
REAGENTES
Etanolamina 500 mmol/L Crianas 10-12 mg/dL 2,5-3,0 mmol/L
R1 Recm-nascidos 8-13 mg/dL 2,00-3,25 mmol/L
Clorofrmio 15 mmol/L
Tampo Urina:
Metanol 5700 mmol/L
R2 o-Cresolftalena 0,62 mmol/L Adultos 50-300 mg/24 h 1,25-7,50 mmol/24 h
Cromogneo 8-Hidroxiquinolena 69 mmol/L Crianas 80-160 mg/24 h 2,00-4,00 mmol/24 h
CLCIUM CAL Padro primrio aquoso de Clcio 10 mg/dL Estes valores servem apenas como referncia. Cada laboratrio deve estabelecer o seu
prprio intervalo de referncia.
PRECAUES
R1: H302+H312+H332-Nocivo por ingesto, contacto com a pele ou inalao. CARACTERSTICAS DO MTODO
H314-Provoca queimaduras na pele e leses oculares graves. H370-Afecta os Intervalo de medio: Do limite de deteo de 0,07 mg/dL at ao limite de linearidade
rgos. de 35 mg/dL.
Se os resultados obtidos forem superiores ao limite de linearidade, diluir a amostra 1/2
R2: H290-Pode ser corrosivo para os metais. H314-Provoca queimaduras na pele
com NaCl 9 g/L e multiplicar o resultado por 2.
e leses oculares graves.
Preciso:
CAL: H290-Pode ser corrosivo para os metais.
Intra-ensaios (n= 20) Inter-ensaios (n= 20)
Seguir os conselhos de prudncia dados em SDS e etiqueta.
Mdia (mg/dL) 9,14 16,02 9,34 16,27
PREPARAO SD 0,07 0,11 0,20 0,37
Os reagentes e o padro esto prontos para utilizao. CV (%) 0,74 0,68 2,16 2,27
Sensibilidade analtica: 1 mg/dL = 0,044 (A).
CONSERVAO E ESTABILIDADE Exatido: Os resultados obtidos utilizando reagentes SPINREACT (y) no
Todos os componentes do kit so estveis at data de validade que consta da demonstraram diferenas sistemticas quando comparados com outros reagentes
etiqueta quando armazenados bem fechados a 2-8C protegidos da luz e quando comerciais (x).
as contaminaes so evitadas durante a sua utilizao. Os resultados obtidos utilizando 50 amostras foram os seguintes:
No utilizar os reagentes aps passar o prazo de validade. Coeficiente de correlao (r)2: 0,981.
Sinais de deteriorao dos reagentes: Equao de regresso: y= 0,8234x + 1,5484.
- Presena de partculas e turvao. Os resultados das caractersticas de desempenho dependem do analisador utilizado.
- Absorvncia nula (A) a 570 nm 0,22.
INTERFERNCIAS
EQUIPAMENTO ADICIONAL Triglicridos <1,25 g/L, no interferem1. Foram descritos vrios medicamentos e outras
- Espectrmetro ou colormetro a medir a 570 nm. substncias que interferem na determinao do clcio4,5.
- Cuvettes equiparadas 1,0 cm passo de luz.
- Equipamento habitual de laboratrio (Nota 2,3). NOTAS
1. CALCIUM CAL: Devido natureza do produto, aconselhvel trat-lo com o
AMOSTRAS mximo cuidado, uma vez que se pode contaminar com facilidade.
- Soro ou plasma1: Separado o mais depressa possvel dos eritrcitos. No 2. Recomenda-se a utilizao de material plstico descartvel. Se se utilizar material
utilizar oxalato ou EDTA como anticoagulantes porque eles so fortes clcio de vidro, dever lavar-se com cido ntrico diludo com gua (1/2), enxaguar vrias
quelante. vezes com gua destilada e secar antes da sua utilizao.
- Urina1: Efetuar a recolha de urina de 24 horas em recipientes livres de clcio. 3. A maioria dos detergentes destinados utilizao do laboratrio contm agentes
Antes da recolha, adicionar ao recipiente 10 mL de cido ntrico a 50% (v/v). quelantes. Vestgios dos mesmos, como consequncia de uma m lavagem do
Anotar o volume. material, invalida a determinao.
Diluir a urina 1/2 em gua destilada para a sua anlise. Misturar. Multiplicar o 4. A calibrao com o Padro aquoso pode dar lugar a erros sistemticos em
resultado obtido por 2 (fator de diluio). mtodos automticos. Neste caso, recomenda-se utilizar calibradores sricos.
Estabilidade da amostra: O clcio estvel 10 dias a 2-8C.
5. Utilizar pontas de pipetas descartveis limpas para sua dispensa.
PROCEDIMENTO 6. O SPINREACT tem instrues para vrios analisadores automticos.
1. Condies dos ensaios:
BIBLIOGRAFIA
Comprimento de onda: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 570 nm (550-590)
1. Farell E C. Calcium. Kaplan A et al. Clin Chem The C.V. Mosby Co. St Louis.
Cuvette: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .1 cm passo de luz
Toronto. Princeton 1984; 1051-1255 and 418.
Temperatura: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .37C/ 15-25C
2. Kessler G. et al. Clin Chem 1964; 10 (8); 686-706.
2. Ajustar o instrumento para zero com gua destilada.
3. Connerty H. V. et al. Am J Clin Path 1996; 45 (3); 200-296.
3. Pipeta numa cuvette (Nota 5):
4. Young DS. Effects of drugs on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC Press, 1995.
Branco Padro Amostra 5. Young DS. Effects of disease on Clinical Lab. Tests, 4th ed. AACC 2001.
R 1 (mL) 1,0 1,0 1,0 6. Burtis A. et al. Tietz Textbook of Clinical Chemistry, 3rd ed. AACC 1999.
R 2 (mL) 1,0 1,0 1,0 7. Tietz N W et al. Clinical Guide to Laboratory Tests, 3rd ed. AACC 1995.
Padro (Nota 1,4) ( L) -- 20 --
APRESENTAO
Amostra ( L) -- -- 20
4. Misturar e incubar 5 minutos a temperatura ambiente (15-25C)/37C. Ref:1001061 R1:1 x 150 mL, R2: 1 x 150 mL, CAL: 1 x 5 mL
Cont.
5. Ler a absorvncia (A) do padro e a amostra, em frente ao Branco do Ref:1001062 R1:1 x 50 mL, R2: 1 x 50 mL, CAL: 1 x 5 mL
reagente. A cor estvel, no mnimo 40 minutos.

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