Introduccin

El virus del papiloma humano (VPH) son grupos diversos de virus de ADN pertenecientes
a la familia Papillomaviridae, no poseen envoltura, y tienen un dimetro aproximado de 52-
55 nm, y representan una de las enfermedades de transmisin sexual ms comunes. Estos
virus se replican especficamente en el ncleo de clulas epiteliales escamosas. A
diferencia de lo que ocurre en otras familias virales, las protenas de la cpside de los
diversos tipos de VPH son antignicamente similares, por lo tanto, los VPH no pueden ser
clasificados en serotipos, entonces su clasificacin se basa en las diferencias a nivel de su
secuencia de DNA.

Son conocidos ms de 100 tipos virales que en relacin a su patogenia oncolgica

la Agencia Internacional para la Investigacin del Cncer (IARC), los clasifican en tipos de
alto y de bajo riesgo oncolgico. Los tipos VPH 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59
y 66 son considerados carcingenos para los humanos y otros tipos, incluidos el VPH 6
y 11 son posibles carcingenos para los humanos, de bajo riesgo oncolgico.

Justificacin

Algunos tipos de VPH pueden causar verrugas o condilomas, mientras otros pueden
generar infecciones subclnicas, que pueden dar lugar a cncer cervical, de vulva, vagina y
ano en mujeres, o cncer de ano y pene en hombres. El 70% de estos canceres son
causados por los VPH tipo 16 y 18.

Vacunas como la vacuna VPH, Cervarix y Gardasil, previenen la infeccin de estos tipos de
VPH.

Cervarix est indicado para la prevencin de las enfermedades causadas por el VPH
oncognico de los tipos 16 y 18 como cncer cervical, neoplasia intraepitelial cervical y
adenocarcinoma in situ. Est aprobado por la FDA desde 2009 para su uso en mujeres con
edades entre 10 y 25 aos de edad

Clulas

Las VLPs de HPV-16 L1 y HPV-18 L1 se producen en sistema de dos niveles, uno de ellos
en la lnea celular de insecto Hi-5 Rix4446 y en un sistema de lote de semillas de
baculovirus. Los controles de calidad consistieron en comprobar la identidad, pureza y
seguridad (objetos extraos).

Clulas high 5 (bti-tn-5b1-4)

Son clulas ovricas de la especie Trichoplusia ni (oruga de la col) que se han convertido
en una de las lneas celulares ms comnmente utilizadas para la expresin de protenas
recombinantes usando baculovirus debido a su alta expresin de protena recombinante en
comparacin con otras lneas celulares. Las clulas de insectos se adaptan al cultivo libre
de suero para el mximo crecimiento celular y la expresin gnica recombinante. El suero
libre es un medio sin protenas ni suero desarrollado especficamente para respaldar el crecimiento
de la suspensin a largo plazo de las clulas en suspensin. Este medio requiere la adicin de 16 mM
de L-glutamina antes del uso.

Fabricacin y purificacin

La fabricacin consiste en un proceso para la expresin a gran escala de las protenas L1

en cultivos de las clulas de insecto Hi-5 Rix4446. Los baculovirus recombinantes de cada
serotipo (HPV 16 y 18) se inoculan en el lote de semillas en las clulas Hi-5. Estas clulas
inoculadas son usadas para la produccin de mayor cantidad de clulas en cultivos. La
protena L1 se libera de las clulas a travs de un choque osmtico y subsecuentemente
purificado por una serie de columnas de cromatografa, una filtracin nanomtrica, una
ultrafiltracin y filtracin estril final para generar las VLP L1. Las VLPs se guardan en
recipientes de acero inoxidable.

Control y validacin:

La validacin de las VLPs se realiza mediante el proceso de produccin de antgenos

mediante la demostracin de pruebas cumpliendo las normas de calidad Quality Control
Standards. Se verifican y controlan los procesos de produccin de inoculante de baculovirus
HPV-16/18 recombinante, la produccin de cosecha nica de L1 y la extraccin de L1 y el
proceso de purificacin de antgeno L1. Se someten a pruebas fsico-qumicas y
evaluaciones de inmunogenicidad. Se realizan pruebas para identificar los perfiles
electroforticos y el peso molecular de las L1 a travs de pruebas como SDS - PAGE,
Western blot, y electroforesis capilar, espectrometra de masas. La estructura primaria
(Anlisis de aminocidos, cartografa de pptidos, anlisis de N y C-terminal), estructura
secundaria (espectroscopia de dicrosmo circular e infrarrojo secundario) y la estructura
terciaria y tamao de VLP (cromatografa de exclusin de tamao, microscopa electrnica
y anlisis de tamao de centrifugacin de disco). Adems tambin se caracterizaron
enfocndose en sus propiedades inmunolgicas (actividad antignica, unin a sueros
policlonales y respuesta inmune provocada en ratones).

Adyuvantes

La vacuna HPV se prepara a partir de HPV-16 L1 VLP y HPV-18 L1 VLP formulada con el
sistema adyuvante AS04 compuesto de hidrxido de aluminio y 4-monofosforil lpido A
(MPL) de 3-O-desacetilo. Se han aplicado especificaciones y controles satisfactorios segn
corresponda a los adyuvantes: O-desacil-4'-monofosforil-lpido A (MPL) e hidrxido de
aluminio, hidratado (Al (OH) 3).

Mecanismo de accin

Cervarix es una vacuna recombinante no infecciosa preparada a partir de la proteina

principal de la cpside L1 en forma de partculas similares al virus (VLPs) altamente
purificadas de los tipos oncognicos 16 y 18 del VPH. Puesto que las VLPs no contienen
ADN viral, no pueden infectar clulas, reproducirse o causar enfermedad. Los estudios en
animales han mostrado que la eficacia de las vacunas de VLP L1 est mediada
fundamentalmente por el desarrollo de una respuesta inmune humoral. Los VPH -16 y VPH-
18 son responsables de aproximadamente el 70% de los casos de cncer de crvix en
todas las regiones del mundo.

Respuesta inmunolgica

La vacuna genera, niveles altos de anticuerpos IgG2a y niveles superiores de IFN- y TNF-
, citoquinas con propiedades antivirales conocidas y altas frecuencias de la memoria de
las clulas B que deben tener un impacto positivo en la persistencia del anticuerpo. Todo
demostrado experimentalmente en ratones. Pruebas en clulas mononucleares de sangre
perifrica humana (PBMCs) y en una lnea de clulas monocticas humanas (U937),
demostraron que la vacuna es un potente inductor de la secrecin pro-inflamatoria de
citocinas (IL-6 y TNF-) por monocitos in vitro. Con respecto a la induccin in vivo en la
maduracin de las clulas presentadoras de antgenos as como en la evaluacin de la
regulacin positiva de la expresin de CD40 presento buena induccin

Ensayos clnicos
La eficacia de Cervarix fue evaluada en dos ensayos clnicos controlados, doble ciego,
aleatorizados de Fase II y III que incluyeron un total de 19.778 mujeres de 15 a 25 aos de
edad. En el ensayo de fase II (estudio 001/007) se incluyeron slo mujeres que: - Eran ADN
negativas para los tipos oncognicos de VPH 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59,
66 y 68 - Eran seronegativas para VPH-16 y VPH-18 y - Presentaban citologa normal La
variable primaria de eficacia fue la infeccin transitoria por VPH-16 y/o VPH-18. Como
variable adicional de eficacia se evalu la infeccin persistente de doce meses de duracin.

Human Papillomavirus (HPV) Infection. CDC. Obtenida el: 25/06/17. [En lnea].
https://www.cdc.gov/std/tg2015/hpv.htm
FDA Licensure of Bivalent Human Papillomavirus Vaccine (HPV2, Cervarix) for Use in
Females and Updated HPV Vaccination Recommendations from the Advisory Committee on
Immunization Practices (ACIP). CDC. MMWR. 2010/59 (20); 626-629.

Nombre comercial y presentacin

Empresa

Glaxo Smith Kline