DEPARTAMENTO DE BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR

PROBLEMAS DE ENZIMAS 2 Farmacia. Curso 2009/2010

1.- Responder si las siguientes cuestiones son verdaderas o falsas. Explicar porqu
a) La velocidad inicial de una reaccin catalizada enzimticamente, es independiente de la concentracin de
sustrato.
b) A niveles de saturacin de sustrato, la velocidad de una reaccin catalizada enzimticamente es proporcional
a la concentracin de enzima.
c) La constante de Michaelis, Km, es igual a la concentracin de sustrato para la cual v0=1/2Vmax.
d) La Km de una enzima vara con la concentracin de enzima.
e) La velocidad de una reaccin catalizada por una enzima en presencia de una concentracin de sustrato
limitante de la velocidad decrece con el tiempo.
f) Adicionando suficiente cantidad de sustrato se puede obtener la Vmax. en presencia de un inhibidor no
competitivo.
g) La Km puede alterarse por la presencia de metabolitos estructuralmente relacionados con el S.

2.- Para estudiar la dependencia de la v frente a [S] de una reaccin catalizada enzimticamente, una cantidad
constante de enzima se adiciona a una serie de medios de reaccin de 10 ml de volumen conteniendo diferente
[S]. Las velocidades iniciales de reaccin se han determinado midiendo el nmero de moles de producto
formado por minuto, obtenindose los siguientes resultados:
[S](moles/litro) 5 x 10-2 5 x 10-3 5 x 10-4 5 x 10-5 5 x 10-6 5 x 10-7
v0(moles/min.) 0,25 0,25 0,25 0,20 0,071 0,0096
Empleese el clculo numrico para responder a las siguientes cuestiones:
a) Cul es la Vmax. para esta [E]?.
b) Cul es la Km de sta enzima?.
c) Demostrar si sta reaccin sigue o no la cintica de Michaelis-Menten.
d) Cuales sern las velocidades iniciales a [S]=1x10-6 M y a [S]=1x10-1 M?.
e) Calcular la cantidad total de producto formado durante los primeros cinco minutos para [S]=2x10-3 M. Se
podra hacer lo mismo para [S]=2x10-6 M?.
f) Suponiendo que la [E] se incrementase en cada medio de reaccin multiplicando por un factor 4. Cul sera el
valor de Km y de la Vmax.? Cul sera la velocidad inicial para [S]=5x10-6 M?.

3.- La cintica de una enzima viene medida como funcin de la [S] en ausencia y presencia del inhibidor a una
[I]=10-4 M. A partir de los siguientes resultados:
[S]x10-5 M 0,3 0,5 1 3 9
v0 (moles/min.) sin I 10,4 14,5 22,5 33,8 40,5
v0 (moles/min.) con I 2,1 2,9 4,5 6,8 8,1
a) Representar v0 frente a [S] y 1/Vmax. frente a 1/[S].
b) Calcular Vmax. y Km en ausencia y presencia de inhibidor.
c) Qu tipo de inhibicin es esta?.
d) Calcular la KI.

4.- La enzima aspartato transcarbamilasa cataliza la primera reaccin propia de la sntesis de pirimidinas. En
un estudio de sta enzima, utilizando aspartato como sustrato, en presencia de CTP 0,5 M y en ausencia del
mismo, se obtuvieron los siguientes datos:
Aspartato (mM) 1 2 3 4 5 7 9 10 12 15 16 17
V0 sin CTP (u.a.) 0,45 0,8 1,7 2,9 3,4 4,3 5,1 5,3 5,6 5,8 5,8 5,8
V0 con CTP 0,5 M 0,2 0,4 0,7 1 1,4 2,4 3,7 4,2 4,8 5,5 5,6 5,6
a) Sin utilizar ninguna representacin grfica, estmese el valor de K0,5.
b) Utilizando la ecuacin de Michaelis-Menten, calcular V0 para una [S]=3 mM. Existe alguna
discrepancia entre stos datos y los experimentales?. Justificarlo.
c) Qu efecto tiene el CTP sobre la actividad enzimtica?.
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Bioqumica. 2 de Farmacia. Curso 2009/010

EJERCICIOS DE ENZIMAS

1.- Completar las siguientes frases:

a) La regin de una molcula de enzima con la cual debe interaccionar el sustrato se llama ------------------
b) La especie qumica de vida corta que se forma despus de que enzima y sustrato interaccionen se llama
----------------------
c) Debido a su estructura, un inhibidor -------------------------------- se une al centro activo de una enzima.
d) Un inhibidor que no altera la KM de una enzima es un inhibidor de tipo ---------------
e) A mayor valor de KM, --------------------- es la afinidad de una enzima por su sustrato.

2.- Explicar cul ser la ocupacin del centro activo de una enzima en las siguientes situaciones:
a) En presencia de sustrato a una concentracin muy inferior a la KM del enzima.
b) En presencia de sustrato a una concentracin 100 veces superior a la KM.
c) En presencia de un inhibidor competitivo a una concentracin de sustrato muy inferior a la KM
d) En presencia de un inhibidor no competitivo a una concentracin de sustrato muy inferior a la KM.

3.- Los moduladores de los enzimas alostricos pueden ser inhibidores o estimuladores. Qu efecto tiene
(aumenta o disminuye) cada clase de moduladores sobre el valor de K0,5, Vmx y cooperatividad?.
Modulador K0,5 Vmx Cooperatividad
Estimulante
Inhibidor

4.- Indicar si las siguientes afirmaciones son ciertas o no. Justificar la respuesta.
a) En una ruta metablica en la que participan diferentes enzimas, el producto final puede controlar la ruta
mediante retroalimentacin PORQUE en estos sistemas el producto final siempre es un anlogo
estructural del sustrato inicial.
b) En la regulacin enzimtica mediante modificacin covalente pueden participar quinasas, fosfatasas,
adenilaciones y mutilaciones.

5.- Decir si son verdaderas o falsas las siguientes afirmaciones sobre las isoenzimas:
a) Son enzimas idnticas que que catalizan la misma reaccin qumica y presentan la misma secuencia de
aminocidos.
b) Son enzimas que catalizan la misma reaccin qumica y suelen mostrar diferentes parmetros cinticos
(i.e. diferentes valores de KM), o propiedades de regulacin diferentes.
c) La existencia de las isoenzimas permite el ajuste del metabolismo para satisfacer las necesidades
particulares de un determinado tejido o etapa del desarrollo.