Beruflich Dokumente
Kultur Dokumente
Para que la informacin que contiene el ADN pueda ser utilizada por la maquinaria celular,
debe copiarse en primer lugar en unos trenes de nucletidos, ms cortos y con unas
unidades diferentes, llamados ARN. Las molculas de ARN se copian exactamente del
ADN mediante un proceso denominado transcripcin. Una vez procesadas en el ncleo
celular, las molculas de ARN pueden salir al citoplasma para su utilizacin posterior. La
informacin contenida en el ARN se interpreta usando el cdigo gentico, que especifica la
secuencia de los aminocidos de las protenas, segn una correspondencia de un triplete de
nucletidos (codn) para cada aminocido. Esto es, la informacin gentica (esencialmente:
qu protenas se van a producir en cada momento del ciclo de vida de una clula) se halla
codificada en las secuencias de nucletidos del ADN y debe traducirse para poder
funcionar. Tal traduccin se realiza usando el cdigo gentico a modo de diccionario. El
diccionario "secuencia de nucletido-secuencia de aminocidos" permite el ensamblado de
largas cadenas de aminocidos (las protenas) en el citoplasma de la clula. Por ejemplo, en
el caso de la secuencia de ADN indicada antes (ATGCTAGATCGC...), la ARN polimerasa
utilizara como molde la cadena complementaria de dicha secuencia de ADN (que sera
TAC-GAT-CTA-GCG-...) para transcribir una molcula de ARNm que se leera AUG-CUA-
GAU-CGC-... ; el ARNm resultante, utilizando el cdigo gentico, se traducira como la
secuencia de aminocidos metionina-leucina-cido asprtico-arginina-...
Dentro de las clulas, el ADN est organizado en estructuras llamadas cromosomas que,
durante el ciclo celular, se duplican antes de que la clula se divida. Los organismos
eucariotas (por ejemplo, animales, plantas, y hongos) almacenan la mayor parte de su ADN
dentro del ncleo celular y una mnima parte en elementos celulares llamados mitocondrias,
y en los plastos y los centros organizadores de microtbulos o centrolos, en caso de
tenerlos; los organismos procariotas (bacterias y arqueas) lo almacenan en el citoplasma de
la clula, y, por ltimo, los virus ADN lo hacen en el interior de la cpsida de naturaleza
proteica. Existen multitud de protenas, como por ejemplo las histonas y los factores de
transcripcin, que se unen al ADN dotndolo de una estructura tridimensional determinada
y regulando su expresin. Los factores de transcripcin reconocen secuencias reguladoras
del ADN y especifican la pauta de transcripcin de los genes. El material gentico
completo de una dotacin cromosmica se denomina genoma y, con pequeas variaciones,
es caracterstico de cada especie.
ndice
[ocultar]
1 Historia de la gentica
2 Propiedades fsicas y qumicas
o 2.1 Componentes
o 2.2 Apareamiento de bases
2.2.1 Otros tipos de pares de bases
o 2.3 Estructura
2.3.1 Estructuras en doble hlice
2.3.2 Estructuras en cudruplex
o 2.4 Hendiduras mayor y menor
o 2.5 Sentido y antisentido
o 2.6 Superenrollamiento
3 Modificaciones qumicas
o 3.1 Modificaciones de bases del ADN
o 3.2 Dao del ADN
4 Funciones biolgicas
o 4.1 Genes y genoma
4.1.1 El ADN codificante
4.1.2 El ADN no codificante
o 4.2 Transcripcin y traduccin
o 4.3 Replicacin del ADN
4.3.1 Hiptesis sobre la duplicacin del ADN
5 Interacciones ADN-protena
o 5.1 Protenas que unen ADN
5.1.1 Interacciones inespecficas
5.1.2 Interacciones especficas
o 5.2 Enzimas que modifican el ADN
5.2.1 Nucleasas y ligasas
5.2.2 Topoisomerasas y helicasas
5.2.3 Polimerasas
6 Recombinacin gentica
7 Evolucin del metabolismo de ADN
8 Tcnicas comunes
o 8.1 Tecnologa del ADN recombinante
o 8.2 Secuenciacin
o 8.3 Reaccin en cadena de la polimerasa (PCR)
o 8.4 Southern blot
o 8.5 Chips de ADN
9 Aplicaciones
o 9.1 Ingeniera gentica
o 9.2 Medicina forense
o 9.3 Bioinformtica
o 9.4 Nanotecnologa de ADN
o 9.5 Historia, antropologa y paleontologa
10 Vase tambin
11 Referencias
o 11.1 Notas
o 11.2 Bibliografa
12 Enlaces externos
Historia de la gentica
Artculo principal: Historia de la gentica
El ADN lo aisl por primera vez, durante el invierno de 1869, el mdico suizo Friedrich
Miescher mientras trabajaba en la Universidad de Tubinga. Miescher realizaba
experimentos acerca de la composicin qumica del pus de vendas quirrgicas desechadas
cuando not un precipitado de una sustancia desconocida que caracteriz qumicamente
ms tarde.2 3 Lo llam nuclena, debido a que lo haba extrado a partir de ncleos
celulares.4 Se necesitaron casi 70 aos de investigacin para poder identificar los
componentes y la estructura de los cidos nucleicos.
En 1919 Phoebus Levene identific que un nucletido est formado por una base
nitrogenada, un azcar y un fosfato.5 Levene sugiri que el ADN generaba una estructura
con forma de solenoide (muelle) con unidades de nucletidos unidos a travs de los grupos
fosfato. En 1930 Levene y su maestro Albrecht Kossel probaron que la nuclena de
Miescher es un cido desoxirribonucleico (ADN) formado por cuatro bases nitrogenadas
(citosina (C), timina (T), adenina (A) y guanina (G)), el azcar desoxirribosa y un grupo
fosfato, y que, en su estructura bsica, el nucletido est compuesto por un azcar unido a
la base y al fosfato.6 Sin embargo, Levene pensaba que la cadena era corta y que las bases
se repetan en un orden fijo. En 1937 William Astbury produjo el primer patrn de
difraccin de rayos X que mostraba que el ADN tena una estructura regular.7
La funcin biolgica del ADN comenz a dilucidarse en 1928, con una serie bsica de
experimentos de la gentica moderna realizados por Frederick Griffith, quien estaba
trabajando con cepas "lisas" (S) o "rugosas" (R) de la bacteria Pneumococcus (causante de
la neumona), segn la presencia (S) o no (R) de una cpsula azucarada, que es la que
confiere virulencia (vase tambin experimento de Griffith). La inyeccin de neumococos S
vivos en ratones produce la muerte de stos, y Griffith observ que, si inyectaba ratones
con neumococos R vivos o con neumococos S muertos por calor, los ratones no moran. Sin
embargo, si inyectaba a la vez neumococos R vivos y neumococos S muertos, los ratones
moran, y en su sangre se podan aislar neumococos S vivos. Como las bacterias muertas no
pudieron haberse multiplicado dentro del ratn, Griffith razon que deba producirse algn
tipo de cambio o transformacin de un tipo bacteriano a otro por medio de una
transferencia de alguna sustancia activa, que denomin principio transformante. Esta
sustancia proporcionaba la capacidad a los neumococos R de producir una cpsula
azucarada y transformarse as en virulentas. En los siguientes 15 aos, estos experimentos
iniciales se replicaron mezclando distintos tipos de cepas bacterianas muertas por el calor
con otras vivas, tanto en ratones (in vivo) como en tubos de ensayo (in vitro).8 La bsqueda
del factor transformante que era capaz de hacer virulentas a cepas que inicialmente no lo
eran continu hasta 1944, ao en el cual Oswald Avery, Colin MacLeod y Maclyn McCarty
realizaron un experimento hoy clsico. Estos investigadores extrajeron la fraccin activa (el
factor transformante) y, mediante anlisis qumicos, enzimticos y serolgicos, observaron
que no contena protenas, ni lpidos no ligados, ni polisacridos activos, sino que estaba
constituido principalmente por "una forma viscosa de cido desoxirribonucleico altamente
polimerizado", es decir, ADN. El ADN extrado de las cepas bacterianas S muertas por el
calor lo mezclaron "in vitro" con cepas R vivas: el resultado fue que se formaron colonias
bacterianas S, por lo que se concluy inequvocamente que el factor o principio
transformante era el ADN.9
A pesar de que la identificacin del ADN como principio transformante an tard varios
aos en ser universalmente aceptada, este descubrimiento fue decisivo en el conocimiento
de la base molecular de la herencia, y constituye el nacimiento de la gentica molecular.
Finalmente, el papel exclusivo del ADN en la heredabilidad fue confirmado en 1952
mediante los experimentos de Alfred Hershey y Martha Chase, en los cuales comprobaron
que el fago T2 transmita su informacin gentica en su ADN, pero no en su protena10
(vase tambin experimento de Hershey y Chase).
El ADN es un largo polmero formado por unidades repetitivas, los nucletidos.18 19 Una
doble cadena de ADN mide de 22 a 26 angstroms (2,2 a 2,6 nanmetros) de ancho, y una
unidad (un nucletido) mide 3,3 (0,33 nm) de largo.20 Aunque cada unidad individual
que se repite es muy pequea, los polmeros de ADN pueden ser molculas enormes que
contienen millones de nucletidos. Por ejemplo, el cromosoma humano ms largo, el
cromosoma nmero 1, tiene aproximadamente 220 millones de pares de bases.21
En los organismos vivos, el ADN no suele existir como una molcula individual, sino como
una pareja de molculas estrechamente asociadas. Las dos cadenas de ADN se enroscan
sobre s mismas formando una especie de escalera de caracol, denominada doble hlice. El
modelo de estructura en doble hlice fue propuesto en 1953 por James Watson y Francis
Crick (el artculo Molecular Structure of Nucleic Acids: A Structure for Deoxyribose
Nucleic Acid fue publicado el 25 de abril de 1953 en Nature), despus de obtener una
imagen de la estructura de doble hlice gracias a la refraccin por rayos X hecha por
Rosalind Franklin.22 El xito de este modelo radicaba en su consistencia con las
propiedades fsicas y qumicas del ADN. El estudio mostraba adems que la
complementariedad de bases poda ser relevante en su replicacin, y tambin la importancia
de la secuencia de bases como portadora de informacin gentica.23 24 25 Cada unidad que
se repite, el nucletido, contiene un segmento de la estructura de soporte (azcar + fosfato),
que mantiene la cadena unida, y una base, que interacciona con la otra cadena de ADN en
la hlice. En general, una base ligada a un azcar se denomina nuclesido y una base ligada
a un azcar y a uno o ms grupos fosfatos recibe el nombre de nucletido.
Componentes
Estructura de soporte: La estructura de soporte de una hebra de ADN est formada por
unidades alternas de grupos fosfato y azcar (desoxirribosa).27 El azcar en el ADN es una
pentosa, concretamente, la desoxirribosa.
cido fosfrico:
Enlace fosfodister. El grupo fosfato (PO43-) une el carbono 5' del azcar de un nuclesido
con el carbono 3' del siguiente.
Su frmula qumica es H3PO4. Cada nucletido puede contener uno (monofosfato:
AMP), dos (difosfato: ADP) o tres (trifosfato: ATP) grupos de cido fosfrico,
aunque como monmeros constituyentes de los cidos nucleicos slo aparecen en
forma de nuclesidos monofosfato.
Desoxirribosa:
Es un monosacrido de 5 tomos de carbono (una pentosa) derivado de la ribosa,
que forma parte de la estructura de nucletidos del ADN. Su frmula es C5H10O4.
Una de las principales diferencias entre el ADN y el ARN es el azcar, pues en el
ARN la 2-desoxirribosa del ADN es reemplazada por una pentosa alternativa, la
ribosa.25
Las molculas de azcar se unen entre s a travs de grupos fosfato, que forman
enlaces fosfodister entre los tomos de carbono tercero (3, tres prima) y quinto
(5, cinco prima) de dos anillos adyacentes de azcar. La formacin de enlaces
asimtricos implica que cada hebra de ADN tiene una direccin. En una doble
hlice, la direccin de los nucletidos en una hebra (3 5) es opuesta a la
direccin en la otra hebra (5 3). Esta organizacin de las hebras de ADN se
denomina antiparalela; son cadenas paralelas, pero con direcciones opuestas. De la
misma manera, los extremos asimtricos de las hebras de ADN se denominan
extremo 5 (cinco prima) y extremo 3 (tres prima), respectivamente.
Bases nitrogenadas:
Timina:
Citosina:
Adenina: 6-aminopurina.
Adenina:
Guanina:
Tambin existen otras bases nitrogenadas (las llamadas bases nitrogenadas minoritarias),
derivadas de forma natural o sinttica de alguna otra base mayoritaria. Lo son por ejemplo
la hipoxantina, relativamente abundante en el tRNA, o la cafena, ambas derivadas de la
adenina; otras, como el aciclovir, derivadas de la guanina, son anlogos sintticos usados en
terapia antiviral; otras, como una de las derivadas del uracilo, son antitumorales.
Las bases nitrogenadas tienen una serie de caractersticas que les confieren unas
propiedades determinadas. Una caracterstica importante es su carcter aromtico,
consecuencia de la presencia en el anillo de dobles enlaces en posicin conjugada. Ello les
confiere la capacidad de absorber luz en la zona ultravioleta del espectro en torno a los 260
nm, lo cual puede aprovecharse para determinar el coeficiente de extincin del ADN y
hallar la concentracin existente de los cidos nucleicos. Otra de sus caractersticas es que
presentan tautomera o isomera de grupos funcionales, debido a que un tomo de
hidrgeno unido a otro tomo puede migrar a una posicin vecina; en las bases
nitrogenadas se dan dos tipos de tautomeras: tautomera lactama-lactima, donde el
hidrgeno migra del nitrgeno al oxgeno del grupo oxo (forma lactama) y viceversa
(forma lactima), y tautomera imina-amina primaria, donde el hidrgeno puede estar
formando el grupo amina (forma amina primaria) o migrar al nitrgeno adyacente (forma
imina). La adenina slo puede presentar tautomera amina-imina, la timina y el uracilo
muestran tautomera doble lactama-lactima, y la guanina y citosina pueden presentar
ambas. Por otro lado, y aunque se trate de molculas apolares, las bases nitrogenadas
presentan suficiente carcter polar como para establecer puentes de hidrgeno, ya que
tienen tomos muy electronegativos (nitrgeno y oxgeno) que presentan carga parcial
negativa, y tomos de hidrgeno con carga parcial positiva, de manera que se forman
dipolos que permiten que se formen estos enlaces dbiles.
Se estima que el genoma humano haploide tiene alrededor de 3.000 millones de pares de
bases. Para indicar el tamao de las molculas de ADN se indica el nmero de pares de
bases, y como derivados hay dos unidades de medida muy utilizadas, la kilobase (kb), que
equivale a 1.000 pares de bases, y la megabase (Mb), que equivale a un milln de pares de
bases.
Apareamiento de bases
Un par A=T con dos puentes de hidrgeno. Los puentes de hidrgeno se muestran como
lneas discontinuas.
Cada tipo de base en una hebra forma un enlace nicamente con un tipo de base en la otra
hebra, lo que se denomina complementariedad de las bases. As, las purinas forman enlaces
con las pirimidinas, de forma que A se enlaza slo con T, y C slo con G. La organizacin
de dos nucletidos apareados a lo largo de la doble hlice se denomina apareamiento de
bases. Este emparejamiento corresponde a la observacin ya realizada por Erwin Chargaff
(1905-2002),30 que mostr que la cantidad de adenina era muy similar a la cantidad de
timina, y que la cantidad de citosina era igual a la cantidad de guanina en el ADN. Como
resultado de esta complementariedad, toda la informacin contenida en la secuencia de
doble hebra de la hlice de ADN est duplicada en cada hebra, lo cual es fundamental
durante el proceso de replicacin del ADN. En efecto, esta interaccin reversible y
especfica entre pares de bases complementarias es crtica para todas las funciones del
ADN en los organismos vivos.18
Como se ha indicado anteriormente, los dos tipos de pares de bases forman un nmero
diferente de enlaces de hidrgeno: A=T forman dos puentes de hidrgeno, y CG forman
tres puentes de hidrgeno (ver imgenes). El par de bases GC es por tanto ms fuerte que el
par de bases AT. Como consecuencia, tanto el porcentaje de pares de bases GC como la
longitud total de la doble hlice de ADN determinan la fuerza de la asociacin entre las dos
hebras de ADN. Las dobles hlices largas de ADN con alto contenido en GC tienen hebras
que interaccionan ms fuertemente que las dobles hlices cortas con alto contenido en
AT.31 Por esta razn, las zonas de la doble hlice de ADN que necesitan separarse
fcilmente tienden a tener un alto contenido en AT, como por ejemplo la secuencia
TATAAT de la caja de Pribnow de algunos promotores.32 En el laboratorio, la fuerza de
esta interaccin puede medirse buscando la temperatura requerida para romper los puentes
de hidrgeno, la temperatura de fusin (tambin denominado valor Tm, del ingls melting
temperature). Cuando todas las pares de bases en una doble hlice se funden, las hebras se
separan en solucin en dos hebras completamente independientes. Estas molculas de ADN
de hebra simple no tienen una nica forma comn, sino que algunas conformaciones son
ms estables que otras.33
Existen diferentes tipos de pares de bases que se pueden formar segn el modo como se
forman los puentes de hidrgeno. Los que se observan en la doble hlice de ADN son los
llamados pares de bases Watson-Crick, pero tambin existen otros posibles pares de bases,
como los denominados Hoogsteen y Wobble u oscilante, que pueden aparecer en
circunstancias particulares. Adems, para cada tipo existe a su vez el mismo par reverso, es
decir, el que se da si se gira la base pirimidnica 180 sobre su eje.
Watson-Crick (pares de bases de la doble hlice): los grupos de la base prica que
intervienen en el enlace de hidrgeno son los que corresponden a las posiciones 1 y
6 (N aceptor y -NH2 donador si la purina es una A) y los grupos de la base
pirimidnica, los que se encuentran en las posiciones 3 y 4 (-NH donador y C=O
aceptor si la pirimidina es una T). En el par de bases Watson-Crick reverso
participaran los grupos de las posiciones 2 y 3 de la base pirimidnica (ver
imgenes).
Hoogsteen: en este caso cambian los grupos de la base prica, que ofrece una cara
diferente (posiciones 6 y 7) y que forman enlaces con los grupos de las pirimidinas
de las posiciones 3 y 4 (como en Watson-Crick). Tambin puede haber Hoogsteen
reversos. Con este tipo de enlace pueden unirse A=U (Hoogsteen y Hoogsteen
reverso) y A=C (Hoogsteen reverso).
Wobble u oscilante: este tipo de enlace permite que se unan guanina y citosina con
un doble enlace (G=T). La base prica (G) forma enlace con los grupos de las
posiciones 1 y 6 (como en Watson-Crick) y la pirimidina (T) con los grupos de las
posiciones 2 y 3. Este tipo de enlace no funcionara con A=C, ya que quedaran
enfrentados los 2 aceptores y los 2 donadores, y slo se podra dar en el caso
inverso. Encontramos pares de bases de tipo oscilante en el ARN, durante el
apareamiento de codn y anticodn. Con este tipo de enlace pueden unirse G=U
(oscilante y oscilante reverso) y A=C (oscilante reverso).
En total, en su forma tautomrica mayoritaria, existen 28 posibles pares de bases
nitrogenadas: 10 posibles pares de bases purina-pirimidina (2 pares Watson-Crick y 2
Watson Crick reverso, 1 par Hoogsteen y 2 pares Hoogsteen reverso, 1 par oscilante y 2
pares oscilante reverso), 7 pares homo purina-purina (A=A, G=G), 4 pares A=G y 7 pares
pirimidina-pirimidina. Esto sin contar con los pares de bases que pueden formarse si
tambin tenemos en cuenta las otras formas tautomricas minoritarias de las bases
nitrogenadas; stos, adems, pueden ser responsables de mutaciones puntuales por
sustitucin de tipo transicin.
Estructura
El ADN es una molcula bicatenaria, es decir, est formada por dos cadenas dispuestas de
forma antiparalela y con las bases nitrogenadas enfrentadas. En su estructura
tridimensional, se distinguen distintos niveles:34 35
1. Estructura primaria:
o Secuencia de nucletidos encadenados. Es en estas cadenas donde se
encuentra la informacin gentica, y dado que el esqueleto es el mismo para
todos, la diferencia de la informacin radica en la distinta secuencia de bases
nitrogenadas. Esta secuencia presenta un cdigo, que determina una
informacin u otra, segn el orden de las bases.
2. Estructura secundaria:
o Es una estructura en doble hlice. Permite explicar el almacenamiento de la
informacin gentica y el mecanismo de duplicacin del ADN. Fue
postulada por Watson y Crick, basndose en la difraccin de rayos X que
haban realizado Franklin y Wilkins, y en la equivalencia de bases de
Chargaff, segn la cual la suma de adeninas ms guaninas es igual a la suma
de timinas ms citosinas.
o Es una cadena doble, dextrgira o levgira, segn el tipo de ADN. Ambas
cadenas son complementarias, pues la adenina y la guanina de una cadena se
unen, respectivamente, a la timina y la citosina de la otra. Ambas cadenas
son antiparalelas, pues el extremo 3 de una se enfrenta al extremo 5 de la
homloga.
o Existen tres modelos de ADN. El ADN de tipo B es el ms abundante y es el
que tiene la estructura descrita por Watson y Crick.
3. Estructura terciaria:
o Se refiere a cmo se almacena el ADN en un espacio reducido, para formar
los cromosomas. Vara segn se trate de organismos procariotas o
eucariotas:
2. En procariotas el ADN se pliega como una sper-hlice, generalmente en
forma circular y asociada a una pequea cantidad de protenas. Lo mismo
ocurre en orgnulos celulares como las mitocondrias y en los cloroplastos.
3. En eucariotas, dado que la cantidad de ADN de cada cromosoma es muy
grande, el empaquetamiento ha de ser ms complejo y compacto; para ello
se necesita la presencia de protenas, como las histonas y otras protenas de
naturaleza no histnica (en los espermatozoides estas protenas son las
protaminas).34
4. Estructura cuaternaria:
El ADN existe en muchas conformaciones.27 Sin embargo, en organismos vivos slo se han
observado las conformaciones ADN-A, ADN-B y ADN-Z. La conformacin que adopta el
ADN depende de su secuencia, la cantidad y direccin de superenrollamiento que presenta,
la presencia de modificaciones qumicas en las bases y las condiciones de la solucin, tales
como la concentracin de iones de metales y poliaminas.36 De las tres conformaciones, la
forma "B" es la ms comn en las condiciones existentes en las clulas.37 Las dos dobles
hlices alternativas del ADN difieren en su geometra y dimensiones.
La forma "A" es una espiral que gira hacia la derecha, ms amplia que la "B", con una
hendidura menor superficial y ms amplia, y una hendidura mayor ms estrecha y
profunda. La forma "A" ocurre en condiciones no fisiolgicas en formas deshidratadas de
ADN, mientras que en la clula puede producirse en apareamientos hbridos de hebras
ADN-ARN, adems de en complejos enzima-ADN.38 39
Los segmentos de ADN en los que las bases han sido modificadas por metilacin pueden
sufrir cambios conformacionales mayores y adoptar la forma "Z". En este caso, las hebras
giran alrededor del eje de la hlice en una espiral que gira a mano izquierda, lo opuesto a la
forma "B" ms frecuente.40 Estas estructuras poco frecuentes pueden ser reconocidas por
protenas especficas que se unen a ADN-Z y posiblemente estn implicadas en la
regulacin de la transcripcin.41
Estructuras en cudruplex
Estructura de un ADN en cudruplex formada por repeticiones en los telmeros. La
conformacin de la estructura de soporte del ADN difiere significativamente de la tpica
estructura en hlice.42
Estas secuencias ricas en guanina pueden estabilizar los extremos cromosmicos mediante
la formacin de estructuras de juegos apilados de unidades de cuatro bases, en lugar de los
pares de bases encontrados normalmente en otras estructuras de ADN. En este caso, cuatro
bases guanina forman unidades con superficie plana que se apilan una sobre otra, para
formar una estructura cudruple-G estable.46 Estas estructuras se estabilizan formando
puentes de hidrgeno entre los extremos de las bases y la quelatacin de un metal inico en
el centro de cada unidad de cuatro bases.47 Tambin se pueden formar otras estructuras, con
el juego central de cuatro bases procedente, o bien de una hebra sencilla plegada alrededor
de las bases, o bien de varias hebras paralelas diferentes, de forma que cada una contribuye
con una base a la estructura central.
Adems de estas estructuras apiladas, los telmeros tambin forman largas estructuras en
lazo, denominadas lazos telomricos o lazos-T (T-loops en ingls). En este caso, las hebras
simples de ADN se enroscan sobre s mismas en un amplio crculo estabilizado por
protenas que se unen a telmeros.48 En el extremo del lazo T, el ADN telomrico de hebra
sencilla se sujeta a una regin de ADN de doble hebra porque la hebra de ADN telomrico
altera la doble hlice y se aparea a una de las dos hebras. Esta estructura de triple hebra se
denomina lazo de desplazamiento o lazo D (D-loop).46
Cuando las dos hebras de ADN se enrollan una sobre la otra (sea a derechas o a izquierdas),
se forman huecos o hendiduras entre una hebra y la otra, dejando expuestos los laterales de
las bases nitrogenadas del interior (ver la animacin). En la conformacin ms comn que
adopta el ADN aparecen, como consecuencia de los ngulos formados entre los azcares de
ambas cadenas de cada par de bases nitrogenadas, dos tipos de hendiduras alrededor de la
superficie de la doble hlice: una de ellas, la hendidura o surco mayor, que mide 22 (2,2
nm) de ancho, y la otra, la hendidura o surco menor, que mide 12 (1,2 nm) de ancho.51
Cada vuelta de hlice, que es cuando sta ha realizado un giro de 360 o lo que es lo
mismo, de principio de hendidura mayor a final de hendidura menor, medir por tanto 34
, y en cada una de esas vueltas hay unos 10,5 pb.
La anchura de la hendidura mayor implica que los extremos de las bases son ms accesibles
en sta, de forma que la cantidad de grupos qumicos expuestos tambin es mayor lo cual
facilita la diferenciacin entre los pares de bases A-T, T-A, C-G, G-C. Como consecuencia
de ello, tambin se ver facilitado el reconocimiento de secuencias de ADN por parte de
diferentes protenas sin la necesidad de abrir la doble hlice. As, protenas como los
factores de transcripcin que pueden unirse a secuencias especficas, frecuentemente
contactan con los laterales de las bases expuestos en la hendidura mayor.52 Por el contrario,
los grupos qumicos que quedan expuestos en la hendidura menor son similares, de forma
que el reconocimiento de los pares de bases es ms difcil; por ello se dice que la hendidura
mayor contiene ms informacin que la hendidura menor.50
Sentido y antisentido
Superenrollamiento
Estructura de molculas de ADN lineales con los extremos fijos y superenrolladas. Por
claridad, se ha omitido la estructura en hlice del ADN.
Modificaciones qumicas
La expresin de los genes est influenciada por la forma en la que el ADN est
empaquetado en cromosomas, en una estructura denominada cromatina. Las
modificaciones de bases pueden estar implicadas en el empaquetamiento del ADN: las
regiones que presentan una expresin gnica baja o nula normalmente contienen niveles
altos de metilacin de las bases citosina. Por ejemplo, la metilacin de citosina produce 5-
metil-citosina, que es importante para la inactivacin del cromosoma X.61 El nivel medio de
metilacin vara entre organismos: el gusano Caenorhabditis elegans carece de metilacin
de citosina, mientras que los vertebrados presentan un nivel alto - hasta 1% de su ADN
contiene 5-metil-citosina.62 A pesar de la importancia de la 5-metil-citosina, sta puede
desaminarse para generar una base timina. Las citosinas metiladas son por tanto
particularmente sensibles a mutaciones.63 Otras modificaciones de bases incluyen la
metilacin de adenina en bacterias y la glicosilacin de uracilo para producir la "base-J" en
kinetoplastos.64 65
El ADN puede resultar daado por muchos tipos de mutgenos, que cambian la secuencia
del ADN: agentes alquilantes, adems de radiacin electromagntica de alta energa, como
luz ultravioleta y rayos X. El tipo de dao producido en el ADN depende del tipo de
mutgeno. Por ejemplo, la luz UV puede daar al ADN produciendo dmeros de timina,
que se forman por ligamiento cruzado entre bases pirimidnicas.67 Por otro lado, oxidantes
tales como radicales libres o el perxido de hidrgeno producen mltiples daos,
incluyendo modificaciones de bases, sobre todo guanina, y roturas de doble hebra (double-
strand breaks).68 En una clula humana cualquiera, alrededor de 500 bases sufren dao
oxidativo cada da.69 70 De estas lesiones oxidativas, las ms peligrosas son las roturas de
doble hebra, ya que son difciles de reparar y pueden producir mutaciones puntuales,
inserciones y deleciones de la secuencia de ADN, as como translocaciones
cromosmicas.71
Muchos mutgenos se posicionan entre dos pares de bases adyacentes, por lo que se
denominan agentes intercalantes. La mayora de los agentes intercalantes son molculas
aromticas y planas, como el bromuro de etidio, la daunomicina, la doxorubicina y la
talidomida. Para que un agente intercalante pueda integrarse entre dos pares de bases, stas
deben separarse, distorsionando las hebras de ADN y abriendo la doble hlice. Esto inhibe
la transcripcin y la replicacin del ADN, causando toxicidad y mutaciones. Por ello, los
agentes intercalantes del ADN son a menudo carcingenos: el benzopireno, las acridinas, la
aflatoxina y el bromuro de etidio son ejemplos bien conocidos.72 73 74 Sin embargo, debido
a su capacidad para inhibir la replicacin y la transcripcin del ADN, estas toxinas tambin
se utilizan en quimioterapia para inhibir el rpido crecimiento de las clulas cancerosas.75
El dao en el ADN inicia una respuesta que activa diferentes mecanismos de reparacin
que reconocen lesiones especficas en el ADN, que son reparadas en el momento para
recuperar la secuencia original del ADN. Asimismo, el dao en el ADN provoca una parada
en el ciclo celular, que conlleva la alteracin de numerosos procesos fisiolgicos, que a su
vez implica sntesis, transporte y degradacin de protenas (vase tambin Checkpoint de
daos en el ADN). Alternativamente, si el dao genmico es demasiado grande para que
pueda ser reparado, los mecanismos de control inducirn la activacin de una serie de rutas
celulares que culminarn en la muerte celular.
Funciones biolgicas
Las funciones biolgicas del ADN incluyen el almacenamiento de informacin (genes y
genoma), la codificacin de protenas (transcripcin y traduccin) y su autoduplicacin
(replicacin del ADN) para asegurar la transmisin de la informacin a las clulas hijas
durante la divisin celular.
Genes y genoma
El ADN codificante
Desde este punto de vista, las obreras de este mecanismo son las protenas. Estas pueden
ser estructurales, como las protenas de los msculos, cartlagos, pelo, etc., o funcionales,
como la hemoglobina o las innumerables enzimas del organismo. La funcin principal de la
herencia es la especificacin de las protenas, siendo el ADN una especie de plano o receta
para producirlas. La mayor parte de las veces la modificacin del ADN provocar una
disfuncin proteica que dar lugar a la aparicin de alguna enfermedad. Pero en
determinadas ocasiones, las modificaciones podrn provocar cambios beneficiosos que
darn lugar a individuos mejor adaptados a su entorno.
El ADN no codificante
Por otro lado, algunas secuencias de ADN desempean un papel estructural en los
cromosomas: los telmeros y centrmeros contienen pocos o ningn gen codificante de
protenas, pero son importantes para estabilizar la estructura de los cromosomas. Algunos
genes no codifican protenas, pero s se transcriben en ARN: ARN ribosmico, ARN de
transferencia y ARN de interferencia (ARNi, que son ARN que bloquean la expresin de
genes especficos). La estructura de intrones y exones de algunos genes (como los de
inmunoglobulinas y protocadherinas) son importantes por permitir los cortes y empalmes
alternativos del pre-ARN mensajero que hacen posible la sntesis de diferentes protenas a
partir de un mismo gen (sin esta capacidad no existira el sistema inmune, por ejemplo).
Algunas secuencias de ADN no codificante representan pseudogenes que tienen valor
evolutivo, ya que permiten la creacin de nuevos genes con nuevas funciones.35 Otros ADN
no codificantes proceden de la duplicacin de pequeas regiones del ADN; esto tiene
mucha utilidad, ya que el rastreo de estas secuencias repetitivas permite estudios de
filogenia.
Transcripcin y traduccin
La replicacin del ADN es el proceso por el cual se obtienen copias o rplicas idnticas de
una molcula de ADN. La replicacin es fundamental para la transferencia de la
informacin gentica de una generacin a la siguiente y, por ende, es la base de la herencia.
El mecanismo consiste esencialmente en la separacin de las dos hebras de la doble hlice,
las cuales sirven de molde para la posterior sntesis de cadenas complementarias a cada una
de ellas, que llevar por nombre ARNm. El resultado final son dos molculas idnticas a la
original. Este tipo de replicacin se denomina semiconservativa debido a que cada una de
las dos molculas resultantes de la duplicacin presenta una cadena procedente de la
molcula "madre" y otra recin sintetizada.
Interacciones ADN-protena
Todas las funciones del ADN dependen de sus interacciones con protenas. Estas
interacciones pueden ser inespecficas, o bien la protena puede unirse de forma especfica a
una nica secuencia de ADN. Tambin pueden unirse enzimas, entre las cuales son
particularmente importantes las polimerasas, que copian las secuencia de bases del ADN
durante la transcripcin y la replicacin.
Interacciones inespecficas
Interaccin de ADN con histonas (en blanco, arriba). Los aminocidos bsicos de estas
protenas (abajo a la izquierda, en azul) se unen a los grupos cidos de los fosfatos del ADN
(abajo a la derecha, en rojo).
Las protenas estructurales que se unen al ADN son ejemplos bien conocidos de
interacciones inespecficas ADN-protenas. En los cromosomas, el ADN se encuentra
formando complejos con protenas estructurales. Estas protenas organizan el ADN en una
estructura compacta denominada cromatina. En eucariotas esta estructura implica la unin
del ADN a un complejo formado por pequeas protenas bsicas denominadas histonas,
mientras que en procariotas estn involucradas una gran variedad de protenas.82 83 Las
histonas forman un complejo de forma cilndrica denominado nucleosoma, en torno al cual
se enrollan casi dos vueltas de ADN de doble hlice. Estas interacciones inespecficas
quedan determinadas por la existencia de residuos bsicos en las histonas, que forman
enlaces inicos con el esqueleto de azcar-fosfato del ADN y, por tanto, son en gran parte
independientes de la secuencia de bases.84 Estos aminocidos bsicos experimentan
modificaciones qumicas de metilacin, fosforilacin y acetilacin,85 que alteran la fuerza
de la interaccin entre el ADN y las histonas, haciendo al ADN ms o menos accesible a
los factores de transcripcin y por tanto modificando la tasa de transcripcin.86
Otras protenas que se unen a ADN de manera inespecfica en la cromatina incluyen las
protenas del grupo de alta movilidad (HMG, High Mobility Group) que se unen a ADN
plegado o distorsionado.87 Estas protenas son importantes durante el plegamiento de los
nucleosomas, organizndolos en estructuras ms complejas para constituir los
cromosomas88 durante el proceso de condensacin cromosmica. Se ha propuesto que en
este proceso tambin intervendran otras protenas, formando una especie de "andamio"
sobre el cual se organiza la cromatina; los principales componentes de esta estructura seran
la enzima topoisomerasa II (topoIIalpha) y la condensina 13S.89 Sin embargo, el papel
estructural de la topoIIalpha en la organizacin de los cromosomas an es discutido, ya que
otros grupos argumentan que esta enzima se intercambia rpidamente tanto en los brazos
cromosmicos como en los cinetocoros durante la mitosis.90
Interacciones especficas
Un grupo bien definido de protenas que unen ADN es el conformado por las protenas que
se unen especficamente a ADN monocatenario o ADN de hebra sencilla (ssDNA). En
humanos, la protena A de replicacin es la mejor conocida de su familia y acta en
procesos en los que la doble hlice se separa, como la replicacin del ADN, la
recombinacin o la reparacin del ADN.91 Estas protenas parecen estabilizar el ADN
monocatenario, protegindolo para evitar que forme estructuras de tallo-lazo (stem-loop) o
que sea degradado por nucleasas.
El factor de transcripcin represor del fago lambda unido a su ADN diana mediante un
motivo hlice-giro-hlice (helix-turn-helix).92
Sin embargo, otras protenas han evolucionado para unirse especficamente a secuencias
particulares de ADN. La especificidad de la interaccin de las protenas con el ADN
procede de los mltiples contactos con las bases de ADN, lo que les permite "leer" la
secuencia del ADN. La mayora de esas interacciones con las bases ocurre en la hendidura
mayor, donde las bases son ms accesibles.93
Las protenas especficas estudiadas con mayor detalle son las encargadas de regular la
transcripcin, denominadas por ello factores de transcripcin. Cada factor de
transcripcin se une a una secuencia concreta de ADN y activa o inhibe la transcripcin de
los genes que presentan estas secuencias prximas a sus promotores. Los factores de
transcripcin pueden efectuar esto de dos formas:
Como los ADN diana pueden encontrarse por todo el genoma del organismo, los cambios
en la actividad de un tipo de factor de transcripcin pueden afectar a miles de genes.96 En
consecuencia, estas protenas son frecuentemente las dianas de los procesos de transduccin
de seales que controlan las respuestas a cambios ambientales o diferenciacin y desarrollo
celular.
Nucleasas y ligasas
Las nucleasas son enzimas que cortan las hebras de ADN mediante la catlisis de la
hidrlisis de los enlaces fosfodister. Las nucleasas que hidrolizan nucletidos a partir de
los extremos de las hebras de ADN se denominan exonucleasas, mientras que las
endonucleasas cortan en el interior de las hebras. Las nucleasas que se utilizan con mayor
frecuencia en biologa molecular son las enzimas de restriccin, endonucleasas que cortan
el ADN por determinadas secuencias especficas. Por ejemplo, la enzima EcoRV, que se
muestra a la izquierda, reconoce la secuencia de 6 bases 5-GAT|ATC-3, y hace un corte en
ambas hebras en la lnea vertical indicada, generando dos molculas de ADN con los
extremos romos. Otras enzimas de restriccin generan sin embargo extremos cohesivos, ya
que cortan de forma diferente las dos hebras de ADN. En la naturaleza, estas enzimas
protegen a las bacterias contra las infecciones de fagos, al digerir el ADN de dicho fago
cuando entra a travs de la pared bacteriana, actuando como un mecanismo de defensa.98
En biotecnologa, estas nucleasas especficas de la secuencias de ADN se utilizan en
ingeniera gentica para clonar fragmentos de ADN y en la tcnica de huella gentica.
Las enzimas denominadas ADN ligasas pueden reunir hebras de ADN cortadas o rotas.99
Las ligasas son particularmente importantes en la replicacin de la hebra que sufre
replicacin discontinua en el ADN, ya que unen los fragmentos cortos de ADN generados
en la horquilla de replicacin para formar una copia completa del molde de ADN. Tambin
se utilizan en la reparacin del ADN y en procesos de recombinacin gentica.99
Topoisomerasas y helicasas
Las topoisomerasas son enzimas que poseen a la vez actividad nucleasa y ligasa. Estas
protenas varan la cantidad de ADN superenrollado. Algunas de estas enzimas funcionan
cortando la hlice de ADN y permitiendo que una seccin rote, de manera que reducen el
grado de superenrollamiento. Una vez hecho esto, la enzima vuelve a unir los fragmentos
de ADN.59 Otros tipos de enzimas son capaces de cortar una hlice de ADN y luego pasar
la segunda hebra de ADN a travs de la rotura, antes de reunir las hlices.100 Las
topoisomerasas son necesarias para muchos procesos en los que interviene el ADN, como
la replicacin del ADN y la transcripcin.60
Las helicasas son unas protenas que pertenecen al grupo de los motores moleculares.
Utilizan energa qumica almacenada en los nuclesidos trifosfatos, fundamentalmente
ATP, para romper puentes de hidrgeno entre bases y separar la doble hlice de ADN en
hebras simples.101 Estas enzimas son esenciales para la mayora de los procesos en los que
las enzimas necesitan acceder a las bases del ADN.
Polimerasas
Las polimerasas son enzimas que sintetizan cadenas de nucletidos a partir de nuclesidos
trifosfatos. La secuencia de sus productos son copias de cadenas de polinucletidos
existentes, que se denominan moldes. Estas enzimas funcionan aadiendo nucletidos al
grupo hidroxilo en 3' del nucletido previo en una hebra de ADN. En consecuencia, todas
las polimerasas funcionan en direccin 5 --> 3.102 En los sitios activos de estas enzimas, el
nuclesido trifosfato que se incorpora aparea su base con la correspondiente en el molde:
esto permite que la polimerasa sintentice de forma precisa la hebra complementaria al
molde.
En la replicacin del ADN, una ADN polimerasa dependiente de ADN realiza una
copia de ADN a partir de una secuencia de ADN. La precisin es vital en este
proceso, por lo que muchas de estas polimerasas tienen una actividad de
verificacin de la lectura (proofreading). Mediante esta actividad, la polimerasa
reconoce errores ocasionales en la reaccin de sntesis, debido a la falta de
apareamiente entre el nucletido errneo y el molde, lo que genera un
desacoplamiento (mismatch). Si se detecta un desacoplamiento, se activa una
actividad exonucleasa en direccin 3 --> 5 y la base incorrecta se elimina.103 En la
mayora de los organismos las ADN polimerasas funcionan en un gran complejo
denominado replisoma, que contiene mltiples unidades accesorias, como
helicasas.104
Recombinacin gentica
Estructura de un intermedio en unin de Holliday en la recombinacin gentica. Las cuatro
hebras de ADN separadas estn coloreadas en rojo, azul, verde y amarillo.107
Artculo principal: Recombinacin gentica
Una hlice de ADN normalmente no interacciona con otros segmentos de ADN, y en las
clulas humanas los diferentes cromosomas incluso ocupan reas separadas en el ncleo
celular denominadas territorios cromosmicos.108 La separacin fsica de los diferentes
cromosomas es importante para que el ADN mantenga su capacidad de funcionar como un
almacn estable de informacin. Uno de los pocos momentos en los que los cromosomas
interaccionan es durante el sobrecruzamiento cromosmico (chromosomal crossover),
durante el cual se recombinan. El sobrecruzamiento cromosmico ocurre cuando dos
hlices de ADN se rompen, se intercambian y se unen de nuevo.
A pesar de todo, el proceso de trabajo hacia atrs desde el presente tiene limitaciones
inherentes, razn por la cual otros investigadores tratan de elucidar el mecanismo evolutivo
trabajando desde el origen de la Tierra en adelante. Dada suficiente informacin sobre la
qumica en el cosmos, la manera en la que las sustancias csmicas podran haberse
depositado en la Tierra, y las transformaciones que podran haber tenido lugar en la
superficie terrestre primigenia, tal vez podramos ser capaces de aprender sobre los
orgenes para desarrollar modelos de evolucin ulterior de la informacin gentica127 (vase
tambin el artculo sobre el origen de la vida).
Tcnicas comunes
El conocimiento de la estructura del ADN ha permitido el desarrollo de multitud de
herramientas tecnolgicas que explotan sus propiedades fisicoqumicas para analizar su
implicacin en problemas concretos: por ejemplo, desde anlisis filogeeticos para detectar
similitudes entre diferentes taxones, a la caracterizacin de la variabilidad individual de un
paciente en su respuesta a un determinado frmaco, pasando por un enfoque global, a nivel
genmico, de cualquier caracterstica especfica en un grupo de individuos de inters. 128
Podemos clasificar las metodologas de anlisis del ADN en aquellas que buscan su
multiplicacin, ya in vivo, como la reaccin en cadena de la polimerasa (PCR), ya in vitro,
como la clonacin, y aquellas que explotan las propiedades especficas de elementos
concretos, o de genomas adecuadamente clonados. Es el caso de la secuenciacin de ADN
y de la hibridacin con sondas especficas ("southern blot" y chips de ADN).
Secuenciacin
La reaccin en cadena de la polimerasa, habitualmente conocida como PCR por sus siglas
en ingls, es una tcnica de biologa molecular descrita en 1986 por Kary Mullis,132 cuyo
objetivo es obtener un gran nmero de copias de un fragmento de ADN dado, partiendo de
una escasa cantidad de aqul. Para ello, se emplea una ADN polimerasa termoestable que,
en presencia de una mezcla de los cuatro desoxinucletidos, un tampn de la fuerza inica
adecuada y los cationes precisos para la actividad de la enzima, dos oligonucletidos
(denominados cebadores) complementarios a parte de la secuencia (situados a distancia
suficiente y en sentido antiparalelo) y bajo unas condiciones de temperatura adecuadas,
moduladas por un aparato denominado termociclador, genera exponencialmente nuevos
fragmentos de ADN semejantes al original y acotados por los dos cebadores.129
La PCR puede efectuarse como una tcnica de punto final, esto es, como una herramienta
de generacin del ADN deseado, o como un mtodo continuo, en el que se evale dicha
polimerizacin a tiempo real. Esta ltima variante es comn en la PCR cuantitativa.128
Southern blot
Chips de ADN
til para mejorar la resistencia del organismo transformado: por ejemplo en plantas
se pueden introducir genes que confieren resistencia a patgenos (virus, insectos,
hongos), as como a agentes estresantes abiticos (salinidad, sequedad, metales
pesados).143 144 145
Medicina forense
Los mdicos forenses pueden utilizar el ADN presente en la sangre, el semen, la piel, la
saliva o el pelo en la escena de un crimen para identificar al responsable. Esta tcnica se
denomina huella gentica, o tambin "perfil de ADN". Al realizar la huella gentica, se
compara la longitud de secciones altamente variables de ADN repetitivo, como los
microsatlites, entre personas diferentes. Este mtodo es frecuentemente muy fiable para
identificar a un criminal.146 Sin embargo, la identificacin puede complicarse si la escena
est contaminada con ADN de personas diferentes.147 La tcnica de la huella gentica fue
desarrollada en 1984 por el genetista britnico Sir Alec Jeffreys,148 y fue utilizada por
primera vez en medicina forense para condenar a Colin Pitchfork por los asesinatos de
Narborough en 1983 y de Enderby en 1986.149 Se puede requerir a las personas acusadas de
ciertos tipos de crmenes que proporcionen una muestra de ADN para introducirlos en una
base de datos. Esto ha facilitado la labor de los investigadores en la resolucin de casos
antiguos, donde slo se obtuvo una muestra de ADN de la escena del crimen, en algunos
casos permitiendo exonerar a un convicto. La huella gentica tambin puede utilizarse para
identificar vctimas de accidentes en masa,150 o para realizar pruebas de consanguinidad.151
Bioinformtica
A lo largo del tiempo, el ADN almacena mutaciones que se heredan y, por tanto, contiene
informacin histrica, de manera que comparando secuencias de ADN, los genetistas
pueden inferir la historia evolutiva de los organismos, su filogenia.158 La investigacin
filogentica es una herramienta fundamental en biologa evolutiva. Si se comparan las
secuencias de ADN dentro de una especie, los genetistas de poblaciones pueden conocer la
historia de poblaciones particulares. Esto se puede utilizar en una amplia variedad de
estudios, desde ecologa hasta antropologa, como ilustra el anlisis de ADN llevado a cabo
para identificar las Diez Tribus Perdidas de Israel.159 160 Por otro lado, el ADN tambin se
utiliza para estudiar relaciones familiares recientes.
Referencias
Notas
1. Volver arriba Sergio Ferrer. El verdadero sentido de la vida Journal of Feelsynapsis
(JoF). ISSN: 2254-3651. 2011 (1): 119-127
2. Volver arriba Dahm R (2005). Friedrich Miescher and the discovery of DNA. Dev Biol
278 (2): pp. 27488. doi:10.1016/j.ydbio.2004.11.028. PMID 15680349.
3. Volver arriba http://www.terradaily.com/reports/Building_Life_On_Earth_999.html Dato
del descubrimiento del ADN en terradaily.com
4. Volver arriba Dahm R (2008). Discovering DNA: Friedrich Miescher and the early years
of nucleic acid research. Hum Genet 122 (2): pp. 565-581. PMID 17901982.
5. Volver arriba Levene P, (1919). The structure of yeast nucleic acid. J Biol Chem 40
(2): pp. 41524. http://www.jbc.org/cgi/reprint/40/2/415.
6. Saltar a: a b Dhanda, J.S.; Shyam S. Chauhan (22-Feb-2008). Structural Levels of
Nucleic Acids and Sequencing.. En All India Institute of Medical Sciences. Molecular
Biology. (Department of Biochemistry edicin). New Delhi 110 029. (Revisado el 7 de octubre de
2008).
7. Volver arriba Astbury W, (1947). Nucleic acid. Symp. SOC. Exp. Bbl 1 (66).
8. Volver arriba Lorenz MG, Wackernagel W (1994). Bacterial gene transfer by natural
genetic transformation in the environment. Microbiol. Rev. 58 (3): pp. 563602. PMID
7968924.
http://www.pubmedcentral.nih.gov/articlerender.fcgi?tool=pubmed&pubmedid=7968924.
9. Volver arriba Avery O, MacLeod C, McCarty M (1944). Studies on the chemical nature
of the substance inducing transformation of pneumococcal types. Inductions of
transformation by a desoxyribonucleic acid fraction isolated from pneumococcus type III.
J Exp Med 79 (2): pp. 137158. http://www.jem.org/cgi/reprint/149/2/297.
10. Volver arriba Hershey A, Chase M (1952). Independent functions of viral protein and
nucleic acid in growth of bacteriophage. J Gen Physiol 36 (1): pp. 3956. PMID 12981234.
http://www.jgp.org/cgi/reprint/36/1/39.pdf.
11. Volver arriba Watson J.D. and Crick F.H.C. (1953). A Structure for Deoxyribose
Nucleic Acid. Nature 171: pp. 737738. doi:10.1038/171737a0. PMID 13054692.
http://www.nature.com/nature/dna50/watsoncrick.pdf.
12. Volver arriba Nature Archives Double Helix of DNA: 50 Years
13. Volver arriba Franklin, R. E. (1953). Molecular Configuration in Sodium
Thymonucleate. Franklin R. and Gosling R.G.. Nature 171: pp. 740741. doi:10.1038/171740a0.
PMID 13054694. http://www.nature.com/nature/dna50/franklingosling.pdf.
14. Volver arriba Original X-ray diffraction image
15. Volver arriba Wilkins M.H.F., A.R. Stokes A.R. & Wilson, H.R. (1953). Molecular
Structure of Deoxypentose Nucleic Acids. Nature 171: pp. 738740. doi:10.1038/171738a0. PMID
13054693. http://www.nature.com/nature/dna50/wilkins.pdf.
16. Volver arriba The Nobel Prize in Physiology or Medicine 1962 Nobelprize .org (Revisado el
22 de diciembre de 06).
17. Volver arriba Brenda Maddox (23 de enero de 2003). The double helix and the 'wronged
heroine'. Nature 421: pp. 407408. doi:10.1038/nature01399. PMID 12540909.
http://www.biomath.nyu.edu/index/course/hw_articles/nature4.pdf.
18. Saltar a: a b Alberts, Bruce; Alexander Johnson, Julian Lewis, Martin Raff, Keith Roberts,
and Peter Walters (2002). Molecular Biology of the Cell; Fourth Edition. New York and
London: Garland Science. ISBN 0-8153-3218-1.
19. Volver arriba Butler, John M. (2001) Forensic DNA Typing "Elsevier". pp. 1415. ISBN
978-0-12-147951-0.
20. Volver arriba Mandelkern M, Elias J, Eden D, Crothers D (1981). The dimensions of
DNA in solution. J Mol Biol 152 (1): pp. 15361. PMID 7338906.
21. Volver arriba Gregory S, et al. (2006). The DNA sequence and biological annotation of
human chromosome 1. Nature 441 (7091): pp. 31521. PMID 16710414.
22. Volver arriba Watson JD; Crick FHC. A structure for Deoxyribose Nucleic Acid. Nature
171(4356):737-738.. (April, 1953) Texto Completo
23. Volver arriba Watson J, Crick F (1953). Molecular structure of nucleic acids; a structure
for deoxyribose nucleic acid. Nature 171 (4356): pp. 7378. PMID 13054692.
http://profiles.nlm.nih.gov/SC/B/B/Y/W/_/scbbyw.pdf.
24. Volver arriba Andrew Bates (2005). DNA structure. DNA topology. Oxford University
Press. ISBN 0-19-850655-4.
25. Saltar a: a b c Berg J., Tymoczko J. and Stryer L. (2002) Biochemistry. W. H. Freeman and
Company ISBN 0-7167-4955-6
26. Volver arriba Abbreviations and Symbols for Nucleic Acids, Polynucleotides and their
Constituents IUPAC-IUB Commission on Biochemical Nomenclature (CBN), consultado el
3 ene 2006
27. Saltar a: a b Ghosh A, Bansal M (2003). A glossary of DNA structures from A to Z.
Acta Crystallogr D Biol Crystallogr 59 (Pt 4): pp. 6206. PMID 12657780.
28. Volver arriba Clausen-Schaumann H, Rief M, Tolksdorf C, Gaub H (2000). Mechanical
stability of single DNA molecules. Biophys J 78 (4): pp. 19972007. PMID 10733978.
http://www.pubmedcentral.nih.gov/picrender.fcgi?artid=1300792&blobtype=pdf.
29. Volver arriba Ponnuswamy P, Gromiha M (1994). On the conformational stability of
oligonucleotide duplexes and tRNA molecules. J Theor Biol 169 (4): pp. 41932. PMID
7526075.
30. Volver arriba Erwin Chargaff Papers
31. Volver arriba Chalikian T, Vlker J, Plum G, Breslauer K (1999). A more unified
picture for the thermodynamics of nucleic acid duplex melting: a characterization by
calorimetric and volumetric techniques. Proc Natl Acad Sci U S A 96 (14): pp. 78538.
PMID 10393911. http://www.pubmedcentral.nih.gov/picrender.fcgi?artid=22151&blobtype=pdf.
32. Volver arriba deHaseth P, Helmann J (1995). Open complex formation by Escherichia
coli RNA polymerase: the mechanism of polymerase-induced strand separation of double
helical DNA. Mol Microbiol 16 (5): pp. 81724. PMID 7476180.
33. Volver arriba Isaksson J, Acharya S, Barman J, Cheruku P, Chattopadhyaya J (2004).
Single-stranded adenine-rich DNA and RNA retain structural characteristics of their
respective double-stranded conformations and show directional differences in stacking
pattern. Biochemistry 43 (51): pp. 159966010. PMID 15609994.
34. Saltar a: a b c d Hib, J. & De Robertis, E. D. P. 1998. Fundamentos de biologa celular y
molecular. El Ateneo, 3 edicin, 416 pginas. ISBN 950-02-0372-3. ISBN 978-950-02-
0372-2
35. Saltar a: a b c De Robertis, E.D.P. 1998. Biologa celular y molecular. El Ateneo, 617
pginas. ISBN 950-02-0364-2. ISBN 978-950-02-0364-7
36. Volver arriba Basu H, Feuerstein B, Zarling D, Shafer R, Marton L (1988). Recognition
of Z-RNA and Z-DNA determinants by polyamines in solution: experimental and
theoretical studies. J Biomol Struct Dyn 6 (2): pp. 299309. PMID 2482766.
37. Volver arriba Leslie AG, Arnott S, Chandrasekaran R, Ratliff RL (1980). Polymorphism
of DNA double helices. J. Mol. Biol. 143 (1): pp. 4972. PMID 7441761.
38. Volver arriba Wahl M, Sundaralingam M (1997). Crystal structures of A-DNA
duplexes. Biopolymers 44 (1): pp. 4563. PMID 9097733.
39. Volver arriba Lu XJ, Shakked Z, Olson WK (2000). A-form conformational motifs in
ligand-bound DNA structures. J. Mol. Biol. 300 (4): pp. 819-40. PMID 10891271.
40. Volver arriba Rothenburg S, Koch-Nolte F, Haag F. DNA methylation and Z-DNA
formation as mediators of quantitative differences in the expression of alleles. Immunol
Rev 184: pp. 28698. PMID 12086319.
41. Volver arriba Oh D, Kim Y, Rich A (2002). Z-DNA-binding proteins can act as potent
effectors of gene expression in vivo. Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 99 (26): pp. 16666-71.
PMID 12486233.
http://www.pubmedcentral.nih.gov/articlerender.fcgi?tool=pubmed&pubmedid=12486233.
42. Volver arriba Created from NDB UD0017
43. Saltar a: a b Greider C, Blackburn E (1985). Identification of a specific telomere terminal
transferase activity in Tetrahymena extracts. Cell 43 (2 Pt 1): pp. 40513. PMID 3907856.
44. Saltar a: a b Nugent C, Lundblad V (1998). The telomerase reverse transcriptase:
components and regulation. Genes Dev 12 (8): pp. 107385. PMID 9553037.
http://www.genesdev.org/cgi/content/full/12/8/1073.
45. Volver arriba Wright W, Tesmer V, Huffman K, Levene S, Shay J (1997). Normal
human chromosomes have long G-rich telomeric overhangs at one end. Genes Dev 11
(21): pp. 28019. PMID 9353250. http://www.genesdev.org/cgi/content/full/11/21/2801.
46. Saltar a: a b Burge S, Parkinson G, Hazel P, Todd A, Neidle S (2006). Quadruplex DNA:
sequence, topology and structure. Nucleic Acids Res 34 (19): pp. 540215. PMID 17012276.
http://www.pubmedcentral.nih.gov/articlerender.fcgi?tool=pubmed&pubmedid=17012276.
47. Volver arriba Parkinson G, Lee M, Neidle S (2002). Crystal structure of parallel
quadruplexes from human telomeric DNA. Nature 417 (6891): pp. 87680. PMID 12050675.
48. Volver arriba Griffith J, Comeau L, Rosenfield S, Stansel R, Bianchi A, Moss H, de
Lange T (1999). Mammalian telomeres end in a large duplex loop. Cell 97 (4): pp. 503
14. PMID 10338214.
49. Volver arriba Created from PDB 1D65
50. Saltar a: a b Watson, J. D.; Baker, T. A.; Bell, S. P.; Gann, A.; Levine, M. et Losick, R
(2006). 6. Las estructuras del DNA y el RNA. Biologa Molecular del Gen (5 Ed.)
(Madrid: Mdica Panamericana). ISBN 84-7903-505-6.
51. Volver arriba Wing R, Drew H, Takano T, Broka C, Tanaka S, Itakura K, Dickerson R
(1980). Crystal structure analysis of a complete turn of B-DNA. Nature 287
(5784): pp. 7558. PMID 7432492.
52. Volver arriba Pabo C, Sauer R (1984). Protein-DNA recognition. Annu Rev Biochem
53: pp. 293321. PMID 6236744.
53. Volver arriba Httenhofer A, Schattner P, Polacek N (2005). Non-coding RNAs: hope or
hype?. Trends Genet 21 (5): pp. 28997. PMID 15851066.
54. Volver arriba Munroe S (2004). Diversity of antisense regulation in eukaryotes: multiple
mechanisms, emerging patterns. J Cell Biochem 93 (4): pp. 66471. PMID 15389973.
55. Volver arriba Makalowska I, Lin C, Makalowski W (2005). Overlapping genes in
vertebrate genomes. Comput Biol Chem 29 (1): pp. 112. PMID 15680581.
56. Volver arriba Johnson Z, Chisholm S (2004). Properties of overlapping genes are
conserved across microbial genomes. Genome Res 14 (11): pp. 226872. PMID 15520290.
57. Volver arriba Lamb R, Horvath C (1991). Diversity of coding strategies in influenza
viruses. Trends Genet 7 (8): pp. 2616. PMID 1771674.
58. Volver arriba Benham C, Mielke S (2005). DNA mechanics. Annu Rev Biomed Eng
7: pp. 2153. PMID 16004565.
59. Saltar a: a b Champoux J (2001). DNA topoisomerases: structure, function, and
mechanism. Annu Rev Biochem 70: pp. 369413. PMID 11395412.
60. Saltar a: a b Wang J (2002). Cellular roles of DNA topoisomerases: a molecular
perspective. Nat Rev Mol Cell Biol 3 (6): pp. 43040. PMID 12042765.
61. Volver arriba Klose R, Bird A (2006). Genomic DNA methylation: the mark and its
mediators. Trends Biochem Sci 31 (2): pp. 8997. doi:10.1016/j.tibs.2005.12.008. PMID 16403636.
62. Volver arriba Bird A (2002). DNA methylation patterns and epigenetic memory. Genes
Dev 16 (1): pp. 621. doi:10.1101/gad.947102. PMID 11782440.
63. Volver arriba Walsh C, Xu G (2006). Cytosine methylation and DNA repair. Curr Top
Microbiol Immunol 301: pp. 283315. doi:10.1007/3-540-31390-7_11. PMID 16570853.
64. Volver arriba Ratel D, Ravanat J, Berger F, Wion D (2006). N6-methyladenine: the
other methylated base of DNA. Bioessays 28 (3): pp. 30915. doi:10.1002/bies.20342. PMID
16479578.
65. Volver arriba Gommers-Ampt J, Van Leeuwen F, de Beer A, Vliegenthart J, Dizdaroglu
M, Kowalak J, Crain P, Borst P (1993). beta-D-glucosyl-hydroxymethyluracil: a novel
modified base present in the DNA of the parasitic protozoan T. brucei. Cell 75
(6): pp. 112936. doi:10.1016/0092-8674(93)90322-H. PMID 8261512.
66. Volver arriba Creado a partir de: PDB 1JDG
67. Volver arriba Douki T, Reynaud-Angelin A, Cadet J, Sage E (2003). Bipyrimidine
photoproducts rather than oxidative lesions are the main type of DNA damage involved in
the genotoxic effect of solar UVA radiation. Biochemistry 42 (30): pp. 92216.
doi:10.1021/bi034593c. PMID 12885257.,
68. Volver arriba Cadet J, Delatour T, Douki T, Gasparutto D, Pouget J, Ravanat J, Sauvaigo
S (1999). Hydroxyl radicals and DNA base damage. Mutat Res 424 (12): pp. 921. PMID
10064846.
69. Volver arriba Shigenaga M, Gimeno C, Ames B (1989). Urinary 8-hydroxy-2-
deoxyguanosine as a biological marker of in vivo oxidative DNA damage. Proc Natl Acad
Sci U S A 86 (24): pp. 9697701. doi:10.1073/pnas.86.24.9697. PMID 2602371.
http://www.pnas.org/cgi/reprint/86/24/9697.
70. Volver arriba Cathcart R, Schwiers E, Saul R, Ames B (1984). Thymine glycol and
thymidine glycol in human and rat urine: a possible assay for oxidative DNA damage.
Proc Natl Acad Sci U S A 81 (18): pp. 56337. doi:10.1073/pnas.81.18.5633. PMID 6592579.
http://www.pnas.org/cgi/reprint/81/18/5633.pdf.
71. Volver arriba Valerie K, Povirk L (2003). Regulation and mechanisms of mammalian
double-strand break repair. Oncogene 22 (37): pp. 5792812. doi:10.1038/sj.onc.1206679. PMID
12947387.
72. Volver arriba Ferguson L, Denny W (1991). The genetic toxicology of acridines. Mutat
Res 258 (2): pp. 12360. PMID 1881402.
73. Volver arriba Jeffrey A (1985). DNA modification by chemical carcinogens.
Pharmacol Ther 28 (2): pp. 23772. doi:10.1016/0163-7258(85)90013-0. PMID 3936066.
74. Volver arriba Stephens T, Bunde C, Fillmore B (2000). Mechanism of action in
thalidomide teratogenesis. Biochem Pharmacol 59 (12): pp. 148999. doi:10.1016/S0006-
2952(99)00388-3. PMID 10799645.
75. Volver arriba Braa M, Cacho M, Gradillas A, de Pascual-Teresa B, Ramos A (2001).
Intercalators as anticancer drugs. Curr Pharm Des 7 (17): pp. 174580.
doi:10.2174/1381612013397113. PMID 11562309.
76. Volver arriba Thanbichler M, Wang S, Shapiro L (2005). The bacterial nucleoid: a
highly organized and dynamic structure. J Cell Biochem 96 (3): pp. 50621.
doi:10.1002/jcb.20519. PMID 15988757.
77. Volver arriba Creado a partir de: PDB 1MSW
78. Volver arriba Wolfsberg T, McEntyre J, Schuler G (2001). Guide to the draft human
genome. Nature 409 (6822): pp. 8246. doi:10.1038/35057000. PMID 11236998.
79. Volver arriba The ENCODE Project Consortium (2007). Identification and analysis of
functional elements in 1% of the human genome by the ENCODE pilot project. Nature
447 (7146): pp. 799816. doi:10.1038/nature05874.
80. Volver arriba Gregory T (2005). The C-value enigma in plants and animals: a review of
parallels and an appeal for partnership. Ann Bot (Lond) 95 (1): pp. 13346.
doi:10.1093/aob/mci009. PMID 15596463. http://aob.oxfordjournals.org/cgi/content/full/95/1/133.
81. Volver arriba Yale University. Yale Researchers Find Junk DNA May Have Triggered
Key Evolutionary Changes in Human Thumb and Foot.
http://opa.yale.edu/news/article.aspx?id=5980.
82. Volver arriba Sandman K, Pereira S, Reeve J (1998). Diversity of prokaryotic
chromosomal proteins and the origin of the nucleosome. Cell Mol Life Sci 54
(12): pp. 135064. doi:10.1007/s000180050259. PMID 9893710.
83. Volver arriba Dame RT (2005). The role of nucleoid-associated proteins in the
organization and compaction of bacterial chromatin. Mol. Microbiol. 56 (4): pp. 85870.
doi:10.1111/j.1365-2958.2005.04598.x. PMID 15853876.
84. Volver arriba Luger K, Mder A, Richmond R, Sargent D, Richmond T (1997). Crystal
structure of the nucleosome core particle at 2.8 A resolution. Nature 389 (6648): pp. 251
60. doi:10.1038/38444. PMID 9305837.
85. Volver arriba Jenuwein T, Allis C (2001). Translating the histone code. Science 293
(5532): pp. 107480. doi:10.1126/science.1063127. PMID 11498575.
86. Volver arriba Ito T. Nucleosome assembly and remodelling. Curr Top Microbiol
Immunol 274: pp. 122. PMID 12596902.
87. Volver arriba Thomas J (2001). HMG1 and 2: architectural DNA-binding proteins.
Biochem Soc Trans 29 (Pt 4): pp. 395401. doi:10.1042/BST0290395. PMID 11497996.
88. Volver arriba Grosschedl R, Giese K, Pagel J (1994). HMG domain proteins:
architectural elements in the assembly of nucleoprotein structures. Trends Genet 10
(3): pp. 94100. doi:10.1016/0168-9525(94)90232-1. PMID 8178371.
89. Volver arriba Maeshima K, Laemmli UK. (2003). A Two-Step Scaffolding Model for
Mitotic Chromosome Assembly. Developmental Cell 4. 467-480. [1]
90. Volver arriba Tavormina PA, Cme MG, Hudson JR, Mo YY, Beck WT, Gorbsky GJ.
(2002). Rapid exchange of mammalian topoisomerase II alpha at kinetochores and
chromosome arms in mitosis. J Cell Biol. 158 (1). 23-9. [2]
91. Volver arriba Iftode C, Daniely Y, Borowiec J (1999). Replication protein A (RPA): the
eukaryotic SSB. Crit Rev Biochem Mol Biol 34 (3): pp. 14180. doi:10.1080/10409239991209255.
PMID 10473346.
92. Volver arriba Creado a partir de PDB 1LMB
93. Volver arriba Pabo C, Sauer R (1984). Protein-DNA recognition. Annu Rev Biochem
53: pp. 293321. doi:10.1146/annurev.bi.53.070184.001453. PMID 6236744.
94. Volver arriba Myers L, Kornberg R (2000). Mediator of transcriptional regulation.
Annu Rev Biochem 69: pp. 72949. doi:10.1146/annurev.biochem.69.1.729. PMID 10966474.
95. Volver arriba Spiegelman B, Heinrich R (2004). Biological control through regulated
transcriptional coactivators. Cell 119 (2): pp. 15767. doi:10.1016/j.cell.2004.09.037. PMID 15479634.
96. Volver arriba Li Z, Van Calcar S, Qu C, Cavenee W, Zhang M, Ren B (2003). A global
transcriptional regulatory role for c-Myc in Burkitt's lymphoma cells. Proc Natl Acad Sci
U S A 100 (14): pp. 81649. doi:10.1073/pnas.1332764100. PMID 12808131.
http://www.pubmedcentral.nih.gov/articlerender.fcgi?tool=pubmed&pubmedid=12808131.
97. Volver arriba Creado a partir de PDB 1RVA
98. Volver arriba Bickle T, Krger D (1993). Biology of DNA restriction. Microbiol Rev
57 (2): pp. 43450. PMID 8336674.
http://www.pubmedcentral.nih.gov/picrender.fcgi?artid=372918&blobtype=pdf.
99. Saltar a: a b Doherty A, Suh S (2000). Structural and mechanistic conservation in DNA
ligases.. Nucleic Acids Res 28 (21): pp. 40518. doi:10.1093/nar/28.21.4051. PMID 11058099.
http://www.pubmedcentral.nih.gov/articlerender.fcgi?tool=pubmed&pubmedid=11058099.
100. Volver arriba Schoeffler A, Berger J (2005). Recent advances in understanding
structure-function relationships in the type II topoisomerase mechanism. Biochem Soc
Trans 33 (Pt 6): pp. 146570. doi:10.1042/BST20051465. PMID 16246147.
101. Volver arriba Tuteja N, Tuteja R (2004). Unraveling DNA helicases. Motif,
structure, mechanism and function. Eur J Biochem 271 (10): pp. 184963. doi:10.1111/j.1432-
1033.2004.04094.x. PMID 15128295.
102. Volver arriba Joyce C, Steitz T (1995). Polymerase structures and function:
variations on a theme?. J Bacteriol 177 (22): pp. 63219. PMID 7592405.
http://www.pubmedcentral.nih.gov/picrender.fcgi?artid=177480&blobtype=pdf.
103. Volver arriba Hubscher U, Maga G, Spadari S (2002). Eukaryotic DNA
polymerases. Annu Rev Biochem 71: pp. 13363. doi:10.1146/annurev.biochem.71.090501.150041. PMID
12045093.
104. Volver arriba Johnson A, O'Donnell M (2005). Cellular DNA replicases:
components and dynamics at the replication fork. Annu Rev Biochem 74: pp. 283315.
doi:10.1146/annurev.biochem.73.011303.073859. PMID 15952889.
105. Volver arriba Tarrago-Litvak L, Androla M, Nevinsky G, Sarih-Cottin L, Litvak
S (1994). The reverse transcriptase of HIV-1: from enzymology to therapeutic
intervention. FASEB J 8 (8): pp. 497503. PMID 7514143.
http://www.fasebj.org/cgi/reprint/8/8/497.
106. Volver arriba Martinez E (2002). Multi-protein complexes in eukaryotic gene
transcription. Plant Mol Biol 50 (6): pp. 92547. doi:10.1023/A:1021258713850. PMID 12516863.
107. Volver arriba Creado a partir de PDB 1M6G
108. Volver arriba Cremer T, Cremer C (2001). Chromosome territories, nuclear
architecture and gene regulation in mammalian cells. Nat Rev Genet 2 (4): pp. 292301.
doi:10.1038/35066075. PMID 11283701.
109. Volver arriba Pl C, Papp B, Lercher M (2006). An integrated view of protein
evolution. Nat Rev Genet 7 (5): pp. 33748. doi:10.1038/nrg1838. PMID 16619049.
110. Volver arriba O'Driscoll M, Jeggo P (2006). The role of double-strand break
repair - insights from human genetics. Nat Rev Genet 7 (1): pp. 4554. doi:10.1038/nrg1746.
PMID 16369571.
111. Volver arriba Visp S, Defais M (1997). Mammalian Rad51 protein: a RecA
homologue with pleiotropic functions. Biochimie 79 (9-10): pp. 58792. doi:10.1016/S0300-
9084(97)82007-X. PMID 9466696.
112. Volver arriba Neale MJ, Keeney S (2006). Clarifying the mechanics of DNA
strand exchange in meiotic recombination. Nature 442 (7099): pp. 1538.
doi:10.1038/nature04885. PMID 16838012.
113. Volver arriba Dickman M, Ingleston S, Sedelnikova S, Rafferty J, Lloyd R,
Grasby J, Hornby D (2002). The RuvABC resolvasome. Eur J Biochem 269
(22): pp. 5492501. doi:10.1046/j.1432-1033.2002.03250.x. PMID 12423347.
114. Volver arriba Joyce G (2002). The antiquity of RNA-based evolution. Nature
418 (6894): pp. 21421. doi:10.1038/418214a. PMID 12110897.
115. Volver arriba Orgel L. Prebiotic chemistry and the origin of the RNA world.
Crit Rev Biochem Mol Biol 39 (2): pp. 99123. doi:10.1080/10409230490460765. PMID 15217990.
http://www.crbmb.com/cgi/reprint/39/2/99.pdf.
116. Volver arriba Davenport R (2001). Ribozymes. Making copies in the RNA
world. Science 292 (5520): pp. 1278. doi:10.1126/science.292.5520.1278a. PMID 11360970.
117. Volver arriba Szathmry E (1992). What is the optimum size for the genetic
alphabet?. Proc Natl Acad Sci U S A 89 (7): pp. 26148. doi:10.1073/pnas.89.7.2614. PMID 1372984.
http://www.pnas.org/cgi/reprint/89/7/2614.pdf.
118. Volver arriba Lindahl T (1993). Instability and decay of the primary structure of
DNA. Nature 362 (6422): pp. 70915. doi:10.1038/362709a0. PMID 8469282.
119. Volver arriba Vreeland R, Rosenzweig W, Powers D (2000). Isolation of a 250
million-year-old halotolerant bacterium from a primary salt crystal. Nature 407
(6806): pp. 897900. doi:10.1038/35038060. PMID 11057666.
120. Volver arriba Hebsgaard M, Phillips M, Willerslev E (2005). Geologically
ancient DNA: fact or artefact?. Trends Microbiol 13 (5): pp. 21220.
doi:10.1016/j.tim.2005.03.010. PMID 15866038.
121. Volver arriba Nickle D, Learn G, Rain M, Mullins J, Mittler J (2002). Curiously
modern DNA for a "250 million-year-old" bacterium. J Mol Evol 54 (1): pp. 1347.
doi:10.1007/s00239-001-0025-x. PMID 11734907.
122. Volver arriba Birnbaum D, Coulier F, Pbusque MJ, Pontarotti P. (2000).
"Paleogenomics": looking in the past to the future. J Exp Zool. 288 ((1):). 21-2. [3]
123. Volver arriba Blanchette M, Green ED, Miller W, Haussler D. (2004).
Reconstructing large regions of an ancestral mammalian genome in silico. Genome Res.
14 ((12):). 2412-23. Erratum in: Genome Res. 2005 Mar;15(3):451.[4]
124. Volver arriba Gaucher EA, Thomson JM, Burgan MF, Benner SA. (2003).
Inferring the palaeoenvironment of ancient bacteria on the basis of resurrected protein.
Nature 425 ((6955):). 285-8. [5]
125. Volver arriba Thornton JW. (2004). Resurrecting ancient genes: experimental
analysis of extinct molecules. Nat Rev Genet. 5 ((5):). 366-75. [6]
126. Volver arriba Benner SA, Caraco MD, Thomson JM, Gaucher EA. (2002).
Planetary biology--paleontological, geological, and molecular histories of life. Science
296 ((5569):). 864-8. [7]
127. Volver arriba Brenner SA, Carrigan MA, Ricardo A, Frye F. (2006). Setting the
stage: the history, chemistry and geobiology behind RNA. The RNA World, 3rd Ed. Cold
Spring Harbor Laboratory Press. ISBN 0-87969-739-3.[8]
128. Saltar a: a b c Griffiths, J .F. A. et al. (2002). Gentica. McGraw-Hill
Interamericana. ISBN 84-486-0368-0.
129. Saltar a: a b Watson, J, D.; Baker, T. A.; Bell, S. P.; Gann, A.; Levine, M. et
Losick, R (2004). Molecular Biology of the Gene (Fifth edition edicin). San Francisco:
Benjamin Cummings. ISBN 0-321-22368-3.
130. Volver arriba Sanger F, Coulson AR. A rapid method for determining sequences
in DNA by primed synthesis with DNA polymerase. J Mol Biol. 1975 Mayo 25;94(3):441
448
131. Volver arriba Sanger F, Nicklen s, y Coulson AR, DNA sequencing with chain-
terminating inhibitors, Proc Natl Acad Sci U S A. 1977 Diciembre; 74(12): 54635467
132. Volver arriba Bartlett & Stirling (2003)A Short History of the Polymerase
Chain Reaction. In: Methods Mol Biol. 226:3-6
133. Volver arriba Southern, E.M. (1975): "Detection of specific sequences among
DNA fragments separated by gel electrophoresis", J Mol Biol., 98:503-517. PMID 1195397
134. Volver arriba Alwine JC, Kemp DJ, Stark GR (1977). Method for detection of
specific RNAs in agarose gels by transfer to diazobenzyloxymethyl-paper and hybridization
with DNA probes. Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 74 (12): pp. 5350-4. doi:10.1073/pnas.74.12.5350.
PMID 414220.
135. Volver arriba W. Neal Burnette (abril 1981). 'Western blotting': electrophoretic
transfer of proteins from sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gels to unmodified
nitrocellulose and radiographic detection with antibody and radioiodinated protein A.
Analytical Biochemistry (United States: Academic Press) 112 (2): pp. 195-203. doi:0.1016/0003-
2697(81)90281-5. ISSN 0003-2697. PMID 6266278.
http://www.sciencedirect.com/science?_ob=ArticleURL&_udi=B6W9V-4DYTNJ8-
1FB&_user=10&_rdoc=1&_fmt=&_orig=search&_sort=d&view=c&_acct=C000050221&
_version=1&_urlVersion=0&_userid=10&md5=f45e0364aabbcacb8f4f75540e622fd0.
136. Volver arriba Miller WL. (1979). Use of recombinant DNA technology for the
production of polypeptides. Adv Exp Med Biol. 118: pp. 153-74. [9]
137. Volver arriba Leader B, Baca QJ, Golan DE. (2008). Protein therapeutics: a
summary and pharmacological classification. Nat Rev Drug Discov. 7 ((1)). 21-39. [10]
138. Volver arriba Dingermann T. (2008). Recombinant therapeutic proteins:
production platforms and challenges. Biotechnol J. 3 ((1)). 90-7. [11]
139. Volver arriba Voigt K, Izsvk Z, Ivics Z. (2008). Targeted gene insertion for
molecular medicine. J Mol Med. Jul 8. (Epub ahead of print). [12]
140. Volver arriba Houdebine L (2007). Transgenic animal models in biomedical
research. Methods Mol Biol 360: pp. 163202. PMID 17172731. [13]
141. Volver arriba Soler E, Thpot D, Rival-Gervier S, Jolivet G, Houdebine LM.
(2006 publicacin = Reprod Nutr Dev.). Preparation of recombinant proteins in milk to
improve human and animal health. 46. 579-88. [14]
142. Volver arriba Chvez A, Muoz de Chvez M. (2003). Nutrigenomics in public
health nutrition: short-term perspectives. Eur J Clin Nutr. 57 (Suppl 1). S97-100. [15]
143. Volver arriba Vasil IK. (2007). Molecular genetic improvement of cereals:
transgenic wheat (Triticum aestivum L.). Plant Cell Rep. 26 ((8)). 1133-54. [16]
144. Volver arriba Daniell H, Dhingra A (2002). Multigene engineering: dawn of an
exciting new era in biotechnology. Curr Opin Biotechnol 13 (2): pp. 13641.
doi:10.1016/S0958-1669(02)00297-5. PMID 11950565.
145. Volver arriba Job D (2002). Plant biotechnology in agriculture. Biochimie 84
(11): pp. 110510. doi:10.1016/S0300-9084(02)00013-5. PMID 12595138.
146. Volver arriba Collins A, Morton N (1994). Likelihood ratios for DNA
identification. Proc Natl Acad Sci USA 91 (13): pp. 600711. doi:10.1073/pnas.91.13.6007. PMID
8016106. http://www.pnas.org/cgi/reprint/91/13/6007.pdf.
147. Volver arriba Weir B, Triggs C, Starling L, Stowell L, Walsh K, Buckleton J
(1997). Interpreting DNA mixtures. J Forensic Sci 42 (2): pp. 21322. PMID 9068179.
148. Volver arriba Jeffreys A, Wilson V, Thein S (1985). Individual-specific
'fingerprints' of human DNA. Nature 316 (6023): pp. 769. doi:10.1038/316076a0. PMID 2989708.
149. Volver arriba Colin Pitchfork first murder conviction on DNA evidence also
clears the prime suspect Forensic Science Service Accessed 23 Dec 2006
150. Volver arriba DNA Identification in Mass Fatality Incidents. National Institute
of Justice (septiembre 2006).
151. Volver arriba Bhattacharya, Shaoni. "Killer convicted thanks to relative's DNA".
newscientist.com (20 abril 2004). Consultado 22 dic 2006
152. Volver arriba Baldi, Pierre. Brunak, Soren (2001). Bioinformatics: The Machine
Learning Approach. MIT Press. ISBN 978-0-262-02506-5.
153. Volver arriba Gusfield, Dan. Algorithms on Strings, Trees, and Sequences:
Computer Science and Computational Biology. Cambridge University Press, 15 January
1997. ISBN 978-0-521-58519-4.
154. Volver arriba Sjlander K (2004). Phylogenomic inference of protein molecular
function: advances and challenges. Bioinformatics 20 (2): pp. 1709.
doi:10.1093/bioinformatics/bth021. PMID 14734307.
http://bioinformatics.oxfordjournals.org/cgi/reprint/20/2/170.
155. Volver arriba Mount, DM (2004). Bioinformatics: Sequence and Genome
Analysis (2 edicin). Cold Spring Harbor, NY: Cold Spring Harbor Laboratory Press.
ISBN 0879697121.
156. Volver arriba Yin P, Hariadi RF, Sahu S, Choi HMT, Park SH, LaBean T, Reif
JH. (2008). Programming DNA Tube Circumferences. Science 321 ((5890)). 824 - 826. [17]
157. Volver arriba Modelos de ADN en papiroflexia realizados en el Sanger Center
(UK) [18]
158. Volver arriba Wray G (2002). Dating branches on the tree of life using DNA.
Genome Biol 3 (1): pp. REVIEWS0001. doi:10.1046/j.1525-142X.1999.99010.x. PMID 11806830.
http://www.pubmedcentral.nih.gov/articlerender.fcgi?tool=pubmed&pubmedid=11806830.
159. Volver arriba Lost Tribes of Israel, NOVA, PBS airdate: 22 February 2000.
Transcript available from PBS.org, (ltimo acceso el 4 marzo de 2006)
160. Volver arriba Kleiman, Yaakov. "The Cohanim/DNA Connection: The
fascinating story of how DNA studies confirm an ancient biblical tradition". aish.com (13
enero 2000). Consultado el 4 de marzo de 2006.
Bibliografa
Clayton, Julie. (Ed.). 50 Years of DNA, Palgrave MacMillan Press, 2003. ISBN 978-
1-4039-1479-8.
Judson, Horace Freeland. The Eighth Day of Creation: Makers of the Revolution in
Biology, Cold Spring Harbor Laboratory Press, 1996. ISBN 978-0-87969-478-4.
Olby, Robert. The Path to The Double Helix: Discovery of DNA, first published in
October 1974 by MacMillan, with foreword by Francis Crick; ISBN 978-0-486-
68117-7; the definitive DNA textbook, revised in 1994, with a 9 page postscript.
Ridley, Matt. Francis Crick: Discoverer of the Genetic Code (Eminent Lives)
HarperCollins Publishers; 192 pp, ISBN 978-0-06-082333-7 2006.
Rose, Steven. The Chemistry of Life, Penguin, ISBN 978-0-14-027273-4.
Watson, James D. and Francis H.C. Crick. A structure for Deoxyribose Nucleic
Acid (PDF). Nature 171, 737738 p. 25 de abril de 1953.
Watson, James D. DNA: The Secret of Life ISBN 978-0-375-41546-3.
Watson, James D. The Double Helix: A Personal Account of the Discovery of the
Structure of DNA (Norton Critical Editions). ISBN 978-0-393-95075-5.
Watson, James D. "Avoid boring people and other lessons from a life in science"
(2007) New York: Random House. ISBN 978-0-375-41284-4.
Calladine, Chris R.; Drew, Horace R.; Luisi, Ben F. and Travers, Andrew A.
Understanding DNA, Elsevier Academic Press, 2003. ISBN 978-0-12-155089-9