Resumo
Os biomarcadores e sua aplicao
na avaliao da exposio aos
agentes qumicos ambientais
Biomarkers for evaluating exposure
to chemical agents present in the
environment
Leiliane Coelho Andr Amorim
Departamento de Anlises Clnicas e Toxicolgicas
Faculdade de Farmcia
Universidade Federal de Minas Gerais
Av. Olegrio Maciel, 2360
CEP 30180-112 - Bairro de Lourdes
Belo Horizonte, MG Brasil
leiliane@dedalus.lcc.ufmg.br
Rev. Bras. Epidemiol.
Vol. 6, N 2, 2003
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A Sade Ambiental tem como um de seus
objetivos, a preveno dos danos sade cau-
sados por contaminantes qumicos presen-
tes no meio ambiente, fazendo com que os
nveis desta exposio sejam mantidos em
valores que no constituam um risco inacei-
tvel. Para isso, tornam-se necessrias a iden-
tificao e quantificao deste risco atravs
da avaliao biolgica da exposio humana.
Este um artigo de reviso que busca
apresentar conceitos e concepes que
abrangem o uso dos parmetros biolgicos
com a finalidade de avaliar a exposio s
substncias qumicas e estimar o risco das
populaes expostas. Os biomarcadores
podem ser usados para vrios propsitos,
dependendo da finalidade do estudo e do
tipo da exposio e podem ser classificados
em trs tipos: de exposio, de efeito e de
suscetibilidade, os quais so instrumentos
que possibilitam identificar a substncia t-
xica ou uma condio adversa antes que se-
jam evidenciados danos sade. Novos
parmetros so apresentados, como os
biomarcadores de neurotoxicidade (ou
marcadores substitutos), que tm como de-
safio detectar aes precoces de agente qu-
micos que agem no sistema nervoso central
atravs da identificao de indicadores pre-
sentes no sistema perifrico, que so equi-
valentes aos parmetros presentes no teci-
do nervoso.
Palavras-chave: Exposio s substncias
qumicas. Biomarcadores de dose interna.
Biomarcadores de efeito. Biomarcadores de
suscetibilidade. Biomarcadores de neuroto-
xicidade.
Abstract
One of goals of environmental health is
to prevent disease and injuries caused by
chemical pollutants present in the environ-
ment. The main objective is to keep chemi-
cal exposure to an acceptable level that does
not imply in risk. In order to accomplish that,
it is necessary to identify and quantify chemi-
cal risk through biological assessment of hu-
man exposure.
In this review, we present concepts and
principles covering the utilization of biologi-
cal indicators in order to evaluate exposure
to chemicals and risk to human health.
The use of biomarkers with different pur-
poses may be classified in to three types: of
exposure (internal dose), of effect and of sus-
ceptibility, which are means for identifying
toxic substances or hazardous conditions
before demage to health has occurred. New
parameters are presented, such as biomar-
kers of neurotoxicity (or surrogate indica-
tors), whose purpose is to detect early ac-
tion of chemicals on the nervous system,
through the determination of indicators
present in peripheral body fluids, which are
equivalent parameters of the nervous tissue.
Key Words: Chemical exposure. Biomarkers
of internal dose. Biomarkers of effect.
Biomarkers of susceptibility. Surrogate indi-
cators.
Os biomarcadores e sua aplicao na avaliao da exposio aos agentes qumicos ambientais
Introduo
Diante do processo de modernizao e
suas conseqncias, incluindo as desigual-
dades sociais, poluio e degradao am-
biental; a crescente concentrao de poder
econmico e poltico; a industrializao ace-
lerada e o uso de novos mtodos tecnolgicos
na agricultura, a espcie humana est sujeita
a uma srie de riscos decorrentes dos fato-
res ambientais envolvidos, tais como: fato-
res psicolgicos, fatores acidentais, fatores
biolgicos, fatores fsicos e fatores qumi-
cos.
No que se refere aos fatores qumicos,
so inmeros os agentes potencialmente t-
xicos, aos quais a populao est exposta
cotidianamente, atravs do ar que respira,
da gua que bebe e do alimento que ingere,
representando as principais fontes de expo-
sio. A avaliao da exposio aos agentes
qumicos constitui um importante aspecto
para a sade pblica, tendo em vista a possi-
bilidade de se prevenir ou minimizar a inci-
dncia de mortes ou doenas decorrentes
da interao das substncias qumicas com
o organismo humano.
A avaliao da exposio, associada aos
conhecimentos relativos aos efeitos na sa-
de e os limites considerados seguros, permi-
te estabelecer as prioridades e as formas de
interveno efetiva para proteger uma po-
pulao dos riscos qumicos. Os estudos dos
efeitos das substncias qumicas sobre a sa-
de possibilita avaliar o risco da populao
exposta e constitui o primeiro passo na fixa-
o de normas ambientais para um contami-
nante qumico presente num meio. E para
isso importante conhecer a solidez e as
limitaes dos dados toxicolgicos, assim
como as informaes disponveis proveni-
entes destes estudos1.
Alguns tipos de informaes sobre os
efeitos txicos de agentes qumicos s po-
dem ser obtidos mediante observaes di-
retas no homem. Estes estudos, cuidadosa-
mente controlados, so realizados com pe-
quenas doses consideradas incuas para al-
guns tipos de efeitos. Ou so realizados sim-
plesmente por observaes clnicas em in-
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 divduos, em geral expostos no trabalho s
substncias qumicas2.
No entanto, as exposies controladas
de seres humanos s substncias perigosas
ou potencialmente perigosas vem-se
restringidas por consideraes ticas e, por
isso, com grande freqncia se recorre a es-
tudos em animais para predizer a reao
humana aos efeitos destas substncias. O
grau de confiabilidade com o qual se pode
estimar os riscos sade humana, tendo
como base os testes de toxicidade realiza-
dos em animais, depende da qualidade dos
dados, assim como da quantidade e dos ti-
pos de testes realizados2.
Alm destes estudos citados acima, os
estudos epidemiolgicos sobre as popula-
es humanas podem estabelecer os riscos
associados a um determinado agente qu-
mico. No entanto, ao estudar as substncias
qumicas presentes no ambiente, a fragilida-
de principal destes estudos se deve a eles
serem relativamente pouco eficazes para
determinar se os efeitos observados na sa-
de so o resultado direto da exposio a uma
substncia qumica em particular. Pelo fato
de de ser necessrio ocorrer uma exposio
a um agente qumico durante um perodo
longo para que possam ser observadas dife-
renas perceptveis em uma populao, a
Epidemiologia no deve ser a base das deci-
ses regulamentares2. Entretanto, a Epide-
miologia Ambiental procura estabelecer as-
sociaes entre a exposio aos agentes qu-
micos e os efeitos adversos na sade,
presumivelmente causados por esta exposi-
o1, desafiando os limites estabelecidos
frente aos novos conhecimentos e possibili-
tando a proteo da sade de populaes
expostas atravs do controle e da vigilncia.
Avaliao da exposio aos
contaminadores qumicos
A deteco precoce de uma exposio
perigosa pode diminuir significativamente a
ocorrncia de efeitos adversos na sade. As
informaes provenientes da monitorizao
da exposio ambiental ou ocupacional pos-
sibilitam a implantao de medidas de pre-
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160 Os biomarcadores e sua aplicao na avaliao da exposio aos agentes qumicos ambientais
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veno e controle apropriadas, sendo ne-
cessrios: a definio dos nveis permissveis
de exposio, que, de acordo com os co-
nhecimentos atuais, so estabelecidos para
no causar efeitos adversos decorrentes da
exposio qumica; e a avaliao regular dos
possveis riscos sade associados exposi-
o por comparao com estes limites per-
missveis3.
A monitorizao da exposio um pro-
cedimento que consiste em uma rotina de
avaliao e interpretao de parmetros bi-
olgicos e/ou ambientais, com a finalidade
de detectar os possveis riscos sade. A
exposio pode ser avaliada por medida da
concentrao do agente qumico em amos-
tras ambientais, como o ar (monitorizao
ambiental), ou atravs da medida de par-
metros biolgicos (monitorizao biolgica),
denominados indicadores biolgicos ou
biomarcadores. A Monitorizao Biolgica
da exposio aos agentes qumicos, propri-
amente dita, significa a medida da substn-
cia ou seus metablitos em vrios meios bi-
olgicos, como sangue, urina, ar exalado e
outros (por exemplo, mercrio na urina).
Algumas vezes, o conceito de Monitorizao
Biolgica estendido para incluir tambm a
deteco precoce de efeitos no adversos
reversveis (monitorizao biolgica de efei-
to) (por exemplo, cido delta aminolevu-
lnico na urina). A deteco de um efeito
adverso (por exemplo, proteinria aumen-
tada) indica que a exposio ou tem sido
excessiva, e alm disso tal medida mais
apropriada para ser includa num programa
de deteco precoce de prejuzo sade (vi-
gilncia da sade), devido exposio a uma
determinada substncia qumica, e no para
fins de preveno4,5.
A Avaliao Biolgica da exposio s
substncias qumicas s possvel quando
estiverem disponveis suficientes informa-
es toxicolgicas referentes ao mecanismo
de ao e/ou toxicocintica dos agentes
qumicos aos quais os indivduos esto ex-
postos. Quando a Monitorizao Biolgica
est baseada na determinao da substncia
qumica ou do seu metablito no meio bio-
lgico, torna-se essencial o conhecimento
de como a substncia absorvida pelas dife-
rentes vias; posteriormente, de como dis-
tribuda para os diferentes compartimentos
do organismo; de como biotransformada;
e, finalmente, de como eliminada. Alm de
ser necessrio saber tambm se a substn-
cia se acumula ou no no organismo3,6.
Da mesma forma, se a Monitorizao
Biolgica estiver baseada na medida de uma
alterao biolgica do organismo, causada
pelo agente qumico, necessrio conhecer
o processo da toxicodinmica, ou seja, pre-
ciso conhecer o mecanismo de ao da subs-
tncia qumica para identificar quais so os
efeitos no adversos decorrentes daquela
ao3,6. Isso se faz necessrio porque s a
identificao e a medida de um efeito pre-
coce, no adverso, podem ser usadas para
fins de preveno.
Indicadores biolgicos (ou
biomarcadores)
Vrios so os parmetros biolgicos que
podem estar alterados como conseqncia
da interao entre o agente qumico e o or-
ganismo; entretanto, a determinao quan-
titativa destes parmetros usados como In-
dicadores Biolgicos ou Biomarcadores, s
possvel se existir correlao com a inten-
sidade da exposio e/ou o efeito biolgico
da substncia. Desta forma, o Biomarcador
compreende toda substncia ou seu produ-
to de biotransformao, assim como qual-
quer alterao bioqumica precoce, cuja de-
terminao nos fluidos biolgicos, tecidos
ou ar exalado, avalie a intensidade da expo-
sio e o risco sade4.
Seleo e validao dos biomarcadores
O processo de seleo e validao dos
indicadores biolgicos requer cuidado em
relao especificidade e sensibilidade, as-
sim como a medida da exposio e a mani-
festao dos efeitos observados. A validao
um processo utilizado para estabelecer a
relao quantitativa e qualitativa do biomar-
cador com a exposio, em funo da subs-
tncia qumica e do objetivo selecionado7.
Os biomarcadores e sua aplicao na avaliao da exposio aos agentes qumicos ambientais
Para que uma substncia qumica, seu
metablito ou uma alterao biolgica se-
jam validados e/ou propostos como bio-
marcador, desejvel que o mesmo apre-
sente as seguintes caractersticas:7
A quantificao do indicador deve:
- refletir a interao (qualitativa ou
quantitativa) do sistema biolgico
com a substncia qumica;
- ter conhecida e apropriada sensibili-
dade e especificidade para a inte-
rao;
- ser reprodutvel qualitativamente e
quantitativamente.
Estar contido em um meio biolgico
acessvel de anlise, considerando a ne-
cessidade de manuteno da integrida-
de da amostra entre a coleta e o procedi-
mento analtico, e de preferncia no ser
invasivo.
A medio analtica tem que apresentar
exatido e preciso adequadas.
Conhecer os valores normais do indica-
dor em populaes no expostas ao agen-
te qumico de interesse, assim como as
variaes intra e interindividuais.
Aplicao dos Biomarcadores
Os Biomarcadores podem ser usados
para vrios propsitos, dependendo da fi-
nalidade do estudo e do tipo da exposio
qumica. Podem ter como objetivos avaliar
a exposio (quantidade absorvida ou dose
interna), avaliar os efeitos das substncias
qumicas e avaliar a suscetibilidade indivi-
dual. Alm disso, podem ser utilizados inde-
pendentemente da fonte de exposio, seja
atravs da dieta, do meio ambiente geral ou
ocupacional. A utilizao destes Biomar-
cadores pode ter como finalidade elucidar a
relao causa-efeito e dose-efeito na avalia-
o de risco sade; para fins de diagnsti-
co clnico; e para fins de monitorizao bio-
lgica, realizada de maneira sistemtica e
peridica7.
O uso dos Biomarcadores na avaliao de
risco fornece uma ligao crtica entre a ex-
posio substncia qumica, dose interna e
prejuzo sade, e eles so valiosos na avalia-
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 o de risco. Contudo, existe uma necessida-
de de identificar e validar para cada sistema
orgnico estes parmetros caractersticos que
so indicativos de induo de disfuno or-
gnica, alterao clnica e toxicidade patol-
gica, alm de estabelecer a especificidade e
sensibilidade de cada biomarcador e seu m-
todo para determinao7.
Os Biomarcadores podem ser utilizados
no diagnstico clnico para7:
confirmar diagnstico de intoxicao
agudo ou crnico;
avaliao da efetividade de tratamento;
avaliar o prognstico de casos individuais.
Os biomarcadores podem ser usados
ainda na atividade de monitorizao para
confirmar a exposio individual ou de uma
populao a uma determinada substncia
qumica e avaliar o risco, quando compara-
dos com uma referncia apropriada. Saben-
do-se que a Monitorizao Ambiental rea-
lizada para reduzir as exposies ocupa-
cionais e comprovar se as medidas preven-
tivas adotadas no ambiente so satisfatrias,
a Monitorizao Biolgica tem como meta
principal verificar se existe segurana en-
quanto ocorre a presena do agente qumi-
co no ambiente de trabalho, em exposies
presentes, e inclusive passadas, para evitar a
ocorrncia de efeitos adversos sade7.
A realizao da Monitorizao Biolgica
da exposio ocupacional permite avaliar a
exposio global ao agente txico, alm de
considerar os aspectos individuais de expo-
sio aumentada provenientes, por exem-
plo, de esforo fsico; e as suscetibilidades
biolgicas3.
Classificao dos Biomarcadores
Independente da finalidade e aplicao
dos Biomarcadores, eles podem ser classifi-
cados em 3 tipos, a saber:
Os Biomarcadores de Exposio podem
ser usados para confirmar e avaliar a ex-
posio individual ou de um grupo, para
uma substncia em particular, estabele-
cendo uma ligao entre a exposio ex-
terna e a quantificao da exposio in-
terna.
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Os Biomarcadores de Efeito podem ser
usados para documentar as alteraes
pr-clnicas ou efeitos adversos sade
decorrentes da exposio e absoro da
substncia qumica. Dessa forma, a liga-
o dos biomarcadores entre exposio
e efeitos contribui para a definio da
relao dose-resposta.
Os Biomarcadores de Suscetibilidade
permitem elucidar o grau de resposta da
exposio provocada nos indivduos6,7.
Biomarcadores de exposio (ou
dose interna)
O indicador biolgico de exposio esti-
ma a dose interna, atravs da determinao
da substncia qumica ou de seu produto de
biotransformao em fludos biolgicos,
como sangue, urina, ar exalado e outros,
possibilitando quantificar a substncia no
organismo, quando a toxicocintica bem
conhecida8.
Os biomarcadores de exposio refletem
a distribuio da substncia qumica ou seu
metablito atravs do organismo, e por isso
so identificados como dose interna. Con-
seqentemente, a dose externa se refere
concentrao do agente qumico presente
no ambiente em contato com o organismo.
Teoricamente, a distribuio da substncia
no organismo pode ser traada atravs de
vrios nveis biolgicos, como tecidos e c-
lulas, at seu alvo definitivo7, como mostra a
Figura 1.
Da quantidade total absorvida da SQ,
somente uma poro chegar at o tecido
alvo. Uma poro alcanar o stio crtico
(stio alvo) na macromolcula, com somen-
te uma frao da ltima quantidade agindo
como a dose biologicamente ativa. A esco-
lha dos Biomarcadores para cada uma des-
tas formas de dose interna seria til para
avaliao do risco9. Na figura, o afunilamento
da base, a diminuio da quantidade total
absorvida para cada nvel, a maneira como
ocorre a distribuio e o metabolismo, de-
monstram a diminuio da concentrao da
dose interna que alcana o tecido alvo (clu-
la ou stio crtico)7.
Figura 1 - Biomarcadores de dose interna das substncias qumicas, para as quais o principal
mecanismo de interao ocorre atravs da interao molecular7
Figure 1 - Biomarkers of internal dose of chemical substances, whose major interaction mechanism is
molecular interaction7

Dependendo da substncia qumica e do principal stio de depsito (tecido adiposo).

parmetro biolgico analisado, o termo
dose interna pode abranger diferentes con-
cepes. O biomarcador de dose interna
pode refletir a quantidade absorvida imedi-
atamente antes da amostragem, como, por
exemplo, a concentrao de um solvente no
ar alveolar ou no sangue durante a jornada
de trabalho de indivduos expostos; pode
refletir a quantidade absorvida no dia ante-
rior, como, por exemplo, a concentrao do
solvente no ar alveolar ou no sangue
coletados 16 horas aps o final da exposi-
o; ou refletir a quantidade absorvida du-
rante meses de exposio, quando a subs-
tncia tem um tempo de meia vida longo,
como, por exemplo, a concentrao de al-
guns metais no sangue4,8.
A dose interna pode significar tambm a
quantidade da substncia qumica armaze-
nada em um ou vrios compartimentos do
organismo ou distribuda em todo o orga-
nismo. Isto geralmente se aplica aos agentes
txicos cumulativos4,8. Por exemplo, a con-
centrao dos inseticidas organoclorados no
sangue reflete a quantidade acumulada no
Por ltimo, como uma forma ideal, a
dose interna pode representar a dose ver-
dadeira, ou seja, a quantidade da substn-
cia ligada ao stio alvo ou biodisponvel para
interagir. Estes indicadores podem ser vi-
veis quando o rgo crtico for acessvel (por
exemplo, a hemoglobina, no caso da exposi-
o ao monxido de carbono) ou quando o
agente txico interage com constituintes do
sangue de forma similar aos constituintes do
rgo crtico (por exemplo, alquilao da
hemoglobina, refletindo a ligao com DNA
no tecido alvo). Neste caso, a dose interna
pode ser o produto da interao entre um
xenobitico e alguma molcula crtica ou
clula, como a medio dos aductos
covalentes formados com a substncia qu-
mica e que podem ser mensurados num
compartimento dentro do organismo4,8. No
entanto, a maioria dos indicadores biolgi-
cos de dose interna refletem apenas a expo-
sio, ou seja, a quantidade absorvida do
toxicante no organismo.
Para escolha do indicador biolgico de
dose interna mais adequado a uma situao

Os biomarcadores e sua aplicao na avaliao da exposio aos agentes qumicos ambientais

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 especfica de exposio, necessrio o co-
nhecimento do comportamento cintico do
agente qumico presente no ambiente. Alm
disso, necessrio o conhecimento do tem-
po de permanncia da substncia qumica
no organismo para a definio do momento
ideal para a coleta. Alguns biomarcadores
de dose interna, como benzeno no sangue,
cido hiprico na urina, 2,5 hexanodiona na
urina, refletem apenas a exposio recente
ao benzeno, tolueno e n-hexano, respecti-
vamente. Enquanto outros, como chumbo
e mercrio, aps a quelao, refletem a ex-
posio mdia dos ltimos meses, e o cdmio
na urina reflete a exposio dos ltimos
anos4,8.
Biomarcadores de efeito
O Biomarcador de Efeito um parmetro
biolgico, medido no organismo, o qual re-
flete a interao da substncia qumica com
os receptores biolgicos. Muitos biomar-
cadores de efeito so usados na prtica diria
para confirmar um diagnstico clnico. Mas,
para o propsito da preveno, um biomar-
cador de efeito considerado ideal, aquele
que mede uma alterao biolgica em um
estgio ainda reversvel (ou precoce), quan-
do ainda no representa agravo sade.
Geralmente, as alteraes bioqumicas
so consideradas como uma fonte potencial
de indicadores biolgicos de efeito. Se con-
siderarmos que estas alteraes precedem
um dano estrutural, a deteco destas alte-
raes biolgicas permite a identificao
precoce de uma exposio excessiva e inter-
veno para prevenir um efeito irreversvel,
ou seja, a doena. Esta estratgia baseada
na identificao das alteraes bioqumicas
precoces e reversveis que so indicadores
sensveis e especficos de uma resposta do
organismo exposio. A extenso em que
estes biomarcadores vo predizer uma res-
posta mais avanada (como doena ou risco
de doena) requer necessariamente mais
pesquisas e evidncias atravs de estudos
epidemiolgicos6.
Em geral, um marcador precoce no pro-
gresso de uma resposta do organismo tem
uma associao menor com o dano; no en-
tanto mais til a sua aplicao com o pro-
psito de prevenir a doena (Figura 2). Para
a ao preventiva de uma exposio exces-
siva (ou que provoca danos sade), o efei-
to biolgico medido, que um biomarcador,
tem que ser, necessariamente, um efeito no
adverso4.
A distino entre um efeito biolgico
adverso e um efeito biolgico no adverso
nem sempre clara e algumas vezes torna-
se arbitrria devido dificuldade de se avali-
ar o alcance do efeito na sade. Entretanto,
considera-se a ocorrncia de efeitos no
adversos quando7:
ao serem produzidos numa exposio
prolongada, no resultem em transtor-
nos da capacidade funcional nem da ca-
pacidade do organismo para compensar
nova sobrecarga;
so reversveis e no diminuem percep-
tivelmente e capacidade do organismo

Figura 2 - Diagrama esquemtico dos indicadores biolgicos, indicando uma resposta

progressiva do organismo uma exposio um agente qumico (A.Q.) e os fatores de
suscetibilidade que podem influenciar as etapas desta progresso6
Figure 2 - Diagram of biological indicators, showing a progressive response of the body to exposure to a
chemical agents (CA) and susceptibility factors that may affect the stages of prograssion6

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164 Os biomarcadores e sua aplicao na avaliao da exposio aos agentes qumicos ambientais
Amorim, L.C.A.
 de manter sua homeostase orgnica;
no aumentam a suscetibilidade do or-
ganismo aos efeitos indesejveis e a ou-
tros fatores de risco ambiental.
Dentre os indicadores biolgicos de efei-
to tem-se a carboxiemoglobina, a atividade
da enzima colinesterase eritrocitria, nveis
de enzimas e intermedirios da biossntese
do HEME, de protenas na urina etc. Cada
um apresenta caractersticas diferentes se-
gundo a sua especificidade. Por exemplo4:
Carboxiemoglobina (COHb): a COHb,
apesar de ser um biomarcador de efeito,
apresenta uma correlao muito signifi-
cativa com a exposio ambiental ao
monxido de carbono, e reflete a dose
interna deste toxicante ligado ao tecido
alvo;
Colinesterases: a determinao da ativi-
dade das enzimas colinesterase eritro-
citria e colinesterase plasmtica em in-
divduos expostos aos inseticidas organo-
fosforados e/ou carbamatos utilizada
tambm para o diagnstico e o tratamen-
to das intoxicaes. Entretanto, no apre-
senta correlao muito significativa em
exposies ambientais e/ou ocupacionais
leves ou moderadas a estes inseticidas.
Ainda assim, considerado o indicador
biolgico de escolha.
Enzima cido delta amino-levulnico
(ALA-D) nos eritrcitos: esta enzima
altamente sensvel inibio pelo chum-
bo. Em uma concentrao de chumbo
na faixa de 5 a 40 mg/dL j possvel
observar uma correlao negativa entre
a ALA-D e o Pb/sg. Por isso, representa
um adequado indicador de efeito para
exposio ambiental ao chumbo.
cido delta amino-levulnico (ALA) na
urina: devido inibio da ALA-D pelo
chumbo, o ALA se acumula nos tecidos
e excretado em grande quantidade na
urina. No entanto, este biomarcador
apresenta correlao com concentraes
de Pb/sg acima de 40ug/dL, mostrando
uma sensibilidade diferente da enzima.
Por isso, considerado mais adequado
para avaliar a exposio ocupacional a
este metal.
Os biomarcadores e sua aplicao na avaliao da exposio aos agentes qumicos ambientais
Alguns indicadores biolgicos de efeito
possibilitam a avaliao da ao de uma subs-
tncia qumica no orgo alvo (ou stio crti-
co) a partir da medida de uma alterao bi-
olgica associada a esta ao. No entanto,
esta medida pode ter como limitao a difi-
culdade de acesso a certos tecidos do orga-
nismo. Embora sejam parmetros importan-
tes para prevenir possveis efeitos nocivos
sade, no so, em sua maioria, especficos
para as substncias qumicas envolvidas, e
por isso requerem pesquisas com o prop-
sito de validao dos mesmos. Alguns exem-
plos so descritos abaixo:
Biomarcadores de nefrotoxicidade
Vrios tipos de parmetros tm sido tes-
tados e usados como biomarcadores de
dano renal. Estes tm sido classificados
como10:
marcadores funcionais (por exemplo,
creatinina srica e 2 microglobulina);
protenas de baixo ou alto peso mole-
cular (por exemplo, albumina, transfe-
rina, globulina ligada ao retinol);
marcadores de citotoxicidade (por exem-
plo, antgenos tubulares);
enzimas urinrias (por exemplo, N-
acetilglicosaminidade, -galactosidade).
Os biomarcadores de nefrotoxicidade
foram bem validados em relao exposi-
o ao cdmio; no entanto, no tm evidn-
cias cientficas suficientes para a exposio
ao mercrio e chumbo10,11.
Biomarcadores de hepatoxicidade
Os efeitos de substncias qumicas no fga-
do tm sido estimados tradicionalmente por
determinao da atividade de vrias enzimas,
como, por exemplo, aminotransferases, lco-
ol desidrogenase, lactato desidrogenase,
glutationa-S-transferase, entre outras7.
A hepatotoxicidade causada por vrias
substncias que so metabolizadas pelo Sis-
tema Citocromo P-450 a intermedirios
reativos. Por exemplo, para o tetracloreto
de carbono, tem sido extensivamente estu-
dada e bem documentada a sua ao
Amorim, L.C.A.
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 hepatotxica. O metablito reativo do
tetracloreto de carbono inicialmente reduz
a glutationa peroxidade (GPX) intracelular a
um nvel que predispe a reao do metab-
lito com macromolculas crticas, levando
morte celular e hepatoxicidade. Neste caso,
os biomarcadores de efeito poderiam incluir
nveis de glutationa, peroxidao lipdica ou
nmero de clulas necrosadas 7,12. Estes
biomarcadores de hepatotoxicidade tam-
bm esto associados exposio ao cromo
VI no estudo de Huang (1999)13.
Biomarcadores de genotoxicidade
Tcnicas sensveis baseadas em mtodos
fsicoqumicos ou imunoqumicos para a
deteco de uma variedade de substncias
conhecidas como carcinognicas tm sido
desenvolvidas. Entre estas esto includas as
aflatoxinas, os hidrocarbonetos policclicos
aromticos, as aminas aromticas, e os
praguicidas7.
Estes biomarcadores incluem os aductos
de DNA e protena (aductos de hemoglobina e
albumina), que se referem ligao do xeno-
bitico ou de seu metablitos a estas mol-
culas, formando os aductos6,14. Tendo em vis-
ta que os aductos constituem a prpria subs-
tncia qumica ligada ao stio alvo, os mesmos
so tambm considerados como biomar-
cadores de exposio ou dose interna.
Biomarcadores de neurotoxicidade
A complexidade das funes do sistema
nervoso, os eventos neurotxicos de nature-
za mltipla e a variabilidade e inacessibilidade
dos stios celulares e moleculares deste rgo
so fatores que limitam o estabelecimento de
indicadores para se avaliar a ao neurotxica
das substncias qumicas. Acrescente-se a
estes fatores, o fato de os efeitos neurotxicos,
em geral, se iniciam tardiamente, aps expo-
sies prolongadas ou mesmo, aps um pe-
rodo de latncia, depois de terminada a ex-
posio. Neste sentido, tem-se procurado va-
lidar alguns parmetros que possam permitir
a deteco precoce da ao neurotxica, an-
tes que seja evidenciado um dano sade do
Rev. Bras. Epidemiol.
Vol. 6, N 2, 2003
166 Os biomarcadores e sua aplicao na avaliao da exposio aos agentes qumicos ambientais
Amorim, L.C.A.
indivduo exposto, seja por exposio ocupa-
cional ou ambiental, considerando principal-
mente as crianas. So vrios os indicadores
utilizados para se avaliar o risco e a exposio
a uma substncia neurotxica. Alguns estu-
dos abordam trs enfoques15,16,17:
Enfoque neurofisiolgico
O enfoque neurofisiolgico, como o es-
tudo da conduo nervosa, o eletroencefa-
lograma etc., bastante til no diagnstico
de desordens neurolgicas, mas a utilizao
destes parmetros na identificao dos efei-
tos neurolgicos iniciais ainda pouco
estabelecida e por isso apresenta um baixo
valor preditivo. Quanto avaliao clnica, a
mesma deve ser realizada com base num
protocolo muito bem detalhado15,18.
Enfoque neurocomportamental
Mtodos para avaliar alteraes de fun-
es cognitivas, como, por exemplo, apren-
dizagem e memria, tm sido extensivamen-
te utilizados em indivduos expostos a
solventes e metais pesados. No entanto, em
relao aos testes neurocomportamentais,
estes podem estar alterados por motivos
outros que no por ao de um xenobitico.
Por isso, para concluir sobre uma ao
neurotxica atravs de testes neurocom-
portamentais, estes devem ser extremamen-
te bem delimitados e interpretados15,19,20.
Enfoque neuroqumico
No enfoque neuroqumico, vrias evidn-
cias experimentais mostram que, na progres-
so de doenas neurotxicas, os eventos
bioqumicos precedem as alteraes estru-
turais e danos permanentes ao SNC. Dessa
forma, a medida destas alteraes poderi-
am fornecer informaes teis sobre os efei-
tos precoces (ou iniciais) detectveis, imedi-
atamente antes ou logo aps o incio da do-
ena (intoxicao) 15,16,17.
Em geral, os eventos bioqumicos que
ocorrem no Sistema Nervoso so conside-
rados como potenciais biomarcadores; no
entanto, a principal limitao da medida des-
tes parmetros a inacessibilidade do teci-
do alvo. Geralmente, no Sistema Nervoso
Central, muitos precursores e produtos so
reciclveis e retidos no local. Alm disso, as
mudanas que acompanham a funo neu-
rolgica ocorrem dentro de um pequeno
espao intra ou extra celular do prprio r-
go, o que leva impossibilidade de se
implementar as rotinas de anlises dos mes-
mos. Diante disso, uma nova metodologia
de biomarcadores tem sido desenvolvida,
procurando alcanar os propsitos da avali-
ao de risco sade, utilizando tecidos mais
acessveis para determinar indicadores
substitutos daqueles localizados no tecido
nervoso15,16.
Por isso, tem-se observado que alguns
parmetros bioqumicos e moleculares, se-
melhantes aos envolvidos na ao txica ocor-
rida dentro do SNC, podem estar presentes
em tecidos mais acessveis, como fludo ce-
rebral espinhal, sangue, plasma e clulas
sangneas. Alguns destes parmetros so15:
Receptores
eceptores::
Receptores muscarnicos da Acetilcolina
em linfcitos
Receptor sigma; receptor Beta e alfa2 em
plaquetas
Enzimas:
Acetilcolinesterase eritrocitria
Esterase neurotxica em linfcitos
MAO tipo B em plaqueta
Dopamina Beta hidoxilase no soro
Sistema de recaptao:
5-Hidroxindolactico (serotonina) em
plaquetas
Transduo do sinal nervoso:
Concentrao de clcio intracelular
Fosfoinositol em plaquetas e linfcitos
A medida destes parmetros permite ava-
liar, atravs de mtodos acessveis, a ao de
um agente qumico no sistema nervoso cen-
tral, os quais so denominados Indicadores
Substitutos de Neurotoxicidade ou, simples-
mente, Marcadores Substitutos. O estudo
destas alteraes bioqumicas pode possibili-
tar a oportunidade de se identificar precoce-
mente uma exposio excessiva e avaliar a
neurotoxicidade para prevenir o aparecimen-
to de efeitos ou danos irreversveis21,22.
Entretanto, a escolha dos indicadores
substitutos no fcil e nem sempre poss-
Os biomarcadores e sua aplicao na avaliao da exposio aos agentes qumicos ambientais
vel. necessrio que estes parmetros peri-
fricos sejam equivalentes ou ento correla-
cionados funcionalmente ao parmetro cor-
respondente no SNC. Esta correspondncia
deve ser comprovada atravs de estudos
experimentais que demonstrem que o par-
metro sob investigao tenha a mesma ca-
racterstica bioqumica e funcional daquele
presente no SNC; e que as alteraes quimi-
camente induzidas neste parmetro ocor-
rem do mesmo modo nos dois sistemas (pe-
rifrico e nervoso)15.
Posteriormente, a comprovao de que
tal marcador biolgico substituto preditivo
para determinado xenobitico (seja para
avaliar risco ou doena), requer necessaria-
mente mais pesquisas, incluindo vigilncia
epidemiolgica e estudos prospectivos para
a validao dos mesmos. Vrios trabalhos23-
30
tm apresentado, ultimamente, contribui-
es e discusses sobre o uso destes
marcadores perifricos (ou marcadores subs-
titutos) de neurotoxicidade, nos quais vrios
autores apontam a necessidade de se incluir
a avaliao de outros parmetros de neuro-
toxicidade, como as alteraes neurocom-
portamental, neurofisiolgica e neuroclnica.
Biomarcadores de suscetibilidade
Por que alguns indivduos adoecem e
outros no?
A predisposio gentica, alm de fato-
res externos, tais como idade, dieta, estilo de
vida, podem influenciar/afetar a suscetibi-
lidade de indivduos expostos a substncias
qumicas7.
Embora alguns indivduos experimentem
exposio ambiental similar, diferenas ge-
nticas no metabolismo podem produzir
doses marcadamente diferentes no stio cr-
tico e, conseqentemente, nvel diferente de
resposta. At mesmo quando as doses crti-
cas so similares, respostas diferentes po-
dem ser notadas nos indivduos devido a
variaes na suscetibilidade biolgica. Os
biomarcadores de suscetibilidade podem
refletir fatores genticos ou adquiridos que
influenciam na resposta do organismo a uma
determinada exposio qumica. Estes so
Amorim, L.C.A.
167 Rev. Bras. Epidemiol.
Vol. 6, N 2, 2003
 fatores pr-existentes e independem da ex-
posio. So predominantemente genticos,
embora a patologia, alteraes fisiolgicas,
medicamentos e exposio a outros agentes
ambientais tambm possam alterar a
suscetibilidade individual. Os biomarcadores
de suscetibilidade identificam aqueles indi-
vduos na populao que tm uma diferen-
a gentica ou adquirida na suscetibilidade
para os efeitos da exposio a substncias
qumicas6,7,31.
Os biomarcadores de suscetibilidade in-
dicam quais os fatores podem aumentar ou
diminuir um risco individual no desenvolvi-
mento da resposta do organismo decorren-
te da exposio aos agentes qumicos
ambientais. A Tabela 1 mostra alguns
biomarcadores de suscetibilidade estabele-
cidos (e/ou propostos) para alguns agentes
qumicos6.
Nveis de ao
A presena e evidncia de um risco qu-
mico num ambiente so reconhecidas com
base nos limites permissveis no meio biol-
gico, os quais so propostos a partir das in-
formaes obtidas nos estudos de toxici-
dade, atravs das relaes dose-resposta, e
reconhecidos como nveis de advertncia.
Os mesmos no devem ser considerados
como valores que separam exposies se-
guras de exposies perigosas. Eles so esta-
belecidos de diferentes maneiras, dependen-
do de sua origem (pas e/ou instituio), atra-
vs de7:
Tabela 1 - Biomarcadores de suscetibilidade para alguns agentes qumicos6
Table 1 - Biomarkers of susceptibility for some chemical agents6
BIOMARCADOR DE SUSCETIBILIDADE
Glicose 6-P desidrogenase (deficincia)
Glutationa-S-transferase
Paroxonase
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Vol. 6, N 2, 2003
168 Os biomarcadores e sua aplicao na avaliao da exposio aos agentes qumicos ambientais
Amorim, L.C.A.
estudos epidemiolgicos, clnicos e ex-
perimentais que estabelecem a relao
entre a concentrao medida de um
agente ou de seu metablito num meio
biolgico com conseqncias para a sa-
de. So nveis de ao da biomonitori-
zao relacionados diretamente com a
sade; ou
derivados matematicamente dos limites
de exposio ocupacional, ou seja, repre-
sentam a concentrao da substncia
qumica ou de seu metablito, que deve-
r estar presente na amostra biolgica co-
letado de um trabalhador exposto ao li-
mite mximo permitido no ambiente.
No Brasil, os Limites Biolgicos de Ex-
posio so estabelecidos para os Biomar-
cadores de exposio e de efeito para subs-
tncias qumicas presentes no ambiente de
trabalho, os quais constam do Quadro I da
Norma Regulamentadora n 732, onde cons-
tam os respectivos valores de referncia para
indivduos no expostos ocupacionalmente.
Estes limites foram atualizados em 1994, re-
cebendo a denominao de ndice Biolgi-
co Mximo Permitido, e so estabelecidos
para apenas 26 substncias qumicas.
No que se refere exposio ambiental,
as concentraes aceitveis so referen-
ciadas em Normas Internacionais e na co-
munidade cientfica. Entretanto, deve ser
considerado que algumas desta normas po-
dem no ter como base estudos de toxici-
dade confiveis e adequados e no serem
apropriadas para indivduos sensveis (crian-
as, idosos, enfermos) ou para exposies
AGENTE QUMICO/EFEITO
Compostos nitroaromticos/baixa resistncia p/
estresse oxidativo
xido de etileno, compostos alifticos
halogenados/diminuio da detoxificao dos
intermedirios epxidos
Organofosforados/aumenta a toxicidade dos OF
diminuindo a atividade da AchE
contnuas. Por isso, torna-se pertinente a
realizao de estudos ambientais utilizando
estes parmetros biolgicos na avaliao do
risco qumico.
Consideraes finais
Os biomarcadores, sejam de exposio
ou de efeito, so ferramentas utilizadas nos
estudos epidemiolgicos ambientais, bus-
cando-se estabelecer uma relao entre a
exposio aos agentes qumicos e os efeitos
na sade dos indivduos expostos. A impor-
tncia do uso destes biomarcadores como
parmetros biolgicos de exposio s subs-
tncias qumicas deve-se ao fato de eles es-
tarem mais diretamente relacionados aos
efeitos na sade do que os parmetros
ambientais. Por isso, podem oferecer uma
melhor estimativa do risco.
A avaliao biolgica leva em considera-
o a absoro por diferentes vias e rotas de
exposio de um agente qumico, permitin-
do avaliar a exposio global do indivduo
ou populao.
Em relao aos efeitos das substncias
neurotxicas, o uso de biomarcadores subs-
titutos permite a associao com a exposi-
o a baixos nveis, fornecendo conhe-
cimentos e evidncias cientficas necessri-
os para a aplicao de medidas de preven-
o e controle da exposio aos agentes qu-
micos ambientais no mbito das polticas
pblicas.

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Recebido em: 24/07/2002
Aprovao em: 29/10/2002