MICROBIOLOGIA PESQUERA

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IDENTIFICACIN DE HONGOS

I. INTRODUCCION:

Los hongos de diferentes gneros existen en todos los tipos de medio

ambiente, pudiendo estar en el aire, suelo y el agua. Existen una infinidad de
hongos en nuestro planeta y principalmente se alimentan absorbiendo
directamente nutrientes de los alimentos.

Son organismos pluricelulares y eucariotas, son aerobios psicrofilos o mesfilos

y no poseen clorofila.

Los hongos pueden ser diferenciados fcilmente de los organismos

procariticos por ser ms grandes, poseer ncleo, vacuolas y mitocondrias; es
decir, una tpica clula eucaritica. Adems, muchos hongos poseen
estructuras externas que los diferencian entre s, como las hifas y las
estructuras reproductoras.

Presentan una reproduccin sexual y asexual y lo realizan por medio de

esporas.

Los hongos son una especie de vegetales rudimentarios que carecen de

clorofila por lo que reciben el nombre de saprfitos, tienen paredes celulares
rgidas y se asemejan en cuanto a su arquitectura a las paredes celulares de
plantas, pero no qumicamente. La celulosa est presente en las paredes de
pocos gneros de hongos.

La quitina es un componente comn de ellas y se dispone en microfibrillas,

como la celulosa; otros polisacridos como galactanos y quitosn reemplazan a
la quitina en algunos grupos de hongos. Las paredes celulares de los hongos
constan de un 80 - 90% de carbohidratos, siendo las protenas, lpidos,
polifosfatos e iones inorgnicos el material cementante.

Existe una variedad de hongos y levaduras que vive en el medio marino

acompaando a pescados y mariscos, pero que no constituye la flora
dominante ni representa ningn riesgo para la salud. Sin embargo, cuando la
actividad de agua (Aw) desciende en productos derivados de la pesca como los
desecados, ahumados y deshidratados.

II. OBJETIVOS.
Identifica las caractersticas ms importantes de los hongos.
Conocer los procesos de evolucin en su desarrollo.
Analizar los diferentes hongos que estn presentes en el medio
ambiente, segn la ubicacin en la Universidad Agraria La Molina.
Realizar el estudio del microcultivo en cmara hmeda.
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III. REVISION BIBLIOGRAFICA:

Hongos:
En biologa el trmino fung (latn, literalmente hongos) designa un reino que
incluye a los organismos celulares hetertrofos que poseen paredes celulares
engrosadas (mediante quitina) y clulas con especializacin funcional. Tambin
son llamados hongos. La especialidad de la Biologa y de la Botnica que se
ocupa de los hongos se llama Micologa
Los hongos estn formados por clulas eucariotas. El DNA est organizada en
cromosomas que se hayan envueltos por la membrana nuclear. El citoplasma,
con orgnulos membranosos y abundantes ribosomas, est limitado por una
membrana se encuentra una pared celular rgida de estructura polisacrido
compleja, compuesta mayoritariamente por quitina, mananos y glucanos, que
protege de la lisis osmtica y regula el paso de molculas. Tienen un
metabolismo de tipo quimio hetertrofo, es decir, obtienen la energa y el
carbono absorbiendo los nutrientes de la materia orgnica, que descomponen
mediante la produccin de exoenzimas. Pueden reproducirse por medio de
procesos asexuales mediante divisin binaria o formando esporas sexuales o a
travs de esporas sexuales.
Los hongos pueden ser unicelulares o pluricelulares, los primeros estn
formados por clulas aisladas redondas u ovaladas, denominadas levaduras.
Los pluricelulares estn constituidas por celular alargadas que crecen por
extensin de sus extremos, tabicndose de un modo ms o menos completo,
formado lagos filamentos denominados hifas que con frecuencia se ramifican.
Estos hongos, denominados mohos, al crecer forman matas de filamentos
entrelazados, como puede apreciarse en el pan o las frutas enmohecidas
(Prats G., 2006).

Figura 1. Morfologa de los hongos

FUENTE: PRATS

Hay hongos en cualquier parte en que existan otras formas de vida. Algunos
son parsitos de organismos vivos y producen graves enfermedades en plantas
y animales.
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Figura 2. Estructura interna y externa de los hongos hifas, sepas y micelios.

La mayora de los hongos estn constituidos por finas fibras que contienen
protoplasma, llamadas hifas. stas a menudo estn divididas por tabiques
llamados septos.

Las hifas crecen por alargamiento de las puntas y tambin por ramificacin. La
proliferacin de hifas, resultante de este crecimiento, se llama micelio.

Cuando el micelio se desarrolla puede llegar a formar grandes cuerpos

fructferos, tales como las setas y los pedos o cuescos de lobo. Otros tipos de
enormes estructuras de hifas permiten a algunos hongos sobrevivir en
condiciones difciles o ampliar sus fuentes nutricionales.

Figura 3. Reproduccin asexual y sexual en la reproduccin de hongos.

Fisiologa de Los Hongos:

En la mayora de los hongos las paredes de las hifas estn compuestas

principalmente por quitina y algunas hemicelulosas.
La celulosa, que est presente slo en unos pocos grupos de hongos, es
caracterstica de los oomicetes.
La proporcin de agua de los hongos mucilaginosos generalmente es mayor
del 90%. Las esporas pueden tener menos del 50% de agua; otras estructuras
de resistencia, tales como los esclerocios, contienen an menos.
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Clasificacin:
a. Clase chytridiomycetes: Grupo formado principalmente por
hongos acuticos microscpicos, aunque algunos pueden crecer
tambin sobre materia orgnica en descomposicin u
organismos vivos como gusanos, insectos, plantas y otros
hongos. En este caso, las esporas, llamadas "zoosporas",
poseen flagelos que les permiten moverse en medios lquidos.

b. Clase oomyces: se compone de hongos que se parecen a las

algas. Abarca desde organismos unicelulares hasta complejas
masas de hifas que no estn tabicadas por septos (micelios no
septados).Adems de producir esporas, los oomicetes forman
zoosporas que se mueven por medio de dos flagelos. Se incluyen
en el filo los mohos acuticos, las royas blancas y los mildius
vellosos.
La mayora de los mohos acuticos viven sobre materia orgnica
muerta, aunque Saprolegnia parasitica, parasita peces vivos. Las
royas blancas y los mildius vellosos, pertenecientes al orden
Peronosporales, son parsitos de plantas. En algunos mildius
vellosos, por ejemplo en los gneros Phytophthora y Peronospora,
los receptculos que contienen las zoosporas pueden estar
modificados; en ese caso, los receptculos se parecen a los
conidios y funcionan como tales

c. Clase plasmodiophomycetes: Normalmente, se desarrollan en

el interior de las clulas vegetales, causando la infeccin del
tejido que suele crecer formando un engrosamiento. Entre las
enfermedades debidas a estos organismos estn la hernia de la
col y la roa de la patata, causadas, respectivamente, por
especies de los gneros Plasmodiophora ySpongospora.

d.Clase zygomycetes: Los hongos pertenecientes al filo

Zigomicetes (Zygomycota) se caracterizan por formar zigosporas
con gruesas paredes, de origen sexual y esporangiosporas no
nadadoras, de origen asexual.
El moho negro del pan (Rhizopus nigricans imgenes e
explicacin mas adelante), un representante bien conocido de
este grupo del orden Mucorales, produce masas de hifas sobre
pan, fruta y otros alimentos deteriorados. Los hongos del orden
Entomoftorales son parsitos de las moscas y de otros insectos.
Tienen esporangiosporas sencillas dentro de unos receptculos;
en el interior de cada uno de ellos se desarrollan unas
estructuras que llegan a independizarse y funcionar como
conidios.
El orden Zoopagales comprende hongos parsitos de amebas,
nematodos y artrpodos.
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e. Clase ascomicetes: Los hongos del filo Ascomicetes

(Ascomycota), tambin llamados hongos con forma de saco,
producen un nmero determinado de ascosporas en el interior
de unas bolsas semejantes a vesculas, denominadas ascas.
Tienen hifas bien desarrolladas, por lo general con un nico
ncleo en cada hifa.
La unin de los ncleos se da en las ascas jvenes; tras la
posterior divisin, suelen producirse ocho ncleos, los cuales
darn lugar a las ascosporas. Algunos ascomicetes tienen solo
una ascospora; otros pueden tener varios cientos. Las tres
clases principales de este filo son: Hemiascomicetes,
Euascomicetes y Loculoascomicetes.
Los hemiascomicetes abarcan a las levaduras y otros hongos
similares, cuyas ascas no se forman dentro ni sobre un soporte
de masas de hifas.
La levadura de la cerveza (Saccharomyces cerevisiae), adems
de reproducirse por medio de ascosporas, lo hace tambin
mediante unas protuberancias, o yemas, que a la larga se
separan de las clulas parentales.

IV. MATERIALES Y METODOS

Materiales:

Muestras de hongos.
Porta y cubre objeto.
Medio de cultivo de Oxitetraciclina Glucosa Agar (OGA).
Papel filtro.
Varilla de vidrio en forma de U.
Bistur.
Azul de metileno.
Materiales de desinfeccin: alcohol, algodn, mechero, agua destilada, etc.
Aguja de kolle.
Cmara hmeda.

Equipos:
Microscopio electrnico.
Estufa de incubacin.
Cmara hmeda.
Mechero Bunsen

METODOS
Observacin de los hongos al microscopio
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Luego de inspeccionar el hongo macroscpicamente (forma, tamao, color,

textura, etc.), realizar los pasos siguientes:
Colocar en una lmina portaobjeto una gota de azul de metileno.
Transferir al portaobjeto, con la aguja de kolle, una pquela porcin del
hongo a analizar.
Extenderla cuidadosamente sobre la gota.
Cubrir la preparacin con una lmina cubreobjetos.
Observar al microscopio con el objetivo 40X.

Observar la estructura del hongo (hifas, micelio, esporas, etc.). Comparar

con la lmina de hongos del laboratorio, tratando de identificarlo.

Microcultivo en cmara hmeda

La cmara hmeda es un sistema estril que permite la observacin del
desarrollo del hongo y consta de: una placa Petri que contiene un pedazo
de papel filtro con una pequea varilla de vidrio en U que sirve de soporte
a una lmina portaobjeto y su cubreobjetos.
Despus de verificar que la cmara hmeda est completa, realizar lo
siguiente:
En condiciones estriles y con la ayuda de un bistur, cortar el agar OGA en
pequeos rectngulos de aproximadamente 2x1 cm.
Sobre el portaobjeto colocar una porcin rectangular de medio de cultivo,
en el centro.
En un extremo de esta porcin depositar mediante el asa de kolle esporas
del hongo en estudio.
Cubrir esta preparacin con la lmina cubreobjetos.
Humedecer el papel filtro con agua destilada estril.
Dejar a temperatura ambiente (20-25C) durante 5 das.
Diariamente observar al microscopio, hasta observar un desarrollo
completo.
Comparar el hongo en estudio con la lmina de hongos del laboratorio.
Esquematizar las caractersticas del hongo analizado.

Microbiologa del ambiente

Se realiza con el objeto de evaluar un ambiente que pueda ser vehculo de
contaminantes microbiano.
En la prctica se analizar la presencia de hongos en el ambiente.
Procedimiento:
Colocar la placa abierta, expuesta al medio ambiente por 15 minutos.
Pasado este tiempo, cerrar la placa Petri e incubar a 20C.
Comparar 3 hongos como mnimo con la lmina de hongos del laboratorio e
identificarlos.
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Fig.4. Muestra de hongos a identificar

Fig.2. Cmara hmeda

V. RESULTADOS:

VI. CONCLUSIONES:

En la practica se observo los siguientes hongos Rhizopus ssp, Mucor,

Chephalosporium y Aspergillus fumigatus los cuales fueron comparados con
imgenes de estos.
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Los Rhizopus ssp, Mucor, Chephalosporium y Aspergillus fumigatus estn

constituidos de filamentos ramificados, o tubos, llamados hifas. Estas hifas son muy
abundantes formando redes complejas llamadas micelio y este es propiamente dicho el
cuerpo del hongo.

El Rhizopus ssp, Aspergillus fumigatus y la muestra en su estructura tienen adems los

esporangios.

La muestra analizada y comparada con la lmina de hongos en el laboratorio se

deduce que se trata del Mucor.

Los hongos Aspergillus tienen importancia econmica porque se las usa en muchas
industrias de la fermentacin que incluyen la produccin del cido ctrico y el
glucnico, que son elaborados en abundancia Aspergillus Nger.

Al comparar la muestra analizada con la lmina de hongos en el laboratorio, se pudo

deducir, que los hongos en mencin se tratara del Rhizopus y del Cephalosporium

En la placa de microbiologa del ambiente, no solo se encontr gran variedad de

hongos, sino tambin de levaduras, con cual estara indicando el alto grado de
contaminacin que posee los centros federados de industrias y pesquerias

El aspecto general de los hongos que crecen en los alimentos es con frecuencia
suficiente para indicar su gnero. Algunos son poco tupidos y lanosos, otros
compactos; en otras ocasiones estn como aterciopelados en su superficie, en otras son
secos y pulverulentos, mientras que algunos estn como humedecidos y gelatinosos.

El lmite de crecimiento y expansin de los hongos lo seala el alimento o el

recipiente que lo contiene.

Los hongos necesitan oxgeno para desarrollarse, es decir, son aerobios, al menos los
que crecen en los alimentos. La mayora pueden crecer en un intervalo de pH muy
amplio (2 8.5), pero casi todos lo hacen mejor a un pH cido.

El microcultivo en cmara hmeda tuvo que incubarse por ms de 5 das para poder
observar bien las caractersticas del hongo.

La mayora de los mohos pueden considerarse mesfilos, es decir, crecen bien a la

temperatura ambiente. La temperatura ptima para la mayora de ellos es de unos 25 a
30C, pero algunos crecen bien a 35 37C, o incluso ms, como algunas especies de
Aspergillus.

El crecimiento de los mohos es lento comparado con el de las bacterias y levaduras,

por lo que, cuando las condiciones son favorables al desarrollo de todos estos
microorganismos, los mohos estn en condiciones desfavorables de competencia; sin
embargo, una vez iniciado su crecimiento puede ser muy rpido.

La mayora de los hongos no son dainos pero le dan mala apariencia al producto
hacindola inaceptable, por esto se debe evitar su presencia.
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VII. RECOMENDACIONES.

Un mtodo mejor para examinar los hongos es la tcnica de cultivo en portaobjetos

(microcultivos) ya que permite manejar y observar la especie sin modificar su
desarrollo y el arreglo y acomodo de sus partes permanecen intactos. En el comercio
se pueden conseguir estos microcultivos aunque es posible hacerlos muy buenos en
cualquier laboratorio

Un medio natural de amplio uso para el cultivo de los hongos es una infusin de
maz al que se le adiciona agar y glucosa. Otro medio de cultivo para los mohos y
levaduras contiene infusin de papa con agar y glucosa.

Si se quiere aislar mohos, resulta muy prctico usar un medio de cultivo que
favorezca su desarrollo pero que no sea ptimo para las bacterias.

VII. BIBLIOGRAFIA:

Hongos. Revisado el 26 de enero 2008. disponible en

http://www.cyberolimpiadas.com.sv/proyectos2004/sluciamaticos/FUNGI/parteshon
go.htm#Estructura
Prats G. 2006. Microbiologa clnica. Editorial medica panamericana. Impreso en
Espaa. Micologia. ParteII. Tcnicas microbiolgicas. Capitulo 5 pag. 83.
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El reino fungi. Revisado el 26 de enero 2008. disponible en

http://www.cyberolimpiadas.com.sv/proyectos2004/sluciamaticos/FUNGI/concepto.
htm

Reproduccin de hongos. Revisado el 26 de enero 2008. disponible en

http://www.cdeea.com/reproduccionhongos.htm

Hongos. Revisado el 26 de enero 2008. disponible en

http://www.ual.es/GruposInv/myco-ual/vegetat.htm

HANS G SCHLEGEL. 1997. Microbiologa General

BROCK, THOMAS (1999).Biologa de los Microorganismos, Ed. Mxico. Octava

Edicin

PELZAC, MICHAEL. Microbiologa. Segunda Edicin en espaol.

FRAZIER, W. C. Microbiologa de los Alimentos Editorial Acribia, Zaragoza

(Espaa). Segunda Edicin. 1976.

ALEXOPOULOS C. J. Introduccin a la Micologa. Editorial Universitaria de

Buenos Aires. 1966.

ICMSF. Microorganismos de los Alimentos. Tcnicas de Anlisis Microbiolgico.

Volumen I. Editorial Acribia, Zaragoza (Espaa). Segunda Edicin. 1983.