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1. INTRODUCCIN
En las rutas metablicas se necesitan numerosas y especficas molculas que van conformando
pasos y productos intermediarios de las rutas. Pero, adems son necesarios varios tipos de
rutas indispensables para su desarrollo final. (Nelson y Cox. 2002).
Una ruta metablica es una serie de reacciones consecutivas catalizadas por un enzima que
produce compuestos intermedios y finalmente un producto o productos, metablica es la
sustancia inicial de otra ruta.
Las rutas metablicas comparten varias caractersticas comunes, por ejemplo la mayora
requiere ATP como fuente de energa, las sustancias intermedias no se almacenan, se
producen los intermedios de otras sustancias en el momento en que es necesario.
(Carrillo A. 2006)
2. OBJETIVOS
OBJETIVO GENERAL
Demostrar la presencia de piruvato en las vas metabolicas mediante la glucolisis
OBJETIVOS ESPECIFICOS
Detectar el piruvato mediante diferentes soluciones.
Indicar la presencia o ausencia de piruvato en los diferentes casos
3. MATERIALES Y REACTIVOS
MATERIALES REACTIVOS
o Tubos de ensayo o Sol. glucos a al 10 % (50 ml)
o Vas os de precipitacin o Sus p. levadura al 10 % en Na 2 HPO4 0.5 M (50 ml)
o Pipetas graduadas o Sus p. levadura al 10 % en KH2PO4 0.5 M (50 ml) Sol.
o Probeta cido tricloroactico al 10% (25 ml)
o Centrfuga o Sol. 2,4-dinitrofenilhidracina s aturada en HCl 2 M (25
o Balones volumtricos ml)
o Sis tema de calentamiento o Sol. NaOH al 10 % (25 ml)
4. PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL
a) Formacin de piruvato a partir de glucosa
FORMACIN DE PIRUVATO A
PARTIR DE GLUCOSA
Tubo A agregar 5 ml de la
AGREGAR suspensin de levadura en
solucin alcalina de Na 2 HPO4
Tubo B aadir 5 ml de la
AADIR suspensin de levadura en
solucin cida de KH 2 PO4
2 ml de la solucin de cido
AADIR tricloroactico
SEPARAR Sobrenadante
b) Determinacin de piruvato
DETERMINACIN DE
PIRUVATO
1 ml de solucin s aturada de
2,4-dinitrofenilhidracina
AGREGAR saturada en HCl 2 M y 2 ml del
sobrenadante obtenido en la
parte a).
MEZCLAR
TOMAR
0,5 ml de
mezcla
1 ml de NaOH al 10 % y 4
AGREGAR
ml de agua.
AGREGAR 1 ml de NaOH al 10
% y 4 ml de agua.
OBSERVAR
5. RESULTADOS
Formacin del piruvato
Una vez elaborado la solucin se mezcla bien, se la somete al bao mara y
procedentemente a la centrifuga, de estas se tomarn cuatro muestras y con dos
sobrenadantes y sus precipitados.
Determinacin del piruvato
Cuando ya se obtiene los tubos se procede a colocar diferentes reactivos en cada tubo,
obteniendo as que aquellos que presentaron un color rosa deba tener presencia de
piruvato, mientras que los obrantes no.
MUESTRA A1 A2 B1 B2
PRESENCIA PIRUVATO + + - -
Elaborado por: Jerez F., Gutierrez D.
Fuente: Laboratorio de Biologia General
PIRUVATO EN TUBOS A Y B
TUBO A SE PRODUJO UN COLOR INTENSO YA QUE LA
LEVADURA Na2HPO4 EN SOLUCION ALCALINA
CUMPLE EL CICLO DE LA GLUCOLISIS
TUBO B La levadura KH2PO4 en medio acido detiene la
actividad de los microorganismos
Elaborado por: Jerez F., Gutierrez D.
Fuente: Laboratorio de Biologia General
6. DISCUSIN
7. CUESTIONARIO
7.1. Elabore una representacin de la gluclisis.
7.2. Elabore un cuadro de clasificacin de las enzimas isostricas y alostricas en la
gluclisis.
ISOTERICAS ALOSTERICAS
Oligomerasas Transferasas
Activadoras Oxido reducrasas
Inhibidoras Trazas
Centros activos Hidrotrazas
8. CONCLUSIONES
o Se demostr como en ciertas sustancias exista la presencia del piruvato mientras que en
otras este no se manifestaba, la causa fue que solo este solo reaccionaba al estar con bases
mas no con cidos.
o Se detecto que la solucin del piruvato, ya separado su sobrenadante mientras que en el
otro fue con el precipitado por lo que se obtuvo tubos de muestra.
o Se indico que de las muestras realizadas solo la mitad no tenan la presencia del piruvato
mientras que los otros si cambiaron levemente de color, a un rosa claro y los dems de
colores base.
9. BIBLIOGRAFA
o Mathews van H. (1999); Bioqumica, Editorial Mc Graw Hill Interamericana.
o Tabison A. (2009); Carbohidratos, UBA, Argentina-Buenos Aires
o Nelson y Cox, Lenhinger (2002); Principios de bioqumica. Editorial Omega. Ediciones
varias.
o Carrillo A. (2007); Metabolismo
Disponible en: http://www.slidshare.net/atavisin/rutas-metabolicas.pdf
[Consultado: 09/07/14]