BIOLOGA

INMUNOENSAYO DE
DETECCIN CUALITATIVA
DE ANTICUERPOS
TREPONEMA PALLIDUM
Objetivos:
Describir las indicaciones de detencin
rpida del treponema pallidum.
Describir la aplicacin de la prueba de
deteccin rpida.
Fundamento terico:
El Treponema pallidum es una bacteria
clasificada como un espirilo, alargada y muy
delgada dispuesta en forma de espiral. Es el
agente causal de la Sfilis
El mtodo ms prctico para detectar la
infeccin es la prueba rpida de sfilis Ab que
es un inmunoensayo practico de un solo uso
basado en inmunocromatografa donde se
emplea reactivos nicos para la deteccin
rpida y confiable del anticuerpos contra el
treponema pallidum (Tp).
Materiales requeridos no suministrados
Control positivo.
Control negativo.
Reloj o cronometro.
Dispositivo de puncin para la prueba de sangre
total.

Reactivos y
materiales suministrados
Bolsas de aluminio selladas que contiene:
a) Un dispositivo de casete.
b) Un desecante.
Goteros de plstico.
 Diluyente de muestra (REF SB-R0031,
5ml/botella).
Un inserto (instrucciones de uso).

Muestra
Sangre capilar (dedo ndice).

Procedimiento
1. Lleve las muestras y componentes del ensayo a temperatura ambiente si es
refrigerada o congelada.
2. Cuando est preparado para realizar la prueba, abra el empaque y saque el
dispositivo. Colquela sobre una superficie limpia y plana.
3. Asegrese de marcar el dispositivo con la identificacin del paciente.
4. Llene la pipeta con la muestra.

En posicin vertical, agregue una gota de (30-45 l) de muestra a una gota

de sangre total (40-50 l) dentro del pozo de muestra. Asegrese de que no
haya burbujas de aire.

Inmediatamente agregue 1 gota (35-50 l) de diluyente de muestra con la

botella en posicin vertical.

5.

Contabilice el tiempo.
6. Los resultados deben ser ledos a los 15 minutos. Los resultados positivos o
reactivos se hacen visibles transcurriendo 1 minuto.

No lea los resultados despus de los 20 minutos. Para evitar

confusiones descarte el casete despus de leer el resultado.
 Lectura de los resultados
1. Resultado negativo:
Solo se le visualiza la banda C coloreada, la prueba indica que no hay
anticuerpos detectables de anti-Tp presentes en la muestra. El resultado es
negativo.

2. Resultado positivo:
Ambas bandas C y T desarrollan color, la prueba indica la presencia de
anticuerpos anti-Tp en la muestra. El resultado es positivo.

3. Resultado invalido:
Si la banda c no se colorea el ensayo se considera invlido a pesar de que
las otras bandas se tian. Se debe realizar nuevamente la prueba en otro
casete.
 Interpretacin del resultado
Cuando un volumen adecuado de muestra es dispensada en el pozo de muestra
del casete, la muestra migra por accin capilar a travs del casete. Los
anticuerpos anti-Tp si estn presentes en la muestra se unirn con el conjugado
Tp. El inmunocomplejo es entonces capturado en la membrana recubierta por el
antgeno Tp, formando la banda T coloreada indicando anticuerpos Tp positivos en
el resultado de la prueba. La ausencia de la formacin de la banda T sugiere un
resultado negativo.
La prueba contiene un control interno (banda C) la cual muestra un color borgaa
por la formacin del inmunocomplejo de anticuerpo de control,
independientemente de la formacin del color de lavanda T. De lo contrario, el
resultado de la prueba no es vlido y la muestra debe ser a analizada de nuevo
con otro dispositivo.

I: Reaccin positiva en la banda T, presencia de anticuerpos anti-Tp.

I: Reaccin negativa en la banda T, ausencia de anticuerpos anti-Tp.
Nota: En el caso de la banda de control siempre debe salir positivo.

Informe de laboratorio: DETECCIN

CUALITATIVA DE ANTICUERPOS TREPONEMA
PALLIDUM
Apellidos y nombres:.
Rellenamos la siguiente tabla con el resultado obtenido de la prueba rpida de
deteccin de anticuerpos anti-Tp
LINEA 1 ANTI-Tp BANDA DE CONTROL
Observando la tabla se identifica que el resultado de la prueba es negativo porque
se observa solo la banda C coloreada eso quiere decir que el paciente no cuenta
con anticuerpos anti-Tp
CONCLUCIONES:
La prueba que acabamos de hacer es llamada tamizaje por inmunocromatografa
se basa en la migracin de una muestra a travs de una membrana de
nitrocelulosa.
Sus principales ventajas son la sencillez y rapidez del test y que no es necesario
reactivos ni instrumentacin adicional.
Su desventaja es que necesitan de otras pruebas para ser corroborada.
RECOMENDACIONES:
La cantidad de sangre y diluyente debe ser la indicada ya que se corre riesgo de
invalidar la prueba.
Es importante leer las pruebas en el tiempo establecido (dentro de 15 minutos)
debido a que la prueba puede falsear el resultado.