Electroforesis nativa

La electroforesis nativa son una serie de tcnicas electroforticas utilizadas para la

separacin individual de protenas, complejos proteicos y supercomplejos. Interacciones
protena-protena lbiles y estables pueden ser detectadas dependiendo de las
condiciones experimentales utilizadas (detergentes y soluciones amortiguadoras).
La electroforesis nativa es aplicable para la deteccin en el mismo gel de protenas con
marcadores fluorescentes y por ensayos de actividad enzimtica en el mismo gel
(zimogramas). Tambin es utilizada para determinar masas moleculares de protenas en
estado nativo y de estado oligomrico de las protenas de membrana. Los extractos de
protenas de las electroforesis pueden ser utilizadas para la produccin de anticuerpos,
para trabajos de protemica y para investigaciones estructurales.
La separacin de las subunidades componentes de un complejo proteico en una segunda
dimensin desnaturante (SDS-PAGE) es muy utilizada para estudios protemicos o
inmunolgicos.

ndice
[ocultar]

1Tipos de electroforesis nativa

o 1.1Electroforesis nativa simple
o 1.2Electroforesis "Blue Native (BN)"
o 1.3Isoelectroenfoques en gel
2Vase tambin
3Referencias

Tipos de electroforesis nativa[editar]

Estos tipos de mtodos son de microescala (de laboratorio) especialmente utilizados para
un vasto nmero de investigaciones bioqumicas, biolgicas y clnicas.1
Electroforesis nativa simple[editar]
En ingls denominada "Clear Native PAGE (CN-PAGE)". Esta tcnica permite separar
protenas solubles y de membrana en geles de acrilamida en gradiente, es de menor
resolucin que BN-PAGE. Sin embargo, esta metodologa es posiblemente las ms
utilizada de todas (aunque no la mejor) para determinar las interacciones entre las
protenas. Es popular por su simplicidad y costo, pero cabe destacar que en este tipo de
electroforesis la carga de la protena influir en su migracin, por lo tanto, no se puede
determinar de forma certera la masa molecular.
Electroforesis "Blue Native (BN)"[editar]
BN-PAGE es una tcnica que utiliza Azul de Coomassie en vez de detergente SDS
(que desnaturalizar las protenas) en el buffer catdico, esto es necesario para otorgar
una carga negativa a la protena o el complejo en estudio.2 Las principales desventajas de
esta mtodologia es que se rompern las interacciones protena-protena si no son fuertes
disociando los complejos proteicos existentes. Sin embargo, algunos complejos se
mantendrn estables y migrarn exclusivamente sobre la base de su peso molecular.
Isoelectroenfoques en gel[editar]
Los isoelectroenfoques en geles de poliacrilamida permiten separar las protenas sobre la
base de su punto isoelectrico (pIs). Este tipo de tcnicas no desnatura las protenas en
estudio, por lo tanto, puede ser acoplada a zimogramas para la visualizacin de actividad
enzimtica.
Vase tambin[editar]
Complejo proteico.
Interacciones protena-protena.
Protena.
Electroforesis.
Isoelectroenfoque.
Electroforesis bidimensional.