LUCA GRIPPO

Biologa vegetal
Clase 9: Hormonas II
Los mamferos responden a estmulos mediante una cascada de seales, es decir, mediante activacin, en
donde una protena activa a otra de manera secuencial. Hay una molcula seal percibida por un receptor de
membrana o nuclear que gatilla una serie de eventos en cascada que culmina con la activacin de una
respuesta. En cambio, las plantas responden a estmulos exgenos o endgenos por des-represin, es decir,
por una degradacin de represores que liberan factores de transcripcin que activan la transcripcin de genes
blanco. Las plantas censan seales hormonales, las cuales actan a bajas concentraciones (generalmente nM
o pM) y pueden ser parcrinas (acta sobre sus vecinas), autcrinas (acta sobre si misma) y sistmicas (hace
que una planta les avisa a otras clulas sobre un dao, clulas que no necesariamente estn cerca).

La clula malgasta energa sintetizando represores, pero es una estrategia evolutiva que le otorgo a las
plantas una ventaja. Se cree que los represores estn todo el tiempo y son degradados solo cuando llega la
seal. Como las plantas son ssiles (no pueden moverse), se cree que esta forma de respuesta es la ms
rpida ya que esta todo sintetizado, aunque implique un gran costo energtico. Por algo fue conservada
evolutivamente.
As, la transduccin de seales en plantas se da por la des-represin de genes, teniendo un rol centran el UPS,
que regula la actividad o estabilidad de protenas. El complejo SCF es crucial en la respuesta a hormonas o
fitocromos de plantas. La ubiquitina (Ub) es un polipptido de 76 aminocidos que est altamente conservado
en todos los organismos eucariotas. La modificacin covalente de las protenas diana con Ub, segn sea
monoubiquitinacin o poliubiquitinacin, est asociada a diferentes funciones en la clula, entre ellas el control
de la progresin del ciclo celular, biognesis de orgnulos, presentacin de antgenos, respuesta a estrs,
transduccin de seales, trfico de protenas, reparacin del ADN, apoptosis, regulacin transcripcional y la
degradacin a travs del sistema ubiquitina/proteosoma 26S (UPS). La unin de la Ub a las protenas diana se
produce a travs de una cascada enzimtica que comprenden tres enzimas principales: la enzima activadora
de ubiquitina o E1, las enzimas conjugadoras o E2 y las ubiquitin-ligasas (E3). La enzima E1, en una reaccin
dependiente de ATP, forma un enlace tioster a travs de un residuo de cistena con el extremo C-terminal de
la ubiquitina para transferirla de forma activada a la enzima E2. La enzima E2 carga la ubiquitina activada
previamente e interacciona con la E3, quien reconoce especficamente a la protena diana. Finalmente, la

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ubiquitina se une covalentemente a la protena diana a travs de un residuo interno de lisina y el grupo C-
terminal de la Ub.

El complejo E3 ligasa confiere especificidad al proceso de ubiquitinacin a travs del dominio F-Box (esta da
la especificidad no el complejo en s).
El proteosoma 26S es un complejo enzimtico formado por el proteosoma 20S, que contiene los lugares activos
de protelisis, y dos partculas reguladoras 19S compuestas de varias subunidades designada como RPT
(regulatory particle triple A-ATPase). Estas partculas reguladoras son las encargadas de reconocer a las
protenas poli-ubiquitinadas. La protelisis es un proceso dependiente de ATP que se produce una vez hayan
sido eliminados los residuos de Ub por la accin de enzimas de-ubiquitinasas situadas en las tapas del
proteosoma.
Gracias a la secuenciacin del genoma de Arabidopsis, se han podido identificar 2 genes que codifican para
enzimas del tipo E1, 45 genes que codifican para enzimas E2 y unos 1300 genes codificantes para enzimas
E3. Como se coment anteriormente, son las enzimas E3 las que reconocen especficamente a las protenas
diana, dando as especificidad al sistema. Estas E3 se dividen en dos grandes grupos segn sea su dominio
de unin a la protena diana:
RING: la enzima E2 y la protena a degradar quedan anclados en proximidad para que la E2 ceda su
residuo de ubiquitina
HECT: la enzima E3 acepta el residuo de ubiquitina de la E2 y forma un nuevo enlace tioster con la
protena diana para transferirle la ubiquitina

Uno de los tipos de enzimas RING ms estudiados es el complejo SCF (Skp1/Cullin/F-box), que consta de 3
subunidades: CUL1, RBX, SKP1 y protenas con un F-box. En este complejo SCF, la protena CUL1 forma un
eje central en el que se acoplan las restantes subunidades. Se han descrito dos dominios dentro de la estructura
de CUL1: motivos A y B, directamente implicados en la interaccin con las protenas F-box y con las protenas
RBX, una protena con dominio RING, cuya funcin es facilitar la transferencia de Ub desde las enzimas E2
hacia las protenas diana. CUL1 tambin interacciona con la protena SKP1/ASK1 (S-phase kinase-associated

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protein 1), que a su vez establece una conexin directa con el motivo F-box. Estas protenas F-box son las
unidades intercambiables en estos complejos, son las encargadas de reclutar las protenas diana a travs de
su regin C-terminal. Recientemente se han descrito nuevos dominios, especficos de plantas, que
posiblemente estn implicados en el reconocimiento de diversos tipos de protenas diana.
Tanto Aux/IAA como JAZ y DELLA tienen la similitud de que son protenas que reprimen factores de
transcripcin, es decir, cuando se encuentran activas no hay una respuesta. Si se logra controlar la estabilidad
de estos represores se puede regular la respuesta final. En presencia de la hormona, estas protenas van a ser
degradadas y por lo tanto van a dejar de reprimir a los factores de transcripcin, lo que culmina en la generacin
de una respuesta.
Gracias a la secuenciacin del genoma de Arabidopsis thaliana y a su posterior anlisis bioinformtico, se ha
encontrado que aproximadamente un 5% de su proteoma pertenece a este sistema de degradacin
ubiquitina/proteasoma 26S. En Arabidopsis existen ms de 700 protenas F-box distintas, un nmero muy
superior que el encontrado en otros organismos eucariotas (14 en Saccharomyces cerevisiae y 74 en humanos)
lo que sugiere que este sistema de regulacin por protelisis especfica juega un papel muy importante en la
sealizacin de plantas.

Tanto al cido jasmnico (JA), como al etileno (ET) y el cido abscsico (ABA) se los conoce como hormonas
del estrs ya que, para su sntesis, se necesitan determinadas condiciones ambientales. Generalmente en la
planta estn en niveles muy bajos y slo cuando hay un estrs determinado se activan y se sintetizan en mayor
cantidad.

Jasmonatos
El cido jasmnico y sus metabolitos se conocen colectivamente como jasmonatos. Estas son molculas
importantes en la sealizacin por efecto del estrs bitico y abitico. Los jasmonatos pertenecen a una familia
de oxilipinas, cidos grasos con uno o ms tomos de oxgeno derivados de la oxigenacin enzimtica de
cidos grasos tri-insaturados de 16 y 18 carbonos. El jasmonato mejor caracterizado es el cido jasmnico
(JA) el cual puede ser modificado por conjugacin y metilacin y se ha reportado que juega un papel crucial
en la reproduccin. El metil jasmonato (MeJA) es un compuesto voltil que media la comunicacin intracelular
y entre diferentes plantas, modulando respuestas de defensa. Por otra parte, el jasmonoil-isoleucina (JA-Ile)
es la forma activa de la molcula implicada en la sealizacin de los jasmonatos en hojas y posiblemente en
las flores de Arabidopsis.
Los jasmonatos participan en el desarrollo reproductivo de diferentes formas, por ejemplo, las plantas
deficientes en JA son estriles femeninas o masculinas. Estn desarrollados en el desarrollo de tricomas (pelos
en la raz), y defensa contra patgenos. El MeJA inhibe el ciclo celular, regula la accin de hongos necrotrficos
(tomate y frutilla), le da el aroma a las plantas y puede activar respuestas en plantas vecinas.

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Las defensas inducibles slo se inducen en presencia del jasmonato. Un ejemplo de defensas inducibles
indirectas son los compuestos voltiles, los cuales se generan y atraen predadores que pueden oviposicionar
sobre la larva. Contra los patgenos necrotrficos, las defensas son a menudo mediadas por jasmonatos y
tambin etileno. Se conoca anteriormente que cuando se daaba una hoja de una planta de tomate, haba en
las hojas distantes induccin de los genes del cido jasmnico. Haba una respuesta a nivel local y algo que
promova la induccin de genes en sitios alejados. Se demostr que las hojas pueden percibir la oviposicion
ya que los huevos vienen acompaados de secreciones que promueven respuestas, las cuales estn mediadas
por JA.
Las plantas tienen distintos mecanismos por los cuales pueden controlar el nivel de la hormona activa, y, por
ende, controlar la respuesta. Una manera es a travs de la sntesis de la hormona y otra es a partir de la
desactivacin de la hormona. Las plantas en el citoplasma tienen enzimas capaces de modificar el estado
activo de estas molculas simplemente conjugndolo a otro tipo de compuesto. En plantas wt, la forma activa
del cido jasmnico se produce una hora despus del dao y luego decae por la desactivacin de la hormona
ya que un exceso de la hormona puede tener un efecto nocivo en las plantas. El JA inhibe el ciclo celular por
lo que si no se desactiva puede daarla. La enzima JH2 controla el estado activo de JA-Ile y, cuando es
necesario, la desactiva agregndole un grupo OH formando una molcula que no puede actuar hormonalmente
y no se conoce su funcin an. La mutante jh2 hiperacumula JA-Ile luego de las heridas y por lo tanto tiene un
fenotipo de hoja ms pequeas. Esto ocurre con todas las hormonas.

Biosntesis de los jasmonatos

La sntesis de jasmonatos ocurre principalmente en las hojas, aunque se realiza en el resto de la planta, pero
siempre la actividad es mayor en tejidos que se encuentran en crecimiento. Los cidos grasos son liberados
de la membrana plasmtica de los cloroplastos por accin de enzimas fosfolipasas y desaturasas. El cido
graso sufre reacciones de oxigenacin, oxidacin y ciclacin por medio de una lipoxigenasa (LOX2), la aleno
xido sintasa (AOS) y la aleno xido ciclasa (AOC), respectivamente. As se forma el cido 12-oxo-fitodienico

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(OPDA), principal precursor de los jasmonatos, el cual se exporta hacia el peroxisoma, nico orgnulo donde
ocurre la -oxidacin, reducindose por la enzima cido oxo-fitodienico reductasa 3 (OPR3). Posteriormente,
este compuesto es sometido a tres ciclos de -oxidacin para producir el cido jasmnico (JA). El JA es
exportado al citosol por un mecanismo desconocido donde ocurren las diferentes reacciones metablicas que
darn origen a los distintos jasmonatos. Entre las principales transformaciones del JA se encuentra la
metilacin en el carbono 1 para producir el compuesto voltil metil-jasmonato (MeJA), el cual est involucrado
en la sealizacin entre plantas. Otra modificacin relevante es la conjugacin del grupo carboxilo al
aminocido isoleucina para formar el jasmonoil-isoleucina (JA-Ile). En Arabidopsis thaliana, el JA-Ile se
sintetiza por una enzima codificada por el gen JAR1. Las mutantes jar1 se caracterizan por una respuesta
disminuida al JA. Estos resultados indican que el JA-Ile es una seal primaria importante para las respuestas
de defensa y desarrollo.
El JA es una molcula cargada pero pequea, lo que hace posible que pueda ingresar al ncleo sin la
necesidad de transportadores. En el ncleo es percibido por un receptor y se da la sealizacin.
Todas las enzimas que intervienen en la sntesis de la hormona estn altamente reguladas por el estadio de
desarrollo de la planta y por el dao mecnico, el cual induce su sntesis. El pool de molculas activas depende
de la sntesis y degradacin de la hormona.

Percepcin y sealizacin de los jasmonatos

Los jasmonatos y las auxinas, a pesar de ser compuestos qumicamente diferentes, comparten algunos
elementos en las vas de sealizacin para su percepcin y respuesta en las clulas. TIR1 es una protena tipo
F-box que funciona como uno de los receptores en la sealizacin de auxinas. Existen cerca de 700 genes que
codifican para protenas tipo F-box en Arabidopsis thaliana. La mutante coi1 permiti definir el papel de los
jasmonatos en el crecimiento de la planta. La coronatina es una fitotoxina relacionada estructural y
biolgicamente con el Ja-Ile. La mutante coi1 es resistente tanto a la coronatina como al MeJA y su principal
caracterstica es la esterilidad masculina. COI1 codifica para una protena tipo F-box estrechamente
relacionada con TIR1, lo que sugiere que al igual que los represores auxnicos ampliamente estudiados, la
respuesta a los jasmonatos implicara la degradacin de un grupo de represores de los jasmonatos conocidos
como JAZ que poseen el dominio ZIM dependiente de SCFCOI1. El complejo multiproteico SCF es comnmente
denominado signalosoma, pertenece al tipo E3 ubiquitina ligasa que media la ubiquitinacin de protenas para
su degradacin por el proteosoma 26S y tiene la caracterstica de ser inespecfico. Lo que le da especificidad

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al complejo son las protenas F-box, y lo hacen para que no pueda ubiquitinar cualquier protena para
degradarlas. Las protenas F-box que se unen directamente con el blanco de la ubiquitinacin. En el caso de
jasmonatos, COI1 ubiquitina especficamente a los represores JAZ, que actan como reguladores negativos
de la transcripcin de genes de respuesta a jasmonatos, las cuales se unen al factor de transcripcin MYC2,
reprimiendo la respuesta de defensa.
Hay diversas maneras de inhibir un factor de transcripcin. Una es inhibir la dimerizacin, ya que hay muchos
factores de transcripcin que son activos cuando forman dmeros. Otros, en el caso de GA, es unirse al dominio
de factor de ADN (lo hacen las protenas DELLAs), por lo tanto, no pueden unirse a los promotores que quiere
activar.
Una gran cantidad de genes JAZ son autoregulados en respuesta a jasmonatos, indicando un mecanismo de
retroalimentacin negativa. Entonces, al percibirse el dao, el JA acta como un pegamento, comnmente
denominado molecular glue uniendo el complejo JAZ-COI1 mantenindolo pegado y permitiendo que pueda
ejercer su funcin. JAZ tiene un dominio que controlan la degradacin de protenas. La unin estable de JAZ-
COI1 en presencia de la hormona va a permitir que el complejo signalosoma ubiquitine a JAZ y la mande a
degradar.
En ausencia de dao las plantas prcticamente no acumulan JA, hay niveles indetectables
En presencia de dao las plantas comienzan a acumular JA, se une al complejo signalosoma, ste
ubiquitina a las JAZ y se degradan y el signalosoma se recicla
Existe la posibilidad de que las protenas JAZ desacoplen a los factores de transcripcin del complejo
transcripciones (ARN pol II, etc), lo cual inhibira la transcripcin. Esto no se sabe si se realiza.
Hay una molcula que se sabe que tiene la capacidad de inducir la respuesta a JA que es la coronatina, la
cual se une al complejo COI1-JAZ con alta afinidad, donde el jasmonato conjugado a isoleucina (JA-Ile) es la
molcula activa. La coronatina es una hormona producida por bacterias y es 1000 veces ms potente que el
JA-Ile. Adems, tiene la ventaja de ser muy eficiente a bajas concentraciones, es ms eficiente incluso que la
propia hormona JA-Ile. Se utiliz esta molcula seal para hacer un screening y tratar de encontrar mutantes
deficientes en la percepcin de JA. Se vio que la mutante coi1 es insensible tanto a MeJA como a coronatina.
El complejo SCFCOI1 sirve como receptor para el JA-Ile para estabilizar la interaccin entre la protena tipo F-
box y su sustrato, lo cual permite la degradacin del represor JAZ y la liberacin del factor de transcripcin
MYC2, ocurriendo entonces la activacin de los genes de respuesta a jasmonatos.

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El reciclaje del signalosoma va a controlar el nivel de represor. En el caso de los jasmonatos, el signalosoma
se asocia a COI1. En el caso de GA, se asocia a las protenas DELLA y, en el caso de las auxinas se asocia a
TIR. Todas estas protenas son F-box.

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La seleccin natural hizo que este mecanismo de respuesta hormonas basado en la des-regulacin prime sobre
otros. Las plantas tienen todos los represores y los factores de transcripcin sintetizados, lo cual tiene un costo
energtico enorme para la planta y no parecera ser eficiente. Sin embargo, por alguna razn debe ser el
mecanismo ms eficiente. Esta todo sintetizado pero reprimido. Una explicacin posible es que este tipo de
respuesta son mas rpidas, ya que las plantas son ssiles y no pueden escapar del peligro. Esto es imposible
de demostrar.
Las protenas JAZ poseen dos dominios conservados, el dominio JAS y el dominio ZIM. El dominio JAS
interacciona con COI1 y MYC2 mientras que el dominio ZIM est involucrado en la dimerizacin de la protena
JAZ y en la interaccin con la protena NINJA.
La expresin de genes de Ja-Ile est regulada por el activador transcripcional MYC2 que interacciona
fsicamente con el dominio ZIM de JAZ. Las protenas JAZ son degradadas y la expresin de los genes
dependientes de JA-Ile se activa.
Se sabe que la represin de la regulacin de los genes blanco se da a travs del reclutamiento de un complejo
corepresivo grande denominado TOPLESS (TPL), el cual recluta histonas acetilasas que van a controlar la
acetilacin de la secuencia downstream y entonces silenciar a los genes. La interaccin con TPL no se da de
forma directa, sino que se da a travs de una protena puente denominada NINJA. NINJA acta como un
represor transcripcional cuya actividad es mediada por un motivo de unin a TPL llamado EAR. Tanto las
protenas NINJA y TPL funcionan como reguladores negativos de la respuesta a jasmonatos. Las protenas
TPL afectan mltiples vas de sealizacin a travs de la interaccin de protenas adaptadoras especficas.
TPL es el nico componente de sealizacin compartido por tres vas. Se puede unir a la protena NINJA de
los jasmonatos, a la protena AUX/IAA de la va de las auxinas y con AFF de la va del cido abscsico. As
reprime los genes de estas 3 vas.

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Cada insecto ataca de forma diferente a la planta. Una respuesta de defensa apropiada a un estrs abitico
requiere un reconocimiento inicial. Los patgenos son reconocidos cuando patrones conservados de molculas
microbianas llamadas patrones moleculares asociados a patgenos o microbios (MAMPs o PAMPs) son
detectados por receptores de reconocimiento de patrones (PRRs) en la superficie de la planta husped,
desencadenando una inmunidad especifica (PTI). Los patrones moleculares asociados al dao (DAMPs)
son molculas endgenas producidas por la planta luego de la infeccin son tambin reconocidas por los PRR
para desencadenar reacciones defensivas. Los patgenos pueden evadir esta inmunidad innata a travs de la
accin de protenas efectores que, mediante la entrada a la clula husped, suprimen la inmunidad. Los
genotipos de algunas plantas contienen protenas de resistencia a la enfermedad (R) que reconocen
especficamente patgenos efectores generando una inmunidad efectora (ETI). PTI se basa en un
reconocimiento no especifico de molculas microbianas mientras que ETI se basa en el reconocimiento
especifico de patgenos.
La ovoposicin representa otra oportunidad para la planta de detectar insectos herbvoros. Las seales
asociadas a ovoposicin actan de manera similar a las MAMPs para reconocer y predecir el ataque herbvoro.
Los efectores de ovoposicin pueden ser producidos por los insectos para suprimir la respuesta inmune de la
planta.
Se ha demostrado que ciertas secreciones orales que producen los insectos, cuando entran en contacto con
una herida en la planta, producen compuestos denominados patrones moleculares asociados a herbvoros
(HAMPs) que se cree que son reconocidos por los PRRs en la superficie de la clula generando una inmunidad
inducida por HAMPs (HTI).
Los herbvoros interrumpen la integridad de los tejidos vegetales y muchas plantas desencadenan respuestas
de defensa por una herida mecnica conduciendo a una resistencia inducida por heridas (WIR).

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Se ha desarrollado la creacin de frmacos agonistas conformados por las molecular glue que reestablecen la
unin entre dos partes del complejo, las junta y las mantiene estables. Por lo tanto, en vez de utilizar frmacos
que activan una fosfatasa o una quinasa, se utiliza una molecula que, teniendo el receptor mutado vuelva a
unirse al receptor en presencia de la hormona.

Etileno
El etileno es una fitohormona implicada en la respuesta a estreses biticos y abiticos. Sin embargo, tambin
se la ha relacionado con el crecimiento y desarrollo de las plantas, con la germinacin de las semillas, el
desarrollo de races laterales, la maduracin de los frutos y la senescencia. El etileno tiene las caractersticas
de ser gaseoso, pequeo, difusible y voltil, lo que le permite poder sealizar plantas vecinas.
El etileno regula la maduracin de algunos frutos, conocidos como frutos climatricos. Estos frutos
experimentan un significativo y rpido incremento en la produccin de etileno, que precede a un brusco
aumento en la produccin de CO2 durante la maduracin. En los frutos no climatricos, la produccin de CO2
decrece gradualmente a medida que se produce la maduracin. Los tomates con un contenido en etileno menor
de lo normal maduran ms despacio. Dichos frutos crecen y suelen perder la clorofila, pero muestran un menor
enrojecimiento y una gran resistencia a pasarse y arrugarse, por lo que se mantienen frescos y sabrosos
durante varias semanas despus de su compra.
En esta hormona tambin hay des-represin, pero de una forma distinta.

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Biosntesis de etileno
El etileno se produce en todas las partes de la planta. La biosntesis inicia con la conversin de metionina a S-
adenosil metionina (SAM) por adicin de adenina. SAM es un metabolito primario, crucial en el metabolismo
de poliaminas y precursor de muchas otras rutas, como las de biosntesis de lignina y la metilacin de los
cidos nucleicos y protenas, por tanto, abundante dentro de los tejidos de la planta. SAM se convierte luego
en cido 1-aminociclopropano-1-carboxilico (ACC) y 5-metiltioadenosina (MTA), reaccin catalizada por la
ACC sintasa (ACS), que es una enzima perteneciente a la familia de las dependientes de piridoxal-5-fosfato y
que comparte un nivel de secuencias similares con otros miembros de esta familia, como aspartato
aminotransferasa (AATasa) y tirosina aminotransferasa (TATasa), y la cual es considerada como enzima clave,
ya que es inducida por muchos estmulos y mantiene un rol en la regulacin de la produccin de etileno en
muchos tejidos de plantas. Adems, la MTA es reciclada a metionina, lo cual permite que los niveles de
metionina permanezcan relativamente inalterados incluso durante altas tasas de produccin de etileno.
Finalmente, el ACC es oxidado por la enzima ACC oxidasa (ACO) para formar etileno. La enzima est presente
en la mayora de los tejidos a niveles muy bajos, pero sufre incrementos en la actividad de maduracin de la
fruta y en la respuesta a la exposicin al etileno, adems, parece estar asociada a la membrana y su actividad
se pierde con el fraccionamiento celular. La oxidacin en cuestin requiere la presencia de oxgeno y bajos
niveles de dixido de carbono para activar la ACO.

Existen en Arabidopsis thaliana 9 genes que codifican protenas homologas a la ACC sintasa. Esta enzima,
adems, funciona como dmero existiendo diferentes combinaciones posibles que pueden llegar a formar 45
dmeros diferentes y producen velocidades de sntesis distintas (determina la capacidad de sintetizar etileno),
por lo que existe una regulacin que determina qu dmero se va a formar segn las necesidades de la planta.

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La metionina no se convierte en un reactivo limitante para la sntesis de etileno ya que la misma se recicla en
el ciclo de Yang, regenerndose.

La enzima VAS1 controla tanto la sntesis de etileno como de auxinas, siendo un puente de conexin entre
ambas vas. Esta enzima recicla la L-metionina para ingresar al ciclo de Yang y realiza la conversin del 3-IPA
en triptfano.

Para dilucidar la va de transduccin de seales del etileno se requiri del aislamiento de mutantes afectadas
de los intermediarios que la integran. Cabe mencionar que la obtencin de dichas mutantes en Arabidopsis ha
dependido casi exclusivamente del fenotipo en la respuesta triple que se presenta cuando las plntulas
mutantes crecen en la oscuridad que contrasta con el fenotipo etiolado: crecimiento preferencial del hipoctilo
en la oscuridad, observado en las plntulas silvestres (wt) expuestas al aire. Las mutaciones aisladas a travs
del fenotipo alterado en la respuesta al etileno pertenecen a dos grupos: insensibles y de respuesta constitutiva
al etileno. Un ejemplo de las primeras es la mutante etr1-1, que presenta ganancia de la funcin en un receptor
y ein2, con prdida de la funcin en un elemento de la va de sealizacin. Mientras que las mutantes de
respuesta constitutiva a etileno mostraron el fenotipo de hipersensibilidad a etileno, tanto cuando crecen en

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aire como en etileno; un ejemplo de ellas son las eto3 con una sobreproduccin de etileno. Alternativamente,
tambin existen mutaciones en la ruta de transduccin de seales como la ctr1 que da como resultado la
prdida de la funcin del regulador negativo de la va de sealizacin manteniendo constitutivamente activada.

La cascada de sealizacin de etileno descrita hasta la fecha consta de cuatro componentes clave: el receptor
ETR1, el regulador negativo de la ruta CTR1, el intermediario EIN2 y el factor de transcripcin EIN3. Existen
otras protenas que pueden realizar la misma funcin debido a su alta similitud con los componentes de la ruta
de etileno; tal es el caso de ETR2, ERS1, ERS2 y EIN4 que tambin funcionan como receptores, o EIL1, EIL2,
EIL3 y ERFs, que lo hacen como factores de transcripcin.
En ausencia de etileno los factores de transcripcin EIN3 y EIL1 son degradados por el signalosoma
por lo tanto no hay respuesta
En presencia de etileno los factores de transcripcin EIN3 y EIL1 son estables y activan la respuesta
a etileno

ETR1 y ETR2 son protenas transmembranales del retculo endoplsmico que comprenden el sitio de unin a
etileno donde, al parecer, la unidad funcional de percepcin de etileno es un dmero. En la activacin de dichos
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receptores implica la autofosforilacin de la protena en un residuo conservado de histidina, con la posterior

transferencia de ese grupo fosfato a un residuo de cido asprtico dentro de un dominio receptor. Dicha
actividad es tpica de sistemas bacterianos de dos componentes, lo que sugiere que podra haberse heredado
cuando se llev a cabo la simbiosis que condujo al origen de los cloroplastos. La unin de alta afinidad del
etileno est mediada por un cofactor de cobre coordinado por dos aminocidos conservados (Cis65 e His69).
La unin del etileno al receptor ETR1 lo activa y le permite la interaccin y activacin de la protena CTR1.
El gen CTR1 codifica una protena cuya mitad C-terminal presenta un dominio similar al de las serinquinasas.
Estas ltimas participan en la cascada de las protenas quinasas activadas por mitgenos (MAPK) en animales,
la cual consta de varias MAPK quinasa quinasa (MAPKKK) que fosforilan y activan a las MAPK quinasas
(MAPKK), las cuales a su vez activan a las MAPK que transmitirn la seal fosforilando a sus blancos. Se ha
sugerido que CTR1 podra funcionar como una MAPKKK e iniciar la sealizacin a travs de la cascada MAPK
en Arabidopsis, lo que culminara con la inactivacin de EIN2. As, las mutaciones en CTR1 que afectan su
actividad provocan un fenotipo de respuesta constitutiva a etileno. EIN2 codifica una protena integral de
membrana cuya regin N-terminal presenta una alta similitud con la familia de transportadores de cationes. La
regin N-terminal es transmembranal. Las mutantes ein2 exhiben el fenotipo insensible a etileno ms fuerte
que el resto de las mutantes resistentes a etileno aisladas en Arabidopsis, lo que corrobora su papel crtico en
la sealizacin. Los experimentos para demostrar la posible actividad de transportador de metales de EIN2 de
plantas en sistemas heterlogos, mostraron que EIN2 de Arabidopsis no complementa cepas de levaduras
deficientes en canales de metales. El dominio C-terminal de EIN2 tiene la capacidad de inactivar al proteosoma.
Por otra parte, corriente abajo de EIN2 se ha reportado una protena blanco conocida como EIN3, con
caractersticas de factor de trascripcin. EIN3 se encuentra en el ncleo y presenta dominios acdicos ricos en
prolina y glutamina. Las mutaciones con prdida de funcin para EIN3 presentan un fenotipo insensible a
etileno, lo que sugiere que funciona como un regulador positivo de la transduccin de seales del etileno. EIN3
es miembro de una familia que contiene al menos otras tres protenas parecidas a EIN3, las cuales se unen
como homodmeros a un elemento promotor en el gen ERF1 promoviendo su transcripcin. Los ERFs son
tambin factores de transcripcin que inducen la expresin de genes relacionados a la patognesis, como la
b-1-3-glucanasa, la quitinasa bsica y la defensina. De esta manera, EIN3 y los EILs estimulan la transcripcin
de genes de respuesta a etileno y de otros factores de transcripcin como los ERFs. Estos ltimos a su vez
tambin promueven la transcripcin de miembros de su misma familia, sugiriendo la existencia de una compleja
red de regulacin transcripcional en la ruta de sealizacin del etileno.
Se han obtenido mutantes en los genes etr1, etr2, ein2, ein3, ein4, etc y se obtuvieron plantas insensibles al
etileno, en donde no se observa triple respuesta. Tambin se han obtenido mutantes con una respuesta
constitutiva al etileno mostrando la triple respuesta en ausencia de la hormona. ETR1 fue el primer receptor
caracterizado, codifica para un receptor de etileno y est asociado a la membrana del retculo endoplsmico.

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Si se hace una cruza entre una mutante etr1 (insensible al etileno) y una mutante ctr1 (respuesta constitutiva),
se obtiene una planta doble mutante con el mismo fenotipo que ctr1, indicando que este gen acta downstream
que ETR1. Recordar que la respuesta constitutiva hace referencia a que en presencia de aire crece como si
hubiera etileno.

Al transformar una planta wt con una versin mutada de etr1, es decir, con etr1-1 se puede observar que tienen
ms o menos insensibilidad al etileno. Esto habla del carcter dominante de la mutacin porque ya en
heterocigosis se puede ver el fenotipo de la mutacin. Un mutante en el receptor puede tener un fenotipo
dominante ya que los receptores son reguladores negativos de la respuesta. Entonces, sin etileno la respuesta
est apagada y cuando hay etileno unido, el receptor no apaga la respuesta y se estabilizan los factores de
transcripcin.

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El efecto dominante negativo de estas mutaciones se origina porque estas mutaciones siempre apagan a los
receptores. Son mutaciones en las que aun en ausencia de etileno van a desacoplar a los receptores. Sabiendo
que en Arabidopsis hay 5 receptores, para que una mutacin en un receptor genere un fenotipo habla de que
es dominante tambin. Aunque haya otros receptores funcionales, el receptor mutado los desacopla
completamente y aumenta la estabilidad de los factores de transcripcin.

La triple respuesta al etileno

Los drsticos efectos del etileno sobre el crecimiento y desarrollo de plntulas fueron las bases para el
descubrimiento de la accin fisiolgica de esta fitohormona, nica por su naturaleza gaseosa. En stas provoca
la denominada triple respuesta, que consiste en la reduccin de la elongacin, incremento del desarrollo
lateral y fomento del hbito de crecimiento en horizontal (cambio en la orientacin del desarrollo), originando
hipocotilos ms cortos, gruesos y con gancho apical. Este tipo de estructuras, se inducen igualmente cuando
el crecimiento de las plntulas se obstaculiza mecnicamente, por lo que el etileno podra controlar las
respuestas de las plantas en dichas condiciones. Esta morfologa particular facilita y protege al meristemo
apical durante la emergencia de la plntula del suelo. La curvatura del gancho apical se debe a que las clulas
de la parte interna sintetizan ms etileno, esto trae consigo una redistribucin de auxina que lleva a un menor
desarrollo de estas clulas, producindose un cambio en la direccin de crecimiento. La accin del etileno en
este proceso est modulada por la luz, cuya presencia restaura la apertura del gancho. El efecto del etileno
sobre la elongacin y engrosamiento se debera a una alteracin en la deposicin de las microfibrillas de
celulosa.
Tres mutantes afectadas en la regulacin de la biosntesis del etileno se identificaron en Arabidopsis basadas
en un fenotipo de triple respuesta constitutiva al etileno, que fue consecuencia de una sobreproduccin de
etileno (mutantes eto = ethylene overproduction). Las mutantes produjeron de 10 a 40 veces ms etileno que
las plantas wt. ETO1 es un componente del complejo ubiquitin-ligasa. Para tener una triple respuesta

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constitutiva al etileno, EIL1 y EIN3 son ms estables, por lo tanto, ETO1 va a estar asociado al proteosoma y
por lo tanto no se mandan a degradar las protenas y se genera una respuesta constitutiva. La mutante eto1
posee una mutacin recesiva y las mutante eto2 y eto3 poseen mutaciones dominantes. La mutante eto2 tiene
una mutacin puntual en el gen de la ACS5 (ACC sintasa 5) y la mutante eto3 tiene una mutacin puntual en
el gen de la ACS9 (ACC sintasa 9). Adems, en ambas mutantes eto1 y eto3 el estado estacionario de todos
los transcriptos de ACS examinados no eran significativamente mayores a los observados en las plantas wt a
pesar de que el nivel de actividad de ACS en las mutantes eto1 y eto3 etioladas se vio aumentado. Estos
resultados sugieren que estas mutantes tambin se ven afectadas en la regulacin post transcripcional de ACS.
Si la ACS se encuentra estable quiere decir que la planta tambin est sintetizando ms etileno, por lo tanto,
EIN3 y EIL1 van a estar estables y van a promover la triple respuesta. Las ACS estn sujetas a protelisis
rpida ya que su turnover es sumamente rpido y son tejido-especficas. Su actividad depende de la
dimerizacin, y sta va a depender de en qu sitios se expresan.

En presencia de aire, el estado basal es de activacin y la mutacin genera que los factores de transcripcin
sean estables y se promueve la triple respuesta.

Acdo abscsico
Es una hormona relacionada con la respuesta al estrs hdrico: sequia, salinidad, falta de nutrientes, pH
inadecuado, etc. Fue identificado por primera vez en 1963 mientras se estudiaban los procesos de abscisin
de las hojas del algodn.
En lo referente a la dormancia de las semillas, el ABA promueve la produccin de protenas de reserva en la
semilla y aumenta su concentracin a medida que la semilla madura. Ms tarde, impide la germinacin durante
los periodos de temperaturas fras, hasta que un aumento en la sntesis de giberelinas permite a las semillas
germinar. En algunas plantas, mutantes de un solo gen reducen la concentracin de ABA o reducen su efecto
sobre la germinacin de las semillas, lo cual da lugar a una germinacin prematura.
Durante los periodos de escasez de agua, el ABA promueve el cierre de las estomas, evitando as una mayor
prdida de agua. Todava no se comprende del todo la accin del ABA en las clulas oclusivas, pero, segn
parece, conlleva al menos tres rutas de transduccin de seales. El hecho de que los estomas se abran o se
cierren responde a un conjunto de seales medioambientales, lo cual podra explicar la complejidad del
mecanismo de accin del ABA.

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Biosntesis del cido abscciso

En vegetales superiores se aisl ABA de hojas, frutos, semillas, brotes, races y tallos y en exudados de floema
y xilema (es un regulador ubicuo en plantas vasculares). Su sntesis se ve favorecida por ciertas condiciones
ambientales como sequa, frio excesivo y condiciones patolgicas.
Tiene lugar principalmente en los plstidos (cloroplastos) y citosol. Presenta dos rutas biosintticas ambas
derivadas del mevalonato. Una involucra la ciclacin directa de un precursor C-15, mientras que en la otra se
forma en primer lugar un carotenoide C-40 seguido de metabolismo oxidativo que conduce a la estructura C-
15. En plantas el carotenoide 9-cis-neoxantina es el principal precursor de ABA. Deriva de la violoxantina,
luego se realiza el clivaje de la cadena polinica para generar xantoxina, la cual es transformada en ABA va
ABA-aldehdo.

Este fitorregulador se sintetiza en races y hojas maduras y se transporta por floema en forma ascendente y
por xilema desde las hojas. En algunos mutantes de tomate y en Arabidopsis se demostr que hay formacin
de ABA a partir del ABA alcohol.

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Percepcin y sealizacin del cido abscsico

Hasta hace unos pocos aos no se tena definido el mecanismo de respuesta al ABA en plantas. El ABA no
involucra protenas F-box. Se examinaron minuciosamente bibliotecas qumicas y se vio que la pirabacter
funciona como un agonista selectivo del ABA. Despus de un escrutinio gentico contra la pirabacter, se
identific al gen pirabactin resistance 1 (PYR1). Otro grupo de investigadores, en un escrutinio de doble hbrido
de levadura aislaron una protena que interacta con ABI1, a la cual denominaron regulatory component ABA
1 (RCAR1). Posteriormente, en el genoma de Arabidopsis se identific que PYR y RCAR corresponden a la
misma familia de genes formada por 14 miembros, los cuales se conocen como PYR1 y parecidos a PYR1
(PYL). Tambin se report que las protenas PYR/PYL/RCAR podan unirse al ABA e interactuar con las
fosfatasas de la familia 2C (PP2C) del grupo A, inhibiendo as la actividad de las PP2C. Los resultados antes
mencionados permitieron sugerir que las PYR/PYL/RCARs funcionan como una subunidad reguladora negativa
de las PP2C.

El ABA se aloja en un pocket hidrofbico de PYR, entonces, formando este complejo se puede asociar a
PP2C y permite que la serinquinasa se autofosforile y fosforile otras protenas por medio de canales inicos
(K+ y Cl-), proceso que culmina con el cierre estomtico.
Debido a que las fosfatasas PP2C modulan negativamente la sealizacin de ABA, se propuso que la unin
de PYR/PYL/RCAR al ABA activa su va de sealizacin. La funcin de las distintas PYR/PYL/RCARs se
confirm por la insensibilidad al ABA de la mutante cudruple pyr1 pyl1 pyl2 pyl3 y, en forma contrastante,

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cuando se sobre-expresaron las protenas RCAR1/PYL9, RCAR3/PYL8 o RCAR8/PYL5 en Arabidopsis se

produjo hipersensibilidad al ABA y elevada tolerancia a la sequa.
En complemento, en un escrutinio gentico para aislar mutantes de Arabidopsis insensibles al ABA, se
identificaron dos genes: ABA-insensitive (ABI1) y ABI2, que codifican las fosfatasas PP2C. Se observ que las
mutantes abi1-1 y abi2-1 eran insensibles al ABA en varios tejidos y en diferentes etapas de desarrollo,
sugiriendo con ello que las fosfatasas PP2C actan como reguladores globales de la sealizacin del ABA.
Recientemente, se determin que la mutante de la fosfatasa PP2C, abi1-1, es incapaz de interactuar con los
receptores PYR/PYL/RCAR, lo que causa que dichos receptores no puedan inactivar a las fosfatasas que
mantienen la va apagada.
La identificacin y caracterizacin de las fosfatasas PP2C ha mostrado la importancia de los eventos de
fosforilacin en la sealizacin del ABA, donde varias quinasas han sido aisladas y tipificadas como
componentes de esta va. Entre ellas, existen 10 quinasas SnRK2, las cuales son desfosforiladas
eficientemente por las fosfatasas tipo ABI1, inactivndolas.
Se identific que OST1 es una serinquinasa que fosforila canales inicos que expulsan Cl - regulando su
actividad. Se expulsa el Cl-, se relaja la clula y los estomas se abren.
Quinabacter es un compuesto diseado en base a pirabacter que hace que la planta sea resistente a la sequa.
Tambin, se encontraron compuestos como la mandipropamid que son ms efectivos que el ABA y son
baratos de sintetizar y provocan una respuesta ms eficaz.
En ausencia de ABA PYR y ABI1 se encuentran libres, inactivando la respuesta de sealizacin
del ABA e inhibiendo las respuestas de las fosforilaciones
En presencia de ABA PP2C interacciona con ABI1 produciendo la liberacin de la serinquinasa
SnRK2 que se autofosforila. sta fosforila una serie de factores de transcripcin de los genes de
respuesta a ABA. Adems, se produce la apertura de canales inicos, por su fosforilacin, de Ca2+ y
de Cl-, despolarizando la membrana. El incremento de Ca2+ en el citosol activa la salida de Cl- e inhibe
la de los canales de entrada de K+. Este flujo neto de cargas se traduce en una despolarizacin de la
membrana, promoviendo el cierre automtico de estomas (espacio apoplstico). Se produce gracias a
que la quinasa activa la protena OST1 que acta directamente sobre el canal inico SLAC1
fosforilandolo.

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Relacin antagnica entre el ABA y el etileno

La interaccin entre ABA y etileno en las plantas se ha caracterizado a distintos niveles. Por ejemplo, existe un
reporte que muestra que las mutantes deficientes de ABA, flacca y notabillis de tomate, contienen ms del
doble de etileno que las plantas silvestres. Las mutantes flacca y notabillis presentan tamao pequeo, biomasa
reducida, tallo corto, hojas pequeas y formacin de races adventicias comparadas con plantas normales, las
cuales son caractersticas tpicas de una repuesta aumentada al etileno. Tambin se observ que el tratamiento
de dichas mutantes con tiosulfato de plata, un inhibidor de la accin del etileno, restaura parcialmente el
crecimiento del follaje en las mutantes mencionadas. Esta informacin sugiere que el efecto causado por la
deficiencia de ABA en el follaje puede ser atribuido a una sobreproduccin de etileno. Respecto al efecto de la
alteracin en la sealizacin del etileno, se ha reportado que las mutaciones con prdida de la funcin en el
gen EIN2 muestran un incremento en la produccin de ABA en Arabidopsis. Adems, se ha observado que las
mutaciones en CTR1, que inducen una respuesta constitutiva a etileno, y la EIN2, que provoca insensibilidad
a etileno, aumentan o suprimen respectivamente el fenotipo de resistencia a la germinacin de la mutante de
Arabidopsis abi1 cuando se suplementa con ABA de manera exgena. Sin embargo, la mutacin en EIN2 no
mostr un efecto supresor significativo en las mutantes abi3 bajo las mismas condiciones. Lo anterior indica
que la cascada de sealizacin del etileno definida por ETR1, CTR1 y EIN2 inhibe la sealizacin de ABA
probablemente cascada arriba del factor transcripcional ABI3 durante la germinacin de la semilla.

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La interaccin del ABA-etileno modula el crecimiento y desarrollo de las plantas de una manera antagnica,
donde cada una de estas fitohormonas puede regular la concentracin de la otra. De esta forma, cuando una
de las dos hormonas pierde o incrementa la capacidad de ejercer su efecto en la planta, el cambio fenotpico
observado es el resultado de la alteracin de la seal de ambas hormonas, ya que stas se regulan entre s.
La mayora de las evidencias de la interaccin ABA-etileno presentadas en esta revisin muestran que la
regulacin principal se efecta a travs de la va de biosntesis de ambas hormonas, en la que el gen EIN2
juega un papel fundamental. Adems de la modulacin transcripcional reportada, el hecho de que ambas rutas
de sealizacin utilizan cascadas de fosforilacin para transmitir la seal abre la posibilidad de una regulacin
post-transcripcional entre ellas.

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