En que consiste la coloracin gran?

:El cristal violeta (colorante catinico)

penetra en todas las clulas bacterianas (tanto gram positivas como gram negativas) a
travs de la pared bacteriana. El lugol es un compuesto formado por I2 (yodo) en equilibrio
con KI (yoduro de potasio) y Sl (Siulterio), los cuales estn presente para solubilizar el
yodo, y actan de mordiente, haciendo que el cristal violeta se fije con mayor intensidad a
la pared de la clula bacteriana. El I2 entra en las clulas y forma un complejo insoluble en
solucin acuosa con el cristal violeta..
La mezcla de alcohol-acetona que se agrega, sirve para realizar la decoloracin, ya que en
la misma es soluble el complejo I2/cristal violeta. Los organismos gram positivos no se
decoloran, mientras que los gram negativos s lo hacen.
Para poner de manifiesto las clulas gram negativas se utiliza una coloracin de contraste.
Habitualmente es un colorante de color rojo, como la safranina o la fucsina. Despus de la
coloracin de contraste las clulas gram negativas son rojas, mientras que las gram
positivas permanecen violetas.
La safranina puede o no utilizarse, no es crucial para la tcnica. Sirve para hacer una
tincin de contraste que pone de manifiesto las bacterias gram negativas. Al trmino del
protocolo, las gram positivas se vern azul-violceas y las gram negativas, se vern rosas
(si no se hizo la tincin de contraste) o rojas (si se us, por ejemplo, safranina).
Algunos microorganismos retienen el colorante violeta, an despus de tratarlos con un
decolorante, y el color no se modifica al aadir ste; otros pierden con facilidad el primer
tinte, y toman el segundo. Los que fijan el violeta, se califican de gram positivos, y los que
pierden la primera coloracin y retienen la segunda, de gram negativos. Basndonos pues,
en la reaccin gram, podemos clasificar a los microorganismos en uno de los dos grupos.
Los colorantes de p-rosanilina son los que mejores resultados dan en la coloracin gram.
Los representantes ms usados de este grupo son violeta de metilo y violeta cristal o de
genciana. En realidad, violeta de metilo es el nombre atribuido al compuesto tetrametil-p-
rosanilina.
El matiz de color de la p-rosanilina se intensifica al aumentar el nmero de grupos metilo
en la molcula; por consiguiente, de los tres grupos, el tono ms oscuro es la hexametil-p-
rosanilina (violeta cristal), y el tinte ms ligero, la tetrametil-p-rosanilina (violeta de metilo).
Los nombres violeta de metilo 3R, 2R, R, B, 2B, 3B, etc., se refieren al nmero de grupos
metilo contenidos. La letra R indica matices rojos, y la letra B, tonos azules. El violeta de
cristal contiene seis grupos metilo, y se considera como el mejor colorante primario para
teir por el mtodo de Gram.
La facultad de las clulas para tomar la coloracin gram no es propia de toda sustancia
viviente, sino que se limita casi en absoluto a hongos y bacterias. As vemos que las
clulas de plantas y animales superiores no conservan la primera coloracin; los mohos se
tien con cierta irregularidad; los grnulos de micelios propenden retener el colorante. La
reaccin de Gram no es infalible ni constante; puede variar con el tiempo del cultivo y el pH
del medio, y quiz por otras causas.

Que son bacterias gram positivas y gran negativas?:

Gran positivasLa pared celular que rodea a las bacterias es compleja y
existen dos formas bsicas: pared celular grampositiva con una
gruesa capa de pptidoglucano y una pared gramnegativa con una
delgada capa de pptidoglucano, as como una membrana externa.
Algunas bacterias carecen de pared celular y compensan su ausencia
sobreviviendo tan solo al interior de clulas del organismo anfitrin o
en un ambiente hipertnico.

Para clasificar a las bacterias debemos tener en cuenta su tamao,

forma, disposicin espacial, propiedades.

Se encuentran en todos los lugares de nuestro planeta, en al agua

dulce y salada, por tanto viven en el aire, agua y tierra, y se les halla
tambien en los alimentos y en el exterior y el interior de los seres
vivos.

Encontramos tambin bacterias que pueden provocar enfermedades

potencialmente mortales. La enfermedad puede deberse a los efectos
txicos de los productos bacterianos o a la invasin de regiones
corporales que acostumbran a ser estriles.
DIFERENCIAS MOLECULARES ENTRE UNA BACTERIA GRAN
POSITIVA Y OTRA GRAN NEGATIVA.
BACTERIAS GRAM BACTERIAS GRAM NEGATIVAS
POSITIVAS
Poseen una pared celular Poseen una pared celular ms
interna y una pared de compleja:
peptidoglucano. -pared celular interna
*Peptidoglucano: es un -pared de peptidoglucano
exoesqueleto que da - bicapa lipdica externa
consistencia y forma esencial
para replicacin y supervivencia
de la bacteria.
No tiene membrana externa Membrana externa: forma un
saco rgido alrededor de la
bacteria, mantiene estructura y
es barrera impermeable a
macromolculas, ofrece
proteccin en condiciones
adversas

Espacio periplasmtico: espacio

No tiene espacio periplasmtico
La red de murena est muy
desarrollada y llega a tener
hasta 40 capas
La penicilina mata a las gram
positivas, ya que bloquea la
formacin de enlaces peptdicos
entre las diferentes cadenas del
peptidoglucano
entre la superficie externa de la
membrana citoplasmtica y la
interna de la membrana externa.
La red de murena presenta una
sola capa
La penicilina no mata a las Gram
negativas, a causa de la capa de
lipopolisacridos situada en la
parte externa de la pared celular.
 Contiene LPS: estimulador de
No contiene LPS respuestas inmunes: activa
clulas B, liberacin de IL, FNT,
IL 6 por macrfagos.
En la tincin de Gram, retienen Quedan decoloradas.
la tincin azul

Conservan el complejo Pierden el complejo

yodocolorante yodocolorante

Pueden ser anaerobios o aerobios

Son esporulantes y no
esporulantes, como
Streptococcus, Cisteria, Frankia.

Poseen otros componentes: Poseen protenas con

cidos teicoicos y lipoteicoicos, concentraciones elevadas.
y polisacridos complejos.

En q consiste la coloracin acido alcohol resistente?: cido-

alcohol resistencia es la propiedad fsica de algunas bacterias a la resistencia a la
decoloracin de la fucsina bsica (rojo) la cual penetra en la clula por accin del fenol y el
calor.
Las bacterias cido-alcohol resistentes no pueden ser clasificados segn la tincin de
Gram, la cual es la tcnica ms comn en la microbiologa contempornea, sin embargo
puede ser teido con algunas tinciones concentradas combinadas con calor. Una vez
teida tiene la capacidad de resistir la decoloracin de una combinacin de alcohol- cido,
el cual es el decolorante ms comn en los protocolos de tincin de bacterias, de donde
viene el nombre Alcohol-cido resistente.
La alta concentracin de cido micolico en la pared celular es la causante, como las
bacterias del gnero Mycobacterium, de la baja absorcin y alta retencin de la tincin
(fucsina). La forma ms comn para poder identificar este tipo de bacterias es a travs de
la tcnica de tincin de Ziehl-Neelsen, donde la bacteria queda teida en rojo y se agrega
una tincin de contraste de nombre azul de metileno la cual permite apreciar de mejor
forma la bacteria.

Que es la coloracin giemsa?: La tincin de Giemsa (pr. gumsa), ideada

por el alemn Gustav Giemsa, es un mtodo habitual para el examen
de frotis sanguneos, cortes histolgicos y otro tipo de muestras biolgicas. Este mtodo
tiene utilidad sobre todo para poner de manifiesto las rickettsias localizadas dentro de las
clulas huspedes. La coloracin de Giemsa se emplea tambin para teir frotis de sangre
en el examen para protozoos. Se pueden emplear, como variaciones, otras coloraciones
como es la tcnica de citoconcentracin para parsitos sanguneos, la cual tiene un bajo
coste y ofrece la posibilidad de aislar e identificar en el mismo sedimento el parsito
principal, con excepcin de los trofozoitos jvenes y el Plasmodium falciparum; tambin se
emplea la tincin de Wright. Este mtodo de tincin permite tambin la tincin diferencial
de zonas con un alto contenido de ADN, y concretamente de uniones A-T. Esto permite
distinguir perfectamente en microscopio ptico el ncleo celular, los cromosomas durante
la mitosis, y en algunos casos, incluso el ADN mitocondrial (kinetoplasto de algunos
protozoos, como Trypanosoma). Los cromosomas pueden ser tratados con varios
compuestos qumicos que producen la alternancia de bandas claras y oscuras a lo largo
de los cromosomas. Cada cromosoma tiene un patrn de bandas caracterstico,
permitiendo que aberraciones estructurales como borrados, duplicaciones o sutiles
translocaciones sean detectadas, al igual que permite la identificacin de cromosomas
marcadores

de q color se tie las bacterias gram positivas y gran negativas?:

gram positiva: En microbiologa, se denominan bacterias grampositivas, o bacterias
Gram-positivas, aquellas bacterias que se tien de azul oscuro o violeta por la tincin de
Gram.1 Esta caracterstica qumica est ntimamente ligada a la estructura de la envoltura
celular, por lo que refleja un tipo natural de organizacin bacteriana. Son uno de los
principales grupos de bacterias, y cuando se tratan como taxn se utiliza tambin el
nombre de Posibacteria.2 Las restantes son las bacterias gramnegativas.

Gram negativa: En microbiologa, se denominan bacterias

gramnegativas aquellas que no se tien de azul oscuro o de violeta por la tincin de
Gram, y lo hacen de un color rosado tenue: de ah el nombre de "gramnegativas" o
tambin "Gram-negativas".1Esta caracterstica est ntimamente ligada a la
estructura didrmica dada por la envoltura celular, pues presenta doble membrana celular
(una externa y la otra citoplasmtica), lo que refleja un tipo natural de organizacin
bacteriana. Son uno de los principales supergrupos de bacterias, y cuando se tratan
como taxn se utiliza tambin el nombre de Negibacteria2 o Didermata. Las restantes son
las bacterias grampositivas.