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BIOQUIMICA II
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PRACTICA 1
OBJETIVO
INTRODUCCION
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MATERIAL REACTIVOS
1 Sartn Sacarosa
1 Cuchillo Lisina
1 Esptula Leucina
1 Mechero Patatas
Aceite de cocina
cido tartrico
Bitartrato de potasio
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PROCEDIMIENTOPRIMERA PARTE
EXPERIMENTO 1
RESULTADOS
REACCION DE MAILLARD
OBSERVACIONES
Se apreci durante la prctica que los aminocidos utilizados al hacerse reaccionar con
los carbohidratos produjeron un olor a alimentos conocidos, como pasta para sopa.
EXPERIMENTO 2
Dividir las patatas en tres grupos (para que pueda ser identificado cada grupo), se
recortan las patatas de manera diferente) poner en remojo los grupos en agua de la
siguiente manera y durante una hora
Despus de 1 hora frer los tres grupos de patatas. Para normalizar las condiciones de
cocinado, frerlas todas junta en la misma sartn. Esto iguala la temperatura y la clase de
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aceite utilizado en las frituras. Separar los 3 grupos despus de cocinarlos, examinar las
patatas fritas y anotar cualquier diferencia de coloracin.
Oscurecimiento enzimtico
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PRACTICA 2
CARAMELIZACION
INTRODUCCION
EXPERIMENTO 1
Calentar suavemente las tres cpsulas de evaporacin juntas sobre un hot plate.
Removerlas hasta que se funda todo el azcar. Anotar el orden en el que se produce la
caramelizacin en las tres cpsulas y la viveza del color marrn formado en tiempos
iguales.
Contina calentando suavemente la cpsula tres, calentar hasta que se produzca un olor
a azcar quemada, quedando un producto marrn oscuro, esto es caramelo y djelo
enfriar.
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OBSERVACIONES
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PRACTICA 3
PARDEAMIENTO ENZIMATICO
OBJETIVO
INTRODUCCION
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MATERIAL REACTIVOS
1 Balanza
EXPERIMENTO 1
1.- Utilizar la cuarta parte de una manzana y cortarla en dos trozos. Desmenuzarlo uno de
los trozos y ponerlo en un vidrio de reloj junto al trozo entero. Comparar el pardeamiento
que se produce en las dos muestras.
2.- Cuando el trozo entero este marrn, dividirlo en tres partes mediante rotura y por corte.
Observar el color del interior de manzana y hallar cual pardea ms rpidamente, si la
superficie rota o la cortada.
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EXPERIMENTO 2
EXPERIMENTO 3
2.-Solucion de fenol al 4%
3.-Agua destilada
EXPERIMENTO 4
A cada tubo aadirle unas cuantas gotas de catecol al 1 % anotar en que tubos se
determina la cantidad de calor necesaria para inhibir el pardeamiento de la muestra.
TUBO REACCION
1
2
3
4
5
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EXPERIMENTO 5
REACTIVOS REACCION
cido ctrico al 1 %
cido ctrico al 0.5 %
Carbonato de sodio al 1 %
Agua destilada
Zumo de limn
EXPERIMENTO 6
Colocar 5 trozos de manzana sobre un vidrio de reloj y tratar a cada uno con una de las 5
soluciones siguientes:
REACTIVO REACCION
cido ascrbico al 5 %
cido ascrbico al 2.5 %
cido ascrbico al 1 %
HCL AL 0.5 %
Agua destilada
EXPERIMENTO 7
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PRACTICA 4
OBJETIVO
INTRODUCCION
La acidez valorable total (AVT) se determina casi siempre con hidrxido sdica 0.1 N o
0.5 N e indicar de fenolftalena (pH 8.3-10.0) o azul de bromotinol (pH 6.0-7.6) NO
obstante, suele presentarse dificultades en la determinacin exacta del punto final a causa
de la presencia de sustancias de calor oscuro en los alimentos. El AVT se suele indicar
en trminos del cido que predomina entre los existentes, por ejemplo, en la leche como
cido lctico, en la mayor parte de las flotas como cido cclico, en las manzanas como
cido mlico, y en el vinagre como cido actico. En el control industrial es frecuente dar
la acidez como numero de ml de lcali 0.1 N consumido por grs.
MATERIAL REACTIVOS
3 Buretas Crema
3 Magnetos Bicarbonato
1 Balanza analtica
1 pH metro
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PROCEDIMIENTO
1.- En un mortero triturar las galletas de animalito, para despus pesar 10 grs.
2.- Por cada alimento se van a hacer tres muestras, para que a la hora de titular se
obtenga la medida
3.- De cada alimento se pesan 10 grs. (en balanza analtica) se coloca en un vaso de 400
ml y se le adiciona o se lleva a 100 ml de agua destilada
5.-En el caso del vinagre de caa y el vinagre de manzana se utilizan pipetas de 10 ml.
6.-Poner con pipetas de 10 cm3 una muestra de vinagre dentro de un vaso y llevarlo a 100
ml de agua destilada
8.- Despus de lavar con agua destilada la bureta, se enjuaga con una pequea cantidad
de NaOH 0.1 M y se llena la bureta hasta el nivel de 25 ml
9.- Deja caer lentamente la solucin de NaOH en la dilucin del vinagre, hasta que la
solucin tome un color rosa opaco. La solucin ser neutra en ese momento, anotar el
volumen gastado de NaOH en la neutralizacin.
ALIMENTO pH ml pH ml pH ml Caractersticas
de la reaccin
Harina de arroz
Vinagre de
manzana
Crema
Galletas
Bicarbonato de
sodio
Mantequilla
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PRACTICA 4
OBJETIVO
Que el alumno aprenda a medir los grados de acidez de la leche, y la leche cortada y
tambin el grado de acidez que tiene el yogurt cuando esta fermentado.
INTRODUCCION
MATERIAL REACTIVOS
1 Bureta de 25 ml
1potenciometro
2 Pipetas de 10 ml
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PROCEDIMIENTO
1.- Tomar con pipeta 25 cm2 y ponerla en un Erlenmeyer de 100 cm3 al que se le aade
unas gotas de fenolftalena
2.- Llenar la bureta hasta la marca de capacidad de la bureta con NaOH al 0.1 M
3.- Aadir la solucin de NaOH a la muestra de la leche hasta que reproduzca un color
rosa plido.
5.- Repetir el mismo mtodo para las otras muestras de leches cidas.
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PRACTICA 5
OBJETIVO
INTRODUCCION
MATERIAL REACTIVOS
1 Hot plate
1 Pipeta de 0.1 ml
1 Pipeta de 10 ml
1 Balanza analtica
MTODO DE BIURET
Las sustancias que contienen uno o ms enlaces pptidos (protenas) dan solucin
alcalina un color violeta caracterstico con sulfato cprico diluido. El nombre de reaccin
de Biuret a dar esta sustancia una reaccin positiva.
PROCEDIMIENTO
1.- Preparar el espectrofmetro o colormetro que vaya hacer utilizado y permita que se
caliente.
2.-Enumre 10 tubos de ensaye y colocarlos con una gradilla. En cada tubo aadir
cuidadosamente los siguientes volmenes de 10 mg/ml de grenetina: 0,0.1, 0.2, 0.3, 0.4,
0.5, 0.6, 0.7, 0.8, 0.9 y 1.0 ml.
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3.-Por cada 10 ml se afora a 100 con agua destilada
4.- Aadir 4.0 ml de reactivo de Biuret a cada tubo a y agite la mezcla por pocos segundos
RESULTADOS
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OBSERVACIONES
Se observa que en cada muestra como la leche, huevo y grenetina hubo presencia de
protena con el reactivo de Biuret, cuando se le agregaron los mililitros indicados y
despus colocndolos a bao mara con una temperatura de 37 C durante 20 min dando
una coloracin morada y dando algunas precipitaciones como lo fue la grenetina.
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PRACTICA 6
INTRODUCCION
Con la adicin de cido o lcali a una solucin de aminocido se alcanza una situacin en
que hay el mismo nmero de grupo amonio, NH3+, y de grupos carboxilo, COO-
Ahora bien, la conducta de una protena ante una titulacin o la actividad elctrica
depende del nmero y la carga uno de los grupos ionizables de los aminocidos que la
forman (grupos guanidino, fenlico de la tirosina, imidazolico de la histidina, grupo amino y
carboxilo que quedan libres de los extremos de los polipptidos, etc.,) se concluye as,
que las protenas, al igual que los aminocidos tienen grupos COO- titulables en la regin
alcalina, de suerte que el punto isoelctrico es el valor del pH en el cual el nmero de
cargas elctricas positivas es igual al de cargas elctricas negativas y por lo tanto la
molcula tiene una carga neta de cero. Las protenas son por lo tanto electrolitos mltiples
con actividades a distintos valores de PH, de modo que pude actuar como sustancias
amortiguadoras.
Por otra parte un gran nmero de propiedades dependern de este hecho, Asia la
migracin en un campo elctrico (electroforesis) dependen de la carga neta de la pretina,
y del mismo modo una protena estando en su punto isoelctrico su solubilidad es mnima
y su viscosidad es mxima.
MATERIAL REACTIVOS
Grenetina
Alcohol absoluto
1 Huevo
NaOH 1 N
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PUNTO ISOELECTRICO Y SOLUBILIDAD DE LA CASEINA
3.- Se mezcla bien. Esta es una solucin de casena en acetato de sodio 0.1 N
5.- Se agrega a cada tubo, con una pipeta 2 ml de solucin de casena en acetato de
sodio y se agitan los tubos inmediatamente.
7.- Registre los resultados, marcando la falta de turbidez con 0, los grados de la misma
con signo + y los de precipitacin con el signo X.
TUBO NUMERO 1 2 3 4 5 6 7 8 9
AGUA 8.38ml 7.75ml 8.75ml 8.5ml 8.0ml 7.0ml 5.0ml 1ml 7.4ml
DESTILADA
AC. ACTICO 0.62ml 1.25ml ------- ----- ---- ---- ---- --- ---
0.01 N
AC. ACETICO 0.1 ------ ------ 0.2ml 0.5ml 1.0ml 2.0ml 4.0ml 8ml ---
N
AC. ACTICO 1 N ------ ------ ------ ----- ---- ---- ---- ---- 1.6ml
CASEINA 2 ml 2 ml 2 ml 2 ml 2 ml 2 ml 2 ml 2ml 2ml
La gelatina y otras protenas se disuelven por completo en agua, incluso en sus puntos
isoelctricos. Sin embargo, en tal punto, precipitan ms pronto si se aade a ellas un
agente precipitante como el alcohol. Se prepara una serie de tubos como se indica:
TUBO NUMERO 1 2 3 4 5 6 7 8 9
ACETATO DE 2 ml 2 ml 2 ml 2 ml 2ml 2ml 2ml 2ml 2ml
SODIO 0.1 N
ACIDO ACTICO 0.12ml 0.25ml 0.5ml 1.0ml 2.0ml 4.0ml --- ---- ---
0.1 N
CIDO ACTICO ---- ---- ---- ---- ---- ---- 0.8ml 1.6ml 3.2ml
1N
AGUA 3.88ml 3.75ml 3.5ml 3.0ml 2.0ml --- 3.2ml 2.4ml 0.8ml
DESTILADA
GRENETINA AL 1 2 ml 2 ml 2 ml 2 ml 2 ml 2 ml 2 ml 2 ml 2 ml
%
PROCEDIMIENTO
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1.- Se mezcla bien el contenido de los tubos y se aade alcohol absoluto al tubo nmero
5, hasta que se produce una nebulosidad tenue (se suele necesitar 8 ml)
2.-se agrega esa misma cantidad de alcohol a cada tubo, se examina despus de 30 min
TUBO NUMERO 1 2 3 4 5 6 7
ACETATO DE 1 ml 1 ml 1 ml 1 ml 1 ml 1 ml 1 ml
SODIO
AC. ACTICO ---- 0.05ml --- --- --- --- ---
0.01 N
AC. ACTICO ---- ---- 0.25ml 1 ml 4 ml --- ---
0.1 N
AC. ACTICO 1 ---- ---- ---- --- --- 1.60ml 6.40
N Ml
NaOH 1 N 0.05 ---- ---- --- --- --- ----
ml
AGUA 6.95 6.95ml 6.75ml 6.00 3.00 5.40 0.60
DESTILADA ml ml ml ml ml
PH 8 7 5 4.60 4 3.40 2.80
APROXIMADO
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PRACTICA 7
OBJETIVO
INTRODUCCION
MATERIAL REACTIVOS
1 Tijeras TCA al 5 %
1 Balanza granatoria
1 Mortero
1 Probeta de 100 ml
12 Tubos de ensaye
1 Vidrio de reloj
3 Pipetas de 10 ml
Algodn
1 Centrifuga
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PROCEDIMIENTO
1.- Sacrificar una rata blanca con cloroformo, evitar inhalar el cloroformo (procura no
excitar a la rata).
3.- Colocar en un mortero previamente sumergido en hielo (el mortero se deja enfriar un
da antes en el congelador), aadir 1 ml de cido tricloroactico heptico y 0.5 de arna
lavada. Triturar el hgado hasta que quede una suspensin homognea.
5.- Aadir a esta mezcla dos volmenes de etanol al 95 % por cada volumen de
sobrenadante. Dejar en reposo hasta que el glucgeno flocule (aparecer una sustancia
color blanca) si esto no sucede aadir NaCl a 37 C hasta que se forme el precipitado.
6.- Suspender el precipitado con ter y pasarlo al vidrio de reloj y dejar secar al aire
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