BIOQUIMICA

PROTEINAS

CURSO : BIOQUIMICA

DOCENTE:

CORDERO AZABACHE, Jorge

ALUMNOS:

CALLEGARI ARIAS quio

Cuba Yerald

Zuiga cano C.Bryan

Victoria

SEMESTRE:

VI

HUANCAYO 2013

INFORME DE PROTEINAS Pgina 1

 BIOQUIMICA

TABLA DE CONTENIDO

INTRODUCCION. 3

OBJETIVOS 4

GENERAL... 4

ESPECIFICO.. 4

I. MARCO TEORICO.. 5

II. MATERIALES / REACTIVOS. 9

III. METODOLOGIA 9

3.1 LUGAR DE EJECUCION 14

IV. PROCEDIMIENTOS. 9

V. RESULTADOS. 11

VI. DISCUSION.. 14

VII. CONCLUSIONES... 17

VIII. BIBLIOGRAFIA 17

ESQUEMAS.... 18

CUESTIONARIO.. 21

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INTRODUCCIN

Las protenas estn formadas por aminocidos los cuales a su vez estn formados por
enlaces peptdicos para formar esfingocinas.Las protenas de todos los seres vivos
estn determinadas mayoritariamente por su gentica (con excepcin de algunos
pptidos antimicrobianos de sntesis no ribosoma), es decir, la informacin gentica
determina en gran medida qu protenas tiene una clula, un tejido y un organismo.

Las protenas se sintetizan dependiendo de cmo se encuentren regulados los genes

que las codifican. Por lo tanto, son susceptibles a seales o factores externos. El
conjunto de las protenas expresadas en una circunstancia determinada es
denominado proteoma.

Las protenas son sustancias formadas por aminocidos constituidos por carbono,
hidrgeno, oxgeno y nitrgeno principalmente. Son los compuestos orgnicos ms
abundantes en plantas y animales.

Forman parte del protoplasma, por tanto son componentes estructurales, se

encuentran presentes en las membranas celulares, e intervienen en la entrada y salida
de sustancias en el interior de las clulas que tambin las utiliza como fuente de
energa en ausencia de azcares, almidones y grasas. Se encuentran presentes en las
fibras musculares, ayudando a las funciones de contraccin y relajamiento de los
msculos.

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OBJETIVOS

GENERAL

Determinar e identificar las protenas mediante los diferentes mtodos

a utilizar en la prctica siguiendo los procedimientos correspondientes.

ESPECIFICO

Identificaremos a las protenas mediante el mtodo de la coagulacin.

Observar y anotar todas las caractersticas como la temperatura forma,

color, modificacin de la composicin, adems anotarlas reacciones de
las reacciones con la albumina

Anotar los cambios de la sustancia de la sacarosa .entre otros.

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I. MARCO TEORICO

PROTEINAS

Las protenas son macromolculas formadas por cadenas lineales de aminocidos.

Las protenas desempean un papel fundamental para la vida y son las biomolecular
ms verstiles y ms diversas. Son imprescindibles para el crecimiento del organismo.
Realizan una enorme cantidad de funciones diferentes, entre las que destacan:

Estructural. Esta es la funcin ms importante de una protena (Ej. colgeno).

Inmunolgica (anticuerpos).
Enzimtica (Ej. sacarosa y pepsina),
Contrctil (actina y misiona).
Homeosttica: colaboran en el mantenimiento del pH (ya que actan como un
tampn qumico).
Transduccin de seales (Ej. rodopsina).
Protectora o defensiva (Ej. trombina y fibringeno).

II CARACTERISTICAS

Todas las protenas tienen carbono, hidrgeno, oxgeno y nitrgeno, y casi todas
poseen tambin azufre. Si bien hay ligeras variaciones en diferentes protenas, el
contenido de nitrgeno representa, por trmino medio, 16% de la masa total de la
molcula; es decir, cada 6,25 g de protena contienen 1 g de N. El factor 6,25 se utiliza
para estimar la cantidad de protena existente en una muestra a partir de la medicin
de N de la misma.

La sntesis proteica es un proceso complejo cumplido por las clulas segn las
directrices de la informacin suministrada por los genes.

Las protenas son largas cadenas de aminocidos unidas por enlaces peptdicos entre
el grupo carboxilo (-COOH) y el grupo amino (-NH2) de residuos de aminocido
adyacentes.

La secuencia de aminocidos en una protena est codificada en su gen (una porcin

de ADN) mediante el cdigo gentico.

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Las protenas tambin pueden trabajar juntas para cumplir una funcin particular, a
menudo asocindose para formar complejos proteicos estables.

III FUNCIONES

Las protenas ocupan un lugar de mxima importancia entre las molculas

constituyentes de los seres vivos (biomolculas). Prcticamente todos los procesos
biolgicos dependen de la presencia o la actividad de este tipo de molculas. Bastan
algunos ejemplos para dar idea de la variedad y trascendencia de las funciones que
desempean. Son protenas:

Artculo principal: Desnaturalizacin de protenas.

http://es.wikipedia.org/wiki/Desnaturalizaci%C3%B3n_de_prote%C3%ADnas#Desnaturalizaci.C3.B3n_de_una_prote.C3.ADna

Funciones de reserva. Como la ovoalbmina en el huevo, o la casena de la leche.

Todas las protenas realizan elementales funciones para la vida celular, pero adems
cada una de stas cuenta con una funcin ms especfica de cara a nuestro organismo.

Debido a sus funciones, se pueden clasificar en:

1. Catlisis: Est formado por enzimas proteicas que se encargan de realizar

reacciones qumicas de una manera ms rpida y eficiente. Procesos que
resultan de suma importancia para el organismo.

Por ejemplo la pepsina, esta enzima se encuentra en el sistema digestivo y se

encargan de degradar los alimentos.

2. Reguladoras: ayudan a que exista un equilibrio entre las funciones que realiza el
cuerpo. Tal es el caso de la insulina que se encarga de regular la glucosa que se
encuentra en la sangre.

3. Estructural: la funcin de dar resistencia y elasticidad que permite formar

tejidos as como la de dar soporte a otras estructuras. Este es el caso de la
tubulina que se encuentra en el cito esqueleto.

4. Defensiva: Son las encargadas de defender al organismo. Glicoprotenas que se

encargan de producir inmunoglobulinas que defienden al organismo contra
cuerpos extraos, o la queratina que protege la piel, as como el fibringeno y
protrombina que forman cogulos.

5. Transporte: su funcin es llevar las protenas es llevar sustancias a travs de

todo el organismo donde son requeridas. Protenas como la hemoglobina que
lleva el oxgeno por medio de la sangre.

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6. Receptoras: Este tipo de protenas se encuentran en la membrana celular y

llevan a cabo la funcin de recibir seales para que la clula pueda realizar su
funcin. El acetilcolina que recibe seales para producir la contraccin.

Artculo principal: Estructura de las protenas.

http://es.wikipedia.org/wiki/Estructura_de_las_prote%C3%ADnas

V PROPIEDADES DE LA PROTEINA

Solubilidad: Las protenas son solubles en agua cuando adoptan una

conformacin globular. La solubilidad es debida a los radicales (-R) libres de los
aminocidos que, al ionizarse, establecen enlaces dbiles (puentes de
hidrgeno) con las molculas de agua.
Amortiguador de pH (conocido como efecto tampn): Actan como
amortiguadores de pH debido a su carcter anftero, es decir, pueden
comportarse como cidos (donando electrones) o como bases (aceptando
electrones).

Referencia bibliogrfica:

Especificidad (Cada protena tiene una funcin especfica que est determinada por su
estructura primaria.) http://www.um.es/molecula/prot06.htm

V CLASIFICACIN

Segn su forma

A. Fibrosas: presentan cadenas poli peptdicas largas y una estructura

secundaria atpica. Son insolubles en agua y en disoluciones acuosas. Algunos
ejemplos de stas son queratina, colgeno y fibrina.
B. Globulares: se caracterizan por doblar sus cadenas en una forma esfrica
apretada o compacta dejando grupos hidrfobos hacia adentro de la protena y
grupos hidrfilos hacia afuera, lo que hace que sean solubles en disolventes
polares como el agua. La mayora de las enzimas, anticuerpos, algunas
hormonas y protenas de transporte, son ejemplos de protenas globulares.
C. Mixtas: posee una parte fibrilar (comnmente en el centro de la protena) y
otra parte globular (en los extremos).

Segn su composicin qumica

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A Simples: su hidrlisis slo produce aminocidos. Ejemplos de estas son la

insulina y el colgeno (globulares y fibrosas). A su vez, las protenas se clasifican
en:

B Escleroprotenas: Son esencialmente insolubles, fibrosas, con un grado de

cristalinidad relativamente alto. Son resistentes a la accin de muchas
enzimas y desempean funciones estructurales en el reino animal.
.
C) Esfero protenas: Contienen molculas de forma ms o menos esfrica. Se
subdividen en cinco clases segn su solubilidad:

http://www.um.es/molecula/prot01.htm (COMPOSICION Y CLASIFICACION)

II. MATERIALES / REACTIVOS

MATERIALES DE LABORATORIO

Tubos de ensayo
Estufa
Beaker de 250 mL
Termmetro
PH
Dos vasos de
precipitacin
Gradilla
Buretas

REACTIVOS

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HCL
Alcohol etlico
Sacarosa al 50%
Bicarbonato de sodio
Hidrxido sdico
Sulfato de cobre al 1%

MATERIALES

Huevo
Leche
Agua destilada
Cuchillo
Vinagre
Limn

III. PROCEDIMIENTOS

1. COAGULACION DE LAS PROTEINAS

Colocar en tres tubos de ensayo una pequea cantidad de clara de

huevo (puede diluirse en un poco de agua para obtener una mezcla
espesa) o 2-3ml de leche.

Calentar uno de los tubos al bao Mara, aadir a otro 2-3ml de HCl
concentrado y al tercero 2 o 3ml de alcohol etlico.

Observar los resultados.

2. ADICION DE SACAROSA

Rotule dos tubos de ensayo A y B

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en el tubo A coloque 5 ml de clara de huevo y 3 ml de la mezcla de

sacarosa preparada al 50% p/v, introduzca dicho tubo en un bao de
agua caliente con ayuda de la plancha de calentamiento. en el tubo de
ensayo B colocar 5 ml de clara de huevo y 3 ml de agua destilada (usar
como testigo), introducimos ambos tubos en bao de agua preparada
en un beaker de 250 ml colocar 100 ml de agua y llevarlo a la estufa
hasta llegar los 40C aproximadamente, por ultimo colocar el
termmetro dentro de cada tubo de ensayo y anotar la temperatura en
la que la albumina de huevo se opaca (coagula), observar y anotar los
resultados.

3. FACTOR PH

Tomar tres tubos de ensayo y colocar en cada una de ellas una letra A,
B y C y las colocamos de la siguiente manera:
Tubo A: 5 mL de yema de huevo y mida su pH
Tubo B: 5mL de yema de huevo y 2ml. de limn, mida el pH.
Tubo C: 5mL de yema de huevo y 2mL solucin de bicarbonato de sodio,
mida el pH.
Introducir ambos tubos en bao de agua preparado en el paso N1 del
experimento anterior, sujetamos un termmetro dentro de cada tubo y
hacemos el mismo procedimiento para que la yema de huevo se
opaque (coagule), por ultimo observamos y anotamos los resultados.

4. PRUEBA DE BIURET

Preparar 3 tubos de ensayo y colocar en cada tubo 2 ml de diferentes

soluciones proteicas, Aadir en cada tubo 2ml de disolucin de hidrxido
sdico.
Agitar y dejar caer cuatro o cinco gotas de una solucin al 1% de sulfato de
cobre, por ultimo ver los resultados.

5. PRUEBA DE LA DESNATURALIZACION DE LA CASEINA

Aade el vinagre a uno de los vasos, exprime el limn en el otro, agita

ambos vasos para que se mezclen sus contenidos; esperamos unos minutos
y observa lo que sucede en cada uno de los vasos.

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IV. RESULTADOS

1. COAGULACION DE LAS PROTEINAS

En el primer tubo hay formacin de tres capas

En el segundo tubo Sistema difsico, el huevo se sedimenta, poca
coagulacin de protenas.
En el tercer tubo alta coagulacin de protenas del huevo.

Anexo 1 resultados de coagulacin de las protenas

2. ADICION DE SACAROSA

Tubo A Sacarosa al 50% + clara de huevo

Tubo B clara de huevo + agua destilada
Al agregarle sacarosa y agua destilada al tubo A y B ya contenido con clara de huevo,
se observa que en ambos presentas dos fases: el tubo A se observa que la sacarosa se
encuentra al fondo del tubo y la clara de huevo en la superficie, pero en el tubo B se
observa lo contrario la clara de huevo se ubica en el fondo del tubo y el agua destilada
en la superficie.

Se mide con un termmetro la temperatura del agua a 40C exactamente.

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Se le adicionan ambos tubos y se observa minuciosamente cul de los dos se va

opacando ms rpido: as mismo medimos los tubos u observamos a que temperatura
pas este cambio. Se observ que el tubo A se opac rpidamente y el tubo B demoro
un poco ms y no se opac completamente.

Rst: es evidente la desnaturalizacin de las proteinas del huevo y su respectiva

coagulacin al ser sometidas a diferentes reacciones.

Anexo 2 resultados de adicin de sacarosa.

3. FACTOR PH

Tubo A: Solo 5 ml de la yema de huevo obtuvimos un PH de PH= 6.17

Tubo B: La yema de huevo ms 2 ml de limn. PH = 3.26

Tubo C: La yema de huevo ms 2 ml de solucin de PH = 7.16

bicarbonato.

Anexo 3 resultados de factor PH

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4. PRUEBA DE BIURET

Resulta un color violeta cuando los iones cpricos en medio alcalino se

compleja con los electrones no saturados de los tomos de nitrgeno y
oxgeno .La cantidad de color producido es proporcional a la concentracin
de protenas y es medida espectrofotomtricamente.

Anexo 4 resultados prueba de biuret

5. PRUEBA DE LA DESNATURALIZACION DE LA CASEINA

Despus de agregar las sustancias a cada vaso notamos en una de ellas

que se vuelve color amarillento y el otro en su color casi normal.
Los diferentes colores demuestran la desnaturalizacin de las proteinas

Anexo 5 resultados de desnaturalizacin de la casena

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V. DISCUSION

PRCTICA LABORATORIO: PROTENAS. DESNATURALIZACIN, PRUEBAS

DE BIURET Y XANTOPROTEICA

UNIVERSIDAD NACIONAL DEL CENTRO DEL PERU

FACULTA DE QUIMICA IV SEMESTRE

1 FUNDAMENTO:

Las protenas son compuestas de carbono, oxigeno hidrogeno y nitrgeno. La

mayora de ellas contienen adems azufre, y algunos fsforos. Sus molculas son
de proporciones coloidales, todas son muy complejas molecularmente y tienen
alto peso molecular. La molcula proteica est compuesta de una combinacin de
aminocidos por condensacin. Las pro teosas, peptonas, pptidos y aminocidos
son derivados de las protenas formados en sntesis e hidrlisis.

Hay ciertas reacciones coloreadas que dan las protenas y dependen de los
aminocidos presentes en la molcula proteica. Todas dan la reaccin de BIURET.
Se basa en una reaccin tpica de los enlaces peptdicos, en la cual los tomos de

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cobre del reactivo se unen a los grupos amino, lo que provoca una coloracin rosa
- violcea. Las que contienen tirosina dan las reacciones Xantoproteica.

Observaremos tambin en esta prctica como se destruye los enlaces que mantienen
estable la conformacin globular de las protenas, de manera que stas queden con
una estructura filamentosa; con lo cual pierden su solubilidad y precipitan en
forma de cogulos. La desnaturalizacin se efectuar sometiendo una disolucin
de protenas a cambios de pH, a alteraciones de concentracin del medio y a
variaciones de la temperatura

2. OBJETIVO:

Ver la presencia de protenas y su importancia dentro de los organismos vivos y

su mecanismo de accin a nivel molecular

3. MATERIAL NECESARIO:

Disolucin de albmina.
Leche.
Disolucin de clara de huevo.
cido clorhdrico.
cido ntrico.
Hidrxido sdico.
Cloruro sdico.
Sulfato de cobre.
12 tubos de ensayo.
Un vaso de precipitado.
Mechero Bunsen.
Trpode y rejilla.
4. TCNICA:

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4. 1 Desnaturalizacin:

1. Hacer series de cuatro tubos con 2 ml de disolucin de albmina y numerar los

tubos. Hacer lo mismo con la leche y la solucin de clara de huevo.

2. Aadir a los tubos nmero 1, dos ml de cido clorhdrico; a los nmero 2, dos
ml de disolucin saturada de cloruro de sodio; a los nmero 3, dos ml de
solucin de hidrxido sdico; y calentar suavemente a los nmero 4, sin aadir
nada.

3. Anotar los resultados para cada serie de tubos.

4. 2 Prueba de Biuret:

1. Preparar tres tubos de ensayo y colocar en cada uno 2ml de las disolucines
proteicas.

2. Aadir en cada tubo 2ml de disolucin de hidrxido sdico. Agitar y dejar

caer cuatro o cinco gotas de una solucin al 1% de sulfato de cobre.

3. Anotar los resultados.

4. 3 Prueba Xantoproteica:

1. Preparar dos tubos de ensayo y verter en cada uno 2ml de las disoluciones
proteicas.

2. Aadir 2ml de cido ntrico en cada tubo. Anotar la coloracin.

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3. Calentar al bao Mara los tubos en un vaso de precipitado y volver a anotar

los resultados.

VI.CONCLUSIONES

Las protenas constituyen una de las molculas ms importantes en

el organismo, ya que cumple muchas funciones. Al realizar las diferentes
pruebas calor extremos y con diferentes reactivos HCL, la albmina,
se pudo comprobar experimentalmente que efectivamente la
desnaturalizacin de las proteinas huevo, leche, vinagre.

En el ultimo experimento vimos que al poner limn o vinagre a la leche, sta se

cortaba, se formaban grumos debido a la coagulacin (desnaturalizacin) de la
protena de la leche.

6. BIBLIOGRAFIAS

Pginas de libros

L.G. WADE, JR.; Qumica Orgnica Quinta Edicin; Ed. Pearson Prentice Hall; Pg. 1114-1155; 2000.

BREWSTED, R.: VANDERWERF, C.; Mc EWEN. W.; Curso prctico de Qumica Orgnica; Editorial
Alhambra; Pg. 149-152; 1979.

NOLLER, C. R.; Qumica de los compuestos orgnicos; EditorialIneramericana; Madrid; Pg. 558-585; 1968.

Pginas web

http://html.rincondelvago.com/proteinas_10.html
http://es.wikipedia.org/wiki/Prote%C3%ADna
http://es.scribd.com/doc/53680794/lab-N%C2%BA-10
www.ucm.es/info/analitic/Asociencia/DesnatProteinas.
es.wikipedia.org/wiki/Desnaturalizacin_ (bioqumica).

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ESQUEMAS

ADICION DE SACAROSA

a) En dos tubos de ensayos se coloca 5ml de clara de huevo

b) al primer tubo se le adiciona

sacarosa al 50%

c) al segundo tubo se le adiciona 3ml de

agua destilada

d) Ambos tubos se calientan en Bao Mara

en un vaso precipitado, con la ayuda de una
estufa a una temperatura de 40C;
posteriormente se observa a que
temperatura
INFORMEseDEopaca la albmina.
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 BIOQUIMICA

EXPERIMENTO 1:
COAGULACIN DE LAS PROTENAS

1.- Colocar en tres tubos de ensayo una

pequea cantidad de clara de huevo
(puede diluirse en un poco de agua para
obtener una mezcla espesa) o 2 3 mL.
De leche.
2.- Calentar uno de los tubos al bao
mara.

3.- En otro tubo de ensayo agregar 2 3

mL. De HCl concentrado y al tercero 2 3
mL. De alcohol etlico.

EXPERIMENTO 5
PRUEBA DE LA DESNATURALIZACIN DE LA CASENA

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1.- Aadir a dos vasos precipitados un poco

de leche a temperatura ambiente.

2.- Aade vinagre a uno de los vasos.

3.- Exprimir limn en el otro.

4.- Agitar ambos vasos para que se mezclen sus contenidos.

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CUESTIONARIO DE PROTEINAS

1) El grupo guanidino de la arginina es uno de los ms bsicos de todos los

grupos orgnicos explique por qu?

Por que La guanidino es un compuesto puro cristalino muy alcalino, formado a

partir de la oxidacin de la guanina. Se encuentra de manera natural en la orina
como un producto normal del metabolismo de las protenas.

Frmula: CH5N3

Masa molar: 59,07 g/mol

Punto de fusin: 50 C

2) Escriba una reaccin que indique la manera en que se pueda usar el 2,4
dinitrofluorobenceno para identificar el aminocido N terminal de la Val, Lys,
Gly, que productos esperara (despus de la hidrolisis) cuando se trata ala Val-
Lys Gil 2,4 - dinitrofluorobenceno?

Todos los aminocidos poseen un grupo amino reaccionan y Forman dixido

decarbono CO2 , amoniaco N y un aldehdo que contiene un tomo de carbono
memos que el compuesto original a travs del amoniaco produciendo una
estructura denominada indanona o prpura

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3) El tratamiento de la oxitocina con ciertos agentes reductores (como el slido

en amoniaco liquido genera un solo cambio qumico que pude revertirse por
la oxidacin con el aire) Qu cambios quimicos hay

La Oxidacin es una forma de tratamiento hidrotrmico. El sistema debe ser

mantenido bajo presin para evitar una excesiva evaporacin de agua. Esto se
hace para controlar el consumo de energa debido al calor latente de
vaporizacin .

4) Cundo una protena esta formada por varias cadenas poli ppticas cada
una de estas cadenas se denomina La columna vertebral, por que el
nombre ?

La columna vertebral de cualquier protena molcula es una cadena de

polipptido obtenido por la condensacin de un gran nmero de amino cido s
con la eliminacin de agua. Se recordar que los aminocidos son
bifuncionales compuestos orgnicos de nitrgeno que contienen un
cido grupo ,-COOH, y una amina de grupo,-NH 2. El grupo amino est unido al
carbono tomo adyacente a la COOH-(el tomo de carbono ). Los ms simples
son tres aminocidos.

5) la unin de oxgeno y la hemoglobina se utiliza la ingeniera gentica para

modificar La interface entre sub unidades de hemoglobina las variantes
resultantes se presenta en disolucin principal mente como dmeros alfa y
beta hay pocos o ninguno estas variantes unirn oxigeno o ms fuertes ?
explique su respuesta

La funcin principal de la hemoglobina (Hb) es transportar oxgeno. Puesto que

el oxgeno no es muy soluble en agua (el principal constituyente de la sangre),
una protena de transporte de oxgeno debe usarse para permitir que el
oxgeno sea 'soluble'. El hierro es el sitio de unin del oxgeno;.. Cada hierro

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puede enlazar una molcula de O 2 por lo que cada molcula de hemoglobina

es capaz de unirse a un total de cuatro (4) molculas de O 2.

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