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Programa de Frmacos Alimentos y Cosmticos, Facultad de Bioqumica y Farmacia, Universidad Mayor de
San Simn. Cochabamba, Bolivia.
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Facultad de Bioqumica y Farmacia, Universidad Mayor de San Simn. Cochabamba, Bolivia.
Direccin para correspondencia: Max Linder Escobar Hinojosa, Programa de Frmacos Alimentos y Cosmticos,
Facultad de Bioqumica y Farmacia, Universidad Mayor de San Simn. Av. Aniceto Arce frente al Parque la Torre,
Cochabamba Bolivia.
E mail: marck144@gmail.com
This antibacterial activity was evaluated by in vivo de plantas utilizadas en la medicina tradicional
susceptibility testing by the technique of modified boliviana.5
double-layer diffusion; the conviction of antidiarrhoeal Entre la diversidad de plantas medicinales utilizadas
activity was evaluated by testing for bacteria that cause para las diarreas, se encuentran las hojas de buganvilla
diarrhea induction. The results show that the ethanol (B. glabra) y la semilla de palto (P. americana), objetos
extract from leaves of Bougainvillea at a concentration de esta investigacin. Ellas sern evaluadas para
of 0.763 g/kg weight, has antidiarrhoeal and determinar la actividad antibacteriana in vitro y la
antibacterial activity against Escherichia coli and the actividad antidiarreica in vivo de los extractos etanlicos
seed extract of avocado to a concentration of 0.688 g/kg de hojas de buganvilla y semilla de palto, sobre
against Escherichia coli, Shigella dysenteriae and bacterias Gram (-)
Salmonella typhimurium. So also found that the
compounds responsible for the antibacterial and MATERIAL Y METODOS
antidiarrhoeal are tannins and flavonoids present in
leaves of bougainvillea and avocado seed. La metodologa utilizada para este trabajo de
Key Words: Activity antidiarrhoeal, antibacterial, investigacin es de tipo analtico experimental.
avocado, bougainvillea. El trabajo se realiz con las hojas de buganvilla
(Bougainvillea glabra) y semilla de palto (Persea
INTRODUCCIN americana), que fueron recolectadas del valle Alto
provincia Punata del Departamento de Cochabamba.
Desde hace mucho tiempo, se considera a la diarrea Las cepas utilizadas para la evaluacin de la actividad
como uno de los problemas sanitarios ms importantes antibacteriana in vitro fueron Escherichia coli
de los pases en vas de desarrollo. A nivel mundial es la diarreognica, Shigella dysenteriae y Salmonella
causa de la muerte de 5-8 millones de nios menores de typhimurium.
5 aos. De acuerdo con los clculos de la OMS Para las pruebas in vivo de actividad antidiarreica, se
correspondientes al ao 2006, hubo alrededor de 7,1 utilizaron ratas de la cepa Winstar.
millones de muertes a causa de la diarrea.1 Los mtodos utilizados fueron los siguientes
En Bolivia, cada ao mueren 15 mil nios menores de Preparacin de los extractos de hojas de buganvilla y
cinco aos por causas que pueden ser razonablemente semilla de palto. Para la preparacin de los extractos se
prevenibles y relativamente superables como las utiliz el mtodo de maceracin. El solvente utilizado
diarreas, la desnutricin y la pobreza extrema.2 fue etanol: agua en una relacin de (7:3). La relacin de
El Ministerio de Salud reporta que en Cochabamba se la maceracin de la materia solvente fue de 1:10, se
produce anualmente ms de 116.775 casos de diarreas y dej en reposo por 48 horas, pasado este tiempo se
en el municipio de Cercado se reportan cerca de 41.793 procedi al filtrado en papel filtro y un embudo
casos de diarreas.3 previamente lavado con alcohol al 70 %. Se concentr el
La falta de asistencia mdica bsica, la insuficiente y extracto filtrado en el rotaevaporador marca
mala alimentacin, la ausencia de condiciones mnimas (FISALOM) a temperatura de 40 45 C hasta la cuarta
de salubridad e higiene, la desnutricin materna, la parte del volumen original y se conserv el extracto en
carencia de servicios bsicos como agua potable y el refrigerador a una temperatura de 8 C, para
alcantarillado y los crecientes niveles de pobreza e posteriormente realizar los slidos totales.
indigencia son los principales factores explicativos Slidos totales. Se determin el porcentaje de humedad
asociadas a la muerte por diarrea en Bolivia.4 por el mtodo gravimtrico, secando las muestras en
Entre los principales agentes causantes de diarreas, se estufa (FANEM) con circulacin de aire hasta peso
encuentra el rotavirus y bacterias como Escherichia coli constante. Con estos datos se calcularon los slidos
diarreognica, Shigella dysenteriae y Salmonella totales con la siguiente formula:
typhimurium.
La medicina tradicional desde la antigedad utiliza ST = 100 - % Humedad
recursos naturales para solucionar estas infecciones.
Bolivia presenta una gran diversidad de plantas Determinacin de la actividad antibacteriana. La
medicinales, todas las culturas tienen su propia medicina evaluacin antibacteriana se realiz siguiendo la tcnica
desde las selvas amaznicas a los nevados andinos, estas descrita por Kirby Bauer. Es una tcnica que permite
zonas cobijan una amplia gama de etnias y culturas ensayar diferentes dosis de extractos sobre cepas
indgenas que supieron adaptarse a su medio, nutrirse bacterianas, en la que puede observarse la formacin o
correctamente y curar sus propias dolencias mediante no de halos de inhibicin empleando el mtodo de
siglos de conocimiento, sin embargo estas plantas Difusin radial en medio agarizado de doble capa.
medicinales no fueron validadas por lo que es Determinacin de la actividad antidiarreica
importante conocer el potencial antibacteriano in vitro e (estandarizacin de la tcnica). La determinacin de la
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actividad antidiarreica se realiz empleando Una vez producida la diarrea se administraron los
procedimientos in vivo utilizando ratas albinas Wistar, extractos, previamente dosificados, segn el peso
cepa Novergicus rattus de 180 a 200 g. de peso. Antes corporal de las ratas.
de comenzar con las pruebas, los animales se Screening fitoquimico. La marcha fitoqumica permiti
mantuvieron en ayunas durante 24 horas, dejndolos identificar los metabolitos secundarios presentes en las
nicamente con agua ad libitum. De acuerdo al mtodo plantas segn el mtodo descrito por Olga Lock de
descrito por Edwin6 Ugaz.3, 8
El material biolgico se distribuy en lotes de 3
animales de la siguiente forma: RESULTADOS
Lote 1 Blanco: Tratado nicamente con el vehculo,
agua destilada Pruebas antibacterianas. Los resultados de la prueba
Lote 2 Problema: Tratado con los extractos etanlicos cualitativa antibacteriana del extracto etanlico de
de las hojas de buganvilla en una concentracin 0.763 buganvilla mostraron actividad frente a Escherichia coli,
gr/Kg peso y semilla de palto a una concentracin 0.688 y el extracto de semilla de palto present actividad
gr/kg de peso. Para causar la diarrea se procedi primero antibacteriana frente a Escherichia coli, Shigella
con la estandarizacin de la tcnica empleando las dysenteriae, Salmonella typhimurium.
siguientes bacterias: Escherichia coli diarreognica, En relacin a la Concentracin Inhibitoria Mnima del
Shigella dysenteriae y Salmonella typhimurium. extracto etanlico de hojas de buganvilla y semilla de
La dosificacin de las cepas se realiz de acuerdo a la palto frente a Escherichia coli, los resultados fueron los
dosis infectante de cada una de las bacterias: siguientes: 7.25 x 10-3 mg/ml hojas de buganvilla, 0.344
Escherichia coli 108 UFC/ml, para Salmonella 105-108 mg/ml semilla de palto, mostrando mayor actividad
UFC/ml y para Shigella 103 UFC/ml, la dosificacin se antibacteriana en las hojas de buganvilla (Ver
realiz con la ayuda de la escala de Marc Farland.7 Fotografias 1 y 2)
Se administr 2ml de esta solucin a cada una de las
ratas con la ayuda de una sonda Nasogstrica. Se
observaron las deposiciones y se analizaron la
consistencia de las heces.
La Concentracin Inhibitoria Mnima (CIM) del extracto etanlico de la semilla de palto frente a Shigella dysenteriae,
fue de 0.344 mg/ml. No se determin la CIM de la buganvilla porque no present actividad antibacteriana en la prueba
preliminar.
La CIM del extracto etanlico de semilla de palto frente a Salmonella typhimurium, demostr presencia de actividad
antibacteriana, con un resultado de 0.689 mg/ml. No se determin la CIM de la buganvilla porque no present
actividad antibacteriana en la prueba preliminar.
Pruebas antidiarreicas. El tratamiento con el extracto etanlico a una concentracin de 0.763 gr/Kg peso buganvilla
frente a Escherichia coli, present actividad antidiarreica, puesto que durante las primeras horas se observ 80
deposiciones lquidas, para normalizarse a partir de la sptima hora. Por su parte el blanco mostr un promedio de 120
deposiciones durante las 7 primeras horas. (Ver Tabla 1 y Fotografas 3 y 4.)
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Tabla 1. Datos del nmero y consistencia de la heces del grupo control y del grupo con el tratamiento del extracto etanlico de
buganvilla.
Las hiptesis planteadas para la comparacin de medias El tratamiento con el extracto etanlico a una
fueron: concentracin de 0.688 gr/Kg peso de semilla de palto
1.- Hiptesis Nula plantea: Las medias son iguales frente a Escherichia coli, present actividad
2.- Hiptesis Alterna plantea: Las medias son diferentes antidiarreica, puesto que durante las 7 primeras horas se
Analizando el valor del sig que es menor a 0.05, se observ 90 deposiciones lquidas, normalizndose
asume que las medias son diferentes, por lo tanto existe posteriormente. El grupo control present un promedio
actividad antidiarreica del extracto en comparacin con de 116 deposiciones lquidas por ms de 7 hrs. Tabla 4.
el blanco.
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Tabla 4. Datos del nmero y consistencia de la heces del grupo control y del grupo con el tratamiento del extracto etanlico de
semilla de Palto.
TRATAMIENTO DOSIS DE DOSIS NMERO DE TIEMPO
UFC/ml (mg/kg) HECES ACUOSAS TRANSCURRIDO HASTA
EN EL TIEMPO LA PRIMERA
7hrs DEFECACIN NORMAL
Control 12 x 108/ml ------- 116 Mayor a 7 hrs
E. Etanlico de ------ 0.688 90 6hrs:45min
Semilla de Palto
Tabla 5. Anlisis estadstico de la comparacin de medias del extracto etanlico de semilla de palto.
Tabla 7. Datos del nmero y consistencia de la heces del grupo control y del grupo con el tratamiento del extracto etanlico de
semilla de palto.
Tabla 8. Anlisis estadstico de la comparacin de medias del extracto etanlico de la semilla de palto
Analizando el valor del sig, se concluye que las medias gr/Kg peso mostraron actividad antidiarreica,
son iguales, mostrando que la actividad antidiarreica de obteniendo 92 deposiciones fecales con una consistencia
la semilla de palto no es significativa, en comparacin lquida durante 8 hrs con 15 min, transcurrido este lapso
con el grupo blanco. de tiempo se normalizan las deposiciones fecales. El
Los resultados obtenidos con la semilla de palto frente a grupo blanco present un promedio de 122 deposiciones
Salmonella typhimurium a una concentracin de 0.688 lquidas por ms de 7 hrs. Tabla 10.
Tabla 10. Datos del nmero y consistencia de la heces del grupo control y del grupo con el tratamiento del extracto etanlico
de semilla de Palto.
Tabla 11. Anlisis estadstico de la comparacin de medias del extracto etanlico de la semilla de palto.
Tipo N Media Desviacin tp. Error tp. de la media
Control 2 3 125,00 15,000 8,660
Conteo
Extracto 2 3 102,67 9,504 5,487
Tabla 12. Prueba T para la igualdad de medias del extracto de semilla de Palto
T gl Sig. Diferencia Error tp. 95% Intervalo de
(bilateral) de medias de la confianza para la
diferencia diferencia
Inferior Superior
Analizando el valor del sig, se concluye que las medias Para comparar la actividad antibacteriana entre los
son diferentes, mostrando actividad antidiarreica de la diferentes extractos se utilizo un test de anova.
semilla de palto, en comparacin con el grupo blanco.
El anlisis de la varianza nos permiti comparar la 0,05, las actividades antidiarreicas de los 4 extractos son
actividad antidiarreica de los cuatro extractos con diferentes, siendo mayor la actividad del extracto de
respecto a sus medias; como el valor de Sig. es menor a buganvilla como se observa en la Tabla 14.
pobreza1. En el presente estudio se estandariz la tcnica 4. Piedos Corpas J, Garcia Barriga H, Montaa Barrera E.
de determinacin de la actividad antidiarreica en el Extractos naturales de plantas medicinales. 2 da. Ed.
laboratorio del Programa de Frmacos Alimentos y universitario escuela de medicina Juan N. Corpas Bogot
Cosmticos (PROFAC) de la Facultad de Bioqumica y Colombia; 1998.
Farmacia, ya que no se realizaron estudios en Bolivia, 5. Thompson K. Salud y plantas Medicinales. Nuestra
Capacidad de estar sanos por naturaleza. 3ra. ed. Buenos
con bacterias que producen la diarrea en humanos.
Aires-Argentina: Planeta; 1992.
Se trabaj con extractos etanlicos de hojas de
6. Edwin E, Sheeja E, Toppo E, Tiwari V, Dutt K.
buganvilla y semilla de palto teniendo conocimiento de Utililizacion de la semilla de palta como producto
que estas plantas eran usadas desde la antigedad para agroindustrial. 2009 (acceso 6 de marzo 2009)
las diarreas. Disponible en http://farmacia.ugr.es/ars/pdf/384.pdf .
Se demostr que los extractos etanlicos de buganvilla 7. Warren E, Jawetz E. Microbiologa e inmunologa.
presentan actividad antibacteriana frente a Escherichia Manual Moderno. 3ra ed. Mxico: Mmundo moderno
Coli diarreogenica. Estos resultados son respaldados S.A; 2001.
por otros trabajos realizados especialmente en Mxico, 8. William S, Withe J. Plantas utilizadas en Mxico para el
que indican que la buganvilla tiene buena actividad tratamiento de asma. CIMET 2008 (Acceso 10 de marzo
antibacteriana contra enterobacterias.6 del 2009) Disponible en
As mismo las semillas de palto presentan actividad http://www.nietoeditores.com.mx/download/otorrinolarin
gologia/sep-
antidiarreica, por pruebas in vivo, resultado muy oct%202009/Otorrino%204.7%20ALGUNAS.pdf..
importante porque apoya el uso tradicional de esta
semilla como antidiarreico. Existen varios trabajos en
Mxico que indican que la semilla de palto tiene
actividad antidiarreica.7
La semilla de palto presenta actividad antibacteriana
frente a Escherichia coli diarreogenica, Shigella
dysenteriae, Salmonella typhimurium. Estos resultados
son respaldados por otros trabajos que indican que se
encontr buena actividad antibacteriana en las semillas
de palto, especialmente contra Salmonella thipy.8
En relacin a los metabolitos secundarios encontrados
en las plantas en estudio, se puede notar que en la
buganvilla se encuentran especialmente los flavonoides
y taninos, en trabajos previos se reportaron los
flavonoides como los compuestos ms importantes para
su actividad antibacteriana.6
El estudio realizado es preliminar por lo cual se propone
continuar con estudios aplicados a formas farmacuticas.
AGRADECIMIENTOS
REFERENCIAS