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AO DEL BUEN SERVICIO AL CIUDADANO

UNIVERSIDAD NACIONAL DE PIURA


FACULTAD DE INGENIERIA INDUSTRIAL
ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERIA
AGROINDUSTRIAL E INDUSTRIAS ALIMENTARIAS

PRESENTACIN DE SEMINARIO N 06

TEMA: Produccin de protena Unicelular

CURSO: Biotecnologa

DOCENTE: Blgo- Mcblgo. Csar Torres Daz, M Sc.

INTEGRANTES: Huamn Daz, Job

Ludea Fernandez, Ana Luca

Navarro Jurez Yefri Samir

Pasache Pizarro, Jhon Hairo

PIURA-2016
1. INTRODUCCIN

La biotecnologa, es una rama interdisciplinaria y aplicada de la ciencia que aglutina a


la qumica, biologa, bioqumica, ingeniera y microbiologa con el objetivo de
solucionar problemas prcticos, ojal implicando una optimizacin de costos y
rendimientos (Durn 1989). Uno de los objetivos primarios de la biotecnologa es
mejorar el manejo y aprovechamiento de grandes cantidades de desechos orgnicos
de origen agrcola, tratando de buscar alternativas para convertir estas fuentes de
polucin en materiales derivados tiles desde un punto de vista econmico e
industrial. Una de las tangentes ms importantes de la biotecnologa enfocada a
abordar este problema, es el empleo de microorganismos como parte de los procesos
industriales, donde substratos baratos o de desecho industrial se aprovechan como
fuente energtica para que microorganismos seleccionados sinteticen nuevos
compuestos de valor comercial (Goel 1994).
Muchos son los compuestos orgnicos derivados obtenidos por medio de un
aprovechamiento biotecnolgico de substratos de desecho (EDV 2003). Algunos se
obtienen en la forma de productos finales intermedios de la actividad metablica
microbiana que son excretados al medio o extrados industrialmente despus de la
clula (metanol, metano, etanol, vitaminas del complejo B, cido lctico y glutmico,
carotenoides, xilitol, etc). Es factible tambin que el producto en si seala biomasa
microbiana como tal (Rojas 1995), y que constituye una fuente alimenticia de elevado
contenido proteico.
Se denomina protena unicelular bioprotena (Molk et al. 2002), a aquella obtenida
de la biomasa microbiana de algas, bacterias, levaduras y hongos filamentosos,
cultivados en condiciones fermentativas apropiadas y controladas que garanticen una
adecuada tasa de crecimiento, por medio del aprovechamiento de sustratos baratos
compuestos por o enriquecidos con carbono, nitrgeno y fsforo (Israelidis 2003, Rojas
1995, Keil 1995, FAO 2003).
El trmino protena unicelular deriva de la contraccin de protena de organismos
unicelulares, que sera el trmino ms adecuado. La literatura cientfica se refiere a la
protena unicelular empleando el trmino SCP, el cual deriva del trmino anglosajn
single cell protein.

Resea histrica sobre la protena unicelular


La biomasa microbiana ha sido utilizada como fuente de alimentacin desde tiempos
remotos en regiones como Mxico y frica, especialmente utilizando Spirulina sp.
(Pelizer et al. 2003).
Ya en tiempos modernos, el primer gran auge de la SCP se da en Berln, Alemania,
durante la primera guerra mundial, dada la escasez de alimento provocada por este
funesto conflicto blico. La produccin se enfoc en el S. cerevisiac, que lleg a
remplazar hasta el 60% de la protena importada antes de la guerra. Terminada la
conflagracin, el inters en la SCP decrece (Israelidis 2003).
Iniciada la segunda guerra mundial, y por las mismas razones, se reactiva el inters en
la biomasa microbiana como fuente de alimentacin. Solo en los Estados Unidos se
produjeron 15.000 toneladas anuales de SCP, la cual fue incorporada en la dieta de
civiles y militares en forma de sopas y salchichas. Para esta poca se ensaya con
levaduras Candida arborea y Candida utilis (Israelidis 2003).
Dadas las experiencias de los aos de guerra, en los aos 1950, muchas empresas
petroleras mostraron inters en proyectar soluciones para el desalentador panorama
nutricional generado por la incipiente explosin demogrfica planificando la
produccin de biomasa partiendo de alcanos. Destacaron pases como Japn , Reino
Unido, Estados Unidos y la antigua Unin Sovitica, que lleg a instalar 86 plantas
productoras (Israelidis 2003).

La primera conferencia sobre protena unicelular se efectu en 1967 en el Instituto


Tecnolgico de Massachusetts (M.I.T). Se acua aqu el trmino SCP como estndar
internacional para la bioprotena (Crueger y Crueger 1989). Solo la British Petroleum
present procesos industriales de peso en esta primera conferencia, lo cual contrasta
con la segunda llevada a cabo en el M.I.T en 1973, donde muchos pases haban ya
iniciado producciones a gran escala.
Desde los aos 1980, y dada la competencia de otras fuentes de protena como la
soya, la produccin de SCP no se ubica entre las ms rentables. Actualmente solo
Rusia, debido a la remarcada escasez de carne y otras fuentes de protena, es una
productora importante de protena unicelular (Keil 1995).

Importancia de la protena unicelular


El crecimiento de la poblacin, especialmente en las naciones en vas de desarrollo es
abrumador esperndose en la primera dcada del siglo 21 que la poblacin mundial
alcance entre cinco y seis billones de personas (Goel 1994, Chicas 1999; Hernndez et
al. 2003).

La agricultura y ganadera convencional muy posiblemente no sean capaces de suplir la


demanda proteica de esta emergente poblacin (Goel 1994), proyectndose que el
planeta necesitar producir entre los aos 1980- 2015 una cantidad de productos
agrcolas igual a los generados a travs de la historia antes de esa fecha.

Adems, la adecuada alimentacin animal es un tem de elevado costo, algo muy


determinante en la produccin (Suharto y Redyowati 1999). Solucionar el problema de
la alimentacin humana implica en primer lugar solucionar mucho el problema de las
fuentes de protena para alimentacin animal. Se est pues ante una demanda en
constante incremento de fuentes protenicas de alto valor nutritivo (De Mulder et al.
1989), la cual empieza a ser insuficiente (Crueger y Crueger 1989).

La biomasa puede ofrecer una gran alternativa para remplazar algunas de las fuentes
tradicionales de protena (soya, harina de pescado, suero descremado de leche) en
piensos para el consumo animal.
2. MARCO TEORICO

2.1 PRODUCCIN DE PROTENAS UNICELULARES (PUC)


El trmino protena unicelular (PUC) se emplea para referirse a microorganismos
tales como bacterias, levaduras, algas y hongos filamentosos, que son empleados
para alimentacin humana o animal, principalmente por su alto contenido en
protenas. El hombre ha consumido microorganismos presentes en alimentos
fermentados desde hace siglos y ms recientemente empleo para consumo animal
microorganismos derivados de la produccin de cerveza y de bebidas alcohlicas.
Pero el alto costo de su produccin slo es competitivo en ciertas circunstancias con
respecto de las protenas de origen vegetal. Los microorganismos crecen
rpidamente, lo cual es una de las razones ms importantes para su inters en su
produccin industrial.
Bacterias de los gneros Methilomonas, Pseudomonas, Bacillus y Aerobacter
tuvieron en los 60 gran inters debido a su alta velocidad de duplicacin y alto
contenido proteico pero el incremento del costo de los sustratos (metano, metanol,
hidrocarburos...) han limitado su aplicacin.

Sin embargo ciertas especies de levaduras, como Candida utilis, Saccharomyces


cerevisiae y Kluyveromycees fragilis ( k.marxianus ) han sido aceptadas para
alimentacin humana y producidas continuamente desde la Segunda Guerra
Mundial.

Los hongos filamentosos y las algas tienen la desventaja de crecer ms lentamente.


En la actualidad se producen comercialmente los hongos Gliocladium deliquescens,
Paecilomyces varioti y Fusarium graminearum y las algas Spirulina y Chlorella. En el
caso de las algas su produccin es similar a la de la agricultura convencional.

En cuanto al sustrato, aunque la atencin inicial se centr en hidrocarburos y


derivados del petrleo recientemente se ha derivado hacia recursos renovables
como residuos agrcolas y subproductos industriales. En muchos casos los sustratos
requieren de un pretratamiento fisico, qumico o enzimtico previo a la
fermentacin.
Los residuos agrcolas forestales, por ejemplo deben ser hidrolizados a azcares
simples o sometidos a una deslignificacin parcial para que puedan ser fcilmente
accesibles a los microorganismos.

2.1.1. BIOQUMICA BSICA Y PROCESO DE OBTENCIN DE LA PUC.

El proceso de obtencin de protena unicelular puede involucrar una gran variedad


de procesos bioqumicos, en concordancia con la amplia gama de microorganismos
que pueden ser utilizados. Genricamente, la produccin de biomasa (PUC),
pueden expresarse a travs de la siguiente ecuacin (Rojas, 1995):
C (H20) (Fuente carbonada) + H20 + NH4- + (amonio) + Sustrato
Mineral (P, K, S, Na, Ca, Fe)

CHNO (biomasa, PUC) + CO2 + H20 + (Energa de activacin)

El proceso bioqumico anterior, como es lgico, requiere de una fuente de carbono


a fermentar, la cual debe ser cualquiera de los substratos ya mencionados en la
seccin de microorganismos y materias primas. Algunas de estas fuentes suelen ser
pobres en nitrgeno y minerales, por lo que es necesario un suplemento con sales
de amonio u otras fuentes de nitrgeno. Como productos de la fermentacin, se
obtiene la biomasa y se liberan energa y gases, como CO2.

Los microorganismos deben ser inoculados en un medio particularmente favorable,


tanto en condiciones de competencia (medio previamente esterilizado) como en
condiciones nutricionales. Por ello se requiere un pretratamiento inicial que no
altere indeseablemente substrato y que garantice que favorezca el desarrollo de la
PUC.

El proceso de produccin de PUC debe tener en cuenta las siguientes pautas:

Reduccin del tamao y homogeneizado mecnico, de modo que sea ms


accesible al microorganismo y ms fcil de manipular en la fermentacin.
Eliminado de agentes inhibidores del crecimiento microbiano, tales como
toxinas y trazas de residuos qumicos. Asimismo, debe garantizarse la inexistencia
de substancias que puedan causar efectos txicos en la PUC obtenida
posteriormente.
En algunos casos, cuando el microorganismo a emplear necesita metabolizar
formas orgnicas ms simples, el substrato debe hidrolizarse enzimtica o
qumicamente empleando cidos, lcalis o enzimas, tales como amilasas o
diastasas.
Suplementacin del medio con nutrientes como fsforo y sales nitrogenadas
que sirvan de fuente mineral a la PUC.
Ajuste del pH y de la humedad del substrato, de modo que favorezcan el
crecimiento de los microorganismos involucrados. Generalmente se requiere
regular constantemente las condiciones de pH empleando buffers
(amortiguadores). El ajuste del pH se mantiene a lo largo del proceso fermentativo y
no solo durante el pretratamiento del substrato. En la mayora de los casos, el pH
suele ser cido y ronda valores de 4 5 a lo largo del proceso.
Tratamiento trmico del substrato para eliminar la flora bacteriana patgena
y/o competitiva de la matriz. El tratamiento puede ser: i) pasteurizado en matrices
destinadas a fermentacin en substrato lquido, o ii) esterilizacin en substratos
slidos. En general, los parmetros del proceso trmico rondan los 1222-123 C por
un tiempo de 30-45 minutos.

2.1.2 MICROORGANISMOS Y MATERIAS PRIMAS


Las bacterias, principalmente los gneros Methylomonas, Pseudomonas, Bacillus y
Aerobacter, recibieron en la dcada de 1960 un inters especial como fuentes
potenciales de PUC, debido a que son capaces de duplicarse en un periodo de 20 a
30 minutos y a su alto contenido de protenas, que puede llegar hasta 85% en base
seca. No obstante estas cualidades, el incremento en el costo durante las ltimas
dos dcadas de algunos sustratos considerados para su propagacin, tales como
metano, metanol, etanol o hidrocarburos, ha limitado su aplicacin.

En contraste, ciertas especies de levaduras como Candida utilis, Saccharomyces


cerevisiae y Kluyveromyces fragilis (ahora conocida como K. marxianus) han sido
aceptadas durante largo tiempo, tanto en alimentacin animal como humana, y se
han producido continuamente a partir de la Segunda Guerra Mundial. Los hongos
filamentosos y las algas tienen la desventaja de crecer ms lentamente que las
bacterias y levaduras; sin embargo, en la actualidad se producen comercialmente
los hongos Gliocladium deliquescens, Paecilomyces varioti y Fusarium
graminearum, y las algas Spirulina y Chlorella.

En el caso de las algas, su produccin es en algunos aspectos similar a la agricultura


convencional, en donde no se aplican las caractersticas de alta productividad, tiene
pocos requerimientos de terreno, y no hay una dependencia de condiciones
climticas que prevalecen en procesos de produccin de PUC a partir de bacterias,
levaduras y hongos.

2.1.3 MICROORGANISMOS EMPLEADOS COMO FUENTE DE PROTINA UNICELULAR


(SCP).
ELECCIN DEL MICROORGANISMO
Se deben tener en cuenta criterios como el sustrato necesario y los posibles
suplementos del mismo, la velocidad de crecimiento, productividad y rendimiento
del sustrato, el PH y la temperatura, la aireacin, morfologa del crecimiento en el
fermentador, seguridad y no patogenicidad, ausencia de productos txicos, facilidad
de recuperacin de las protenas de organismos unicelulares, la composicin
proteca, el contenido de RNA (indeseable para la utilizacin humana)

Los primeros microorganismos empleados como fuente de protena fueron las


levaduras, especialmente Saccharomyces cerevisiae, que an hoy da es la principal
fuente de SCP con una produccin de 200.000 toneladas anuales en peso seco
(Biocity 2003, Chicas 2003).

Son tambin de uso amplio Spirulina mxima (Pedraza 2003), Aspergillus niger
(Arias 2001), Kluyveromyces fragilis (Hernndez et al. 1979) y Candida utilis
(Phetteplace et al. 2003).
La Tabla 1 muestra la lista de muchos de los organismos de inters en la obtencin
se biomasa

Tabla 1. Microorganismos ms importantes en la produccin de protena celular.


2.2 DISEO DEL FERMENTADOR.

Econmicamente el proceso debe realizarse en el mnimo de fermentadores


posibles a gran escala. Con objeto de maximizar la productividad es esencial operar
en procesos continuos, manteniendo velocidades de crecimiento microbiano
elevadas y minimizando el tiempo de residencia en el reactor. Un parmetro de vital
importancia es una elevada velocidad de transferencia de oxgeno que implica una
elevada productividad y gran desprendimiento de calor metablico que debe ser
refrigerado eficazmente.
a) Bioreactor de BP en su plantas de Escocia y Cerdea (1800m3) agitado
mecnicamente con deflectores con mezcladores de turbina y
aireacin mediante difusores.
b) Con el gas-oil BP utiliza un diseo con tubo de retorno agitado por aire.
c) Fermentador agitado por aire de Kanegufuchi en el que el medio de
fermentacin es conducido por un bucle giratorio externo por la fuerza
del aire.
d) Fermentador piloto de ICI con presurizacin combinacin de reactor
agitado por aire y otro de bucle, es una columna agitada por aire con
un tubo de retorno donde se elimina el calor.
e) El fermentador de produccin del diseo piloto de ICI en cambio no
tiene tubo de retorno externo.
f) Fermentador con dos agitadores con ejes separados funcionando a sus
respectivas velocidades ptimas para optimizar la transferencia de
masa en las fermentaciones de biomasa fngica.
Fig1. Fermentadores utilizados en la produccin de protenas de organismos
unicelulares
2.3 PROCESOS DE FERMENTACIN DE LAS PROTENAS DE ORGANIMOS
UNICELULARES.

Fig2. Esquema de un proceso lipdico de produccin de protenas de organismos


unicelulares a partir de metanol (reproducisdo con permiso de Litchfield, 1938)

2.4 USOS DE LA BIOMASA Y LA PROTENA UNICELULAR.


A partir de la biomasa microbiana pueden desarrollarse muchos productos
derivados, dada su riqueza composicional: carbohidratos, lpidos, protenas,
cidos nucleicos, vitaminas, entre otros (Rojas, 1995).

El uso de la protena unicelular en piensos es el ms inmediato y menos


tecnificado de todos.

Productos ms elaborados que la biomasa cruda pueden obtenerse


industrialmente y ser utilizados como protena suplementaria en alimentos
humano y animal, ingrediente funcional en alimentos, o sustrato para
procesos qumicos o biotecnolgicos. (Durn, 1989)

La protena unicelular encuentra adems aplicaciones an experimentales


en el campo de la salud. Recientes investigaciones evalan el papel de la
PUC como un nutriente de control inmunitario en pacientes quirrgicos con
hipoproteinemia, hiperglucemia, anemia e hipercolesterolemia (EDV, 2003).

Tabla 2. Aprovechamiento industrial de los principales componentes de la


biomasa bacteriana.

2.5 SUBSTRATOS PARA LA PRODUCCIN DE PROTENA UNICELULAR (SPC).

2.5.2 HIDROCARBUROS Y COMBUSTIBLES


a. Petroqumicos (n-alcanos)
En un principio los substratos principales fueron de naturaleza fsil,
es decir hidrocarburos siendo este campo el de mayores inversiones
en investigacin y desarrollo (Biocity 2003). El principal problema de
los hidrocarburos como sustrato es su naturaleza no renovable, a lo
cual se suma un costo econmico a veces mayor. Muchos de los
hidrocarburos que se destinan a la produccin de SCP son alcanos de
cadena carbonada de 12 a 20 tomos de carbono fcilmente
utilizables como sustituto de carbohidratos como fuente nutricional
de la biomasa (Biocity 2003).

Productos derivados de la actividad petrolera son tambin


metabolizables, emplendose incluso la parafina como substrato
(Butolo et al. 2003).
Los n-alcanos pueden obtenerse a partir del mismo petrleo crudo
(Hernndez 1979, Keil 1995) y constituyen la fraccin de ceras del
gasoil que debe ser removida pues aumenta la viscosidad y tiende a
causar precipitaciones a baja temperatura. La principal desventaja de
los n-alcanos es su baja solubilidad (10-4 - 10-9 v/v) lo cual dificulta el
proceso de suspensin que muchas veces requiere de forzamiento
mecnico. De hecho las especies seleccionadas para el crecimiento
en estos medios probablemente tiene la capacidad de secretar
sustancias emulsificantes que conviertan los n-alcanos insolubles en
gotas de 0,01 - 0,5 mm de dimetro, de modo que las mismas puedan
difundir pasivamente a travs de la membrana lipdica (Crueger y
Crueger 1989).
La protena unicelular derivada de los n-alcanos se denomina
genricamente Toprina (Keil 1995, Israelidis 2003), y se obtiene
principalmente por crecimiento de Candidor lipolytica, C. tropicalis,
Candida oleophila y Saccharomycopsis lipolytica (Crueger y Crueger
1989), as como de bacterias oxidativas. El medio suele ser
enriquecido con NH3 como fuente de nitrgeno y Mg como
suplemento mineral.
La Toprina cuenta con una baja popularidad debido a los
cuestionamientos generados en los aos setenta por los japoneses,
en cuanto a que hidrocarburos aro-mticos pudiesen ser
transportados por la SCP que creciere en substratos derivados del
petrleo, y que por consiguiente existiere un riesgo carcinognico en
la in-gesta. Investigaciones posteriores del gobierno Italiano parecen
demostrar que el temor es infundado (Israelidis2003). No obstante el
estigma resultante de la feroz controversia, en conjuncin con los
siempre inestables precios del petrleo, han hecho que los
hidrocarburos caigan en un segundo plano como substratos para la
SCP.

b. Metano:
Los estudios con metano para su uso como sustrato para la SCP
inician en los aos 70 en Inglaterra por iniciativa de la compaa
Shell. El metano es un sustrato barato y abundante, el cual de hecho
existe en exceso en muchas partes del mundo, donde es fcil de
conseguir con muy alto grado de pureza (Crueger y Crueger 1989).

Quizs, su mayor ventaja es que no presenta los cuestionamientos de


toxicidad que se argumentan en contra de los n-alcanos (Israelidis
2003). Dada su estructura qumica (CH4), el metano presenta la
forma carbonlica ms reducida, lo cual permite a las clulas
microbianas obtener el mayor rendimiento por volumen de gas
consumido El principal problema que presenta el metano es que este
no se lica con facilidad, por lo cual se pueden implicar muy altos
costos por concepto de licuado y posterior transporte al lugar de
proceso (Crueger yCrueger 1989).

Las bacterias que oxidan el metano son denominadas metilforos


obligados y solo metabolizan substratos de un solo carbono. Entre
ellas estn Methylomonas methanica, Methylococcus capsulatus,
Methyvibriosoehngenii, Methanomonas margaritae as como los
gneros Acinetobacter y Flavobacterium. Puesto que el metanol es de
manejo ms simple y de ms fcil transporte, y el metano puede ser
transformado en metanol, se prefiere utilizar este ltimo como
sustrato para los sistemas que utilizan materiales de un solo carbono.

c. Metanol:
El metanol fue en determinado momento el substrato ms
importante y barato para la produccin de SCP (Crueger y Crueger
1989, Biocity 2003). Entre las principales ventajas del metanol, est el
hecho de que puede ser obtenido a partir de una amplia gama de
fuentes como el gas natural, la gasolina, la hulla y hasta desechos
agroindustriales.

En la fermentacin del metanol se emplean ms las bacterias como


por ejemplo Methyluphilus methylotropha, dado su ms rpido
crecimiento, su mayor con-tenido de protena, su mayor rendimiento
y requerimientos ms sencillos de cultivo (Crueger y Crueger1989).
Generalmente estos requerimientos implican la suplementacin con
amonio del medio (Biocity 2003).

La protena obtenida a partir del metanol se conoce genricamente


como Pruteen (Israelidis 2003). Actualmente la produccin de
Pruteen no es econmicamente rentable debido a las condiciones de
mercado (Crueger y Crueger 1989, Israelidis 2003).

d. Etanol

En comparacin con el metano y el metanol, el etanol cae en un


tercer lugar dado su costo comparativa-mente ms elevado.
Generalmente el proceso fermentativo se hace por medio de
levaduras grado alimenticio "torula". La SCP obtenida por este
medio se denomina pues genricamente como "Torutein"
(Israelidis2003) y suele caracterizarse por su bajo contenido de
methionina. La Torutein suele presentar valores de PER cercanos a
1,7. El PER (Protein Efficiency Ratio) es una forma de medir la calidad
de una protena y corresponde al peso que gana una rata en
crecimiento dividido entre la ingesta de protena necesaria para
generar ese aumento de peso en el perodo de estudio (SOLAE 2003,
Whey Protein Institute 2003).

A medida que el valor del PER se incrementa, as aumenta tambin la


calidad dietaria de la protena (Whey ProteinInstitute 2003). El valor
biolgico es otra unidad alter-nativa de medicin para la calidad de
protena que corresponde a la fraccin del nitrgeno en la dieta que
permanece en el organismo despus de la digestin, a diferencia del
nitrgeno que se pierde en las heces (Whey Protein Institute 2003).

2.5.3 DESECHOS INDUSTRIALES.

Los desechos agroindustriales son las materias primas ms baratas y


diversas, especialmente si se aprovechan en el lugar donde son
producidos, con lo que pueden eliminarse los costos de transporte y
minimizar la contaminacin ambiental.
A continuacin se citan algunos de los residuos ms representativos
como fuente de carbono:

Aguas residuales de las industrias de la celulosa, del caf, de


almidn, de procesamiento de alimentos y del papel (aguas
sulfticas), empleando Candida utilis, C. tropicales, Chaetomium
cellulolyticum y Paecilomyces varioti (Crueger y Crueger, 1989).
Residuos de cscaras de ctricos con Fusarium culmorum
(Duran, 1989) o Residuos de la industria vincola o vinazas con
Chaetomiun cellulolycum (Rojas, 1995).
Hidrolizados de cuernos y pezuas sobrantes de la industria
crnica con Bacillos subtillis (Kurbanoglu y Algur, 2002).
Bagazo de banano y caa empleando Saccharomyces
cerevisiae, Aspergillus nigis y Aspergillus foetidus.
Excretas de animales de granja.

Cada residuo requiere de un tratamiento de pasteurizacin previo y


de unas condiciones de incubacin posteriores favorables al
microorganismo especfico que en ellos se hace prosperar.

2.5.4 SUBSTRATOS DE ORIGEN VEGETAL NO CONSIDERADOS COMO DESECHOS:

Los substratos de origen vegetal como la madera y carbohidratos han estado muy en
boga desde los aos70 en la produccin de SCP. Estos materiales vegetales, fuente de
celulosa, lignocelulosa y de lignina, se tratan preliminarmente hidrolizando en medio
cido (H2SO4) o por medios enzimticos (Crueger y Crueger 1989). Esta ltima hidrlisis
se logra con un complejo de celulasas extra-celulares (endo--1,4-glucanasa; exo--
1,4-glucanasa y -1,4-glucosidasa) que son excretadas por bacterias (Cellulomonas) o
por hongos (Trichoderma, Penici-llum, Thermoascus, Sporotrichum, Humicola). Otros
autore (Israelidis 2003), reportan que la hidrlisis previa puede lograrse por mtodos
alcalinos y hasta por exposicin a radiaciones X. La hidrlisis garantiza que todos los
polisacridos complejos existentes en la matriz pasen a formar azcares simples
fermentables ms asimilables metablicamente para los microorganismos.

Los hidrolizados de madera se han ensayado con Candida utilis, mientras que los de
paja con Trichosporonsp obteniendo rendimientos de 42% y 30 % respectivamente.
Hidrolizados del grano de sorgo tambin has ido objeto de estudio empleando Candida
crusei y Saccharomyces sp. Los rendimientos a partir de materiales con celulosa,
lignocelulosa y lignina aun no son lo suficientemente buenos como para lograr
procesos industriales de ata escala que sean rentables. Esto no tanto por el
crecimiento en s de la SCP, si no por lo poco eficientes que pueden resultar los
procesos previos de hidrlisis (Crueger y Crueger 1989).

2.6 OBTENCIN DE PUC A PARTIR DE ALGUNOS DESECHOS AGROINDUSTRIALES.

La variedad de procesos para obtener PUC es tan grande como la cantidad misma
de microorganismos que puede ser empleada. Por ello, lo que a continuacin se
expondr no debe considerarse como procesos generalizados, sino ms bien como
casos particulares ilustrativos.

2.6.2 Obtencin de bioprotena a partir de bagazo de naranja (Citrus sinensis) con


Aspergillus niger (Bustamante et al., 2003).

En las diferentes industrias frutales y como productos domsticos, se tiene una


gran cantidad de residuos de frutas que no tienen ninguna utilidad y son desechos
que se encuentran en los basurales, siguiendo un proceso normal de
descomposicin.

La biotecnologa ha desarrollado una serie de procedimientos que permiten


realizar un tratamiento biolgico a los residuos con microorganismos adecuados,
con el fin de producir la denominada bioprotena o enriquecer los alimentos,
incrementando el nivel de protena con los mismos.

La materia prima utilizada es el residuo que queda despus de la expresin del


jugo, a la cual se le realizan los anlisis previos tales como: % de humedad, %
ceniza total, % fibra total, nitrgeno total, nitrgeno amoniacal, % nitrgeno
orgnico, y la medicin de pH.
El bagazo de naranja enriquecido por Aspergillus niger se convierte en un alimento
altamente nutritivo para el uso como alimento balanceado, pues contiene diversos
aminocidos esenciales, pudiendo reemplazar a la protena proveniente de la soya
o el maz.
2.6.3 Produccin de PUC a partir de desechos de vinaza con Cndida utilis
(Daz et al., 2007).

En el proceso de la destilera para producir alcohol etlico, se produce un residuo


lquido final llamado vinaza, el cual se ha reconocido como un compuesto rico en
sales minerales y materia orgnica, que ha sido usado principalmente como
fertilizante en los campos de los cultivos.

La vinaza constituye el residuo de mayor importancia en las destileras de alcohol,


debido al gran volumen de produccin. La vinaza representa aproximadamente el
90% del volumen de fermentacin original; es un lquido de color de caf con bajo
pH, olor dulce y alto contenido de materia orgnica disuelta y en suspensin.

En el caso de las industrias licoreras, la vinaza ha sido normalmente vertida a las


corrientes de agua sin tratamiento alguno, causando una gran contaminacin
ambiental (la demanda biolgica de oxgeno oscila entre 7000 y 20000 mg/litro).
Por poseer altos valores de DQO (Demanda Qumica de Oxgeno) y DBO (Demanda
Bioqumica de Oxgeno), un bajo valor de pH, taninos y otras sustancias podran
provocar disminucin en el oxgeno disuelto en el medio ambiente, favoreciendo
la proliferacin de organismos patgenos y la muerte de animales benignos para
el ecosistema.

El aprovechamiento de las vinazas recolectadas de la planta de tratamiento de una


industria alcohlica para la produccin de protena unicelular mediante
fermentacin aerbica con Cndida utilis determin la concentracin ms
apropiada de una mezcla de nutrientes conformada por sulfato de amonio, urea y
extracto de malta, que se agreg al desecho lquido de vinaza, para obtener el
mximo crecimiento en el menor tiempo posible. Adicionalmente, se determin la
concentracin de protena que posee la biomasa de levadura cultivada, con el fin
de conocer si es posible su produccin como suplemento en frmulas para
alimentacin animal. La levadura Candida utilis puede crecer, reproducirse y
adaptarse en el desecho de vinaza, obtenindose un producto con alto contenido
de protena.

2.6.4 Produccin de protena unicelular de levaduras crecidas en desechos


de harina de maz precocida (Zea mays) (Gualtieri et al., 2007).

El procesamiento industrial de la harina de maz precocida genera


aproximadamente 6 toneladas por da de desechos slidos orgnicos, volumen
que generalmente las empresas depositan en rellenos sanitarios, con el objetivo
de promover una putrefaccin rpida, mezclando los desechos con lodos
provenientes de la planta de tratamiento de aguas residuales. La enorme cantidad
de desecho produce problemas de costosa deposicin y difcil solucin. En un
estudio preliminar que se realiz sobre la composicin bioqumica de esos
desechos, se determin que poseen un alto contenido de materia orgnica
(79.45%), formada principalmente por almidn. Esta circunstancia condujo a
proponer una solucin biotecnolgica, aprovechando la capacidad de las levaduras
para metabolizar, mediante procesos fermentativos, materia orgnica y generar
protena unicelular con alto valor proteico similar a la de origen vegetal.

Saccharomyces cerevisiae representa una de las levaduras de primera eleccin


para la produccin industrial de biomasa y etanol, y que careciendo de actividad b-
galactosidasa, amilasa y glucoamilasa, las levaduras en gemacin son incapaces de
fermentar el almidn. Schwanniomyces castelli es una levadura amiloltica, capaz
de degradar el almidn por dos amilasas secretadas, una -amilasa y una
glucoamilasa; la produccin de estas enzimas es inducida por la ausencia de
glucosa, por la presencia de maltosa o almidn. Cndida utilis es una levadura que
tiene una alta tasa de crecimiento que ninguna especie ha logrado superar, y que
requiere de un sustrato rico en azcares o fuentes de carbono, para su
crecimiento o cultivo.

Mediante fermentaciones aerbicas de los desechos de harina de maz precocida


con levaduras, se pueden enriquecer en protena unicelular. A los residuos de
harina de maz precocida se les aplican tratamientos qumicos y enzimticos con la
finalidad de obtener azcares fermentables por las levaduras.

Obtener biomasa a partir de las tres levaduras mencionadas permite ofrecer una
tecnologa para disponer de un desecho agroindustrial contaminante y
proporcionar una solucin ecolgica con un beneficio econmico, til como aporte
proteico para dietas de animales.

Los desechos generados durante el empacado de harina de maz precocida


pueden enriquecerse en protenas microbianas por procesos de fermentacin
liquida, los cuales poseen 78.55% de almidn y 7.8% de protena. Los desechos
son sometidos a hidrlisis por tratamientos qumicos y enzimticos.
En general, los desechos de harina de maz precocida constituyen un substrato
adecuado para obtener biomasa o protena unicelular, que podra ser destinada
como suplemento en formulaciones para alimentacin animal.

2.6.5 Determinacin de protena total de Candida utilis y Saccharomyces


cerevisiae en bagazo de caa (Gutirrez y Gmez, 2008).

Dentro de los desechos agroindustriales se encuentra el bagazo de caa,


producido en grandes cantidades en las centrales azucareras. Ante esta situacin,
la biotecnologa ha desarrollado una serie de procedimientos que permiten
realizar un tratamiento biolgico a estos residuos, con el fin de producir PUC con
microorganismos adecuados que aumentan el valor nutricional de los mismos.

En la investigacin de Gutirrez y Gmez (2008) se produjeron concentrados


proteicos de las levaduras C. utilis y S. cerevisiae, como suplementos de
alimentacin animal mediante el aprovechamiento biotecnolgico del desecho
generado en el procesamiento industrial de la caa de azcar. El bagazo de caa
previamente hidrolizado sirvi como sustrato para el crecimiento de las dos
levaduras, evalundose la composicin de las levaduras y protena total producida.
Ambos microorganismos presentaron un contenido balanceado de aminocidos,
sugiriendo su empleo potencial como concentrados proteicos.

2.6.6 Produccin de biomasa de Saccharomyces cerevisiae y Candida utilis


usando residuos de pulpa de Coffea arabica L.

La pulpa de caf es el residuo slido principal del beneficio hmedo del grano de
caf, y constituye aproximadamente el 41% del peso hmedo del grano de caf.
Para 1996, la produccin mundial de residuos de caf se estim en cerca de 22
millones de toneladas mtricas (TM) de pulpa de caf, 2,4 millones TM de
muclago y 8,6 de pergamino. Estas cantidades fluctan cada ao de acuerdo a las
variaciones en las tcnicas usadas en el procesamiento y produccin del caf. El
problema de disposicin de los residuos del caf, sin embargo, es enorme y
representa una contaminacin potencial en los pases productores.
Los esfuerzos para reciclar los residuos de caf comprenden actividades tales
como: compostaje, alimentos para animales, produccin de fertilizantes orgnicos,
protena unicelular y biogas. El mejoramiento de los valores nutricionales de la
pulpa de caf por tratamientos biolgicos incluye procesos aerbicos y
anaerbicos, empleando microorganismos tales como levaduras, bacterias y
mohos. Se conocen alternativas bien estudiadas en el tratamiento combinado con
hongos filamentosos y levaduras. El proceso involucra un consorcio de
microorganismos que son tpicamente usados para la bioconversin de residuos
lignocelulsicos (Thrichoderma viride y Aspergillus niger), y levaduras como
Saccharomyces cerevisiae y Candida utilis, en diferentes combinaciones.
Inicialmente, los hongos filamentosos degradan la celulosa y hemicelulosa
presente en la fibra y, subsecuentemente, las levaduras fermentan los azcares
libres producidos. Dichos hongos pueden tambin mejorar los valores
alimentarios de otros residuos agroindustriales. Dentro de los cultivos no
convencionales, el caf es uno de los ms prometedores para la obtencin de
protena unicelular o biomasa en Colombia, debido a su alto contenido de hidratos
de carbono fcilmente hidrolizables.

Puede decirse que la pulpa de caf constituye un sustrato adecuado para obtener
biomasa o protena unicelular, que podra ser destinada como suplemento en
formulaciones para alimentacin animal (Gualtieri et al., 2007).

2.7 ASPECTOS NUTRICIONALES DE LA PROTENA UNICELULAR.

2.7.2 COMPOSICIN GENERAL Y VALOR NUTRICIONAL DE LA PROTENA


UNICELULAR.

La protena unicelular como ya se estudi, puede generarse a travs del


crecimiento de muchsimas especies diferentes de hongos, algas, levaduras y
bacterias. Caracterizar la composicin particular de cada uno de estos
microorganismos resultara una tarea muy amplia. No obstante, dadas las
similitudes es posible expresar en trminos ms generales la composicin de estos
microorganismos segn su tipo (Tabla 3).
Tabla 3. Composicin porcentual promedio en base seca de los principales
microorganismos empleados

Puede denotarse que el principal valor de la biomasa microbiana es su aporte de


protena. Segn la Tabla 3, los contenidos de protena alcanzan un mximo para
las bacterias y un mnimo para hongos filamentosos, quedando las levaduras y
algas en una posicin inter-media. Esta protena bacteriana es nutricionalmente
similar a la protena del pescado, mientras que la de levadura mantiene similitudes
con la de soya (Israelidis2003).

En cuanto a minerales, la SCP destaca como fuente de fsforo, aunque suelen ser
pobre en calcio, as como no es buena fuente tampoco de lpidos dietarios (FAO
2003). Es posible establecer un perfil general y aproximado de aminocidos para la
protena unicelular, el cual se denota en el perfil de aminocidos esenciales es uno
de los factores bsicos a la hora de evaluar la calidad de un substrato proteico
como alimento.

Por lo general los aminocidos limitantes son la lisina, metionina y el triptofano. A


partir de la Tabla 4 puede verse que la protena microbiana, anteriormente citada
como la de mayor rendimiento, es deficiente en aminocidos sulfurados como la
cistena y la metionina mientras que exhibe mejores niveles de lisina. Este
problema hace necesaria la suplementacin (Annimo 2003). El perfil de
aminocidos de las levaduras es favorable, con niveles satisfactorios de la mayora
de los aminocidos esenciales, mantenindose eso si las bajas proporciones de
aminocidos sulfurados como factor limitante y alcanzndose de hecho niveles
crticos en la metionina. Las deficiencias en determinados aminocidos esenciales
no descalifican en lo ms mnimo a la SCP. Alimentos tan comunes como la leche o
las leguminosas son tambin deficitarios, as como varios cereales bajos en lisina.
Tabla 4. Perfil de aminocidos esenciales promedio en g/100gde protena de los
principales grupos de microorga-nismos empleados como SCP.

El secreto est en la suplementacin y en la incorporacin dentro de dietas


balanceadas. Dejando de lado los dficits y considerando las Tablas antes
expuestos, las SCP pueden considerarse como un excelente concentrado proteico.
Ellos hacen de la SCP un excelente suplemento de dietas para animales, dnde se
han obtenido excelentes resultados en rumiantes (Phetteplace, et al.2003,
Berquist y Jurgenson 2003).

La Tabla 5 muestra como la SCP puede ser utilizada en la sustitucin de varias


fuentes tradicionales de protena para dietas animales.

Tabla 5. Ahorros en piensos animales por sustitucin parcial con SCP.


La calidad nutricional de la SCP no slo depende del perfil de aminocidos.
Aspectos tan importantes como la digestibilidad, el valor biolgico, la utilizacin
neta de protena y el PER deben tomarse en cuenta (Israelidis 2003). La
digestibilidad es uno de los problemas que eventualmente puede presentar la SCP,
especialmente con levaduras. Esto se da pues ciertas especies presen-tan paredes
celulares indigestibles para el ser humano y hasta para ciertos animales, lo cual
puede ser causa de alergias (Israelidis 2003, Butolo, et al. 2003). No obstante esta
limitante, la digestibilidad no deja en muchos casos de considerarse como buena
(annimo 2003). La palatabilidad y la aceptabilidad son otro problema de inters,
pues muchos de los resultados sensoria-les obtenidos en los estudios no suelen
ser muy halageos tanto en humanos como animales (Israelidis2003)
En trminos muy generales se ha estimado que la protena unicelular cuenta con
un PER que ronda valores de 2,02 en comparacin con el de 2,5 para la casena
(Berquist y Jurgenson 2003) y una digestibilidad mayor o igual a 82% (EDV2003).

En la Tabla 6 se muestran los valores de digestibilidad, utilizacin neta de


protena y valor biolgico de diferentes fuentes de protena unicelular.

Tabla 6. Parmetros nutricionales de la SCP.

La SCP se caracteriza por ser una fuente alimenticia de bajas caloras (388 c/100 g
en promedio). No se han detectado pruebas contundentes que denoten
problemas toxolgicos causados por la ingesta de SCP. Estudios efectuados con
ratas alimentadas con dietas de 30% de SCP pura no reportaron efectos sobre el
crecimiento sobre la ingesta de otros alimentos, o sobre valores he-mticos
(Annimo, 2003). La biomasa microbiana con-tiene tambin toda una serie de
compuestos nutricionales tales como vitaminas, enzimas, carotenos, tocoferoles y
dems.

Algunas de las vitaminas ms importantes presentes en algunos microorganismos


empleados como fuente de SCP se citan a modo de ilustracin en la Tabla 7.

Tabla 7. Contenido aproximado de vitaminas en mg/100g (base seca) de algunos


microorganismos empleados como fuente de SCP.
En la SCP, las vitaminas presentes son primordial-mente del complejo B. La
vitamina B12 se encuentra primordialmente en bacterias, mientras que la vitamina
A se encuentra generalmente en algas. La SCP suele encontrarse
significativamente des-provista de colesterol y grasas. As mismo, la SCP en su
forma ntegra podra cumplir funciones similares a la fibra diettica contribuyendo
a bajar la incidencia de la diabetes y la arteriosclerosis (EDV2003). Actualmente se
estudia el papel de ciertos antgenos rectificadores de la actividad de los linfocitos
T presentes en las SCP y que son promotores de una mejor respuesta inmune en
las enfermedades (EDV, 2003)

Limitaciones nutricionales asociadas con los cidos nucleicos


La fraccin ms importante del nitrgeno no proteico de la SCP, alrededor de un
30% o 20% de la pro-tena total, se encuentra en forma de cidos nucleicos
altamente polimerizados y de sus productos de descomposicin (Israelidis 2003,
FAO 2003). El alto contenido de cidos nucleicos es normal y caracterstico de to-
do organismo que presente altas tasas de crecimiento, como es el caso de la
protena unicelular, y puede ser un serio inconveniente si esta se piensa destinar
para el consumo de seres humanos (Annimo 2003).Al momento de calcular una
dieta mixta es muy importante no dejar de tomar en cuenta que adems del
contenido de cidos nucleicos (AN) propios de la fuente de SCP, la matriz donde se
incluir esta tambin puede tener AN. Una forma de controlar el contenido de
cidos nucleicos es no manejando tasas de crecimiento demasiado aceleradas.
Otra forma es tratando la SCP de modo que el contenido de AN baje por debajo de
2% tal y como recomienda la FAO. Con este fin se aplican diferentes tratamientos
que se describen ms adelante en esta revisin.
2.8 IMPORTANCIA DE LA PROTENA UNICELULAR.

El crecimiento de la poblacin, especialmente en las naciones en va de desarrollo,


es abrumador. Se espera que, para la primera dcada del siglo XXI, la poblacin
mundial alcance entre cinco y seis billones de personas.
Es muy probable que la agricultura y ganadera convencionales no sean capaces de
suplir la demanda proteica para esta poblacin emergente, proyectndose que
necesitar producir entre los aos 1980-2015 una cantidad de productos agrcolas
igual a los generados a travs de la historia antes de este periodo.
El problema no slo involucra a seres humanos, sino en especial a sus animales. El
animal puede presentar una marcada escasez futura, dado que se necesitar ms
ganado para suplir la abrumadora demanda. Adems, la adecuada alimentacin
animal es un tem de elevado costo, algo muy determinante en la produccin.
Solucionar el problema de la alimentacin humana implica, en primer lugar,
solucionar el problema de las fuentes de protena para alimentacin animal. Se
est pues ante una demanda en constante incremento de fuentes protenicas de
alto valor nutritivo, la cual empieza ser insuficiente.
La biomasa puede ofrecer una gran alternativa para reemplazar algunas fuentes
tradicionales de protena (soya, harina de pescado, suero descremado de leche) en
piensos para el consumo animal, e incluso en porciones para humanos despus de
ser tratada adecuadamente. Por ello, el desarrollo e implementacin de tcnicas
de produccin industrial de PUC ayudara a solventar el problema de la cada vez
ms limitada disponibilidad e ingesta de protena (Chacn, 2004).

Tabla 8. Parmetros nutricionales de la PUC (SPC).

Fuente: Durn (1989)

2.9 VENTAJAS Y DESVENTAJAS DE PRODUCIR PROTENA UNICELULAR.

2.9.2 VENTAJAS

Los microorganismos se multiplican con rapidez.


Requerimientos de crecimiento fciles de implementar, que
originan altas tasas de crecimiento y alta productividad
(University of Indiana, 2003). El tiempo de duplicacin puede
ser de 0.3 a 2 h para bacterias, 1-3 h para levaduras, 2-6 h para
algas y 4-14 horas para hongos filamentosos celulticos (FAO,
2003)
Poseen un alto contenido de protena (55-60%) y hasta un 15%
de cidos nucleicos en base seca.
Pueden utilizar un gran nmero de fuentes de carbono
diferentes.
Factibilidad de seleccionar o producir con facilidad cepas con
alta produccin y buena composicin.
Las instalaciones de produccin ocupan reas limitadas y dan
producciones elevadas. La produccin microbiana es
independiente de variaciones climticas o estacionales, y por
consiguiente es ms fcil de planear.

2.9.3 DESVENTAJAS.
No obstante a las mencionadas ventajas, tambin se presentan desventajas
inherentes a la produccin de PUC:
Por razones culturales, muchas personas en Occidente rechazan la
idea de emplear microorganismos como fuente de alimento.
(Goel, 1994)
En varias ocasiones, la PUC no presenta las caractersticas de olor,
textura, color y sabor necesarios para garantizar una buena
aceptacin (Israelidis, 2003). Las algas suelen ser las ms
problemticas respecto a color y sabor.
Pueden presentarse en la PUC sustancias txicas o carcinognicas
que fuesen adsorbidas previamente en los sustratos utilizados
como fuente de carbono, importante para asegurar la seguridad y
hasta la pureza del medio de cultivo (University of Indiana, 2003).
La digestin lenta o nula de la pared celular en el tracto digestivo
del ser humano y otros animales, especialmente en cuanto a las
algas, puede ser causa de indigestin y reacciones alrgicas
(University of Indiana, 2003)
3. CONCLUSIONES

Se denomina protena unicelular bioprotena (Molk et al. 2002), a aquella


obtenida de la biomasa microbiana de algas, bacterias, levaduras y hongos
filamentosos, cultivados en condiciones fermentativas apropiadas y
controladas que garanticen una adecuada tasa de crecimiento, por medio del
aprovechamiento de sustratos baratos compuestos por o enriquecidos con
carbono, nitrgeno y fsforo (Israelidis 2003, Rojas 1995, Keil 1995, FAO
2003).

Muchos son los compuestos orgnicos derivados obtenidos por medio de un


aprovechamiento biotecnolgico de substratos de desecho (EDV 2003).
Algunos se obtienen en la forma de productos finales intermedios de la
actividad metablica microbiana que son excretados al medio o extrados
industrialmente despus de la clula (metanol, metano, etanol, vitaminas del
complejo B, cido lctico y glutmico, carotenoides, xilitol, etc). Es factible
tambin que el producto en si seala biomasa microbiana como tal (Rojas 1995).
Desde los aos 1980, y dada la competencia de otras fuentes de protena como
la soya, la produccin de SCP no se ubica entre las ms rentables. Actualmente
solo Rusia, debido a la remarcada escasez de carne y otras fuentes de protena,
es una productora importante de protena unicelular (Keil 1995).

El proceso de obtencin de protena unicelular puede involucrar una gran


variedad de procesos bioqumicos, en concordancia con la amplia gama de
microorganismos que pueden ser utilizados. Genricamente, la produccin de
biomasa (PUC), pueden expresarse a travs de la siguiente ecuacin (Rojas,
1995).

A partir de la biomasa microbiana pueden desarrollarse muchos productos


derivados, dada su riqueza composicional: carbohidratos, lpidos, protenas,
cidos nucleicos, vitaminas, entre otros (Rojas, 1995).

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