HEWLETT-PACKARD

FACULTAD DE CIENCIAS AGROPECUARIAS

ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERA AMBIENTAL

Experimento N12

BIODEGRACIN DE COMPUESTOS DE FENOL

ASIGNATURA:
Microbiologa Ambiental

DOCENTE:
Dr. Csar Julio Cceda Quiroz

PRESENTADO POR:
Gmez Cceres, Grecia 2015 178012
Lajo Huayta, Jhasmin 2015 178031
Chambi Ururi, Alexandra 2015 178026

AO Y SEMESTRE:
3er ao, V

TACNA PER
2017
 Experimento N 12

Biodegracin de compuestos de Fenol

12.1. RESUMEN:

Objetivo: Determinar la tasa de biodegradacin de un fenol sinttico.

Aadir nutrientes y bacterias al agua destilada

Aadir soluciones madre de fenol y 2,4-diclorofenol
Incubar a 20 C
Recoger las muestras y determinar la concentracin de oxgeno
Grfico de la tasa de consumo de oxgeno en funcin del tiempo de
incubacin.

12.2. TEORA E IMPORTANCIA:

El fenol es un compuesto de origen natural en el medio

ambiente y es fcilmente biodegradable. Sintticamente,
el fenol (Figura 12-1) se obtiene a partir de alquitrn de
hulla o calentando monoclorobenceno con NaOH acuoso
bajo alta presin. Se utiliza como desinfectante general,
en la fabricacin de resinas artificiales incoloras o de
color claro, muchos compuestos orgnicos e industriales
y colorantes, y se utiliza como reactivo en los anlisis
qumicos.

Los fenoles clorados no se producen naturalmente en el

medio ambiente, pero se han fabricado y utilizado
ampliamente como herbicidas / pesticidas y
conservantes. Ejemplos de fenoles clorados incluyen
Figura 12-1: Fenol y algunos de
2,4-diclorofenol y pentaclorofenol (Figura 12-1). estos derivados clorados.
Tanto el 2,4-diclorofenol como el pen- taclorofenol se preparan clorando fenol;
El 2,4-diclorofenol es un intermedio clave en la fabricacin del herbicida cido
2,4-diclorofenoxactico (2,4-D).

El pentaclorofenol se usa como un insecticida para el control de las termitas, un

herbicida defoliante antes de la cosecha y general. Tambin se utiliza como
conservante para la madera, los productos de madera, los almidones, las
dextrinas, y las colas.

En general, el aumento de la cloracin de los compuestos orgnicos aumenta la

recalcitancia o la estabilidad de la molcula en el medio ambiente. Hay varias
razones para la recalcitrancia de los fenoles clorados. Una es que los tomos de
cloro simplemente bloquean sitios normalmente atacados por enzimas
degradantes, lo que ralentiza la biodegradacin. Una segunda razn es que los
tomos de cloro, que son grupos que atraen electrones, disminuyen la densidad
electrnica en el anillo aromtico. Esto retarda el ataque enzimtico
(hidroxilacin) del anillo de benceno, porque el ataque se produce en sitios de
alta densidad de electrones. Una tercera razn para una biodegradacin ms
lenta es que los constituyentes de cloro tienden a disminuir la solubilidad en agua
del fenol. La disminucin de la solubilidad en agua da lugar a una menor
disponibilidad de microorganismos para la biodegradacin.

12.3 PROCEDIMIENTO
12.3.1. Materiales
BOD incubadora a 20 C
1-L DBO agua de dilucin
3 pipetas de 10 ml
15 botellas BOD de 60 ml
1 Oxgeno disuelto Kit de ensayo 1 o sonda de oxgeno Inculo
bacteriano (poliestireno)
1 vaso de 1litro
2 vasos de precipitados de 500 ml
3,5 ml de solucin de fenol en stock (10 g L-1)
 3,5 ml de solucin de 2,4-diclorofenol stock (10 g L-1) suministro de aire
comprimido.

12.3.2. Procedimiento
a) Prepare u obtenga del instructor un litro de agua de dilucin de DBO. El
agua de dilucin de BOD se prepara mediante la adicin de almohadillas
de nutrientes tamponantes Hach Chemical Company a agua destilada.
Las almohadas contienen tampn fosfato, MgSO4, FeCl3, CaCl2 y cido
glucosa-glutmico.

b) Aadir 2 ml de polseed al agua de dilucin de BOD. El polseed contiene

una mezcla de bacterias capaz de oxidar la materia orgnica
biodegradable.

c) Se divide el litro en tres alcuotas de aproximadamente 333,3 ml.

d) Haga los espacios en blanco rellenando 5 botellas de dilucin de 60 ml de

BOD con una alcuota.

e) A una de las alcuotas, aadir 3,5 ml de solucin de fenol en stock y

mezclar bien para dar una concentracin de fenol de 100 mg l-1 en la
mezcla diluida. Utilizando el agua de dilucin que contenga fenol, llene
cinco botellas de BOD de 60 ml (Figura 12-2). Estas son las muestras de
fenol.

f) A la tercera alcuota, aadir 3,5 ml de solucin madre de 2,4-diclorofenol

y mezclar bien para dar una concentracin de 2,4-diclorofenol de 100 mg
L-1 en la mezcla diluida. Utilizando esta mezcla, llene cinco botellas de 60
ml de BOD. Estas son las muestras de 2,4-diclorofenol.

g) Determine la concentracin de oxgeno disuelto en el blanco, una muestra

de fenol y una muestra de 2,4-diclorofenol.

h) Incubar las botellas de DBO restantes en la oscuridad a 20 C.

 i) Retirar los conjuntos de muestras de fenol y 2,4-diclorofenol en blanco a
j) 0 horas (antes de la inoculacin) ya las 50, 170, 220 y 340 horas.
Determine la cantidad de oxgeno disuelto restante en estas muestras.

Figura 12-2 Botellas de BOD usadas para este experimento.

(Foto cortesa de K.L. Josephson.)

12.4 PELIGROS POTENCIALES

DEBE HACER:
Lvese la mano o la piel inmediatamente si entran en contacto con fenol o
2,4-diclorofenol

12.5 CLCULOS:

Haga una tabla de la concentracin de oxgeno disuelto para cada momento en

el que se prob una muestra. Utilizando papel cuadriculado trace la
concentracin de oxgeno disuelto para las muestras en blanco, de fenol y las
muestras de 2,4-diclorofenol con el tiempo. De estas grficas se derivan curvas
que muestran el curso de absorcin de oxgeno disuelto debido al fenol y 2,4-
diclorofenol con el tiempo.
12.6 PREGUNTAS Y PROBLEMAS:

1. Qu compuesto se degrad a mayor velocidad? Por qu se degrad uno

a un ritmo ms rpido?
2. Por qu es importante estudiar la degradacin de los compuestos
artificiales en el medio ambiente?
3. Qu conclusiones puede sacar de la extensin y la tasa de biodegradacin
del fenol y del 2,4-diclorofenol?
4. Qu se entiende por recalcitrancia? Dar un ejemplo?
5. Por qu los compuestos orgnicos clorados son ms estables en el medio
ambiente?

12.7 REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS:

Pitter, P., and Chudoba, J. (1990). Biodegradability of Organic Substances

in the Aquatic Environment, pp. 165177 and 251266. CRC Press, Boca
Raton.
APHA (1998) Standard Methods for the Examination of Water and
Wastewater. American Health Association. Washington, DC.