Clase 7 Enzimas

La curva es de esta forma ya que al aumentar la

concentracin de sustrato (eje X) va creciendo la velocidad de la
reaccin (eje Y), pero luego llega a un punto que a velocidad es
constante, esto ocurre porque la enzima se satura.

- A baja concentracin de sustrato afecta a la velocidad

- A altas concentraciones de sustrato deja de afectar a la
velocidad (SATURACIN), la velocidad d reaccin permanece
constante.
- Todos los sitios activos estn ocupados con sustrato.

No todas las reacciones se comportan igual, por lo

tanto no en todas vamos a tener la misma forma de la
curva, son solamente las que se comportan segn la
ecuacin de Michaelis-Menten .

La velocidad mxima no depende de la reaccin qumica,

sino que de la enzima que la catalice.
Son 2 enzimas diferentes que catalizan la misma reaccin.

- Bajos valores de Km = alta afinidad de complejo enzima-

sustrato
- Altos valores de Km = poca afinidad de complejo
enzima-sustrato

Con la velocidad mxima/2 se obtienen las 2 Km, solo va cambiando la concentracin de sustrato que se requiere para
alcanzar la misma velocidad, esto quiere decir que una tiene ms afinidad de enzima-sustrato.

- Mientras ms pequea la Km para una misma reaccin, el complejo tiene mayor afinidad por el complejo
enzima-sustrato
 Ej. Si la Km es baja voy a necesitar una cantidad mnima de glucosa para que se transforme de sustrato a
producto, con Km se necesitara ms glucosa para convertirla en producto

Nota: a la larga ambas van a llegar a la misma Vmxima.

La Km se mide en unidades de concentracin, y esta es igual a la Vmxima/2, a la vez es una medida de afinidad
complejo enzima-sustrato, pero solo se pueden comparar sustratos iguales en concentraciones iguales.

Enzima acetaldehdo deshidrogenasa, en algunas personas la

enzima acta igual pero la Km aumenta.
Ej. En metabolizar el alcohol y es cuando se acumula
acetaldehdo y por eso produce el enrojecimiento al tomar
alcohol.

Para aumentar la velocidad mxima se debe aumentar la

concentracin de enzimas. Ya que estas dos son directamente
proporcionales.

Se tienen 2 comportamientos en el grfico,

primero va aumentando la velocidad a medida
que se le agrega ms concentracin de sustrato
y luego se mantiene constante cuando la
enzima se satura. Hay 2 zonas en la curva que se
comportan de forma diferente en cuanto a la
concentracin de sustrato v/s velocidad.

Numero de orden: es la parte de la recta que esta al comienzo, que es

una recta, antes de que se sature. Esto quiere decir que va aumentando
directamente proporcional 1:1, no as cuando se satura; que solo va
aumentando el sustrato y no la velocidad.
 Cuando la recta de dobles recprocos se tope en el eje
Y es 1/ Vmxima. Recta de dobles recprocos. Y
cuando toque en el eje de las X que va a ser al lado
negativo ese valor va a ser 1/Km
Esta recta la podemos sacar solo con reacciones que se
comporten de forma micaeliana.

Por ejemplo ac no se pueden comprar los Km por que todos los

sustratos son diferentes, para poder comparar deben ser sustratos iguales en
la misma reaccin, esto quiere decir que las enzimas pueden ser diferente
pero el sustrato debe ser el mismo.

Cantidad de molculas de sustrato que son

convertidas en productor por unidad de tiempo por una
enzima, o sea, la cantidad de sustrato que es convertida en
producto bajo la condicin de tiempo y por una enzima.

Kcat: constante para cada enzima del numero de

recambio, numero de molculas de sustrato convertidas en
producto por cada enzima en unidad de tiempo.
Ej: ahidrasa carbnica: 600.000 molculas
transformadas en producto por cada una enzima y tiempo determinado.
Mientras mayores son los valores de Km menor es su afinidad.
 En la clula las enzimas las tenemos en el citosol o confinadas en los
organelos, se puede tener una enzima que catalice la misma reaccin que este
en la mitocondria en el citosol o en algn otro organelo.

las barreras de los organelos hacen que para entrar deba tener
transportador

las enzimas tienen una localizacin especifica, por ejemplo si estn en

el lisosoma van a catalizar a una reaccin ah, si sale de ah va a estar inactiva

Hay enzimas que catalizan la misma

reaccin, pero que estn en diferentes lugares, en
diferentes compartimentos o bien en diferentes
momentos del desarrollo, pero son diferentes protenas
(secuencia de aa diferente)
Ej. lactato deshidrogenasa: cuando va a
pasar de lactato a piruvato ocupa NAD y cuando va a pasar
de piruvato a lactato ocupa NADH.

- los 3 aa que forman el sitio activo en comn, es que son los

tres aa con carga positiva (bsico) (arginina y histidina)

- El lactato a pH 7.2 tiene carga negativa

- con dos genes podemos lograr 5 protenas diferentes, lo que

ocurre es que van cambiando los aminocidos, si se cambia
uno apolar por otro apolar no va a afectar mayormente, pero
si cambiamos un apolar por un polar sin carga hay un cambio
importante.

Yo puedo saber a travs de la isoforma de la enzima, puedo saber el tejido que se me est daando por exceso
de la deshidrogenasa, y con otras enzimas se puede hacer lo mismo.
en conclusin las isoenzimas son enzimas que catalizan la misma reaccin pero son protenas distintas, por que
las subunidades que las forman son diferentes, los aa.
 Inhibicin de enzimas

Competitiva: El inhibidor se une al sitio activo del sustrato,

poniendo un sustrato que se le parece, amos compiten por el sitio
activo de la enzima. por lo tanto como se le une el inhibidor no
produce producto.
La Vmax no se alera por que igual va a llegar un momento
en que se va a empezar a producir la reaccin, la Km se ve alterada
por la afinidad que tiene el complejo enzima-sustrato
este tipo de inhibicin se usan en muchos frmacos, el cual
sera el inhibidor de la reaccin. por ej.: en personas que tienen el
colesterol alto se les da un frmaco que son de tipo estatina.

La estatina es un ejemplo de inhibidor competitivo de tipo

frmaco.

El inhibidor contiene dentro del el mismo grupo que

forma al sustrato pero posee un grupo dems que lo
diferencia del sustrato y por ello no producir producto.

No competitiva: el inhibidor no competitivo no

reconoce el sitio activo, se une a un sitio diferente no compite
con el sustrato por el sitio activo.
La Km no se alera por que el inhibidor no est
compitiendo con el sitio activo, pero la Vmax disminuye porque
ya no puede catalizar la reaccin como lo haca antes.
Son reversibles estas reacciones porque al sacar
el inhibidor vuelve a catalizarse la reaccin, o tambin
agregando mas sustrato (solo en caso de la competitiva), en la
no competitiva agregar mas sustrato no sirve por qu no
compiten por el mismo sitio activo.
 Acompetitiva: El inhibidor se une al complejo enzima-
sustrato y se va a ver alterada la Km como la Vmax. Tambien es una
reaccion reversible (puede volver a ocurrir en ausencia de inhibidor)

Mixta: el inhibidor se une a un

sitio diferente del sitio activo de la enzima y del complejo enzima-
sustrato.
Tambien se ven afectadas las
Vmax y la Km.

Regulacin de la acividad enzimtica.-

La regulacin de la actividad enzimtica es a nivel

gentico, o sea, de la regulacin de la expresin de genes,
induciendo o reprimiendo la transcripcin del gen.
 - La regulacin alexitrica no posee la curva de la cintica de
michaelis-menten, en general estn formadas por 2 subunidades o
ms en donde una va a tener el sitio activo y otra subunidad va a
tener el sitio alostrico, en donde se va a activar o inhibir, a esta
subunidad se le va a unir el modulador alosterico, que es una
molcula que podra aumentar la actividad o inhibirla, si la aumenta
es modulador alosterico positivo y si la inhibe se llama modulador
negativo, por lo tanto la enzima solo va a estar activa en presencia
de modulador, este produce un cambio conformaciones (puede
quedar ms o menos expuesto al sustrato) la unin al modulador es
por interaccin dbil y es reversible y presentan cintica sigmoidea.

- Las enzimas reguladoras se ponen en partes estratgicas,

es colocada al principio para regular la va metablica, y son
reguladas por mecanismos de retroalimentacin.

- El mismo producto que crea la reaccin es el modulador de la parte clave

de la reaccin y es negativo porque se usa para inhibir la reaccin
(indicadle que ya hay mucho del producto que se est formando en la
reaccin)

Tambin puedo regular una enzima por modificacin covalente, el ms

conocido es la fosforilacion (agrega un grupo fosfato), se pueden en los
aa que tengan grupos hidroxilos: serina, treonina y tirosina.

Pero hay algunas protenas que necesitan de otra enzima para poder
fosforilar (kinasas) o sea se necesitara una proteinquinasa para que se
fosforile la enzima.

La desfoforilacion es una reaccin muy lenta, por lo tanto tambin se

necesita otra enzima, la fosfatasa, se pierde el grupo fosfato por
hidrolisis.

*Fosforilar: proteinquinasa

*Desfosforilacion: Fosfoproteinfosfatasa.
* el tipo de modificacin covalente es por fosforilacion, como es el
caso del glucgeno fosforilasa, que es una reaccin que degrada
glicgeno.

*las enzimas claves son reguladas por ms de una cosa.

*la glucgeno fosfrilasa acta en el metabolismo del glicgeno,

degradando a este ltimo, una de las formas de estimular la
degradacin del glicgeno es cuando baja la glicemia y cuando nos
asustamos, porque nos preparamos para correr, ya que el musculo se
prepara y se llena de glucosa, si esta la ocupamos para correr se
degrada glicgeno si no la ocupamos se para la degradacin.