Kit para determinao do cido rico por metodologia enzimtica-colorimtrica.
Cat. 451 MS 80022230065
MTODO normativas locais, estaduais e federais de preservao do meio ambiente.
Enzimtico-Colorimtrico. Contato com os olhos, pele ou mucosas devem ser evitados. No aspirar ou ingerir. FINALIDADE Recomendamos o uso de equipamentos de proteo individual (EPI) Reagentes para determinao quantitativa do cido rico no soro, urina, como avental, culos de segurana, luvas descartveis e outros que se plasma e lquidos sinovial e amnitico. fizerem necessrios para a realizao do teste. Somente para uso diagnstico in vitro. No deve ser utilizada a boca para pipetagem de reagentes, amostra ou FUNDAMENTO qualquer outra substncia. O cido rico oxidado pela uricase (UOD) em alantona, CO2 e H2O2. No pipetar diretamente do frasco Reagente de Cor (2) para evitar
Atravs de uma reao de copulao oxidativa, catalisada pela peroxidase contaminao.
(POD), o perxido de hidrognio formado reage com o Em caso de acidentes tomar as medidas cabveis de primeiros socorros.
diclorofenolsulfonato (DCFS) e 4-aminoantipirina (4-AMP), produzindo
uma antipirilquinonimina de cor vermelha. A absorbncia do complexo AMOSTRA BIOLGICA formado, medida em 505 nm, diretamente proporcional concentrao SORO, PLASMA (EDTA, Heparina), URINA e LQUIDOS SINOVIAL e de cido rico da amostra. AMNITICO. No soro, o analito estvel por 5 dias entre 2-8 C. UOD cido rico + O2 + 2H2O Alantona + CO2 + H2O2 NOTA: Recomendamos que a coleta, preparao, armazenamento e POD 2H2O2 + DFCS + 4-AMP 4H2O + Antipirilquinoneimina descarte das amostras biolgicas sejam realizadas seguindo as recomendaes das Boas Prticas em Laboratrios Clnicos. SIGNIFICADO CLNICO Enfatizamos que os erros provenientes da amostra podem ser muito O cido rico um metablito das purinas, cidos nucleicos e maiores do que os erros ocorridos durante o procedimento analtico. nucleoprotenas. Numerosas doenas, condies fisiolgicas, alteraes bioqumicas, fatores sociais e ambientais esto associados a elevaes na INFLUNCIAS PR-ANALTICAS concentrao do urato plasmtico. A concentrao de cido rico aumenta aps jejum prolongado, no stress, Enquanto drogas como salicilatos, fenilbutazona aumentam a excreo de na obesidade e nas 24horas aps ingesto aguda de lcool. cido rico, outras como o alopurinol interfere na sntese, diminuindo assim O cido ascrbico (vitamina C), por ser uma substncia redutora, consome sua concentrao no sangue. o H2O2 e assim leva a resultados falsamente diminuidos. No se deve Valores aumentados consumir alimentos ou medicamentos contendo cido ascrbico at 48 A hiperuricemia ocorre na maioria dos pacientes com gota, na insuficincia horas antes da realizao do exame. renal, leucemia, policitemia, mieloma multiplo, intoxicao por chumbo, cetoacidose, nos tratamentos com citostticos ou tiazdicos, na sndrome PROCEDIMENTO DO TESTE de Lesch-Nyhan, nas hiperuricemias idiopticas. A-Condies de Reao O aumento de urato est positivamente relacionado a hiperlipidemia, Equipamento: Espectrofotmetro obesidade, aterosclerose, diabetes mellitus e hipertenso, embora os Leitura: Comprimento de onda 505 nm mecanismos destas alteraes ainda no sejam bem compreendidos. Temperatura: 37 C Valores diminudos Medida: contra o tubo branco As causas da hipouricemia so pouco frequentes, ocorrendo na sndrome de Fanconi, doena de Wilson e doenas malgnas como linfoma de B- Tcnica de Anlise Hodgkin e carcinoma broncognico. 1- Deixar os reagentes e as amostras atingirem 37C antes de realizar o teste. QUALIFICAES DO MTODO 2- Identificar 3 tubos de ensaio como "Branco", "Teste" e "Padro" e Metodologia enzimtica colorimtrica de ponto final, rpida e direta para proceder: dosagem do cido rico, facilmente adaptvel para a maioria dos Tubos Branco Teste Padro analisadores automticos e semi-automticos. Amostra ------ 20 L ------ O produto emprega reagentes lquidos, prontos para uso. Padro (1) ------ ------ 20 L A metodologia permite obter resultados exatos e precisos se for Reagente de Cor (2) 1000 L 1000 L 1000 L executada conforme descrita nesta Instruo de Uso.
IDENTIFICAO DOS REAGENTES
Conservar entre 2-8 C. 3- Misturar bem e incubar os tubos por 5 minutos em banho-maria a 37 C. 4- Ler as absorbncias do Teste e do Padro em 505 nm, acertando o Zero 1. Padro 6,0 mg/dL - Contm 6,0 mg/dL de cido rico. com o Branco. 2. Reagente de Cor - Contm tampo 155 mmol/L, 4- 5- A cor estvel por 30 minutos. aminoantipirina 0,05 mmol/L, diclorofenolsulfonato 0,05 mmol/L, peroxidase 500 U/L, uricase 60 U/L, octil fenol polioxietanol 0,5 C- Clculos g/L, azida sdica 0,02%. Ver Linearidade. Como a metodologia obedece a lei de Lambert-Beer, os clculos podem ESTABILIDADE ser feitos atravs do Fator de Calibrao (Fc). Os reagentes so estveis at o vencimento da data de validade impressa Concentrao do Padro = Cp Concentrao do Teste = Ct no rtulo do produto e na caixa quando conservados em temperatura entre Absorbncia Padro = Ap Absorbncia do Teste = At 2-8 C bem vedados e se evite a contaminao durante o uso. Exemplo Sinais de Deteriorao dos Reagentes Cp = 6,0 mg/dL Ap = 0,190 At = 0,152 1- Presena de partculas e turbidez indicam deteriorao dos reagentes. 2- No utilizar o reagente de cor quando sua absorbncia medida contra gua Cp 6,0 Fc 31,6 em 505 nm for igual ou maior que 0,300. Ap 0,190
MATERIAIS NECESSRIOS E NO FORNECIDOS Ct = Fc x At = 31,6 x 0,152 = 4,8 mg/dL
Espectrofotmetro (490 - 540 nm); Tubos e pipetas; Ateno Cronmetro; Esta tcnica de dosagem adequada para fotmetros cujo volume mnimo Banho-maria. de soluo para a leitura igual ou menor do que 1000 L. O analista sempre deve fazer uma verificao da necessidade de ajuste PRECAUES E CUIDADOS ESPECIAIS do volume para o fotmetro empregado no seu laboratrio. Aplicar os cuidados habituais de segurana na manipulao dos Os volumes de amostra e de reagente podem ser modificados reagentes e amostra biolgica. proporcionalmente, sem alterar o desempenho do teste e os clculos. Em Recomendamos o uso das Boas Prticas em Laboratrio Clnico para a caso de reduo dos volumes necessrio observar o volume mnimo de execuo do teste. leitura fotomtrica. De acordo com as instrues de biossegurana, todas as amostras Volumes da amostra menores do que 10 L so crticos em aplicaes devem ser manuseadas como materiais potencialmente infectantes. manuais e devem ser usados com cautela porque aumentam a impreciso Descartar os reagentes e as amostras de acordo com as resolues da medio. Dosagem de cido rico na Urina Comparao de Mtodos Homogeneizar a urina, separar 10ml, acertar o pH entre 7,0 e 9,0 com O produto foi comparado com outro similar disponvel no mercado atravs NaOH 5% e aquecer 10 minutos para dissolver os cristais de urato e cido da anlise de 40 amostras de soro humano com valores desconhecidos. rico. Os resultados analisados por modelos estatsticos demonstraram que no Diluir a amostra de urina 1:10 (0,1 mL de urina + 0,9 mL de gua destilada h diferena significativa em um intervalo de confiana de 95% com uma ou deionizada). Seguir a tcnica de anlise descrita e multiplicar o resultado equao de regresso linear onde y = 1,0179x - 0,109. obtido por 10. Interferncias mg/dL x volume urinrio de 24h em mL O fluoreto de sdio atua como inibidor da uricase. Logo, a utilizao de mg/24horas plasma fluoretado leva obteno de resultados falsamente diminudos. 100 Valores de bilirrubina at 5 mg/dL e hemoglobina at 100 mg/dL no produzem interferncias significativas. Amostras turvas levam obteno Fator de Converso de Unidades (mg/dL para SI) de resultados falsamente elevados. mol/L de cido rico = mg/dL de cido rico x 59,5 OBSERVAES VALORES DE REFERNCIA 1- A observao minuciosa da limpeza e secagem da vidraria, da Para amostras de Soro e Plasma estabilidade dos reagentes, da pipetagem, da temperatura e do tempo de Adultos reao de extrema importncia para se obter resultados precisos e Homens: 2,5 a 7,0 mg/dL exatos. Mulheres: 1,5 a 6,0 mg/dL 2- Na limpeza da vidraria pode-se empregar um detergente neutro ou uma soluo cida. A ltima lavagem deve ser feita com gua destilada ou Crianas deionizada. Homens: 1,5 a 6,0 mg/dL 3- A gua utilizada nos laboratrios clnicos deve ser purificada utilizando- Mulheres: 0,5 a 5,0 mg/dL se mtodos adequados para as finalidades de uso. Colunas deionizadoras saturadas liberam diversos ons, aminas e agentes oxidantes que Para amostras de Urina deterioram os reativos. 250 a 750 mg/24 horas REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS Estes valores devem ser usados como uma orientao. recomendado 1. Barham D, Trinder P. Analist 1972;97:142-145. que cada laboratrio estabelea seus prprios valores de referncia. 2. Burtis CA, Ashwood ER. Tietz Fundamento de Qumica Clnica, 4 Ed - Guanabara Koogan SA; 1998. AUTOMAO 3. Duncan PH, Gochman N, Cooper T, Smith E, Sayze D Clin Chem Este kit pode ser utilizado na maioria dos analisadores automticos. 1982;28:284-290. O consumidor poder solicitar mais informaes atravs do Setor de Apoio 4. Elin RJ, Johnson E, Chesler R. Clin Chem 1982;28:2089. ao Cliente (SAC) ou acessando o site www.goldanalisa.com.br 5. Fossati P, Prencipe L, Berti G Clin Chem 1980, 26:227-31. A calibrao com o Padro aquoso pode causar desvios em alguns 6. Inmetro - Boas Prticas de Laboratrio Clnico e Listas de Verificao analisadores. Nestes casos, recomenda-se calibrar com calibrador para Avaliao, Qualitymark ed., Rio de Janeiro, 1997. protico - Calibrador - Cat. 410 - Gold Analisa. 7. Kaplan A, Szabo LL, Opheim KE. Clinical Chemistry: Interpretation and Techniques. Philadelphia, Lea & Febiger, 1988:140-143. CONTROLE DA QUALIDADE 8. Trinder P. Ann Clin Biochem, 1969;6:24. O laboratrio clnico deve ter implementado um Programa de Garantia da 9. Westgard JO, Barry PL, Hunt MR. Clin Chem 1981; 27:493-501. Qualidade para assegurar que todos os procedimentos laboratoriais sejam 10. Ferraz MHC, Delgado RB - Valores de Referncia para Exames realizados de acordo com os princpios das Boas Prticas de Laboratrio Laboratoriais: Leo E, Corra EJ, Viana MB, Mota JAC - Pediatria Clnico (BPLC). Ambulatorial 3 Ed. Belo Horizonte, COOPMED, Belo Horizonte, 1988:837- Para controle e verificao do desempenho do kit usar Soro Controle N e 848. Soro Controle P da Gold Analisa. 11. GOLD ANALISA: Informe Tcnico do Produto. importante que cada laboratrio estabelea os seus prprios valores mdios e os respectivos limites de variao. APRESENTAO CARACTERSTICAS DO DESEMPENHO11 Cat. Embalagem N de Testes Reagentes Volume Linearidade A reao linear at 20,0 mg/dL. Para valor acima de 20,0 mg/dL, diluir Padro 1 x 5 mL a amostra com NaCl 0,9 g%, realizar nova determinao e multiplicar o 451 Normal 200 resultado obtido pelo fator de diluio empregado. Reagente de Cor 1 x 200 mL Urina:Diluir a amostra (com pH entre 7,0 e 9,0 e aquecida 10 minutos a 56C) 1:20 ou 1:40 com gua destilada ou deionizada e repetir a medio. TERMOS E CONDIES DE GARANTIA DA QUALIDADE DO PRODUTO Multiplicar o resultado por 20 ou 40 conforme diluio previamente Lei n 8.078 de 11-9-90 - Cdigo de Defesa do Consumidor utilizada. A Gold Analisa garante a substituio, sem nus para o consumidor, de todos os produtos que comprovadamente apresentarem problemas Repetitividade tcnicos, desde que o usurio utilize equipamentos e materiais em boas A impreciso intra-ensaio foi calculada com 80 determinaes, utilizando 3 condies tcnicas, siga rigorosamente o procedimento tcnico e as amostras com valores de 2,1 mg/dL, 8,6 mg/dL e 11,7 mg/dL. As mdias dos recomendaes estabelecidas nas Instrues de Uso. coeficientes de variao obtidas foram de 2,43, 1,36 e 1,06%, N do lote e data de validade: Vide Rtulos do Produto respectivamente. Gold Analisa Diagnstica Ltda - CNPJ: 03.142.794/0001-16 Reprodutibilidade AF MS N 800222-3 - Reg. MS - N 80022230065 A impreciso inter-ensaio foi calculada com 80 determinaes, utilizando 3 Farm. Resp. Ludmilla Parreiras Campos - CRF- MG -25481 amostras com valores de 2,1 mg/dL, 8,6 mg/dL e 11,7 mg/dL. As mdias dos Av. Nossa Senhora de Ftima, 2363 - Carlos Prates - Fone: (31) 3272-1888 coeficientes de variao obtidas foram de 4,55, 1,96 e 1,59%, Belo Horizonte MG Brasil CEP: 30710-020 respectivamente. Home page: www.goldanalisa.com.br E-mail: goldanalisa@goldanalisa.com.br Limite de Deteco Setor de Apoio ao Cliente (SAC): 0800 703 1888 Uma amostra no contendo cido rico foi utilizada para calcular o limite de deteco do ensaio. O valor encontrado foi 0,09 mg/dL (mdia de 10 Analisa marca registrada da Gold Analisa Diagnstica Ltda ensaios mais 3 desvios padro). Utilizando-se da absorbncia do padro como parmetro verificou-se que o Edio: 10/12 limite de deteco fotomtrica de 0,03 mg/dL.