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Bacteriologa

Seminario 1

Introduccin a la
Microbiologa y a la
Bacteriologa
Microbiologa 1
II Ctedra
Facultad de Medicina (UBA)
Introduccin
a la
Microbiologa
Qu es la MICROBIOLOGIA?
La Microbiologa se puede definir como
la ciencia que trata de los seres vivos
muy pequeos, concretamente de aquellos
cuyo tamao se encuentra por debajo del
poder resolutivo del ojo humano:
BACTERIAS, VIRUS Y HONGOS

PARASITOS: organismos
unicelulares(microscpicos) y
pluricelulares(macroscpicos)

Poder resolutivo del ojo: 0,1-0,2 mm.


Por ejemplo: tamao de una
bacteria esfrica 0.2 y 2um
(micrmetros).
MICROORGANISMOS
Es un conjunto de formas de vida agrupados por conveniencia del
hombre; todos los organismos que no pueden observarse a simple
vista. Es necesaria la ayuda de una lupa o de microscopios.
Entre los microorganismos estn:

FORMAS ACELULARES FORMAS CELULARES


Organismos unicelulares o pluricelulares de
dimensiones microscpicas.
Resumen
Caractersticas Virus Bacterias Hongos Parsitos

Clula NO si si si
Dimetro 0.02-0.2 1-5 3-10 15-25
aprox. (um) (levadura) (trofozoito)
cido nucleico ADN ARNO ADN y ARN ADN y ARN ADN y ARN

Tipo de ncleo Ninguno Procariota Eucariota Eucariota


Naturaleza de Cpside Pared celular Pared celular Membrana
la superficie proteica y de de quitina flexible
externa envoltura proteoglicano
lipoprotena
(virus
envueltos)
Mecanismo de Parsitos Fisin binaria Gemacion o Ciclos
replicacin intracelulares mitosis complejos
obligados
Qu estudia la microbiologa?
De los microorganismos se estudian sus:

Actividades
Forma y estructura
Reproduccin
Fisiologa y metabolismo
Identificacin
Distribucin en la naturaleza
Relaciones con otros seres
Efectos benficos y perjudiciales que ejercen sobre los
humanos
Alteraciones fsicas y qumicas que ejercen en el medio
Dnde se encuentran los
microorganismos?
Los microorganismos son ubicuos

Se encuentran en el aire, en el agua, en el suelo,


en los alimentos, sobre las superficies de los
objetos y sobre el exterior de todos los
organismos y an dentro de sus sistemas
digestivos, respiratorios y genitales.
En un cuerpo sano viven
1 trillon de microbios
APLICACIONES DE LA MICROBIOLOGIA
1- Bancos de sangre
Los bancos de sangre tienen por cometido la preparacin eficiente y
oportuna de componentes sanguneos inocuos.
Funciones:
-Captacin, educacin y registro de donantes.
-Extraccin de sangre y separacin de sus componentes.
-Anlisis inmunohematologico, serolgico, distribucin y almacenamiento
correspondiente de la misma.

Programas de seguridad en el laboratorio de forma tal que el


donante, el paciente y el personal del banco de sangre estn
protegidos contra posibles efectos nocivos de la exposicin
a la sangre humana.
Normas preventivas y bioseguridad:
-Toda muestra de sangre debe ser tratada y manipulada como si fuese Infecciosa
(aquellos materiales de alto riesgo para SIDA, Hepatitis B y/o C pueden demandar
medidas de seguridad especiales)
- Un buen programa de seguridad debe considerar todos los peligros que en el ambiente
laboral pueden ser causales de accidentes y/o enfermedades profesionales.
- Implementar el uso de etiquetas y carteles y en las muestras.
-El personal debe vacunarse contra Hepatitis B (excepto que se encuentre Inmunizado o
vacunado previamente)
- Lavarse cuidadosamente las manos antes y despus de cada procedimiento o si se tiene
contacto con material patgeno y despus del contacto con pacientes o donantes.
- Mantener los elementos de proteccin personal en ptimas condiciones de aseo, en un
lugar seguro y de fcil acceso.
- Las mujeres embarazadas que trabajen en bancos de sangre (expuestas a riesgos
biolgicos VIH/SIDA y/o Hepatitis B, C) debern ser muy estrictas en el
cumplimiento de las normas de bioseguridad.
- Realizar la desinfeccin y limpieza de las superficies, elementos y equipos de trabajo al
final de cada procedimiento y al final de cada jornada.

Es de suma importancia una efectiva comunicacin y la provisin y uso el uso de


equipamiento de proteccin.
ACCIDENTE DE EXPOSICION A SANGRE 0 FLUIDOS
CORPORALES (AES):

Se denomina a todo contacto con sangre o fluidos corporales y que lleva una
solucin de continuidad (pinchazo o herida cortante) o un contacto con
mucosas o con piel lesionada (eczema, escoriacin, etc.).El riesgo de
transmisin depende de numerosos factores, fundamentalmente de:
-la prevalencia de la infeccin en una poblacin determinada
-la concentracin del agente infeccioso
-la virulencia del mismo
-el tipo de accidente

Los agentes ms frecuentes de AES son:


-Virus de la Inmunodeficiencia humana (HIV)
-Virus de Hepatitis B (HBV)
-Virus de Hepatitis C (HCV)
RECORDAR!

Bioseguridad

Proteccin Peligro

Procedimientos a seguir frente a un accidente laboral.

INMEDIATAMENTE DECONTAMINAR LA PIEL CON AGUA Y JABN, o CON


SOLUCIN FISIOLGICA EN CASO DE MUCOSAS.
CATEGORIZAR ELACCIDENTE: Debe haber ocurrido con material contaminado con
SANGRE.
Realizar control de serologa para HIV, HBV y HVC inmediatamente, y tomar medidas
adicionales urgentes en caso de obtener resultados positivos.
2-Anlisis de Peligros y Puntos de Control Crticos
(APPCC o HACCP )

Es un proceso sistemtico preventivo para garantizar la seguridad


alimentaria de forma lgica y objetiva, identificando, evaluando y previniendo
todos los riesgos de contaminacin de los productos a nivel fsico, qumico y
biolgico a lo largo de todos los procesos de
la cadena de suministro.
HACCP NO es un sistema de control de calidad. Su objetivo es asegurar la
INOCUIDAD.

Concepto de Puntos de Control Criticos (PCC)


Fase en la que puede aplicarse un control y que es esencial para prevenir o
eliminar un peligro relacionado con la inocuidad de los alimentos o para
reducirlo a un nivel aceptable.

Concepto de Lmite Crtico (LC)


Son los valores mnimos o mximos de un parmetro fsico, qumico o
microbiolgico que deben ser controlados en un PCC. Deben estar asociados a
variables tales como: temperatura, tiempo, actividad de agua, pH, acidez, residuos de
antibiticos entre otros, evaluados y monitoreados con mtodos rpidos para que sea
expedita la toma de decisin y ajuste.
Ejemplos:

Temperatura y tiempo necesarios para inactivar


microorganismos patgenos en procesos de
pasteurizacin de leche.

pH en producto final para asegurar que no


existe desarrollo de patgenos en conservas
enlatadas.

Residuos de antibiticos y plaguicidas en


materias primas, mediante pruebas qumicas en
carne de abasto y leche.
METODOS DE ESTERILIZACIN Y
DESINFECCIN

ESTERILIZACION: Es la total destruccin o eliminacin de todas las


formas de vida microbiana. Este proceso debe ser utilizado en los
materiales de categora crtica.

DESINFECCION: Es el proceso de eliminacin de microorganismos


patgenos, excepto las esporas bacterianas. En los bancos de sangre se
utiliza un nivel medio de desinfeccin, inactivando a los
microorganismos (hongos, virus y bacterias) en la forma vegetativa.

La responsabilidad sobre las normas de seguridad depende del EQUIPO


DE SALUD EN SU TOTALIDAD
ORGANISMOS E
INSTITUCIONES
Food and drug
administration

Agencia del gobierno de los Estados Unidos dependiente


del Departamento de Salud y Servicios Humanos
responsable de la regulacin de: alimentos, frmacos,
dispositivos mdicos, vacunas, sangre y injertos
biolgicos, productos veterinarios (alimentos, drogas,
dispositivos mdicos), cosmticos, productos que emiten
radiacin y productos con tabaco.
www.fda.gov
Centers for Disease Control
and Prevention

Agencia del Departamento de Salud y Servicios


Humanos responsable del desarrollo y aplicacin de
polticas para prevenir y controlar enfermedades.
Cuenta con centros, institutos y oficinas
especializadas: Centro de inmunizacin y
enfermedades respiratorias, de enfermedades
zoonticas, de transmisin sexual.
www.cdc.gov
OMS WHO
Organizacin Mundial de
la Salud

- Lleva a cabo la Clasificacin internacional


de enfermedades
- Determina la aplicacin de Medidas
Sanitarias para detener una epidemia, o
profilcticas (como la vacunacin)
- Asiste a pases menos avanzados en
vacunacin, aprovisionamientos de agua
potable, proteccin maternal, etc.
- Realiza estadsticas y estudios
epidemiolgicos de los 193 estados
miembros.
www.who.int
CIE ICD Clasificacin de
enfermedades
El objetivo actual es estandarizar diagnsticos por cdigo y
enfermedades para su fcil reconocimiento con fines
estadsticos.
OPS PAHO -
Organizacin
Panamericana de la
salud

Organismo internacional de salud pblica dedicada a mejorar


la salud y las condiciones de vida de los pases de Amrica.
-Fijar polticas sanitarias en los pases miembros.
-Cooperar tcnicamente, incluyendo actividades educativas y
de apoyo promoviendo la prevencin de enfermedades.
-Promover la estrategia de atencin primaria de la salud.
www.paho.org
ANMAT - Agencia nacional
de Medicamentos,
Alimentos y Tecnologa
Mdica
Controlar, fiscalizar, vigilar la calidad y sanidad de los
productos, sustancias, elementos y procesos que
involucren medicamentos, alimentos cosmticos y
tecnologa mdica.
Velar por el cumplimiento de las disposiciones legales,
cientficas y tcnicas especificadas en reglamentos o
leyes.
Ambos a travs del: Instituto Nacional de Medicamentos,
Instituto Nacional de Alimentos, Direccin de Tecnologa
mdica y Direccin de evaluacin de medicamentos.
www.anmat.gov.ar
Cdigo Alimentario Argentino
(CAA)
Regula en todo el territorio de Argentina todos los
alimentos, condimentos, bebidas, sus materias primas
y aditivos. Respecto a su elaboracin
,fraccionamiento, conservacin, trasporte, envasado,
as como tambin el establecimiento que lo elabore
Alimentos que obligatoriamente debern estar sujetos a
controles microbiolgicos (segn el CAA):

Alimentos lcteos: Leche (en todas sus formas), Queso


(todos los tipos), Yogur, Cremas, Manteca, etc.
Productos crnicos que se consumen sin tratamiento
trmico: Chacinados, Embutidos, Fiambres, Salados,
Ahumados, etc.
Alimentos refrigerados: Aves, Vegetales, Pescados y
mariscos, etc.
Alimentos congelados: Platos preparados, Helados,
Pescados y mariscos, Vegetales, Hielo, etc.
Pastas frescas (con y sin relleno)
Bebidas analcohlicas:
Agua
Jugos de frutas
Condimentos: salsas y aderezos
Frutas secas: man, etc.
Tolerancia microbiolgica de
la carne cruda vacuna segn
el CAA
Deber responder a las siguientes
exigencias:
- Actividad de agua (aw): 0,83 - 0,88
- Anaerobios esporulados, no mayor de:
100 por g
- Bacterias mesfilas (recuento a 35C),
no mayor de: 106 por g
- Cloruro de sodio, Mx: 15% p/p
- Enterobacterias, no mayor de: 10 por g
- Humedad: 55 - 65% p/p
- pH, no superior a: 5,2
- Sorbato de potasio, (c/cido srbico),
Mx 0,12% p/p
- Staphylococcus aureus coagulasa
positiva,
no mayor de: 100 por gramo
INAL Instituto Nacional de
Vigilancia Alimentaria

Identifican de forma temprana los


alimentos que no cumplen con el Cdigo
Alimentario Argentino

Retirar del mercado productos


contaminados

Realizar acciones de prevencin y control


de la Enfermedades de Transmisin
Alimentaria
Denuncie siempre que:
Consumi o compr comida que no era segura. La comida es
considerada insegura cuando:
- La comida que debe ser servida caliente no se encuentra caliente
- La comida que debe estar fra no est refrigerada
- Los alimentos contienen materiales extraos a su composicin normal,
por ej: vidrio, insectos, pelos, etc.
- Los alimentos listos para consumir estn en contacto con alimentos
crudos
- Los alimentos tienen olor o sabor desagradable
Si la higiene de un restaurante o supermercado no es la adecuada.
Se considera que la higiene es inadecuada cuando:
- El negocio o restaurante se encuentra visiblemente sucio
- El personal del lugar manipula alimentos crudos y despus cocidos y/o
listos para consumir sin lavarse las manos entre ambas operaciones
Si se enferm despus de comer un alimento
- Si usted sospecha que tiene una infeccin o una intoxicacin
alimentaria, es importante que consulte a su mdico.
Denuncie a:

Telefnicamente a 0800-222-6110 o 4340-


0888 de lunes a viernes de 8 a 17 hs y
sbados y domingos de 8 a 20 al 0800-
333-1234

De manera personal al Departamento de


vigilancia Alimentaria en Estados Unidos
25 de lunes a viernes de 8 a 17 hs.
Administracin Nacional
de Laboratorios e Institutos de
Salud
Es un organismo pblico dependiente del
Ministerio de Salud de la Nacin Argentina que
tiene como objetivo participar en polticas
cientficas vinculadas en los aspectos sanitario
del mbito pblico

- Nuclea y coordina institutos, laboratorios y centros de salud


localizados en distintos lugares del pas.
- Acta como institucin nacional de referencia para la prevencin,
control e investigacin de patologas
- Lleva a cabo investigaciones de especficos agentes patgenos.
- Realiza estudios epidemiolgicos
www.anlis.gov.ar
Informe epidemiolgico de la ANLIS:
Que es la epidemiologa?
Estudios de la distribucin y los determinantes
de estados o eventos (en particular
enfermedades) relacionados con la salud y la
aplicacin de esos estudios al control de
enfermedades y otros problemas de salud.
(segn la OMS)
Vas de transmisin

Horizontal: Respiratoria, Salival, Fecal Oral,


Cutnea, Sexual, Sangunea, Oftlmica,
Zoontica

Vertical: pasaje transplacentaria


Enfermedad y Epidemiologa
Interaccin entre el cuerpo humano y los diversos grmenes

Salud y enfermedad

Defensas humanas Mecanismos patognicos


de los grmenes

ENFERMEDAD
Persona infectada Recuperacin completa
Dao temporario
Dao permanente
Muerte
PATOLOGA Estudio cientfico de las enfermedades

ETIOLOGA Causa de la enfermedad

PATOGENIA
Provoca cambios estructurales y funcionales causados por la
enfermedad y de sus efectos finales sobre el organismo.

INFECCIN Invasin o colonizacin de cuerpo por


microorganismos patgenos. (OPORTUNISTAS?)

ENFERMEDAD Aparece cuando la infeccin produce


cambios en el estado de salud.
SALUD (Definicin segn OMS 1946): "Estado de completo
de bienestar fsico, mental y social y no solamente la ausencia
enfermedad"
Sntomas: cambios en la funcin corporal (dolor o
malestar).Cambios subjetivos.
Signos: cambios objetivos, que se pueden observar y
medir (cuantificar). Lesiones, tumefaccin, fiebre,
parlisis, etc.
Sndrome : conjunto especfico de signos o sntomas
que pueden acompaar una enfermedad particular.

El Diagnstico de una enfermedad se logra a travs de


la evaluacin de los signos y los sntomas, junto a los
resultados de las pruebas de laboratorio.
Aparicin de una enfermedad
Incidencia: es el n de casos nuevos que surgen en
un rea geogrfica y perodo de tiempo determinado
Es un indicador de la diseminacin de la enfermedad.

Prevalencia: es la proporcin de personas que en un


rea geogrfica y perodo de tiempo establecido,
sufren una determinada enfermedad
n de los que padecen el trastorno
n total de los habitantes del rea)
GRADO DE COMPROMISO DEL HUESPED

Sepsis es una enfermedad inflamatoria txica que se origina


en la diseminacin de microorganismos o sus toxinas, a partir
de un foco infeccioso.

Septicemia es una infeccin sistmica causada por la


multiplicacin de patgenos en la sangre.

Bacteriemia es la presencia de bacterias en la sangre

Toxemia es la presencia de toxinas en la sangre

Viremia es la presencia de virus en sangre


INFECCIONES HOSPITALARIAS
(NOSOCOMIALES)

5-15% de pacientes hospitalizados adquieren


algn tipo de infeccin nosocomial.
Microorganismos presentes en el hospital
Husped comprometido
Cadena de transmisin
MECANISMOS DE PATOGENICIDAD
MICROBIANOS

Patogenicidad
Capacidad de causar enfermedad al superar las
defensas del husped

Virulencia
Grado o magnitud del dao que puede provocar
Cantidad de Microorganismos Invasores

DI 50 indica la virulencia de un microorganismo (indica la


dosis infecciosa para el 50% de una poblacin de muestra)
Ej. Bacillus anthracis puede causar infeccin por tres puertas de entrada
diferentes.
DI 50 a travs de piel (carbunco cutneo) es de 10 a 50 esporas.
DI 50 por inhalacin (carbunco respiratorio) es por aspiracin de
10.000 a 20.000 esporas.
DI 50 en el caso del carbunco gastrointestinal es por la ingestin de
250.000 a 1.000.000 de esporas.

DL50 (dosis letal para el 50% de una poblacin de muestra).


Esta nomenclatura se usa para la potencia de una toxina. ej.
0,03 ng/kg es la dosis letal en ratones para botulismo.
BACTERIOLOGA
BACTERIAS
Microorganismos unicelulares que presentan un tamao de
algunos m de largo y diversas formas

Son procariontes y por lo tanto no tienen ncleo, ni organelas


citoplasmticas

Poseen una pared compuesta de peptidoglicano

Muchas de ellas poseen flagelos u otro sistema de


desplazamiento y son mviles

Son organismos de vida libre (excepto Chlamydia y Rickettsia)

Se dividen por fisin binaria


Diferencias entre Procariontes y Eucariontes
CLASIFICACIN DE LAS
BACTERIAS
Fenotpica: (propiedades reales y expresadas)
morfologa microscpica, morfologa
macroscpica, biotipo, serotipo, antibiograma.

Genotpica: (propiedades potenciales) hibridacin


ADN, anlisis de secuencias de nucletidos,
anlisis plsmidos, anlisis fragmentos de ADN
cromosmico.

Analtica: anlisis pared celular, lpidos pared,


protenas de sostn, enzimas celulares.
TAXONOMA Y NOMENCLATURA
BACTERIANAS

Taxonoma = Clasificar Nomenclatura = Poner nombre


Criterios genticos: Criterios muy diversos
- Homologa ADN Primera palabra hace referencia
- Homologa ARN al Gnero (maysculas)
ribosmico de Segunda palabra hace referencia
subunidad 16S a la especie (minsculas)
Se escriben siempre en cursiva o
subrayado (Ej.: Staphylococcus
aureus)
MORFOLOGA BACTERIANA
ULTRAESTRUCTURA BACTERIANA
Estructuras citoplasmticas: ADN cromosmico, ARNm,
ribosomas y metabolitos.
Envoltura Celular:
Cpsula, matriz exopolisacarida
Membrana Externa (solo Gram -)
Pared Celular
Espacio Periplasmico (solo Gram -)
Membrana Citoplasmtica
Otras estructuras: Flagelos, Pili, Fimbrias

RECORDAR!
Cromosoma Bacteriano: ADN doble cadena circular y superenrrollado que
se encuentra en el nucleiode.
Tiene funcin de replicacin, recombinacin y expresin de genes.
COMPARACIN ENTRE LAS ENVOLTURAS DE Gram + y Gram -

LTA = Acido Lipoteicoico


Formas Bacterianas libres de pared

Cuando las bacterias se tratan


1) con enzimas lticas que degradan la pared celular, por
ejemplo: lisozima, o
2) con antibiticos que interfieren con la biosntesis de
peptidoglicanos,
se producen bacterias libres de pared celular.

Generalmente estos tratamientos generan organismos no


viables, pero que son tiles en la experimentacin in vitro.
A las bacterias libres de pared que no pueden replicar se les
llama esferoplastos (cuando la membrana externa an esta
presente) o protoplastos (si la membrana externa ya no est
presente). Ocasionalmente estos tratamientos generan
formas de bacterias libres de pared que pueden replicar (las
formas L).
RECORDAR
Las estructuras bacterianas pueden ser
proteicas, hidrocarbonadas o lipdicas, o
combinadas.
Recordar cul es la estructura bioqumica
permite entender su antigenicidad y su
resistencia al calor
BLANCO DE ACCION
DE LOS ANTIBIOTICOS
MECANISMOS DE
RESISTENCIA ANTIBITICA
Inhibicin enzimtica
Alteracin del blanco ribosomal
Modificacin de la permeabilidad de la pared
Extraccin del antibitico
Alteracin de los sistemas de transporte
Modificacin de los precursores de la pared
Mutacin de las enzimas
Cambio de la estructura de las protenas blanco
Es posible terminar con las
enfermedades infecciosas?
La era antibitica moderna se inici hace ms de 60 aos con el
descubrimiento de la penicilina y otras sustancias similares,
capaces de eliminar las bacterias.

Tras los primeros y extraordinarios resultados, la humanidad


concibi la idea de eliminar las enfermedades infecciosas

Sin embargo, hoy en da, dicha meta sigue siendo una aspiracin
difcil de alcanzar e incluso poco probable a la luz de las
sorprendentes estrategias desarrolladas por las bacterias para
sobrevivir y hacerse resistentes a la accin de un gran nmero de
compuestos antibacterianos.
Es posible terminar con las
enfermedades infecciosas?
Mayor rapidez la aparicin de cepas poco o nada sensibles, incluso
a los compuestos de ltima generacin, como vancomicina.

Los primeros reportes de resistencia fueron publicados, casi


simultneamente en 1940, por varios grupos de investigadores
independientes.

Para 1947, un alto porcentaje de las cepas de estafilococos aisladas


en los hospitales de Estados Unidos y varios pases europeos eran
insensibles a penicilina G.

La respuesta de la comunidad cientfica al surgimiento de grmenes


resistentes, fue la acelerada produccin y utilizacin de nuevos
frmacos.
Bases genticas de la
resistencia bacteriana
Segn la teora de la seleccin
natural, la variabilidad gentica de
los organismos vivientes es
esencial para su evolucin y en el
caso de las bacterias, este
fenmeno es el resultado de tres
mecanismos
las mutaciones puntuales
los cambios estructurales en el
material gentico
la adquisicin de fragmentos de
ADN procedentes de otras
bacterias.
GENETICA
BACTERIANA
Clon: conjunto de bacterias que derivan de un ancestro
en comn, como resultado de una misma cadena de
replicacin.
Especie bacteriana: circunscribe un grupo
genticamente similar de cepas individuales (una especie
bacteriana se compone de diferentes clones).
Variacin Gentica
Fenotpicas: modificacin de una o varias
caractersticas como respuesta a estmulos presentes en
el medio ambiente (mecanismo de adaptacin).
Genotpicas: variacin del material gentico
(mutaciones).
Mecanismos de regulacin de la expresin
de genes
Regulacin por reordenamiento: amplificacin, variacin
de fase, variacin antignica.
Regulacin transcripcional: activacin y represin de
genes.
Regulacin post transcripcional: modificacin que hace
activa una molcula inactivada. Por ejemplo: activacin
por proteolisis de protenas.

Recombinacin Homloga
Se produce entre secuencias de ADN estrechamente
relacionadas y que en general se sustituye una secuencia
por otra.
Divisin Celular
Plsmidos
ADN circular extracromosomal, que se replica de forma
autnoma con respecto al cromosoma bacteriano.
Su funcin es contener informacin para la adaptacin de la
bacteria al medio y para su evolucin (Ej: resistencia a ATB)
Transposones: segmentos de
ADN con capacidad de
movilizarse de forma autnoma
en el genoma y que contiene
genes estructurales (Ej: factores
de virulencia y para adaptacin
al medio). Mutan y se integran
a cromosomas o plasmidos.
Las bacterias pueden
intercambiar material gentico
mediante tres mecanismos:

Transformacin (DNA desnudo)


Conjugacin (Contacto bacteriano)
Transduccin (Bacterifago)
TRANSFORMACIN
CONJUGACIN
Bacterifagos

Conocidos tambin como "fagos", son parsitos


intracelulares (virus) de bacterias.
Estn constituidos por DNA o RNA y protenas. Si lisan a
la bacteria infectada se habla de una infeccin ltica; si se
integran al genoma bacteriano y se encuentran en estado
quiescente (profagos con el potencial de producir fagos)
se habla de una bacteria en estado lisognico.
TRANSDUCCION
RELACIN HUSPED BACTERIA
CONCEPTOS BSICOS SOBRE LAS ENFERMEDADES INFECCIOSAS
MODO DE ENTRADA DE LOS ORGANISMOS EN
UN HUESPED

Mucosas

Piel

Va Parenteral
Entrada, Transmisin y Salida
Entrada, Transmisin y Salida
Flora normal y patgena
Los patgenos se pueden clasificar en:
Primarios: producen enfermedad en individuo sano
Oportunistas: necesitan de una condicin predisponente
Componentes flora normal del husped
Patogenicidad Bacteriana
Adherencia
adhesinas o ligandos que se fijan especificamente
a receptores de superficie.
fimbrias

Mecanismos de evasin de las defensas del


husped

Mecanismos de los patgenos bacterianos


para daar las clulas husped
Patogenicidad Bacteriana
Mecanismos de evasin de las defensas del
husped

Cpsulas: resiste las defensas del husped porque altera la


fagocitosis.
Componentes de la pared celular: ej. protena M en Streptococcus pyogenes
contribuye a resistencia bacteriana a la fagocitosis leucocitaria.

Enzimas: exoenzimas
coagulasas : coagulan el fibringeno en la sangre.
quinasas: degradan la fibrina (fibrolisina)
hialuronidasa: hidrolizan el cido hialurnico (polisacrido que une clulas del tejido
conectivo).
colagenasa: degrada el colgeno del tejido conectivo de los msculos.
IgA (algunos patgenos producen IgA proteasa)

Variacin antignica
Penetracin del citoesqueleto de la clula husped Invasinas, modifican
los filamentos de actina cercanos al citoesqueleto celular (usan tambin una glucoprotena
cadherina como puente entre clulas)
Patogenicidad Bacteriana
Mecanismos de Dao de las clulas del husped

Utilizacin de los nutrientes del husped: Siderforos

Dao directo en la cercana inmediata de la invasin

Produccin de toxinas

Induccin de reacciones de hipersensibilidad


Factores: toxinas, exoezimas

Producidos por la bacteria

Evasin DAO Signos y sntomas

Producidos por el husped

ENFERMEDAD
Inflamacin
Hipersensibilidad
Autoinmunidad

Infeccin vs. Enfermedad Infecciosa


FISIOLOGA
BACTERIANA
Requerimientos nutritivos

Macronutrientes:
Carbono, Nitrgeno, Fsforo, Azufre,
Potasio, Magnesio, Hierro, Agua

Micronutrientes:
Cobalto, Zinc, Cobre, Manganeso

Factores de crecimiento:
Aminocidos, Vitaminas y Bases
nitrogenadas
GRUPOS NUTRICIONALES
Grupo Fuente de Fuente de
nutricional carbono energa
Fotoauttrofos CO2 Luz
Compuesto
Fotohetertrofos Luz
orgnico
Sales
Quimioauttrofos CO2
inorgnicas
Compuesto Compuesto
Quimiohetertrofos
orgnico orgnico
TIPOS DE REACCIONES METABLICAS

Reacciones energticas

Reacciones de biosntesis

Reacciones de polimerizacin

Reacciones de ensamblaje
REACCIONES ENERGTICAS:
FASES

Digestin extracelular

Paso a travs de la envoltura:


Difusin simple
Difusin facilitada
Transporte activo

Degradacin y obtencin de energa


REACCIONES ENERGTICAS

Va glucoltica de Embder
Meyerhof
Va pentosa fosfato
Ciclo de Krebs

Va de Entner Doudoroff
REACCIONES ENERGTICAS

Fermentacin:
Aceptor final de e- compuesto orgnico
1 glucosa/2 ATP

Respiracin:
Aceptor final de e- compuesto inorgnico
1 glucosa/38 ATP
Crecimiento Produccin
Tipo de Catalasa
Va
bacteria Superoxido metablica
Aerobio Anaerobio dismutasa
(SOD)
Aerobia
+ - + Respiracin
estricta
Anaerobia
- + - Fermentacin
estricta
Respiracin/
Facultativo + + +
Fermentacin
Indiferente/
+ + + Fermentacin
Aerotolerante
Microaerfilo (+) + (+) Fermentacin
REACCIONES DE BIOSNTESIS

Formacin de elementos estructurales:


cidos grasos
Azcares
Aminocidos
Nucletidos
REACCIONES DE POLIMERIZACIN Y
ENSAMBLAJE

Formacin de macromolculas:
ADN, ARN, protenas,
peptidoglicano, fosfolpidos,
LPS

Formacin de las distintas


estructuras celulares
REGULACIN DEL METABOLISMO

Regulacin de la actividad
enzimtica

Regulacin de la sntesis
enzimtica:
Represin
Induccin
Supervivencia Bacteriana:
por procesos de esporulacin,
motilidad y quimiotaxis
ESPORAS

Ms pequeas que
clula vegetativa
Metabolismo limitado
No se reproducen
Ms resistentes a la
accin de agentes
fsicos y qumicos
ESPORULACIN
Bacteria Septacin ENDOCITOSIS
vegetativa asimtrica

FORMACIN DE
LA ENDOSPORA

Lisis clular. Sntesis de Formacin del


Liberacin de la cubierta cortex
la espora
CRECIMIENTO BACTERIANO:
TIPOS DE MEDIOS DE CULTIVO

Segn su estado fsico:


- Lquidos o caldos
- Slidos (Agar al 1.5-2%)
- Semislidos
Segn crecimiento que permitan:
- Enriquecidos
- De enriquecimiento
- Selectivos
- Diferenciales
CRECIMIENTO BACTERIANO:
FACTORES

1. Temperatura
2. pH
3. Medio de cultivo
4. Inculo
TEMPERATURA
pH

A. Acidfilos
B. Neutrfilos
C. Alcalfilos
ESTUDIO CUALITATIVO DEL
CRECIMIENTO BACTERIANO

Medios lquidos:
Turbidez

Medios slidos:
Colonias
COLONIAS BACTERIANAS. TIPOS

Forma CIRCULAR IRREGULAR FILAMENTOSA RIZOIDE

Superficie CONVEXA PLANA UMBILICADA CRATERIFORME

Bordes REDONDEADO ONDULADO FILAMENTOSO ESPICULADO LOBULADO


1: alfa-hemlisis

Colonias aisladas

alfa-hemlisis

Cultivo cofluente

2: beta-hemlisis

Colonias aisladas

beta-hemlisis
DIAGNOSTICO
BACTERIOLOGICO
Para realizar un diagnostico microbiolgico, se
deben seguir secuencialmente los siguientes pasos:

1- Toma de muestra

2- Microscopa

3- Aislamiento en cultivo del agente etiolgico

4- Identificacin

5- Prueba de sensibilidad a los ATB


TOMA DE MUESTRA
Muestra directa: se extrae directamente del rgano o
cavidad infectada. Son sitios que en condiciones
normales son estriles como pulmn, LCR, pleura.
Muestra indirecta: orina, esputo, que se emiten de
manera espontnea y que atraviesan una regin que
contiene flora normal.
Muestra en sitios con flora normal: intestino y
faringe. Se investigan bacterias que normalmente no se
encuentran en personas sanas. Ej: Salmonella, Shigella,
S.pyogenes.

Seleccionar medio de transporte


adecuado y conservacin de la muestra !!!
MICROSCOPIA
Observacin en fresco
Extendidos Teidos
Tincin de Gram
Tincin de Ziehl Neelsen
Microscopio de fluorescencia
Microscopio de contraste de fase
Microscopio de campo oscuro
Tincin de Gram
Tincin de Ziehl Neelsen Microscopia de Fluorescencia

Microscopia de contraste de fase Microscopia de campo oscuro


CULTIVO

Medios slidos (agar)


Medios lquidos (caldos)
El objetivo es recuperar y aislar el
microorganismo responsable de la patogenia
Tener en cuenta los siguientes parmetros:
temperatura, pH, Oxigeno
Identificacin por pruebas
bioqumicas
Consiste en bateras de pruebas bioqumicas que determinan la
capacidad de un aislamiento bacteriano de utilizar determinados
sustrato, de producir un metabolito particular, de fermentar
azucares,
descarboxilar, hidrolizar o desaminar aminocidos

Prueba de oxidasa
Prueba de catalasa
Prueba de manitol
Reaccin de CAMP
Prueba de ureasa
Prueba de coagulasa
Identificacin por pruebas
serolgicas
Consiste en detectar antgenos especificos de las bacterias

Permiten diferenciar entre especies microbianas y entre


cepas dentro de una misma especie

Cepas con diferentes antgenos se denominan


SEROTIPOS,
SEROVARIEDADES (serovares) o BIOVARIEDADES
(biovares)

Se puede detectar por ELISA, Aglutinacin, Western Blot


Identificacin por Fagotipia

Consiste en enfrentar la bacteria aislada a


diferentes bacterifagos

Se producen reas de lisis


Perfiles de cidos grasos
Citometria de flujo
Composicin de bases del ADN
Huellas del ADN (Fingerprint) Microbiologa forense
PCR
RFLP (polimorfismo de longitud de fragmentos de restriccion)
Hibridacin del acido nucleico (Southern Blot)
Micromatrices (chips) del ADN
Ribotipificacion y secuenciacin del ARN ribosmico (rRNA)
Hibridacin fluorescente in situ (FISH)
Claves dicotmicas
Cladogramas
Bioinformatica
Pruebas de sensibilidad a ATB
(Antibiograma)

Mtodos de difusin en agar (Mtodo Kirby Bauer)


(Cualitativo)
Mtodos de dilucin de antimicrobiano
(cuantitativo)
Concentracin Inhibitoria Minima (CIM): minima
concentracin de ATB que inhibe el crecimiento bacteriano
Concentracin Bactericida Minima (CBM): minima
concentracin de ATB para eliminar el 99.9% de bacterias en
24hs.
Kirby Bauer

CIM
SEROLOGIA
La serologa nos permite determinar el ttulo de
anticuerpos presentes en el suero del paciente

Se emplea generalmente cuando:


El agente etiolgico no es cultivable
Requiere cultivos especficos no disponibles en la
mayora de los laboratorios
El paciente se encuentra en una etapa de la infeccin
en la cual el agente etiolgico no es viable.
Bioseguridad
Bioseguridad
doctrina de comportamiento encaminada a lograr actitudes y
conductas que disminuyan el riesgo del trabajador de la salud de
adquirir infecciones en el medio laboral

Puntos Clave
Compete a todas las personas que se
encuentran en el ambiente sanitario.
Prctica Rutinaria
Deben ser cumplidas por todo el
personal de salud.
Independiente del riesgo.
Principios de la Bioseguridad
1) Universal: Aplicadas a todas las personas independiente de presentar o no
enfermedad.
Involucra a todos los pacientes, independiente de conocer o no su
serologa.
Todo el personal debe seguir las precauciones estndares para prevenir
la exposicin de la piel y de las membranas mucosas, en todas las situaciones que
puedan dar origen a accidentes, estando o no previsto el contacto con sangre o
cualquier otro fluido corporal.

2) Uso de Barreras: evitar la exposicin directa a sangre y otros fluidos orgnicos


potencialmente contaminantes, mediante la utilizacin de materiales adecuados.

3) Medios de eliminacin de material contaminado: conjunto de dispositivos y


procedimientos.
Infecciones
Asociadas a los
Cuidados de la
Salud
(IACS)
IACS:

1.Infeccin Intrahospitalaria

2. Hemodilisis
30 das
3. Hospital de Da
posteriores al
4. Rehabilitacin inicio de la
terapia
5. Internaciones Domiciliaras

6. Geritricos
Infecciones Hospitalarias/Nosocomiales
Toda infeccin adquirida durante la internacin y que no estuviese presente o
incubndose al momento de la admisin del paciente () En el caso de las
heridas quirrgicas la infeccin puede manifestarse luego del alta del paciente,
hasta 30 das o un ao dependiendo de la colocacin o no de prtesis.

Afecta 10% de los


pacientes internados

2guias prcticas, OMS, 2002


Ejemplos de Infecciones Nosocomiales

ITU: Infeccin Tracto Urinario


ISQ: Infeccin Sitio Quirrgico
IRB: Infecciones Respiratorias
Bajas
Prevencin
1.Lavado de Manos
2.Guas de prevencin
3.Precauciones estndar
4.Aislamiento
5.Uso correcto de Antibiticos
6.Inmunizacin del Personal
7.Higiene Hospitalaria
8.Educacin.
Lavado de
Manos
Porqu es importante?
Disminucin del 30% de Infecciones Intrahospitalarias

Disminucin de la Morbimortalidad

Disminucin de la inversin pblica para el tratamiento de


las infecciones nosocomiales

Da Mundial del
Lavado de Manos:
18 de octubre.

2002,OMS
Flora Colonizante - Residente
Aislados en la piel de la mayora de los individuos

Residentes Permanentes

NO REMOVIBLES por friccin mecnica

Microorganismos

Estafilococo coagulasa negativa,


Corynebacterium spp.
Propionibacterium spp.
Enterobacterias
Flora Transitoria
No presente en todos los individuos (con respecto a sus especies)

Transmisibles por contacto

REMOVIBLES por friccin mecnica

DESTRUCCIN con Antispticos

Microorganismos

Staphylococcus aureus,
Streptococcus pyogenes
Bacilos gram negativos (ej.E. Coli)
Candida spp
Clasificacin de Lavados de Manos
1. Lavado Social
REMUEVE Flora Transitoria

Remueve suciedad

Material: Jabn de tocador o Detergente

Duracin: 10-15 segundos.

Usos: inicio del da, salida de sala, alimentacin, al estornudar y toser.

NO PARA ATENCIN DE PACIENTES.


2. Antisptico

REMOVER y DESTRUIR Flora Transitoria

Materiales: Jabn o Detergente antimicrobiano. Preparacin alcohlica.

Duracin: 10-15 segundos.

Usos: Antes y despus de realizar procedimientos invasivos, curaciones,


aspirar secreciones, manipuleo de catteres o Asistencia Mecnica
Ventilatoria, extraer sangre, entrar en sala y aislamientos y al salir.
Procedimiento
2guias prcticas, OMS, 2002
2guias prcticas, OMS, 2002
Uso del Alcohol en Gel
Boletn Informativo N 210 , Centro de Informacin de Medicamentos CIM, Universidad de Rosario, 2014
3. Quirrgico

REMOVER y DESTRUIR Flora Transitoria

REDUCIR Flora Residente

Material: Jabn o detergente antimicrobiano + Esponja para friccionar

Duracin: > 120 segundos.

Usos: Antes y despus de cada ciruga.


Retirar joyas.
NO usar uas postizas.
Quirrgico: mangas por encima del codo.
Usar agua tibia. Aplicar 5 cc de jabn antimicrobiano
Friccionar y hacer espuma sobre manos y
muecas
Frotar entre los dedos.
Quirrgico: Usar esponja estril
Friccionar hasta encima del
pliegue de codo

Humedecer las manos


Siempre con las manos hacia arriba
Enjuagar siempre con manos hacia arriba
Con abundante agua
Secar a conciencia con toalla descartable Cerrar la canilla sin tocarla con la mano,
Quirrgico: A conciencia con papel o use la toalla de papel.
tela estriles. Quirrgico: cerrar con el codo.
Precauciones
Estndares
Precauciones Estndares
Son las precauciones que deben aplicarse a
todos los pacientes independientemente de su
diagnstico, a fin de minimizar el riesgo de
transmisin de cualquier tipo de
microorganismo, del paciente al trabajador de la
salud y viceversa.
HIGIENE de MANOS GUANTES
CUBRA su TOS
SIEMPRE Antes del contacto con
Antes y despus del mucosas, piel no intacta,
contacto con 1 Si tose o estornuda
paciente cubra su boca y nariz fluidos corporales.
Entre pacientes con pauelo descartable. Retirar inmediatamente luego
Antes y despus del del uso.
uso de guantes.
BARBIJO QUIRURGICO Y CAMISOLIN
PROTECCION OCULAR
Usar durante
Usar durante procedimientos que procedimientos que
puedan causar salpicaduras o puedan causar
aerosoles. salpicaduras o
aerosoles.
ISTRUMENTAL NO CRTICO SALUD DEL PERSONAL

Manejar equipo no estril con cuidado para No encapuchar ni manipular


evitar contaminacin del personal y de otros elementos punzo-cortantes.
pacientes. Retirar en forma inmediata y Desechar en
procesar (segn normas) los elementos descartadores rgidos.
contaminados
NO USAR
AISLAMIENTO
Varios anillos,
pulseras, relojes. No indicado
Uas largas, postizas o Solo para pacientes en
pintadas. aislamiento especfico.
Pelo suelto.
Precauciones:
Aislamientos
Precauciones: Aislamientos
Ayudan a prevenir la propagacin de microorganismos en el hospital

Basados en la Transmisin del patgeno

Asilamiento de Contacto

Aislamiento Por Gotas

Aislamiento Por Aerosoles


1. Aislamiento por Contacto
Sospecha o certeza de infeccin por patgeno muy transmisible.

Asociado a Patgeno Multiresistente:


1. SARM de la Comunidad
2. Klebsiella carbapenem resistente
3. Acinetobacter
4. Pseudomona
5. Enterobacter kpc
6. Virus sincial Respiratorio
7. Herpes Virus
8. bola.
Procedimiento:
Lavado de Manos ---- Camisoln ---- Guantes

Material crtico solo para el uso de ese paciente.

Habitacin individual o cohorte.


2. Aislamiento por Gotas
Patgeno que se transmite por hablar, toser, estornudar, procedimiento Vas Areas

Microorganismos: H. influenzae, N. meningitidis, Neumococo B-lctamico


Resistente, Nuemonia por Mycoplasma, Influenza, VSR, B. pertusis, C. diphterea,
Parvo B19, Fiebres hemorrgicas.

No Neumona por Neumococo. Porque?

Procedimiento:
Lavado de Manos --- Barbijo quirrgico --- Antiparras para procedimiento

Habitacin individual. Puerta cerrada.


3. Aislamiento por Aerosoles
Patgeno se transmite por el aire, recorren grandes distancias por corrientes.

Microorganismos: M. tuberculosis, Mycobacterias no tuberculosas, Varicela zster,


Sarampin, Herpes Zster diseminado, Influenza H1N1 cuando aerosoliza.

Patgeno < 1 micrn.

Procedimiento:
Antes de ingresar: Barbijo N95 --- Lavado de Manos --- Reutilizable con el mismo
paciente hasta su externacin.

Habitacin individual

Aire filtrado: EPA N95.


Sospecha para Aislamiento
Aislamiento de Gota Barbijo quirrgico
-Infeccin respiratoria en nios(*)
-Meningitis
-Fiebre + petequias o equimosis.
-Tos persistente severa o paroxstica en poca de coqueluche
-Epiglotitis

Aislamiento de Aerosoles Barbijo N95


-Vesculas (*)
-Fiebre + erupcin mculo-papular + catarro.
-Fiebre/tos/infiltrado pulmonar con antecedentes o contacto con TBC.
-Fiebre/tos/infiltrado pulmonar sugestivos de TBC.
-Infiltrados pulmonares en pacientes HIV (+).
-Patologa respiratoria crnica sin diagnstico.
Aislamiento de Contacto
-Infeccin respiratoria en nio(*)

-Vesculas (*)

-Diarrea aguda.

-Infeccin o colonizacin por grmenes multiresistentes.

-Abscesos cutneos o heridas abiertas.

-Gripe
RESIDUOS
DESCARTADORES
Se considera descartadores al recipiente donde se
depositan, con destino a su eliminacin por
incineracin, todos los materiales corto punzantes. No
deben ser reutilizados.

Debe estar hecho con material resistente a los


pinchazos y compatible con el procedimiento de
incineracin sin afeccin del medio ambiente.
RESIDUOS
BOLSA NEGRA BOLSA ROJA
(Residuos domiciliarios)
Guantes, algodn, gasa, venda.
Toalla de papel. Material descartable.
Contenedor de material punzo-cortante.
Caja de remedios, blister
Frasco de remedio parenteral
Papeles, cartones. Material con restos orgnicos.
Material administrativo. Restos de quirfano y anatoma patolgica.
Residuos de laboratorio.
Latas, botellas.
Paales.
Restos de alimentos. Todo lo usado en aislamientos
DESECHO DE RESIDUOS LQUIDOS

Los residuos lquidos (sangre, heces, vmitos, orina,


secreciones y otros lquidos corporales ) pueden desecharse
por el inodoro, Chatero y/o equipo sanitario similar. Esto es
posible cuando los efluentes son vertidos a la red sanitaria: si
el establecimiento no cuenta con conexin a la red sanitaria
deben ser tratados previamente.

NO DEBEN DESECHARSE POR EL INODORO POR


NINGN MOTIVO: materiales como: restos de suturas,
gasas, algodn, agujas, papel, cartn, material de polietileno
etc. (Estos ocluyen las tuberas de desagote, impidiendo la
normal circulacin de los efluentes)
Gua de prevencin de
infecciones hospitalarias,
2 edicin, OMS, 2002
REENFUNDAR LA AGUJA ES LA CAUSA DE 2/3 DE
LOS ACCIDENTES

ANTES O DURANTE EL USO : 15%

DESPUS DEL USO, ANTES DE DESECHAR: 68%

DURANTE O DESPUS DE DESECHAR: 14%

NO reencapuchar las agujas

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