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SS16 Alwine Hildebrandt

Chromosomenbiologie und Cytogenetik Prof Loidl SS16

- Zusammenfassung nach Vorlage der Folien und der Zusammenfassung vom SS13

Lehrinhalte

1. Chromosomen als Trger der Erbinformation Ein geschichtlicher berblick. Die Organisation des
eukaryotischen Genoms.
2. Der mitotische Zellzyklus
3. Die Meiose Rekombination und Segregation als Grundlage der Mendel-Regeln
4. Karyosystematik und Chromosomenevolution
5. Humancytogenetik
6. Organisation der Chromosomen in der Interphase; chromosomale Geschlechtsbestimmung
7. Spezielle Karyologie

Zellgenetik / Chromosomenforschung / Cytogenetik: Unterteilung

- Chromosomenbiologie: Wie verhalten sich Chromosome? Bau, Mechanik, Genexpression und Re-
gulation im Kontext des Chromosoms
- Cytogenetik (im engeren Sinn): Chromosomen in Fortpflanzung und Vererbung
- Chromosomenevolution: Vernderung der Chromosomen in der Stammesentwicklung und ihre
Rolle bei der Entstehung der Arten bzw. Aufspaltung v. Arten
- Karyosystematik, Cytodiagnostik: Chromosomen als Merkmale der Verwandtschaftsforschung und
als Krankheitsmarker Erkennung von bestimmten Krankheiten durch aberrante Chromosomen
mglich

1. Chromosomen & DNA als Trger der Erbinformation ein geschichtlicher berblick

17. Jhd: Robert Hook findet Zellen im Kork, Zelle = Einheit des Lebens
1828: Beschreibung des Zellkerns und der Chromosome durch Robert Brown Entdeckung, dass es
diesen nur in bestimmten Stadien gibt.
1865: Verffentlichung der Ergebnisse von Mendels Zchtungsexperimenten (Die Teilchennatur der
Gene). Entdeckung, dass sich quantitative (entweder-oder) Erbmerkmale nicht beliebig vermi-
schen.
1876: Beobachtung des Befruchtungsvorgangs (in Seeigel-Eiern) durch Oskar Hertwig. Diese sind
durchsichtig, man kann beobachten wie die Spermien an die Eizelle herangehen etc. -> Beobachtung,
wie Erbmaterial v. Vater u. Mutter gemeinsam in eine Zygote hinein kann. So htte die Zygote aber
die doppelte Menge an Erbmaterial.

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1890: Oskar Hertwig und Theodor Boveri postulierten eine Reduktionsteilung vor der Bildung der
Gameten
1892: Beschreibung der Meiose (beim Spulwurm) durch Boveri = postulierte Reduktionsteilung.
1889 1895: Boveri zeigt durch die Befruchtung entkernter Seeigeleier, dass die Erbinformation im
Zellkern liegt (bisher unklar, wo das Material genau in der Zelle liegt). Die Befruchtung fand durch
Spermien einer anderen Seeigelart statt, es kamen aber keine Hybride heraus, wenn der Kern kaputt
war, sondern nur mehr Nachkommen der Art, von der das Spermium kam: Daher Erbinformation im
Zellkern.
1896: Edmond Wilson postuliert, dass sich Chromosomen verhalten, wie man es von Mendels Erb-
merkmalen erwarten sollte.
1903: Besttigung der These, dass Erbmerkmale auf den Chromosomen liegen, durch Walter Sutton:
In den Zellkernen von Heuschrecken kommen zwei gleiche Chromosomenstze vor -> Chromosomen-
theorie der Vererbung, diploide Zellen, jeweils 1 Chromosom von der Mutter und 1 vom Vater.
1911: Lokalisierung von Genen auf einem Chromosom von Drosophila durch Sturtevant und Morgan
(mittlerweile sind mehrere Gene lokalisiert, die verschiedene Merkmale bestimmen: Fhlerlnge,
Krperfarbe, Augenfarbe, Flgel)
1928: Kann die Substanz, die das Erbmaterial beinhaltet, zwischen Zellen hin- und hergegeben wer-
den? Entdeckung der bakteriellen Transformation durch Frederick Griffith: Gene sind eine Substanz,
die von Zellen an andere Zellen weitergegeben werden kann. Einbringung von Fremd-DNA in andere
Zellen mglich. Griffith nahm 2 Stmme von Streptococcus: solche, die infektis waren (S-Stmme,
bei Infektion stirbt Maus), und solche, gegen die Muse resistent waren (R-Stmme). Im R-Stamm
fehlt die uere Schutzschicht aus Polysacchariden, die Bakterien sind daher nicht gegen die Abwehr-
rekation des Wirtes geschtzt, und die Maus berlebt. - bei Injektion von S-Stamm: Maus stirbt - bei
Injektion von R-Stamm: Maus lebt - bei Injektion von hitzeabgettetem S-Stamm: Maus lebt - aber:
bei Injektion von lebenden R-Bakterien und hitzeabgetteten S-Bakterien stirbt die Maus. Daher
muss sich also irgendetwas von den toten S-Bakterien auf die lebenden R-Bakterien bertragen ha-
ben. Es wird allerdings nicht einfach nur die Bakterienhlle bertragen, denn bei Isolierung von Bak-
terien aus den toten Musen und Injektion in weitere Muse sind auch diese gestorben. Es wird also
die Information, die notwendig ist, um infektise Zellen auszubilden, an andere Zellen weitergegeben.
1944: Oswald Avery entdeckt, dass die DNA Trger der Gene ist. Klar war, dass Zellen aus DNA und
Proteine bestehen. Ursprnglich stellte man sich DNA als einfaches, uniformes Molekl vor; man
wusste allerdings, dass Proteine Polymere waren, die aus Aminosuren in beliebiger Abfolge beste-
hen. Daher schienen Proteine als Informationstrger von Genen geeigneter. Aber: Avery entdeckte,
dass die pathogene Eigenschaft von Streptococcus durch einen protein-freien Zellextrakt (Protein
durch Proteasen zerstrt) auf den nicht-pathogenen Stamm bertragen wird. Daher muss DNA Tr-
ger der Gene sein.
1953: Watson und Crick beschreiben die Doppelhelix-Struktur der DNA aufbauend auf Rntgen-
strukturanalysen von Maurice Wilkins und Rosalind Franklin. Entdeckung, dass DNA aus 2 komple-
mentren Strngen besteht. -> Erbinformation ist in der DNA, DNA ist in den Chromosomen.

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2. Die Organisation des eukaryotischen Genoms

Chromosomen und Interphasechromatin

Form der Chromosomen: Typisch fr Eukaryoten sind Stbchenchromosome. Prokaryoten haben


hufig zirkulre Chromosomen und meist auch nur einzelne statt Paare. Vermutlich entwickelten sich
lineare Chromosome bei sich sexuell fortpflanzenden Organismen, weil die Meiose nur bei linearen
Chromosomen mglich ist (die homologen Chromatiden mssen sich zur Zellteilung aneinander la-
gern knnen).

Anzahl der Chromosomen: Je mehr Chromosomen in einer Art vorhanden sind, desto grer ist der
Grad der Durchmischung bei der Meiose dies ist evolutionr gnstig, da so viele unterschiedliche
Genotypen hervorgebracht werden knnen. Unterschiedliche Arten haben eine unterschiedliche
Chromosomenanzahl. Zahl der Chromosomen schwankt zwischen 2 (diploides Minimum, bei man-
chen Ameisen oder Spulwrmern zu finden) und 2n=1440 (2n = doppelte Chromosomenanzahl, da
der Organismus diploid ist). Typische Zahlen bei Sugern sind ~30 40. Mensch: 2n = 46.

Gre der Chromosomen: Ein Chromosom darf eine bestimmte Gre nicht berschreiten, um wh-
rend der Kernteilung nicht durchgeschnitten zu werden und Teile zu verlieren. Daher ist es bei DNA-
reichen Arten ntig, dass sich die Chromosomen whrend der Mitose sehr stark verkrzen. Vor allem
in den Chromosomen von Pflanzen und Amphibien ist die DNA extrem dicht gepackt.

DNA-Menge: Das C-Value Paradoxon: Die DNA-Menge korreliert nicht mit der Zahl der Gene und sie
ist kein zuverlssiger Indikator fr die Komplexitt eines Organismus. Beim Menschen und hheren
Eukaryonten berwiegt der Anteil an nicht-kodierender DNA. (Mensch hat ca. 3*109 kb, also Nukleo-
tidbasenpaare DNA und ca. 30.000 Gene). Nicht die Zahl der Chromosomen, aber die Zahl der Gene
korreliert grob mit der Komplexitt des Organismus.

Nicht kodierende DNA: Bei Organismen mit weniger DNA liegen die Gene dichter zusammen; bei
mehr DNA sind die Gene durch nicht-kodierende DNA getrennt. Viele der nicht-kodierenden DNA
liegt als Satelliten-DNA vor. Dabei handelt es sich um eine Untergruppe der repetitiven DNA (hoch-
repetitiv), in der eine Sequenz viele Male hintereinander vorkommt, entweder tandemrepetitiv (di-
rekt hintereinander) oder im Genom verteilt. Aber auch in der unikalen DNA gibt es nicht-kodierende
Teile, die im Laufe der Evolution z.B. nach einer Sequenzduplikation ihre Funktion verloren haben
(Pseudogene).
Satelliten-DNA bildet bei der Zentrifugierung eine eigene Fraktion: DNA hat unterschiedliche Dichten
schwerer bzw. dichter sind GC-reiche Abschnitte, leichter bzw. weniger dicht sind AT-Basen. In der
Satelliten-DNA des Menschen sind mehr AT-Basen.

Repetitive DNA: Sie repetitive DNA wird unterteilt in hoch repetitive und mittel repetitive DNA. Ein
Hinweis auf repetitive DNA Sequenzen im Genom ist die Reassoziationsgeschwindigkeit denaturier-
ter DNA (gemessen als abnehmende optische Dichte der DNA Suspension einzelstrngige DNA ab-
sorbiert Licht schneller als doppelstrngige; mit der Zeit nimmt die Absorption ab). Wenn man DNA
aus verschiedenen Organismen isoliert und diese denaturiert, werden bei Zimmertemperatur die

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Halbstrnge im Reagenzglas wieder zusammenfinden. Wenn das Genom des Organismus nicht sehr
komplex ist, wird bei gleicher DNA-Menge fter dieselbe Sequenz vorkommen. Daher sind mehr
komplementre Strnge in der DNA und die Reassoziation luft schneller ab als bei Arten mit einem
komplexeren Genom und vielen unterschiedlichen Sequenzen. Bei hheren Organismen ist die Ab-
sorption nicht linear, die entstehende Kurve der Reassoziation ist buckelig. Die repetitive DNA reasso-
ziiert sehr schnell, da es viele identische DNA-Stcke zur Paarung gibt, im Gegensatz zu unikaler DNA,
deren Sequenzen nur einmal im Genom vorkommt und daher sehr langsam reassoziiert.

Mittel repetitive DNA: Dazu gehren Tandem repeats, Interspersed Retrotransposons und tRNA
Gene.
SINES (Short interspersed nuclear elements) = Retrotransposons, die im Laufe der Evolution stillge-
legt wurden. Sie sind im Gegensatz zu den LINES krzer und nicht autonom, bentigen also eine ex-
terne reverse Transkriptase (oft von LINES codiert), die ihnen den Einbau in eine andere Position
ermglicht.

Chromatin: Form der DNA in sich nicht teilenden Zellkernen. Whrend der Zellteilung liegt die DNA in
Chromosomen vor. Beide Formen enthalten zu etwa einem Drittel DNA und bestehen zustzlich zu
zwei Dritteln aus Histon-Proteinen, Nicht-Histon-Proteinen (z.B. Topoisomerasen, Condensine) und
einem kleinen Teil RNA. Die Nicht-Histon-Proteine bilden ein Skelett (Scaffold), das das Chromatin
umgibt.
Die Histone bilden Nukleosomen (Oktamere), 8er Komplexe aus je zwei Histon-Proteinen H2A, H2B,
H3 und H4. Um das Oktamer ist die DNA zweifach herumgewickelt. Das Linker-Histon H1 hlt die

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Komplexe zusammen. Daraus wiederum entsteht eine 30nm Fiber (umstritten), die in Schleifen ge-
ordnet wird und daraus die Chromosomen formt.
Histone knnen kovalent modifiziert (Acetylierung, Methylierung, Phosphorylierung und Ubiquitinie-
rung) werden und so den Zustand der DNA beeinflussen. So kann eine Acetylierung des Histon-H3
Proteins die positive Ladung der Histone neutralisieren und deren starke Bindung zur negativ gelade-
nen DNA auflockern, was dann die Transkription der DNA ermglicht.
Um herauszufinden, welche Abschnitte der DNA mit der Kernmatrix interagieren (MAR = matrix-
associated regions), kann die DNA nach der Extraktion der Histone mit Restriktionsendonukleasen
geschnitten werden. Da Matrix-assoziierte DNA-Sequenzen vor dem Restriktionsverdau geschtzt
sind, knnen sie extrahiert und sequenziert werden. Alternativ kann zuerst die DNA mit DNase dena-
turiert werden, sodass ein Pool aus DNA-Fragmenten entsteht. Dann werden die Histon-Proteine
zugegeben, sodass DNA-Sequenzen mit einer Affinitt zur Matrix assoziieren knnen. Diese werden
herausgefiltert und anschlieend analysiert.

Condensine: gehren zu einer Familie von


ringfrmigen Protein-Komplexen und be-
wirken die Chromosomen-Kondensation,
aber haben auch Funktionen in Chromati-
den-Kohsion und DNA-Reparatur.
Condensin-Ringe bestehen aus den Smc-
Proteinen 2 und 4 und einer Hinge-Region.
Sie umschlieen den Chromatinfaden, indem sie ihn zu Schleifen bie-
gen.
Im Gegensatz dazu verbinden die Cohsin-Ringe die Chromatidenf-
den von Schwesterchromatiden. Beide haben jedoch die gleichen Bindungsstellen, es kann also ent-
weder ein Condensin oder ein Cohsin an eine Stelle der DNA binden.

Zwei Modelle fr die Struktur der Metaphasechromosomen:


- Innenskelettmodell: die Verkrzung erfolgt in der Prophase durch einen bisher unbekannten Me-
chanismus unter Beteiligung von Condensin 2, nach der Verkrzung stabilisiert Condensin 1 das
Chromosom.
- Schraubenmodell: die Chromosomen mancher Arten zeigen nach bestimmten Fixierungsmethoden
eine Schraubenstruktur (Ohnuki Coils). Es handelt sich um ein lteres Gegenmodell, es ist unklar,
ob dessen Aussage stimmt.

Experiment Taylor-Woods-Hughes (1957): Chromatide besteht aus einem einzelnen DNA-Molekl.

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Telomere

Telomere dienen der Erhaltung der Chromosomenlnge: Die Telomere befinden sich am Ende der
Chromosomen und schtzen die Gene davor, abgebaut zu werden. Bei jeder DNA-Replikation geht
ein Stck DNA an den Telomeren verloren, da an jener Stelle, wo der RNA-Primer bindet, keine Repli-
kation stattfinden kann. Daher wird bei jedem Zellzyklus das Chromosom am 5Ende um ca. 100bp
krzer. Sobald von der Verkrzung codierende DNA-Abschnitte betroffen sind, ist das fr die Zelle ein
Signal, die Apoptose einzuleiten (DNA Damage Checkpoint).
TERT: Telomeric Reverse Transcriptase = Telomerase, besteht aus einem Komplex aus RNA und Pro-
teinen. Sie bringt einen repetitiven RNA-Abschnitt (Telomer-Repeats) mit, der als Vorlage fr die
reverse Transkriptase dient, wenn diese die Telomere verlngert. Eine DNA-Polymerase ergnzt dann
den komplementren Strang.

Regulierung der Telomerlnge: Wenn ein Telomer lang ist, bindet es viele Kopien von Rif1 und Rif2.
Rif2 interagiert mit dem MRX Komplex und verhindert damit, dass Tel1 an MRX binden kann. Wenn
die Telomersequenz krzer wird, wird die Interaktion von Rif2 mit MRX schwcher, MRX kann dann
Tel1 aktivieren, und dieses rekrutiert den Telomerase Komplex. Dieser ist so lange aktiv, bis wieder
gengend Rap1 und Rif Proteine an das nunmehr wieder lange Telomer binden knnen.
Bei eukaryotischen Einzellern (Hefen, Protisten) ist die Telomerase bei Bedarf aktiv, bei mehrzelligen
Tieren normalerweise nur in der Keimbahn. Bei geklonten Tieren knnen die Telomere in der Keim-
bahn nicht verlngert werden, daher sind bei vielen dieser Tiere typische Alterskrankheiten festzu-
stellen. Es gibt jedoch auch Flle, wo keine Telomerverkrzung festgestellt wurde: Bei geklonten
Musen wurde bis in die 5. geklonte Generation keine Abnahme (sondern vielmehr eine leichte Zu-
nahme) der Telomerlnge festgestellt. Dies ist evtl. durch ALT (Alternative Lengthening of Telomeres)
zu erklren.

ALT = Alternative Lengthening of Telomeres: Mechanismus als Backup System, wenn die Telomerase
fehlt oder inaktiv ist. Die meisten Krebszellen reaktivieren die Telomerase zur Erhaltung ihrer Telo-
mere, aber einige Tumore nutzen Reparatur-abhngiges ALT.
Der Mechanismus funktioniert zumeist ber Rekombinationsvorgnge, durch die Sequenzen aus
anderen Stellen am Genom an die Chromosomenenden gehngt werden, um sie wieder zu verln-
gern. Diese HR(homologous recombination)- abhngige Replikation der Enden bentigt zumindest
einige nicht komplett erodierte Telomere. Gelegentlich bilden sich auch Ring-Chromosomen (die ja
keine offenen Enden haben), z.B. bei der Hefe beobachtet

Telomer-Elongationsmechanismus mit Telomere-associated-Retrotransposons bei Drosophila: RNA


wird transkribiert mit willkrlicher Sequenz, diese setzt sich an jedes freie DNA-Ende (kann auch ein
Bruch sein), dann findet dort reverse Transkription statt mit der RNA als Template. Schlielich wird
das RNA-Stck degradiert, durch DNA ersetzt und man erhlt einen vollstndigen DNA-Strang. Unse-
re Telomerase war ursprnglich wahrscheinlich auch ein Transposon, beide Mechanismen sind aber
unabhngig voneinander entstanden.

Das ungewollte Auslsen des DNA Damage Checkpoints, der bei offenen DNA-Enden und DNA-
Brchen aktiviert wird, kann verhindert werden, indem sich eine t-loop bildet. Der Einzelstrang formt
eine Schleife und wechselwirkt mit den Basen des Doppelstrangs. Dadurch werden die offenen Telo-
mere maskiert.
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Das Centromer

- eingeschnrter Abschnitt der kondensierten DNA


- kann an verschiedenen Stellen des Chromosoms liegen, jedoch nie ganz am Ende
- Stelle, an der die Schwesterchromatiden bis zur Anaphase zusammengehalten werden
- haben statt der normalen H3 Histone eine modifizierte Version: CENP-A (Centromer Protein A)
- die Kinetochor-Proteine binden an CENP-A und stellen ber Mikrotubuli den Kontakt mit dem Spin-
delapparat whrend der Mitose/Meiose her
- epigenetisch definiert durch Protein-Ausstattung und Ultrastruktur, ein konserviertes centromeri-
sches Sequenzmotiv lsst sich nicht erkennen; die Stelle des Centromers wird also epigenetisch an
die Tochterzellen weitergegeben

Im Elektronenmikroskop zeigen Chromosomen zahlreiche Chromatinfasern im Centromer (wider-


spricht dem Dogma: 1 Chromatide = 1 DNA Molekl). Eine mgliche Erklrung wre die nicht-lineare
Anordnung der DNA im Centromer: Nur ein kleiner Teil der Centromer-DNA ist mit CENP-A beladen,
daher ist die DNA an dieser Stelle mehrfach gefaltet.

Je grer die Anzahl der Chromosomen in einem Organismus, desto mehr Mikrotubuli binden an ein
Centromer, um es in der Zellteilung bewegen zu knnen. Die Bckerhefe hat nur ein Mikrotubuli pro
Centromer (Punktcentromer).
Die Centromerelemente CDE I und CDE III (Hefe) sind in den Centromeren codiert und fr dessen
Funktion wichtig.
Die DNA in den Centromeren besteht im Allgemeinen aus DNA Tandem Repeats in Assoziation mit
modifizierten Histonen. Centromere sind Orte im Chromosom, deren DNA-Sequenz im Laufe der
Evolution fr die Centromerfunktion optimiert wurden. Jedoch knnen andere Sequenzen diese Rolle
bernehmen.

Nucleolus-organisierende Region (NOR)

NOR = die Stelle in einem kondensierten Chromosom, wo mehrere hundert Repeats von ribosomaler
DNA lokalisiert sind, die fr rRNA codieren. Mindestens ein Chromosomenpaar im Genom besitzt
eine NOR, beim Menschen sind es insgesamt fnf pro hapoidem Chromosomensatz (bei Hefe nur
einer). Sie ist durch eine Einschnrung im Chromosom erkennbar, whrend der Interphase bildet sich
dort der Nucleolus aus.
Die rDNA ist in Tandem-Repeats organisiert, von die simultan (mehrere hundert Loci) durch RNA
Polymerase I sehr effizient transkribiert wird. Hier werden viele Kopien bereits bei der Transkription
erstellt. Im Gegensatz dazu ist bei unikalen Genen ist die multiple Translation einer mRNA an mehre-
ren Ribosomen gleichzeitig hauptverantwortlich fr die Vermehrung des Genprodukts.
Die ribosomalen 18S, 5.8S und 28S RNA Untereinheiten entstehen durch das Processing eines einzi-
gen Transkripts. Dadurch ist gewhrleistet, dass diese Untereinheiten in stchiometrischen Verhlt-
nissen vorliegen.

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Nucleolus = Bereich, in dem die ribosomale RNA


transkribiert und prozessiert wird. Auerdem wer-
den dort die Ribosom-Untereinheiten zusammen-
gebaut. Der Nucleolus dient auch als Reservoir fr
ribosomale Proteine und Regulatoren des Zellzyk-
lus. Da Nucleoli nicht von Membranen umgeben
sind und zur Fusion neigen, sind oft weniger Nu-
cleoli als NORs in der Zelle vorhanden.
In der Interphase bildet sich an der NOR der Nu-
cleolus aus. Vor der Zellteilung wird dieser wieder
aufgelst und die ribosomale DNA konzentriert sich an der NOR. Das wichtigste Protein der Nucleoli,
das Nucleolin, wird bei der Auflsung der Nucleoli recycled, indem es sich an die sich teilenden mito-
tischen Chromosomen anlagert. So gelangt es als chromosomal hitchhiker in die Tochterkerne, wo
es am Aufbau der neuen Nucleoli beteiligt ist.

3. Mitose

1. Kondensationszyklus und Stadien

Bei Einzellern fhrt die mitotische Zellteilung automatisch zur klonalen (vegetativen) Vermehrung.
Bei Vielzellern fhrt sie dagegen zum Wachstum (von der Zygote zum vielzelligen Organismus), zur
Zellerneuerung in manchen Organen und zur Wundheilung.
Beim Menschen entwickelt sich ein Erwachsener nach etwa 44 Teilungsschritten aus der Zygote.

Die Funktion der Mitose ist die Weitergabe von Erbmaterial auf zwei Tochterzellen. Diese Vermeh-
rung und Teilung beginnt eigentlich schon in der S-Phase (Replikationsphase), wenn sich das Chro-
mosom semikonservativ repliziert (jedes neue DNA-Molekl besteht aus einem alten und einem
neuen Strang). Dann wird die DNA verdoppelt und kann sich verteilen. Anschlieend folgt die Karyo-
kinese (Kernteilung), und zuletzt die Cytokinese (die ganze Zelle teilt sich und es entstehen zwei neue
Zellen).

- Interphase: das Chromatin ist noch sehr dnn, man sieht relativ wenig (unterhalb Auflsungs-
schwelle des Lichtmikroskops).
- Prophase: Das Chromatin kondensiert, die Chromosomen werden dicker, krzer und als lineare
Strukturen erkennbar. Der Zellkern ist noch von einer Membran umgeben, der sich aber whrend der
Prometaphase auflst. Hier setzen auch die Mikrotubuli, ausgehend von den Polen der Zellen, an
den Centromeren an.
- Metaphase: Die Chromosomen werden von den Mikrotubuli zum quator der Zelle geschoben und
bilden die Metaphaseplatte.
- Anaphase: Die Schwesterchromatiden eines jeden Chromosoms weichen aufgrund des Zugs der
Mikrotubuli auseinander.
- Telophase: Die Chromatiden sind an den Polen angelangt, sie lockern sich wieder auf und es bildet
sich um sie eine neue Kernmembran.

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Die Cytokinese (Teilung der Zelle) kann auf unterschiedliche Weisen erfolgen: Bei Tieren kommt es
normalerweise zu einer Furchung zwischen den zwei Tochterhalbzellen, durch diese Einschnrung
kommt es zur Teilung. Bei Pflanzen, die starre Zellwnde haben, geht dies nicht. Es wird ein Fragmo-
plast gebildet: eine neue Zellplatte zwischen den zwei Zellen. Das Fragmoplast wird durch die mitoti-
sche Spindel dorthin transportiert.

2. Der Spindelapparat

Prokaryoten, Bakterien und Archaea haben keinen Spindelapparat und auch keine Mikrotubuli, hier
geschieht die Bewegung der Tochterchromosomen durch Actin. Die zirkulren Genome binden an
der Zellwand, wenn die Zelle sich streckt, weichen sie auseinander und irgendwann werden die zwei
Zellhlften voneinander abgeschnrt.
Bei den Eukaryonten haben sich verschiedene Mglichkeiten entwickelt, wie die Chromosomen aus-
einanderweichen knnen:
- Trennung durch intranuklere Mikrotubuli: Bei sehr einfachen Organismen gibt es eine intranukle-
re Spindel. Innerhalb des Zellkerns wird eine Spindel aus Mikrotubuli ausgebildet, ohne dass die
Kernhlle sich auflst. Diese Spindel schiebt die beiden Kernhlften auseinander und trennt die
Chromatiden.
- Trennung durch perforierte Kernmembran: Bei Dinoflagellaten ist die Kernmembran zwar intakt,
aber perforiert, sodass die Mikrotubuli sie durchdringen knnen, um mit den Chromatiden in Kontakt
zu treten.
- Auflsung der Kernmembran: Bei den hheren Eukaryonten lst sich die Kernmembran whrend
der Teilung auf und eine mitotische Spindel bildet sich in der Zelle.

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Es gibt verschiedene Klassen von Mikrotubu-


li: Astrale MT stehen aus dem Zentrum hin-
aus, gehen aber sozusagen in die falsche
Richtung. Dann gibt es solche die zu weit
hinausgehen, manchmal fast bis zum ande-
ren Pol, und dann blind enden. Diese bei-
den Klassen haben die Funktion, die beiden
Pole des Spindelapparats auseinanderzuhal-
ten.
Die Kinetochorfasern gehen vom Pol zur
Metaphaseplatte, setzen an den Kinetocho-
ren der Chromosomen an, verkrzen sich in
weiterer Folge, um dadurch die Chromati-
den auseinanderziehen. Um zu verhindern,
dass sich gleichzeitig die Pole aufeinander zu
bewegen, sind die beiden anderen Klassen
von Mikrotubuli da.
Auch die Streckung der Zelle leistet einen Beitrag zur Trennung der Schwesterchromatiden.

Prometaphase: durch Schub werden die Chromosomen zum quator bewegt, der Schub findet dabei
nicht nur an den Cinetochoren, sondern am gesamten Chromosom statt. Er wird erzeugt durch an
den + Enden polymerisierende Mikrotubuli und Kinesin-Motorproteine (bewegen sich in Plus-
Richtung).

Anaphase: durch Zug werden die Chromatiden getrennt, dieser entsteht durch
- Auseinanderweichen der Pole,
- Verkrzung der Kinetochor-Mikrotubuli durch deren Depolymerisierung
- Gleiten von Kinetochorfasern entlang anderer Mikrotubuli durch Dynein-Motorproteine (bewegen
sich in Minus-Richtung).

Die Mikrotubuli haben eine rhrenfrmige Struktur.


Zum einen sind die MT am Kinetochor verankert, lsen
sich an dieser Stelle durch Depolymerisierung aber
gleichzeitig auf: Paradoxon?
Lsung: Der ringfrmige DAM-Komplex legt sich wie ein
Kragen um die Mikrotubuli herum und stellt die Ver-
bindung mit dem Kinetochor her. Die Mikrotubuli wer-
den nicht einfach nur depolymerisiert, sondern produ-
zieren eine Kraft, die den Komplex nach hinten schiebt.

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3. Kohsion und Segregation

Der Zusammenhalt der Schwesterchromatiden und die zeitlich genau geregelte Auflsung dieser
Kohsion sind ntig fr die koordinierte Trennung (Segregation) aller Chromatiden einer Zelle. Zur
Kohsion tragen wahrscheinlich mehrere unabhngige Faktoren bei: DNA Catenation (Ineinander-
Verwindung von replizierten DNA-Moleklen) und Cohsine (Kohsions-Protein-Komplexe).
Die ersten Hinweise auf Chromatid Linking Proteins wurden durch Immunfrbung mit CREST Auto-
antiserum gefunden. Man wusste, dass es eine Substanz zwischen den Chromatiden gibt, nicht aber
was es ist. Erst spter durch Experimente mit Hefe entdeckte man die Cohesine: Proteinkomplexe
aus mehreren Untereinheiten, einen Hinge, einer SMC-1 und einer SMC-3 Einheit. Sie sind eng ver-
wandt mit den Condensinen, die jedoch eine andere Funktion ausfhren.

In der Interphase sehen die Chromosomen eher aus wie Stbchen. In der Mitose wird die Kohsion
entlang der Arme schon in der Prophase aufgelst, indem die Phosphatase Aurora B die Cohsine
dephosphoryliert, wodurch sich die Ringstruktur ffnet.
Zwischen den Centromeren bleibt die Kohsion aber bis zum Beginn der Anaphase erhalten, ge-
schtzt durch das Protein Shugoshin (Sgo1). Daher sehen die Chromosomen whrend Prophase und
Metaphase eher aus wie X-Formen. In der Anaphase bewirkt die Phosphorylierung der Kleisin-
Untereinheit Scc1 den Schneideprozess durch das Enzym Separase.

Diese Entdeckungen wurden alle bei der Hefe gemacht. Mit der Chip-Technik (Chromatin-Immuno-
Precipitation) kann man feststellen, wo Proteine auf einem DNA-Molekl sitzen.
ChIP-Seq Technik: Die Methode hat das Ziel herauszufinden, ob bestimmte Proteine an spezifische
Genregionen gebunden sind. Die Chromosomen werden mittels Ultraschall in kleine Fragmente zer-
schnitten, dann werden Antikrper zugegeben, die an Cohesine binden (Immunoprzipitation). Zu-
letzt knnen die markierten DNA-Stcke sequenziert oder alternativ auf einem Microarray hybridi-
siert werden
Ergebnisse: In der Umgebung der Centromere ist Cohesin angereichert; und auch sonst schwankt die
Menge des Cohesins zwischen unterschiedlichen Chromosomenbereichen.

An den Centromeren muss die Kohsion besonders robust sein, denn dort darf sie sich erst auflsen,
sobald die Spindel angesetzt haben, damit die beiden Schwesterchromatiden sich ordnungsgem
trennen knnen. Weniger Cohesin ist entlang der Arme zu finden. Die Kohsion sorgt dafr, dass die
beiden Schwesterchromatiden auch nach der Entstehung zweier separater DNA-Molekle parallel
angeordnet bleiben und nicht auseinanderdriften. Dies ist ein Vorteil bei der DNA-Reparatur, da

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Doppelstrangbrche einfacher zu reparieren sind (falls ein Strang bricht, hat man gleich einen Mus-
terstrang, nach dem man den kaputten Strang durch homologe Rekombination rekonstruieren kann).
Im Bereich des Bruches binden sich weitere Cohesin-Molekle. Dann sind die DNA-Molekle eng
beisammen und eine Reparatur durch einen Strangaustausch ist gut mglich.

Cohesin hat auerdem eine von der Kohsion unabhngige Funktion, nmlich bei der Regulierung der
Expression von Genen. Sie regulieren die Expression von Genen dadurch, dass sie die Gene von den
zugehrigen Enhancern physisch trennen, wodurch sie dessen Wirkung verhindern. Das Gen wird
daraufhin weniger exprimiert. Bei Sugern lokalisieren Cohesine meist mit dem benachbarten Isola-
torprotein CTCF, sie sind ntig fr dessen Blockierung von Enhancersequenzen (Isolatoren verhindern
die Interaktion von Enhancern mit Promotoren).

4. Regulation des Zellzyklus

Die Entscheidung fr den Eintritt in einen mitotischen Zyklus am Restriktionspunkt (kurz vor Beginn
der Synthesephase, in der die DNA verdoppelt wird) ist abhngig von Zellgre, Nahrungsangebot,
Wachstumsfaktoren und Zellumgebung/Zelldichte. Ist die Entscheidung, die Zelle zu teilen, erst ein-
mal getroffen, wird der Zyklus komplett durchgefhrt bis zum nchsten Restriktionspunkt. Zellen, die
sich nicht mehr teilen, bleiben im G1-artigen G0-Statium.
Als Taktgeber fr den Zellzyklus dienen zyklische Vernderungen von Cyclinen (Regulatorproteine). In
ihrer Aktivitt von den Cyclinen abhngige Proteinkinasen (CDKs = cyclin-dependent kinases) und
Phosphatatasen aktivieren oder deaktivieren Proteine, die Funktionen in bestimmten Stadien des
Zellzyklus haben.
CDKs erlangen ihre Kinase-Aktivitt erst durch Bildung eines Komplexes mit einem Cyclin. Eine hohe
Cyclin-Konzentration begnstigt die Bildung von Cyclin-CDK-Komplexen. Einer der zahlreichen Cyclin-
CDK-Komplexe ist MPF, der Mitosis (oder Maturation) Promoting Factor, der als Hauptschalter fr
den Eintritt in die Mitose wirkt und nur whrend dieser in aktiver Form vorliegt.
Je nach Mitose-Phase (frh/mittel/spt) sind unterschiedliche Cycline aktiv. Degradiert werden Cyc-
line durch Markierung mit Ubiquitin, was zum Abbau durch eine Protease fhrt.

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Whrend verschiedener Checkpoints an drei Stellen im Zellzyklus werden die inneren und ueren
Bedingungen fr den Fortgang des Zellzyklus berprft:
- G1/S Checkpoint (Restriktionspunkt): Entscheidung, ob die Zelle in einen weiteren Zyklus eintritt.
- DNA Damage Checkpoint (am Ende der S-Phase): Kontrolliert, ob die ganze DNA repliziert worden
ist und ob Schden (z.B. Doppelstrangbrche) vorliegen, in diesem Fall werden diese entweder repa-
riert oder die Zelle leitet Apoptose ein, um unkontrolliertes Zellwachstum zu vermeiden.
- Spindle Assembly Checkpoint (SAC, am Ende der Metaphase): Kontrolliert durch gleichmigen Zug
(Tension) auf alle Mikrotubuli, ob der Spindelapparat korrekt an die Schwesterchromatiden gebun-
den hat und die Zelle bereit ist zur Segregation. In der Prophase sind die Kinetochorproteine stark
phosphoryliert (durch Ipl1 Kinase, wirkt auf monoorientierte MT). Die Phosphorylierung nimmt bei
korrekter Spannung auf die bipolaren MT in der Metaphase ab. Sobald der SAC erfolgreich absolviert
wurde und die Kinetochoren dephosphoryliert sind, wird der Eintritt in die Anaphase und die Tren-
nung der Schwesterchromatiden ermglicht.

Zellzyklus-regulierte, Separase-abhngige Auflsung der Kohsion:


Monoorientierte Mikrotubuli, kein Zug auf die Kinetochoren, daher phosphoryliert: Die Phosphorylie-
rung an den Kinetochoren aktiviert das Checkpoint-Protein Mad2, das mitotische Cyclin ist inaktiv,
ebenso wie die Separase (durch Inhibierung mit Securin).
Chromosomen in Metaphaseplatte angeordnet, Zug auf Kinetochoren, daher dephosphoryliert: das
mitotische Cyclin Cdc20 aktiviert den Anaphase Promoting Complex (APC/C), eine Ubiquitin-Ligase.
APC vermittelt die Ubiquitin-abhngige Degradierung des Securins, dadurch wird die Separase aktiv.
durch Schneiden der Scc1 Untereinheit mit der Separase Esp1 wird der Cohesin-Ring geffnet, die
Chromatiden knnen sich trennen: Beginn der Anaphase.

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SS16 Alwine Hildebrandt

4. Meiose

Die Meiose ist eine Abfolge von zwei Teilungen ohne dazwischenliegende DNA-Verdopplung, woraus
zuletzt vier unterschiedliche, haploide Produkte entstehen.

1. Funktionen und Stadien

- Reduktion des diploiden Chromosomensatzes der somatischen Zellen zum haploiden Chromoso-
mensatz der Geschlechtszellen
- Rekombination der elterlichen Genome
- Regeneration (Verjngung) der Zellen und Genome (umstritten)

- Mitose: zwei homologe Chromosomen (stellvertretend fr die beiden Stze eines diploiden Orga-
nismus), trennen sich in ihre Schwesterchromatiden auf, die Tochterzellen sind weitestgehend iden-
tisch ident.

- Meiose: Zunchst weichen die beiden homologen Chromosome als Ganzes auseinander, nachdem
sie durch Crossover untereinander Stcke ausgetauscht haben. In der zweiten Phase der Meiose
trennen sich auch die Schwesterchromatiden, wie in der Mitose. So entstehen am Ende vier haploide
Produkte mit jeweils einer Schwesterchromatide der Chromosomen, die sich alle genetisch vonei-
nander unterscheiden, da sie unterschiedliche Chromosomen bzw. Chromosomenzusammensetzun-
gen besitzen. Die Gameten besitzen also nicht nur eine Schwesterchromatide wie auf dem Bild dar-
gestellt, sondern je eine von jedem Chromosom nach der Rekombination.

Das Verhalten der Chromosomen in der Meiose ist die Grundlage der Mendelschen Regeln:
Bei Kreuzung zweier reinerbiger (homozygoter) Linien ist die F1 (Tochtergeneration) einheitlich: Uni-
formittsregel.
Bei wiederholter Kreuzung der heterozygoten F1 bekommt man in der F2 eine bestimmte Aufspal-
tung: Spaltungsregel.

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SS16 Alwine Hildebrandt

Auerdem: Unabhngigkeitsregel, Merkmale werden unabhngig vererbt, sofern sie auf unterschied-
lichen Chromosomen oder weit genug voneinander entfernt liegen.
Kernphasenwechsel: Wechsel zwischen haploidem und diploidem Entwicklungsstadium.
Bei manchen Pilzen, Algen und niederen Pflanzen ist das haploide Stadium prdominant (Haplonten:
alle Zelltypen bis auf die Zygote sind haploid).
Bei hheren Pflanzen gibt es einen Generationswechsel, wo diploide (Sporophyt) und haploide Stadi-
en (Gametophyt) als separate Individuen existieren. Haplo-Diplont: haploide Phase berwiegt (z.B.
Moose); Diplo-Haplont: diploide Phase berwiegt (z.B. Baum).
Bei Tieren herrscht das diploide Stadium vor, nur die Eizelle und Samenzelle sind haploid. Die Diploi-
die ist von Vorteil, da bei einem beschdigten Allel immer noch eine zweite Version im Genom vor-
handen ist.

Regeneration im Zuge der Meiose? Da die Zygote nach der Befruchtung keinerlei Alterserscheinun-
gen hat, muss es irgendwann zu einer Regeneration gekommen sein. Ein gutes Beispiel dafr ist das
geklonte Schaf Dolly, das als Klon eines lteren Schafs aufgrund von Alterserscheinungen bereits jung
starb. Dies zeigt, dass bei Dolly keine Regeneration stattgefunden haben kann, da keine Meiose
durchlaufen wurde.
- Erhhte Reparatur-Aktivitt im Zuge der Rekombination durch Recombinational Repair whrend
der meiotischen Prophase
- Telomerase-Aktivitt in der Keimbahn: berwindung des Hayflick-Limits (die begrenzte Anzahl
von Zellteilungen bei Eukaryoten, denen sich eine Zelle unterziehen kann, bevor der Programmierte
Zelltod eingeleitet wird, weil die Telomere eine kritische Lnge erreicht haben).
- Eliminierung der Mutational Load durch Selektion auf intakte Genome in der haploiden Generati-
on: die haploiden Produkte unterliegen einem Selektionsdruck, es wird auf die intakten Versionen
selektiert, haploide Chromosomenstze mit fehlerhaften Genen fhren zu nicht lebensfhigen Emb-
ryos und werden so nicht an die darauf folgende Generation weitergegeben.
- Rcksetzung des Genomischen Imprinting und anderer epigenetischer Markierungen: Die elterli-
chen Prgungen werden in den frhen Keimzellen jedes Menschen gelscht und nach der Meiose
wieder geschlechtsspezifisch etabliert. Ein Gen ist nur aktiv, wenn es von einem bestimmten Eltern-
teil kommt, das andere wird automatisch durch Cytosin-Methylierungen inaktiviert. Dies kann zu
Problemen fhren, wenn das aktivierte Gen fehlerhaft ist und das andere Allel die Mutation nicht
mehr ausgleichen kann (Prader Willi Syndrom: nur paternales Chromosom aktiv wird nur paternal
vererbt). Imprinting steht im Widerspruch zum Reziprozittsgesetz, nach dem es egal ist, ob ein Allel
von Vater oder Mutter stammt.

Stadien der Meiose


Bei der Meiose, ebenso wie in der Mitose, muss es zu einer Verkrzung der Chromosomen kommen.
Denn diese mssen kompakt sein, um ordnungsgem auf Tochterkerne und Tochterzellen segre-
giert werden knnen. Die Verkrzung geschieht im Zuge der meiotischen Prophase (dauert an vom
Ende der Interphase bis zu Beginn der Metaphase I). Die Kondensation ist maximal am Ende der Dia-
kinese (letztes Stadium der meiotischen Prophase).

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SS16 Alwine Hildebrandt

Der meiotische Zellzyklus dauert ca. 10x so lang wie der mitotische. Diese lngere Dauer kommt
hauptschlich dadurch zustande, weil neben der Verkrzung auch noch die Paarung der homologen
Chromosomen stattfinden muss (im Leptotn, Zygotn, Pachytn). Hier hngen alle Chromosomen
mit ihren Enden an der Kernmembran. Wie ein Reiverschluss gehen von den Enden aus hier die
homologen Chromosomen zusammen, bis alle miteinander gepaart sind. (ungelste Frage: wie er-
kennen homologe Chromosomen einander in der Meiose?)
Nach der vollstndigen Paarung im Pachytn lst sich diese wieder ein wenig auf, die Chromosomen
sind nur noch an den Chiasmen (berkreuzung der Chromatiden homologer Chromosomen) zusam-
mengefgt, dort, wo auch das Crossingover stattfindet. Jedes der bivalenten Paare besitzt eins oder
mehr Chiasmen.
Nach der Diakinese (letztes Stadium der meiotischen Prophase) geht es weiter mit der Metaphase I:
Die Kernmembran lst sich auf, damit sich der Spindelapparat bilden und mit den Chromosomen in
Kontakt treten kann. Dies ist Voraussetzung dafr, dass die homologen Chromosomen, die sich auch
hier wieder auf eine quatorialebene anordnen, voneinander getrennt werden je ein elterliches
Chromosom wandert auf eine Seite. Anaphase I: Trennung der Chromosomen.
Dann findet eine kurze Zwischenphase statt, die Interkinese, wo die Chromosomen manchmal vo-
rbergehend etwas dekondensieren. In manchen Organismen bilden sich sogar schon Kernmembran
und Zellwand. Entscheidend ist aber, dass whrend dieser Phase in den Tochterzellen keine DNA-
Synthese stattfindet, wie es bei der Mitose vor einer erneuten Teilung der Fall wre.
Es folgt eine mitotische Teilung. Das Produkt sind 4 haploide Zellen, beim Mann sind es 4 haploide
Spermazellen (klein und beweglich). Bei der Frau wird eine der vier eine Eizelle, die anderen degene-
rieren, weil Eizellen massenreich und nhrstoffreich sind.

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SS16 Alwine Hildebrandt

2. Meiotische Paarung

Die homologen Chromosomen werden in der meiotischen Prophase ber mehrere Stufen miteinan-
der gepaart, diese Paarung ist dabei sehr effizient:
1. homologe Chromosomen sind lose miteinander assoziiert. Das Aneinanderlagern der Homologen
wird dabei erleichtert durch die Bouquet-Anordnung: alle Chromosomenenden kommen in einem
kleinen Bereich der Kernperipherie zusammen, wodurch sich die Chromosomenarme grtenteils
parallel ausrichten. Konservierte Komplexe aus Transmembranproteinen verbinden die Telomere der
Chromosomen mit cytoplasmatischen Motorproteinen, was ihnen Beweglichkeit zur Suche nach ih-
rem homologen Partner ermglicht. Wie sich die homologen Chromosome erkennen, ist noch weit-
gehend unbekannt.
2. DNA-Sequenzen werden verglichen und gleiche Sequenzen interagieren
3. zwischen den gepaarten homologen Chromosomen wird eine Proteinverbindung, der Synaptone-
male Komplex (SC), aufgebaut. Diese SCs sind konservierte, strickleiterartige Proteinstrukturen, die
aus lateralen, transversalen und zentralen Elementen, die homologen Chromosomen in der meioti-
schen Prophase zusammenhalten. Der Rekombinationsknoten ist der Ort der molekularen Rekombi-
nation durch Crossing over.

3. Rekombination

Die Durchmischung ganzer Chromosomen ist die Basis der freien Kombinierbarkeit der Merkmale (=
Mendels Unabhngigkeitsregel).

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SS16 Alwine Hildebrandt

Intrachromosomale Rekombination: Crossover und Conversion


Crossover tauscht Chromatidenstcke aus und fhrt daher zur Neukombination von Merkmalen, die
durch Gene auf demselben Chromosom codiert werden. Das Crossover findet statt in den Rekombi-
nationsknoten der Synaptonemalen Komplexe. Fr das meiotische Crossover werden programmierte
Doppelstrangbrche herbeigefhrt, was fr die Zelle sehr gefhrlich sein kann, wenn sich die gebro-
chenen Stcke nicht wiederfinden. Sie werden induziert durch Dimere der Spo11 Endonuclease (He-
fe, verwandt mit Typ II Topoisomerase A Untereinheit), die eine Transesterase Reaktion durchfh-
ren; gleichzeitig stabilisiert Spo11 durch kovalente Bindung die freien DNA-Enden. Fr die weiteren
Schritte der Rekombination muss Spo11 wieder entfernt werden.
Die Verteilung des Spo11 Proteins entlang der Chromosomen korreliert mit dem Auftreten von meio-
tischen DSBs.
Repariert werden die DSBs durch verschiedene alternative Mechanismen:
1. Ligation: Es kommt zu keinem Crossover, stattdessen wird der DSB nur ligiert, wobei einige Basen
an der Schnittstelle verloren gehen knnen (End joining).
2. Rekombination und Schwesterchromatid-Austausch: der Crossover findet nur zwischen den
Schwesterchromatiden statt, sodass ein Teil der Chromatiden untereinander getauscht wird. Dies hat
aber keinen Effekt, da sie identisch sind. Dies soll verhindert werden durch eine Barriere des Synap-
tonemalen Komplexes.
3. Rekombination und Inter-homologes Crossover: Der DSB wird erweitert zum anderen Chromosom
hin. Beim Fllen der Lcke durch DNA-Synthese dient die homologe Chromatide als Vorlage. Dabei
bricht auch die Vorlagen-DNA, anschlieend werden alle Bruchstellen kreuzweise ligiert.

DSB Processing
An meiotischen DSBs agieren zwei Gruppen von Proteinen: jene mit Funktionen in der Repara-
tur/Rekombination (RPA, MRX-Komplex, Rad51, Dmc1, Rad52), und jene, die DSBs bzw. ssDNA ber-
hnge erkennen und Checkpoint Response auslsen (ATM).
- nachdem Spo11 den Doppelstrangbruch herbeigefhrt hat, muss es fr die Reparatur der DNA ent-
fernt werden, dies geschieht durch nukleolytische Aktivitt.
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SS16 Alwine Hildebrandt

- Gleichzeitig wird ATM rekrutiert, eine Proteinkinase, die durch DSBs aktiviert wird und verschiedene
Schlsselproteine phosphoryliert, die am DNA Damage Checkpoint beteiligt sind.
- Das Replikationsprotein A (RPA) bindet an den offenen Einzelstrang und verhindert, dass er sich
aufwindet oder eine Sekundrstruktur bildet.
- Um zu verhindern, dass die Enden auseinanderdriften, werden sie durch das Protein Rad50 und mit
Cohsin (MRX-Komplex) mit der Schwester-DNA verbunden. Des Weiteren verhindert eine Barriere
(Axialelemente des SC), dass die Reparatur des DSB mit der Schwester-DNA erfolgt; erst dadurch wird
die Rekombination zwischen homologen Chromosomen gewhrleistet.
- Die entstehende Lcke hat 3 berhnge (sticky ends), die notwendig sind fr die Rekombination.
Ist die Lcke nicht gro genug, wird sie durch Exonukleasen weiter geffnet.
- um den komplementren Partner zu finden, kommt es zur Invasion des Einzelstranges in den Dop-
pelstrang des anderen Chromosoms ber eine Displacement Loop (D-Loop).
- gemeinsam mit der incoming Einzelstrang DNA bilden die Rekombinationsproteine Rad51 (homolog
zum bakteriellen RecA) und Dmc1 ein helicales Nucleoproteinfilament, gemeinsam suchen sie nach
homologen Bereichen und helfen bei der DNA-Anlagerung.
- das Protein Rad52 bindet an den Einzelstrang und fhrt die DNA-DNA-Interaktion mit dem homolo-
gen Strang (nicht der Schwester-DNA) herbei, die notwendig ist fr die anschlieende Verbindung.
- Das Base-Switching vom Outgoing- zum Incoming Strang wird begnstigt durch die starke Streckung
der DNA des Outgoing Stranges; der Strangaustausch erfolgt in Schritten von jeweils 3 Basen.

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SS16 Alwine Hildebrandt

Zusammenhang zwischen Crossover und Chiasma

Bivalente (= zwei homologe Chromosomen bzw. vier Chromatiden) sind durch Chiasmen verbunden,
sie sind die cytologisch sichtbare Folge von Crossovers. Ein Bivalent hat mindestens ein Crossover, oft
aber mehrere. Die Chiasmen sorgen nach Auflsung des Synaptonemalen Komplexes dafr, dass die
homologen Chromosomen zusammenbleiben, bis es zur Auftrennung in der ersten meiotischen Ana-
phase kommt.
Die meiotische Segregation von cytologischen Markern (Knobs) verriet, dass Chromosomen Stcke
austauschen knnen.
Chiasmatypie-Theorie: Chiasmen sind eine Folge des Crossovers, dies wurde bewiesen durch die Exis-
tenz einer speziellen Form von multiplem Interlocking und dadurch, dass die identischen Chromoso-
menarme immer beisammen liegen. Auerdem ist es nicht mglich, noch intakte Chromatiden zu
berkreuzen, es ist zuvor immer ein Bruch notwendig Crossover kommt zuerst.

Dritte Mendelregel = Unabhngigkeitsregel. Gene werden unabhngig voneinander vererbt, aber nur
wenn sie weit genug auseinander liegen. Crossing Over durchbricht die chromosomale Kopplung von
Genen.
Die Hufigkeit von Crossovers zwischen 2 Genen hngt ab von ihrem Abstand am Chromosom je
weiter Chromosomen auseinander sind, desto wahrscheinlicher ist ein Crossover. Diesen Umstand
nutzt man zur Erstellung von Genkarten.
Die Rekombinationshufigkeit wird (nach John Haldane) in Morgan-Einheiten (Morgan-Units) ausge-
drckt. 1 Centi-Morgan (cM) entspricht einem Prozent Rekombination zwischen 2 Markergenen.
50cM -> 50% Rekombination = freie, unabhngige Kombination. Dies passiert, wenn zwei Genen auf
verschiedenen Chromosomen oder sehr weit auseinander auf einem gemeinsamen Chromosom lie-
gen sie rekombinieren zufllig.
Eine beobachtete Hufigkeit von z.B. 20% Chiasmen/Crossovers in einem bestimmten Intervall auf
einem Chromosom entspricht 10% Rekombination (10 cM), weil von den 4 Chromatiden des Biva-
lents nur 2 am Austausch beteiligt sind. D.h. durch 1 Chiasma werden 2 von 4 Gameten und 2 von 4
Nachkommen rekombinierte Chromosomen erhalten. Die Chiasmahufigkeit ist also das Doppelte
der Rekombinationshufigkeit.
Auf diese Weise wurden genetische Karten fr diverse Organismen erstellt, wo die Rekombinations-
hufigkeit zwischen zwei Loci als Ma fr den Abstand zwischen zwei Genen hergenommen wird: In
der genetischen Karte werden die Reihenfolge, aber nicht die Abstnde zwischen den Genen richtig

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SS16 Alwine Hildebrandt

wiedergegeben. Die physische Genkarte hingegen wird durch DNA-Sequenzierung erstellt. Sie gibt
an, wie viel DNA zwischen zwei Genen liegt, und sie wird in Basenpaaren (bp) gemessen.
Der Grund fr Fehler in der genetischen Karte ist die ungleichmige Verteilung von Crossovers ent-
lang der Chromosomen: Es gibt Hotspots der Rekombination, die gleichzeitig Orte erhhter Dop-
pelstrangbruch-Aktivitt sind. Dementsprechend wurde an diesen Hotspots auch verstrkte Bindung
von Spo11 beobachtet.

Die ungleichmige Rekombinationshufigkeit hat nicht


nur mit Hot und Cold Spots zu tun, sondern auch mit
folgenden Grnden:
- Obligatorisches Cross-Over / Chiasma: Jedes Bivalent
hat mindestens ein Chiasma, denn dieses ist vor allem
dazu da, um die homologen Chromosomen zusammen-
zuhalten und Fehlverteilungen vorzubeugen. Die Zahl
der Chiasmen ist also auch von der Chromosomenlnge
abhngig (je lnger, desto mehr Platz fr mehr Chias-
men). Aber bei sehr kleinen Chromosomen gibt es trotz-
dem das Minimum von 1, das nicht unterschritten wer-
den kann.
- Interferenz von Crossovers / Chiasmata:
Crossovers unterdrcken die Bildung weiterer Crosso-
vers in ihrer Nachbarschaft. Doppelcrossovers sind daher
wesentlich seltener.

Endstndige (terminale) Chiasmen minimieren die genetische Rekombination als Folge des Crosso-
vers. Manchmal ist Rekombination nicht erwnscht wenn Organismen bereits optimal angepasst
sind, ist zu viel Rekombination nur eine Verschlechterung. Aber das Chiasma ist fr Zusammenhalt
trotzdem ntig. Dann werden Chiasmen ans Ende verlegt, und der Austausch ist genetisch nicht rele-
vant, weil die Telomersequenzen repetitiv sind.
Bsp. Molch: genetische Rekombination nur auf der weiblichen Seite in den Eizellen, aber nicht in den
Samenzellen (hier sind Chiasmen endstndig). So reduziert sich die Rekombination im Schnitt um die
Hlfte.

4. Reduktion und Segregation

Reduktion und Segregation sind die letzten Schritte in der Meiose, wo die homologen Chromosomen
auseinanderweichen mssen.
Bivalente werden durch Chiasmen, aber auch durch die Kohsion der Schwesterchromatiden zu-
sammengehalten. Die verantwortlichen Proteine, die Cohesine, lsen sich auf (durch Separase), um
die Segregation der homologen Chromosomen in der Meiose I und der Schwesterchromatiden in der
Meiose II zu erlauben.
Die distale Kohsion lst sich, indem sich die Cohesinringe zunchst auerhalb der Chiasmen ffnen.
Die Chromosomen weichen in der Anaphase I auseinander. In der Anaphase II wird auch die centro-
mer-nahe Kohesion aufgelst und auch die Schwesterchromatiden weichen auseinander.

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SS16 Alwine Hildebrandt

Protein Sgo1 (Shugoshin) liegt am Centromer und rekrutiert eine Protein-Phosphatase (PP2A),
wodurch die Cohsine vor Abbau geschtzt werden. Die Ringe bleiben am Centromer bis zur Anapha-
se II geschlossen. Die Auflsung der Cohesine durch Separase-abhngige Spaltung wird dadurch be-
gnstigt, dass die Cohsin-Untereinheit Scc3 durch eine Kinase phosphoryliert wird.
Am Beispiel der konditionellen Separase-Knockout Maus zeigt sich, dass sich die homologen Chromo-
somen nicht trennen knnen, wenn die Kohsion entlang der Arme nicht aufgelst wird.

Eine erfolgreiche Segregation erfordert die korrekte Orientierung der


Centromere, diese wird begnstigt durch die rumliche Organisation der
Kinetochore (jeweils nach auen zeigend). Der Zusammenhalt der
Schwesterchromatiden durch die Cohsine gengt dazu nicht. Fehler in
der Orientierung werden durch den Spindle Assembly Checkpoint korri-
giert.
In der Bckerhefe gibt es einen Proteinkomplex Monopolin, der die
Schwestercentromere so zusammenhlt, dass sie in der ersten meioti-
schen Teilung (whrend der sie noch nicht voneinander getrennt werden
sollen) als Einheit funktionieren. In der Monopolin-Mutante kommt es
hufig zur vorzeitigen Trennung der Schwestern.
In der Spalthefe wird die Kohsion im Centromerbereich mithilfe des Pro-
teins Moa1 verstrkt. Dadurch sind die Schwester-Kinetochore eng anei-
nander gebunden.
Im Mais hlt das Protein MIS12 die Schwesterkinetochore whrend der
ersten meiotischen Teilung zusammen.

Vorteile und Nachteile von geschlechtlicher Reproduktion, Meiose und Kernphasenwechsel

Geschlechtliche Fortpflanzung geht einher mit der Diploidisierung von Zellen. Vorteile der Diploidie:
- Backup Genom zur Schadensbegrenzung bei Funktionsverlust eines Allels
- Backup Genom zur Tolerierung einer hheren Mutationsrate, man kann mehr probieren -> Be-
schleunigung der Evolution
- Heterozygotenvorteil (Heterosis): Von einem Gen knnen zwei unterschiedlich optimierte Allele
vorliegen -> Erhhung der Flexibilitt, grere Anpassungsfhigkeit.
- Grenzuwachs der Zelle und des Organismus (weil grerer Zellkern ntig)

Theorien zu den Vorteilen der sexuellen Reproduktion (gegenber Formen der klonalen Vermehrung)
fallen grob in 2 Kategorien:
- Sie beschleunigt die evolutionre Anpassung: Unabhngig in verschiedenen Linien entstandene (vor-
teilhafte) Mutationen werden in einem Individuum vereint.
Mullers Ratchet: In diploiden asexuellen Populationen hufen sich nachteilige Mutationen an, die im
heterozygoten Zustand toleriert werden. Diese Mutationen knnen jedoch nicht aus der Population
eliminiert werden. Schlielich wird eines der beiden Allele von jedem Gen betroffen sein, und die
Zelle ist de facto haploid. Es bleibt nur noch eine funktionelle Kopie jedes Gens. Das Ende einer klo-
nalen Linie kommt sptestens, wenn beide Allele eines Gens betroffen sind und keines mehr funkti-
onsfhig ist. Somit sind asexuelle Lebewesen recht kurzlebig. Nach manchen Schtzungen msste
eine asexuelle Eukaryonten-Population nach 10^4 bis 10^5 Generationen aussterben. Bakterien
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SS16 Alwine Hildebrandt

kompensieren Mullers Ratchet dadurch, dass die Zahl der neuen Nachkommen grer ist als die Zahl
der neuen Mutationen.
- Sie ist effizienter bei der Eliminierung von nachteiligen Mutationen und dient daher der Aufrechter-
haltung der Diploidie ber evolutionre Zeitrume. In Zusammenarbeit von Meiose und Befruchtung
werden rezessive mutierte Allele homozygotisiert und damit der Selektion unterworfen. Nachteilige
Mutationen knnen sich also nicht durchsetzen, vorteilhafte verbreiten sich schneller.
Zustzliche, unmittelbar wirkende Vorteile werden postuliert (aber es gibt auch Nachteile, sh. Kapitel
ber Geschlechtsbestimmung).

5. Karyotyp und Chromosomenevolution

Der Karyotyp beschreibt die Eigenschaften eines Chromosomensatzes eines Individuums oder einer
Art. Er umfasst Chromosomenzahl, die relativen Gren der Chromosomen, die Centromerpositio-
nen, und soweit bekannt, die Positionen der NORs und Chromosomenbnder (Heterochromatin). Der
Karyotyp wird durch Chromosomen- und Genom-Mutationen verndert.
Innerhalb einer Art knnen sich Individuen durch Chromosomenpolymorphismen und Abweichungen
(Trisomie) unterscheiden. Bsp. Geschlechtschromosomen, B-Chromosomen, Heterochromatinpoly-
morphismen.
Innerhalb eines Individuums kann sich der Chromosomenbestand spezieller Zelltypen unterscheiden,
z.B. Haploidie der Geschlechtszellen, Polyploidie mancher differenzierter Zellen.
Chromosomen knnen sich auch durch ihr ueres unterscheiden: Klassifizierung der Chromosomen
nach Lage des Centromers in metazentrisch, sub-metazentrisch, sub-telozentrisch und telozentrisch.

Parasitische/egoistische DNA-Elemente wie konstitutives Heterochromatin und B-Chromosomen


tragen ebenfalls zur Variabilitt der Karyotypen bei. Transposons haben dagegen keinen Einfluss auf
den Karyotyp.

Konstitutives Heterochromatin
- besteht auf DNA-Ebene hauptschlich aus degenerierten Retrotransposon-Sequenzen und/oder
simplen Tandem-Repeats.
- ist arm an Genen, sehr spt replizierend und assoziiert mit methyliertem Histon H3, welches eine
Reihe Heterochromatin-spezifischer Proteine bindet. Die Bildung des Heterochromatins ist epigene-
tisch determiniert.
- ist eine cytologisch sichtbare, genetisch weitgehend inaktive Chromatin-Komponente.
- ist berkondensiert und erscheint als Bnder entlang der Chromosomen mit artspezifischem Mus-
ter
- zu unterscheiden vom fakultativen Heterochromatin: zeitweilige Inaktivierung von ganzen Chro-
mosomen oder Chromosomenabschnitten durch Heterochromatisierung (z.B. das inaktive weibliche
X = fakultatives Heterochromatin) konstitutives Heterochromatin ist eine Substanz, fakultatives
Heterochromatin ist ein Zustand.

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B-Chromosomen
- extreme Form von genomischen Parasitismus.
- tragen kaum Gene, auer (wahrscheinlich) solchen, die ihren Bestand in einer Population sichern.
- in manchen Populationen sind (fast) alle Individuen betroffen, andere sind gnzlich frei; in Pflanzen
hufiger zu finden als bei Tieren.
- sie treten manchmal zustzlich zum normalen Karyotyp auf.
- durch ihre gerichtete Segregation in der weiblichen Meiose reichern sie sich in den Eizellen und den
Spermakernen an und somit in den Zygoten, was fr ihre Vermehrung in der Population sorgt.

Mutationen

Mutationen sind ein Grundphnomen lebender Systeme. Auf Ebene des Einzelindividuums oft mit
negativen Folgen, sind sie fr die Evolution von Organismen unentbehrlich. Insbesondere Chromo-
somenmutationen sind als Kreuzungsbarrieren (Individuen mit zwei unterschiedlich organisierten
Chromosomenstzen sind steril) von Bedeutung fr die Artentstehung.
Der Karyotyp des Menschen unterscheidet sich durch multiple Translokationen und Inversionen von
dem des Schimpansen. Der Unterschied liegt also hauptschlich in seiner chromosomalen Organisa-
tion und nicht in der DNA-Sequenz, die zu 98,8% gleich ist.

1. Genmutationen, inklusive Punktmutationen: Entstehen durch Replikationsfehler und Schdigung


einzelner Basen. Fhren zu nderungen der molekularen Architektur eines einzelnen Gens.

2. Chromosomenmutationen: Entstehen durch Fehler bei der Rekombination und der Reparatur von
Doppelstrangbrchen. Fhren zu Vernderungen der Chromosomenstruktur und manchmal der
Chromosomenzahl (Duplikation, Deletion, Inversion, Translokation).

Duplikation Deletion

- Spiegelbildliche Duplikation eines Armes fhrt zur Bildung von Isochromosomen.


- Deletion durch intrachromosomale Rekombination: Crossover zwischen hnlichen Sequenzen auf
demselben Chromosom, es entsteht ein Ringchromosom aus einem Stck, das dem restlichen Chro-
mosom dann fehlt. Problematisch wird es vor allem, wenn das Centromer in das Ringchromosom
bertragen wird, da die Ringe in der Meiose nicht stabil sind und fragmentieren.

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- Inversionen: Bereiche des Chromosoms werden miteinander vertauscht. Bei der perizentrischen
Inversion werden intrachromosomal zwei Bereiche ausgetauscht, wobei das Centromer in einem
davon liegt. Man kann diese Form der Inversion also daran erkennen, dass das Centromer seine Posi-
tion im Chromosom gendert hat. Bei der parazentrischen Inversion sind zwei intrachromosomale
Bereiche betroffen, die das Centromer nicht einschlieen, wodurch die Inversion weniger offensicht-
lich ist.
- Translokationschromosomen liegen in Diploiden meist zusammen mit den unvernderten Chromo-
somen des anderen Satzes (heterozygot) vor. Man spricht von einer balancierten, reziproken
Translokation, wenn es nicht zum Verlust bzw. Zugewinn von Chromosomenstcken gekommen ist,
sie kann zu Problemen in der Meiose fhren (es entsteht ein Translokationsquadrivalent, wenn die
Schwesterchromatiden sowohl untereinander, als auch mit den homologen Teilen des anderen
Chromosoms paaren die Chromosomen knnen sich bei der meiotischen Teilung unterschiedlich
orientieren und segregieren 3:1 / 2:2 Konfiguration teilweise Trisomie oder teilweise Deletio-
nen).

- Robertsonsche Fusion/Fission: eine Form der Translokation, bei der


Austausche in Centromer-Nhe stattfinden. Dies fhrt zur Vernderung
der Chromosomenzahl.
Beispiel: Reduktion der Chromosomenzahl durch multiple
Robertsonsche Fusionen innerhalb eines kurzen evolutionren Zeit-
raumes in der Gattung der Zwerghirsche (Muntjak) von 2n=46 auf
2n=6(female) / 7(male).
Mgliche Erklrung: der Muntjak wollte seinen Karyotyp verkleinern,
um die Rekombinationsrate zu verringern und dadurch grere geneti-
sche Stabilitt zu erreichen.

Folgen von Strukturheterozygotie aufgrund von Chromosomenmutationen in der Meiose

- Paarungslcke: die zwei Chromosomen unterscheiden sich, da in einem eine chromosomale Muta-
tion vorgekommen ist. Es entsteht eine Paarungslcke, in der die Rekombination stark herabgesetzt
ist. Dies fhrt zur erhhten Kopplung von Genen in diesem Bereich.
- Inversionsschleife: Ein Stck des Chromosoms liegt durch eine Inversion in die andere Richtung
orientiert. Es bildet sich in dem einen Chromosom eine Schleife, sodass die homologen Paarungsbe-
reiche wieder aufeinander passen. Findet whrend der Bildung einer parazentrischen Inversions-
schleife (Centromer auerhalb der Schleife) ein Crossover statt, erhlt nur ein Teil der Gameten ei-
nen vollstndigen Satz an Genen, die Fertilitt ist vermindert. Individuen mit mehreren strukturhe-

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terozygoten Chromosomen sind nahezu vollstndig steril. Bei einem Crossover in einer perizentri-
schen Inversionsschleife (Centromer innerhalb der Schleife) sind die Folgen hnlich.
- Sympatrische Artbildung im Gebiet der Ursprungsart mglich, wenn sich Nachkommen mit einer
aufgrund von Chromosomenmutationen verschiedenen Chromosomenanordnung untereinander
paaren.
- Sterilitt von Hybriden als Kreuzungsbarriere, entstanden durch multiple chromosomale Umbau-
ten.

3. Genommutationen: Vernderungen der Chromosomenzahl, sind fr die Evolution bedeutsam,


denn sie bedeuten eine Verdopplung einer groen Zahl von Genen. Diese zustzlichen Gene knnen
anschlieend mutieren, was zu der Entstehung neuer Gene fhrt.
- Aneuploidien: einzelne Chromosomen sind zustzlich vorhanden oder fehlen (Trisomie, Tetraso-
mie); sie entstehen meist durch die Fehlverteilung einzelner Chromosomen in der Mitose oder Meio-
se. Erst bildet sich eine disome Geschlechtszelle, die nach der Befruchtung zu einer trisomen Zygote
wird. Bei Pflanzen wirken sich Aneuploidien nicht so offensichtlich nachteilig aus wie bei Sugetieren.
- Polyploidien: der ganze Chromosomensatz ist vervielfacht (Triploidie, Tetraploidie), hat also mehr
als den zweifachen Chromosomensatz. Poliploide Individuen entsteht oft durch den Ausfall oder den
Abbruch der Meiose, wodurch diploide Gameten gebildet werden. Polyploide Zellen und Gewebe
entstehen durch aufeinanderfolgende Replikationszyklen bei gleichzeitigem Ausfall von Mitosen.
- Autoploidisierung: Verdopplung der Chromosomen innerhalb einer Art durch einen Fehler bei der
Zellteilung fhrt zu Individuum mit Zellen mit mehr als zwei gleichen Chromosomenstzen. Selbst bei
der Bildung von diploiden Gameten fhrt die Paarung mit einem Individuum mit haploiden Gameten
zu triploiden, sterilen Nachkommen. Jedoch kann die Befruchtung durch einen ebenfalls unreduzier-
ten Gameten einer anderen Art zu fertilen, tetraploiden Nachkommen und in weiterer Folge zur Bil-
dung einer neuen Art fhren.
- Alloploidisierung: Verdopplung von Chromosomenstzen aus verschiedenen Arten. Ein Hybrid mit
zwei verschiedenen Chromosomenstzen erfhrt Polyploidisierung durch fehlerhafte Mitose,
dadurch erlangt jedes einzelne Chromosom einen passenden Partner, der Hyrid wird fertil und kann
nun die Meiose durchfhren es entstehen haploide Gameten. Wenn sich zwei solcher Gameten be-
fruchten, kann eine neue polyploide Art entstehen.
Viele heutige Pflanzenarten sind durch Alloploidie bzw. Autoploidie entstanden, Polyploidisierungen
spielten eine groe Rolle in der Evolution und bei der Entstehung von Kulturformen.

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SS16 Alwine Hildebrandt

Die Rolle der Chromosomen- und Genom-Mutationen in der Evolution: Zusammenfassung

- Duplikationen ermglichen das Entstehen neuer Gene durch die Mutation einer Kopie, bei Beibe-
haltung der Funktion der anderen.
- Chromosomale Strukturvernderungen fhren zur Hybridsterilitt und damit zur sympatrischen
Artbildung.
- Allopolyploidisierung ermglicht die berwindung der Hybridsterilitt, indem jedes Chromosom
einen identischen Paarungspartner bekommt.

6. Humancytogenetik und (erbliche) chromosomale Defekte

Chromosomen knnen am besten unter dem Fluoreszenzmikroskop beobachtet werden. Bei Zugabe
bestimmter Fluoreszenzmittel werden Bnder sichtbar, die eine Unterscheidung zwischen den ein-
zelnen Chromosomenpaaren mglich machen. Durch Einbau von BrdU (Bromdesoxyuridin) sind G-
und R-Bnder zu erkennen (G=Giemsa, R=Revers, nicht gefrbt). R-Banden enthalten berdurch-
schnittlich viele Gene, sind AT-reich und werden whrend der Replikation der Chromosomen frh
verdoppelt. G-Banden sind genarm, GC-reich und sie werden eher spt repliziert.
Durch Erstellung eines standardisierten G-Band Karyogramms des Menschen knnen Chromosomen-
strukturmutationen durch einen einfachen Buchstaben-/Zahlencode beschrieben werden.

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SS16 Alwine Hildebrandt

Fluoreszenz in situ Hybridisierung (FISH)


Das Chromosomenprparat wird mit RNasen und Proteasen vorbehandelt, es kommt zur DNA Dena-
turierung, sodass die Einzelstrnge vorliegen. Diese werden dann mit einer Sonde hybridisiert, die
zuvor mit einem Fluoreszenzfarbstoff behandelt und ebenfalls denaturiert worden ist. Wenn die
Sonde ein passendes Gegenstck in der Probe findet, basenpaart sie damit und kann ber die Fluo-
reszenz detektiert werden.
Der Vorteil der FISH ist, dass der Nachweis in situ, also noch in der Zelle erfolgt, und nicht wie bei den
meisten Methoden in vitro. Auerdem knnen Aneuploidien in Interphasekernen festgestellt wer-
den, es ist also nicht notwendig, erst eine Zellteilung zu induzieren, was das Verfahren beschleunigt.

Chromosomenanomalien sind die Ursache von 50% aller Fehlgeburten. Eine prnatale Diagnose kann
durch Amniocentese (Fruchtwasseruntersuchung) oder Chorionzotten-Biopsie (Auslufer der Plazen-
ta) durchgefhrt werden. Die Hufigkeit von Trisomien ist stark abhngig vom
Alter der Mutter, ab 35 Jahren steigt die Wahrscheinlichkeit stark an. Numeri-
sche Chromosomenanomalien sind eine Zivilisationskrankheit bedingt durch
zunehmendes Alter bei der Familiengrndung in entwickelten Lndern.

Trisomie 21: Das Chromosom 21 liegt in dreifacher statt doppelter Ausfhrung


vor. Diese Form der Trisomie tritt am hufigsten auf, weil das Chromosom 21
klein ist und relativ wenig Gene hat, daher ist sie lebensfhigsten ist. Sie ent-
spricht der Trisomie 22 beim Schimpansen.
Auerdem gibt es noch Trisomie 13 (Paetau-Syndrom) und Trisomie 18
(Edwards-Syndrom). Auch diese Chromosomen sind arm an Genen.

Translokations-Trisomie: Ein Stck eines (meist kleineren) Chromosoms wird


durch Translokation whrend der Meiose auf ein anderes Chromosom bertra-
gen. Es entsteht ein disomer Gamet, der eine zu lange Chromatide hat. Dieses
hat whrend der Befruchtung Probleme, sein Homologes zu erkennen, was zu
verminderter Paarung und fehlerhafter Segretation fhrt.
Im Gegensatz dazu liegt bei der Freien Trisomie ein ganzes Chromosom doppelt
vor.

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Ursachen fr die Enstehung von Aneuploidien

Die wahrscheinlichste Ursache ist eine verminderte Kohsion der Schwesterchromatiden. Der Zellzyk-
lus wird angehalten bei falsch orientierten Bivalenten, aber nicht bei dem Verlust von Cohsinen. Der
Verlust der Bivalent-Bildung, gepaart mit einem geschwchten Spindel-Checkpoint, kommt hufiger
vor bei Oocyten in einem hheren Alter. Der Checkpoint ist also abhngig von der Kohsion.
Auch eine extrem centromerferne oder centromernahe Position des Chiasma birgt ein erhhtes Risi-
ko fr Fehlverteilung, besonders bei geschwchter Kohsion.

7. Tumercytogenetik

Aberrante Chromosomen als Auslser und Folge von Tumorwachstum

Krebs kann ausgelst werden durch chromosomale Umbauten, durch die Fusionsgene oder neue
Kombinationen von Promotoren und Zellzyklusregulatorgenen entstehen, die die Zellen zur stndi-
gen Proliferation stimulieren. Die ursprnglichen Gene nennt man Protoonkogene, da sie das Po-
tential haben, durch Mutation zu Onkogenen umgewandelt zu werden.
Ebenso knnen Tumorsuppressorgene, die eine Funktion in der Kontrolle des Zellzyklus haben, durch
chromosomale Umbauten disruptiert (zerrissen) werden, wodurch es ebenfalls zur unkontrollier-
ten Proliferation kommen kann.
Durch einen Second Hit kann es in solchen Zellpopulationen zur konstitutiven Aktivierung der
Telomerase kommen. Die Telomerase muss bei einem Tumor stndig aktiv bleiben, sonst gehen der
Zelle die Telomere aus, die Chromosomen werden immer krzer und irgendwann stirbt sie ab. Durch
das unregulierte Wachstum (fehlerhafte Checkpoint Kontrollen) von Tumoren knnen sich aberrante
Chromosomen in Tumoren anhufen. Der Karyotyp einer Tumorzelle kann wegen der unkontrollier-
ten Teilungen stark degenerieren, die Chromosomenzahl verndert sich stark, ebenso wie auch die
Gre.

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Tumorzellen aufgrund von Translokation


Das berhmteste Beispiel einer Translokation, durch die ein Tumor entstehen kann, ist das Philadel-
phia Chromosom, welches charakteristisch fr die chronische myeloische Leukmie ist. Durch den
reziproken Austausch von Chromosomenabschnitten zwischen Chromosom 9 und 22 entstehen zwei
Fusionschromosomen, das kleinere wird als das Philadelphia Chromosom bezeichnet.
Am normalen Chromosom 9 liegt das C-ABL Gen: es codiert im Normalfall fr eine Proteinkinase, die
eine Rolle beim Transfer von Wachstumsfaktor-Signalen aus dem Gewebe in den Nukleus spielt. Am
normalen Chromosom 22 liegt das BCR Gen.
Durch die Translokation entsteht als Produkt das chimrische BCR-ABL Protein, ebenfalls eine Tyro-
sinkinase, die konstitutiv aktiv ist und als ein abnormales Signal-Transduktionsmolekl die Zellen zur
stndigen Proliferation stimuliert.
Eine hnliche Situation besteht bei Burkitt-Lymphomen. C-myc auf Chromosom 8 codiert fr ein
unspezifisches Transkription-verstrkendes Protein. Bei Translokationen des c-myc Locus an Loci fr
Immunglobulin Gene an den Chromosomen 2, 14 oder 22 gert das c-myc Gen unter den Einfluss von
Immunglobulin-Enhancern und Promotoren. Die dadurch erhhte Expression von c-myc kann Krebs
verursachen.

Chromothripsis: Ein einmaliges Ereignis, ausgelst durch radioaktive Strahlung oder hnliche Eingrif-
fe in die Zelle, fhrt in der Mitose, wenn die Chromosomen in kondensierter Form vorliegen, zu einer
massiven Zerstrung der Chromosomenstruktur. Anders als erwartet sterben von den betroffenen
Zellen scheinbar nicht alle durch Apoptose, einige berleben durch Mechanismen der DNA-
Reparatur, die die Chromosomen teilweise wieder zusammensetzen. Dabei kommt es durch eine
Vielzahl an Deletionen, Duplikationen, Inversionen sowie Translokationen zur Verschmelzung von
zuvor nicht benachbarten Chromosomenabschnitten. Als Folge dieser Vernderungen, die durch
Zellteilung weitervererbt werden, geht die Funktion von Tumorsuppressorgenen verloren. Die ent-
standenen entarteten Zellen haben unbegrenztes Wachstum und verfgen ber keine Kontrollme-
chanismen mehr.
Ein anderes Modell zur Entstehung von Chromothripsis geht von einer Fehlverteilung der Chromo-
somen in der Mitose aus, eine unverteilte Chromatide schliet sich in der Telophase oft in einen se-
paraten Micronucleus ein. Da die Replikation im Micronucleus oft fehlerhaft oder unvollstndig ist,
wird das Chromosom darin zerstckelt. Wenn der Micronucleus mit dem Zellkern wieder verschmilzt,
werden die Fragmente in falscher Reihenfolge und Orientierung wieder zusammengebaut, es ent-
steht eine entartete Zelle. Genauso gut kann es sein, dass die Zelle an verschiedenen Stadien des
Prozesses stirbt, weil ein Chromosom fehlt bzw. keine funktionierende Kopie vorhanden ist.

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Double Minutes (DMs) und Homogeneously Staining Regions (HSRs) sind cytologische Marker
mancher Tumore. Sie entstehen durch selektive Amplifikation mancher Gene (z.B. MYCN und
MDM2), die das Wachstum dieser Zellen begnstigen oder ihnen Resistenz gegen die Behandlung mit
Tumor-Repressoren verleihen.
DMs sind amplifizierte Gene, die aus dem Chromosomenverband herausgebrochen sind und nun als
einzelne Gene vorliegen. Sie haben selbst keine Centromere, werden aber in der Zellteilung trotzdem
in die Tochterkerne mitgenommen, da sie an der Oberflche der normalen Chromosomen haften.
HSRs sind hnlich, aber sind nicht aus dem Chromosom herausgelst, sondern befinden sich als
amplifizierte Gene im Chromosom.

Diagnostik chromosomaler Abnomalien in Tumoren durch Comparative Genomic Hybridisation (CGH)

Die Diagnostik ist schwierig aber wichtig, weil sie unter Umstnden eine Prognose ergeben kann und
dann eine Einschtzung bezglich Behandelbarkeit im Vergleich mit frheren Fllen mglich macht.
Eine Methode ist Comparative Genomic Hybridisation (CGH). Damit kann man einen Tumorkaryotyp
erstellen, ohne die Zelle zu sehen. Man entnimmt dem Tumor DNA und hybridisiert sie mit normalen
menschlichen Chromosomen zum Vergleich. Da man nicht die Chromosomen aus dem Tumor
braucht, ist die Methode relativ leicht anzuwenden.
Auf manchen Chromosomen ist die Tumor-DNA im berschuss vorhanden, was durch farbliche Mar-
kierung ersichtlich ist. Dies deutet darauf hin, dass die DNA des betroffenen Chromosoms im Tumor
strker vorhanden ist. Auch wenn von einem Chromosom besonders wenig DNA im Tumor vorhan-
den ist, zeigt CGH dies auf.

8. Organisation der Chromosomen im Interphasekern

- Chromosomenindivitualitt: Carl Rabl zeigte 1885, dass die


Gene auch in der Interphase, wo die Chromosomen aufgelo-
ckert und nicht-kondensiert vorliegen, auf Chromosomen auf-
gefdelt bleiben und dass diese eine geordnete Orientierung
einnehmen.
- Rabl-Orientierung: Als Folge der Orientierung der Chromoso-
menarme in der Anaphase liegen die Chromosomen mit den
Centromeren an einem Pol und an den Telomeren im gegen-
berliegenden Bereich des Interphase-Kerns.
- Chromosomendomnen /-territorien: innerhalb der Domnen
ist das Chromatin nicht zufllig angeordnet; es gibt Bereiche der
frhen und der spten Replikation. Zwischen den Domnen
finden sich interchromosomale Domnen (Kanle), die unterei-
nander und mit den Kernporen in Verbindung stehen und of-
fenbar fr den Stofftransport im Kern sorgen.

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- Intra- und interchromosomale Chromatin-Interaktionen: Die Faltung des Chromatins und funktio-
nelle Wechselwirkungen zwischen verschiedenen Loci innerhalb eines Chromosoms, aber auch ber
Interaktionen zwischen Chromosomen spielen eine Rolle zum Beispiel bei der funktionellen Kompar-
timentierung des Zellkerns in Zentren, wo Transkription, Replikation oder DNA-Reparatur stattfin-
den. Gewisse Prozesse im Kern sind also auf einige Stellen (factories) konzentriert. Chromosomale
Loci, an denen diese Prozesse aktuell erfolgen, versammeln sich dort.Um dies zu koordinieren und
effizient zu nutzen, mssen die Chromosomen untereinander in Kontakt stehen. Besonders starke
Interaktionen bestehen zwischen den Centromer-Regionen.
Durch die 4C-Technik (Chromosome Conformation Capure on Chip), ein lichtmikroskopisches Ver-
fahren, konnten diese Informationen festgestellt werden. Auerdem liefert die Methode Informatio-
nen ber die Faltung des Chromatins und funktionelle Wechselwirkungen zwischen verschiedenen
Loci innerhalb eines Chromosoms, aber auch ber Interaktionen zwischen verschiedenen Chromo-
somen.
Ablauf: Als erstes wird die DNA-Probe gecrosslinked, wodurch miteinander agierende DNA-
Abschnitte zusammengehalten werden. Dann werden die Stcke durch Restriktion gekrzt und zwei
der vier Enden jeweils miteinander ligiert. So werden aus jeweils zwei Strngen einer. Schlielich
erhlt man ein zirkulres DNA-Molekl, das aus zwei DNA-Strngen besteht.
Um die Sequenz von dem einen Strang zu ermitteln, erzeugt man Primer fr die bekannte Sequenz
des anderen Stranges und fhrt eine PCR durch. Anschlieend kann man die erhaltenen Einzelstrnge
auf ein Microarray auftragen.

Transcription Factories: enthalten primre Transkripte und RNA Polymerase II. Anscheinend wan-
dern Gene zu bereits existierenden Transkriptionsstellen, anstatt Transkriptionskomplexe selbst zu
rekrutieren und zusammenzubauen. Mehrere Gene, auch solche von verschiedenen Chromosomen,
teilen sich eine Transkription Factory.
Replication Factories: Bei Bakterien war schon lnger klar, dass nicht die Replikationsgabel am
Chromosom entlang wandert, sondern sich umgekehrt die DNA an der Replication Factory vorbeibe-
wegt.
Repair Centers: Doppelstrangbrche versammeln sich dort zur Reparatur, dort ist das Reparaturpro-
tein Rad52 zusammen mit Site Markers fr DSBs kolokalisiert.
Transkribierte und genreiche Chromosomenbereiche, sowie Chromosomenbnder liegen bevorzugt
im Kerninneren, inaktive Bereiche eher an der Peripherie. Unabhngig davon liegen kleinere Chro-
mosomen eher im Kerninneren und grere eher an der Periphierie.

Chromosomenorganisation im Interphasekern: Zusammenfassung

- Die Anordnung der Chromosomen im Zellkern ist nicht fixiert, aber auch nicht zufllig.
- rDNA Regionen (NORs) neigen zum Fusionieren.
- Gen-arme Chromatinbereiche liegen in einer Schicht unterhalb der Kernhlle, whrend Gen-reiches
Chromatin im Kerninneren angereichert ist.
- Gene pendeln zwischen dem Inneren und der Peripherie in Abhngigkeit von ihrem aktiven oder
inaktiven Status.

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9. Chromosomen und Reproduktion; Chromosomale Geschlechtsbestimmung

Die geschlechtliche Fortpflanzung ist kausal mit der genetischen Rekombination, der Multiallelie
(verschiedene Ausprgungsformen eines Gens in einem (in der Regel) diploiden Genom) und dem
damit verbundenen Heterosiseffekt (aufgrund der verschiedenen Allele eines Gens hat das heterozy-
gote Individuum hat einen Vorteil gegenber dem homozygotem) verknpft. Zwei Partner steuern
ihre haploiden Genome (in Form der Keimzellen) zu einem gemischten diploiden Genom der Nach-
kommen bei.
Apomiktische Population: ungeschlechtliche Fortpflanzung ohne Meiose und ohne Verschmelzung
von Gameten, bei der die Nachkommen mit der Vorgngergeneration (nur ein Individuum ntig)
identisch sind.
Sexuelle Population: ist ineffizient, da sie einen Geschlechtspartner finden mssen, um berhaupt
Nachkommen kriegen zu knnen, und dann sind diese im Schnitt zur Hlfte mnnlich und knnen
selber keine Nachkommen kriegen, also nicht zum Wachstum der Population beitragen.

Genetische Geschlechtsbestimmung

Haplogenotypisch: Der haploide Gametophyt trgt eines der beiden Geschlechtschromosomen, des-
sen Merkmale exprimiert werden, die diploide Generation dagegen ist einheitlich. Dies kommt hufig
bei Algen, Einzellern und Moosen vor. Es besteht die Gefahr der Selbstbefruchtung.
Diplogenotypisch: Der Phnotyp der haploiden Generation ist unabhngig vom Genotyp, es kann
also auch Spermien geben, die ein X-Chromosom tragen (beim Menschen). Die diploide Generation
zeigt unterschiedliche Geschlechtsmerkmale.
Beim Schnabeltier und anderen sind die Gene fr Geschlechtsmerkmale auf mehrere Chromosomen
verteilt. Heuschrecken haben ein XX/X0 System, wo Weibchen XX Chromosome haben und Mnn-
chen nur ein X.

Beim Menschen ist ein Gen auf dem Y-Chromosom der domi-
nante Faktor fr die Geschlechtsbestimmung, es ist also aus-
schlaggebend, ob ein Y-Chromosom vorhanden ist oder nicht.
Das Y Chromosom induziert die Bildung der Testes und damit
die Geschlechtsentwicklung (genauer gesagt TDF-Locus Testes
determining factor). Wenn das Y fehlt, entwickeln sich die
mnnlichen Gonaden zu Ovarien und die Entwicklung zur Frau
findet statt.
Entdeckt hat man dies durch Deletionskartierungen. Hete-
rochromatin ist unwichtig, da dort keine Gene codiert sind.
Mnner, die ein in diesem Bereich verkrztes Y Chromosom
haben, haben kein Problem.
- Die Pseudoautosomale Region trgt keine geschlechtsspezifi-
schen Gene. In diesem Bereich liegt das obligatorische Crosso-
ver, notwendig fr die ordnungsgeme Verteilung von X und Y
in der Meiose I.

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- TDF ist das hauptschliche Gen, das fr die Ausbildung der sekundren Geschlechtsmerkmale zu-
stndig ist.
- Mnner, denen der Bereich 6 fehlt, sind steril.
- Wenn der 2. Teil fehlt, ist der Phnotyp weiblich.
- Auch mglich: Mnner mit XX Chromosomen, wo das TDF/SRY Stck aber auf einem der X Chromo-
somen liegt.

XY-Synapsis in der Meiose


In der Meiose paaren X und Y Chromosom miteinander. Da sie nicht homolog miteinander sind und
ganz unterschiedliche Gene tragen, findet die Rekombination nur im Bereich der Pseudoautosomalen
Region (PAR) statt. Die Paarung (Synapsis) kann vllig erratisch (verirrt) sein, aber auch ber die PAR
hinausgehen und das gesamte Y einbeziehen. Jeder Bereich des X-Chromosoms (ist deutlich lnger
als das Y-Chromosom), der kein homolog hat, versucht manchmal, mit sich selbst zu paaren (Haarna-
del-Strukturen).
Die weitgehende Unterdrckung der Rekombination zwischen X und Y fhrte zu ihrer morphologi-
schen und genetischen Differenzierung, und damit einhergehend, zum Verlust von Genen auf dem Y.

Das XY Bivalent ist im Sex Body eingebettet, dort manifestiert sich die meiotische Inaktivierung der
Geschlechtschromosomen. Im Sex Body werden die Geschlechtschromosomen transkriptorisch inak-
tiviert und die ungepaarten Bereiche des X Chromosoms maskiert.
Es gibt in der Meiose auch einen Paarungs-Checkpoint, wo berprft wird, ob jedes homologe Chro-
mosom seinen Partner gefunden hat. Beim Weibchen ist das kein Problem, da die X Chromosome
sowieso zusammenpassen. Beim Mnnchen gibt es allerdings stets einen ungepaarten Bereich am X,
weil das Y krzer ist. Um zu verhindern, dass durch diesen ungepaarten Bereich die Meiose am Paa-
rungs-Checkpoint abgebrochen wird, wird der ungepaarte Teil des X im Sex Body abgeschottet. Die
Geschlechtschromosomen werden dort transkriptorisch inaktiviert wenn bestimmte Teile am Y
whrend der Meiose aktiv wren, wrden sie whrend der Meiose zur Apoptose fhren.
Aus hnlichen Grnden sind mnnliche Individuen mit Trisomie 21 steril das dritte 21 hat keinen
homologen Partner.

Als Konsequenz der XY Heterozygotie bei Mnnern und der Verarmung des Y an Genen, die wohl
eine Konsequenz von der Rekombinationsbarriere zwischen X und Y ist, sind Mnner hufiger von X-
chromosomal gebundenen rezessiven Defekten betroffen. Frauen haben dagegen noch ein gesundes
X-Chromosom und sind daher meistens nur Trger. Der Sohn allerdings hat eine 50% Chance, die
Erkrankung zu bekommen.
Am Y Chromosom haben alle Gene mit der Geschlechtsbestimmung zu tun. Es gibt am Y ca. 25 Pro-
tein-codierende Gene, und ca. 30 Gene, denen man ansieht, dass sie einmal funktionelle Gene waren
und homologe am X haben, die aber nicht mehr funktionell sind.
Warum ist es das Y, das Gene verloren hat(knnte ja auch X sein)? Das X kommt bei Frauen doppelt
vor, es kann also einen Genverlust kompensieren. Das Y Chromosom liegt dagegen alleine vor, wenn
ein Gen verloren geht, kann es nicht ersetzt werden.
Kann das Y gnzlich verloren gehen? Beim Menschen theoretisch ja, wird aber noch etwas dauern
(wre Umstieg auf X/0 System). Bei Drosophila ist das Y-Chromosom nicht dominant bezglich der
Geschlechtsbestimmung.

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Polygenetische Geschlechtsbestimmung
Beispiel Afrikanische Zwergmaus: Der W Locus ist dominant ber den Mnnchen-
determinierenden Faktor auf dem Y-Chromosom, wenn also W und Y zusammenliegen, wird es ein
Weibchen. Dadurch entsteht ein fr diese Spezies vorteilhaftes 3:1 Verhltnis

Sex Reversal Syndromes


- Testikulre Feminisierung (Androgen Insensivity Syndrome). 46 Chromosomen mit XY, steriler
weiblicher Phnotyp.
Es besteht eine rezessive Mutation des X-Chromosomalen AR-Locus. Es wird kein zellulrer Rezeptor
fr Testosteron und verwandte Androgene gebildet, Testes existieren zwar, aber an Stelle der Eizel-
len im Bauch. Die Zellen glauben, in einem testosteronfreien Umfeld aufzuwachsen, da es keine zellu-
lren Rezeptoren gibt, die das Testosteron erkennen. Diese Frauen haben einen besonders stark aus-
geprgten Phnotyp und keine sekundre Krperbehaarung.

- XX Maleness: 46 Chromosomen mit XX, steriler mnnlicher Phnotyp.


Mnner z.T. komplett maskulinisiert durch viel Testosteron. Wenig Flle bekannt.

Aneuploidien von Geschlechtschromosomen


X0-Frau (Turner Syndrome, normale geistige Entwicklung); XXY-Mann (Klinefelter-Syndrom). Be-
troffene sind infertil. Die ueren Phnotypen der Syndrome sind vergleichsweise mild, z.B. im Ver-
gleich zu Trisomie 21. Es existieren auch andere Aneuploidien (XXX, 4X, XXYY, etc.).
Mit zunehmender Abweichung vom normalen Chromosomensatz kommt es zu geistiger Behinde-
rung. XXX ist eingeschrnkt fertil, 4X ist nicht mehr fertil. Solche Flle sind meistens Resultate einer
Fehlentwicklung whrend der Embryonalentwicklung, da eine Fehlverteilung beim Vater UND bei der
Mutter viel zu unwahrscheinlich wre.

X-chromosomale Dosiskompensation
Die X-Inaktivierung erfolgt, damit Frauen nicht doppelt so viele X-chromosomale Genprodukte haben
wie Mnner. Somit ist bei beiden Geschlechtern das Verhltnis der X-chromosomalen zur autosoma-
len (=nicht-Geschlechtschromosomen) Gendosis gleich balanciert. Sichtbar sind diese inaktivierten X-
Chromosomen als Barr-Krperchen: eine dunkle Stelle im Zellkern, hyperkonserviert (heterochroma-
tisch) und spt replizierend. X0-Frauen haben keine Barr-Krperchen.
Es handelt sich dabei um Zufall, welches der beiden X-Chromosomen inaktiviert wird. Die Ausbrei-
tung der X-Inaktivierung geschieht in cis, ausgehend vom X-Inactivation-Center durch Xist RNA
(strukturelle RNA, die transkribiert, aber nicht aus dem Zellkern zur Translation exportiert wird. Sie
bleibt an der Transkriptionsstelle als Markierung am X Chromosom liegen, woraufhin das Chromo-
som abgeschaltet wird).
15% der Gene des X Chromosoms bleiben ausgeschlossen, darunter die PAR und das Heterochroma-
tin, dort legt die Xist RNA (X Inactive Specific Transcript) nicht an. Das Signal zur Inaktivierung geht
dabei vom aktiv bleibenden X aus und wird bertragen im Zuge des vorbergehenden Kontakts der
beiden X-Inactivation-Center.

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10. Spezialisierte Chromosomen und besondere Anpassungen im Chromosomenverhalten

- Polytnchomosomen (Riesenchromosomen): entstehen als


eine Form der Polyploidie. Wenn sich neu synthetisierte DNA-
Molekle (Chromatiden) nicht auf die Tochterkerne aufteilen,
werden die Kerne polyploid. Polytnie ist ein Spezialfall der
Polyploidie, bei dem die neu synthetisierten Chromatiden an-
einander haften bleiben. Nach den Replikationszyklen verkr-
zen sich die Molekle nicht und die Chromatiden weichen
auch nicht voneinander.
Die Bnder der Polytnchromosomen bei Drosophila begns-
tigten die Erstellung einer genetischen Karte (Speicheldrsen bei Drosophila haben polytne Chro-
mosomen). Sie haben die Interphasenlnge, und dadurch dass die die Kondensation ausbleibt, er-
reicht man eine sehr hohe Auflsung.
In den Riesenchromosomen sind sog. Puffs erkennbar, es handelt sich um aufgelockertes Chromatin,
wo hohe Transkriptionsaktivitt herrscht.
Polytnchromosomen gibt es in Dipteren-Larven, Embryosuspensoren von Pflanzen und den
Macronuclei mancher Ciliaten. Ihre Bildung geht wahrscheinlich einher mit der Erfordernis von Zellen
mit hoher Transkriptionsaktivitt. Teilung wrde die Phasen der Transkription unterbrechen. Man
findet solche Chromosomen in besonders aktivem Gewebe, das durchgehend besonders produktiv
sein muss.
Normalerweise kommt die homologe Paarung von Chromosomen nur whrend der Zellteilung vor.
Die Polytnchromosomen von Dipteren-Larven paaren sich auch whrend der Interphase, in diesem
Fall spricht man von somatischer (vegetativer) Paarung. Vorteile eines angelagerten homologen
Chromosoms: erlaubt Promoter Sharing, ermglicht Rekombinations-Reparatur in G1, erleichtert
Homologensuche in der Meiose durch Vorsortierung. Somatische Paarung wurde bei den unter-
schiedlichsten Arten beobachtet.
- Lampenbrstenchromosomen (bzw. bivalente): Eine Transkription ntiger Proteine
fr die Fertigstellung der Eizellen ist notwendig whrend der Meiose in den Oocyten
von Vgeln und Amphibien. Als Kompromiss zwischen der erforderlichen Chromoso-
menkondensation und der Erhaltung einer hohen Transkriptionsaktivitt in der Propha-
se der weiblichen Meiose werden die homologen Chromosomen durch Chiasmen ver-
bunden, und Teile stehen in Form vom Schleifen aufgelst weg, um die Transkription
zu ermglichen.
- holozentrische/polyzentrische Chromosomen: bei holozentrischen Chromosomen
erstreckt sich das Kinetochor ber die gesamte Chromoeomenlnge, beobachtet
wurden sie bei manchen Ciliaten, Nematoden etc., unter anderem auch bei
C.elegans. In der Mitose ist das kein Problem, wohl aber in der Meiose, da Bivalente
mit Chiasmen nicht durch eine holokinetische Spindel getrennt werden knnen.
Daher gibt es zwei Mglichkeiten der Meiose in holozentrischen Organismen:
1. lokalisierte Kinetochore (C.elegans): Die Spindelfasern setzen an den Chiasma-
fernen Enden der Chromosomen an.
2. invertierte Meiose (Luzula): Meiose 1 und 2 werden umgekehrt, zuerst werden
die Schwesterchromatiden getrennt, dann die homologen Chromosomen.

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- Minimierung unerwnschter Rekombination: Vermeidung bzw. Minimierung genetischer Rekom-


bination zwischen Chromosomenstzen, um den Genbestand nicht zu verndern. Mglichkeiten sind:
1. distal lokalisierte Crossovers/Chiasmen: Rekombination nur an den Enden, wo keine Gene codiert
sind, sondern nur die Telomere liegen.
2. Anpassung der Chromosomenzahl: weniger Chromosomen fhren zu einer verringerten Rekombi-
nationsrate
3. Komplexheterozygotie: keine bivalenten Chromosomenpaare, sondern Multivalente in Zickzack-
organisation (z.B. Geschlechtschromosomen beim Schnabeltier). Ein Multivalent verhlt sich wie ein
einziges Chromosom. Die Crossovers finden ganz nahe an den Chromosomenenden statt, daher bil-
det sich in der Meiose ein groes Ringchiasma. die Gene werden nicht durch Chromosomendurchmi-
schung getrennt und jeder Gamet erhlt einen unrekombinierten Chromosomensatz.

- Chromosomen der Dinoflagellaten: zum Teil sind die Kerne und Chromosomen von Protisten sehr
ungewhnlich, vermutlich sind sie innerhalb der Eukaryoten nicht primitiv, sondern abgeleitet. Die
DNA macht ca. 90% der Masse der Chromosomen aus (statt normal 30%), sie sind whrend des ge-
samten Zellzyklus kondensiert und schraubenfrmig links-gedreht, die Histone sind stark modifiziert.
Mglicherweise sind Dinochromosomen polytn. Es ist inzwischen bekannt, dass sie konventionelle
Telomere haben, also lineare DNA enthalten, was ein frheres Modell von ringfrmigen Chromoso-
men widerlegt.
- Chromosomenfragmentierung und Amitose bei Ciliaten: Bsp. Tetrahymena
Macronucleus (MAC): Das Soma, polyploid, amniotische Teilung (Spaltung) ohne Centromere,
fragmentierte Minichromosomen (jedes davon mit neuen, eigenen Telomeren), keine Meiose, keine
geschlechtliche Vererbung, Replikation entlang des Replikationsbands, transkriptorisch aktiv, so-
matische DNA Elimination: ca. 30% der Keimbahn-DNA (hauptschlich Transposons) werden aus dem
somatischen Kern entfernt
Micronucleus (MIC): Die Keimbahn, diploid, normale Mitosen und Meiose, transkriptorisch inaktiv,
gibt bei der geschlechtlichen Reproduktion sein Erbgut an die nchste Generation weiter.

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