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CLAVE Pre-requisito
FACULTAD DE QUMICA
Laboratorio de Bioqumica
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INGENIERO QUMICO EN ALIMENTOS
MANUAL DE PRCTICAS
SEMESTRE: 5
CLAVE: 653
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NDICE GENERAL
Contenido Pgina
NDICE GENERAL ii
I. INTRODUCCIN iii
II. OBJETIVO x
III. ALCANCE x
IV.1 Prctica 1 3
IV.2 Prctica 2 9
IV.2 Prctica 3 25
IV.2 Prctica 4 36
IV.2 Prctica 5 44
IV.2 Prctica 6 58
IV.2 Prctica 7 67
IV.2 Prctica 8 76
IV.2 Prctica 9 87
ii
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3. La bibliografa consultada tiene que ser actual (de los ltimos 5 aos) e indizada,
siempre indicada entre parntesis con nmeros consecutivos al final de donde se
cita en el texto (ya sea la seccin de introduccin, conocimiento previo, resultados y
discusin), o bien, citando los autores y el ao de publicacin.
Nota: Cualquier informacin, figura, imagen, frmula, entre otros, incluida en la
prctica y no debidamente citada se considerar plagio.
Revista:
El primer apellido del autor (es) e iniciales del nombre o nombres, Punto. Ao, Punto. Ttulo del
artculo, Punto. Nombre completo de la revista, punto. Nmero del volumen con nmeros
arbigos, Dos puntos. Pgina inicial, guin, pgina final, punto.
Ejemplo:
Wu JL., Wu CJ., Lei CL., Baraoidan M., Bordeos A. and Madamba MRS. 2004. Sorghum diversity
evaluated by simple sequence repeat (SSR) markers and phenotypic performance. Plant
Production Science. 7: 301-308.
Captulo o artculo de un libro:
Apellidos del autor (es) del captulo e iniciales del nombre o nombres, Punto. Ao de publicacin,
Punto. Nmero y ttulo del captulo. Ttulo del libro, Punto. Nmero de edicin, Punto. Editores,
apellidos de los editores, coma e iniciales del nombre o nombres, Punto. Nombre completo de la
casa editora, coma. Nombre de la ciudad o lugar de publicacin, Dos puntos. Pgina inicial,
guin, y pgina final, punto.
Ejemplo:
Spiess WEL. and Wolf W. 1987. Critical evaluation of methods to determine moisture sorption
isotherms. En: Water Activity: Theory and Applications to Food. Rocklan LB. and Beuchat LR.
(Editors). Editorial Marcel Dekker, Inc. New York: 215-234.
Tesis:
Apellidos del autor (es) e iniciales del nombre o nombres, Punto. Ao de publicacin, Punto.
Nombre de la tesis, Punto. Nombre de la Universidad, Punto. Nombre de la ciudad, Punto. Tesis
para obtener el ttulo de..........., Punto. Pgina inicial, guin, y pgina final, punto.
Ejemplo:
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Basurto FI. 2002. Gua Prctica para la Validacin de Mtodos. Universidad Autnoma de
Quertaro. Quertaro, Qro. Tesis para obtener el ttulo de licenciatura en 59-68.
Pginas de internet:
Apellidos del autor (es), coma e iniciales del nombre o nombres. Ao de publicacin, Punto. Ttulo
del documento. Direccin de la pgina, Punto. Fecha de consulta. Punto.
Ejemplos:
Hernndez, M. 1998. www. Sldk fecha de consulta.
Instituto Nacional de Estadstica, Geografa e Informtica. INEGI. 2012. www.inegi.gob.mx.
Fecha de consulta: 30 de diciembre de 2014.
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nombre del alumno), avaladas por los resultados del estudio. No se justifican las
conclusiones derivadas de posibilidades o tendencias. Las conclusiones deben ser
totalmente congruentes con los objetivos. Dentro de stas, el alumno deber
mencionar la importancia que tiene el conocimiento de cada tcnica en la industria de
alimentos.
11. Al final del curso, los estudiantes entregarn dos CD por equipo con cada una
de las prcticas, incorporando y marcando aquellos comentarios y sugerencias
que se realicen durante la revisin de las prcticas individuales, as como los artculos
empleados para la discusin de cada prctica y las hojas de seguridad de los
reactivos usado en cada prctica. Se incluir tambin la presentacin y los artculos
empleados.
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3. Al final del curso, cada equipo entregar los reportes revisados durante el semestre
y el manual de prcticas completo en un CD, resaltado en amarillo aquellos
comentarios y sugerencias que se realicen durante la revisin de cada una de las
prcticas. La entrega de los CD con las prcticas completas y modificadas, los
artculos de discusin de cada prctica y la presentacin y artculo de discusin, es
obligatorio al final del curso. La entrega del manual de prcticas equivale al 25% de
la calificacin final del laboratorio y es obligatoria para la exencin del mismo.
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Algunas
Actitud Siempre Pocas veces
veces
Trabaja hacia el logro de los objetivos del equipo.
POLTICAS DE APROBACIN
La calificacin mnima para exentar es 8.0 (ocho punto cero), considerando todos los
puntos especificados en el sistema de evaluacin:
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I. OBJETIVO
II. ALCANCE
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Entrega de
Fecha de
Sesin de artculos y Fecha de Entrega de
Tema Prctica o prcticas programadas entrega de
laboratorio diagramas de realizacin resultados
reporte
movimientos
Captulo I. Presentacin del curso 1 28/Jul/17
Introduccin y Polticas de evaluacin
Agua
Captulo III. 6. Determinacin del punto 6 25/Ago/17 1/Sep/16 8/Sep/17 J14 L18
Protenas isoelctrico de un aminocido y /Sep/17
una protena.
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Entrega de
Fecha de
Sesin de artculos y Fecha de Entrega de
Tema Prctica o prcticas programadas entrega de
laboratorio diagramas de realizacin resultados
reporte
movimientos
7. Solubilidad y extraccin de 7* 1/Sep/17 8/Sep/16 J14 L18 V22 L25
protenas. /Sep/17 /Sep/17
8. Desnaturalizacin de protenas 8 J14 L18 22/Sep/17 29/Sep/17 6/Oct/17
/Sep/17
Da de la Independencia 15/Sep/17
Captulo IV. 9. Pruebas de accin enzimtica 9 22/Sep/17 29/Sep/17 6/Oct/17 13/Oct/17
Enzimas (peroxidasas) y especificidad de Semana
enzimas (amilasas). cultural?
10. Factores que afectan la 10 29/Sep/17 6/Oct/17 13/Oct/17 20/Oct/17
velocidad de reaccin de una Semana
enzima (ureasa). cultural?
Semana cultural de la Facultad de 11 13/Oct/16
Qumica
Captulo VI. 11. Pruebas cualitativas de lpidos. 12 6/Oct/17 20/Oct/17 27/Oct/17 L6/Nov/17
Lpidos
Da de muertos 1 al 3/Nov/17
1 Revisin de los artculos 1 al 3/Nov/17
cientficos
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Entrega de
Fecha de
Sesin de artculos y Fecha de Entrega de
Tema Prctica o prcticas programadas entrega de
laboratorio diagramas de realizacin resultados
reporte
movimientos
Captulo VII. 13. Reacciones de oscurecimiento 14 L6/Nov/17 10/Nov/17 17/Nov/17 24/Nov/17
Interaccin entre enzimtico y no enzimtico.
componentes
Revisin de la metodologa para la 10/Nov/17
prctica 14.
2 Revisin de los artculos 17/Nov/17
cientficos
14. Reconocimiento de 15 (10/Nov/17) 17/Nov/17 En manual En manual
componentes principales en un
alimento.
15. Preparacin de la presentacin. 16 24/Nov/17
Discusin de
16. Presentacin y discusin de
artculo
artculo(s) cientfico(s). 17 1/Dic/17
Entrega del manual de prcticas y L4/Dic/17
bitcoras
*Equivalen al menos una semana previa a la realizacin de la prctica para la preparacin de los materiales de prueba. Entrega de la bitcora o
reporte a ms tardar a las 11 AM. Los artculos se podrn enviar va electrnica a ambas coordinadoras en el horario acordado, con el nombre
de los artculos en el siguiente orden: 3 palabras claves que mejor describan al artculo separadas por guin, guin y el apellido del primer autor
seguido de et al., ao (cuando son varios autores). Entrega del manual, bitcoras y CD/USB a las 10 AM.
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CAPTULO I
AGUA
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INTRODUCCIN AL CAPTULO 1:
AGUA
1. Qu es la bioqumica?
La bioqumica es el estudio de:
1) la composicin molecular de las clulas vivas;
2) las reacciones qumicas que sufren los compuestos biolgicos;
3) la regulacin de esas reacciones.
Etimolgicamente Bioqumica significa" qumica de la vida". Es una disciplina cientfica
que se ocupa de los procesos qumicos que ocurren en la materia viva.
El objetivo de la bioqumica es el conocimiento de la estructura y comportamiento de las
molculas biolgicas, que son compuestos de carbono que forman las diversas partes
de la clula y llevan a cabo las reacciones qumicas que le permiten crecer, alimentarse,
reproducirse y usar y almacenar energa.
1)Biologa celular: estudia los procesos que se desarrollan en los seres vivos desde un
punto de vista molecular, pretende fijarse con preferencia en el comportamiento
biolgico de las macromolculas que componen los seres vivos.
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son reportadas en varias formas; entre stas, las ms usadas son: partes por milln
(ppm), miligramos por litro (mg/l) y porcentaje de slidos (%s).
Como se ha mencionado anteriormente, en el agua de formacin se encuentran sales
disueltas; adems de ellas, estn presentes microorganismos de diferentes cepas y
especies por ej. bacterias anaerbicas sulfato-reductoras son productoras de cidos por
lo que contribuyen a la corrosin en el pozo y a taponar la formacin durante las
operaciones de inyeccin de agua.
Las variaciones en la concentracin y composicin inica de las aguas de formacin
pueden deberse a muchos factores como lo son; el origen de algunos sedimentos no
marinos, la dilucin cerca del agua subterrnea, la concentracin con la evaporacin del
gas de la migracin, la reduccin del sulfato por las bacterias o de los componentes
anaerbicos del petrleo, la adsorcin y el intercambio bajo de cationes con los
minerales de la arcilla, el intercambio del magnesio y los iones del calcio durante una
dolomitizacin (aguas enriquecidas de magnesio), la precipitacin del magnesio y de los
sulfatos y carbonatos de calcio, y la reaccin qumica con los componentes de los
sedimentos que se depositan. Los anlisis qumicos del agua son utilizados en los
registros geofsicos para la interpretacin cuantitativa de la saturacin del agua de
formacin, otro uso de los anlisis es en la identificacin de las aguas producidas con
respecto a las formaciones geolgicas donde se originaron.
-Salinidad en el agua
La salinidad es el contenido de slidos disueltos totales (SDT) y se expresa en mg/kg
(ppm) y en algunos casos en unidades de masa por volumen: mg/l, mol/l (Morales,
2015).
La molcula de agua est formada por dos tomos de H unidos a un tomo de O por
medio de dos enlaces covalentes. El ngulo entre los enlaces H-O-H es de 104'5. El
oxgeno es ms electronegativo que el hidrgeno y atrae con ms fuerza a los electrones
de cada enlace. El resultado es que la molcula de agua aunque tiene una carga total
neutra (igual nmero de protones que de electrones), presenta una distribucin
asimtrica de sus electrones, lo que la convierte en una molcula polar, alrededor del
oxgeno se concentra una densidad de carga negativa, mientras que los ncleos de
hidrgeno quedan parcialmente desprovistos de sus electrones y manifiestan, por tanto,
una densidad de carga positiva.
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Polaridad: El agua es una molcula "polar"; es decir, existe en ella una distribucin
irregular de la densidad electrnica. Por esta razn, el agua posee una carga parcial
negativa cerca del tomo de oxgeno y una carga parcial positiva cerca de los tomos
de hidrgeno.
Punto de fusin: tambin se explica por los enlaces por puentes de hidrgeno. Algunos
de estos enlaces se rompen a medida que el hielo se transforma en agua lquida (debido
a que el ordenamiento de los tomos se pierde a medida que se funde), de forma que
el calor necesario para esta ruptura se extrae del entorno. Por el contrario el agua lquida
al solidificar libera calor.
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NIR:
Espectroscopia infrarroja
-Es un mtodo de absorcin
-Grupo OH a una 2.8m
-Muy sensible (1 ppm)
-Requiere calibracin
Los modos de vibracin de cada grupo son sensibles a cambios en la estructura qumica,
cambios en las conformaciones y a interacciones con el medio; as por ejemplo el grupo
C=0 tiene una banda centrada en 1.700 cm-1 y cuando se forma un puente hidrgeno,
C=0 H , la banda se desplaza a 1652 cm-1.
RMN
-El ncleo de H vibra en un campo magntico con el espn orientado
-Absorbe la energa de la radiofrecuencia
-Permite diferenciar agua libre de agua unida.
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Spiess WEL. and Wolf W. 1987. Critical evaluation of methods to determine moisture
sorption isotherms. En: Water Activity: Theory and Applications to Food. Rocklan LB. and
Beuchat LR. (Editors). Editorial Marcel Dekker, Inc. New York: 215-234.
Espinoza P.L. 2003. Captulo 1 . Introduccin a la Bioquimica.1ra edicin. Universidad
Catlica Agropecuaria del Trpico Seco. Ingeniera Agropecuaria.
Morales M.A. 2015. Propiedades elctricas de rocas de yacimientos petroleros mojadas
por agua y mojadas por aceite. Universidad Nacional Autnoma de Mxico. Mxico,
D.F. Tesis para obtener el titulo de: Ingeniero Petrolero. 74- 83.
Octavio C.A.2007. Resonancia Magntica Nuclear (RMN). Disponible:
https://investigacion.us.es/scisi/sgi/servicios/rmn. [05/08/17].
Badui.S. 2006. Agua; Qumica de los Alimentos. 4 edicin. Quintanar D.E. Editorial
Pearson Educacin de Mxico, Mxico. 1-37
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I. INTRODUCCION
II. CONOCIMIENTOS PREVIOS
III. OBJETIVO
IV. METODOLOGA
IV.1. Material y equipo.
IV.2. Reactivos y soluciones.
IV.3. Preparacin de reactivos.
IV.4. Requerimientos de seguridad.
IV.5. Disposicin de residuos.
IV.6. Procedimiento.
IV.7. Diseo experimental (si lo hay)
V. RESULTADOS
V.1 Datos experimentales
V.2 Clculos
VI. DISCUSIN
VII. CONCLUSIONES
VIII. BIBLIOGRAFA
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I.INTRODUCCION
II.CONOCIMIENTOS PREVIOS
1. Definicin de:
a) Humedad relativa
b) Aw
c) Contenido de humedad
2. Cmo se clasifican los alimentos segn su Aw? Indicar los intervalos de Aw.
3. Menciona 10 ejemplos de alimentos que consumas diariamente y su valor de Aw.
Especificar el tipo de alimento.
4. Cul es la relacin de Aw y la vida de anaquel de un alimento?
5. Mencione los tipos de deterioros fsicos y qumicos que se pueden presentar en un
alimento durante su vida de anaquel.
6. Cmo influye la composicin qumica del alimento en la actividad de agua?
7. Describe a) las caractersticas del equipo Aqualab, b) el fundamento completo de la
determinacin de Aw a travs de este equipo, c) su manejo y d) su uso en la industria
de alimentos.
II. OBJETIVOS
III. METODOLOGA
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III.6. Procedimiento
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Abrir previamente (24 horas) uno de los paquetes y exponerlo a las condiciones
ambientales. Registrar las condiciones ambientales (HR, temperatura, hora, etc.).
Triturar finamente la muestra expuesta (aproximadamente a 250 micras) y colocarla
en la celda especialmente adaptada al equipo Aqualab (llenar no ms de de la
celda).
Abrir cuidadosamente el portacelda e insertar la muestra.
Mediar la Aw del alimento (expuesto). La medicin puede tomar varios minutos,
dependiendo del tipo de muestra (considerar este dato para las discusiones).
Triturar finamente la muestra del paquete cerrado (aproximadamente a 250 micras) e
inmediatamente medir el valor de Aw.
Limpiar la celda entre cada muestra (de la misma especie) con un pauelo desechable.
Registrar: la temperatura de la medicin, el tiempo en alcanzar el equilibrio y el valor de
Aw.
Apagar el equipo Aqualab y guardarlo debidamente limpio.
Lavar las celdas usadas y enjuagar con etanol. Guardar.
IV. RESULTADOS:
IV.1. Datos experimentales y clculos: incluir cada uno de los clculos realizados;
emplear el mismo nmero y mnimo de decimales (3 decimales que son los que marca
el equipo) en todos los cuadros y figuras o grficos;
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2. Describir todos los factores ambientales del da en que la muestra fue expuesta y
en el que se realiz el experimento.
ABIERTO:
1. Construir un grfico que compare los datos experimentales de los alimentos abiertos
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2. Construir un grfico que muestra la diferencia (ganancia o prdida) entre los alimentos
abiertos y cerrados. Numerar y titular la grfica. Describir resultados.
V. DISCUSIN
VI. CONCLUSIONES
VII. BIBLIOGRAFA
Badui Dergal S. 2006. Agua. En: Qumica de los Alimentos. 4ta. Edicin. Editorial
Pearson Educacin de Mxico, Mxico: 1-28.
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I. INTRODUCCION
II. CONOCIMIENTOS PREVIOS
III. OBJETIVO
IV. METODOLOGA
IV.1. Material y equipo.
IV.2. Reactivos y soluciones.
IV.3. Requerimientos de seguridad.
IV.4. Disposicin de residuos.
IV.5. Procedimiento.
V. RESULTADOS
V.1 Datos experimentales
V.2 Clculos
VI. DISCUSIN
VII. CONCLUSIONES
VIII. BIBLIOGRAFA
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I. INTRODUCCIN
II.CONOCIMIENTOS PREVIOS
1. Definicin de:
a) Adsorcin
La adsorcin es la transferencia de un soluto en un gas o lquido(adsorbato) hacia la
superficie de un slido (adsorbente) en donde el soluto es retenido como resultado de
atracciones intermoleculares con las molculas slidas. Se llama adsorbente a la
sustancia sobre el cual se fija la otra, que recibe el nombre de adsorbato.
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b) Desorcin
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Como consecuencia de estos fenmenos de histresis puede ocurrir que para un mismo
contenido acuoso del alimento, su actividad de agua sea muy diferente, segn se est
considerando la hidratacin del producto o la desecacin del mismo, pues en la zona
intermedia de actividades las isotermas siguen caminos diferentes (Badui, 2006).
Los valores de humedad de un producto para una misma Aw pueden diferir ligeramente
s ella se determina adsorbiendo o desorbiendo agua. Los valores de humedad
obtenidos de la curva de desorcin son en teora ligeramente superiores a los obtenidos
en la curva de adsorcin. Este fenmeno se denomina histresis.
La histresis puede ser explicada por la desnaturalizacin de protenas que puede
ocurrir durante la desorcin, ya sea debido a la temperatura de secado o el efecto salino
originado por la concentracin de solutos en el alimento (Barreiro, 2006).
ampliar
= = = =
100 +
II. OBJETIVOS
III. METODOLOGA
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agua corriente
durante 15 min..
Tras contacto con
los ojos: Lavar
suavemente con
agua corriente
durante 15 min
abriendo
ocasionalmente
los prpados.
Tras ingestin: De
a beber
inmediatamente
agua para diluir.
Carbonato de Proteccin de los Desechar en el Tras inhalacin:
potasio ojos / la cara: contenedor de aire fresco.
584-08-7 Gafas de sales En caso de
seguridad contacto con la
Proteccin de las piel: Aclararse la
manos: piel con
guantes de caucho agua/ducharse.
nitrilo Tras contacto con
los ojos: aclarar
con abundante
agua.
Tras ingestin:
hacer beber agua
inmediatamente
(mximo 2 vasos).
Nitrito de Proteccin de las Desechar en el En caso de
magnesio manos: Guantes contenedor de inhalacin:
10377-60-03 de nitrilo, sobre sales Transportar a la
0.11 mm espesor.. vctima al exterior
Proteccin de la y mantenerla en
vista: Gafas reposo en una
protectoras. posicin cmoda
para respirar.
En caso de
contacto con la
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con abundante
agua.
Tras ingestin:
hacer beber agua
inmediatamente
(mximo 2 vasos).
Cloruro de sodio Proteccin de los Desechar en el Tras inhalacin:
7647-14-5 ojos / la cara: contenedor de aire fresco.
Gafas de sales Tras contacto con
seguridad la piel: aclarar con
Proteccin de las abundante agua.
manos: guantes de Eliminar ropa
caucho nitrilo contaminada.
Tras contacto con
los ojos: aclarar
con abundante
agua.
Tras ingestin:
hacer beber agua
(mximo 2 vasos),
en caso de
malestar consultar
al mdico8.
Cloruro de potasio Proteccin de los Desechar en el Tras inhalacin:
7447-40-7 ojos / la cara: contenedor de aire fresco.
Gafas de sales Tras contacto con
seguridad la piel: aclarar con
Proteccin de las abundante agua.
manos: guantes de Eliminar ropa
caucho nitrilo contaminada.
Tras contacto con
los ojos: aclarar
con abundante
agua,
manteniendo
abiertos los
prpados. En caso
necesario, llamar
al oftalmlogo.
27
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CLAVE Pre-requisito
FACULTAD DE QUMICA
Laboratorio de Bioqumica
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INGENIERO QUMICO EN ALIMENTOS
Tras ingestin:
hacer beber agua
(mximo 2 vasos).
Cloruro de bario Proteccin de los Desechar en el Tras inhalacin:
10361-37-2 ojos / la cara: contenedor de aire fresco.
Gafas de sales Tras contacto con
seguridad la piel: aclarar con
Proteccin de las abundante agua.
manos: guantes de Tras contacto con
caucho nitrilo los ojos: aclarar
con abundante
agua,
manteniendo
abiertos los
prpados.
Tras ingestin:
hacer beber agua
(mximo 2 vasos).
Si no es posible la
asistencia mdica
dentro de una
hora, provocar el
vmito (solamente
en personas
plenamente
despiertas y
conscientes),
administrar carbn
activo (20 - 40 g en
suspensin al
10%).
(www.reactivosmeyer.com.mx)
III.5. Procedimiento
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CLAVE Pre-requisito
FACULTAD DE QUMICA
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INGENIERO QUMICO EN ALIMENTOS
Cantidad
Sal % Humedad relativa
Sal (g) Agua (mL)
Cloruro de litio LiCl 11.15 22.5 12.75
Acetato de potasio CH3COOK 22.60 30 9.75
Cloruro de magnesio MgCl2 32.73 30 3.75
Carbonato de potasio K2CO3 43.80 30 13.5
Nitrito de magnesio Mg(NO3)2 52.86 30 4.5
Bromuro de sodio NaBr 57.70 30 12.0
Cloruro de estroncio SrCl2 70.83 30 7.5
Cloruro de sodio NaCl 75.32 30 9.0
Cloruro de potasio KCl 84.32 30 12.0
Cloruro de barrio BaCl2 90.26 37.5 10.5
(Rockland y Beuchat, 1987)
29
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CLAVE Pre-requisito
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INGENIERO QUMICO EN ALIMENTOS
Se acondicionaron los frascos para las sales, donde se colocaron bases (en el centro
del frasco) y arriba de estas, los vasos con muestra, posteriormente vertimos las
soluciones saturadas como se muestra en la figura 2.1 y proseguimos a taparlos.
Se etiquetaron adecuadamente los frascos de acuerdo a la humedad relativa (HR) de
trabajo.
Vaso-muestra
Base
C) Isoterma de adsorcin:
Se pesaron los vasitos desechables 2 y se adicionaron aproximadamente 1.2 g de
muestra seca a cada uno de ellos, por duplicado. El tamao de muestra se fij ya que
se careca de muestra.
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FACULTAD DE QUMICA
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INGENIERO QUMICO EN ALIMENTOS
Se colocaron los vasitos 2 con la muestra seca en las cmaras de HR conocida (frasco
con solucin saturada correspondiente) (Fig. 2.4)
Se dejaron los vasos 2 (con las muestras) abiertos dentro de los frascos hasta que
alcanzaron su peso constante.
Se registraron el peso de las muestras hasta llegar a un peso constante.
Una vez alcanzado el peso constante se determin la actividad acuosa (con el equipo
Aqualab) y se procedi a elaborar la isoterma de adsorcin.
IV. RESULTADOS:
IV.1. Datos experimentales y clculos: incluir cada uno de los clculos realizados;
emplear el mismo nmero y mnimo de decimales (3 decimales que son los que marca
el equipo) en todos los cuadros y figuras o grficos.
W1 W2
% Humedad *100
W1 Wo
Donde:
W1 = Muestra inicial (en crisol).
W2 = Muestra seca (en crisol).
Wo = Cpsula, crisol o vaso (donde se sec la muestra).
NOTA: Incluir todos los datos y promediar si se emplearon varios crisoles o cpsulas para secar
la muestra. Incluir la desviacin estndar (DE).
NOTA: Incluir todos los datos y promediar si se emplearon varios crisoles o cpsulas para secar
la muestra. Incluir la desviacin estndar (DE).
3. Una vez alcanzado el equilibrio (en base al registro de los pesos de cada tercer da),
calcular la cantidad de agua que ganaron cada una de las muestras (en los vasitos)
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FACULTAD DE QUMICA
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PesoFinal PesoMuestra
%VariacinP eso *100
PesoMuestra
Donde:
Peso final = peso de la muestra en cada vasito al final del experimento
Peso muestra = peso de la muestra en cada vasito al inicio del experimento
2. Graficar las sales de menor a mayor valor de Aw vs. los valores de %Variacin en
Peso.
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2. Recuperar los datos de Aw (de las sales correspondientes) y M (g H20/g S.S.) de cada
muestra o vasito.
4. Construir con los datos calculados la grfica Y vs. Aw (incluir todo los datos
calculados).
35
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is
5. Del grfico anterior, considerar nicamente aquellos datos (a partir de varias sales o
condiciones de Aw) que ms se asemejen a una recta y que se consideren para la
ecuacin de BET (para evitar grandes variaciones en la obtencin de un valor de
monocapa adecuado) y construir la grfica del valor de monocapa. Indicar los valores
en la ltima columna del cuadro 7.
6. Obtener la ecuacin de la tendencia lineal de los datos y con ello determinar los
valores de la ecuacin de BET y despejar as el valor de Aw (x).
Donde:
Pendiente de la ecuacin lineal = (C 1)/MmC (1)
Intercepto de la ecuacin lineal = 1/MmC (2)
9. Despejar para cada caso el valor de Aw y comparar estos datos con los obtenidos en
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2. Comparar los datos obtenidos a partir de la ecuacin (Isoterma) con los valores de
Aw del Aqualab.
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V. DISCUSIN
VI. CONCLUSIONES
VII. BIBLIOGRAFA
Badui Dergal S. 2006. Agua. En: Qumica de los Alimentos. 4ta. Edicin. Editorial
Pearson Educacin de Mxico, Mxico: 1-28.
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CAPTULO II
CARBOHIDRATOS Y SU METABOLISMO
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INTRODUCCIN AL CAPTULO 2:
CARBOHIDRATOS
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CONTENIDO Pgina
I. INTRODUCCION
II. CONOCIMIENTOS PREVIOS
III. OBJETIVO
IV. METODOLOGA
IV.1. Material y equipo.
IV.2. Reactivos y soluciones.
IV.3. Preparacin de reactivos.
IV.4. Requerimientos de seguridad.
IV.5. Disposicin de residuos.
IV.6. Procedimiento.
IV.7. Diseo experimental (si lo hay)
V. RESULTADOS
V.1 Datos experimentales
V.2 Clculos
VI. DISCUSIN
VII. CONCLUSIONES
VIII. BIBLIOGRAFA
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I. INTRODUCCION
II.CONOCIMIENTOS PREVIOS
II. OBJETIVO
III. METODOLOGA
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Microesptula
4 matraces aforados de 25 mL (preparacin de soluciones)
1 matraz aforado de 100 mL (preparacin de soluciones)
1 matraz aforado de 50 mL (preparacin de soluciones)
1 Plato caliente y Bao mara
1 Mechero
Vasos de precipitados
2 Gradillas
3 Pipetas graduadas de 5 mL
Pipetas Pasteur
1 Vidrio de reloj
2 Varillas de vidrio
Tubos cnicos de 15 mL o tubos Falcon de 15 mL
Centrfuga refrigerada
Reactivo de Fehling:
Reactivos
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Reactivo de Lugol
Reactivos:
Yodo (I), 1.0 g
Yoduro de potasio (KI), 2.0 g
Agua destilada, 300 mL
Procedimiento:
Se mezclan los tres reactivos y se filtra la solucin. La solucin final que se obtiene
presenta color mbar.
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III.6. Procedimiento
Deber emplearse un bao de agua para calentar los tubos de ensaye; lo anterior para
evitar posibles proyecciones.
A) Azcares reductores:
Prueba de Fehling:
A 3 ml de disolucin de glucosa al 2% aadir 0.5 mL de solucin A y 0.5 mL de solucin
B de Fehling.
Agitar o mezclar perfectamente cada tubo.
Calentar en bao mara hasta la ebullicin.
La presencia de un precipitado amarillo de hidrxido cuproso CuOH o bien precipitado
rojo de xido cuproso Cu2O indica la presencia de un azcar reductor. La prueba ser
negativa si queda azul o cambia a un tono azul-verdoso.
Repetir el procedimiento para los otros azcares y el almidn.
B) Azcares no reductores:
A 5 ml de disolucin de sacarosa al 2% en un tubo aadir varias gotas de HCl
concentrado (4-5).
Mezclar cuidadosamente y hervir a fuego abierto por 2 min (para hidrolizar).
Enfriar la mezcla y neutralizar con Na2CO3 hasta que no se produzca efervescencia.
Realizar la reaccin o prueba de Fehling de acuerdo al punto anterior.
La presencia de un precipitado amarillo de hidrxido cuproso (CuOH) o bien precipitado
rojo de xido cuproso (Cu2O) indica la presencia en la disolucin de productos de la
hidrlisis que poseen propiedades reductoras.
Repetir el procedimiento para el almidn al 2%.
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C) Polisacridos:
a) Reaccin de yodo o prueba de Lugol para almidn
A 3 ml de disolucin de almidn al 2% aadir solucin de Lugol gota a gota.
Agitar o mezclar perfectamente cada tubo.
Para almidn sin hidrolizar, se espera un color negro azulado al combinarse con la
disolucin de iodo en ioduro potsico.
Posteriormente, calentar suavemente en bao mara, sin que llegue a hervir, hasta que
pierda el color azul.
Enfriar el tubo de ensayo al chorro de agua y observar a los 2-3 minutos la reaparicin
del color azul.
Hervir nuevamente la disolucin en el tubo 1 por 2 4 min, enfriar y tomar una alcuota
(0.5 1 mL) en otro tubo (4).
Repetir la prueba con yodo al tubo 4.
La reaccin con Lugol ser negativa: el lquido adquiere un color amarillo
correspondiente a la coloracin de la disolucin de Lugol (el almidn se desintegra al
final hasta la glucosa, produciendo como productos intermedios acrodextrinas,
maltodextrinas y maltosa).
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IV. RESULTADOS
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Calentamiento suave
y reaccin de Lugol
Almidn Hidrlisis qumica en
tubo 2 (2 min) y
reaccin de Lugol
Hidrlisis qumica en
tubo 3 (4 min) y
reaccin de Lugol
Hidrlisis qumica en
tubo 4 (6 min) y
reaccin de Lugol
Hidrlisis qumica en
tubo 1 y reaccin de
Fehling
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2. Describir los datos experimentales de acuerdo al orden de los cuadros (citar los
cuadros en el texto).
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V. DISCUSIN
VI. CONCLUSIONES
VII. BIBLIOGRAFA
Badui Dergal S. 2006. Carbohidratos. En: Qumica de los Alimentos. 4ta. Edicin.
Editorial Pearson Educacin de Mxico, Mxico: 29-109.
Mathews, C. 2002. Bioqumica. 3ra. Edicin, Editorial Pearson Addison Wesley, Mxico:
312-336.
51
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CONTENIDO Pgina
I. CONOCIMIENTOS PREVIOS
II. OBJETIVO
III. METODOLOGA
III.1. Material y equipo.
III.2. Reactivos y soluciones.
III.3. Preparacin de reactivos.
III.4. Requerimientos de seguridad.
III.5. Disposicin de residuos.
III.6. Procedimiento.
III.7. Diseo experimental (si lo hay)
IV. RESULTADOS
IV.1 Datos experimentales
IV.2 Clculos
V. DISCUSIN
VI. CONCLUSIONES
VII. BIBLIOGRAFA
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I. CONOCIMIENTOS PREVIOS:
II. OBJETIVO
III. METODOLOGA
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1 Plato caliente
Material o equipo para filtracin
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III.6. Procedimiento
Da de inicio de la prctica: Activacin de la levadura e inicio del proceso fermentativo
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IV. RESULTADOS
Glucosa
Lactosa
Azcar morena
Mango
Manzana
Nota: Describir detalladamente las caractersticas (color, fases, apariencia, etc.) del
sobrenadante y el precipitado en cada caso.
Importante: Resaltar o indicar el equipo que realiz estos experimentos.
Glucosa
Lactosa
Azcar morena
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Mango
Manzana
IV.2. Clculos:
V. DISCUSIN
VI. CONCLUSIONES
Sacar conclusiones respecto a los resultados e importancia de la prctica en los
conocimientos de tu rea; aplicaciones en el rea, entre otros aspectos importantes.
VII. BIBLIOGRAFA
Lehninger AL. 1995. Principios de Bioqumica. 2da. Edicin, Ediciones Omega, S.A. de
C.V., Espaa: 428-429.
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Mathews C. 2001. Bioqumica. 2da. Edicin, Editorial McGraw Hill, Espaa: 507-511.
Pavia DL, Lampman GM, Kriz GS, Engel RG. 2005. Introduction to Organic Laboratory
Techniques, a small scale approach; 2da. Edicin, Brooks/Cole-Thomson Learning; CA,
EUA: 136-140.
59
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CONTENIDO Pgina
I. CONOCIMIENTOS PREVIOS
II. OBJETIVO
III. METODOLOGA
III.1. Material y equipo.
III.2. Reactivos y soluciones.
III.3. Preparacin de reactivos.
III.4. Requerimientos de seguridad.
III.5. Disposicin de residuos.
III.6. Procedimiento.
III.7. Diseo experimental (si lo hay)
IV. RESULTADOS
IV.1 Datos experimentales
IV.2 Clculos
V. DISCUSIN
VI. CONCLUSIONES
VII. BIBLIOGRAFA
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I. CONOCIMIENTOS PREVIOS:
II. OBJETIVO
III. METODOLOGA
61
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Material biolgico:
120 o ms semillas de maz, frijol, garbanzo, chcharo, sorgo, etc. (Investigar
primeramente las condiciones y tiempos de germinacin de la semilla; no incluir
semillas demasiado pequeas o grandes).
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III.6. Procedimiento
Desinfectar las semillas (mnimo 45 semillas del mismo tamao por da)
Remojar durante 20 minutos en el reactivo desinfectante
Lavar abundantemente con agua hervida y fra
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Nota: Realizar el pelado de las semillas de acuerdo al tiempo de incubacin en el agar, de tal
modo que al final y al mismo tiempo se retiren todas las mitades de semillas.
Remover cuidadosamente con una pinza las mitades de las semillas al final del
experimento.
Revelar la caja Petri adicionando 3 mL de solucin* reveladora de yodo-yoduro de
potasio.
*Nota: Realizar una pre-prueba en el agar para determinar la dilucin de la solucin de Lugol.
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IV. RESULTADOS
A) Degradacin enzimtica del almidn por las amilasas (0, 3-4 y 6-7 das)
65
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Tamao del
Das de
( % de
Observaciones hipoctilo/epictilo
germinacin* DE) germinacin
(cm o mm)
Condiciones ptimas de temperatura, luz y humedad (control)
3-4
6-7
3-4
6-7
3-4
6-7
Nota: Especificar *los das exactos de germinacin; las caractersticas de las semillas
germinadas y el nmero de semillas totales y germinadas.
66
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0 60
0 90
0 120
3-4 30
3-4 60
3-4 90
3-4 120
6-7 30
6-7 60
6-7 90
6-7 120
0 60
0 90
0 120
3-4 30
3-4 60
3-4 90
3-4 120
6-7 30
6-7 60
67
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FACULTAD DE QUMICA
Laboratorio de Bioqumica
362 352
INGENIERO QUMICO EN ALIMENTOS
6-7 90
6-7 120
0 60
0 90
0 120
3-4 30
3-4 60
3-4 90
3-4 120
6-7 30
6-7 60
6-7 90
6-7 120
Nota: Especificar los das de germinacin.
0 60
0 90
0 120
3-4 30
3-4 60
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INGENIERO QUMICO EN ALIMENTOS
3-4 90
3-4 120
6-7 30
6-7 60
6-7 90
6-7 120
0 60
0 90
0 120
3-4 30
3-4 60
3-4 90
3-4 120
6-7 30
6-7 60
6-7 90
6-7 120
0 60
0 90
0 120
3-4 30
3-4 60
3-4 90
3-4 120
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6-7 30
6-7 60
6-7 90
6-7 120
Nota: Especificar los das de germinacin.
V. DISCUSIN
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VI. CONCLUSIONES
VII. BIBLIOGRAFA
Murtaza G. and Asghar R. 2012. -Amylase activities during seed development and
germination in pea (Pisum sativum L.) treated with salicylic acid. Pak. J. Bot. 44(6):
1823-1829.
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CAPTULO III
PROTENAS
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CONTENIDO Pgina
I. CONOCIMIENTOS PREVIOS
II. OBJETIVO
III. METODOLOGA
III.1. Material y equipo.
III.2. Reactivos y soluciones.
III.3. Preparacin de reactivos.
III.4. Requerimientos de seguridad.
III.5. Disposicin de residuos.
III.6. Procedimiento.
III.7. Diseo experimental (si lo hay)
IV. RESULTADOS
IV.1 Datos experimentales
IV.2 Clculos
V. DISCUSIN
VI. CONCLUSIONES
VII. BIBLIOGRAFA
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I. CONOCIMIENTOS PREVIOS:
1. Cules son las frmulas, las estructuras qumicas, los pKs y el punto isoelctrico (pI)
terico de los aminocidos a evaluar en esta prctica y qu caractersticas fsico-
qumicas tienen?
2. Describir la curva de titulacin (en equivalentes de OH-) del aminocido a evaluar en
la prctica en funcin del pH y su relacin con el pI y los pKs.
3. Cul es el fundamento de la reaccin de titulacin de un aminocido que se emplea
en esta prctica? Por qu los reactivos para la titulacin del aminocido deben tener
las mismas concentraciones?
4. Incluir los grficos tericos del pI de los aminocidos a evaluar en la prctica,
incluyendo los valores eq. OH- y las estructuras qumicas.
5. Por qu precipitan las protenas al llegar al pI? Explicar y dar ejemplos.
6. Qu problemas pueden presentarse en general durante la titulacin de protenas?
7. Incluir la composicin proteica de cada leche y suero a evaluar en la prctica. Cul
es el punto isoelctrico terico de cada una de las protenas de la leche y del suero?
II. OBJETIVOS
III. METODOLOGA
75
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CLAVE Pre-requisito
FACULTAD DE QUMICA
Laboratorio de Bioqumica
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INGENIERO QUMICO EN ALIMENTOS
2 Esptulas
2 Goteros o pipetas Pasteur
1 Piceta con agua destilada y desionizada para enjuagar el electrodo
Papel para secar el electrodo
1 Barra magntica ( 2)
Gasa o manta de cielo (para filtrar el suero)
Embudo y anillo metlico (para la filtracin del suero)
Potencimetro
2 Termmetros
1 Plato caliente con agitacin
76
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CLAVE Pre-requisito
FACULTAD DE QUMICA
Laboratorio de Bioqumica
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INGENIERO QUMICO EN ALIMENTOS
III.6. Procedimiento
77
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CLAVE Pre-requisito
FACULTAD DE QUMICA
Laboratorio de Bioqumica
362 352
INGENIERO QUMICO EN ALIMENTOS
Evitar la agitacin brusca de la leche mientras aaden la solucin de Hcl, ya que se rompe el
cogulo que se forma y pueden alterarse los resultados; **as mismo, evitar el calentamiento
brusco de las soluciones del suero de leche. Calentar a 90 C por 5 min.
IV. RESULTADOS
Cuadro 2. Relacin del volumen (mL) de Hcl gastados con el pH de la solucin del aminocido
Volumen Equivalentes Volumen Equivalentes
pH pH
Hcl (mL) de OH- Hcl (mL) de OH-
0 (pH inicial)
78
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CLAVE Pre-requisito
FACULTAD DE QUMICA
Laboratorio de Bioqumica
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INGENIERO QUMICO EN ALIMENTOS
Cuadro 3. Relacin del volumen (mL) de NaOH gastados con el pH de la solucin del
aminocido
Volumen Equivalentes Volumen Equivalentes
pH pH
NaOH (mL) de OH- NaOH (mL) de OH-
0 (pH inicial)
2. A partir del volumen total empleado para la titulacin (eje X) graficar contra pH (eje
79
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CLAVE Pre-requisito
FACULTAD DE QUMICA
Laboratorio de Bioqumica
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INGENIERO QUMICO EN ALIMENTOS
Y). Incluir las estructuras ionizadas del aminocido en funcin del pH.
Cuadro 4.
4. A partir de la definicin de pK y pI, calcular los pKs empleado los datos experimentales
de la grfica pH vs. OH; incluir estos valores en la grfica.
5. Calcular el punto isoelctrico (pI) a partir de los pKs calculados en el punto anterior
(valores experimentales); describir detalladamente los clculos en cada caso.
Vaca Cabra
pH final de la solucin
Observaciones generales:
80
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CLAVE Pre-requisito
FACULTAD DE QUMICA
Laboratorio de Bioqumica
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INGENIERO QUMICO EN ALIMENTOS
Medir el pH y
calentar en bao
I
mara a 90 C/5
min
Modificar el pH a
II 4 y calentar a 90
C/5 min
Modificar el pH a
III 6 y calentar a 90
C/5 min
Modificar el pH a
IV 7 y calentar a 90
C/5 min
En cada caso:
1. Describir los datos experimentales de acuerdo al orden de los cuadros y de las figuras
(citar los cuadros y las figuras en el texto).
V. DISCUSIN
81
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CLAVE Pre-requisito
FACULTAD DE QUMICA
Laboratorio de Bioqumica
362 352
INGENIERO QUMICO EN ALIMENTOS
VI. CONCLUSIONES
VII. BIBLIOGRAFA
Badui Dergal S. 2006. Protenas. En: Qumica de los Alimentos. 4ta. Edicin. Editorial
Pearson Educacin de Mxico, Mxico: 119-244.
82
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CLAVE Pre-requisito
FACULTAD DE QUMICA
Laboratorio de Bioqumica
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INGENIERO QUMICO EN ALIMENTOS
CONTENIDO Pgina
I. CONOCIMIENTOS PREVIOS
II. OBJETIVO
III. METODOLOGA
III.1. Material y equipo.
III.2. Reactivos y soluciones.
III.3. Preparacin de reactivos.
III.4. Requerimientos de seguridad.
III.5. Disposicin de residuos.
III.6. Procedimiento.
III.7. Diseo experimental (si lo hay)
IV. RESULTADOS
IV.1 Datos experimentales
IV.2 Clculos
V. DISCUSIN
VI. CONCLUSIONES
VII. BIBLIOGRAFA
83
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CLAVE Pre-requisito
FACULTAD DE QUMICA
Laboratorio de Bioqumica
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INGENIERO QUMICO EN ALIMENTOS
I. CONOCIMIENTOS PREVIOS:
II. OBJETIVOS
III. METODOLOGA
84
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CLAVE Pre-requisito
FACULTAD DE QUMICA
Laboratorio de Bioqumica
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INGENIERO QUMICO EN ALIMENTOS
10 g de muestra (harinas de: maz, frijol, haba, trigo, cebada, entre otros)
H2O desmineralizada
NaCI al 1%
Etanol al 75%
NaOH 0.1 N
Solucin patrn de albmina de concentracin conocida.
Reactivo Biuret
Reactivos:
Sulfato cprico (CuSO4.5H2O; PM = 249.68), 1.5 g
Tartrato sdico potsico (PM = 282.22), 4.5 g
Yoduro de potasio (KI, PM = 166), 2.5
NaOH (PM = 40) en escamas, 60 g en 250 mL de agua destilada (6 M)
Agua destilada
Procedimiento:
Disolver en el siguiente orden 4.5 g tartrato de sodio-potasio, 1.5 g de sulfato cprico,
2.5 de KI en 205 mL de agua destilada. Cuando los solutos se hayan disuelto, agregar
50 mL de NaOH 6 M. Diluir a un volumen final de 500 mL con agua destilada. (Volver
a preparar la solucin si se forma un precipitado negro). Esta solucin debe
almacenarse en frascos color mbar y es estable por 6 meses.
85
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CLAVE Pre-requisito
FACULTAD DE QUMICA
Laboratorio de Bioqumica
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INGENIERO QUMICO EN ALIMENTOS
de los reactivos restantes, as como lo que debe de hacerse en caso de que ocurra
algn accidente). Incluir la informacin en el Cuadro 1.
Los residuos de alimentos que se deriven de la realizacin de la prctica pueden
desecharse dentro de una bolsa cerrada, la cual puede depositarse en el bote de la
basura del laboratorio.
III.6. Procedimiento
Pesar 5.0 g de muestra (harinas de: maz, frijol, haba, trigo, cebada, entre otras) por
duplicado y colocar en un matraz Erlenmeyer con tapa de 100 mL.
Agregar 20 mL de H2O desmineralizada, agitar en plato durante 10 min y centrifugar la
suspensin a 3,000 rpm por 5 min.
Vaciar el sobrenadante a un matraz aforado de 50 mL. Al residuo agregar de nuevo otros
20 mL de H2O desmineralizada y repetir exactamente el proceso anterior.
Despus de centrifugar, el sobrenadante de esta segunda extraccin se adiciona al
matraz que contiene al primer sobrenadante.
Completar su volumen a 50 mL con H2O desmineralizada hasta el afore. La fraccin
obtenida incluye las albminas (Figura 1).
86
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CLAVE Pre-requisito
FACULTAD DE QUMICA
Laboratorio de Bioqumica
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INGENIERO QUMICO EN ALIMENTOS
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CLAVE Pre-requisito
FACULTAD DE QUMICA
Laboratorio de Bioqumica
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INGENIERO QUMICO EN ALIMENTOS
Mezclar bien y dejar en reposo por 30 min a temperatura ambiente o introducir los tubos
en un bao de agua a 30C durante 10 min para el desarrollo del color violeta
caracterstico.
88
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CLAVE Pre-requisito
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Laboratorio de Bioqumica
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INGENIERO QUMICO EN ALIMENTOS
Leer la absorbancia a 540 nm frente al blanco. Aunque el color es estable por 1 h, medir
la absorbancia a un tiempo determinado.
IV. RESULTADOS
1. Describir los resultados obtenidos y combinar con figuras o fotografas de los datos
experimentales (incluir nmero y ttulos de figuras).
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CLAVE Pre-requisito
FACULTAD DE QUMICA
Laboratorio de Bioqumica
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INGENIERO QUMICO EN ALIMENTOS
Concentracin final
Estndar (L) Agua destilada (L) Sol. Biuret (mL)
(g/mL)
0 150 2.85 0
30 120 2.85 20
60 90 2.85 40
90 60 2.85 60
120 30 2.85 80
150 0 2.85 100
Solucin patrn de protena: 10 mg/mL
Clculos y resultados:
Clculos y resultados:
2. Interpolar las absorbancias de los tubos problemas y calcular cada fraccin protenica,
teniendo en cuenta las diluciones de cada caso.
V. DISCUSIN
90
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CLAVE Pre-requisito
FACULTAD DE QUMICA
Laboratorio de Bioqumica
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INGENIERO QUMICO EN ALIMENTOS
VI. CONCLUSIONES
VII. BIBLIOGRAFA
Badui Dergal S. 2006. Protenas. En: Qumica de los Alimentos. 4ta. Edicin. Editorial
Pearson Educacin de Mxico, Mxico: 119-244.
Gornall AG., Bardawill CS. And David MM. 1949. Determination of serum proteins by
means of the Biuret reaction. Journal of Biological Chemistry. 177: 751-766.
91
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CLAVE Pre-requisito
FACULTAD DE QUMICA
Laboratorio de Bioqumica
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INGENIERO QUMICO EN ALIMENTOS
CONTENIDO Pgina
I. CONOCIMIENTOS PREVIOS
II. OBJETIVO
III. METODOLOGA
III.1. Material y equipo.
III.2. Reactivos y soluciones.
III.3. Preparacin de reactivos.
III.4. Requerimientos de seguridad.
III.5. Disposicin de residuos.
III.6. Procedimiento.
III.7. Diseo experimental (si lo hay)
IV. RESULTADOS
IV.1 Datos experimentales
IV.2 Clculos
V. DISCUSIN
VI. CONCLUSIONES
VII. BIBLIOGRAFA
92
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CLAVE Pre-requisito
FACULTAD DE QUMICA
Laboratorio de Bioqumica
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INGENIERO QUMICO EN ALIMENTOS
I. CONOCIMIENTOS PREVIOS:
II. OBJETIVO
Aplicar diversas pruebas para identificar los diferentes factores que desnaturalizan y
desestabilizan las protenas (albmina, clara de huevo, casena, peptona, gelatina
(grenetina), protena de suero de leche, entre otras).
III. METODOLOGA
93
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CLAVE Pre-requisito
FACULTAD DE QUMICA
Laboratorio de Bioqumica
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INGENIERO QUMICO EN ALIMENTOS
Alcohol desnaturalizado
Metanol
Acetona
Cloruro mercrico al 10%
Nitrato de plata al 1%
Nitrato de plomo al 1%
cido tnico al 1%
cido pcrico al 3%
Solucin saturada de sulfato de amonio
94
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CLAVE Pre-requisito
FACULTAD DE QUMICA
Laboratorio de Bioqumica
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INGENIERO QUMICO EN ALIMENTOS
III.6. Procedimiento
B. Desnaturalizacin de protenas
Se efectuarn las siguientes pruebas con cada solucin proteica (no agitar las muestras
para evitar la formacin de burbujas)
95
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CLAVE Pre-requisito
FACULTAD DE QUMICA
Laboratorio de Bioqumica
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INGENIERO QUMICO EN ALIMENTOS
Tubo A Tubo B
96
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CLAVE Pre-requisito
FACULTAD DE QUMICA
Laboratorio de Bioqumica
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INGENIERO QUMICO EN ALIMENTOS
IV. RESULTADOS
Muestras originales
Suero
Clara de Gelatina
Albmina Casena de Peptona
huevo (grenetina)
leche
Descripcin
Suero
Clara de Gelatina
Albmina Casena de Peptona
huevo (grenetina)
leche
Calor
RESULTADO:
Sulfato de
amonio
RESULTADO:
97
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CLAVE Pre-requisito
FACULTAD DE QUMICA
Laboratorio de Bioqumica
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INGENIERO QUMICO EN ALIMENTOS
Etanol
Metanol
Acetona
RESULTADO:
Cloruro
mercrico
Nitrato de
plata
Nitrato de
plomo
RESULTADO:
cido tnico
cido pcrico
RESULTADO:
Importante: Resaltar o indicar el equipo que realiz estos experimentos. Incluir cada factor en
una pgina y no dividir o cortar los resultados.
98
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CLAVE Pre-requisito
FACULTAD DE QUMICA
Laboratorio de Bioqumica
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INGENIERO QUMICO EN ALIMENTOS
3. Describir detalladamente las diferentes reacciones que se llevan a cabo entre los
reactivos y cada una de las diferentes protenas.
V. DISCUSIN (si es conveniente para la discusin de los resultados, incluir una sola
seccin integrada de resultados y discusin)
VI. CONCLUSIONES
99
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CLAVE Pre-requisito
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Laboratorio de Bioqumica
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INGENIERO QUMICO EN ALIMENTOS
VII. BIBLIOGRAFA
Badui Dergal S. 2006. Protenas. En: Qumica de los Alimentos. 4ta. Edicin. Editorial
Pearson Educacin de Mxico, Mxico: 119-244.
100
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INGENIERO QUMICO EN ALIMENTOS
CAPTULO IV
ENZIMAS
101
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CLAVE Pre-requisito
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Laboratorio de Bioqumica
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INGENIERO QUMICO EN ALIMENTOS
102
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CLAVE Pre-requisito
FACULTAD DE QUMICA
Laboratorio de Bioqumica
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INGENIERO QUMICO EN ALIMENTOS
Nombre de la prctica:
Pruebas de accin enzimtica Prctica No. De
Pginas de la
pginas
(peroxidasas) y especificidad de enzimas 9 xx
xax
(amilasas)
Realiz: No. Equipo y nombres de integrantes Revis:
CONTENIDO Pgina
I. CONOCIMIENTOS PREVIOS
II. OBJETIVO
III. METODOLOGA
III.1. Material y equipo.
III.2. Reactivos y soluciones.
III.3. Preparacin de reactivos.
III.4. Requerimientos de seguridad.
III.5. Disposicin de residuos.
III.6. Procedimiento.
III.7. Diseo experimental (si lo hay)
IV. RESULTADOS
IV.1 Datos experimentales
IV.2 Clculos
V. DISCUSIN
VI. CONCLUSIONES
VII. BIBLIOGRAFA
103
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CLAVE Pre-requisito
FACULTAD DE QUMICA
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INGENIERO QUMICO EN ALIMENTOS
I. CONOCIMIENTOS PREVIOS:
II. OBJETIVOS
III. METODOLOGA
104
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CLAVE Pre-requisito
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INGENIERO QUMICO EN ALIMENTOS
Plato caliente
Pelador de vegetales
Cuchillos y tablas de picar
Guantes de cocina
5 Jeringas de 20 30 mL marca TERUMO (por equipo)
2 Jeringas de 5 mL marca TERUMO (por equipo)
105
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INGENIERO QUMICO EN ALIMENTOS
III.6. Procedimiento
106
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CLAVE Pre-requisito
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Tubo Tratamiento
1 Control negativo, sin tratamiento
Temperatura: Directo en la flama hasta ebullicin, 2 veces (evitar
2
proyecciones)
3 Inhibidor: Agregar el inhibidor investigado (indicar).
Incubar los tubos en bao mara a 37 C por 5 minutos (excepto el tubo del calentamiento
directo a la flama).
Posteriormente, a los tres tubos agregar lentamente por la pared 2 mL de H2O2 al 3%;
los tubos no deben mezclarse ni agitarse.
Colocar los tubos en la gradilla y anotar todas las observaciones dentro de los 5 minutos
siguientes.
Numerar los vasos de precipitados o los tubos de acuerdo a la primera columna del
Cuadro 3.
Proceder y preparar las soluciones como se muestra en el Cuadro 3. Considerar para el
volumen total de cada solucin, el volumen a emplear en cada reaccin por cada equipo
de acuerdo al nmero de equipos en el laboratorio.
107
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INGENIERO QUMICO EN ALIMENTOS
108
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CLAVE Pre-requisito
FACULTAD DE QUMICA
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INGENIERO QUMICO EN ALIMENTOS
109
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CLAVE Pre-requisito
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INGENIERO QUMICO EN ALIMENTOS
Lavar, pelar, picar (en trozos menor a 1 cm) y congelar cada uno de los vegetales frescos
(1 o 2 piezas dependiendo del tamao del vegetal o fruto).
En el da de la prctica:
Inmediatamente antes de realizar el experimento, lavar y pelar cada uno de los vegetales
frescos. Cada equipo evaluar dos vegetales distintos.
Cortar discos o cilindros de ambos vegetales (tantos frescos como congelados) de 1 cm
de dimetro x 1 cm de altura.
Numerar distintos tubos e introducir cada uno de los discos o cilindros.
Aadir 5 mL de H2O2 al 3% y anotar todas las observaciones.
Explicar lo ocurrido y ordenar los vegetales segn su actividad (burbujeo o produccin
de oxgeno).
Repetir el proceso anterior con los vegetales previamente cortados y congelados por 24
h (tamao menor a 1 cm).
Aadir 5 mL de H2O2 al 3% y anotar todas las observaciones.
Repetir nuevamente el proceso anterior con vegetales previamente hervidos por dos
minutos (discos o cilindros de 1 cm) en 20 mL de agua.
Anotar todas las observaciones y comparar los resultados con los vegetales crudos.
M. Nota: Procurar realizar cada experimento despus de recin cortados los discos o
cilindros de cada vegetal. Para fines comparativos, ordenar segn los cm de la produccin
de oxgeno (burbujeo).
110
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CLAVE Pre-requisito
FACULTAD DE QUMICA
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INGENIERO QUMICO EN ALIMENTOS
Mezclar vigorosamente el contenido de los tubos e incubar durante 10-30 min* a 37C.
Ver nota abajo.
Tomar una alcuota (0.5 mL) de los tubos de ensayo 1 y 2, colocarlos en tubos nuevos
y aadir unas gotas de reactivo de Lugol.
Tomar una alcuota (0.5 mL) de los tubos de ensayo 1 y 2 y colocarlos en tubos nuevos.
Aadir 2 mL de reactivo de Fehling (1 mL solucin A + 1 mL solucin B) y calentar
hasta ebullicin en bao mara (ver prctica 3).
Tomar una alcuota de los tubos de ensayo 3 y 4 y colocarlos en tubos nuevos. Aadir
2 mL de reactivo de Fehling (1 mL solucin A + 1 mL solucin B) y calentar hasta
ebullicin en bao mara (ver prctica 3).
Tomar una alcuota de los tubos de ensayo 5 y 6 y colocarlos en tubos nuevos. Aadir
2 mL de reactivo de Fehling (1 mL solucin A + 1 mL solucin B) y calentar hasta
ebullicin en bao mara (ver prctica 2).
IV. RESULTADOS
1 Control
111
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INGENIERO QUMICO EN ALIMENTOS
Inhibidor
Equipo Observaciones
(nombre y concentracin)
1
1. Describir los resultados y comparar entre los factores que alteran la actividad de la
enzima catalasa y entre inhibidores (considerar el mecanismo de accin).
112
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INGENIERO QUMICO EN ALIMENTOS
3 3 mL de EF/EI + 2
mL de H2O2 al
1.0%
4 3 mL de EF/EI + 2
mL de H2O2 al
0.5%
5 3 mL de EF/EI + 2
mL de H2O2 al
0.3%
6 3 mL de EF/EI + 2
mL de H2O2 al
0.1%
7 3 mL de EF/EI + 2
mL de H2O2 al 0%
3. Con los datos de concentracin de H2O2 (en mM) en cada tubo, graficar volumen de
oxgeno desplazado (Y) vs concentracin de H2O2 (X) de los tubos 1 7, con y sin
inhibidor.
113
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INGENIERO QUMICO EN ALIMENTOS
2
2
3
3
4
4
Importante: Resaltar o indicar el equipo que realiz estos experimentos.
114
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INGENIERO QUMICO EN ALIMENTOS
V. DISCUSIN
VI. CONCLUSIONES
VII. BIBLIOGRAFA
Badui Dergal S. 2006. Enzimas. En: Qumica de los Alimentos. 4ta. Edicin. Editorial
Pearson Educacin de Mxico, Mxico: 301-362.
115
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INGENIERO QUMICO EN ALIMENTOS
Nombre de la prctica:
Efecto de la concentracin del sustrato, el Prctica No. de
Pginas de la
pginas
pH y la temperatura sobre la velocidad de 10 xx
xax
reaccin de una enzima (Ureasa)
Realiz: No. equipo y nombres de integrantes Revis:
CONTENIDO Pgina
I. CONOCIMIENTOS PREVIOS
II. OBJETIVO
III. METODOLOGA
III.1. Material y equipo.
III.2. Reactivos y soluciones.
III.3. Preparacin de reactivos.
III.4. Requerimientos de seguridad.
III.5. Disposicin de residuos.
III.6. Procedimiento.
III.7. Diseo experimental (si lo hay)
IV. RESULTADOS
IV.1 Datos experimentales
IV.2 Clculos
V. DISCUSIN
VI. CONCLUSIONES
VII. BIBLIOGRAFA
116
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FACULTAD DE QUMICA
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INGENIERO QUMICO EN ALIMENTOS
I. CONOCIMIENTOS PREVIOS:
II. OBJETIVOS
III. METODOLOGA
117
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FACULTAD DE QUMICA
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INGENIERO QUMICO EN ALIMENTOS
118
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CLAVE Pre-requisito
FACULTAD DE QUMICA
Laboratorio de Bioqumica
362 352
INGENIERO QUMICO EN ALIMENTOS
de los reactivos restantes, as como lo que debe de hacerse en caso de que ocurra
algn accidente). Incluir la informacin en el Cuadro 1
Los residuos de alimentos que se deriven de la realizacin de la prctica pueden
desecharse dentro de una bolsa cerrada, la cual puede depositarse en el bote de la
basura del laboratorio.
III.6. Procedimiento
Parte 1: Blancos
Tubo 1 2 3 4 5
119
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Urea (mL) 4 4 4 4 4
Sol. amortiguadora pH 7.2 (mL) 5.5 5.5 5.5 5.5 5.5
HgCl2 al 2% (gotas) 6 6 6 6 6
Pre-incubacin (C) por 5 min 4 25 50 70 Ebullicin
Ureasa (mL) 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5
Temperatura de incubacin (C) por
4 25 50 70 Ebullicin
30 min con agitacin
Rojo de metilo (gotas) 5 5 5 5 5
Nota: Indicar en el cuadro de procedimientos la temperatura actual de experimentacin.
Titular con HCl 0.01 M hasta obtener una coloracin rosa-salmn (Si fuera necesario,
titular los otros 5 mL del tubo de reaccin). Anotar los volmenes en el Cuadro 9
Tubo 6 7 8 9 10
Urea (mL) 4 4 4 4 4
Sol. amortiguadora pH 7.2 (mL) 5.5 5.5 5.5 5.5 5.5
Pre-incubacin (C) por 5 min con
4 25 50 70 Ebullicin
agitacin
120
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CLAVE Pre-requisito
FACULTAD DE QUMICA
Laboratorio de Bioqumica
362 352
INGENIERO QUMICO EN ALIMENTOS
Titular con HCl 0.01 M hasta obtener una coloracin rosa-salmn (Si fuera necesario,
titular los otros 5 mL del tubo de reaccin). Anotar los volmenes en el Cuadro 9
Parte 1: Blancos
Tubo 1 2 3 4 5
Urea (mL) (concentracin ptima) 4 4 4 4 4
Sol. amortiguadora (5.5 mL) pH 5.5 pH 6.5 pH 7.2 pH 8.5 pH 10
HgCl2 al 2% (gotas) 6 6 6 6 6
Pre-incubar los tubos en bao mara por 5 minutos a la temperatura ptima
121
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CLAVE Pre-requisito
FACULTAD DE QUMICA
Laboratorio de Bioqumica
362 352
INGENIERO QUMICO EN ALIMENTOS
Titular con HCl 0.01 M hasta obtener una coloracin rosa-salmn (Si fuera necesario,
titular los otros 5 mL del tubo de reaccin). Anotar los volmenes en el Cuadro 11
Tubo 6 7 8 9 10
Urea (mL) 4 4 4 4 4
Sol. amortiguadora (5.5 mL) pH 5.5 pH 6.5 pH 7.2 pH 8.5 pH 10
Pre-incubar los tubos en bao mara por 5 minutos a la temperatura ptima
Ureasa (mL) 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5
Incubar los tubos en bao mara por 30 minutos a la temperatura ptima
HgCl2 al 2% (gotas) 6 6 6 6 6
Rojo de metilo (gotas) 5 5 5 5 5
122
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CLAVE Pre-requisito
FACULTAD DE QUMICA
Laboratorio de Bioqumica
362 352
INGENIERO QUMICO EN ALIMENTOS
Titular con HCl 0.01 M hasta obtener una coloracin rosa-salmn (Si fuera necesario,
titular los otros 5 mL del tubo de reaccin). Anotar los volmenes en el Cuadro 11
Tubo Bco 1 2 3 4 5 6
Urea (mL) 5 0.5 1.0 2.0 4.0 7.0 9.0
Solucin amortiguadora pH 5 9.0 8.5 7.5 5.5 2.5 0.5
ptimo
HgCl2 al 2% (gotas) 6 - - - - - -
Pre-incubar los tubos en bao mara por 5 minutos a temperatura ptima
HgCl2 al 2% (gotas) - 6 6 6 6 6 6
123
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CLAVE Pre-requisito
FACULTAD DE QUMICA
Laboratorio de Bioqumica
362 352
INGENIERO QUMICO EN ALIMENTOS
Titular con HCl 0.01 N hasta obtener una coloracin rosa-salmn (Si fuera necesario,
titular los otros 5 mL del tubo de reaccin). Anotar los volmenes en el Cuadro 13
Previamente: Pesar 5 g de muestra (en cada caso ser una de las harinas de
leguminosas o de oleaginosas) y transferirla a un matraz Erlenmeyer con tapa;
agregar X mL de ter, tapar sin apretar. Agitar al menos 24 h
En el da de la prctica, centrifugar la mezcla y eliminar la fase oleosa superior
Al precipitado, agregar 10 mL de NaCl 1% y agitar durante 15 min
Centrifugar la suspensin a 5,000 rpm por 15 min y transferir el sobrenadante a un
matraz aforado de 25 mL
Al residuo agregar nuevamente otros 10 mL de NaCI 1% y repetir exactamente el
procedimiento anterior
Reunir los dos sobrenadantes y completar a 25 mL con NaCI 1%. Este es el extracto
que contiene ureasa
En tubos de ensayo marcados pipetear en cada uno las cantidades de reactivos como
se indica en el Cuadro 7; determinar la actividad por duplicado:
Titular con HCl 0.01 N hasta obtener una coloracin rosa-salmn (Si fuera necesario,
titular los otros 5 mL del tubo de reaccin). Anotar los volmenes en el Cuadro 15
Nota: Si la actividad de la enzima es muy baja con las alcuotas utilizadas, repetir el
ensayo enzimtica usando una alcuota del extracto de ureasa mayor y ajustar los
volmenes
Para las diferentes extracciones tomar una alcuota de 0.5 mL (o en caso necesario diluir
con el solvente correspondiente).
Rotular tubos de ensayo (B, blanco) y pipetear en cada uno las cantidades de reactivos
que se indican en el Cuadro 8.
Mezclar bien y dejar en reposo por 30 min a temperatura ambiente o introducir los tubos
en un bao de agua a 30C durante 10 min para el desarrollo del color violeta
caracterstico.
125
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CLAVE Pre-requisito
FACULTAD DE QUMICA
Laboratorio de Bioqumica
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INGENIERO QUMICO EN ALIMENTOS
Leer la absorbancia a 540 nm frente al blanco. Aunque el color es estable por 1 h, medir
la absorbancia a un tiempo determinado y anotarlas en el Cuadro 17
IV. RESULTADOS
25
50
70
Ebullicin
Notas: *Indicar en el cuadro la temperatura actual de trabajo. Indicar las unidades calculadas.
126
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Donde:
2: relacin estequiomtrica entre el HCl y NH4OH
5 mL: Volumen de titulacin
30 min: tiempo de reaccin
25
50
70
Ebullicin
Notas: *Indicar en el cuadro la temperatura actual de trabajo. Indicar las unidades calculadas.
127
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CLAVE Pre-requisito
FACULTAD DE QUMICA
Laboratorio de Bioqumica
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6.5
7.2
8.5
10
Notas: *Indicar en el cuadro el pH actual de las soluciones de trabajo. Indicar las unidades
calculadas.
128
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7. Calcular la velocidad de la reaccin que se llev a cabo a cada valor de pH, expresada
como mmol de urea hidrolizada/min/mL de solucin titulada, mediante la siguiente
ecuacin
Donde:
2: Relacin estequiomtrica entre el HCl y NH4OH
5 mL: Volumen de titulacin
30 min: Tiempo de reaccin
5.5
6.5
7.2
8.5
10
Notas: *Indicar en el cuadro el pH actual de las soluciones de trabajo. Indicar las unidades
calculadas.
129
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6
Nota: Indicar las unidades calculadas.
130
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Donde:
2: Relacin estequiomtrica entre el HCl y NH4OH
5 mL: Volumen de titulacin
30 min: Tiempo de reaccin
6
Nota: Indicar las unidades calculadas.
8. Graficar la velocidad de reaccin (Y) vs concentracin del sustrato (X) y describir los
resultados obtenidos en el grfico
5
Nota: Indicar las unidades calculadas.
Donde:
2: Relacin estequiomtrica entre el HCl y NH4OH
5 mL: Volumen de titulacin
30 min: Tiempo de reaccin
Cuadro 16. Velocidad de reaccin de la ureasa en los extractos proteicos obtenidos a partir de
leguminosas y oleaginosas
6
Nota: Indicar las unidades calculadas.
8. Graficar la velocidad de reaccin (Y) vs concentracin del sustrato (X) y describir los
resultados obtenidos en el grfico
Cuadro 17. Valores de absorbancia a 540 nm de los diferentes los extractos proteicos obtenidos
Absorbancia en los tubos
mL de muestra
B 1 1 2 2 3 3
Sol. patrn de albmina
Extracto proteico de XX
Extracto proteico de XX
Extracto proteico de YY
133
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Extracto proteico de YY
Extracto proteico de ZZ
Extracto proteico de ZZ
Agua destilada o NaCl 1%
Clculos y resultados:
V. DISCUSIN
1. Comparar las grficas/curvas obtenidas para cada factor evaluado con la literatura
en cuanto a la actividad enzimtica.
2. De acuerdo a los resultados, discutir sobre las condiciones ptimas de concentracin,
pH y temperatura para la ureasa.
3. Comparar la actividad uresica entre cada extracto obtenido y con la literatura.
VI. CONCLUSIONES
VII. BIBLIOGRAFA
Badui Dergal S. 2006. Enzimas. En: Qumica de los Alimentos. 4ta. Edicin. Editorial
Pearson Educacin de Mxico, Mxico: 301-362.
134
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CAPTULO V
LPIDOS
136
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INTRODUCCIN AL CAPTULO V:
LPIDOS
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CONTENIDO Pgina
I. CONOCIMIENTOS PREVIOS
II. OBJETIVO
III. METODOLOGA
III.1. Material y equipo.
III.2. Reactivos y soluciones.
III.3. Preparacin de reactivos.
III.4. Requerimientos de seguridad.
III.5. Disposicin de residuos.
III.6. Procedimiento.
III.7. Diseo experimental (si lo hay)
IV. RESULTADOS
IV.1 Datos experimentales
IV.2 Clculos
V. DISCUSIN
VI. CONCLUSIONES
VII. BIBLIOGRAFA
138
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I. CONOCIMIENTOS PREVIOS:
1. Escribe las frmulas e incluye las estructuras qumicas de cada uno de los lpidos o
grasas a evaluar en la prctica:
2. Describir las propiedades fsicas y qumicas de los lpidos a evaluar (grado de
saturacin o insaturacin, formacin de emulsiones, solubilidad, solventes, etc.):
3. Describir la relevancia biolgica del colesterol. A partir de que ruta metablica se
sintetiza? En qu rutas metablicas participa?
4. En qu se basan los mtodos de extraccin y purificacin de lpidos o aceites? Dar
ejemplos.
5. En qu se basa la prueba de insaturacin con agua de bromo?
6. Cuntas fases se forman y qu se encuentra en cada una de las fases despus de
saponificar un lpido?
II. OBJETIVO
III. METODOLOGA
139
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Volumen o cantidad apropiada de cada uno de los siguientes solventes: Etanol, acetona,
ter, cloroformo
Agua de bromo (preparar la solucin; investigar)
Solucin de NaOH al 20%
Solucin de Sudn III
Tinta china (roja)
Jabn lquido incoloro (importante)
140
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III.6. Procedimiento
A) Pruebas de solubilidad
Numerar los tubos del 1 6 por aceite (Cuadro 2).
Colocar en cada tubo de ensaye 0.5 g o 0.5 mL de aceite (cidos esterico y oleico,
colesterol, aceites vegetales y mantecas) y aadir 2 mL de los siguientes disolventes
apolares (cloroformo y ter de petrleo) y polares (agua, alcohol y acetona).
Agitar vigorosamente y anotar los resultados.
Explicar detalladamente la solubilidad de las emulsiones formadas, el nmero de fases,
el orden de las fases, la composicin de cada fase, etc.
Repetir el procedimiento para cada aceite a evaluar.
C) Prueba de la emulsin.
A los tubos 1 6 de la prueba anterior de extraccin, aadir 1 mL de una solucin
concentrada de jabn lquido incoloro.
Agitar vigorosamente, esperar unos minutos y anotar detalladamente lo sucedido (en
comparacin con los dos puntos anteriores).
D) Pruebas de insaturacin.
Poner 2 mL de cada aceite o lpido a evaluar en un tubo.
Aadir lentamente el agua de bromo, gota a gota, a la muestra; agitando despus de
cada adicin. Registrar el nmero total de gotas aadidas por muestra.
Describir detalladamente las observaciones en cada muestra.
Comparar la capacidad de los lpidos para decolorar el agua de bromo.
141
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Una vez formadas las dos fases, dejar caer 4-5 gotas de Sudn III y agitar nuevamente.
Dejar reposar el tubo y anotar los resultados.
G) Prueba de la saponificacin.
Colocar 0.5 mL o 0.5 g de aceite o lpido y 3 mL de NaOH al 20%.
Agitar durante algunos minutos y hervir suavemente de forma controlada en bao Mara
de 20 a 30 min.
Dejar reposar y observar la formacin de dos o tres fases: Superior lipdica (puede no
aparecer), intermedia e inferior clara.
IV. RESULTADOS
Extraccin Emulsin
Prueba Solubilidad
(con agua) (con jabn)
Lpido Solvente Observaciones* Observaciones* Observaciones*
cido
Cloroformo
oleico -
ter
Acetona
Alcohol
Agua
142
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cido
Cloroformo
esterico
ter
Acetona
Alcohol
Agua
Colesterol Cloroformo
ter
Acetona
Alcohol
Agua
Aceite de
Cloroformo
oliva
ter
Acetona
Alcohol
Agua
Aceite de
Cloroformo
canola
ter
Acetona
Alcohol
Agua
Aceite de
Cloroformo
girasol
ter
Acetona
Alcohol
Agua
143
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FACULTAD DE QUMICA
Laboratorio de Bioqumica
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Manteca
Cloroformo
vegetal
ter
Acetona
Alcohol
Agua
Manteca
Cloroformo
de cacao
ter
Acetona
Alcohol
Agua
Manteca
Cloroformo
de cerdo
ter
Acetona
Alcohol
Agua
Aceite o
Cloroformo
manteca
ter
Acetona
Alcohol
Agua
*Nota: Explicar detalladamente la solubilidad de las emulsiones formadas en cada prueba, el
nmero y orden de las fases, la composicin y color de cada fase, especificar la fase en qu se
encuentra el aceite o grasa evaluada, entre otros detalles o resultados.
Importante: Resaltar o indicar el equipo que realiz estos experimentos.
144
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CLAVE Pre-requisito
FACULTAD DE QUMICA
Laboratorio de Bioqumica
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INGENIERO QUMICO EN ALIMENTOS
cido esterico
Colesterol
Aceite de oliva
Aceite de canola
Aceite de girasol
Aceite de semilla
de uva
Aceite de coco
Aceite de
aguacate
Manteca vegetal
Manteca de cerdo
Aceite de
pescado
Aceite de salmn
Manteca de
cacao
Manteca de coco
Manteca de
cacahuate
Nota: Comparar la capacidad de los lpidos para decolorar el agua de bromo.
Importante: Resaltar o indicar el equipo que realiz estos experimentos.
145
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CLAVE Pre-requisito
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INGENIERO QUMICO EN ALIMENTOS
cido esterico
Colesterol
Aceite de oliva
Aceite de canola
Aceite de girasol
Manteca vegetal
Manteca de cerdo
Manteca de cacao
*Nota: Explicar detalladamente las emulsiones formadas en cada prueba, el nmero y orden de
las fases, la composicin y color de cada fase, especificar la fase en qu se encuentra el aceite
o grasa evaluada, entre otros detalles o resultados.
Importante: Resaltar o indicar el equipo que realiz estos experimentos.
cido esterico
146
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CLAVE Pre-requisito
FACULTAD DE QUMICA
Laboratorio de Bioqumica
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INGENIERO QUMICO EN ALIMENTOS
Colesterol
Aceite de oliva
Aceite de canola
Aceite de girasol
Manteca vegetal
Manteca de cerdo
Manteca de
cacao
*Nota: Explicar detalladamente las fases formadas en cada prueba, el nmero y orden de las
fases, la composicin y color de cada fase, especificar la fase en qu se encuentra el aceite o
grasa evaluada, entre otros detalles o resultados.
Importante: Resaltar o indicar el equipo que realiz estos experimentos.
V. DISCUSIN
VI. CONCLUSIONES
Sacar conclusiones respecto a resultados/tratamiento e importancia de la prctica en los
conocimientos de tu rea (Identificacin de lpidos o del tipo de lpidos en alimentos);
aplicaciones en el rea, entre otros aspectos importantes.
VII. BIBLIOGRAFA
Badui Dergal S. 2006. Lpidos. En: Qumica de los Alimentos. 4ta. Edicin. Editorial
Pearson Educacin de Mxico, Mxico: 245-300.
147
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148
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CLAVE Pre-requisito
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Laboratorio de Bioqumica
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CAPTULO VI
METABOLITOS SECUNDARIOS
149
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150
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CLAVE Pre-requisito
FACULTAD DE QUMICA
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INGENIERO QUMICO EN ALIMENTOS
CONTENIDO Pgina
I. CONOCIMIENTOS PREVIOS
II. OBJETIVO
III. METODOLOGA
III.1. Material y equipo.
III.2. Reactivos y soluciones.
III.3. Preparacin de reactivos.
III.4. Requerimientos de seguridad.
III.5. Disposicin de residuos.
III.6. Procedimiento.
III.7. Diseo experimental (si lo hay)
IV. RESULTADOS
IV.1 Datos experimentales
IV.2 Clculos
V. DISCUSIN
VI. CONCLUSIONES
VII. BIBLIOGRAFA
151
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I. CONOCIMIENTOS PREVIOS:
Carotenoides
Antocianinas
Betalanas
152
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CLAVE Pre-requisito
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Laboratorio de Bioqumica
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INGENIERO QUMICO EN ALIMENTOS
II. OBJETIVO
III. METODOLOGA
153
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III.6. Procedimiento
IMPORTANTE: Recoger en todos los casos los espectros de absorcin de cada uno
de los extractos ricos en pigmentos.
Carotenoides
Clorofilas a, b y total:
Colocar en el mortero 1 g del vegetal o fruto, sin venas, pulpa, etc., cortado en pequeos
tamaos.
Agregar un poco de arena (sin tierra) y 5 mL de acetona al mortero, para moler el tejido
y obtener una pasta fina.
Adicionar 5-10 mL ms de acetona (volumen final o de aforacin 25 mL).
Transferir cuidadosamente el extracto resultante al embudo de Buchner provisto de
papel filtro y filtre al vaco. Hay que humedecer el filtro con una gotas de acetona,
para que le filtro se adhiera bien al embudo.
155
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INGENIERO QUMICO EN ALIMENTOS
En caso de ser necesario, agregar otros 5-10 mL de acetona a la pulpa de las hojas y
reanudar la molienda y el filtrado. Este segundo extracto se debe agregar al primero.
El tejido deber quedar sin color (clorofila), de lo contrario repetir el proceso con otros
5-10 mL de acetona y reunir todos los filtrados.
Lavar el mortero y el embudo con 5-10 mL de acetona que se incorporar al filtrado.
En todo el proceso no deber usarse ms de 25 mL de acetona. Por lo tanto, se
aconseja aforar a 25 mL en un matraz cubierto con papel aluminio.
Recoger los espectros de absorcin del extracto entre 800 y 400 nm (utilizando el blanco
respectivo) para verificar las longitudes de onda.
Leer la absorbancia del extracto (densidad ptica, OD) a 645, 652, 663 y 750 nm en
celda de cuarzo, usando como blanco acetona.
Nota: Verificar las absorbancias anteriores de acuerdo a los espectros de absorcin obtenidos
a partir del extracto. Clorofila a: 430 y 662/663 nm y clorofila b: 453 y 642. Ajustar y discutir
en los resultados.
156
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157
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3. Betalanas:
Pesar 1 g del vegetal o fruto y cortarlo finamente o elaborar una pulpa.
Colocar la pulpa en un matraz Erlenmeyer con rosca, adicionar 10 mL de metanol y tapar
perfectamente.
Cubrir el matraz completamente con papel aluminio y agitar a temperatura ambiente
durante 1 h.
Filtrar y lavar el filtrado dos veces con 5 mL de metanol (volumen final 20 mL).
Reunir todos los filtrados en un frasco con tapa y cubrir con papel aluminio para evitar
la degradacin de los compuestos.
Recoger los espectros de absorcin del extracto entre 800 y 400 nm (utilizando el blanco
respectivo).
Verificar y leer la absorbancia a 476, 538 y 600 nm.
Nota: Verificar las absorbancias anteriores de acuerdo a los espectros de absorcin obtenidos.
IV. RESULTADOS
650
158
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665
*Nota: Indicar el material vegetal/fruto/flor evaluado en cada caso, as como las longitudes de
onda de mxima absorcin modificadas o ajustadas.
Importante: Resaltar o indicar el equipo que evalu cada vegetal.
Ajustar a mg/g de muestra e incluir los datos en columna 4 del Cuadro 3.
159
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652
663
750
*Nota: Indicar el material vegetal/fruto/flor evaluado en cada caso, as como las longitudes de
onda de mxima absorcin.
160
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CLAVE Pre-requisito
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Laboratorio de Bioqumica
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A652nm 1000 X ml
Clorofila total* contenido _ total *
34.5 1000 g _ muestra
161
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Laboratorio de Bioqumica
362 352
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162
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FACULTAD DE QUMICA
Laboratorio de Bioqumica
362 352
INGENIERO QUMICO EN ALIMENTOS
*Nota: Indicar el material vegetal/fruto/flor evaluado en cada caso. **Este apartado debe
realizarse antes de agregar el cido o la base.
Importante: Resaltar o indicar el equipo que evalu cada vegetal.
2. CUANTIFICACIN DE ANTOCIANINAS
pH 1 pH 4.5 Conc. de
Conc. de
antocianina
antocianina
Muestra vis- A vis- vis- A vis- A monomrica
A 700 A 700 monomrica
(mg/g de
max max max max (mg/L)
tejido)
Vegetal
1
Vegetal
2
Vegetal
3
Vegetal
4
Vegetal
5
163
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Vegetal
6
*Nota: Indicar el material vegetal/fruto/flor evaluado en cada caso, as como las longitudes de
onda de mxima absorcin.
Importante: Resaltar o indicar el equipo que evalu cada vegetal.
Donde:
A vis-max es la absorbancia del pico ms alto a pH 1 y pH 4.5, respectivamente
A 700 es la absorbancia a 700 nm, tanto a pH 1 como pH 4.5
A es la absorbancia calculada
Donde:
A es la absorbancia antes calculada
FD es el factor de dilucin
es el coeficiente de extincin molar de la cianidina-3-glucsido (29,600 L mol-1 cm-1)
PM es el peso molecular de la cianidina-3-glucsido (449.2 g/L)
1 es la longitud de la celda (1 cm)
1000 es el factor de conversin de g a mg
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Longitud
Vegetal Vegetal Vegetal Vegetal Vegetal Vegetal Vegetal
de onda
1* 2* 3* 4* 5* 6* 7*
(nm)
476
538
600
537
(pH 6.1)
*Nota: Indicar el material vegetal/fruto/flor evaluado en cada caso, as como las longitudes de
onda de mxima absorcin.
Importante: Resaltar o indicar el equipo que evalu cada vegetal.
Ecuacin de Nilsson
a = (A538 A600) 1.095 (absorbancia de betacianinas a 538 nm, betanina)
y = A476 z (a/3.1) (absorbancia de betaxantinas a 476 nm, vulgaxantina I)
z = A538 a (absorcin de las impurezas)
Porciento de betanina = % Betanina = (a/1120) (FD) (V) (100)
Porciento de vulgaxantina I = % Vulgaxantina = (y/750) (FD) (V) (100)
Donde: A = absorbancia a una determinada longitud de onda
E 1% cm = 1120 para betanina
E 1% cm = 750 para vulgaxanina I
FD = Factor de dilucin
V = volumen del extracto
100 = porcentaje en g/100 g
166
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V. DISCUSIN
VI. CONCLUSIONES
VII. BIBLIOGRAFA
Badui Dergal S. 2006. Pigmentos naturales. En: Qumica de los Alimentos. 4ta. Edicin.
Editorial Pearson Educacin de Mxico, Mxico: 401-444.
Fish WW., Perkins-Veazie P. and Collins JK. 2002. A quantitative assay for lycopene
that utilizes reduced volumes of organic solvents. Journal of Food Composition and
Analysis. 15(3): 309-317.
Jungmin L., Durst RW. and Wrolstand RE. 2005. Determination of total monomeric
anthocyanin pigment content of fruit juices, beverages, natural colorants, and wines
by the pH differential method: Collaborative Study. Journal of AOAC International.
88(5): 1269-1278.
Sapers GM. and Hornstein JS. 1979. Varietals differences in colorant stability of red beet
pigments. Journal of Food Science. 44: 1245-1248.
167
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CAPTULO VII
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CONTENIDO Pgina
I. CONOCIMIENTOS PREVIOS
II. OBJETIVO
III. METODOLOGA
III.1. Material y equipo.
III.2. Reactivos y soluciones.
III.3. Preparacin de reactivos.
III.4. Requerimientos de seguridad.
III.5. Disposicin de residuos.
III.6. Procedimiento.
III.7. Diseo experimental (si lo hay)
IV. RESULTADOS
IV.1 Datos experimentales
IV.2 Clculos
V. DISCUSIN
VI. CONCLUSIONES
VII. BIBLIOGRAFA
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I. CONOCIMIENTOS PREVIOS:
II. OBJETIVO
Evaluar el tipo de sustrato, el valor de pH y la presencia de un inhibidor en el desarrollo
de las reacciones de oscurecimiento enzimtico y no enzimtico (del tipo Maillard).
III. METODOLOGA
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Celdas espectrofotomtricas
Vasos de precipitados de 400 mL y 50mL
Embudo
Probetas graduadas de 10, 50, 100 y 500 mL
Homogenizador o licuadora
Morteros
Gasa
Cajas Petri,
Termmetro
Sartn con mango, palitas de madera, cucharas, etc.
Tablas, cuchillos
Potencimetro
Papel encerado (para las pruebas de caramelizacin)
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III.6. Procedimiento
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De acuerdo al cuadro anterior, incubar los tubos a 130 C por 1 h 30 min a 2 h y luego
enfriarlos a temperatura ambiente (checar la formacin o aparicin de color).
Para los tubos que se mantendrn a bajas temperaturas, anotar la temperatura de
refrigeracin.
En el caso de los tubos con inhibidor, adicionar 500 L del metabisulfito de sodio al inicio
de la incubacin.
Al finalizar el perodo de incubacin, realizar un espectro de absorcin de las muestras
coloridas (empleando agua como blanco) y comparar con la longitud de onda
investigada.
Si est muy concentrada la solucin, hacer diluciones (valor ptimo de absorbancias de
0.2 0.8).
Repetir el mismo procedimiento para algn otro aminocido a evaluar.
4. Caramelizacin:
Tomar tres (3) ollas de aproximadamente 1.5 L de capacidad y realizar las siguientes
preparaciones:
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2. Efecto de la temperatura:
Colocar 10 mL de zumo del fruto/vegetal en cada uno de los tubos de ensayo
identificados con las letras A, B, C y D.
Tubo A: Colocarlo en bao de agua fra (0 4 C), por 25 min.
Tubo B: Colocarlo en bao de Mara a 45-50 C, por 25 min.
Tubo C: Colocarlo en bao de Mara con agua hirviendo, por 25 min.
Tubo D: sin tratamiento, por 25 min.
Nota: Checar y mantener constante la temperatura de los baos.
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IV. RESULTADOS
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3. Graficar los resultados: absorbancia vs. azcar, vs. pH, vs. temperatura o presencia
de inhibidor por aminocido, azcar, pH, temperatura, etc. De acuerdo a los
resultados obtenidos, se pueden graficar los resultados de diversas maneras; todo
depende cmo lo quieran presentar y discutir.
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Observaciones
Tratamiento
Remojo 1 h Fredo en aceite
Agua destilada
Glucosa al 5%
Sacarosa al 5%
Deshidratacin
Tratamiento
Antes Despus
Escaldado
Sulfito de sodio 1%
*Nota: indicar las condiciones de deshidratacin.
4. Caramelizacin:
Observaciones
Tratamiento
Tiempo 1* Tiempo 2 Tiempo 3 Tiempo 4
Sacarosa
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Glucosa
Sacarosa y sal
*Nota: indicar los tiempos (en min) experimentales en el cuadro.
Recipiente cerrado
*Nota: indicar las condiciones de incubacin.
2. Efecto de la temperatura:
Tratamiento Observaciones
Agua fra
Temperatura ambiente
45-50 C
Agua hirviendo
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Tratamiento pH Observaciones
Agua destilada
Zumo de limn
Jugo de naranja
Vinagre
NaOH 0.1 M
NaCl 1%
*Nota: indicar el pH del zumo del fruto o vegetal.
V. DISCUSIN
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VI. CONCLUSIONES
VII. BIBLIOGRAFA
Badui Dergal S. 2006. Carbohidratos. En: Qumica de los Alimentos. 4ta. Edicin.
Editorial Pearson Educacin de Mxico, Mxico: 56-71.
Badui Dergal S. 2006. Txicos presentes en los alimentos. En: Qumica de los
Alimentos. 4ta. Edicin. Editorial Pearson Educacin de Mxico, Mxico: 590-591.
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Nombre de la prctica:
Reconocimiento de los componentes Prctica No. de
Pginas de la
pginas
principales en un alimento (leche) 14 xx
xax
EJEMPLO
Realiz: No. equipo y nombres de integrantes Revis:
CONTENIDO Pgina
I. CONOCIMIENTOS PREVIOS
II. OBJETIVO
III. METODOLOGA
III.1. Material y equipo.
III.2. Reactivos y soluciones.
III.3. Preparacin de reactivos.
III.4. Requerimientos de seguridad.
III.5. Disposicin de residuos.
III.6. Procedimiento.
III.7. Diseo experimental (si lo hay)
IV. RESULTADOS
IV.1 Datos experimentales
IV.2 Clculos
V. DISCUSIN
VI. CONCLUSIONES
VII. BIBLIOGRAFA
184
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I. CONOCIMIENTOS PREVIOS:
II. OBJETIVO
III. METODOLOGIA
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III.6. Procedimiento
Preparar una serie de cuatro tubos de ensayo (para cada leche) y numerarlos.
Al tubo 1 se le aaden 2 mL de leche y 2 mL de HCl concentrado.
Al tubo 2 se le aade igual cantidad de leche y 2 mL de una disolucin concentrada de
NaCl.
Al tubo 3 aadir 2 mL de leche y 2 mL de NaOH al 20 %.
Al tubo 4 se le aade 2 mL de leche y despus se calienta cuidadosamente a ebullicin.
Anotar los resultados obtenidos y comparar los diferentes tratamientos fsico-qumicos.
Repetir para cada leche a evaluar.
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Con una pipeta Pasteur o gotero recuperar cuidadosamente la fase soluble de la prueba
anterior y se filtra.
Aadir 1 mL del filtrado a un tubo de ensayo y agregar 1 mL del reactivo de Fehling (o
de Benedict).
Calentar durante unos minutos y observar el desarrollo de color esperado.
Sustitutos de
Carotenoides
E) Otras determinaciones:
HR, actividad acuosa, cidos grasos insaturados, pigmentos naturales, etc. (cualquier
determinacin realizada en prcticas anteriores o bien, investigada en la literatura
cientfica o normas oficiales).
IV. RESULTADOS
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INGENIERO QUMICO EN ALIMENTOS
Entera en
polvo
Descremada
en polvo
Fermentada
Condensada
Evaporada
Descremada
Sin lactosa
Sin lactosa y
descremada
Nota: Anotar los resultados obtenidos para cada prueba.
Entera en polvo
Descremada en
polvo
Fermentada
Condensada
Evaporada
Descremada
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CLAVE Pre-requisito
FACULTAD DE QUMICA
Laboratorio de Bioqumica
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INGENIERO QUMICO EN ALIMENTOS
Sin lactosa
Sin lactosa y
descremada
*Nota: Anotar qu se forma en cada fase o capa para cada leche.
Entera en polvo
Descremada en
polvo
Fermentada
Condensada
Evaporada
Descremada
Sin lactosa
Sin lactosa y
descremada
*Nota: Anotar las caractersticas del sobrenadante y el precipitado que se forma en cada leche.
190
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Laboratorio de Bioqumica
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INGENIERO QUMICO EN ALIMENTOS
Entera en polvo
Descremada en polvo
Fermentada
Condensada
Evaporada
Descremada
Sin lactosa
Sin lactosa y
descremada
*Nota: Anotar las caractersticas de la reaccin que se forma en cada leche.
V. DISCUSIN
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VI. CONCLUSIONES
VII. BIBLIOGRAFA
Badui Dergal S. 2006. Leche. En: Qumica de los Alimentos. 4ta. Edicin. Editorial
Pearson Educacin de Mxico, Mxico: 603-631.
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