PRCTICA 4.

CROMATOGRAFA

OBJETIVO GENERAL

Conocer la tcnica de cromatografa y los factores experimentales que la

afectan.

OBJETIVOS ESPECFICOS

Aplicar y comparar los mtodos cromatogrficos de capa fina y columna,

para separar, identificar y purificar compuestos orgnicos.
Observar el efecto de diferentes fases mviles y estacionarias en la
separacin.
Determinar los valores de Rf, como un parmetro en la identificacin de los
compuestos separados.

OBSERVACIONES

Experiencia 2.
Al introducir la placa en la que aplicamos una pequea porcin de la mezcla de
colorantes (anaranjado de metilo-azul de metileno (1:1)) en la solucin de acetato
de etilo-etanol (7:3) observamos la aparicin de una mancha superior al punto de
aplicacin(origen), que corresponde al punto A, es decir, el centro del soluto (Fs)
A, (ver placa cromatogrfica),dicha mancha al cabo de unos minutos desapareci.
Posteriormente, una vez que la mezcla lleg 0.5 cm antes del borde superior de la
placa (Frente del disolvente), la retiramos y la dejamos secar, para observarla bajo
luz ultravioleta, donde se observ adems del punto A, una mancha colorida ms
es decir, el punto B correspondiente al centro del soluto (Fs) B, (ver placa
cromatogrfica).

Placa
cromatogrfica
 (ese cuadro djalo as, ah voy a pegar la placa con colores le vpoy a poner Rf y as, slo acomdalo,
para que no quede tanto espacio)

RESULTADOS
Experiencia 2.
En la cromatoplaca (Ver placa cromatogrfica en el apartado de observaciones):
Se obtuvieron dos manchas coloridas, el punto A correspondiente al azul de
metileno a una distancia de 2.3 cm de punto de aplicacin de los colorantes
(Origen) y el punto B, correspondiente al anaranjado de metilo a 3.3 cm. Dichas
distancias corresponden cada una al Centro del soluto (Fs).
La solucin de acetato de etilo-etanol (7:3), es decir el eluyente o tambin llamado
fase mvil lleg hasta 3.7 cm (Frente del disolvente (Fd)) del punto del origen.
Clculo de Rf
Rf A : 2.3cm/3.7cm =0.62 cm Rf B : 3.3cm/3.7cm =0.89 cm

DISCUSIN
Experiencia 2.
Al aplicar 5 veces la mezcla que se quera analizar (anaranjado de metilo-azul de
metileno (1:1)), en la placa cromatogrfica (punto de aplicacin u origen) y se introdujo
en una cmara cromatogrfica, los colorantes se encontraron con la fase mvil, es
decir, con el eluyente compuesto por acetato de etilo-etanol (7:3), el cual fue
ascendiendo por la cromatoplaca por capilaridad, desplazando los componentes de la
mezcla a diferentes velocidades, siendo el punto B el que mayor Frente del soluto tuvo
debido a su polaridad.
Se obtuvieron dos Rf debido a que la mezcla que utilizamos estaba compuesta de 2
colorantes, por lo que podemos decir que el Rf A corresponde al azul de metileno y
el Rf B al anaranjado de metilo, ste fue el que eluy ms rpido ya que es un
colorante ms polar que el azul de metileno, por tanto, este no tuvo retencin por parte
de la fase estacionaria de slica gel que es un compuesto polar y atrajo al colorante
menos polar, esto se puede observar claramente en la Tabla 1 que muestra las zonas
polares de los colorantes.

Polaridad de los colorantes utilizados en la prctica de Cromatografa

Azul de metileno (colorante menos Anaranjado de metilo (colorante ms

polar) polar)
Tabla 1. Sealizacin de las zonas de las molculas de los colorantes utilizados que
presentan polaridad.

(Imprmelo a blanco y negro, los colores no importan)