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1. Gluclisis
2. Una visin global: la gluclisis tiene dos fases
3. La fase preparatoria de la gluclisis requiere ATP
4. La fase de beneficios de la gluclisis produce ATP y NADH
5. El balance global muestra una ganancia de ATP
6. Regulacin de la va glicoltica.
7. Destinos del piruvato en condiciones anaerbicas: fermentacin.
1. Gluclisis
La glucosa ocupa una posicin central en el metabolismo de plantas, animales y muchos
microorganismos. Es relativamente rica en energa potencial, por lo que es un buen combustible; su
oxidacin completa a dixido de carbono y agua transcurre con una variacin de energa libre estndar de
-2840 kJ/mol. Almacenando la glucosa en forma de polmero de elevada masa molecular tal como el
almidn o el glucgeno, una clula puede acumular grandes cantidades de unidades de hexosa, al tiempo
que mantiene una osmolaridad citoslica relativamente baja. Cuando las necesidades energticas de la
clula aumentan, la glucosa puede liberarse a partir de estos polmeros de almacenamiento intracelular y
utilizarse para producir ATP , ya sea aerbica o anaerbicamente. La glucosa no es slo un combustible
excelente sino tambin un precursor extremadamente verstil, capaz de suministrar una gran cantidad de
intermediarios metablicos para las reacciones biosintticas. En los animales y plantas superiores la
glucosa tiene cuatro destinos principales: puede ser utilizada para la sntesis de polisacridos complejos
destinados al espacio extracelular; puede ser almacenada en forma de polisacridos o de sacarosa; puede
ser oxidadada a un compuesto de tres carbonos (piruvato) va gluclisis para proporcionar ATP e
intermediarios metablicos o puede ser oxidada por la ruta de las pentosas fosfato (fosfogluconato) para
obtener ribosa 5-fosfato utilizado en la sntesis de cidos nucleicos y NADPH para los procesos
biosintticos reductores.
La rotura de la glucosa, que tiene 6 carbonos, en dos molculas de piruvato, formado por tres carbonos,
tiene lugar en 10 pasos, de los que los 5 primeros constituyen la fase preparatoria. En estas reacciones la
glucosa es fosforilada en primer lugar en el grupo hidroxilo en C-6. La D-glucosa 6-fosfato as formada se
convierte en D-fructosa 6-fosfato, la cual vuelve a ser fosforilada, esta vez en C-1, dando D-fructosa 1,6
bifosfato. El ATP es el dador del grupo fosforilo en ambas fosforilaciones. Dado que todos los derivados de
azcares en la glucolisis son ismeros D, omitiremos normalmente esta designacin excepto cuando se
trate de dar nfasis a la esteroqumica.La fructosa 1,6-bifosfato se parte a continuacin dando dos
molculas de tres carbonos, la dihidroxiacetona fosfato y el gliceraldehido 3-fosfato; este es el paso de la
lisis del que proviene el nombre del proceso. La dihidroxiacetona fosfato se isomeriza a una segunda
molcula de gliceraldehido 3-fosfato, lo que pone punto final a la primera fase de gluclisis. Desde una
perspectiva qumica, la isomerizacin del paso 2 es crtica para establecer las reacciones de fosforilacin y
de rotura del enlace C-C de los pasos 3 y 4. En resumen: en la fase preparatoria de la glucolisis se invierte
la energa del ATP, elevando el contenido de energa libre de los intermediarios, y las cadenas de carbono
de todas las hexosas metabolizadas se convierten en un producto comn, el gliceraldehido 3-fosfato.
El retorno energtico tiene lugar en la fase de beneficios de la gluclisis. Cada molcula de gliceraldehido
3-fosfato se oxida y fosforila por fosfato inorgnico (no por ATP) formado 1,3-bifosfoglicerato. En la
conversin de las dos molculas de 1,3-bifosfoglicerato en dos molculas de piruvato se libera energa.
Gran parte de esta energa se conserva mediante la fosforilacin acoplada de dos molculas de ADP a
ATP. Al final, el rendimiento neto es de dos molculas de ATP por molculas de glucosa utilizada, ya que
se han invertido dos molculas de ATP en la fase preparatoria de la glucolisis. Tambin se conserva
energa en la fase de beneficios mediante la formacin de dos molculas del transportador de electrones
NADH por molcula de glucosa.
En las reacciones secuenciales de la glucolisis tienen un especial inters tres tipos de transformaciones
qumicas:
-La degradacin del esqueleto carbonado de la glucosa que produce piruvato
-La fosforilacin del ADP a ATP por parte de compuestos fosfato de alta energa, formados durante la
gluclisis
- La transferencia de un in hidruro al NAD+, formndose NADH.
Destinos del piruvato: El piruvato formado en la glucolisis puede continuar siendo metabolizado
siguiendo una de tres rutas catablicas distintas. En los organismos o tejidos aerbicos, en condiciones
aerbicas , la gluclisis solo constituye el primer paso en la degradacin completa de la glucosa. El
piruvato se oxida, con prdida de su grupo carboxilo en forma de
CO2, dando el grupo acetilo del acetil-coenzima A, que es oxidado
seguidamente de manera completa a CO2 por el ciclo del cido
ctrico. Los electrones de estas oxidaciones pasan al O2 a travs de
una cadena de transportadores en la mitocondria, formando H2O. La
energa procedente de las reacciones de transferencia electrnica
impulsa la sntesis de ATP en la mitocondria. La segunda ruta para el
piruvato es su reduccin a lactato va fermentacin del cido lctico.
Cuando el msculo esqueltico durante la contraccin vigorosa ha
de funcionar con bajas concentraciones de oxgeno (hipoxia), el
NADH no puede ser reoxidado a NAD+, siendo este ltimo el aceptor
de electrones imprescindible para la posterior oxidacin del piruvato.
En estas condiciones, el piruvato se reduce a lactato y acepta los
electrones del NADH, regenerando as el NAD+ necesario para la
continuacin de la glucolisis. Algunos tipos celulares y tejidos (retina
y eritrocitos, por ejemplo) convierten la glucosa en lactato incluso en
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Por cada molcula de glucosa degradada a piruvato, se generan dos molculas de ATP a partir de ADP y
Pi y se producen dos molculas de NADH por reduccin del NAD+. El aceptor de hidrgeno en esta
reaccin es el NAD+. La reduccin del NAD+ se realiza mediante la transferencia enzimtica de un in
hidruro (:H-) del grupo aldehdo del gliceraldehido 3-fosfato al anillo de nicotinamida del NAD+, dando el
coenzima reducido NADH. El otro tomo de hidrgeno se libera a la solucin en forma de H+. Podemos
ahora dividir la ecuacin de la glucolisis en dos procesos: el primero consiste en la conversin de la
glucosa en piruvato, que es exergnica:
La suma de las ecuaciones es la variacin de la energa libre estndar de la glucolisis que es de -85
kJ/mol. Tanto en las condiciones estndar como intracelulares , la gluclisis es un proceso esencialmente
irreversible, conducido hasta su totalidad por un gran descenso neto de energa libre.
Energa remanente en el piruvato: la2 gluclisis solo libera una pequea fraccin de la energa total
disponible de la molcula de glucosa; las dos molculas de piruvato formadas por la gluclisis an
contienen la mayor parte de la energa qumica potencial obtenible de la molcula de glucosa, energa que
se puede extraer mediante reacciones oxidativas en el ciclo del cido ctrico y en la fosforilacin oxidativa.
Importancia de los intermediarios fosforilados: cada uno de los nueve intermedios glucolticos entre la
glucosa y el piruvato est fosforilado. El grupo fosforilo parece tener tres funciones:
-Como sea que la membrana plasmtica carece de transportadores para los azcares fosforilados no
pueden abandonar la clula. Despus de la fosforilacin inicial, la clula ya no ha de gastar ms energa
para retener los intermediarios fosforilados a pesar de la gran diferencia de las concentraciones intra y
extracelulares.
- Los grupos fosforilos son componentes esenciales en la conservacin enzimtica de la energa
metablica. La energa liberada en la rotura de enlaces fosfoanhdridos se conserva parcialmente en la
formacin de steres fosfato tales como la glucosa 6-fosfato. Los compuestos fosfato de alta energa que
se forman en la glucolisis (1,3-bifosfoglicerato y fosfoenolpiruvato) donan grupos fosforilo al ADP para
formar ATP.
-La fijacin de los grupos fosfato a los sitios activos de los enzimas disminuyen la energa de activacin y
aumenta la especificidad de las reacciones enzimticas. Los grupos fosfato del ADP, ATP y los
intermediarios glucolticos forman complejos con el Mg`2+, siendo los sitios de unin a sustrato de muchos
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enzimas glucolticos especficos para esos complejos de Mg2+. Prcticamente todos los enzimas
glucolticos requieren Mg2+ para ejercer su actividad.
3. La fase preparatoria de la glucolisis requiere ATP
En la fase preparatoria de la glucolisis se invierten dos molculas de ATP y se rompe la cadena de hexosa
en dos triosas fosfato.
1 reaccin fosforilacin de la glucosa: en el primer paso de la glucolisis, la glucosa se activa para
reacciones posteriores mediante la fosforilacin en el C-6 dando glucosa 6-fosfato; el ATP es el dado de
fosforilo. Esta reaccin, que es irreversible en condiciones intracelulares , est catalizada por la
hexoquinasa. El aceptor en el caso de la hexoquinasa es una hexosa, normalmente la D-glucosa, aunque
la hexoquinasa tambin cataliza la fosforilacin de otras hexosas comunes, tales como la D-fructosa y la
D-manosa .
Quinta reaccin. Interconversin de las triosas fosfato: solamente una de las dos triosas fosfato
formadas por la aldolasa, el gliceraldehido 3-fosfato, puede ser degradada directamente en los siguientes
pasos de la glucolisis. El otro producto, la
dihidroxiacetona fosfato, se convierte rpida y
reversiblemente en gliceraldehdo 3-fosfato por el quinto
enzima de la secuencia glucoltica, al triosa fosfato
isomerasa:
Esta reaccin completa la fase preparatoria de la
gluclisis.
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deshidrogenasa durante la reaccin. El grupo aldehdo del gliceraldehdo 3-fosfato reacciona con el grupo
SH de un residuo Cys esencial del sitio activo, en una reaccin anloga a la formacin de un hemiacetal,
pero en este caso el producto es un tiohemiacetal. La reaccin del residuo Cys esencial con un metal
pesado tal como el Hg2+ inhibe el enzima de modo irreversible.
Sptima reaccin. Transferencia de fosforilo desde el 1,3-bisfosfoglicerato al ADP: el enzima
fosfoglicerato quinasa transfiere el grupo fosforilo de alta energa desde el grupo carboxilo del 1,3-
bisfosfoglicerato al ADP, obtenindose ATP y 3-fosfoglicerato:
Dcima reaccin. Transferencia del grupo fosforilo desde el fosfoenolpiruvato al ADP: el ltimo paso
de la glucolisis es la transferencia del grupo fosforilo desde el fosfoenolpiruvato al ADP catalizada por la
piruvato quinasa, que requiere K+ y tambin Mg2+ o Mn2+. En esta fosforilacin a nivel de sustrato, el
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producto piruvato aparece en primer lugar en su forma enol y a continuacin se tautomeriza rpidamente y
de forma no enzimtica para dar la forma ceto, que es la que predomina a ph=7.
Si simplificamos los trminos que son comunes a ambos lados de la ecuacin, obtenemos la ecuacin
global de la glucolisis en condiciones aerbicas:
Las molculas de NADH formadas durante la glucolisis en el citosol son, en condiciones aerbicas,
reoxidadas a NAD+ por transferencia de sus electrones a la cadena respiratoria que , en las clulas
eucariticas , est localizada en la mitocondria. La cadena de transporte electrnico pasa estos electrones
a su destino final, el O2:
B. PFK-1: La glucosa 6-fosfato puede fluir hacia la gluclisis o hacia cualquiera de otras rutas diferentes
entre las que se cuentan la sntesis de glucgeno y la ruta de las pentosas fosfato. La reaccin
metablicamente irreversible catalizada por la PFK-1 es la etapa que compromete el paso de la glucosa a
travs de la glucolisis. Adems de sitios de fijacin para sus sustratos , este enzima complejo tiene varios
sitios reguladores en los que se fijan activadores o inhibidores alostricos. El ATP no es solo un sustrato
de la PFK-1 sino tambin uno de los productos finales de la ruta glucoltica. Cuando la elevada [ATP]
celular seala que se est produciendo ATP ms rpidamente de lo que se consume, el ATP inhbe la
PFK-1 al fijarse a un sitio alostrico y disminuir la afinidad del enzima por la fructosa 6-fosfato. El ADP y
AMP, que aumentan su concentracin cuando el consumo de ATP es superior a su produccin, actan
alostricamente para aliviar esta inhibicin por el ATP. Estos efectos se combinan para producir una
actividad enzimtica superior cuando se acumulan ADP o AMP y disminuyen la actividad cuando se
acumula el ATP. El citrato, que es un intermediario clave en la oxidacin aerbica del piruvato, de los
cidos grasos y de los aminocidos, acta tambin como regulador alostrico de la PFK-1; una
concentracin alta de citrato aumenta el efecto inhibidor del ATP , reduciendo an ms el flujo de glucosa
a travs de la glucolisis. En este caso, como en muchos otros, el citrato sirve como seal intracelular de
que la clula est alcanzando sus niveles necesarios de metabolismo productor de energa al oxidar
grasas y protenas.
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C. Piruvato quinasa: el enzima glucoltico piruvato quinasa es inhibido alostricamente por el ATP.
Concentraciones elevadas de ATP, acetilCoA y cidos grasos de cadena larga inhiben alostricamente
todos los isozimas de la piruvato quinasa. El isozima heptico (forma L), pero no el isozima muscular
(forma M), est sujeto a una regulacin adicional por fosforilacin. Cuando una baja concentracin de
glucosa en sangre provoca la liberacin de glucagn, la protena quinasa dependiente de cAMP fosforila el
isozima L de la piruvato quinasa, inactivndolo. De este modo disminuye la utilizacin de glucosa como
combustible por el hgado, reservndola para su exportacin al cerebro y a otros rganos. En el msculo
es diferente, en respuesta a la adrenalina, el cAMP activa la degradacin de glucgeno y la gluclisis, y
proporciona el combustible necesario para la respuesta de luchar o huir.
El piruvato es el aceptor electrnico terminal en la fermentacin lctica: Cuando a los tejidos animales no
se les puede suministrar oxgeno suficiente para mantener la oxidacin aerbica del piruvato y del NADH
producidos en la gluclisis, el NAD+ se regenera a partir del NADH mediante la reduccin del piruvato a
lactato. Tal como ya se ha mencionado anteriormente, ciertos tejidos y tipos celulares (eritrocitos)
producen lactato a partir de la glucosa en condiciones aerbicas. La reduccin del piruvato en esta ruta
est catalizada por la lactato deshidrogenasa, que forma el ismero L del lactato a pH 7:
El equilibrio global de esta reaccin favorece fuertemente la formacin de lactato, tal como se demuestra
por la gran variacin negativa de la energa libre estndar. En la gluclisis, la deshidrogenacin de las dos
molculas de gliceraldehdo 3-fosfato procedentes de cada molcula de glucosa transforma dos molculas
de NAD+ en dos de NADH. Debido a que la reduccin de dos molculas de piruvato a dos de lactato
regenera dos molculas de NAD+, no hay cambio neto de NAD+ o NADH:
El lactato formado por msculos esquelticos activos (o por eritrocitos) puede reciclarse; se transporta por
la sangre al hgado, en donde se convierte en glucosa durante la recuperacin de la actividad muscular
vigorosa. Cuando se produce lactato en grandes cantidades durante la contraccin muscular vigorosa, la
acidificacin resultante de la ionizacin del cido lctico en el msculo y la sangre limita los perodos de
actividad energtica. Los atletas mejor preparados no pueden esprintar a velocidad lmite durante ms de
un minuto. Aunque hay dos pasos de oxidacin-reduccin en la conversin de la glucosa en lactato, no
hay cambio neto en el estado de oxidacin del carbono; en la glucosa (C6H12O6) y en el cido lctico
(C3H6O3), la proporcin H:C es la misma. No obstante, se ha extrado parte de la energa de la molcula de
glucosa en su conversin a lactato, suficiente para producir un rendimiento neto de dos molculas de ATP
por cada molcula de glucosa consumida.
El etanol es el producto reducido en la fermentacin alcohlica: la levadura y otros microorganismos
fermentan la glucosa a etanol y CO2 en un proceso de dos pasos:
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En el primer paso, el piruvato se descarboxila en una reaccin irreversible catalizada por el piruvato
descarboxilasa. Esta reaccin es una descarboxilacin simple que no supone la oxidacin neta del
piruvato. La piruvato descarboxilasa necesita Mg2+ y tiene un coenzima unido muy fuertemente, la tiamina
pirofosfato, que se describe con mayor detalle ms adelante. En el segundo paso, el acetaldehdo se
reduce a etanol a travs de la accin de la alcohol deshidrogenasa mediante el poder reductor
proporcionando por el NADH procedente de la deshidrogenacin del gliceraldehdo 3-fosfato. Esta
reaccin es un caso bien estudiado de transferencia de hidruro a partir del NADH. Por lo tanto, los
productos finales de la fermentacin alcohlica son el etanol y el CO2, y la ecuacin global es:
Del mismo modo que en la fermentacin del cido lctico, no hay cambio neto en la razn de tomos de
hidrgeno a tomos de carbono cuando se fermente la glucosa, (razn H:C=12/6=2) a dos etanol y dos
CO2 (razn combinada H:C=12/6=2).
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