Excitabilidad y Electrofisiologa

jueves, 11 de agosto de 2016 08:34

El registro del potencial de accin se estudi histricamente mediante la

colocacin de electrodos dentro de una clula, permitiendo el paso y
registro de una corriente elctrica. De esta forma se mantiene el registro
de la forma del potencial de accin, dado por la despolarizacin de la
membrana plasmtica.
En una etapa inicial, llegando a un nivel umbral, se produce un
aumento en el potencial de la membrana, debido a la entrada de
sodio masiva. Seguido a esta etapa, esta subida se frena mediante
la salida de potasio
La forma de activar los msculos ha tenido variables concepciones
a lo largo del tiempo.
El cientfico Luigi Galvani fue el primero que defini la
contraccin muscular mediante cambios elctricos en piernas
de rana, experimentando con la mayor fuente de electricidad,
los rayos.
Los conocimientos posteriores permitieron concebir lo que
actualmente se conoce como mecanismo de contraccin.
Julius Berstein fue el primero en definir la contraccin a travs
de la depolarizacin de potasio, no de sodio. Cabe destacar
que todos estos cientficos nunca registraron un potencial de
accin
Los primeros en registrar un potencial de accin fueron
Hodgkin y Huxley , los cuales utilizaron el axn gigante de
calamar, introduciendo alambres dentro de esta gran fibra. El
calamar utilizado fue el loligo sp, que no era un calamar muy
grande, pero tena una gran neurona de dametro 1-2 mm en
su axn.
A partir de estas observaciones, se gener la hiptesis inica
del potencial de accin.
La membrana plasmtica, en reposo, es permeable al
cloro y al potasio, pero muy poco permeable al sodio.
Una aplicacin de una corriente produce un cambio en la
polaridad de la membrana, generando un aumento
progresivo de las concentraciones de sodio dado que
 La membrana plasmtica, en reposo, es permeable al
cloro y al potasio, pero muy poco permeable al sodio.
Una aplicacin de una corriente produce un cambio en la
polaridad de la membrana, generando un aumento
progresivo de las concentraciones de sodio dado que
aumenta la permeabilidad, y con esto, la conductancia.
En algn momento dado, la entrada de sodio es mxima
y los canales se detienen o se inactivan.
Finalmente, existe una salida de potasio para restaurar la
polaridad inicial. La bomba sodio/potasio permite
restaurar las concentraciones inicas iniciales.
Estos dos cientficos midieron las conductancias versus el
tiempo de los diferentes iones en relacin al tiempo. Para esto
se utiliz una tcnica denominada fijacin de voltaje, o
voltage clamp, y consiste en mantener constante la diferencia
de potencial a travs de la membrana y medir las
concentraciones de iones iniciales. Fue inventada por Cole y
Marmont, pero fue utllizada por Hodkin y Huxley.
Se necesita primero un potencial de comando, o Vc, el
cual genera el cambio de voltaje inicial. Esta diferencia
entre el comando y el feedback de la membrana produce
un error en el aparato, el cual inyecta una corriente para
corregirla, mantenindola dentro de un valor definido,
estableciendo un circuito con un feedback negativo.
Cuando se introduce la corriente comando, en una
primera instancia, los fosfolpidos de la membrana
funcionan como condensadores, y generan una corriente
capacitiva, la cual es seguida por una descarga inica.
Con estos amplificadores, introducan la corriente
totalmente opuesta, para hacer frente y anular el
potencial. Sin embargo, esta corriente no explica el
movimiento de iones, y solo es la suma de todos los
movimientos.

Para medir esto ltimo, se hicieron experimentos cambiando el

cloruro de sodio por cloruro de colina, que no pasa por los
canales. A partir de esto, se obtuvo la corriente de salida, la cual
fue restada a la corriente total, para obtener la corriente de entrada.
Tambin se utilizaron bloqueadores del canal de sodio, como la
tetrodotoxina (TTX),la cual se encuentra en un pez, y un bloqueador
 cloruro de sodio por cloruro de colina, que no pasa por los
canales. A partir de esto, se obtuvo la corriente de salida, la cual
fue restada a la corriente total, para obtener la corriente de entrada.
Tambin se utilizaron bloqueadores del canal de sodio, como la
tetrodotoxina (TTX),la cual se encuentra en un pez, y un bloqueador
de canales de potasio, como el tetraetilamonio(TEA). Se midieron
las corrientes o influx, y los voltajes para poder obtener las
conductancias individuales
Se observ que en algn momento, el potencial de sodio se
detiene, y la corriente se invierte y vuelve a 0mV. Algo debera
ocurrir en los canales en algn momento. La corriente de entrada
disminua en cierto punto. En los canales de sodio, la corriente
aumenta progresivamente hacta cierto punto, donde ocurre la
inactivacin, donde progresivamente la corriente comienza a
disminuir, por una disminucin gradual de la conductancia.
Tcnicas posteriores, como el patch clamp permitieron obtener
registros de la actividad elctrica de canales individuales,