UNIVERSIDAD DE GUAYAQUIL.

FACULTAD DE INGENIERA QUMICA.

CARRERA DE INGENIERA QUMICA
Laboratorio de Fundamentos de la Microbiologa-Bioqumica

Molina Nugra Josu Daniel

Profesor: Wilfrido Tern

5to Semestre
Paralelo A

1. TEMA: Mtodos de Siembra

2. OBJETIVO: Practicar los fundamentos de la siembra microbiana.

3. CONCEPTO:
Sembrar o inocular es introducir artificialmente una porcin de muestra (inoculo) en u
medio adecuado con el fin de iniciar un cultivo microbiano para su desarrollo y
multiplicacin una vez sembrado el medio de cultivo se incuba a una temperatura adecuada
para el crecimiento

Las reglas fundamentales para efectuar la siembra exigen

Que se realice aspticamente

Que los medios de cultivo y el instrumental a utilizar estn esterilizados
Que se realicen solo las manipulaciones indispensables
Que se trabaje fuera de toda corriente de aire de ser posible utilizar un mechero o
bien flujo laminar

Tcnica asptica
1. El asa se calienta hasta incandescencia y se enfra al aire cerca del mechero o
un costado del agar
2. Se extrae la muestra con el asa esterilizada
3. Se realiza la siembra en un medio estril
4. Se vuelve a esterilizar el asa

MTODOS DE SIEMBRA
El mtodo de siembra a emplear depender de los objetivos que se pretendan alcanzar
con el cultivo ya que en ocasiones se requiere que el desarrollo del microorganismo se
produzca de forma masiva mientras que el otras resulta indispensables que las colonias
queden aisladas o que las manifestaciones de los microorganismos se realicen en
privacin de oxigeno los mtodo de siembra ms usados son los siguientes

1. Siembra Por Estras

2. Siembras Por Puncin
3. Siembra Volumtrica
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4. Siembra Masiva

Siembras por estras

Este mtodo de siembra se realiza sobre las superficies de los medios de cultivo solidos
distribuidos en placas de petri o en tubos de ensayo solidificados en forma de cua
(slam) para la siembra por estras se utiliza el asa de platino o el hisopo en algunos
ocasiones se utilizan ambos instrumentos en la misma siembra.

Siembra por puncin

El instrumento de siembra a emplear ser la aguja de platino y el medio de cultivo
solido generalmente en tubo de ensayo la particularidad que tiene este mtodo es que la
aguja (o con el inoculo) debe atravesar perpendicular mente el medio de cultivo

Siembra volumtrica
Este mtodo de siembra consisti en sembrar una muestra liquida cuyo volumen no
puede ser predeterminado en medio de cultivo solido o liquido

Lquidos: muestra de exudado vaginal tomadas con pipeta pasteur no poseen escala de
graduacin
Ejemplo: muestra de orine en el graduacin Uro cultivo o la sangre para el hemocultivo
se puede determinar con pipeta o jeringuilla respectivamente el volumen que ser
sembrado

Siembra masiva
Cuando se desea realizar una siembra masiva se puede utilizar la esptula de drigalsky.
En este casa la gota de muestra liquida se esparce por toda la superficie del medio de
cultivo solido imprimiendo un movimiento en espiral la siembra masiva tambin se
puede realizar con un hisopo grueso embebido en un cultivo liquido procediendo a su
deslizamiento sobre toda la superficie de una placa de agar.
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4. PROCEDIMIENTO:

Siembra en estra

1. Prender el Mechero de Bunsen.

2. Con la mano opuesta a la sujeta el asa de nicromo tome la placa de Petri, de manera que la
tapa quede hacia arriba con ayuda del dedo pulgar abra parcialmente la placa, siempre y
cuando se la haga cerca del mechero. Flamear el asa hasta que se ponga al rojo vivo, dejar
de enfriar y tomar la muestra con la punta del asa de siembra.

3. Introduzca el asa con la muestra y proceda a deslizarla suavemente en forma de zigzag

desde la pared hasta cubrir a aproximadamente un tercio de toda la superficie del agar.
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4. Flamear el asa nuevamente.

5. Halar 2 estras de la primera parte y proceder con el estriado a un lado, esta vez ya sin
tocar las primeras estras, las estras deben ser menos y estar ms separadas que la
primera vez.
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6. Una vez que se ha culminado con la siembra, cierre la placa Petri, escribir los datos
necesarios (nombre del microorganismo, nombre del medio) voltear y proceder a incubar
por 24 o 48 horas.
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Siembra Masiva:
1. Prender el Mechero de Bunsen.
2. Con ayuda de la micropeta cogemos una cierta cantidad de muestra lquida del tubo, y la
colocamos una gota a un costado de la caja Petri con agar.

3. Luego en un recipiente con alcohol descargamos la punta de la pipeta con la sobra de la

muestra. Cogemos un asa Drigalsky y la empapamos con alcohol, posteriormente la
llevamos a flamear hasta que se seque.
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4. Con el asa asentamos en el agar y donde est la gota y empezamos a mover delicadamente
la caja Petri dando la vuelta, donde quedar extendida toda la muestra en el agar.

Cuando ya se termina el proceso, nuevamente ponemos en alcohol el asa Drigalsky y

secamos.
5. Una vez que se ha culminado con la siembra, cierre la placa Petri, escribir los datos
necesarios (nombre del microorganismo, nombre del medio) voltear y proceder a incubar
por 24 o 48 horas.