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UROANALISIS Y DE TERMINACIN DE UREA EN SUERO

SANGUNEO

UROANALISIS
INTRODUCCIN

El termino uro anlisis da conocer un grupo de pruebas con capacidad para


detectar una enfermedad renal y del tracto urinario.
La orina sea descrito como una biopsia liquida, obtenida de forma indolora y la
mejor herramienta de diagnstico no invasiva de que se dispone.
El cuadro hemtico y el parcial de orina son 2 de los exmenes de laboratorio
ms comunes que se realizan en el diagnstico de enfermedades, estos
exmenes pueden ayudar a identificar varias patologas que presenta las
personas y animales.
Lo principales parmetros fisicoqumicos son el aspecto, el color, el PH y la
densidad. EL aspecto puede variar de por la presencia de fosfatos, sales de
cido rico, del cido oxlico, presencia de pus y bacterias. El color por lo
general amarrillo puede cambiar en condiciones patolgicas. El valor de PH
nos da a conocer sobre la variacin de cido-base del organismo y la densidad
nos da a conocer la capacidad del rin para concentrar la orina.
Caractersticas fsicas: estas incluye el anlisis del volumen, olor, color y
densidad.

1.Volumen

Este parmetro se ve alterado por mltiples condiciones tanto


intrnsecas como de la especie (canino, felino, equino, entre otros), el
tamao del paciente, tipo de alimentacin, actividad fsica, como tambin
extrnsecas como: disponibilidad de agua, temperatura, humedad entre
otros.
El volumen de orina se debe determinar en los casos clnicamente se
observe poliuria y polidipsia, proteinuria y para evaluar la perfusin renal
en estado de Shock. El volumen es inversamente proporcional a la
densidad, a un volumen elevado la densidad es baja y para volumen
bajo la densidad es alta, a excepcin de diabetes mellitus y en la nefritis
severa.
Los cambios en el volumen urinario pueden ser tanto fisiolgicos como
patolgicos ya sea por aumento, disminucin o cambios en la frecuencia
de miccin.
2. Color
La variacin en el color de la orina se ve alterado por diversas
condiciones que pueden ser fisiolgicas o patolgica. El color de la
orina es muy importante en los de determinacin analticas
coliromtricas. La intensidad de color est directamente relacionada con
la gravedad especfica. Hay que tener en cuenta la administracin de
medicamentos, dieta y factores del medio ambiente.
El color normal de la orina es de amarillo claro o mbar, la cual se debe
a 2 pigmentos, el urocromo y la uribilina. Pero hay que tener en cuenta
las variaciones de cada especie como por ejemplo: los felinos y
lagomorfo se tienen orinas de color amarillo intenso, los equinos la orina
la tienen de un aspecto turbio y color lechoso
1. Transparencia
Es una propiedad que nos da a conocer el grado de dilucin de la orina
o de la concentracin de solutos. En la gran cantidad de especies es
traslucida. El grado de turbidez se puede clasificar clara, Turbia.

2. Olor
Se asocia dependiendo de la especie animal que la produce, tambin
depende del sexo del animal y el estado fisiolgico. El olor a amoniaco
es comn en la orina debido al NH3, por otra parte el NH4 y la urea so
inoloros, la principales causas del olor son la reduccin de la urea a NH3
por bacterias que pueden ser patgenas o contaminantes, por lo que un
color amoniacal es la orina recin recolectada puede ser indicativo de
una problema infeccioso del sistema urinario.
Un olor putrefacto puede dar a conocer grandes cantidades de protena
por bacterias

Caractersticas qumicas El anlisis qumico es determinado por el uso de


pruebas reactivas, las cuales se pueden obtener los cambios fisiolgicos o
patolgicos. Los parmetros qumicos incluyen el PH, glucosa, protenas,
bilirrubina, cuerpos cetnicos, creatinina
1. PH
El Ph es urinario es utilizado para determinar el balance Acido-Base, por
lo general el organismo produce un aumento de metabolitos cidos y los
encargados de regular son los pulmones adicionado o reteniendo
dixido de carbono, por otra parte el rin lo regula mediante la
eliminacin de bicarbonato, amonio y fosfatos con la orina.
El conocimiento del ph puede ayudar en el diagnstico presuntivo de la
presencia de cristales como la estrovista y el fosfato de calcio que se
presenta en generalmente en ph alcalinos, mientras que la cistina y el
cido rico se encuentran generalmente en ph cida.
La presencia de microorganismos cambia las condiciones locales del
ambiente y favorece los cambios del ph. Tambin la ingestin de
proteinas de origen animal en la dieta infiere un ph cido para la orina,
debido a esto las dietas de caninos y felinos generan ph entre 5.5-7.

Causas que generan acidificacin o alcalinizacin de la orina

DETERMINACIN DE TRANSAMINASA GLUTMICO PIRUVICA


(TGP) O ALANINA AMINO TRANSFERANSA (ALT)
INTRODUCCIN

La transaminasas so un conjunto de enzimas que catalizan la transferencia de


un grupo amino desde un alfa-aminocido a un alfa-cetcido. Entre ellas
podemos ver las 2 transaminasas ms importantes, la aminotransferasa d
asprtica (AST o GOT) y la aminotransferasa de alanina (ALT o TGP) estas
ltimas dan a conocer una lesin hepatocelular. Estas transaminasas participan
en la gluconeognesis al catalizar la transferencia de grupos amino del cido
asprtico o alanina dela cido cetoglitrico para producir oxalactico y pirvico.
La TGO sta presente en la ioenzimas cistoslicas y mitocondriales del hgado,
msculos esquelticos y cardiaco, rin, cerebro, pncreas, pulmones,
leucocitos y glbulos rojos. Es decir es menos especfica y sensible para el
hgado.
Debido a su amplia distribucin la TGO se considera una enzima inespecfica, y
es ms til cuando su concentracin srica es comparada con los valores de
varias enzimas sricas diferentes. Una cantidad muy escasa de TGO se
excreta en la bilis debido a la barrera hematobiliar.
Su funcin a nivel celular es catalizar la transferencia reversible de un grupo
alfa amino del amino cido (aspartato) a un alfacetocido como una de las
ms importantes reacciones del metabolismo proteico.
LA TGP es una enzima cistoslicas que se encuentra en altas concentraciones
en el hgado, es mucho ms especfica del hgado.
Se eleva en la hepatitis acompaada de necrosis, cirrosis, ictericia obstructiva,
cncer al hgado o congestin heptica. La TGP

DETERMINACIN DE UREA EN SUERO SANGUINEO


INTRODUCCIN

La urea es un compuesto nitrogenado, se produce en el ciclo heptico de la


urea. Los niveles de BUN se usan para evaluar la funcin renal basada en la
capacidad del rin de eliminar desechos nitrogenados de la sangre. Esta
prueba no es muy sensible debido que el 75% aproximadamente del tejido
renal debe haber perdido su funcin antes de encontrar valores altos en
sangre. Si el rin no est funcionando bien y no se remueve suficiente urea
del plasma, se puede encontrar niveles altos de BUN.

La sensibilidad y la especificidad del BUN como indicador de enfermedad renal


son bajas a comparacin con otras pruebas, varios factores pueden alterar su
concentracin independientemente de cambios en la taza de filtracin
glomerular.

Lac concentracin e urea comnmente se reporta como nitrgeno ureico


sanguneo (BUN), nitrgeno ureico srico (SUN) o concentracin de nitrgeno
ureico (UN). Los procesos que alteran a concentracin de la urea en el suero,
son las tasa de sntesis de la urea por los hepatocitos que est influenciada por
las alteraciones en la dieta a base de protena o su catabolismo y la tasa de
aclaracin de la urea por los riones que depende de la tasa de filtracin
glomerular y de la tasa de resorcin de urea por lo tbulos renales.

2. MARCO TEORICO

SIGNIFICANCIA CLINICA EN LA DETERMINACION DE UREA EN SANGRE

La urea es el producto final mayoritario del metabolismo del nitrgeno proteico en los seres
humanos. Constituye la fraccin ms abundante del nitrgeno no proteico. La urea se produce
en el hgado y es excretada por la orina. Su elevacin es producto de trastornos en la funcin
renal o heptica, problemas dietticos, diabetes y otros.

FUNDAMENTOS DEL METODO


La urea presente en la muestra, es desdoblada a amonio por accin de la enzima ureasa, segn
la proposicin de Faucet y Scott.

UREASA
(NH2)2CO + 2 H2O 2 NH3 + CO2 + H2O

El amonio producido reacciona con salicilato e hipoclorito en ambiente alcalino, formndose


un complejo de color verde.

La intensidad del color producido es directamente proporcional a la cantidad de urea presente


en la muestra, y su absorbancia se lee a 600 nm. (580620).

3. MATERIALES Y REACTIVOS

3.1 Materiales y equipos

Tubos de ensayo

Gradillas

Micropipetas

Pipetas

Propipetas

Tips amarillos

Bao maria

Espectrofotmetro

REACTIVOS

Suspensin de Ureasa: Ureasa >50 U/ml Estabilizantes y preservantes no reactivos c.s.

Reactivo Salicilato: cido Saliclico 5 mM Nitroprusiato 5 mM

Reactivo Hipoclorito: Hipoclorito 10 mM NaOH 200 Mm

Solucin Standard: Urea 66 mg/dL Equivalente a Nitrgeno Ureico 30 mg/dL


Estabilizantes y preservantes no reactivos c.s.

4. PROCEDIMIENTO

a. Preparacin del Reactivo de Trabajo:

Mezclar 1 ml. de Reactivo Salicilato con 50 ul de Suspensin de Ureasa, o preparar el volumen


requerido manteniendo la proporcin. (i.e. 30 ml. Reactivo Salicilato + 1,5 ml. Suspensin
Ureasa).
El reactivo de trabajo es estable por 20 das almacenado entre 2 y 8C. y protegido de la luz.

b. Se procedi a rotular los tubos segn la cantidad de muestras a analizar

c. Se agreg los reactivos y las muestras segn lo establecido en la siguiente tabla:

d. Una vez ledo la absorbancia del estndar en el espectrofotmetro se procede a programar


este para obtener los resultados finales de las posteriores muestras. En caso de no
programar el espectrofotmetro se puede calcular el factor de conversin de la siguiente
manera: