BIOQUMICA

Sergio Joya Rodrguez, Germn Camilo Pea Loaiza

Facultad de Ciencias naturales e Ingeniera, Universidad Jorge Tadeo Lozano,
Bogot, Colombia.
2017-09-06.

INFORME
Muestra problema: Musculo de res
Resumen:

Objetivo general: Demostrar que en la muestra problema que nos dan, se

encuentran carbohidratos, lpidos, protenas y cidos nucleicos de acuerdo
con su funcin biolgica.

Resultado general: Dado los pasos del laboratorio observamos que nuestra
muestra problema es una protena con cidos nucleicos, y obviamente con
carbohidratos.

Conclusin general: El musculo de res es una protena, que genera el

movimiento. Est conformada por la membrana celular y una lmina basal
externa formada por glucoprotenas.

Palabras claves :

Compuesto biolgico, clula, biopolmeros, biomolculas, enzimas

Abstract:

General objective: To demonstrate that the carbohydrates, lipids, proteins

and nucleic acids in the test sample do not give according to their biological
function.

Overall result: Given the steps of the laboratory we observed that our
problem sample is a protein with nucleic acids, and obviously with
carbohydrates.

General Conclusion: The muscle of the res and the protein, which generates
movement. It is made up of the cell membrane and an outer sheet formed
by glycoproteins.
 Key words:

Biological compound, cell, biopolymers, biomolecules, enzymes

Marco terico o introduccin:

Los tejidos principales que forman el cuerpo de cualquier animal son el

muscular, conectivo, adiposo, seo, nervioso y epi-telial (Recinto
Universitario de Mayagez (RUM), 1999). El tejido de mayor importancia
para nosotros como humanos es el muscular, pues ingerimos estos tejidos
dentro de la dieta para la obtencin de protenas y aminocidos esenciales.

La carne que presenta un mayor consumo en la dieta humana es la carne

de res. Esta carne presenta diferentes composiciones de colgeno soluble
a medida que aumenta la edad del animal (RUM, 1999). Adems de esto, la
carne de res tiene un alto contenido de protenas. En la tabla 1 se puede
observar el contenido de valor nutricional que aporta una porcin de res a la
dieta.

Tabla 1. Nutrientes correspondientes a 100 g de carne de res.

Caloras 130 kcal.

Grasa 3,38 g.
Colesterol 261 mg.
Sodio 116 mg.
Carbohidratos 5,30 g.
Fibra 0 g.
Azcares 0 g.
Protenas 19,50 g.
Fuente: http://alimentos.org.es/higado-vaca

Dentro de estos contenidos de la carne de res se encuentran cidos grasos

(AG), los cuales son los componentes principales de los lpidos complejos,
como los triacilgliceroles o los fosfolpidos. De ellos, los triacilgliceroles son
quienes ms almacenan energa en los animales. La ventaja de los
triacilgliceroles es que al oxidarse el carbono (C) del AG se produce ms
ATP que de cualquier otra forma de C. En la tabla 2 se puede observar la
proporcin de lpidos que tiene la carne de res diferenciando los lpidos
presentes.
Tabla 2. Perfil lipdico de la carne.

S= saturados; M= monoinsaturados; P= poliinsaturados; w6= omega-6; w3=

omega-3.
Fuente: http://www.edualimentaria.com/carnes-cecinas-composicion-
propiedades

Adems de los lpidos se tienen las protenas, las cuales funcionan como
enzimas para formar estructuras, tambin por los aminocidos pueden
usarse como fuente de energa o como sustratos para otras rutas
metablicas (Metabolismo de carbohidratos, lpidos y protenas. Ramrez y
Buntinx, Dpto. de nutricin de animales y bioqumica). Y debido a que las
protenas son conjuntos de aminocidos homogneos o heterogneos,
tambin se tienen derivados de los aminocidos, los principales se pueden
observar en la tabla 3.

Tabla 3. Productos derivados de los aminocidos.

Aminocido Producto Funcin
Histidina Histamina. Carnosina y Vasodilatador.
arserina. Amortiguadores
intracelulares en el
msculo.
Tirosina Melanina. Pigmento.
Catecolaminas. Neurotransmisores.
Hormonas tiroideas. Metabolismo.
Triptfano NAD*. Serotonina. Coenzima.
Melatonina. Neurotransmisor.
Hormona
Ornitina Esperimina, Estabilizadores de
espermidina y estructuras
putrescina. polianinicas.
*NAD = nicotinamida adenina dinucletido, tambin llamado difosfopiridina
nucletido o Coenzima I.
Fuente: Metabolismo de carbohidratos, lpidos y protenas. Ramrez y
Buntinx, Dpto. de nutricin de animales y bioqumica. URL disponible en:
http://amaltea.fmvz.unam.mx/textos/alimenta/MET_CHO_LIP_PRO2.pdf

El metabolismo implica una serie de procesos bioqumicos controlados que

ocurren dentro de las celular animales. Para tener un metabolismo
adecuado, los animales deben obtener los nutrientes de la dieta pues no
todos son sintetizados en el organismo, lo que vara dependiendo del tipo
 de animal. En el presente informe se demostrar el contenido de protenas,
lpidos, carbohidratos y cidos nucleicos mediante pruebas en el laboratorio
especficas para componente presente en el msculo de res.

Metodologa: TEJIDO

Cortar en trozos pequeos y pesar unos 7g, pasar a un mortero y

adicionar aprox. 0,5 g de arena lavada (a cargo del auxiliar).
Luego agegar ATA en relacin de 1,5mL/g de tejido. Centrifugar por
10 min.
RESIDUO SOBRENADANTE

Lpidos, Protenas, cidos

nucleicos, arena Carbohidratos

Adicione al residuo en una cpsula de

porcelana la mezcla de etanol-ter-
Cloroformo 2:2:1 en 1,5mL/g de tejido,
luego centrifugue a 2500 rpm por 5
minutos.
En un vaso de precipitados adicione etanol
al 95% en una relacin 2:1 con respecto al
volumen del sobrenadante y enfriar en un
bao de hielo por 5min. Centrifugar por 10
min preferiblemente en fro.
SOBRENADANTE RESIDUO

Mono y oligosacridos: Glicgeno:

evaporar al bao mara y Sacar y
guardar
guardar.

SOBRENADANTE RESIDUO

Lpidos: evaporar al bao cidos nucleicos, protena

mara y guardar y arena

En una vaso de precipitados de 100mL con

extraer agregando NaCl al 10% (1ml/g tejido
original) a 90C en una bao mara por 20
min(use perlas de ebullicin). Centrifugar a
4000 rpm por 10min
RESIDUO SOBRENADANTE

cidos nucleicos:adicionar etanol al

Protena desnaturalizada y
95% en frio en relacin 2:1 y dejar
arena, sacar y guardar
reposar por 10 minutos, centrifugar a
8000 rpm.

cidos nucleicos Desechar

 Tabla de datos:

Carbohidratos:
Tabla 4. Reactivos y resultados para pruebas de carbohidratos.
Reactivo Aspecto Resultado Foto

Lugol Rojo pardo Positivo

Foto I.

Violeta en
Molisch interfase suave, Positivo
pero observable a
la vista.

Foto II.

Benedict Azul Negativo

Foto III.

En la prueba de Lugol y Molisch da positiva ya que nuestra muestra

problema tiene glucgeno, el glucgeno es un polisacrido que se
encuentra en el cuerpo del hombre y de los animales, en el hgado y los
msculos; se forma a partir de la glucosa y es utilizada como sustancia de
reserva energtica.
 Reactivo de Molisch:

Fuente: https://sites.google.com/site/laboratoriosbioquimica/bioquimica-
i/carbohidratos/reaccion-de-molish

Al someterse el sobrenadante a la reaccin de Benedict nos proporciona un

resultado negativo como se observa en la imagen, ya que no present el
precipitado rojo ladrillo caracterstico de un azcar reductor

Fuente: http://www.fotoseimagenes.net/reaccion-de-benedict

Lpidos:
Tabla 5. Reactivos y resultados de pruebas para lpidos.
Reactivo Aspecto Resultado Foto
Lieberman Sin color Negativo

Saponificacin Transparente con Positivo

espuma

Foto IV.
En la prueba de Lieberman es para identificar colesterol, en esta reaccin
dio un resultado negativo porque el musculo de res no tiene colesterol.
En la prueba de saponificacin de la muestra problema nos dio positivo,
porque tiene cido grasos y durante esta prueba estos compuestos
reaccionan con una base y se obtienen las sales de los cidos grasos, es
decir jabones, detectables por agitacin.

Protenas:
Tabla 6. Reactivos y resultados de pruebas para protenas.
Reactivo Aspecto Resultado Foto

Millon Rojo ladrillo Positivo

Foto V.

En la prueba de Millon nos muestra la presencia de la tirosina que produce

una coloracin roja que se debe a la formacin de nitrotirosina que, por
adicin de mercurio en el curso del calentamiento, se transforma en una sal
mercrica de color rojo.

Fuente:
https://es.wikipedia.org/wiki/Reactivo_de_Millon#/media/File:Millon_Reactio
n_Principle_V.1.svg
 cidos nucleicos:
Tabla 7. Reactivos y resultados para cidos nucleicos.
Reactivo Aspecto Resultado Foto

Difenilamina Liquido azul claro Positivo

En la prueba de Difenilamina se calientan con el ADN, se rompen los

enlaces fosfo-distery e hidrolizan los enlaces glucosdicos entre el azcar
y los purines. Identificamos que haba poca concentracin de ADN en el
tejido, ya que cuando hay un color ms oscuro del azul quiere decir que
est el ADN ms concentrado.

Anlisis de resultados

Siguiendo el diagrama de flujo de la prctica, del primer centrifugado se usa

el sobrenadante para la realizacin de pruebas de carbohidratos, para los
cuales se debe realizar otro centrifugado. Al sobrenadante de este se le
realiz la prueba de Lugol, la cual nos da positiva demostrando as la
presencia de glicerol dentro de la muestra seleccionada, msculo de res.
Con el residuo se practicaron los pruebas, Molisch y Benedict. Con la
prueba de Molisch se obtuvo un resultado positivo, lo que indica la
presencia de oligosacridos o polisacridos que se hidrolizan en presencia
de cido sulfrico. Mientras que en la prueba de Benedict se obtuvo un
resultado negativo, pues en la muestra problema no se encuentran
carbohidratos reductores, por lo tanto no pueden reducir el cobre formando
el precipitado caracterstico de una prueba positiva.
Los residuos del primer centrifugado se utilizan para realizar pruebas de
lpidos, protenas y cidos nucleicos. para esto se debe centrifugar
nuevamente, y el sobrenadante de esta centrifugacin se usar para
realizar las pruebas de lpidos. Dichas pruebas son Lieberman y
saponificacin. Con la prueba de Lieberman se obtuvo un resultado
negativo, demostrando as que en la muestra problema, el msculo de res,
no tena presentes molculas que dentro del ncleo del ciclo tuvieran
pentanoperhidrofenantreno. Por otro lado con la prueba de saponificacin
se obtuvo un resultado positivo, notandose una solucin translcida con
espuma (caracterstica de los jabones), con la cual se sabe que la muestra
problema contiene cidos grasos en su estructura.
Posterior a esto, con el residuo del ltimo centrifugado se deben realizar las
pruebas de protenas y cidos nucleicos. Para esto se debe volver a
 centrifugar y tomar el residuo para la prueba de protenas, la cual es la
prueba de Millon. Al realizar la prueba nos da un resultado positivo, esto se
debe a la presencia de la tirosina, pptidos o alguna protena que tenga
tirosina dentro de su estructura, todo esto debido a que el anillo fenlico
tiene un comportamiento caracterstico frente a las sales de mercurio a pH
cido, formando complejos de color rojo ladrillo, como el obtenido en la
prueba de laboratorio.
Por ltimo se toma el sobrenadante de este ltimo centrifugado para
centrifugarlo por una ltima vez, de este se desecha el sobrenadante y se
utiliza el residuo para realizar la prueba de cidos nucleicos, la prueba de
difenilamina. Con esta prueba se obtuvo un resultado positivo, pues se
genera una hidrlisis cida que remueve las bases pricas, obteniendo
como producto cidos nucleicos sin bases pricas, lo cual demuestra la
presencia de cidos nucleicos dentro de la muestra de msculo de res.

Conclusiones

Se encontr en el msculo de res el glucgeno, este es un carbohidrato de

reserva energtica formado por cadenas ramificadas de glucosa.

Se da conocer que en el msculo de res hay cidos grasos, quiere decir

que tiene lpidos saponificables, se especifica que en estos compuestos
reaccionan con una base y se obtienen las sales de los cidos grasos, es
decir jabones.

Encontramos varios el aminocido de la tirosina, que este conforma las

protenas en el musculo de la miosina y la actina.

En la muestra problema detectamos que todava hay concentracin de ADN

en el tejido.

Bibliografa

Ramrez A. Buntinx S. Metabolismo de carbohidratos, lpidos y protenas. Dpto.

de nutricin de animales y bioqumica. URL disponible en:
http://amaltea.fmvz.unam.mx/textos/alimenta/MET_CHO_LIP_PRO2.pdf.
Accedido en fecha 2 de septiembre de 2017.

Facultad de Agricultura, Estacin Experimental Agrcola y Servicio de Extensin

Agrcola. (1999). Composicin de la carne de res. La Res Informativa.
Volumen 4(1). 1-4.

Chilean Journal of Agricultural Research 69(3):366-372 (July-September 2009)

Recuperado de: http://www.scielo.cl/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0718-
58392009000300009
Albarrn, F. (27/09/2013). Protenas Musculares. Recuperado de:
https://prezi.com/a8cg8fc5xzae/proteinas-musculares/