BIOPROCESOS I

TALLER 4. ALGAS Y VIRUS

1. Escriba la clasificacin taxonmica de las algas

2. Cmo se clasifican las algas segn su tamao

Las algas viven en hbitats muy diversos. Las algas microscpicas, que constituyen el
fitoplancton, flotan en lagos y ocanos. Aunque la mayora de las algas son unicelulares y
microscpicas, algunas de 1 o 2 micrmetros de dimetro (1 micrmetro = 0,001 milmetros),
muchas son pluricelulares y visibles a simple vista. Numerosas algas unicelulares se agrupan
formando colonias. Las algas marinas son las que tienen mayor tamao y alcanzan unos 100
m. Aunque la mayora crecen en aguas dulces o saladas, algunas especies pueden crecer sobre
el suelo, los rboles y los animales.
3. Cmo se clasifican las algas segn su pigmento o coloracin

Esta es muy variable: las unas son de un verde oscuro o muy tenue, otras ofrecen desde el azul
celeste ms delicado, hasta el azul ms oscuro, y otras por fin son rojas o amarillas.

Estas diferentes coloraciones son debidas a la clorofila o a otras materias diversas, pero
siempre se encuentra la primera aunque velada por las coloraciones de las segundas.

Las clulas de las algas contienen adems de la materia colorante, otras sustancias; en unas
existe almidn, en otras inulina, en otras cristaloides de naturaleza proteica, diferencindose el
almidn de stas, del que contienen las Fanergamas que difcilmente toma color azul con el
iodo.

4. Qu tipo de compuestos coloreados o pigmentos hacen parte de las algas?

Las plantas y las algas contienen una gran variedad de pigmentos que dan lugar a los colores
que en ellas observamos. Estos pigmentos son: clorofila-a (verde intenso), clorofila-b (verde),
carotenos (naranja), xantofilas (amarillo), antocianinas (rojizo, prpura o azulado) y las
ficobilinas (rojo). El color particular que presenta un alga o un rgano vegetal depende
generalmente del predominio de uno u otro pigmento o la combinacin de ellos.

5. Describa que tipos de reproduccin celular realizan las algas.

Al tratarse las algas de unos organismos muy diversos, su biologa tambin lo es y
especialmente su forma de reproduccin. En general, se puede decir que las algas pueden
multiplicarse vegetativamente, o reproducirse sexual o asexualmente:

Las algas presentan una amplia variedad de ciclos reproductivos. En la mayora de ellos
existen dos generaciones que alternan: una sexual y otra asexual. Estas tienen uno o dos
juegos de cromosomas por clula, respectivamente. La reproduccin asexual en las algas
unicelulares suele ser por divisin simple, originndose dos o ms clulas. Si estn provistas
de flagelo tienen movilidad y se las denomina zoosporas. Por el contrario, las clulas que no
poseen flagelo son inmviles y se las conoce como aplanosporas. La reproduccin sexual
implica la formacin de gametos; estos son los vulos (oosferas) y espermacios, que se
producen en zonas especializadas (gametangios), y cuya fusin origina un cigoto que origina
un nuevo talo. El talo que produce gametos se llama comunmente gametofito, y puede haber
gametofitos masculinos y gametofitos femeninos (foto inferior: gametofito y oosferas de
Fucus).
La reproduccin asexual en las algas pluricelulares puede producirse por fragmentacin del
talo o por formacin de esporas que se originan frecuentemente dentro de las clulas. Sin
embargo, la mayora de las algas tambin poseen algn tipo de reproduccin sexual en la que
intervienen gametas. En la reproduccin asexual no existe la fecundacin; las clulas que
intervienen llaman esporas, las cuales originan un nuevo talo directamente. La formacin de
estas esporas se realiza en los esporangios (foto derecha, esporangios de Undaria pinnatifida)
y puede ser mediante mitosis (sin reducir la carga cromosomica), formando mitosporas, o
mediante meiosis, originando entonces meiosporas. Los talos que producen esporas se llaman
esporofitos.
 6. Defina que es un virus

un virus es un agente infeccioso microscpico celular que solo puede multiplicarse dentro de las
clulas de otros organismos. Los virus infectan todos los tipos de organismos, desde animales y
plantas, hasta bacterias y arqueas. Los virus son pequeos pedazos de ARN (cido ribonucleico) o
ADN (cido desoxirribonucleico), muchos estn encapsulados en una envoltura hecha a base de
protenas conocida como cpside, otros protegen su material gentico con una membrana o envoltura
derivada de la clula a la que infectan y algunos otros adems rodean su cpside con una membrana
celular.

Los virus han evolucionado para reproducirse dentro de la clula que infectan, ya que por si solos no
son capaces de hacerlo porque carecen de la maquinaria molecular necesaria. Los virus son demasiado
pequeos para poder ser observados con la ayuda de un microscopio ptico, por lo que se dice que son
submicroscpicos. Los virus se diseminan de muchas maneras diferentes y cada tipo de virus tiene un
mtodo distinto de transmisin. Entre estos mtodos se encuentran los vectores de transmisin, que
son otros organismos que los transmiten entre portadores. Los virus vegetales se propagan
frecuentemente por insectos que se alimentan de su savia, como los fidos, mientras que los virus
animales se suelen propagar por medio de insectos hematfagos.

7. Cmo se clasifican los virus segn el tipo de clula que infecta?

Virus vegetales: atacan clulas vegetales. Cpsidas de forma helicoidal.

Virus animales: atacan clulas animales. Cpsidas de forma icosadrica.
Virus bacterianos, bacterifagos o fagos: atacan bacterias. Cpsidas de forma mixta.

8. Cmo se clasifican los virus segn la estructura?

Virus helicoidales: cpsidas alargadas, donde los capsmeros se disponen de forma helicoidal
en torno al cido nucleico. Estos virus infectan clulas vegetales.
Virus (polidricos) icosadricos: cpsidas redondeadas con capsmeros triangulares. Estos
virus infectan clulas animales.
Virus mixtos, o complejos: cpsidas con una zona icosadrica, seguida de otra zona
helicoidal. Estos virus infectan bacterias.

9. Cmo se clasifican los virus segn el cido nucleico?

Tipo I: ADN bicatenario, es decir, de dos hebras de ADN.

Tipo II: ADN monocatenario, es decir, de una hebra de ADN.
Tipo III: ARN binatenario. Se transcribe de ARN a ARN mensajero.
Tipo IV: ARN monocatenario (+). No es necesaria su transcripcin. Se lee directamente como
ARN mensajero.
Tipo V: ARN monocatenario (-). El ARN vrico debe ser transcrito a ARN mensajero.
Tipo VI: ARN monocatenario (+). El ARN es transcrito a ADN utilizando una enzima
llamada transcriptasa inversa. Posteriormente, el ADN sintetizado es transcrito a ARN.

10. Describa que es un ciclo viral ltico?

El ciclo ltico se denomina as porque la clula infectada por un virus muere por rotura (lisis en
griego), al liberarse las nuevas copias virales. El ciclo ltico es el mtodo de reproduccin viral, este es
usualmente el principal mtodo de replicacin viral e involucra la destruccin de clulas infectadas. El
ciclo consta de las siguientes fases:

1. Fase de adsorcin o fijacin: El virus se une a la clula hospedadora de forma estable. La unin es
especfica, ya que el virus reconoce complejos moleculares de tipo proteico, lipoproteico o
glucoproteico, presentes en las membranas celulares.
2. Fase de penetracin o inyeccin: el cido nucleico viral entra en la clula mediante una perforacin
que el virus realiza en la pared bacteriana.
3. Fase de eclipse: en esta fase no se observan copias del virus en la clula, pero se est produciendo la
sntesis de ARN, es decir la duplicacin y transcripcin de ARN, necesario para generar las copias de
protenas de la cpsida. Tambin se produce la continua formacin de cidos nucleicos virales y
enzimas destructoras del ADN bacteriano.
4. Fase de ensamblaje: en esta fase se produce la unin de los capsmeros para formar la cpsida y el
empaquetamiento del cido nucleico viral dentro de ella.
5. Fase de lisis o ruptura: conlleva la muerte celular. Los viriones salen de la clula, mediante la rotura
enzimtica de la pared bacteriana. Estos nuevos virus se encuentran en situacin de infectar una nueva
clula.

11. Describa que es un ciclo viral lisognico?

Ciclo lisognico

Las dos primeras fases de este ciclo son iguales a las descritas en el ciclo anterior. En la fase de
eclipse el cido nucleico viral en forma de ADN bicatenario recombina con el ADN bacteriano,
introducindose en ste como un gen ms. Esta forma viral se denomina profago, o virus atenuado,
mientras que la clula infectada se denomina clula lisognica.

En este estado el profago puede mantenerse durante un tiempo indeterminado, pudiendo incluso,
reproducirse la clula, generando nuevas clulas hijas lisognicas. El profago se mantendr latente
hasta producirse un cambio en el medio ambiente celular que provoque un cambio celular, por
ejemplo, por variaciones bruscas de temperatura, o desecacin, o disminucin en la concentracin de
oxgeno. Este cambio induce a la liberacin del profago, transformndose en un virus activo que
contina el ciclo de infeccin hasta producir la muerte celular y la liberacin de nuevos virus.

12. Describa cules son las etapas de la infeccin viral

LA INFECCIN se inicia cuando entran en contacto una partcula viral y una clula susceptible. En el
caso de fagos y bacterias en un cultivo en suspensin, la interaccin entre ambos ocurre por simple
difusin, ya que partculas con el tamao de bacterias y virus se encuentran en permanente
movimiento browniano cuando estn en suspensin.
a) ADSORCIN

La mayora de los fagos se adsorben (pegan) a la pared celular de las bacterias susceptibles, pero
algunos fagos tambin son capaces de adsorberse a los flagelos, vellosidades (pili) o cpsulas
presentes en la superficie de la bacteria hospedera. Los virus animales Al igual que en el caso de los
fagos, la adhesin parece ser de tipo electrosttico y es afectada en forma importante por la presencia
de iones en medio de cultivo. Sin embargo, todava se sabe poco en relacin con la naturaleza de los
receptores celulares para los virus animales, con excepcin de aquellos receptores involucrados en la
adsorcin de los virus de la poliomielitis, la influenza y el SIDA (sndrome de inmunodeficiencia
adquirida).

b) PENETRACIN DEL VIRUS

El caso mejor estudiado de la penetracin de un virus en la clula hospedera est representado por el
caso del fago T2. La cola de este fago es contrctil y en su forma extendida consiste de 24 anillos de
subunidades que forman una funda que rodea a un elemento central. Las clulas animales carecen de
pared celular y slo estn rodeadas por la membrana plasmtica que es muy flexible y cambiante en
sus componentes estructurales. Las clulas animales continuamente introducen elementos del medio
externo por medio del proceso de pinocitosis y a travs de un procedimiento similar, pero inverso,
exportan al medio diversas substancias como enzimas, hormonas y neurotransmisores. Los virus
animales solamente pueden infectar clulas que poseen receptores especficos para el virus en
particular. Por lo tanto, se requieren diferentes receptores para diferentes tipos de virus.

13. Cmo se cuantifican los virus

Mtodos fsicos: las partculas virales pueden ser contadas directamente en el microscopio electrnico
mediante su comparacin con una suspensin estndar de partculas de ltex de tamao semejante. Sin
embargo, una preparacin relativamente concentrada de virus es necesaria para este procedimiento, y
las partculas virales infectantes no pueden ser distinguidas de las no infectantes.
Hemaglutinacin: los eritrocitos humanos, del pollo y de otras especies de animales pueden ser
aglutinados por muchos virus diferentes. La hemaglutinacin por virus ha conducido a mtodos de
conteo rpido y baratos para el anlisis viral. Ya que los virus no infectantes dan la reaccin, la prueba
mide el total de partculas virales presente.
Mtodos biolgicos: la medicin de la cantidad de virus en trminos del nmero de unidades
infecciosas por unidad de volumen se conoce como titulacin. Hay diversas formas de determinar el
ttulo de una suspensin viral, involucrando todas ellas la infeccin de un husped o clula blanco de
forma tal que cada partcula que causa una infeccin provoque una reaccin reconocible.

Los anlisis biolgicos con punto terminal dependen del nmero de animales muertos, infeccin en
animales, o efecto citoptico en los cultivos de tejido, con el virus analizado en diluciones seriadas. El
anlisis ms ampliamente utilizado para el virus infectante es el anlisis en placa. Se inoculan virus en
diluciones adecuadas sobre monocapas de clulas husped y, despus de la adsorcin, son recubiertas
con medio que contiene agar o carboximetilcelulosa para prevenir la diseminacin viral a travs del
cultivo.

14. Que son priones, qu clulas infectan y qu tipos de infecciones causan.

El prin o protena prinica es una partcula acelular, patgena y transmisible y posee la propiedad de
desnaturalizar otras protenas. Teoras ms recientes sugieren que los priones son protenas
modificadas bajo circunstancias que favorecen su cada a un nivel energtico muy estable,
confirindole nuevas propiedades biolgicas, tales como ser insolubles, resultar inmunes a las
proteasas y cambiar su configuracin tridimensional. 7, 8

Adems cuentan entre sus propiedades las siguientes:

No contiene ADN ni ARN.

Carece de cuerpos de inclusin.
Perodo de incubacin prolongado (meses, aos, dcadas).
 No ocasiona respuesta inflamatoria.
No genera respuesta antignica.
Curso crnico progresivo.
Invisible al microscopio electrnico

Entre sus manifestaciones clnicas sobresalen: demencia, ataxia, insomnio, paraplejas, parestesias y
conductas anormales. El principal hallazgo anatomopatolgico es el aspecto espongiforme del cerebro
de animales y personas infectados, causado por la acumulacin de las protenas prinicas en las
neuronas, donde forman placas amiloides. Atacan las neuronas.

15. Describa los siguientes mtodos de conservacin de microorganismos:

a. Subcultivo
b. Desecacin en alginato de calcio
c. Mantenimiento bajo capa de aceite
d. Congelacin
e. Desecacin en celulosa
f. Ultracongelacin
g. Desecacin en suelo
h. Liofilizacin

a) El subcultivo; que consiste en el repique peridico del cultivo en un medio nutritivo fresco. Una vez
desarrollados los cultivos, se mantienen a 4C durante lapsos que van entre 15 das y dos meses. Sin
embargo esta tcnica presenta algunos inconvenientes, entre los cuales estn: Incremento de la
posibilidad de mutacin con cada transferencia, riesgo de contaminacin y alteraciones en el medio de
cultivo, durante la etapa en fro, que produce una desecacin gradual del mismo.

b)La desecacin en alginato e calcio, es un procedimiento bastante eficaz, en el cual las celuas se
encuentran en una matriz de alginato y la eliminacin del agua se hace con tratamiento con soluciones
hipertnicas sucesivas y posterior desecacin al aire hasta que se pierde un 70% de su contenido en
agua.

c) Mantenimiento bajo capa de aceite, consiste en cubrir completamente el cultivo despus de su

desarrollo en un medio slido, con una capa de aceite mineral o vaselina estril; sin embargo algunos
autores sostienen que en estas condiciones, los microorganismos pueden seguir reproducindose y
podran aparecer mutaciones.

d) La congelacin es una tcnica muy popular, ya que la actividad metablica de la clula se reduce
considerablemente a muy bajas temperaturas, lo cual la convierte en un mtodo muy recomendable
para preservacin a corto y largo plazo. Las clulas a congelar pueden ser resuspendidas directamente
en un agente crio protector o se puede agregar el mismo como aditivo al medio de cultivo. El ms
utilizado es glicerol al 10% o el dimetil sulfxido, aunque tambin funcionan la sacarosa, glucosa,
lactosa etc. Estos agentes protegen a los microorganismos durante el proceso, al reducir la velocidad
de congelacin de los componentes de la clula microbiana. Se recomienda conservar las clulas a
temperaturas por debajo de los -70C, ya que a temperaturas ms altas ocurren recristalizaciones, que
pueden ser letales para las clulas.

e) La desecacin de las clulas vegetativas microbianas paraliza su actividad metablica. Este proceso
fsico se utilizaba ampliamente antes del desarrollo de la refrigeracin. El tiempo de supervivencia de
los microorganismos despus de desecados depende de muchos factores, entre ellos la especie
microbiana. En general, los cocos Gram (-) son ms susceptibles a la desecacin que los cocos Gram
(+). Las endoesporas bacterianas son muy resistentes a la desecacin pudiendo permanecer viables
indefinidamente.

f) La ultracongelacin es un mtodo de conservacin de muestras biolgicas que se basa en el

descenso de la temperatura de la muestra (de -40 C a -86 C) en un corto periodo de tiempo (menor a
cuatro horas), lo cual evita el desarrollo de microorganismos descomponedores y al mismo tiempo
detiene toda actividad bioqumica en la muestra congelada, manteniendo la integridad de las clulas.

Las muestras biolgicas que se pueden conservar a temperaturas muy bajas son:

- Cepas microbianas
- Sangre
- Piel
- Msculos
- Alimentos
- Invertebrados completos con tamao menor a 15 milmetros

g) La desecacin en suelo, es donde se detiene el crecimiento debido a la eliminacin del agua

disponible como por ejemplo por medio de la arena.

h) La liofilizacin es uno de los mtodos ms empleados para la conservacin de microorganismos

debido a sus numerosas ventajas, entre la que resalta tiempo de supervivencia prolongado. La
seleccin de los aditivos que permitan lograr tanto una buena apariencia como una estabilidad
prolongada del material liofilizado es uno de los aspectos ms importantes a tener en cuenta al
emplear este mtodo.
La liofilizacin es un mtodo eficaz, que se lo utiliza para la conservacin de los alimentos, debido a
que los microorganismos provocan el deterioro del mismo causando enfermedades, ya que necesitan
agua para desarrollarse.