UNIVERSIDAD NACIONAL

PEDRO RUIZ GALLO

Facultad de Medicina Humana

EFECTOS DE LAS SOLUCIONES DE CLORURO

DE SODIO Y GLUCOSA A DIFERENTES
CONCENTRACIONES, EN ERITROCITOS DE
ESTUDIANTES DE MEDICINA HUMANA DE LA
UNIVERSIDAD NACIONAL PEDRO RUIZ GALLO

INTEGRANTES CDIGO
1. UGAZ CALDERN, Juan Carlos 155697F
2. VARGAS SANTA CRUZ, Kiara Carolina 160648J
3. VELSQUEZ SAMILLN, Ricardo Felipe 152271H
4. VERA GRANDEZ, Daniel Orlando 152272D
5. VIERA EXEBIO, Ftima Anggelyna 154551H
6. ZAPATA GARCA, Diego Alberto 160649F
7. ZEGARRA RODRGUEZ, Cynthia Alejandra 152273K

Docente
Dr. Julio Tello Lazo

Lambayeque Per
Setiembre de 2017
EFECTOS DE LAS SOLUCIONES DE CLORURO
DE SODIO Y GLUCOSA A DIFERENTES
CONCENTRACIONES, EN ERITROCITOS DE
ESTUDIANTES DE MEDICINA HUMANA DE LA
UNIVERSIDAD NACIONAL PEDRO RUIZ GALLO
 Contenido
I. INTRODUCCIN .................................................................................................... 1
I.1. ANTECEDENTES HISTRICOS ....................................................................... 1
I.2. MARCO TERICO .......................................................................................... 8
I.3. IMPORTANCIA .............................................................................................. 14
I.4. PROBLEMA .................................................................................................... 15
I.5. OBJETIVOS .................................................................................................... 16
II. MATERIALES Y MTODOS............................................................................... 17
II.1. MATERIALES ................................................................................................ 17
II.1.1. Material biolgico: ................................................................................... 17
II.1.2. Material no biolgico ............................................................................... 17
II.2. MTODOS ...................................................................................................... 17
II.2.1. Para la extraccin de sangre ..................................................................... 17
II.2.2. Para la preparacin de las muestras de sangre en las soluciones.............. 17
II.2.3. Para la observacin al microscopio .......................................................... 18
III. RESULTADOS ................................................................................................... 19
IV. DISCUSIONES ................................................................................................... 20
V. CONCLUSIONES .................................................................................................. 21
VI. RECOMENDACIONES ..................................................................................... 22
VII. REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS ................................................................ 23
ANEXOS ........................................................................................................................ 24
 I. INTRODUCCIN

I.1. ANTECEDENTES HISTRICOS

El descubrimiento del fenmeno osmtico y los primeros estudios al respecto

estn unidos a la historia de la creacin de las ciencias del siglo XIX: la biologa, la
qumica y la fisicoqumica.

La biologa, que surge como ciencia prcticamente en 1800, cuando Marie-

Franois-Xavier Bichat (1771-1802) define la vida como "un conjunto de funciones que
resisten a la muerte", entendida sta como el comportamiento inerte de la materia. Entre
los avances que registr la biologa en la primera mitad del siglo XIX se encuentra el
descubrimiento de la smosis

A finales del siglo XIX, el desarrollo de la qumica recibe en Rusia un decisivo

impulso con los trabajos de D. I. Mendeleiev (1834-1907), quien da a conocer la
clasificacin peridica de los elementos. Este descubrimiento impuso en la comunidad
cientfica europea un gran esfuerzo de comprensin y anlisis de datos y, sobre todo,
una disciplina cientfica en la que dominaba el sentido de la objetividad de la naturaleza
y descartaba el sentido positivista de la poca. Este espritu fue el que posteriormente
domin la fsica atmica de principios del siglo XX y que permiti la evolucin hacia la
qumica cuntica.

La fisicoqumica por su parte surge como ciencia a finales del siglo XIX y es el
resultado de las investigaciones de la dinmica de las reacciones termoqumicas, la
catlisis, la electrlisis y, sobre todo, la fsica de soluciones. Todo ello se conjuga con la
aceptacin de la teora atomista.

A principios del siglo XIX los qumicos pretendan dar una explicacin al
comportamiento de los gases a travs de sus experimentos. El objetivo de estos estudios
era la comprensin del tomo. En ese entonces, Thomas Graham (1805-1869), padre de
la qumica de los coloides, junto con Franois Marie Raoult (1830-1901), fundador de la
Teora de las Soluciones, sentaron las bases de la fisicoqumica como disciplina
cientfica. Los estudios de estos qumicos coinciden con la corriente de estudio de los
fisilogos, quienes estaban preocupados por entender los procesos de transporte en las

1
clulas de las plantas y los animales y cuyas investigaciones fueron decisivas para el
descubrimiento de la smosis. Las dos corrientes, tanto la del estudio de los gases y las
soluciones, como la del estudio de la clula y sus intercambios, se entrecruzan y se
influyen mutuamente.

El descubrimiento de la difusin fue realizado por Graham mediante

experimentos efectuados entre los aos de 1828 y 1833. Graham descubri la difusin
de los lquidos y estuvo muy cerca de emitir la ley que ahora conocemos como Ley de
Fick, pero Graham no acert, porque la Ley de Fick implica una relacin lineal entre el
flujo de difusin y la diferencia de concentraciones que produce dicho flujo; l buscaba
una relacin ms complicada o espectacular como la que encontr en otro de sus
experimentos con gases, en los que Graham haba demostrado que el flujo de difusin
de un gas a travs de un tapn poroso es inversamente proporcional a la raz cuadrada
de las densidades de los gases empleados. Tan impresionante fue este resultado para su
poca, que le vali su eleccin para ingresar a la Royal Society a la edad de treinta aos.

As estaban las cosas cuando entr en escena Adolf Eugen Fick (1829-1901),
fisilogo alemn de reconocido prestigio cientfico. Fick participaba del espritu
cientificista de la poca y pretenda combinar las matemticas con la medicina, para
sealar que las ciencias bsicas deben ser usadas para fundamentar la medicina. Estos
conceptos de Fick fueron influenciados por Carl Ludwig (1816-1895).

Los estudios de la difusin los realiz Fick en Zurich en 1855 cuando tena 26
aos de edad. Este investigador plante los experimentos de Graham sobre bases
cuantitativas y descubri la ley de la difusin un tanto casualmente. Esto ocurri cuando
Fick sugiri en su publicacin una comparacin de la difusin de un material disuelto
con la Ley de Ohm para conductores elctricos y tambin con la ley de la transferencia
de calor en conductores sometidos a una diferencia de temperaturas. Esta confrontacin
daba la clave para la formalizacin matemtica de la difusin.

Pero la presentacin de este trabajo produjo a Fick grandes incertidumbres y

escribi entonces una obra con el fin de reforzar sus ideas de la difusin; este nuevo
trabajo combinaba argumentos de la teora cintica de los gases, con la que reconoca a
la difusin como un proceso de dinmica molecular. Pero los casos por l tratados eran
procesos biolgicos, considerados por la fisiologa y las ciencias mdicas el primer

2
texto de biofsica. Esto ocurri en 1856. Hasta ese momento Fick solo sugera una Ley,
haciendo notar que la presencia de un flujo de difusin es debido a una diferencia de
concentraciones, de tal manera que las dos cantidades en cursivas son directamente
proporcionales y, la constante de proporcionalidad es, precisamente, una cantidad que
depende de la naturaleza de las sustancias empleadas. Esta constante es similar a la
resistencia elctrica, que relaciona la diferencia de potencial entre dos puntos y el flujo
de corriente presente entre ellos. Sin embargo, fue la analoga con la ley de difusin del
calor como Fick trat de demostrar que efectivamente la difusin molecular segua el
mismo patrn matemtico. Fick encontr en esta formulacin la clave para expresar la
ley del flujo de difusin, que se ajustaba a una descripcin muy exacta de algunos de los
experimentos de la difusin. Pero despus de todo, su triunfo no fue completo, porque
surgi una dificultad relacionada con los datos obtenidos por Graham, los cuales
seguan un comportamiento no lineal, y mostraban que la analoga de la difusin con la
conductividad trmica no era muy exacta. Para aclarar este punto, motivo de polmica,
Fick se puso a trabajar de nuevo en el laboratorio repitiendo los experimentos de
Graham e, ideando un nuevo mtodo para demostrar dnde estaba la discrepancia
descubri que resida en la geometra de los dispositivos experimentales que us
Graham, los cuales introducen efectos de fronteras (efectos de paredes), desvirtuando la
relacin lineal vlida para un medio homogneo. Con lo anterior, el camino para la
aceptacin plena de la Ley de Fick quedaba establecido. La presentacin de los trabajos
de Fick caus conmocin inmediata en la comunidad cientfica. Sus trabajos fueron
realizados con tal discrecin que cuando los dio a conocer se encontr de sbito con que
el tratamiento cuantitativo de la difusin ya estaba hecho.

No obstante estos progresos, tanto los experimentos de Graham como los

conceptos derivados del tratamiento de Fick no quedaban aclarados del todo debido a
que el concepto mismo de flujo de difusin era impreciso y provocaba grandes
confusiones cuando se relacionaba con experimentos donde haba agitacin masiva de
un gas o de un lquido. Este asunto fue vivamente discutido en 1860 por toda la
comunidad cientfica interesada, y fue J. C. Maxwell (1831-1879) quien dio la clave de
la solucin al problema, al sealar que la difusin se debe tanto al movimiento de
translacin de las molculas como a la agitacin masiva en un movimiento convectivo;

3
as, Maxwell introdujo el concepto de velocidad relativa, donde el flujo de difusin debe
definirse.

El descubrimiento de la smosis es anterior al de la difusin, antecedida esta a su

vez, por un mundo reinante de confusiones. La primera luz es dada en 1748 por J. A.
Nollet (1700-1770) cuando era profesor de fsica experimental en la Universidad de
Navarra. Nollet obtuvo una membrana de vejiga animal, colocando alcohol de un lado y
agua del otro, y observ que el agua flua a travs de la vejiga para mezclarse con el
alcohol, pero de ninguna manera el alcohol se mezclaba con el agua. Lo que Nollet
descubri fue la existencia de membranas semipermeables, ya que permitan el paso de
uno de los componentes de una solucin y evitaba la difusin de otros.

El descubrimiento de la smosis en membranas semipermeables fue realizado

por Henri Dutrochet (1776-1847), considerado como uno de los grandes fisilogos del
siglo XIX, quien tambin tiene relacin con las primeras observaciones que condujeron
al descubrimiento de la fotosntesis. Al igual que Fick y Ludwig, Dutrochet profes la
creencia de que las leyes fundamentales de la fsica y de la qumica explicaban todos los
procesos bsicos de la vida. Aseguraba que deba haber similitudes en los procesos
fsicos y qumicos de todos los organismos, fueran plantas o animales.

Dutrochet descubri el fenmeno de la smosis cuando observ que la difusin

del solvente a travs de una membrana semipermeable ocurra siempre de la solucin de
menor concentracin de un soluto, que no puede pasar, hacia la solucin de mayor
concentracin; adems, el solvente que fluye es capaz de desarrollar una presin sobre
la membrana a la que denomin presin osmtica. Dutrochet construy el primer
dispositivo experimental para observar la presencia de la presin osmtica. Este
descubrimiento lo dio a conocer en 1828 cuando declar:

Este descubrimiento que he hecho pertenece a una clase nueva de

fenmenos fsicos que sin duda alguna intervienen fuertemente en los
procesos vitales.
Con lo anteriormente expresado Dutrochet daba la pauta para la concepcin de
una clula viva rodeada de una membrana semipermeable que absorbe agua de sus
alrededores a travs del flujo osmtico, al mismo tiempo que se interrumpe la difusin
de ciertas sustancias de la solucin.

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 No obstante la importancia de este descubrimiento, la medida cuantitativa de la
presin osmtica fue elaborada 50 aos ms tarde, en 1877, por el botnico Wilhelm
Pfeffer (1845-1920). Pfeffer es otro de los fisilogos que son mencionados junto a su
maestro Julius von Sachs (1832-1897), en relacin al descubrimiento de la fotosntesis.

Curiosamente, y a pesar de los antecedentes fisiolgicos bien conocidos de la

smosis, Pfeffer no utiliz en sus experimentos membranas biolgicas sino artificiales,
preparadas en el laboratorio por medio del depsito de un electrolito, de ferrocianuro de
cobre sobre un dispositivo poroso. En ese entonces, las membranas artificiales haban
sido descubiertas por Troube en 1867 y usadas extensivamente entre 1870 y 1920. Con
estas membranas se consiguieron medidas aceptables de la presin osmtica de
soluciones de azcar y de algunas molculas orgnicas, logrndose presiones osmticas
de un poco ms de 200 atmsferas.

En su experimento, Pfeffer utiliz agua como solvente y sacarosa como soluto.

Observ que la presin osmtica de una solucin es directamente proporcional a su
concentracin. Ahora bien, Pfeffer desarroll este experimento a temperatura constante
y concluy que si modificaba la temperatura, utilizando la misma solucin (sin cambiar
la concentracin), la variacin de la presin osmtica tambin era directamente
proporcional a la temperatura. Este comportamiento de la presin osmtica es idntico
al de un gas ideal.

J. H. Van't Hoff (1852-1911) fue quien aventur una interpretacin comparativa

de la presin osmtica con la presin ejercida por un gas. De esta forma, el estudio de la
smosis se escapa de las manos de los fisilogos y cae en las de los fisicoqumicos.
Primero Van't Hoff y luego Josiah Willard Gibbs (1839-1903) contribuyeron a dar
unidad a la teora de las soluciones que incorpora el comportamiento osmtico como
una de las propiedades de las soluciones. Esta teora tambin integra los trabajos
realizados por Raoult entre los aos de 1875 y 1890.

Antes de la formalizacin de la teora de las soluciones, las leyes de Raoult se

daban como hechos empricos, lo mismo que la ley de la smosis; de manera que la
conexin que hizo Van't Hoff entre la smosis y la teora cintica impresion
muchsimo a la colectividad y fue considerada como una de las explicaciones ms
sugestivas de su poca. La teora de Van't Hoff de 1886 fue resumida as:

5
 Toda materia disuelta ejerce sobre una pared semipermeable una
presin osmtica igual a la presin que sera ejercida en el mismo
volumen, para un nmero igual de molculas en estado gaseoso.
Tales ideas sobre la interpretacin de la presin osmtica ganaron gran
popularidad. Sin embargo, fueron abandonadas por la comunidad cientfica a principios
del siglo XX por considerarse errneas. La presin osmtica no es el resultado del
choque de las molculas de la sustancia disuelta contra un tabique poroso, sino que su
interpretacin debe apreciarse como la presin necesaria para compensar un dficit
energtico que se produce por la disolucin espontnea del soluto en el solvente. Esta
explicacin apareci cuando los trabajos de Van't Hoff quedaron entendidos dentro del
formalismo de la teora termodinmica qumica dada por Gibbs.

Es necesario hacer notar que el siglo XIX concluye con la aparicin de la

fisicoqumica como ciencia. Esta establece, la teora de las soluciones en general, as
como las relaciones entre el equilibrio y las condiciones exteriores de un sistema
termodinmico.

En 1883, Hamburger inicio una larga serie de experimentos usando eritrocitos

humanos y de animales. Verificaba experimentalmente las presiones osmticas relativas
de las soluciones comparando al mismo tiempo sus efectos biolgicos. En ese sentido el
glbulo rojo del mamfero es uno de los instrumentos ms adecuados.

En presencia de soluciones acuosas de dbil actividad osmtica se hincha, toma

forma esfrica por ingreso de agua. Si el ingreso de agua continua termina por provocar
la apertura de la membrana sola. En presencia de soluciones acuosas de alta actividad
osmtica las molculas de agua salen provocando un encogimiento de los glbulos rojos
llamado crenacin. El experimento se ha utilizado reiteradamente con el fin de poner de
manifiesto que las sustancias por su comportamiento se clasifican en: clase I, todas
aquellas sustancias que a una determinada concentracin mantienen la existencia del
eritrocito por ejemplo: glucosa, cloruro de sodio, cloruro de calcio, protenas cargadas,
etc; la clase II, todas aquellas sustancias que independientemente de su concentracin
destruyen al eritrocito por ejemplo: urea, glicerol, etc. Las sustancias de Clase I se
clasifican a su vez dependiendo de la concentracin y de la manera que afectan el
volumen del eritrocito en isotnicas, hipotnicas e hipertnicas.

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 Como otro experimento similar a este, se tiene que, en Junio de 2012, fue
presentado en la Facultad de Ciencias Exactas y Naturales de la Universidad de
Antioqua, el trabajo de investigacin smosis en glbulos rojos por Yenny Lpez,
Dairon Machado y Natal Duque. El informe tuvo como objetivo demostrar las
propiedades de la membrana de los glbulos rojos con respecto al intercambio de soluto
con el medio y por las concentraciones de ste, lo cual les permiti observar la actividad
dada por las modificaciones de concentraciones y solutos en el exterior celular de los
glbulos rojos presentes en las muestras de sangre. Experimentaron con NaCl, con unas
concentraciones de 0.1%, 0.2%, 0.4%, que son hipotnicas en relacin a la
concentracin de sal en la sangre, en la cual observaron lisis celular, explicado
tericamente por la gradiente de concentracin de solutos, trasladando el agua del
medio extracelular hacia el interior de las clulas.

Con las soluciones de NaCl al 0.7% y 0.9% no se observ reaccin alguna, salvo
por una precipitacin de los eritrocitos, ya que stas concentraciones son similares a la
concentracin salina en la sangre. Se observaron los mismos fenmenos con soluciones
de glucosa.

Al organizar los datos obtenidos se concluy que las reacciones de la clula ante los
medios hipertnicos, isotnicos e hipotnicos se hacen evidentes por medio de cambios
observables, como en el caso de los eritrocitos. Mientras conservaran su forma, tendan
a precipitar, en cambio si presentaban rompimiento, se evidenciaba en el color rojo
indicando que la hemoglobina que contenas haba sido liberada. Para evidenciar una
crenacin, dado que tambin precipitar, sera preciso una observacin con microscopio
ptico para detallar si presentan la forma trgida o si, por el contrario, se han
deshidratado. Al realizar el experimento tambin se evidenci que la concentracin
isotnica de NaCl en la sangre es de 0.9%, y de glucosa de aproximadamente 5%, y que
esto es un dato importante para usos mdicos, pues determina las concentraciones de los
sueros intravenosos con que se asiste a los pacientes en los hospitales.

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I.2. MARCO TERICO
La sangre es un fluido que se compone de una sustancia intercelular lquida,
llamada plasma, en la cual se encuentran en suspensin los elementos formes:
eritrocitos, leucocitos y plaquetas. Tiene el aspecto de un lquido viscoso de color rojo,
con una densidad promedio de 1.056 a 1.066 g/cm3. En el cuerpo tiene una temperatura
de 38 C y un pH entre 7,35 y 7,45. En el adulto normal, el volumen de la sangre es de
alrededor de 6 litros, lo que equivale aproximadamente al 8% del peso corporal.

El plasma, el lquido de la sangre, constituye el 55% del total del volumen de

ella, compuesto aproximadamente por un 90% de agua, un 7% de protenas como el
fibringeno, la albmina y globulinas, entre otras, y un 3% de sales inorgnicas. La
sangre tiene una gran cantidad de funciones, entre ellas el transporte de factores
humorales y clulas del sistema inmunitario, transporte de nutrientes y oxgeno hacia las
clulas, transporte de hormonas y agentes reguladores de las clulas endocrinas a las
distintas clulas blanco, regulacin de la temperatura corporal, equilibrio cido-bsico,
etc.

Dentro de las clulas sanguneas encontramos los eritrocitos, hemates o

glbulos rojos el cual tiene como funcin primaria mantener en circulacin una elevada
concentracin de hemoglobina, esencial para el transporte de oxgeno y CO2. Tambin
encontramos los leucocitos o glbulos blancos que participan en el sistema de defensa
del organismo y a las plaquetas o trombocitos: elementos formes de la sangre que
participan en la prevencin de las hemorragias, a travs de los mecanismos de la
coagulacin, y en el mantenimiento de la integridad del endotelio vascular.

Las principales funciones consisten en suministrar oxgeno a los tejidos y en

ayudar en la eliminacin de dixido de carbono y protones formados por el
metabolismo hstico. De este modo, tiene una estructura mucho ms simple que casi
todas las clulas del ser humano; en esencia est compuesto por una membrana que
rodea a una solucin de hemoglobina (esta protena forma alrededor de 95% de la
protena intracelular del eritrocito). No hay organelos intracelulares, como mitocondrias,
lisosomas o aparato de Golgi. Los eritrocitos del ser humano, al igual que casi todos los
eritrocitos de animales, son no nucleados. Sin embargo, el eritrocito no es inerte desde
el punto de vista metablico. Se sintetiza ATP a partir de gluclisis, y es importante en

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procesos que ayudan al eritrocito a mantener su forma bicncava, y en la regulacin del
transporte de iones (p. ej., mediante la Na+-K+-ATPasa y la protena de intercambio de
anin) y de agua hacia adentro y afuera de la clula. La forma bicncava aumenta la
proporcin entre superficie y volumen del eritrocito, lo que facilita el intercambio de
gases. El eritrocito contiene componentes de citoesqueleto que desempean una
importante funcin en la determinacin de su forma. Su membrana es una bicapa
compuesta de alrededor de 50% de lpido y 50% de protena.

El ndice de entrada de glucosa hacia los eritrocitos es mucho mayor que el que
se calculara para la difusin simple. Ms bien, es un ejemplo de difusin facilitada. La
protena especfica involucrada en este proceso se llama transportador de glucosa
(GLUT1) o glucosa permeasa; el proceso de entrada de glucosa hacia los eritrocitos
tiene gran importancia porque es el principal aporte de combustible para estas clulas.
Se han aislado alrededor de 12 transportadores de glucosa diferentes, pero relacionados,
a partir de diversos tejidos del ser humano; al contrario del transportador eritroctico,
algunos de stos son dependientes de insulina (p. ej., en msculo y tejido adiposo). Hay
considerable inters por estos ltimos tipos de transportador porque los defectos en su
reclutamiento a partir de sitios intracelulares hacia la superficie de clulas de msculo
esqueltico pueden ayudar a explicar la resistencia a la insulina desplegada por
pacientes con diabetes mellitus tipo 2.

Cuando una sustancia se disuelve en agua, la concentracin de molculas de

agua en la solucin es inferior al que se encuentra en el agua pura, porque la adicin de
soluto ocasiona que dicha solucin ocupe un mayor volumen en comparacin con el
agua sola. Si la solucin se coloca en un lado de una membrana que es permeable al
agua pero no al soluto y se coloca un volumen igual de agua del otro lado, las molculas
de agua se difunden hacia un menor gradiente de concentracin (qumico) en la
solucin. Este proceso se denomina smosis y consiste en la difusin de molculas de
solvente hacia la regin en la cual hay concentraciones ms elevadas del soluto para el
cual la membrana es impermeable. Este es un importante factor en los procesos
fisiolgicos. La tendencia para el desplazamiento de molculas de solvente a la regin
con mayor concentracin de solutos puede evitarse al aplicar presin a la solucin ms
concentrada. La presin necesaria para evitar la migracin de solvente es la presin
osmtica de la solucin.

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 La presin osmtica (al igual que la disminucin de la presin del vapor, la
disminucin del punto de congelacin y la elevacin del punto de ebullicin) depende
del nmero ms que del tipo de partculas en una solucin; esto constituye una
propiedad coligativa fundamental de las soluciones. La concentracin de partculas con
actividad osmtica suele ser expresada en trminos de osmoles. Un osmol (osm)
equivale al peso molecular en gramos de una sustancia dividida entre el nmero de
partculas en movimiento libre que cada molcula libera a la solucin. Para las
soluciones biolgicas, ms a menudo se utilizan los miliosmoles (mOsm; 1/1 000 de 1
osm). Si el soluto es un compuesto no ionizante, como la glucosa, la presin osmtica
es una funcin del nmero de molculas de glucosa presentes. Si el soluto se ioniza y
forma una solucin ideal, cada ion es una partcula con actividad osmtica. Por ejemplo,
el NaCl podra disociarse en iones de Na+ y Cl, de forma que cada mol en la solucin
proporcionara 2 osm. Un mol de Na2SO4 se disociara en Na+, Na+ y SO4 2 originando
3 osm. Sin embargo, los lquidos corporales no son soluciones ideales y aunque la
disociacin de los electrolitos fuertes suele ser completa, el nmero de partculas libres
que ejercen un efecto osmtico es reducido a causa de las interacciones entre los iones.
Por tanto, la capacidad osmtica est determinada ms por la concentracin eficaz
(actividad) que por el nmero de equivalentes de un electrolito en una solucin. Esto
explica, por ejemplo, que 1 mmol de NaCl por litro en los lquidos corporales
contribuya con un poco menos de 2 mOsm de partculas con actividad osmtica por
litro. Mientras ms concentrada sea la solucin, mayor ser la diferencia para ser una
solucin ideal.

La concentracin osmolal de una sustancia en un lquido se mide por el grado en

el cual disminuye el punto de congelacin, en donde 1 mol de una solucin ideal
disminuye el punto de congelacin 1.86C. El nmero de miliosmoles por litro en una
solucin equivale a una disminucin del punto de congelacin dividido entre 0.00186.
La osmolaridad es el nmero de osmoles por litro de solucin (p. ej., plasma), en tanto
que la osmolalidad es el nmero de osmoles por kilogramo de solvente. Por tanto, la
osmolaridad se ve afectada por el volumen de diversos solutos en la solucin y por la
temperatura, en tanto que la osmolalidad no se afecta. Las sustancias con actividad
osmtica en el cuerpo se disuelven en agua y la densidad de esta es de 1, de forma que

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las concentraciones osmolales pueden expresarse en trminos de osmoles por litro
(osm/L) de agua.

Aunque una solucin homognea contenga partculas con actividad osmtica y

pueda decirse que tiene presin osmtica, solo puede ejercer una presin osmtica
cuando se encuentra en contacto con otra solucin a travs de una membrana permeable
al solvente pero no al soluto.

El trmino "isotnico" significa que la osmolaridad de la solucin a un lado de la

membrana es la misma que la del otro lado de la membrana. La osmolaridad del lquido
isotnico se aproxima a la osmolaridad del plasma en suero (285-295 mOsm/l). Los
lquidos isotnicos se utilizan para hidratar el compartimento intravascular en
situaciones de prdida de lquido importante, como deshidratacin, hemorragias, etc.
Como norma general es aceptado que se necesitan administrar entre 3 y 4 veces el
volumen perdido para lograr la reposicin de los parmetros hemodinmicos deseados.

Las soluciones hipotnicas son las que tienen una osmolaridad inferior a la de
los lquidos corporales y, por tanto, ejercen menos presin osmtica que el LEC. La
administracin excesiva de lquidos hipotnicos puede llevar a una deplecin del LIV,
hipotensin, edema celular y dao celular, por lo que debe ser controlada su
administracin. El uso de estas soluciones es poco frecuente y son tiles para hidratar a
un paciente, aumentar la diuresis y valorar el estado renal.

Las soluciones hipertnicas son las que tienen una osmolalidad superior a la de
los lquidos corporales y por tanto, ejercen mayor presin osmtica que el LEC. La alta
osmolaridad de estas soluciones cambia los lquidos desde el LIC al LEC. Estas
soluciones son tiles para tratamiento de problemas de intoxicacin de agua (expansin
hipotnica), que se produce cuando hay demasiada agua en las clulas. La
administracin rpida de soluciones hipertnicas pueden causar una sobrecarga
circulatoria y deshidratacin.

Una de las patologas importantes son las deshidrataciones agudas (DA), trmino
que se emplea para designar el estado clnico consecutivo a la prdida de agua y
solutos. Existe un discreto predominio en varones. En cuanto a la edad, el 75-80% de
los casos se produce en lactantes menores de 12 meses y ms del 90% por debajo de los
18 meses. Las causas ms frecuentes de DA son las digestivas, y dentro de stas, la

11
gastroenteritis aguda (GEA). En menor proporcin, cabe considerar los vmitos, los
sndromes de malabsorcin, etc. Entre las causas extradigestivas, mucho ms raras,
podemos considerar el golpe de calor, las metablicas (diabetes mellitus o inspida,
tubulopatas, sndrome adrenogenital congnito) y las prdidas excesivas de agua y
electrolitos (quemaduras, mucoviscidosis, polipnea, hipertemia, etc.).

Cuando se producen alteraciones en los volmenes o en la composicin de los

espacios hdricos corporales se ponen en marcha mecanismos reguladores (sed,
barorreceptores carotdeos y auriculares, sistema renina-angiotensina-aldosterona,
ADH, etc.), que inmediatamente corrigen el trastorno inicial. La deshidratacin se
clasifica segn las variaciones que se producen en el peso y la composicin del plasma:
en cuanto a la concentracin del plasma basado en los valores sricos de sodio:
hipotnica (< 130 mEq/l), isotnica (130-150 mEq/l) e hipertnica (> 150 mEq/l). En la
primera y la segunda la deshidratacin es eminentemente extracelular, mientras que en
la ltima es intracelular.

Segn el equilibrio cido-base se puede producir acidosis metablica por prdida

de bicarbonato o alcalosis metablica en los vmitos incoercibles

La DA se reconoce clnicamente por la inspeccin y la exploracin,

confirmndose con el peso del paciente y la realizacin de un ionograma srico. El
sndrome clnico de la DA puede dividirse en tres apartados fundamentales: la prdida
de peso, que permite la exacta valoracin de la DA. Al ser el agua el componente ms
importante del organismo, una brusca prdida de peso supone obviamente una prdida
de este elemento. La valoracin de la gravedad de la DA se basa en la prdida ponderal:
prdida < 5% del peso, deshidratacin leve; prdida 5-10% del peso, deshidratacin
moderada; prdida > 10% del peso, deshidratacin grave; los signos de deshidratacin
extracelular, que se presentan preferentemente en la DA isotnica e hipotnica. Dentro
de stas se incluyen el signo de pliegue positivo y persistente, facies de sufrimiento con
cerco periocular, ojos hundidos, mirada extraviada, aspecto txico, sensacin de
gravedad, frialdad de la piel, prdida de turgor, depresin de la fontanela anterior,
descenso de la presin arterial (PA) como expresin de la repercusin que tiene la
prdida de LEC sobre la volemia, lo cual se plasma en un pulso dbil y rpido, con
extremidades fras y signos ms o menos acusados de shock; oliguria como

12
consecuencia de la repercusin sobre el filtrado glomerular, lo que constituye un
mecanismo de ahorro por parte del organismo para no perder ms agua ni solutos. La
escasa orina emitida es pobre en sodio, potasio y cloro y rica en urea. Y por ltimo, los
signos de deshidratacin intracelular que se presentan preferentemente en la DA
hipertnica. Dentro de stos se incluyen: oliguria con aumento de la ADH; gran
sensacin de sed, y sequedad de las mucosas; signos de sufrimiento cerebral
(hiperreflexia, irritabilidad, convulsiones, trastornos de la conciencia, etc.)

En cuanto al diagnstico se puede realizar con una historia clnica detallada y

una exploracin fsica adecuada, que puede complementarse con datos de laboratorio.
En el transcurso de la enfermedad hay que tener en cuenta la cantidad y el tipo de
ingesta (agua, electrolitos, etc.), la cantidad y el tipo de prdidas (miccin, diarrea,
vmitos, etc.). Las variaciones en el peso nos permitirn calcular las prdidas y
determinar la gravedad de la deshidratacin. Estos datos permiten precisar si se trata de
una DA leve, moderada o grave. En los nios que presenten una DA grave es necesario
realizar con la mayor urgencia una serie de exmenes complementarios que permitan
confirmar el diagnstico bioqumico. Eventualmente, se debe practicar un
electrocardiograma (ECG), un electroencefalograma (EEG) u otras determinaciones que
se consideren oportunas en casos concretos. La determinacin de la natremia nos va a
permitir definir si la DA es isonatrmica, hiponatrmica o hipernatrmica.

Para el tratamiento se puede optar por rehidratacin oral por medio de sales, son
vlidas para cualquier tipo de deshidratacin (isotnica, hipertnica o hipotnica), y en
los grados de deshidratacin leve y moderada. Se pueden utilizar a cualquier edad, y son
preferibles frente a las soluciones caseras, expuestas a mayor nmero de errores en su
composicin y dilucin.

En el caso de DA moderada y grave deberemos restituir rpidamente la volemia

para impedir o tratar la situacin de shock, reponer el dficit de agua y de electrolitos,
teniendo en cuenta las prdidas continuadas que puedan seguir producindose y aportar
las necesidades diarias de agua y electrolitos hasta que se pueda volver a la
administracin de lquidos por va oral.

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I.3. IMPORTANCIA

El fenmeno de la smosis, que afecta a toda membrana semipermeable, es

fundamental para el ciclo vital de la clula, por lo que es importante su debida
comprensin. Radica en que tiene como objetivo mantener el equilibrio hdrico (la
diferencia neta entre el aporte y la prdida de agua) y de electrolitos en los seres vivos.

El agua es la molcula ms abundante en el interior de todos los seres vivos, y

mediante la smosis es capaz de atravesar membranas celulares que son
semipermeables para penetrar en el interior celular o salir de l. Sin esto no podra haber
regulacin de lquidos y absorcin de nutrientes y el lquido se quedara acumulado en
una parte del cuerpo o solamente pasara y moriramos deshidratados o por falta de
nutrientes.

La smosis es un proceso biofsico de extrema importancia en el funcionamiento

normal y patolgico de los seres vivos y el hombre, en particular, toda vez que
determina el movimiento neto de agua entre los compartimientos lquidos intracelular
(LIC) y extracelular (LEC) a travs de la membrana plasmtica; adems de participar en
el intercambio acuoso a nivel de los capilares.

En la prctica mdica, el conocimiento de la smosis es de vital importancia por la

gran cantidad de trastornos hidroelectrolticos que se acompaan de cambios en la
osmolalidad normal o la concentracin de glbulos, por ejemplo; as como por la
utilizacin de soluciones dialticas y parenterales que modifican el hematocrito y la
osmolalidad normal y patolgica de pacientes en diversas condiciones que pueden ser
vitales.

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I.4. PROBLEMA
Cules son los efectos de las soluciones de cloruro de sodio y glucosa a diferentes
concentraciones, en eritrocitos de estudiantes de Medicina Humana de la Universidad
Nacional Pedro Ruiz Gallo?

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I.5. OBJETIVOS

Objetivo general

- Identificar los efectos de las soluciones de cloruro de sodio y glucosa a

diferentes concentraciones en eritrocitos de estudiantes de Medicina Humana de
la Universidad Nacional Pedro Ruiz Gallo.

Objetivos especficos

- Identificar los efectos de la solucin de cloruro de sodio al 0.3 % en eritrocitos

de estudiantes de Medicina Humana de la Universidad Nacional Pedro Ruiz
Gallo.

- Identificar los efectos de la solucin de glucosa al 2% en eritrocitos de

estudiantes de Medicina Humana de la Universidad Nacional Pedro Ruiz Gallo.

- Identificar los efectos de la solucin de cloruro de sodio al 0.9 % en eritrocitos

de estudiantes de Medicina Humana de la Universidad Nacional Pedro Ruiz
Gallo.

- Identificar los efectos de la solucin de glucosa al 5% en eritrocitos de

estudiantes de Medicina Humana de la Universidad Nacional Pedro Ruiz Gallo.

- Identificar los efectos de la solucin de cloruro de sodio al 3.4% en eritrocitos de

estudiantes de Medicina Humana de la Universidad Nacional Pedro Ruiz Gallo.

- Identificar los efectos de la solucin de cloruro de sodio al 30 % en eritrocitos de

estudiantes de Medicina Humana de la Universidad Nacional Pedro Ruiz Gallo.

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 II. MATERIALES Y MTODOS
II.1. MATERIALES
II.1.1. Material biolgico:

Se utilizaron muestras de sangre de dos alumnos de la facultad de Medicina Humana de

la Universidad Nacional Pedro Ruiz Gallo

II.1.2. Material no biolgico

Se hizo uso de jeringas con aguja N21 y ligadura, alcohol corriente y algodn,
gradillas, 8 tubos de ensayo, 6 pipetas, soluciones con diversas concentraciones de
cloruro de sodio y de glucosa; de cloruro de sodio se hizo uso de concentraciones al
0.3%, 0.9%, 3.4%; de glucosa se usaron concentraciones al 2%, 5% y 30%. Lminas
portaobjetos y cubreobjetos, heparina y microscopios pticos.

II.2. MTODOS
II.2.1. Para la extraccin de sangre

Antes de extraer sangre, es necesario lavarse las manos y preparar el material. Se coloc
la ligadura a tres dedos por encima del sitio de puncin. Desinfectamos la zona de
puncin de forma circular de adentro hacia fuera con algodn y alcohol. Luego
insertamos la aguja con el bisel hacia arriba, formando un ngulo de 30 grados y
dejamos caer la sangre por las superficies interiores del tubo de ensayo con heparina
agitada en inversin previamente. Colocamos algodn con alcohol en la zona de
puncin y retiramos la aguja.

II.2.2. Para la preparacin de las muestras de sangre en las

soluciones.
En seis tubos de ensayos rotulados colocamos respectivamente 5 mL de solucin
hipotnica de NaCl 0.3%, 5 mL de solucin isotnica de NaCl 0.9%, 5 mL de solucin
hipertnica de NaCl 3.4%, 5 mL de solucin hipotnica de glucosa 2%, 5 mL de
solucin isotnica de glucosa 5%, 5 mL de solucin hipertnica de glucosa 30%. De los
tubos de ensayo con muestra de sangre se tomaron y aadieron, con una pipeta, 5 gotas
por cada uno de los tubos de ensayo preparados. Se agit cada uno por inversin y se
dejaron reposar las mezclas por 2-3 minutos.

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 II.2.3. Para la observacin al microscopio
Lavamos con alcohol una lmina portaobjeto, la secamos y con una pipeta se extrajo
una gota de solucin. La colocamos en la lmina portaobjeto y colocamos sobre ella una
lmina cubreobjeto. Colocamos la lmina al microscopio y observamos a 400x.

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 III. RESULTADOS
Cuadro N 1
Tipo de solucin: Hipotnica
Concentracin de NaCl (%): 0.3
Concentracin de glucosa (%): 2
Volumen de solucin: 5 ml
Cantidad de sangre: 5 gotas
N de glbulos NaCl 110
Observacin
rojos glucosa 240
microscpica
Morfologa: Esfrica grande
Aspecto: transparente
Fenmeno celular: hemlisis
Direccin del transporte del: LIC LEC

Cuadro N 2
Tipo de solucin: Isotnica
Concentracin de NaCl (%): 0.9
Concentracin de glucosa (%): 5
Volumen de solucin: 5 ml
Cantidad de sangre: 5 gotas
N de glbulos NaCl 180
Observacin
rojos glucosa 350
microscpica
Morfologa: esfrico
Aspecto: turbio
Fenmeno celular: normal
Direccin del transporte del: LIC LEC

Cuadro N 3
Tipo de solucin: Hipertnica
Concentracin de NaCl (%): 3.4
Concentracin de glucosa (%): 30
Volumen de solucin: 5 ml
Cantidad de sangre: 0.1 ml
N de glbulos NaCl 150
Observacin
rojos glucosa 330
microscpica
Morfologa: pasas
Aspecto: turbio
Fenmeno celular: eritrocrenacin
Direccin del transporte del: LIC LEC

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 IV. DISCUSIONES
- En la membrana, la clula (eritrocito) estalla, proceso que es
denominado hemlisis. Al ser destruidos, los eritrocitos son difcilmente observados
en el microscopio por lo que el nmero de estas clulas se aprecia disminuido.
- En el cuadro N 2 se muestra 5ml de soluciones isotnicas de NaCl al 0.9% y
glucosa al 5% con 5 gotas de sangre, de aspecto turbio, observando al microscopio
el nmero de glbulos rojos para NaCl y glucosa 180 y 350 respectivamente con
una morfologa esfrica, propia de un eritrocito normal. La direccin de transporte
fue bidireccional entre el LIC y el LEC. Esto debido a que las soluciones tienen la
misma concentracin molar que la del plasma, por lo tanto el flujo neto es 0. Todo
se mantuvo en su estado basal y los eritrocitos no sufrieron ningn cambio; todo ello
debido a que esta solucin se comporta como un medio similar al plasma en donde
se encuentran los hemates, por lo tanto, no experimentan transformaciones.

- En el cuadro N 3 se muestra 5ml de soluciones hipertnicas de NaCl al 3.4% y

glucosa al 30% con 5 gotas de sangre, de aspecto turbio, observando al microscopio
el nmero de glbulos rojos para NaCl y glucosa 150 y 330 respectivamente con
una morfologa en pasas. La direccin de transporte fue del LEC al LIC. Esto
debido a que las concentraciones de los solutos son mayores en el extracelular que
en el intracelular, como consecuencia existe transporte de agua en direccin al
extracelular. Debido a ello, el eritrocito se deshidrata, entonces se arruga y su
membrana celular presenta una especie de identaciones, fenmeno conocido como
crenacin

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 V. CONCLUSIONES
- Se identific los efectos de las diferentes concentraciones de soluciones de cloruro
de sodio y glucosa en los eritrocitos, siendo estos la variacin de morfologa celular,
el cual se hincha, se mantiene o se arruga y en el nmero de eritrocitos que puede
mantenerse o disminuir.

- Se identific el efecto de la solucin de cloruro de sodio al 0.3%, la cual produjo

una morfologa esfrica grande del eritrocito y una disminucin pronunciada en el
nmero de eritrocitos.

- Se identific el efecto de la solucin de glucosa al 2%, la cual produjo una

morfologa esfrica grande del eritrocito y una disminucin pronunciada en el
nmero de eritrocitos.

- Se identific el efecto de la solucin de cloruro de sodio al 0.9%, obtenindose una

morfologa esfrica propia de un eritrocito normal sin efectos significativos en el
nmero de eritrocitos

- Se identific el efecto de la solucin de glucosa al 5%, obtenindose una morfologa

esfrica propia de un eritrocito normal sin efectos significativos en el nmero de
eritrocitos

- Se identific el efecto de la solucin de cloruro de sodio al 3.4 %, obtenindose una

morfologa arrugada (en forma de pasa) y pequea de la clula, sin efectos
significativos en el nmero de eritrocitos

- Se identific el efecto de la solucin de glucosa al 30 %, obtenindose una

morfologa arrugada (en forma de pasa) y pequea de la clula, sin efectos
significativos en el nmero de eritrocitos

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 VI. RECOMENDACIONES
Para una mejor obtencin de resultados se recomienda agitar por inversin suavemente
y sincrnicamente el tubo de ensayo con la mezcla de sangre, heparina y la solucin
correspondiente, ya que la membrana de los glbulos rojos es muy frgil y un
movimiento brusco la destruye y genera una lisis de la clula.

Se deben homogeneizar la solucin hipertnica de glucosa antes de extraer con la

pipeta.

Es necesario tambin limpiar con un algodn humedecido en alcohol las lminas

portaobjetos y cubreobjetos para una mejor observacin microscpica ya que siempre
estos vienen cubiertos con una capa de aceite de inmersin.

Y por ltimo llevar al microscopio primero las lminas con la mezcla en solucin
hipotnica, ya que estas causan lisis de los glbulos rojos.

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 VII. REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS
1. lvarez-Calatayud, G., Taboada, L., Rivas, A. (2006) Deshidratacin: etiologa,
diagnstico y tratamiento. An Pediatra Contin. Elsevier. [Internet] 2006;4(5):
292.301. Disponible en:
https://juanmasevilla001.files.wordpress.com/2010/12/deshidratacion.pdf
[Consultado 10 Setiembre 2017].

2. Barrett, K., Boitano, S., Barman S, Brooks H. (2013). Ganong fisiologa mdica.
24a ed. Mxico: McGraw-Hill, p.7-8.

3. Guyton, A., Hall, J., Zocchi, L. y Aicardi, G. (2015). Tratado de fisiologa

mdica. 13a ed. Espaa: Elsevier.

4. Lecuona, M., Castell, A., Sampedro, E., Acevedo, S., Guerrero, A., Fernandez,
A. (2015) Compendio de histologa mdica y biologa celular. 1a ed. Espaa:
Elsevier. pp. 187-190.

5. Lpez, Y., Machado, D. y Duque, N. (2012). smosis en glbulos rojos.

Instituto de Biologa, Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de
Antioquia.

6. Murray, R., Berder, D., Botham, K., Kennelly, P., Rodwell, V., Weill, P. (2015).
Harper Bioqumica Ilustrada. 29 ed. Espaa: McGraw-Hill, pp.662-664, 667

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 ANEXOS

Anexo 1: Materiales

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