Extraccin casera de ADN

FUNDAMENTO

En una extraccin de ADN casera se empieza por romper las clulas mediante un
detergente, vacindose su contenido molecular en una disolucin tampn en la que se
disuelve el ADN. En ese momento, el tampn contiene ADN y todo un surtido de restos
moleculares. Las protenas asociadas al ADN, de gran longitud, se habrn fraccionado en
cadenas ms pequeas y separadas de l por accin del detergente. Slo queda, por tanto,
extraer el ADN de esa mezcla de tampn y detergente, para lo cual se utiliza alcohol
isoamlico.

Qu funcin tiene el jabn lquido?

Qu funcin tiene el alcohol isoamlico?
Cul es la estructura y funcin tiene el DNA vegetal?
Qu tipo de reactivos o medios se pueden utilizar para triturar muestras vegetales?
Para que es utilizado el nitrgeno lquido?
Qu medidas de precaucin debe tomar para extraer ADN?
Qu diferencias existe entre ADN vegetal y animal?

MATERIALES Y REACTIVOS UTILIZADOS

Muestra vegetal
Agua (destilada o mineral)
Sal de mesa (pura)
Bicarbonato sdico
Detergente lquido o champ , lava vajillas
Batidora
Nevera
Centrfuga
Vaso de precipitacin
Tubos de ensayo
Alcohol isoamlico
Varilla fina
PROCEDIMEINTO
1. Preparar el tampn con los siguientes ingredientes y mantener en la nevera o en un bao
de hielo triturado:
120 ml de agua, si es posible destilada y si no mineral. No usar agua del grifo.
1,5 g de sal de mesa, preferiblemente pura.
5 g de bicarbonato sdico.
5 ml de detergente lquido o champ.
2. Elegir la muestra que va a proporcionar el ADN entre los vegetales que pueda haber en la
cocina (cebolla, ajo, tomates, etc.) y cortarla en cuadraditos.
3. Triturar la muestra con un poco de agua en la batidora accionando las cuchillas a
impulsos de 10 segundos. As se rompern muchas clulas y otras quedarn expuestas a la
accin del detergente.
4. Mezclar en un recipiente limpio 5 ml del triturado celular con 10 ml del tampn fro y
agitar vigorosamente durante al menos 2 minutos.
5. Separar despus los restos vegetales ms grandes del caldo molecular hacindolo pasar
por un colador lo ms fino posible. Lo ideal es centrifugar a baja velocidad 5 minutos y
despus pipetear el sobrenadante.
6. Retirar 5 ml del caldo molecular a un tubo de ensayo y aadir con pipeta 10 ml de
alcohol isopropilico enfriado a 0C. Se debe dejar escurrir lentamente el alcohol por la cara
interna del recipiente, teniendo ste inclinado. El alcohol quedar flotando sobre el tampn.
7. Se introduce la punta de una varilla estrecha hasta justo debajo de la separacin entre el
alcohol y el tampn. Remover la varilla hacia delante y hacia atrs y poco a poco se irn
enrollando los fragmentos de mayor tamao de ADN. Pasado un minuto retirar la varilla
atravesando la capa de alcohol con lo cual el ADN quedar adherido a su extremo con el
aspecto de un copo de algodn mojado.

1. Deshacer las membranas para dejar salir el ADN.

2. El alcohol estabiliza la molcula de ADN evitando que esta se "rompa" y precipita el ADN.
3. La estructura del ADN vegetal es una doble hlice con esqueleto de azcar y fosfato y su
funcin es transcribir los genes que mantienen funcionando a la clula vegetal correctamente.
4. Para triturar muestras vegetales puedes congelar la muestra y ya que este congelada puede ser
triturada fcilmente, con este mtodo no hay dao en la muestra.
5. El nitrgeno lquido es un sper congelante, este se agrega a la muestra vegetal y esta es
congelada inmediatamente as pudindose triturar fcilmente y rpidamente.
6. Para la extraccin de ADN se debe de tener cuidado con la cantidad de reactivos que se utilicen
ya que un exceso o falta de estos pueden ocasionar que no se obtenga ADN.
7. Molecularmente hablando son exactamente igual, presentan misma estructura, mismos
componentes, etc.