Sper resolucin secuencial de imgenes de protenas bacterianas

reguladoras: El nucletido y la membrana celular en clulas simples, fijas

de E. coli.

Autores: Spahn C, Glaesmann M, Gao Y, Foo YH, Lampe M, Kenney LJ, Heilemann M

Instituto de Qumica Fsica y Terica, Goethe-Universidad de Frankfurt, Max-von-Laue-Str. 7,

60438, Frankfurt, Alemania.
Instituto de Mecanobiologa, T-Lab, Universidad Nacional de Singapur, 5A Engineering Drive 1,
Singapur, 117411, Singapur.
Y otros.

Resumen
A pesar de su pequeo tamao y la falta de compartimentacin, las bacterias muestran un sorprendente grado
de organizacin celular, tanto en el tiempo como en el espacio. Durante la ltima dcada, surgi un grupo de
nuevas tcnicas de microscopa, denominadas microscopa de sper resolucin o nanoscopa, que facilitan
la visualizacin de la organizacin de protenas en bacterias a nanoescala. La microscopa de localizacin de
una sola molcula (SMLM) es especialmente adecuada para revelar una amplia gama de nueva informacin
sobre la organizacin de las protenas, la interaccin y la dinmica en clulas bacterianas individuales. Los
desarrollos recientes en qumica de click facilitan la visualizacin de la cromatina bacteriana con una
resolucin de ~ 20 nm, proporcionando informacin valiosa sobre la ultraestructura de nucletidos
bacterianos, especialmente a tiempos de generacin cortos. En este captulo, describimos un protocolo de
simple realizacin que permite determinar la informacin estructural precisa de nucletidos bacterianos en
clulas fijas, utilizando microscopa ptica estocstica directa de reconstruccin (dSTORM). En
combinacin con la microscopa de localizacin fotoactivada cuantitativa (PALM), se puede estudiar la
relacin espacial de las protenas con el cromosoma bacteriano. La posicin de una protena de inters con
respecto a los nucleoides y el cilindro celular se puede visualizar mediante super-resolucin de la membrana
usando acumulacin de puntos para la obtencin de imgenes en topografa a nanoescala (PAINT). La
combinacin de las diferentes tcnicas SMLM en un flujo de trabajo secuencial maximiza la informacin
que se puede extraer de las clulas individuales, manteniendo al mismo tiempo condiciones ptimas de
imagen para cada tcnica.
PALABRAS CLAVE:
Nucletido bacteriano; Protenas reguladoras bacterianas; Cuantificacin de protenas; Imgenes de una
sola molcula; Microscopa de super resolucin.
Fecha de publicacin: 26 agosto 2017
Fuente Web: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/28842890
 La coordinacin de la dinmica celular contribuye a las deformaciones del
epitelio dental
Autores: Ritsuko Morita, Miho Kihira, Yousuke Nakatsu, Yohei Nomoto, Miho Ogawa, Kazumasa Ohashi,
Kensaku Mizuno, Tetsuhiko Tachikawa, Yukitaka Ishimoto, Yoshihiro Morishita, Takashi Tsuji
Laboratoire de Biologie du Dveloppement de Villefranche-sur-Mer, FRANCE
Resumen
Las morfologas de los rganos ectodrmicos se forman mediante combinaciones apropiadas de varios modos
de deformacin, tales como la invaginacin y el alargamiento del tejido anisotrpico. Sin embargo, la forma
en que la dinmica multicelular est coordinada durante los procesos de deformacin queda por dilucidar.
Aqu, hemos desarrollado un sistema de anlisis de cuatro dimensiones (4D) para el seguimiento del
movimiento celular y la divisin de una sola clula de resolucin en el desarrollo epitelio dental. Los patrones
de expresin de una sonda Fucci aclararon los patrones de ciclo celular especficos de regin y etapa en el
germen dental, los cuales estaban en buen acuerdo con el patrn de la tasa de crecimiento de volumen
estimada a partir del anlisis de deformacin a nivel de tejido. La motilidad celular fue mayor en las regiones
con mayores tasas de crecimiento, mientras que la orientacin mittica fue significativamente sesgada a lo
largo de la direccin de alargamiento del tejido en el epitelio. Adems, estos patrones espacio-temporales de
la dinmica celular y la deformacin del nivel del tejido estaban altamente correlacionados con el de la
actividad de cofilina, que es un factor de depolimerizacin de actina, lo que sugiere que la coordinacin de
la dinmica celular a travs de la remodelacin actina juega un papel importante en epiteliales dentales
Morfognesis. Nuestro sistema mejora la comprensin de cmo los comportamientos celulares se coordinan
durante la organognesis ectodrmica, que no puede observarse a partir de anlisis histolgicos.
Recibido: febrero 11, 2016; Aceptado: agosto 3, 2016; Publicado septiembre 2, 2016
Fuente web: http://journals.plos.org/plosone/article?id=10.1371/journal.pone.0161336