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Universidad de Santiago de Chile

Facultad Qumica y Biologa


Laboratorio de Fisiologa animal
Bioqumica y Licenciatura en Bioqumica

Laboratorio n3:
Velocidad de conduccin axonal en
humanos

Nombre integrantes:
Constanza Cid
Isidora Molina
Daphne Moreno
Fabin Urtubia

Profesora:
Karina Bravo

Fecha de entrega:
2 de Mayo de 2017
Introduccin

Los impulsos nerviosos son en realidad impulsos electricos que se producen por cambios
rpidos del potencial de membrana en una clula neuronal o muscular. Para que esto
ocurra se necesita un estmulo suficiente que provoque una elevacin del potencial de
membrana. A esto se le denomina el umbral del potencial de accin. Este cambio en la
membrana puede propagarse desde las zonas despolarizadas a zonas adyacentes en
reposo, movimiento que ocurre por difusin de iones. La transmisin del proceso de
despolarizacin se denomina impulso nervioso o muscular. (1)
La velocidad de transmisin de los potenciales de accin se denomina velocidad de
conduccin. Para explicar la velocidad de conduccin se utilizan dos conceptos, la
constante tiempo y la constante de longitud, las cuales dependen de la resistencia de la
membrana y de la capacitancia de la misma. Existen dos mecanismos para aumentar la
velocidad de conduccin en un nervio, el incremento de la fibra nerviosa, ya que disminuye
el valor de la resistencia interna; y la mielinizacin de la fibra nerviosa. La mielina es un
aislante lipdico que aumenta la resistencia de la membrana y obliga al impulso nervioso a
elegir el recorrido con menor resistencia. En los axones mielinizados se presentan zonas
especficas, denominadas nodos de Ranvier, donde no hay mielinizacin y por tanto ocurre
el potencial de accin.(2) Los nervios perifricos suelen tener velocidad de conduccin en el
rango entre los 40 y 70 m/s. (3)

La sinapsis entre una motoneurona y una fibra nerviosa muscular se denomina unin
neuromuscular. El mecanismo general de la contraccin muscular consiste en un estmulo
que genera un potencial de accin, lo cual a su vez provoca la liberacin de acetilcolina.
Esto provoca la apertura de canales que permiten el ingreso de cationes y la propagacin
del estmulo por la fibra muscular. En esta se produce la apertura de canales de calcio en el
sarcolema, los que producen el inicio del proceso contrctil. La recaptacin del calcio
termina con este proceso. Una unidad motora consiste en la neurona motora y el grupo de
fibras musculares esquelticas a las que inerva.(1)
Un espasmo muscular se puede sumar individualmente para aumentar la contraccin a nivel
muscular, proceso denominado sumacin, lo que puede aumentarse si existen mayor
cantidad de fibras motoras o de frecuencia en el estmulo. Si esta ltima alcanza un nivel
crtico, en donde las contracciones musculares se suman entre s y la contraccin se
muestra como una sola se denomina tetanizacin.(1) En los estudios sobre conduccin
nerviosa se producen espasmos para evaluar la conduccin elctrica en una fibra nerviosa y
su respuesta motora y nerviosa. Una forma de realizar estas pruebas es utilizando una
tcnica denominada electromiografa, donde se registra de la conductividad elctrica de una
unidad motora.(8) Para esto se puede utilizar un programa en donde se observa el potencial
evocado en la fibra sensorial o motora en forma de grfico y se pueden determinar cuando
fue aplicado el estmulo y cunto se demor la fibra motora en reaccionar a este.(4)
Para este experimento partimos de la base en que es posible realizar una electromiografa
en un nervio, el cubital o mediano, y determinar la velocidad de la conduccin axonal
condiciones normales para de esta forma compararlos en casos de isquemia y fro,
esperando observar una mayor disminucin de la velocidad de conduccin en la exposicin
a fro. Los resultados presentados en este informe corresponden a ambas secciones de
laboratorio y corresponden tambin a distintos nervios, pero en general puede observarse
que las medidas control se corresponden a lo expresado en la literatura, con un promedio
de 49,6. En cambio, para las mediciones de isquemia y fro se obtuvieron valores de 42,3 y
28,51 respectivamente.
Metodologa

Para la determinacin de las velocidades de conduccin se realiz una electromiografa.


Utilizando el programa Chart5 que codifica la estimulacin elctrica cutnea, generada por
el estimulador PowerLab 4/20T y conducida por el electrodo de estimulacin, en un grfico
de potencial (mV) versus tiempo (s), adems de un bioamplificador y electrodos de registro
para detectarlos.
Se midi la respuesta al estmulo en tres condiciones diferentes:
I.- Control: En condiciones normales.
a) Se observ y describi la respuesta a un estmulo donde fue ms favorable
(deteccin del nervio cubital)
b) Se registr la respuesta al estmulo y calcul la velocidad de conduccin.
II.-Isquemia: donde se utiliz un esfigmomanmetro hasta que no se detecta pulso, se
registr y calcul la velocidad de conduccin en respuesta a la estimulacin.
III.-Fro: se deposit el brazo en una cubeta de hielo durante 60 segundos, se registr y
calcul nuevamente la respuesta a la estimulacin.

Diagrama N1. Metodologa para localizacin del nervio cubital.


Diagrama N2. Metodologa para determinar velocidad de conduccin en tres condiciones diferentes,
al aplicar fro, bajo condiciones normales y al producir isquemia

Preparacin del equipo:


1) Se conect a un pc el estimulador PowerLab con el interruptor en off, luego se
conect las bananas rojo y negra del electrodo de barra de estmulo a la entrada roja y
negra del estimulador (conectores de estimulador aislado).

Figura N1: Estimulador PowerLab indicando las entradas y salidas del panel de control.
2) Se conectaron los electrodos de registro ctodo (polo positivo), nodo (polo negativo) y el
electrodo tierra, al cable bioamplificador en el canal 1, como indica la figura N2, y este a su
vez se conect al estimulador PowerLab en el conector bioamp que se visualiza en la figura
N1.

Figura N2: Conexiones de electrodos ctodo (positivo), nodo (negativo) y tierra en cable
bioamplificador en canal 1.

Configuracin del programa:


Configuracin 1
Para esto se configur el programa abriendo:
Archivo >> galera de Experimentos >> Muscle >> muscle Physiology >> Nerve Effect.
Se configura el impulso en:
Configuracin>>Estimulador aislado con los siguientes parmetros:
-Modo de pulsos: Continuo
-Duracin pulso: 200 s
-Frecuencia: 0.3 Hz
-Amplitud: 20 mA

Configuracin 2
Para esto se configur el programa abriendo:
Archivo>>galeria de Experimentos>>Electromiography>>Muscle Physiology>>EMG evoked
settings

Configuracin>> Configuracin de canales>>activar canal 2


Configuracin>>Estimulador aislado>>activar marcador de canal>>seleccionar canal 2
Configuracin>>Estimulador asilado con los siguientes parmetros:
-Modo de pulsos: Continuo
-Duracin pulso: 200 s
-Frecuencia: 1 Hz
-Amplitud: 20 mA
Distribucin de electrodos, deteccin de estmulo y determinacin de velocidad

Figura N3. Diagrama de distribucin de los electrodos tanto de estimulacin como de registro a lo
largo del nervio cubital destacado en color amarillo, especificando la localizacin de los electrodos
nodo, ctodo y tierra.

Se localizaron los electrodos a lo largo del nervio cubital que se encuentra en la parte
posterior del antebrazo extendindose hasta los dedos meique, anular y dedo medio. Los
electrodos de registro se ubicaron en la eminencia hipotenar ubicada en el borde inferior de
la palma hacia la prolongacin del dedo meique asegurando que el catodo y anodo formen
un tringulo con el electrodo tierra. Los electrodos de estimulacin cubiertos de crema
conductora, se ubican a lo largo del nervio cubital en el antebrazo en dos puntos distintos,
bajo la mueca y cercano al codo, y se determin la distancia entre los ctodos donde se
genera el estmulo hasta el ctodo donde se detecta, d1 y d2 respectivamente, como se
ilustra en la Figura N3.

Para la deteccin del estmulo una vez localizados los electrodos se puso el interruptor del
PowerLab en ON y se presiona iniciar donde se registra el grfico de milivoltios v/s tiempo
en segundos.

Gracias a la utilizacin del programa se determinaron los tiempos en donde se observ la


respuesta al estmulo y el inicio de este, lo que se denomina como perodo de latencia.
Luego de obtener estos dos datos se aplic la ecuacin para la velocidad instantnea,
v = (d2-d1)/(t2-t1), para realizar el clculo de la velocidad de conduccin.
Resultados

Tabla N1: Resultados de velocidades de conduccin de mueca y codo en las situaciones


de isquemia, fro y control
Control Isquemia Frio

Mueca Codo Mueca Codo Mueca Codo

Distancia nodos (m) 0,095 0,34 0,095 0,34 0,095 0,34

Tiempo (s) 3 103 7, 5 103 1 103 7 103 6 103 8 103

Velocidad de 54,4 40,8 35,0


conduccin (m/s)

Tabla N2: Resultados de velocidad de conduccin a diferentes condiciones en diferentes


individuos.
Grupos Velocidad Control Velocidad Isquemia (m/s) Velocidad Frio (m/s)
(m/s)

1 54,4 40,8 35

2 48 43,6 40

3 57,1 53,3 44,4

4 45,4 30,4 29,5

5 52,1 49,7 57,7

6 41 - 33

7 - 36 30

Promedio 49,67 42,3 28,51

Varianza 35,93 72,2 34,4


Grfico N1: Grfica de las diferente velocidad de conduccin de control, isquemia y fro de los
distintos grupos del laboratorio, demostrando que hay diferencias entre estas.

Anlisis estadstico
Cmo se logra apreciar en el grfico N1 existe diferencia entre las velocidades control,
isquemia y fro, no obstante, no solo depende de una grfica para ver si hay una diferencia
entre las velocidades, por lo cual se aplic t-student como anlisis estadstico, se hizo uno
prueba entre la velocidad control y la velocidad de la isquemia y otro prueba entre la
velocidad control y la velocidad en fro obteniendo as la siguiente decisin.
Prueba para la velocidad control y velocidad de la isquemia:
La hiptesis nula, (no hay diferencia entre la velocidad control y velocidad de la isquemia),
se rechaza con un p-valor de 0,021 y un valor de 0,05, por lo que se dice que hay
diferencia estadsticamente significativa.
Prueba para la velocidad control y velocidad del fro:
La hiptesis nula, (no hay diferencia entre la velocidad control y velocidad del fro), se
rechaza con un p-valor de 0,041 y un valor de 0,05, por lo que se dice que hay diferencia
estadsticamente significativa.

Discusin

Como se aprecia anteriormente al utilizar el anlisis estadstico t-student se ve que existe


una diferencia estadsticamente significativa entre la velocidad de control y la velocidad de
la isquemia como tambin de la velocidad del control y la velocidad en fro obteniendo una
resultado significativamente mayor el fro.
El fro produce una disminucin de la velocidad de conduccin de los nervios perifricos.
Las fibras nerviosas varan en su sensibilidad al fro segn su dimetro y su grado de
mielinizacin, siendo las fibras que presentan un dimetro mayor las ms sensibles a los
cambios de temperatura. Se ha postulado que la sensibilidad de las fibras nerviosas
dependen del funcionamiento de los canales dependientes de voltaje con respecto a la
temperatura. Cuando esta aumenta se provoca un aumento transitorio en la
hiperpolarizacin. Algunos estudios indican que la velocidad de conduccin aumenta en un
5% por cada grado en el rango entre 29 y 38 C. Cuando se disminuye la temperatura esto
aumenta el tiempo donde el canal voltaje dependiente de sodio permanece abierto,
alargando los potenciales de accin, aumentando la latencia y disminuyendo la velocidad de
conduccin.(5)
Al observar los resultados obtenidos en la realizacin de isquemia, se observa una
disminucin en la velocidad de conduccin nerviosa. Esto se debe a que la isquemia
corresponde a la detencin o disminucin de la circulacin de sangre a travs de las arterias
de una determinada zona, que comporta a un cese total o disminucin de la actividad
metablica por falta de oxgeno. (6)

Al producirse una isquemia, disminuye la cantidad de ATP en el tejido, produciendo la
prdida de potasio por la ineficiencia de la bomba Na+/K+ ATPasa, lo que conlleva a
variaciones en los potenciales de accin que se generen. Esto determina un potencial de
reposo ms despolarizado, la produccin de un potencial de reposo muy negativo conlleva a
la disminucin de la amplitud del potencial de accin generado. La disminucin en la
amplitud de los potenciales de accin generar un menor flujo de cargas y cambio de la
polaridad ms lento (disminucin de la velocidad en el tiempo). (6)
As como la temperatura e isquemia, existen otros factores que afectan la velocidad de
conduccin nerviosa entre los que se encuentran la edad y la estatura.
En el caso de la edad, la velocidad de conduccin nerviosa, aumenta desde el nacimiento
hasta la edad adulta donde alcanza los valores normales de velocidad de conduccin. Sin
embargo, esta va disminuyendo a medida que contina avanzando la edad, disminuyendo
1,5% por cada dcada de vida despus de los 60 aos de edad.(7)
La estatura es otro factor que afecta la velocidad, siendo inversamente proporcional a la
estatura, debido a que, en individuos de mayor estatura, los axones estn sometidos a un
mayor estrs metablico para suplir las largas distancias.(7)
En relacin a la hiptesis formulada en la introduccin, se observ una mayor disminucin
en la velocidad de conduccin en la exposicin a fro intenso (hielo), que en una isquemia
de duracin de un minuto. Esto se debe a que el efecto que produce el fro en la velocidad
de conduccin nerviosa, afecta directamente la apertura de canales, disminuyendo la
velocidad de conduccin de forma rpida. Por lo cual, la disminucin en la velocidad de
conduccin depende netamente de la temperatura a la cual se expone el tejido. En cambio,
el efecto que se produce en isquemia, es indirecto, ya que se produce por la alteracin en el
metabolismo celular. Por lo que, la disminucin de la velocidad de conduccin depende
netamente del tiempo de isquemia.
Al realizar la electromiografa, se deben tener en cuenta que existen diferentes factores que
pueden interferir en la correcta medicin, entre los que se encuentran, la correcta posicin
de los electrodos, la localizacin del nervio a estimular, el propagacin del estmulo elctrico
en la piel, la interferencia de clulas muertas en la superficie, la correcta aplicacin de la
crema conductora, entre otras fuentes de error. Para una ptima medicin de la velocidad
de conduccin, se utilizan agujas electrodos, las cuales se insertan directamente en el
tejido, disminuyendo los errores de la medicin.
Conclusiones

A partir de los resultados expuesto anteriormente, la velocidad de conduccin axonal


depende de propiedades extrnsecas de los axones del nervio, como la temperatura del
axn y del medio interno, como tambin las alteraciones metablicas. Como se explica
anteriormente la temperatura es uno de los principales factores que afectan a la velocidad.
El fro disminuye la velocidad de conduccin en nervios motores y sensitivos, esta
disminuye 2,5 m/s por cada 1C que disminuye la temperatura del medio interno.
Otro factor que afecta a la velocidad de conduccin es la isquemia ya en esta se ve
afectado el metabolismo celular, porque conlleva la falta de oxgeno y materias nutritivas en
la zona afectada, por lo que se forma menos ATP por esto su metabolismos tiende a
disminuir.
Debido a que la velocidad de conduccin axonal depende de mucho factores del examinado
como la edad, gnero, estatura, entre otros. Por esto se decidi hacer como anlisis
estadstico t-student demostrando as que hay diferencias estadsticamente significativa
entre la velocidad de conduccin control con respecto a la isquemia y la temperatura (fro),
dicho esto, con respecto a la hiptesis enunciada al inicio y con base en la discusin, se
acepta la hiptesis planteada
Por lo que se concluy que independiente del examinado (ya sea por su gnero, edad,
estatura), tender a verse afectada la velocidad de conduccin tanto por el fro como por la
isquemia, logrando una disminucin de la velocidad axonal mayor en el fro.

Referencias

1. Hall J, Guyton A. Tratado de fisiologa mdica. 13th ed. Barcelona: Elsevier; 2016.
pp: 162-242
2. Costanzo L, Moreira A, Esbrard C. Fisiologa. 4th ed. Barcelona: Elsevier; 2011. pp:
23-27
3. Stetson D, Albers J, Silverstein B, Wolfe R. Effects of age, sex, and anthropometric
factors on nerve conduction measures. Muscle & Nerve. 1992;15(10):1095-1104.
4. Weiss J, Weiss L, Silver J. Easy EMG. 1st ed. London etc.: Elsevier; 2016. pp:1-4
5. Dhavalikar, M., Narkeesh A. and Gupta, N. Effect of skin temperature on nerve conduction
velocity and reliability of temperature correction formula in indian females. Journal of
Exercise Science and Physiotherapy. 2009. Vol.5, No.1: 24-29
6. Dvorkin. M, Cardinali. D, Iermoli. R. Best & Taylor: Bases Fisiolgicas de la Prctica
Mdica. 14th ed. Buenos Aires: Panamericana; 2010. pp: 228-235
7. Gutierrez. L, Villagrn. S.Efectos del ejercicio, sobre la velocidad de conduccin
nerviosa, en nervios tibial posterior y mediano, comparando sujetos sedentarios y
deportistas. Santiago; 2003.
8. Silberman. F. Varaona. O. Ortopedia y traumatologa.3th ed. Buenos Aires:Mdica
Panamericana; 2010. pp: 101-102

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