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CONTRIBUCION A LA DETERMINACION
POR ESPECTROFOTOMETRIA ULTRAVIOLETA DEL CONTENIDO
DE CAFEINA EN DISTINTOS TIPOS DE CAFES: CAFES VERDES
Y DE TUESTE NATURAL
Por A. CEPEDA
Departamento de Qttmica Analtica, Nutricin y Bromatologa. Facultad de Veterinaria.
Universidad de Santiago de Compostela. E-27002 Lugo.
RESUMEN
PALABRAS CLAVE: Cafena, caf verde, caf tueste natural, Espectrofotometra Ultravioleta,
Sep Pak Cl8, Mtodo de Morton y Stubb, Espectroscopia de Segunda
Derivada.
SUMMARY
A new ultraviolet (UV) spectrophotometry method for the determination of caffeine contents
in green grains and natural roasted coffee has been developped. Samples were clarified with
light magnesium oxide. Extraction and purification were made using Sep Pak C18 cartridges.
This method is simple, and rapid (in relation to AOAC Micro Bailey-Andrew method} and it is
also reliable. It shows a less than 0.5 Cv %. Recovering average was 100%. It has also been
studied the problem of background interferences resolution by the Morton and Stubb method
and the second derivative method. The results agreed with those obtained by using Micro
Bailey.Andrew method (AOAC).
KEY WORDS: Caffeine, green coffee grains, natural toasted coffee grains, UV Spectropho-
tometry, Sep Pak Cl8, Morton and Stubb method, second derivative spec
troscopy.
INTRODUCCION
En otro orden de cosas, el estudio de las interferencias se ha realizado por dos di-
ferentes mtodos para su correccin:
PARTE EXPERIMENTAL
Reactivos
Todos los reactivos utilizados son de grado analtico. Etanol, Metano!, Acido clor-
hdrico 1N, Sulfrico, Hidrxido potsico.
Aparatos
Espectrofotmetro de doble haz (Hitachi 100-60), equipado con una unidad de ba-
rrido automtica y una unidad derivativa de diferenciacin analgica (Hitachi, modelo
200-0507). Los espectros han sido obtenidos a una velocidad de barrido de 240 nm/min
y en modo 6 la unidad derivativa. Cubetas de cuarzo de un cm de espesor.
Preparacin de la muestra
En un matraz Erlenmeyer de 500 mi, tarado, se pesan exactamente unos dos gramos
de caf molido, cinco g de OMg y se aaden 200 ml de agua destilada. Se calienta y
se mantiene a ebullicin durante cuarenta y cinco minutos, agitando ocasionalmente,
e incorporando agua cuando sea necesario para prevenir la formacin de espuma. Pos-
teriormente, se enfra y se ajusta el peso final de forma que el agua aadida sea de
100 g. Esta solucin se filtra a travs de papel (en nuestro caso, papel Whatman n-
mero 542). El filtrado se acidifica hasta pH 4 con Acido clorhdrico 1N. Cinco ml de
esta solucin se pasan a travs de una minicolumna Sep Pak C18 y a continuacin otros
cinco ml de agua destilada acidulada a pH 4. La minicolumna se eluye con cinco ml
de etanol y el eluato se recoge en un matraz aforado de 100 ml aadiendo agua hasta
volumen. Esta solucin es utilizada para realizar las medidas en el espectrofotmetro.
Determinacin y clculo
2
% Cafena e--, donde
M
r = 0,9998
donde
2
% Cafena C-
M
RESULTADOS Y DISCUSION
---------------------------------------- - - .
DETERMINACIN POR ESPECTRO FOTOMETRA DE CAFENA ... 245
0,6
A 8 e
0,5
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111
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Fig. l.-Espectros de absorcin de las soluciones de medida: (A) patrn de cafena (1 mg/mL);
(B) caf verde, y (C) caf de tueste natural (lnea continua) y sus respectivos BlancOS>> que
corresponden a la absorcin de fondo (lnea discontinua).
Su aspecto nos sugiri intentar la correccin mediante los dos procedimientos antes
indicados:
A 8 e
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N Q A
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Fig. 2.-Espectro de segunda derivada de las soluciones de medida: (A) patrn de cafena (1 mg/
mL); (B) caf verde, y (C) caf de tueste natural (lnea continua) y sus respectivos Blancos
que corresponden a la absorci6n de fondo continua (lnea discontinua).
Tabla 1
Estudio de la recuperacin de la cafena sobre soluciones de cafs verdes
y de tueste natural
CAFS VERDES
(a) = mg/100 mL. Concentracin referida a las soluciones clarificadas de medida, y se corres-
ponden con el % de cafena! en las muestras de caf.
Por ltimo, se han analizado cinco muestras comerciales de caf verde (Brasil, Co-
lombia, Etiopa, Kenia y Mxico) y cinco muestras de caf de tueste natural de dis-
tintas casas comerciales, por estos mtodos y el de referencia de la AOAC, no obser-
vndose diferencias significativas entre ellos al aplicar el test "t" de diferencia entre
pares.
Tabla 11
Mtodo de:
Muestra
Micro Bailey-Andrew Morton y Stubb Segunda Derivada
CAFS VERDES
(a) = Entre parntesis figuran las diferencias de cada mtodo con el mtodo de referencia.
(b) = t calculada para la t terica (t1-re/2, = 0,05, 4 grados de libertad) = 2,776.
BIBLIOGRAFIA
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