UNIVERSIDAD NACIONAL MAYOR DE SAN MARCOS

Universidad del Per, DECANA DE AMRICA

FACULTAD DE FARMACIA Y BIOQUIMICA

Creada del 29 de Octubre de 1943

ESCUELA ACADMICO PROFESIONAL DE

FARMACIA Y BIOQUMICA

LABORATORIO DE BROMATOLOGA

CUANTIFICACIN DE CIDO
ASCRBICO DEL JUGO DE NARANJA
TANGELO

INTEGRANTES:
AGUILAR LPEZ, YAMILE
RAMIREZ GARIBAY, DEIDY
RIVERA PUMA, XIOMARA
TAPIA BAEZ, YSAMAR
VASQUEZ CAYCHO, ALEIDA
LABORATORIO:
Martes 10:00 am-2:00 pm

2017-II
VITAMINAS

INDICE
I. VITAMINA C (CIDO ASCRBICO) .................................................................................3
1.1 DEFINICIN ................................................................................................................3
1.2 PROPIEDADES ............................................................................................................3
1.3 FUENTES ALIMENTARIAS ............................................................................................4
1.4 DOSIS DIARIAS ...........................................................................................................4
1.5 CARENCIA ..................................................................................................................5
1.6 MTODOS DE DETERMINACIN ..................................................................................5
II. VITAMINA B12 .............................................................................................................7
2.1 ESTRUCTURA QUMICA ...............................................................................................7
2.2 ABSORCIN................................................................................................................7
2.3 METABOLISMO ..........................................................................................................9
2.4 ALMACENAMIENTO ....................................................................................................9
2.5 INGESTAS RECOMENDADAS...................................................................................... 11
2.6 CAUSAS DE LA DEFICIENCIA ...................................................................................... 12
2.7 MTODOS DE DETERMINACIN ................................................................................ 13
III. VITAMINA B6 (PIRIDOXINA) .................................................................................... 14
3.1 DEFINICIN .............................................................................................................. 14
3.2 PROPIEDADES .......................................................................................................... 14
3.3 FUENTES .................................................................................................................. 14
3.4 FUNCIONES .............................................................................................................. 15
3.5 DOSIS ....................................................................................................................... 15
3.6 CARENCIA ................................................................................................................ 15
3.7 PRECAUCIONES ........................................................................................................ 16
3.8 INTERACCIONES FARMACOLGICAS.......................................................................... 16
3.9 MTODOS DE DETERMINACIN ................................................................................ 16
IV. PARTE EXPERIMENTAL ............................................................................................ 17
MATERIALES .................................................................................................................. 17
DATOS DE LA MUESTRA ................................................................................................. 19
V. RESULTADOS .............................................................................................................. 19
VI. DISCUSIN ............................................................................................................. 19
VII. CONCLUSIONES ...................................................................................................... 20
VIII. OBSERVACIONES .................................................................................................... 20
IX. REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS................................................................................ 21

2
VITAMINAS

I. VITAMINA C (CIDO ASCRBICO)

1.1 DEFINICIN

La vitamina C, tambin conocida como cido ascrbico, es una vitamina hidrosoluble.

Mientras que la mayora de los animales son capaces de sintetizar la vitamina C en su
organismo, los humanos no tienen la capacidad de generar su propia vitamina C;
tienen que obtenerla a travs de la dieta.

Es un cido comparativamente fuerte (ms fuerte que el actico ya que en soluciones

acuosas tiene un pH de 3). 1

La vitamina C se encuentra principalmente en alimentos de origen vegetal y puede

presentarse en dos formas qumicas interconvertibles: cido ascrbico (forma
reducida) y cido dehidroascrbico (forma oxidada), siendo ambas formas funcionales
biolgicamente y mantenindose en equilibrio fisiolgico. Si el cido dehidroascrbico
es hidratado se transforma en cido dicetogulnico, no activo biolgicamente, siendo
esta transformacin irreversible. Esta hidratacin ocurre espontneamente en
disolucin neutra o alcalina. 1
O OH
C
OH OH
HO 4 O HO 4 O O C
5
1
O 5
1 O
3 2 3 2 O C
HO OH O O H C OH
cido dehidroascrbico
HO C H
CH2 OH

cido dicetogulnico

Fig. 1. Estructura molecular de las formas qumicas del cido ascrbico.

1.2 PROPIEDADES

El cido ascrbico es una sustancia blanca cristalina, muy soluble en agua. Tiende a
oxidarse con facilidad. No la afecta la luz, pero el calor excesivo la destruye, sobre todo
cuando se encuentra en una solucin alcalina. Como es un agente antioxidante y
reductor poderoso, puede por lo tanto reducir la accin perjudicial de los radicales
libres y es tambin importante para mejorar la absorcin del hierro no-hemnico en
alimentos de origen vegetal.

El cido ascrbico es necesario para la formacin y mantenimiento adecuados del

material intercelular, sobre todo del colgeno. En trminos sencillos, es esencial para
3
VITAMINAS

producir parte de la sustancia que une a las clulas, as como el cemento une a los
ladrillos. En una persona que tiene carencia de cido ascrbico, las clulas endoteliales
de los capilares carecen de solidez normal. Son, por lo tanto, frgiles y se presentan
hemorragias. De modo semejante, la dentina de los dientes y el tejido seo de los
huesos no se forman bien. Adems, esta propiedad de fijacin celular explica la
cicatrizacin pobre y la lentitud en el proceso de curacin de las heridas que se ve en
personas con carencia de cido ascrbico.

Es una creencia comn, mencionada tambin por algunos cientficos, que dosis
abundantes de vitamina C previenen y reducen los sntomas del resfriado comn
(coriza). Esta afirmacin no se ha comprobado. Un extenso estudio sugiere una
reduccin modesta en la severidad de los sntomas en quienes toman vitamina C
medicinalmente, pero la vitamina no evit los resfriados. 2

1.3 FUENTES ALIMENTARIAS

Las principales fuentes de vitamina C en la mayora de las dietas son las frutas, las
hortalizas y diversos tipos de hojas. Las hojas verdes de color oscuro, como el
amaranto y la espinaca contienen mucha ms vitamina C que las hojas plidas como el
repollo y la lechuga. Las hortalizas de raz y las patatas contienen cantidades pequeas
pero tiles. El maz tierno aporta algo de cido ascrbico, as como los cereales
germinados y las legumbres. Los productos animales (carne, pescado, leche y huevos)
tienen cantidades reducidas.

Como el calor destruye con facilidad la vitamina C, la coccin prolongada de cualquier

alimento puede destruir gran cantidad de la vitamina C que contenga.

1.4 DOSIS DIARIAS

La cantidad de vitamina C que necesita por da depende de su edad. Las cantidades

promedio diarias de vitamina C, expresadas en miligramos (mg), que se recomiendan
para las personas de diferentes edades son las siguientes:

4
VITAMINAS

Fig. 2. Cantidad de Vitamina C necesaria para el hombre. 3

1.5 CARENCIA

La deficiencia de Vitamina C puede causar escorbuto y otras manifestaciones clnicas.

Actualmente el escorbuto no es una enfermedad predominante. Los brotes han
ocurrido en zonas de hambrunas y recientemente en varios campos de refugiados en
frica.

En sus primeras etapas, la carencia de vitamina C puede ocasionar encas que sangran
y cicatrizacin lenta de las heridas. Tambin se ha asociado el nivel reducido de
vitamina C con una serie de trastornos cardiovasculares, inclusive enfermedades
cardiacas, hipertensin, derrames cerebrales y ateroesclerosis, as como algunos
cnceres. 2

1.6 MTODOS DE DETERMINACIN

Mtodo Volumtrico

- INDOFENOL
El mtodo volumtrico recomendado por la AOAC es la titulacin con el indicador
redox 2,6-diclorofenolindofenol. El anlisis implica la oxidacin del cido ascrbico
con un colorante redox, como el 2,6-diclorofenolindofenol (azul en medio bsico y
rojo en medio cido), el cual se reduce en presencia de un medio cido, a un
compuesto incoloro. El cido ascrbico reduce el tinte indicador a una disolucin
incolora. El punto final de la valoracin con este tinte, de una muestra que

5
VITAMINAS

contenga cido ascrbico, el exceso de tinte no reducido confiere una coloracin

rosada a la disolucin acida. 4

- YODOMETRA

Es la determinacin del contenido de vitamina C mediante una volumetra de

xido-reduccin, la vitamina C tiene carcter reductor y se utiliza una disolucin de
yodo como agente oxidante que constituye el titulante patrn.

Las titulaciones en las que interviene el yodo como agente oxidante se denominan
yodometras. Dado que la reaccin entre el yodo y el cido ascrbico presenta una
estequiometra 1:1, en el punto final de la titulacin el nmero de moles de yodo
reducido es equivalente a los moles de cido ascrbico oxidado.

Es importante sealar que con este mtodo se determina la capacidad reductora

total de la disolucin, por ello, si la disolucin a titular contiene otras sustancias
reductoras adems del cido ascrbico el volumen de la disolucin oxidante (yodo)
consumida puede estar aumentada, y por tanto, el contenido de cido ascrbico
sobrestimado. Adems hay que tener en cuenta que la vitamina C es oxidada
fcilmente por el aire, por tanto, las disoluciones que contienen vitamina C deben
ser preparadas inmediatamente antes de ser tituladas, con el fin de obtener
resultados fiables.

El almidn se utiliza como indicador para el yodo, debido a que forma un complejo
de color azul intenso con el mismo. Cuando aadimos yodo sobre vitamina C
reducida desaparecer pues pasar a yoduro (la vitamina C se oxidar en el
proceso). Cuando ya no quede vitamina C reducida el yodo no desaparecer, se
unir al almidn y aparecer el color azul indicando el fin de la titulacin. 5

Mtodo de Cromatografa liquida

La cromatografa lquida de alta resolucin (CLAR), garantiza lmites de deteccin y

cuantificacin ms bajos, que facilita adems la eliminacin de los efectos
causados por la matriz (interferencias en otros mtodos de anlisis); esta tcnica se
utiliza como herramienta esencial en los estudios cinticos detallados. 6

6
VITAMINAS

II. VITAMINA B12

2.1 ESTRUCTURA QUMICA

El trmino cobalamina se refiere a una familia de compuestos con una estructura
determinada. La vitamina B12 es una cobalamina (PM 1,355) que resulta de la unin
asimtrica de 4 anillos pirrlicos. Estructura de la vitamina B12 formando un grupo
macrocclico casi planar (ncleo corrina) en torno a un tomo central de cobalto (Co).
El anillo corrina es parecido al anillo porfirnico y se diferencia de ste por el carcter
asimtrico de las uniones entre los grupos pirrlicos.7

La hidroxicobalamina y la cianocobalamina (vitamina B12) son formas no fisiolgicas

de la cobalamina; en el organismo se transforman de forma espontnea en metil y 5'
desoxiadenosil que son las formas fisiolgicamente activas o coenzimas de la vitamina
B12. La cianocobalamina por exposicin a la luz y a los agentes reductores pasa
rpidamente a la forma de hidroxicobalamina.7

Fig. 03 Estructura qumica de la

cobalamina o vitamina B12

2.2 ABSORCIN
El tracto gastrointestinal humano est provisto de un complejo sistema para la
absorcin eficiente de las mnimas cantidades de vitamina B12 de la dieta, el cual
consta de 5 pasos: 7

Liberacin de las cobalaminas de los alimentos.

Unin de las cobalaminas y sus anlogos por las cobalofilinas del estmago.

7
VITAMINAS

Digestin de las cobalofilinas en la parte alta del intestino por las proteasas
pancreticas con transferencia solamente de las cobalaminas al factor
intrnseco (FI).
Adhesin del complejo vitamina B12- FI al receptor especfico en el leon.
Endocitosis y unin intracelular a la transcobalamina II (TcII)

En el estmago la vitamina B12 es liberada del alimento por digestin pptica, proceso
esencial para la absorcin normal de sta. Una vez liberadas del alimento, las
cobalaminas y sus anlogos son unidas por las cobalofilinas, tambin llamadas
haptocorrinas o protenas R, que son glicoprotenas de 66 KD de peso molecular con
una elevada afinidad de unin al pH cido de las secreciones gstricas. Estas protenas
R constituyen un grupo inmunolgicamente relacionado compuesto por un polipptido
simple variable sustituido con oligosacridos que terminan con diferentes cantidades
de cido silico. Se encuentran en la leche, el plasma, la saliva, el jugo gstrico y otros
fluidos corporales y se plantea que son sintetizadas por los rganos que las secretan y
por los fagocitos, pero son incapaces de promover la absorcin intestinal de la
vitamina B12. 7

En el estmago adems se produce la secrecin, por las clulas parietales del fundus y
el cardias, del FI, que es una glicoprotena termolbil, estable en medio alcalino y
resistente a la digestin proteoltica, que une cobalaminas con alta afinidad
(Ka=1010/mol) y especificidad (no une los anlogos de la cobalamina). Es un
monmero de aproximadamente 45 KD de peso molecular codificado por un gen en el
cromosoma 11,16 compuesto aproximadamente por el 15 % de carbohidratos y unos
350 residuos aminoacdicos en su porcin proteica. Cuenta en su estructura con 2
sitios especficos de unin: uno para la cobalamina, situado cerca del extremo
carboxilo terminal y el segundo para un receptor especfico ileal, ubicado cerca del
extremo amino terminal de la molcula. En presencia de cobalamina, 2 molculas del
monmero se combinan rpidamente para formar un dmero que une 2 molculas de
vitamina B12. Cada miligramo de FI une aproximadamente 30 g de cobalamina y la
cantidad de esta protena secretada diariamente es suficiente para unir de 40 a 80 g
de vitamina B12.8

Fig. 04 Estructura de la absorcin de la

vitamina B12

8
VITAMINAS

2.3 METABOLISMO

Para ser til a la clula, la cianocobalamina y la hidroxicobalamina deben ser

convertidas en 5' desoxiadenosil y metilcobalamina, las formas coenzimticamente
activas de la cobalamina. Esto se logra por reduccin y alquilacin de las formas
farmacolgicas antes mencionadas. La cianocobalamina y la hidroxicobalamina son
primero reducidas a Co2+ (cob(II)alamina) por reductasas dependientes de NADPH y
NADH, que estn presentes en las mitocondrias y los microsomas. Durante esta
reduccin, el cianuro y el hidroxilo son desplazados del metal. Una parte de las cob(II)
alaminas son reducidas en la mitocondria a la forma intensamente reducida Co+
(cob(I)alamina), la cual es alquilada por el ATP para formar 5'
desoxiadenosilcobalamina en una reaccin en la que la porcin 5' desoxiadenosil del
ATP es transferida a la cobalamina y los 3 fosfatos son liberados como trifosfato
inorgnico. El resto de la cobalamina se une a la N5 metiltetrahidrofolato-
homocistena metil transferasa citoslica, donde es convertida en metil cobalamina. 7

Cualquier alteracin en estos pasos metablicos puede producir defectos hereditarios

del metabolismo de la vitamina B12 caracterizados por homocistinuria, aciduria metil
malnica o ambos.7

La vitamina B12 es esencial en numerosas reacciones bioqumicas en la naturaleza, la

mayora de las cuales implican redistribucin de hidrgenos (H) o de carbonos (C),
como por ejemplo:8

Reduccin de ribonucletidos (algunas bacterias).

Biosntesis de la metionina(mamferos).
Isomerizacin del metilmalonato a succinato (mamferos).
Isomerizacin del metil aspartato a glutamato(Clostridium tetanomorphum).
Conversin de aldehdos en dioles (algunas bacterias).

De estas reacciones, slo 2 ocurren en los seres humanos. La primera es la sntesis del
aminocido metionina a partir de la homocistena, reaccin de especial inters, pues
no slo requiere metilcobalamina, sino tambin folatos como coenzima
(metiltetrahidrofolato) y la segunda es un paso en el catabolismo del propionato, la
conversin del metilmalonilCoA a succinilCoa.

2.4 ALMACENAMIENTO

La vitamina es liberada de los alimentos por la accin de los cidos y la pepsina del
estmago, aqu se une con la haptocorrina secretada en la saliva con una afinidad que
persiste al pH cido del jugo gstrico. En el duodeno la haptocorrina se hidroliza por las
enzimas pancreticas y la cobalamina se une al factor intrnseco secretado del
estmago, que presumiblemente la envuelve protegindola de las enzimas

9
VITAMINAS

proteolticas. Este complejo es absorbido por un receptor especfico en el ileum. La

unin al receptor capacita al complejo factor intrnseco-B12 entrar en las clulas
entricas; dentro de la clula el factor intrnseco se degrada y la cobalamina es
liberada, unindose a la transcobalamina II la cual la transporta a la circulacin
portal1.8

Aunque la transcobalamina II es un pool metablicamente importante de vitamina B12

en el plasma por ser el transportador de la vitamina a los tejidos extrahepticos
metablicamente activos (mdula sea y cerebro principalmente), sta representa
slo el 20 % del total circulante; cerca del 80 % de la vitamina B12 est unida a la
transcobalamina I y III.8

La transcobalamina I parece actuar como almacn de la vitamina con una larga vida
media de 7 a 10 d y no parece estar envuelta en la toma tisular o transporte
intertisular de vitamina. La transcobalamina III es rpidamente aclarada por el hgado
con una vida media de 5 min, y parece proveer un mecanismo para regresar vitamina
B12 y sus metabolitos de los tejidos perifricos al hgado, que es el rgano
fundamental de almacenamiento. 8

Fig. 05 Vas metablicas en las que participa

la cobalamina

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VITAMINAS

2.5 INGESTAS RECOMENDADAS

La ingesta recomendada de folatos vara de acuerdo con la edad desde 30 a 45 g/d en

los lactantes hasta 250 g/d en adolescentes y adultos; en los nios de bajo peso al
nacer, en el embarazo y la lactancia son mayores los requerimientos, por lo que se
recomienda un incremento de 50 a 250 g/d de acuerdo con el caso.9

Las fuentes de ingestin son amplias pues se pueden obtener de productos animales
como carne, hgado, huevo entero y leche, y de productos vegetales como
leguminosas, cereales integrales, races y tubrculos feculentos, frutas y vegetales. 9

Para la cobalamina las recomendaciones son muchos menores pues varan de 0,5 a 1,5
g/d en lactantes hasta 3 g/d en adolescentes y adultos; en el embarazo y la lactancia
se recomienda la ingestin de 1 g/d adicional. Raramente es necesario un incremento
de las recomendaciones, pero las necesidades en los ancianos merecen ser
consideradas particularmente a causa de la absorcin menos efectiva de los alimentos
que se presenta en ellos. 9

Las vas de ingestin de cobalamina son mediante productos de origen animal como
vsceras, carne de res, carne de ave, pescado y leche entera; las fuentes vegetales de
vitamina B12 son las leguminosas. Las cantidades de esta vitamina presente en la dieta
de los adultos difieren de un grupo de poblacin a otro, donde el consumo de protena
animal es elevado tienen ms altos niveles de ingestin de cobalamina (2,7 - 31,6
g/d); si la poblaci n es estrictamente vegetariana los niveles son mucho ms bajos
(0,25 - 0,5 g/d).9

Fig. 07 Fuentes de vitamina B12

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VITAMINAS

2.6 CAUSAS DE LA DEFICIENCIA

Existen mltiples causas de deficiencia de vitamina B12, ya que el fallo de cualquiera

de los pasos del complejo proceso de asimilacin que sufren las cobalaminas desde los
alimentos hasta su utilizacin al nivel celular, ocasiona la interrupcin de ste y por lo
tanto, la posibilidad potencial de desarrollar una deficiencia de cobalaminas. Veremos
a continuacin algunas de las causas de deficiencia de vitamina B12: 7

1. Insuficiencia diettica.
Vegetarianos estrictos o veganos.
Lactantes de madres vegetarianas.
2. Desrdenes gstricos.
Ausencia de FI.
Anemia perniciosa (adulto y juvenil).
Anemia perniciosa congnita.
Desrdenes infiltrativos del estmago.
3. Desrdenes mixtos.
Enfermedad posgastrectoma.
Derivacin gstrica.
Malabsorcin de la cobalamina de los alimentos.
4. Desrdenes intestinales.
Defectos luminales.
Sobrecrecimiento bacteriano del intestino delgado.
Infestacin por parsitos.
Sndrome de Zollinger-Ellison.
Insuficiencia pancretica.
5. Defectos ileales.
Enfermedad ileal.
Reseccin ileal.
Malabsorcin inducida por drogas.
Malabsorcin congnita de cobalaminas.
6. Desrdenes del transporte plasmtico.
Dficit congnito de transcobalamina II.
Dficit de protena R.
7. Desrdenes del metabolismo celular.
Exposicin al xido nitroso.
Errores congnitos del metabolismo.

12
VITAMINAS

2.7 MTODOS DE DETERMINACIN12

A. Frmula y propiedades
Frmula emprica
Vitamina B12: C63H88O14N14PCo
(P.M. 1355,4)

Descripcin
Polvo cristalino rojo oscuro.

Punto de fusin
210-220C carbonizacin.

Espectro de absorcin
La solucin acuosa muestra una absorcin mxima a 278, 361 y 550 nm.

Estabilidad
La cianocobalamina cristalina y sus soluciones neutras o dbilmente cidas son
relativamente estables al aire y calor pero son atacadas por la luz y la radiacin UV. La
vitamina B12 es slo levemente estable a lcalis, cidos fuertes y agentes reductores.

B. Mtodo

El nivel presente en los alimentos es muy bajo y el mtodo microbiolgico es la nica

manera de estimar la vitamina B12 en forma satisfactoria.

Extraccin

La vitamina B12 es extraida de la muestra con agua o buffer a una temperatura de

aproximadamente 100C durante 10-30 minutos con la adicin de cianuro de potasio.
El pH del extracto se ajusta a 6 ya sea con hidrxido de potasio o cido clorhdrico. La
dilucin del extracto se realiza con agua para obtener concentraciones de
aproximadamente 2 mg/ml.

Microorganismos de ensayo y mtodo

El microorganismo de ensayo, Lactobacillus leichmanii (ATCC 7830) es mantenido en

un agar de cultivo de Micro-Ensayo (Laboratorios Difco, Detroit USA; no. 031902). El
subcultivo es preparado por incubacin hasta 16-18 h a 37C en el medio de
fermentacin que contiene B12 (caldo de micro inoculacin (Difco no. 0320-02). El
medio de cultivo Difco no. 0457-15 se utiliza para esta prueba. Los tubos se llenan con
el medio (10 ml), y se agrega 25, 50 y 100 l del extracto o solucin estndar. Seis
tubos para blanco no contienen ningn aditivo. Los tubos son sometidos a un bao de

13
VITAMINAS

vapor durante 10 minutos a 100C o autoclavados durante 5 min a 121C. Despus de

enfriarse, todos los tubos con excepcin de 2 blancos son cada uno inoculados con 1
gota de inculo y luego incubados durante 16-18 h a 37C.

Medicin de la turbidez

La turbidez de la suspensin celular se mide a 580 nm despus de mezclar bien. Para el

clculo se utiliza una curva estndar y se debe corregir el blanco.

III. VITAMINA B6 (PIRIDOXINA)

3.1 DEFINICIN
La vitamina B6 es una vitamina hidrosoluble. Existen tres formas naturales de vitamina
B6: piridoxina, piridoxamina y piridoxal, y todas estn normalmente presentes en los
alimentos. Estas formas participan como cofactores enzimticos en numerosas
reacciones bioqumicas implicadas en el metabolismo de las protenas y aminocidos, y
en menor medida, en el de los lpidos y los glcidos. Tambin participa en la sntesis de
los cidos nucleicos (ADN O ARN), de hemoglobina, y parece intervenir en la del GABA.
Los humanos dependen de fuentes externas para cubrir sus necesidades de vitamina
B6 y la forma piridoxal-5-fosfato (PLP) es de gran importancia.11

3.2 PROPIEDADES
Frmula emprica
Vitamina B6 (hidrocloruro de piridoxina) C8H11O3N*HC1 (P.M. 205,6).
Aspecto:
Polvo cristalino blanco.
Punto de fusin:
206 C (descomposicin)
Espectro de absorcin:
En soluciones acuosas los puntos mximos de absorcin son: 291 nm a pH cido; 254 y
324 nm a pH neutro y 245 y 309 nm para las soluciones alcalinas.
Estabilidad:
El hidrocloruro de piridoxina es estable al calor y al oxgeno. La piridoxina es degradada
por la luz en soluciones alcalinas o neutras.

3.3 FUENTES
Fuentes excelentes de vitamina B6 (piridoxina) son el pollo, la ternera, especialmente
el hgado, y el cerdo. Algunas buenas fuentes son el pescado (salmn, atn, sardinas,
mero y arenques), los frutos secos (nueces, cacahuetes), el pan, el maz y los cereales
integrales. La verdura y la fruta son, en general, fuentes pobres en vitamina B6. 11
14
VITAMINAS

3.4 FUNCIONES
Una ingesta adecuada de vitamina B6 (piridoxina) es esencial puesto que ayuda al
cuerpo a:

Convertir alimentos en glucosa, que es utilizada para producir energa;

Formar neurotransmisores, que transportan seales de una clula nerviosa a
otra;
Producir hormonas, glbulos rojos y clulas del sistema inmunitario;
Controlar (junto con la vitamina B12 y la vitamina B9) el nivel de homocistena
en la sangre, un aminocido que podra estar asociado con las enfermedades
cardiacas.
La Autoridad Europea de Seguridad Alimentaria (EFSA), que presta asesoramiento
cientfico a los responsables polticos, ha confirmado que se han demostrado unos
claros beneficios para la salud de la ingesta de vitamina B6 en la dieta, ya que
contribuye a lo siguiente: Funcionamiento normal del metabolismo de protenas y
glucgeno;

Funcionamiento normal del sistema nervioso;

Formacin normal de glbulos rojos;
Funcionamiento normal del sistema inmunitario;
Regulacin de la actividad hormonal.

3.5 DOSIS
El aporte diettico recomendado de vitamina B6 (piridoxina) vara de acuerdo con la
edad, sexo, grupo de riesgo y otros criterios aplicados.
Nios: 5-25 mg/da durante 3 semanas, seguido de 1,5-2,5 mg/da.
Adolescentes: 10-20 mg/da durante 3 semanas, seguido de 2-5 mg/da.
La necesidad de vitamina B6 aumenta cuando se sigue una dieta rica en protena,
puesto que el metabolismo de la protena slo puede funcionar adecuadamente con la
ayuda de piridoxina.

3.6 CARENCIA
La carencia de vitamina B6 raramente se da de forma aislada, suele ocurrir en
combinacin con un dficit de otras vitaminas del complejo B (especialmente con la
vitamina B2).
Los grupos de poblacin con riesgo de una deficiencia de vitamina B son las mujeres
embarazas y lactantes (mayor demanda) y las que toman anticonceptivos, las personas
mayores (menor ingesta de alimentos), personas de bajo peso, alcohlicos crnicos y
personas con una ingesta de protenas elevada.
Los sntomas de deficiencia incluyen trastornos del sistema nervioso (irritabilidad,
depresin y confusin), sistema inmunitario deficiente e inflamacin de la piel y las
mucosas.11

15
VITAMINAS

3.7 PRECAUCIONES
En neonatos y lactantes, la administracin de dosis altas de vitamina B6 puede
provocar apnea o hipopnea secundaria a debilidad muscular, por lo que se recomienda
monitorizar al paciente y realizar la administracin en una Unidad de Cuidados
Intensivos.

3.8 INTERACCIONES FARMACOLGICAS

Aumento de la fotosensibilidad inducida por amiodarona: Evitar exposicin a la
luz.
Se ha observado en un estudio que la administracin de dosis altas de
piridoxina (80-200 mg diarios) podra disminuir los niveles sricos de fenitona y
fenobarbital: Se recomienda monitorizar niveles de antiepilpticos.
No se debe usar simultneamente levodopa con piridoxina ya que sta bloquea
los efectos antiparkinsonianos de la levodopa acelerando su metabolismo, por
lo que reduce su eficacia: Asociar levodopa a un inhibidor de dopa-carboxilasa
(como carbidopa).
Varios medicamentos interfieren con la piridoxina y pueden incrementar los
requerimientos de vitamina B6: Antituberculosos (isoniazida, cicloserina,
etionamida); antihipertensivos (hidralazina); penicilamina; anticonceptivos
orales; inmunosupresores (como corticosteroides, ciclosporina, azatioprina,
etc.); antineoplsicos (ciclofosfamida).12

3.9 MTODOS DE DETERMINACIN

a) Mtodo
Debido a la mltiple presencia de la vitamina B6 en los alimentos es imposible
determinar su actividad midiendo un slo componente. Aunque puede ocurrir
interconversin entre las diferentes formas debido a reacciones enzimticas, el
analista encontrar predominantemente una mezcla si el alimento no ha sido
suplementado con hidrocloruro de piridoxina. Por lo tanto, en este momento se
recomienda un mtodo microbiolgico para la determinacin de la actividad de la
vitamina B6.13
b) Extraccin y desfosforilacin
La vitamina B6 es extrada de la muestra por hidrlisis cida. Las condiciones
recomendadas por AOAC son HC1 0,44 M durante 2 h a 121C para productos de
plantas y HC1 0,055 M durante 5 h a 121C para productos animales. Debe
mencionarse que la hidrlisis cida puede liberar vitmeros-B6 a partir de glucsidos y
por lo tanto llevar a una sobrestimacin del contenido biodisponible. Despus de la
hidrlisis, las soluciones son neutralizadas a un pH 5,0 con una solucin de hidrxido
de sodio. La dilucin del extracto se realiza con agua para obtener concentraciones de
aproximadamente 100 ng/ml.

16
VITAMINAS

c) Microorganismo de ensayo y mtodo

El microorganismo de ensayo, Saccharomyces carisbergensis (ATCC 9080) es
mantenido en un agar-APT. El subcultivo es preparado por incubacin hasta 24 h a
30C en el medio de fermentacin que contiene B6. El medio de cultivo no. 0951-15-2
se utiliza para el ensayo (Laboratorios Difco, Detroit USA). Los tubos se llenan con el
medio (10 ml), y se agregan 25, 50 y 100 del extracto o de una solucin estndar. Seis
tubos para blanco no contienen ningn aditivo. Los tubos son sometidos a un bao de
vapor durante 10 minutos a 100C. Despus de enfriarse, todos los tubos con
excepcin de 2 blancos son cada uno inoculados con 1 gota de inculo y luego
incubados durante 16-18h a 30C. 13
d) Medicin de la turbidez
La turbidez de la suspensin celular se mide a 580 mn despus de mezclar bien. Para el
clculo, se utiliza un estndar y se debe corregir el blanco. 13

IV. PARTE EXPERIMENTAL

MATERIALES
Matraz
Colador
Beaker
Bureta
Papel aluminio
Espatula
Cuchillo
Tabla de picar
Probeta
Pipeta volumtrica 5ml
Fiola

MTODO VOLUMTRICO

REDUCCIN DE TAMAO EXPRIMIR

Antes de este proceso, se pes la muestra,
EL zumo de la naranja, sustancia a analizar
se parti por la mitad la fruta, evitando
se vierte en un recipiente oscuro, matraz
que se encuentre en contacto por mucho
envuelto con papel aluminio. 17
tiempo con el aire y los rayos del sol.
VITAMINAS

10 ml Jugo Naranja

100 ml Agua destilada

2,6 Diclorofenol Indofenol 5ml Alicuota

AZUL Rosa salmn

GASTO: 6.3 ml

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VITAMINAS

DATOS DE LA MUESTRA

ZUMO DE NARANJA TANGELO

TABLA I. DATOS GENERALES

COMPONENTE ANALIZADO cido ascrbico ORIGEN Huaral
PROCEDENCIA Mercado
ALIMENTO DE PARTIDA Naranja Tangelo
FECHA DE ANLISIS 29/08/2017
PESO 224,3 g

TABLA II. ANLISIS ORGANOLPTICO

ASPECTO Cscara rugosa, gajos de gran tamao
COLOR Anaranjado
OLOR Sui generis
SABOR Dulce y ligeramente ctrico

V. RESULTADOS
100
% =
. ()

6.3 0.08807/1 00
= 11.09682
5

% = 11.09682

VI. DISCUSIN

La vitamina C o cido ascrbico se encuentra en mayor porcentaje en frutos ctricos

como el tangelo. El tangelo es un hbrido proveniente del cruzamiento de mandarinos
con toronjas de sabor dulce, y tienen pocas o ninguna semilla. El contenido de
vitamina C presente en el fruto es de 53.2 mg en 100 g de muestra. 15
En la prctica, se determin el contenido de cido ascrbico en la muestra de naranja
tangelo mediante el mtodo volumtrico con indofenol. Este mtodo redox implica la
oxidacin del cido ascrbico por el 2,6-diclorofenolindofenol (azul en medio bsico y

19
VITAMINAS

rojo en medio cido), y la reduccin del tinte indicador a una disolucin incolora, el
exceso de tinte no reducido confiere una coloracin rosada a la disolucin acida. 14
La cantidad de cido ascrbico presente en la muestra biolgica fue 11.0968 %,
resultando una concentracin baja a comparacin de la referencia bibliogrfica (53.2
mg por 100 g de muestra). Adems, el contenido de cido ascrbico en ctricos vara
desde 31 mg (mandarinas) a 105 mg (algunas variedades de naranjas). 15
En la tabla peruana de composicin de alimentos las variedades de naranja de jugo,
Guayaquil y Huando contienen 42.00 mg, 42,20 mg y 43,90 mg por 100 g de muestra,
respectivamente.16 Estos valores de cido ascrbico son mayores al contenido
encontrado en la muestra biolgica de naranja tangelo.

VII. CONCLUSIONES

Se determin el contenido de cido ascrbico mediante el mtodo volumtrico con

indofenol en una muestra biolgica de jugo de naranja tangelo cuyo valor (11.0968 %)
se encuentra por debajo de los valores encontrados en la bibliografa (53.2 mg en 100
g de muestra).

VIII. OBSERVACIONES

Es importante tener en cuenta que la vitamina C es oxidada fcilmente por el

aire, ya que es una molcula orgnica muy inestable frente a fuentes de calor,
al contacto con el oxgeno o a la luz, por lo que se descompone formando cido
dehidroascrbico, por tanto, las disoluciones que contienen vitamina C deben
ser preparadas inmediatamente antes de ser tituladas, con el fin de obtener
resultados fiables.
Cumpliendo con los estndares de calidad, los zumos deberan ser envasados al
vaco y en recipientes opacos.
La realizacin de la prctica se realiz en un ambiente inadecuado, debido al
constante flujo de aire, ambiente abierto sin proteccin de la luz.
Al exprimir el zumo del fruto no se contaba con materiales que permitan evitar
el contacto del jugo con el oxgeno. Eran utensilios rudimentarios, necesarios
para fines didcticos; sin embargo, en un centro analtico certificado, son
detalles que importan para brindar resultados confiables.

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VITAMINAS

IX. REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS

1. Oro J.R, Donnamara M. C. Accin Farmacolgica, Biofisicoqumica y Estructura

Dinmica de la Vitamina C. Instituto de Fsica de Lquidos y Sistemas Biolgicos,
CONICET-CIC-UNLP. La Plata, Argentina. Acta Farm. Bonaerense 25 (1): 145-54 (2006)
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http://www.fao.org/docrep/006/w0073s/w0073s0f.htm
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[Online]. 17 de febrero de 2016. Disponible en:
https://ods.od.nih.gov/pdf/factsheets/VitaminC-DatosEnEspanol.pdf
4. Zago, K.; Garcia, M.; Di Bernardo, M. 2010. Determinacin del contenido de vitamina C
en miel de abejas venezolanas por volumetra de xido-reduccin. Disponible en:
http://www.scielo.org.ve/scielo.php?pid=S0798-
04772010000100004&script=sci_arttexT. Revisado el 5 de julio del 2015.
5. Ciancaglini P et al. Using a classical method of vitamin C quantification as a tool for
discussion of its role in the body. Biochem. Mol. Biol. Edu. 29: 110-114, 2001.
6. Gutirrez T. M., Hoyos O. L., Pez M. I. Determinacin del contenido de cido
Ascrbico en Uchuva (Physalis peruviana L.), por Cromatografa Lquida de alta
resolucin (Clar). Facultad de Ciencias Agropecuarias. Vol 5 No.1 Marzo 2007
7. Forrellat M., Gmis I., Gautier H. Vitamina B12: Metabolismo y aspectos clnicos de su
deficiencia. Rev Cubana Inmunol Hemoter. 15(3): 159-174; 1999.
8. Pita G. cido flico y vitamina B12 en la nutricin humana. Rev Cub Aliment Nutr.
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9. National Institutes of Health. Datos sobre la vitamina B12. (Actualizado el 17 de
febrero del 2016; citado el 02 de setiembre del 2017). Disponible en:
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10. FAO. Anlisis de vitaminas en alimentos. (Citado el 02 de setiembre del 2017).
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11. Vitamina B6. (Revisado el 03 de setiembre del 2017). Disponible en:
http://www.nutri-facts.org/content/dam/nutrifacts/pdf/nutrients-pdf-
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12. Pediamcum. Piridoxina (Vitamina B6). (Revisado el 03 de setiembre del 2017).
Disponible en: http://pediamecum.es/wp-content/farmacos/Piridoxina.pdf
13. FAO. Anlisis de vitaminas en alimentos. (Citado el 03 de setiembre del 2017).
Disponible en: http://www.fao.org/docrep/010/ah833s/ah833s19.htm
14. Hallo J. ESTUDIO FSICO-QUMICO Y CROMATOGRFICO COMPARATIVO DEL FRUTO DE
NARANJA VARIEDADES VALENCIA (Citrus sinensis) Y TANGELO (Citrus paradisi x citrus
reticulata) EN DOS ESTADOS DE MADUREZ PROVENIENTE DEL CANTN LAS NAVES.
Ecuador: Universidad Tcnica Estatal De Quevedo, Facultad Ciencias De La Ingeniera;
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15. Manual para Productores de Naranja y Mandarina. Los ctricos. Captulo 1. [Online].
Citado 3 septiembre 2017. Disponible en: http://inta.gob.ar/sites/default/files/script-
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16. Garca M, Gmez I, Espinoza C, Bravo F, Ganoza L. Tablas peruanas de composicin de
alimentos. 8. ed. Lima: Ministerio de Salud, Instituto Nacional de Salud, 2009.

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